Лабораторна диагностика на рикетсиози при селскостопански животни. Обща характеристика на патогенните рикетсии Обща характеристика на патогенните рикетсии

х

х

В съответствие със съвременната таксономия и номенклатура на бактериите, разред Rickettsiales включва три семейства: Rickettsiaceae, Bartonellaceae и Anaplasmataceae. Орденът е кръстен в чест на американския микробиолог Х. Рикетс (1871-1910).

Въз основа на морфологията на патогените, адаптивността към съществуване в клетките на членестоноги и бозайници, както и някои други характеристики, семейството Rickettsiaceae е разделено на три племена, от които Rickettsiae включва три рода: Rickettsia, Rochalimea и Coxiella.

Повечето представители на род Rickettsia живеят в задължителни вътреклетъчни асоциации с еукариотни гостоприемници (гръбначни или членестоноги). Някои видове рикетсии причиняват заболявания при хора (коремен тиф, петниста треска от Скалистите планини, треска цугамуши и др.) или други гръбначни (рикетсиален кератоконюнктивит) и безгръбначни. Според морфологията на рикетсията те са плеоморфни микроорганизми от кокоидна (0,3...0,4 µm), пръчковидна (до 2,5 µm), бациларна или нишковидна форма. Често формират дипло форми. Имат трислойна клетъчна стена, характерна за грам-отрицателните бактерии. По правило те са неподвижни. Те се оцветяват с основни анилинови багрила по Романовски-Гимза и др.. Размножават се чрез бинарно делене в цитоплазмата или едновременно в цитоплазмата и ядрото на някои клетки на гръбначни животни и членестоноги. Расте добре в клетъчна култура на пилешки ембриони и в някои клетъчни линии на бозайници. Аеробите образуват хемолизин и произвеждат токсични вещества, подобни на бактериалните токсини, които не се отделят в околната среда. Оптималната температура за растеж е 32...35°C.

Рикетсиите са слабо устойчиви във външна среда и бързо загиват при високи температури и под въздействието на конвенционални дезинфектанти. Устойчиви са на ниски температури (запазват вирулентност дълго време в лиофилизирано състояние при -20...-70 °C). Те са резистентни към сулфонамидни лекарства и чувствителни към тетрациклинови антибиотици.

Coxiella са подобни на представителите на род Rickettsia, но за разлика от тях те се възпроизвеждат във вакуоли (фаголизозоми) на клетките гостоприемници, а не в цитоплазмата или ядрото. Родът включва един вид, Coxiella burnetii, който причинява Ку-треска при хора и животни. C. burnetii са полиморфни къси пръчици (0.2...0.4x0.4...1 µm), грам-отрицателни, без капсули, неподвижни. Те се възпроизвеждат само във вакуоли (фаголизозоми) на клетките гостоприемници. Култивирани в жълтъчната торбичка на пилешкия ембрион, те са устойчиви на нагряване до 65°C и действието на химикали.

Племето Erlichiae включва три рода: Erlichiae, Cowdria и Neorickettsia.

Родът Cowdria включва един вид - C. raminantium, причинител на каудриоза (хидроперикардит) по преживните животни. Морфологично кудриите са плеоморфни кокоидни или елипсовидни (0,2...0,5 µm), по-рядко пръчковидни клетки (0,2...0,3x0,4...0,5 µm), грам-отрицателни, неподвижни. Те са локализирани във вакуолите на цитоплазмата на ендотелните клетки на съдовете на преживните животни, където се образуват специфични компактни колонии. Според Giemsa те са боядисани в тъмно синьо и приемат добре други анилинови бои. Те не се развиват върху изкуствени хранителни среди. Пренасят се от иксодидни кърлежи от род Amblyomma. Чувствителен към сулфатни лекарства и тетрациклин.

Q ТРЕСКА

Q треска(лат. - Q-febris; англ. - Q-fever; Cu-rickettsiosis, Queensland fever, coxiellosis) е естествено огнищно заболяване на домашни, стопански и диви животни, птици и хора, протичащо ензоотично по селскостопанските животни, предимно безсимптомно; по-рядко - проявява се с краткотрайно повишаване на телесната температура, депресия, конюнктивит, загуба на апетит, аборт, мастит и намалена производителност.

Историческа обстановка, разпространение, степен на опасност и щети.Болестта е наблюдавана за първи път от Derryn (1937) сред работници в кланици, дърводобив и мандри в провинция Куинсланд в Австралия. Той го описа като вид фебрилно заболяване. Патогенът от болни хора е изолиран и идентифициран като новият видрикетсия Wernet и Freeman (1937), наричайки я Rickettsia burnetii. Впоследствие причинителят на Ку-треска е въведен в независим род - Coxiella и е наречен Coxiella burnetii в чест на изследователя Кокс.

Ку-треската е регистрирана на всички континенти, но е най-разпространена в Австралия и повечето страни в Африка, Азия, Америка и Европа, като е зооантропоноза и представлява особена опасност за човешкото здраве.

Икономическите щети, причинени от болестта, се състоят в недостиг на добитък (аборти, раждане на нежизнеспособно потомство, полов стерилитет), намаляване на млечността при кравите и производството на яйца при домашните птици, измършавяване на животните и намаляване на продаваемата продукция. стойност на получените продукти.

Причинителят на заболяването.Причинителят е Coxiella burnetii (син. Rickettsia burnetii) от семейство Rickettsiaceae, полиморфен микроорганизъм с форма на кокус, яйцевидна или пръчковидна форма, неподвижен аероб, подобен на други рикетсии; клетките често са подредени по двойки. Според Романовски-Гимза е оцветен в лилаво, по Stamp - червен. Патогенът не се възпроизвежда в изкуствени хранителни среди, но расте добре при 37 °C в жълтъчната торбичка на развиващите се пилешки ембриони (CE), в различни клетъчни култури и в тялото на експериментално заразени морски свинчета, бели мишки и хамстери. открити главно във вакуолите на цитоплазмата на клетките гостоприемници след оцветяване на препаратите по Romanovsky-Giemsa и други методи. Формите с пропусклива клетъчна стена, намиращи се в тялото на животното във външната среда, се трансформират в малки форми с плътна обвивка.

Причинителят е серологично двуфазен. Докато C. burnetii е в тялото на болно животно, външната му повърхност е гладка клетъчна стенасъдържа антиген фаза 1. Тази форма на патогена се счита за силно вирулентна и опасна. Антигенът от 2-ра фаза се появява след пасажи върху пилешки ембриони. Вирулентността на тази форма на патогена е незначителна. Изолираните от животни щамове имат различна вирулентност.

Благодарение на образуването на плътна клетъчна стена, C. burnetii, за разлика от други рикетсии, е стабилен във външната среда и може да оцелее дълго време в сухи и влажни субстрати. Издържа на слънчева светлина, изсушаване и относително високи температури. В сухи изпражнения на кърлежи, например, микроорганизмите остават жизнеспособни до 1,5 години, в суха кръв - до 6 месеца, в изсъхнал остатък от урина - до 50 дни, в лиофилно състояние - до 10 години. В млякото издържат нагряване при 90 °C за 1 час, но при варене умират за 5 минути. В мляко и нехлорирана вода при 4 °C те остават живи повече от 1 г. В масло и сирене, произведени от заразено мляко, остават жизнеспособни 41...46 дни, в прясно месо при 4 °C - 30 дни. , в осолени в месо - повече от 150 дни; в оборски тор, съхраняван за биотермична дезинфекция - от 32 дни до 1 година.

Разтвори на хлорамин (2%), натриев хидроксид (3%) и фенол (3%) инактивират патогена в рамките на 2 часа, докато 2% разтвор на формалдехид го прави в рамките на 24 часа.

При естествени условия най-податливи са говеда, овце, кози, прасета, коне, камили, биволи, кучета, пилета, гъски и гълъби (изследванията на кръвния серум в RDSC показват 3...7% положително реагиращи животни сред клинично здрави едри и дребни говеда). Лабораторните животни от всички видове са чувствителни към експериментална инфекция.

Патогенът има широк спектър на патогенност, като негов гостоприемник могат да бъдат над 60 вида диви бозайници и 50 вида птици, както и над 53 вида различни кърлежи от родовете Dermacenter, Amblyomma, Haemophylus, Hyalomma, Ixodes, Ornithodorus , Рипицефал. Естествените огнища се поддържат в продължение на години от заразени кърлежи, сред които се осъществява трансовариално предаване на патогена. Кърлежите са заразени с рикетсия на Бърнет на всички етапи от развитието си. Инфекцията не е фатална за тях.

Възприемчивите животни се заразяват трансмисивно, чрез ухапване от заразени кърлежи, както и хранително - чрез фуражи и вода, замърсени с екскременти на болни животни, гризачи и кърлежи и животински суровини (кожа, вълна, месо, мляко и др.). Когато болните и здравите животни се държат заедно, патогенът на Ку-треската може да се предаде аерогенно и чрез директен контакт.

Заразените животни отделят патогена в кръвта, слюнката, урината, изпражненията и млякото. Мембраните и водите са особено заразени, така че хората често се заразяват при оказване на помощ по време на отелване и агнене. Особена опасност представляват заразените кучета пазачи, които отделят патогена с урината и изпражненията си. Те често се заразяват чрез изяждане на плацентата и чрез ухапване от кърлежи. Здравите пилета се заразяват с Ку-треска, когато се държат дълго време заедно с болни птици (след 17...63 дни) и овце (след 115...164 дни). Превозването на рикетсии при пилета и патици продължава 32...90 дни.

Поради високата си устойчивост на изсушаване и слънчеви лъчии поради наличието на широк кръг от междинни гостоприемници - кърлежи, патогенът може да се задържи дълго време в почвата и да се разпространи широко в райони с различни природни и географски условия. Най-голям брой животни с Ку-треска се откриват през пролетта, в периода на масово раждане на селскостопански животни, и през лятото, по време на най-високата биологична активност на кърлежите и дивите гризачи.

Наличието на селскостопански животни в естествени огнища на куриккециоза и включването им в естествената циркулация на рикетсията на Бърнет води до отслабване на вирулентността на патогена в огнищата, до изчезване на инфекцията и в същото време до появата на животни и хора, имунизирани срещу това заболяване, което се потвърждава от положителни серологични резултати от изследвания (RSC) и липса на клинични признаци на заболяването.

Патогенеза.Скоро след заразяването патогенът навлиза в кръвта, където може да бъде открит в рамките на 15...20 дни. Притежавайки изразена селективност, рикетсиите се размножават в белите дробове, лимфните възли, млечната жлеза, далака, тестисите и бременната матка. Натрупвайки се в значителни количества, те причиняват общи промени от септично-токсичен характер, дразнене на ретикулоендотелната и лимфната система, хиперплазия на фоликулите на далака, както и дегенеративни и възпалителни промени в черния дроб, бъбреците, миокарда, централната нервна система, матката. , млечни жлези, тестиси и други органи; образуването на микронекротични огнища, които впоследствие се заместват от съединителна тъкан. В някои случаи се образуват абсцеси в паренхима (гърдата и регионалните лимфни възли). Заболяването се развива бавно, често латентно, с натрупване на специфични (комплемент-фиксиращи) антитела. При болни животни се открива и алергична сенсибилизация на тялото.

Протичане и клинична изява.Инкубационният период варира от 3 до 30 дни. При естествени условия на заразяване заболяването при кравите често протича безсимптомно или се проявява като краткотрайна треска (телесната температура се повишава до 41...41,8 °C за 3...5 дни), обща депресия, намален апетит, серозно- катарален конюнктивит и ринит, бронхопневмония, нефрит, подуване на ставите, мастит и дългосрочно (до няколко месеца) намаляване на добива на мляко. Такова заболяване може да бъде открито само чрез серологични изследвания и инфекция на лабораторни животни. По време на остра фебрилна атака при бременни животни се появяват аборти (главно през втората половина на бременността), раждане на нежизнеспособен плод и плацентит. Биковете развиват орхит.

През следващите 3...8 месеца се регистрират многократни и нередовни покачвания на температурата. Патогенът може периодично да се отделя във външната среда със секрети на горните дихателни пътища, мляко, урина и изпражнения. На 3-ия ден от живота телетата, родени навреме, показват признаци на септицемия със симптоми на обща слабост, загуба на апетит, диария и интоксикация.

Конете, наскоро докарани в огнища на курикетсиоза, са диагностицирани със сух бронхит и кашлица. Когато работят усилено, те често развиват бързо прогресиращ емфизем. Такива животни се умъртвяват.

При овцете в естествени условия, освен аборт и плацентит, рядко е възможно да се открият други клинични признаци на заболяването. Въпреки това сред младите агнета в студено дъждовно време може да има случаи на смърт от пневмония.

Повечето птици (кокошки, патици, гъски) по време на фебрилно състояние (периодично повишаване на телесната температура с 0,2 ... 1,0 ° C) изпитват влошаване на апетита, обща летаргия и нарушена координация на движенията. Телесното тегло намалява с 11...38%, производството на яйца при пилета - с 34,4, при патици - със 75,6%. При болна птица показателите на хемограмата се променят значително: съдържанието на хемоглобин и броят на еритроцитите намаляват, броят на левкоцитите се увеличава поради увеличаване на броя на лимфоцитите, базофилите и моноцитите. Заболяването обикновено завършва с възстановяване; при експериментална инфекция смъртността може да достигне 17,9% (на 5-ия...58-ия ден).

При кучетата, като правило, се появяват признаци на бронхопневмония и далакът се увеличава.

Патологични признаци.Промените при Ку-треска са незначителни и неспецифични, поради което нямат специална диагностична стойност. При сложни случаи при бременни крави се засягат белите дробове, плеврата, сърцето, мембраните и матката; Може да има огнища на фибринозен мастит, надматочните лимфни възли са увеличени и хиперемирани. При фетусите се отбелязва увеличен далак с ивичести и точковидни кръвоизливи, подуване на интерлобуларната съединителна тъкан на белите дробове и дегенеративни промени в черния дроб и бъбреците.

При птиците белите дробове са пълни с кръв, далакът се увеличава 2 пъти или повече; чревната лигавица е подута, хиперемирана, на места с точковидни кръвоизливи, обилно покрита със слуз; Фоликулите на повърхността на яйчника и на секцията са с мраморна форма.

Диагностика и диференциална диагноза.Диагнозата се основава на епизоотологични и епидемиологични данни, клинични признаци на заболяването, резултати от серологични изследвания и задължително изолиране на патогена от тялото на болни животни.

За изолиране на причинителя на Ку-треската се извършва контролно клане на съмнителни за заболяването животни, последвано от патологично изследване на тях. Следният материал се изпраща в специализирана лаборатория за изследване в херметически затворени контейнери с лед (4 ° C): парчета от засегнатия бял дроб, далак, черен дроб, лимфни възли, виме, както и части от паренхимни органи на абортирания плод. и нейната мембрана.

Изсушени и фиксирани петна или отпечатъци върху предметни стъкла се оцветяват с помощта на Романовски-Гимза или други методи и се изследват под микроскоп. Биотестът се извършва чрез интраперитонеално инжектиране на суспензия от материала в морски свинчета или млади бели мишки. За изолиране на рикетсии и последващото им култивиране се използват 5-6-дневни пилешки ембриони. За серологична диагностика на куриккециоза при селскостопански животни се използва RDSC, като се използва антиген от 1-ва фаза на патогена. В серума на болни животни на 7-13-ия ден от началото на заболяването се натрупват комплемент-фиксиращи антитела, които в много случаи остават в диагностичния титър (1: 10 и по-висок) в продължение на години.

Диагнозата се счита за установена, ако се открият клинично болни животни, които реагират положително в RDSC, и в тях се открият рикетсии.

При диференциална диагноза се изключват бруцелоза, хламидия, пастьорелоза, листериоза, лептоспироза, инфекциозен хидроперикардит и рикетсиална моноцитоза чрез провеждане на бактериологични и серологични изследвания.

Имунитет, специфична профилактика.Заболяването се развива бавно, често латентно, а в периода на възстановяване имунитетът е много слаб. При животни, преживели болестта, имунитетът остава в продължение на много години. Клетъчните механизми на имунитета, включително фагоцитозата, са от първостепенно значение. В Русия не са разработени специфични средства за защита на животните. В чужбина се използват инактивирани ваксини.

Предотвратяване.Профилактиката на Ку-треска се основава на систематично планирано унищожаване на кърлежи и гризачи в пасища, ферми, складове за фураж, животновъдни сгради и населени места, както и на задължително профилактично диагностично изследване за носителство на рикетсии при собствени и внесени животни. Необходимо е периодично да се наблюдава евентуалната поява на патогенен резервоар в дивата фауна сред популациите на кърлежи, дребни бозайници и птици (в необлагодетелстваните райони за тази цел се хващат гризачи, събират се кърлежи и се изследват за носителство на патогени) .

В трайно засегнатите от това заболяване райони се забранява достъпът на животни до вода от открити водоеми (язовири, езера, реки, потоци и др.). За поливане се използва вода от артезиански кладенци или водопроводната мрежа.

Лечение. С тетрациклин и неговите производни се третират животни с тежки симптоми на заболяването, реагиращи положително на RDSC, както и без клинични признаци, но с повишена телесна температура за 2 дни.

Мерки за контрол. INВъв ферми, незасегнати от Ку-треска, се въвеждат ограничения, при които се забранява: влизането във фермата (фермата, комплекса) и извеждането от нея на животни, с изключение на извеждането за клане; прегрупиране на животни без знанието на главния ветеринарен лекар на фермата, използване на месо от принудително умъртвени пациенти (трупът и непроменените органи се освобождават след варене, променените органи и кръвта се изпращат за унищожаване); отстраняване на фураж, който е бил в контакт с болни или съмнителни животни.

Клинично болни, RSC позитивни (RDSC) и фебрилни животни се изолират и лекуват. Всички бременни животни от нефункциониращи ферми се прехвърлят в изолирани помещения 2 седмици преди раждането, където се дезинфекцират ежедневно. Отелването (агненето, опрасването) на женските, за които има съмнение, че имат Ку-треска, трябва да се извършва в тези помещения; след това плацентата, мъртвородените фетуси, заразеният тор и постелята се изгарят. Торът от видимо здрави животни се дезинфекцира биотермично.

Трупове и други продукти, получени от клането на животни, които са реагирали положително на RDSC, но не са имали клинични признаци на заболяването и в чиято мускулна тъкан и органи не са открити патологични промени, се освобождават без ограничения.

До премахване на ограниченията помещенията, оборудването и предметите за грижа се дезинфекцират на всеки 5 дни с 2% разтвор на натриев хидроксид, загрят до 80 °C, 3% разтвор на белина, 2% разтвор на формалдехид, 3% разтвор на креолин или 5% разтвор от сярно-карбова смес. През зимата се използва вар.

Животните се третират системно срещу членестоноги, а гризачите се унищожават в помещенията. Провеждане на мерки за премахване на кърлежовите биотопи чрез почистване и ремонт животновъдни помещенияпоследвано от цялостно обеззаразяване, косене на треви и разораване на площта на стопанството на местата, където насекомите снасят яйца. Преди извеждането на животните на паша пасищата се преглеждат и третират срещу кърлежи. Животните се пасат на култивирани пасища.

Млякото от болни крави, овце и кози се вари в продължение на 5 минути и се дава на млади животни, а от клинично здрави, които реагират положително в RSC (RDSC) без повишаване на титрите на антителата, се използва след пастьоризация. Вълната и козият пух се транспортират от нефункциониращи ферми в контейнери с дебел плат до преработвателни предприятия, заобикаляйки пунктовете за доставка. Вълна, кожи, косми, рога и копита от убити болни или умрели животни се дезинфекцират съгласно указанията.

Ограниченията от неблагоприятната точка се премахват 1 месец след последния случай на изолиране на патогена от патологичен материал (след диагностично клане) от животни, които са реагирали положително в RDSC, лечение на реагиращи животни с антибиотици и извършване на крайни мерки.

Мерки за опазване на общественото здраве.Особено внимание трябва да се обърне на разработването и прилагането на цялостен план за здравни мерки, ветеринарно-просветна работа сред туристите, населението и обслужващия персонал по въпросите на личната профилактика и хигиена. Всички служители на ферми, засегнати от Ку-треска, трябва да бъдат снабдени със защитно облекло. Лицата, които са се възстановили от коксиелоза, са ваксинирани срещу тази инфекция или имат положителен RSC (не по-нисък от 1:10) и (или) положителна реакция на индиректна имунофлуоресценция (в титър не по-нисък от 1:10), се допускат да се грижат за болни животни. 1 : 40).

основни характеристики патогенна рикетсия

Рикетсиите са кръстени на американския микробиолог Хауърд Тейлър Рикетс, който през 1909 г. открива причинителя на една от рикетсиозите, петниста треска от Скалистите планини, и умира, докато го изследва (1910 г.).

Rickettsia е доста голяма група, представена от патогенни и непатогенни видове. Патогенните видове са значително по-малко. В природата рикетсиите живеят предимно в телата на насекоми (въшки, бълхи, кърлежи), както и на гризачи, диви и селскостопански животни.

Таксономия

Понастоящем рикетсиите се класифицират според Bergey's Guide to Bacteria (1984; 1994), както следва:

Царство Прокариоти

Дивизия Gracilicutes

Раздел 9. Rickettsii et Chlamydii. Рикетсия и хламидия.

Род 1 Rickettsia Род 1 Bartonella Род 1 Anaplasma

Род 2 Rochalimaea Род 2 Grahamella Род 2 Aegyptianella

Род 3 Coxiella Род 3 Haemobartonella

Род 4 Ehrlichia Род 4 Eperhytrozoon

Род 5 Каудрия

Род 6 Neorickettsia

Род 7 Wolbachia

Род 8 Rickettsiella

Следните са основните патогенни родове и видове рикетсии:

Род 1 Rickettsia

Видът R.conjunctivae е причинител на рикетсиален кератоконюнктивит при говеда

Видът R. prowacheki е причинителят на епидемичния тиф

Общо шестнадесет вида

Род 3 Coxiella

Видът C. burnetii е причинител на Ку треска (Q-рикетсиоза)

Род 4 Ehrlichia

Видът E. canis е причинител на кучешката ерлихиоза (Ehrlichiosis (Rickettsia canis) monocytosis)

Видът E. phagocytophila е причинител на ерлихиоза по преживни и всеядни животни (E. bovis, E. ovis) (ерлихиозна моноцитоза, рикетсиална моноцитоза)

Видът E. egui е причинител на ерлихиозата по конете

Видът E. senetsee е причинителят на треската от долината на Пото (E. risticii) мак (Ерлихиозен колит, моноцитна ерлихиоза, синдром на диария по конете)

Род 5 Каудрия

Видът C. ruminantium е причинител на рикетсиозен хидроперикардит (кудриоза, инфекциозен хидроперикардит, сърдечен хидропс на говеда и дребни преживни животни)

Род 6 Neorikettsia

Видът N. helminthoeca е причинител на неорикетсиоза (ерлихиоза) при кучета

Род 7 Wolbachia

Вид W. melophagi

Видове W. persise – патогени на болести по насекомите

Вид W. pipientis

Род 2 Grachamella

Видът G. peromysci е причинител на заболяването при гризачите

Видът G. talpae е причинител на заболяването при зайците

Род 1 Anaplasma

Видът A. centrale е причинителят на анаплазмозата при говедата

Вид A. marginale

Видът A. ovis е причинителят на анаплазмозата при овцете и козите

Рози 3 Haemobartonella

Вид H. felis - патогени на заболявания при кучета, котки,

Вид H. muris от диви гризачи

Род 4 Eperythrozoon

Видът E. ovis е причинител на еперитрозоонозата по овцете

Видът E. suis е причинителят на еперитрозоонозата по свинете

Видът E. wenyonii е причинител на еперитрозооноза при говеда

Според 9-то издание (1994 г.) на „Ръководството на Бърджи за бактериите” в 2 тома, рикетсиите също са оставени в група (раздел) 9 „Рикетсии и хламидии”, в която таксономичната категория „племе” е премахната, останалите таксономични категории са семейства, родове и видове останали непроменени.

В съответствие с рода, вида повечетопатогенните рикетсии се разделят на групи заболявания: заболявания, причинени от ерлихия - ерлихиоза, кудрия - кудриоза, неорикетсия - неорикетсиоза, анаплазма - анаплазмоза, бартонела - бартонелоза и др.

Понастоящем най-актуалните патогени са: Ку треска - C. burnetti, рикетсиален кератоконюнктивит - R. сonjunctivae, анаплазмоза по говедата - A. centrale, A. marginalae и анаплазмоза по овце и кози A. ovis.

Морфологични свойства

Структурата на рикетсията е подобна на тази на другите бактерии. При рикетсията се разграничават мембраната, цитоплазмата и гранулираните включвания. Ядрената структура е представена от зърна (от 1-2 до 4). ДНК и РНК се откриват в клетките.

Рикетсиите са полиморфни.

Цялото разнообразие от техните форми може да се сведе до четири основни морфологични типа (според P.F. Zdrodovsky, 1972).

Тип а. Кокоидна, еднозърнеста рикетсия, размер 0,3-1 µm (обикновено 0,5 µm) в диаметър, това е най-патогенният вид, характерен за интензивно размножаване на патогена в клетките.

Тип б. Пръчковидна, биполярна (с форма на дъмбел), размер: ширина 0,3 микрона, дължина 1-1,5 микрона (също идентифициран с активното развитие на рикетсиоза).

Тип s. Бациларен, удължен, обикновено извит, размер: 0,3-1 µm широк, 3-4 µm дълъг (идентифициран в началния период на заболяването, слабо вирулентни, често гранулирани пръчици, понякога могат да включват 4 зърна, разположени по двойки на полюсите) .

Тип d. Нишковидните полигрануларни рикетсии изглеждат като дълги, сложно извити нишки, размер: ширина 0,3-1 µm, дължина 10-40 µm или повече; (освобождаването им е характерно и за началните стадии на инфекцията - показател за ранна умерена рикетсиоза).

Има и много малки форми до 0,2 микрона, преминаващи през бактериални филтри и невидими в конвенционален светлинен микроскоп, които са ранен стадий на вътреклетъчно размножаване на патогена.

Рикетсиите са неподвижни и не образуват спори или капсули.

Рикетсиите се размножават като бактерии чрез просто напречно делене. Има 2 вида разделение:

обичайното разделяне на кокоидните a - и b - форми с образуването на хомогенни популации;

възпроизвеждане чрез фрагментиране на нишковидни d-форми с последващо образуване на популации, състоящи се от клетки от a- и b-типове.

Тинкториални свойства

Rickettsia оцветява грам-отрицателни.

Кокоидните форми на рикетсия са оцветени в червено според Romanovsky-Giemsa и Ziehl-Nielson, пръчковидни и нишковидни форми са оцветени в червено-синьо (червени гранули, цитоплазмата между тях е синя), според Zdrodovsky - червено (фиг. 2, Приложение 2).

Оцветяването по Romanowsky-Giemsa е класическо оцветяване за идентифициране на рикетсии вътре и извън клетките.

Техника на оцветяване по метода на Романовски-Гимза: препаратите за намазка, приготвени от микробна култура, се изсушават на въздух за 24 часа и се фиксират химическии поставени в панички на Петри върху стъклени пръчици, размажете. Боята се разрежда в размер на една капка на 1 ml дестилирана вода (рН 6,8-7,0). Препаратите се оцветяват студено (в рамките на 4-24 часа) или горещо (разтвор на боя, загрят до 90 0C, се излива под препаратите за намазка, боядисани в продължение на 20 минути. След оцветяване препаратите се измиват с вода, изсушават се и се изследват под микроскоп.

Ако е необходимо, цветните препарати могат да бъдат допълнително диференцирани слабо решение 0,5 % лимонена киселинав резултат на това се подобрява цветният контраст на рикетсията по отношение на общия фон.

Най-често се използва студеният метод. В този случай цитоплазмата на рикетсиите е оцветена във виолетово или синьо, а ядрените гранули са оцветени в червено.

Оцветяването на рикетсии по Romanovsky-Giemsa дава добри резултати само ако са изпълнени определени изисквания (надеждна фиксация на лекарството, добро качествобоя, необходимо pH на водата, достатъчно дълготрайно оцветяване).

За текуща работаМетодът е малко полезен, тъй като изисква много време.

По-често в практиката се използват методи за диференциално оцветяване с фуксин и метиленово синьо; това са методите на оцветяване по Здродовски и Макиавело. Същността на оцветяването с тези методи е, че рикетсиите имат известна киселинна устойчивост. След оцветяване на препаратите с фуксин те се диференцират с киселина и се контраоцветяват с метиленово синьо. В резултат на това рикетсиите запазват пурпурния си цвят, а тъканните елементи са боядисани в контрастен син или светлосин цвят.

Техника на оцветяване по метода на P. F. Zdrodovsky: този метод е лека модификация на метода на Ziehl-Neelsen (обикновен карболен фуксин на Ziehl - основен фуксин 1 g, фенол 5 g, алкохол 10 ml, дестилирана вода 100 ml), разреден в съотношение от 10-15 капки на 10 ml двойно дестилирана вода или фосфатен буфер с pH 7,4. Препаратът, направен на тънък слой, се суши на въздух и се фиксира върху пламък, боядисан с разреден фуксин за 5 минути. След това се измиват с вода, бързо (2-3 секунди) се диференцират чрез потапяне във вана с киселина (0,5% лимонена или 0,15% оцетна, или 0,01% солна и др.), измиват се с вода и завършват боядисването за 10 секунди 0,5 % воден разтвор на метиленово синьо, промит, изсушен с филтърна хартия. Рикетсиите са оцветени в рубинено червено, клетъчните елементи - в синьо (протоплазма) или синьо (ядро).

Техника на оцветяване по метода на Макиавело: изсушеният препарат се фиксира с пламъка на спиртна лампа, оцветява се през филтърна хартия с фуксин (0,25% алкален разтвор на основен фуксин, рН 7,2-7,4) в продължение на 4 минути, промива се с вода, потапя се в 0,25% разтвор на киселина от лимонов сок за 1-3 секунди, оцветява се с 0,5% воден разтвор на метиленово синьо, промива се, изсушава се с филтърна хартия. Рикетсиите са оцветени в червено на син фон.

Културални и биохимични свойства

Рикетсиите са аероби, абсорбират O2 и освобождават CO2, образуват хемолизини, активно окисляват глутаминова киселина, освобождавайки въглероден диоксид, но са безразлични към глюкозата, образуват ендотоксини, подобни на имунологичните реакции на бактериалните токсини, но свързани с рикетсиите не се освобождават в околната среда .

Образуване на токсини

Патогенните рикетсии произвеждат токсични вещества, които играят важна роля в патогенезата на рикетсиозата. Те се отличават от бактериалните токсини по своята неотделимост от микробните клетки и тяхната изключителна нестабилност. Ендотоксините са сходни по имунологични реакции с бактериалните токсини, но тъй като са свързани с рикетсии, те не се освобождават в околната среда. В същото време те не са идентични с ендотоксините, тъй като са термолабилни (протеини) и нестабилни към действието на формалдехида (когато са инактивирани, те запазват своите имуногенни свойства). Всички патогенни видове имат хемолитични свойства.

устойчивост

Оцеляването в течна среда зависи от техните свойства, pH и ToC; те се запазват по-добре в протеинова среда с неутрално или леко алкално pH. Така Coxiella burnetii се задържа в млякото при 4°C до 2 месеца. Изсушени издържат по-дълго върху различни субсирати (изпражнения на въшки) до 1 – 3 години.

Във външната среда устойчивостта на рикетсии (с изключение на C. burnetii) е ниска. Нагряването във влажна среда до 50-60 0C осигурява смъртта на рикетсията за 5-30 минути, при 70 0C - за 1-3 минути. Рикетсиите на Бърнет (причинителят на Ку-треската) могат да издържат на продължително (30-90 минути) нагряване при 60-63 0С и загиват напълно само при кипене. Ниските температури не убиват, а запазват рикетсиите. Консервирани при минус 20-70 0С, при замразяване запазват жизнеспособност и вирулентни свойства за дълго време.

Когато рикетсиите са изложени на различни дезинфектанти в нормални концентрации (3-5% фенол, 2% хлорамин, 2% формалдехид, 10% водороден прекис, 10% натриев хидроксид), смъртта им настъпва в рамките на 5 минути, а 1% разтвор на белина убива рикетсия за 1 минута.

Рикетсията е чувствителна към тетрациклин, дибиомицин, синтомицин, хлорамфеникол и сулфонамиди.

Лиофилизацията осигурява дългосрочно съхранение (с години).

Патогенност

Патогенността на рикетсията се определя от способността им да проникват в чувствителните към тях клетки, където се размножават и синтезират токсин, чийто ефект се проявява само по време на живота на микроорганизмите. Токсинът не се секретира като истинските екзотоксини и не предизвиква интоксикация на тялото след смъртта на патогена, както ендотоксините. Той е термолабилен и се разрушава при нагряване на микробната суспензия до 600С. интравенозно приложение на суспензия от живи рикетсии на бели мишки причинява остра интоксикация и смърт на животните след 2-24 часа.

Rickettsia се характеризира с променливост, проявяваща се с намаляване и загуба на вирулентност при запазване на имуногенните свойства, което се използва при производството на живи авирулентни ваксини.

Разграничаване на рикетсии от вируси и прокариотни микроорганизми

Рикетсиите са подобни на вирусите и бактериите, но има редица отличителни черти.

Прилики с прокариотните микроорганизми:

Рикетсиите имат трислойна клетъчна стена;

боядисани с анилинови багрила;

са чувствителни към тетрациклинови антибиотици, сулфонамиди, а някои видове (N. hilminthoeca) към широк спектър от антибиотици.

Прилики с вирусите:

най-малките форми на рикетсии се филтрират през бактериални филтри;

Rickettsia може да се култивира само в жива клетка (REC, CC, лабораторни животни);

рикетсиите имат тъканен тропизъм;

Рикетсиите се характеризират с липса на строга специфичност на гостоприемника.

Rickettsia стимулира производството на интерферон.

Сравнителна характеристика на прокариотни микроорганизми и вируси

Така микроорганизмите от разред Rickettsiales се характеризират с:

плеоморфизъм;

неподвижност;

грам-отрицателно оцветяване;

патогенност за много видове селскостопански животни, хора и членестоноги;

ниска устойчивост във външната среда (с изключение на C. burnetii);

специална чувствителност към тетрациклинови антибиотици.

Основната отличителна черта от прокариотните микроорганизми и вируси е наличието на членестоноги (въшки, кърлежи, бълхи) в цикъла на развитие на рикетсията.

Причинителят на Ку-рикетсиоза (ку-треска)

Причинителят е Coxiella burnetii.

Ку-треска (от англ. guery - неясен, несигурен, съмнителен) е естествено огнищно зооантропонозно заболяване на домашни, стопански и диви бозайници и птици, най-често безсимптомно, характеризиращо се с развитие на ринит, бронхит, пневмония, конюнктивит, плеврит, мастит. (при мъжете орхит), както и аборт.

Името на болестта идва от първата буква английска думаТреска на Гери буквално: „треска с въпроси“, тъй като в началото причината не беше ясна, тоест „треска с неизвестен произход“.

Като отделно заболяване Ку-треската е идентифицирана за първи път през 1935 г. от Дерик в Южен Куинсланд (Австралия); причинителят е идентифициран през 1937 г. и по предложение на Дерик е наречен Coxiella burnetii. Независимо от австралийски изследователи в САЩ, Кокс изолира филтриращия агент на векторите на кърлежи, доказвайки неговата рикетсиозна природа (1938).

Cu-rickettsiosis е широко разпространена, но е по-често срещана в Австралия.

Икономическите щети от Ку-рикетсиозата са значителни. Състои се от: липсата на потомство от животни (аборти, раждане на нежизнеспособни млади животни, безплодие); намаляване на добива на мляко при крави и производство на яйца при домашни птици и изтощение.

Говеда, прасета, коне, камили, биволи, кучета, кокошки, гъски и гълъби са най-податливи на рикетсия на Burnet. C. burnetii може спонтанно да зарази 70 вида бозайници, 50 вида птици и повече от 50 вида различни кърлежи от родовете Dermacentor, Ambliomma, Yxodes, Rhipiceрhalus, Hyalomma, Haemaphisalis, както и десет вида въшки и бълхи.

Източник на инфекциозния агент могат да бъдат възприемчиви животни, както и в природни огнища кърлежи и гризачи, които са резервоар на патогена.

В естествени условия животните и хората се заразяват трансмисивно чрез ухапване от кърлежи, аерогенно, алиментарно чрез храна и вода, чрез фуражи, замърсени с екскременти на болни животни, животински суровини (кожа, вълна, месо, мляко и др.).

Заразените животни отделят патогена в кръвта, слюнката, урината, изпражненията и млякото. Мембраните и водите са особено заразени, така че човек често се заразява по време на акушерство.

Когато болни и здрави животни се държат заедно, патогенът може да се предаде директно. Заразените кучета пазачи, които отделят патогена с урината и изпражненията, представляват особена опасност в стадата от животни. Те често се заразяват чрез изяждане на плацента или чрез ухапване от кърлеж.

Епидемични взривове от Ку-треска в селски районичесто съвпадат със сезоните на отелване и агнене.

В райони с топъл климат Ку-рикетсиозата се среща по-често и протича по-тежко.

В. Я. Никитин и Л. Д. Тимченко (1994), провеждащи изследвания в три ферми. Ставрополска територия и Белгородска област са диагностицирани с Ку-треска, която се проявява като кератоконюнктивит. При 36% от кравите с увреждане на очите, задържана плацента, некротични промени в амниотичните мембрани и ендометрит са регистрирани (98-100%).

При болните животни рикетсията на Бърнет се открива в маточния секрет в 78% от случаите.

Поради безсимптомното хронично протичане, смъртността при Cu-рикетсиозата е минимална.

Патогенеза

При Ку-треската патогенезата е най-пълно проучена при опитни животни. Установено е, че патогенът, попаднал в тялото на гостоприемника по аерогенен, хранителен, контактен или предавателен път, причинява състояние на рикетсия и след това се размножава в тъканите и клетките на SMF - хистиоцити и макрофаги, след разрушаването на които генерализиране на процеса и се отбелязва токсикемия. След генерализационния стадий, поради изразената избирателна способност на патогена към тъканите, процесът се локализира и C. burnetii започва да се размножава обилно в белите дробове, лимфните възли, вимето, тестисите и особено често в бременната матка. В резултат на това се образуват микронекротични огнища, които впоследствие се заместват от съединителна тъкан. От локални огнища патогенът може отново да проникне в кръвния поток.

Тази органотропия води до аборт, конюнктивит, бронхопневмония, мастит и отделяне на рикетсии с амниотична течност, плацента, секрет от очите, носа и млякото.

По време на инфекцията се развива реакция на свръхчувствителност от забавен тип и се откриват комплемент-фиксиращи антитела.

Инкубационният период на Ку треската продължава от 3 до 30 дни. Заболяването се развива бавно, често латентно, с натрупване на специфични антитела в кръвния серум.

На третия ден от инкубационния период (след експериментална инфекция) телесната температура на говедата се повишава до 41-41,8 0C и се поддържа в продължение на 3-5 дни. Отбелязват се депресия, отказ от хранене, серозен ринит и конюнктивит, значително и дългосрочно (до няколко месеца) намаляване на добива на мляко, аборти при бременни крави и плацентит. Регистрират се повтарящи се нередовни покачвания на телесната температура за период от 3-8 месеца.

При естествени условия на инфекция заболяването при кравите често е асимптоматично и се открива само чрез серологични изследвания и инфекция на лабораторни животни. Понякога обаче има пристъпи на остра треска, аборти във втория период на бременността и продължителна екскреция на рикетсии в млякото, урината и изпражненията. Освен това се отбелязват бронхопневмония, увреждане на гениталните органи, мастит (орхит при бикове) и конюнктивит.

Експерименталната инфекция при животни протича тежко: с увреждане на далака и други вътрешни органи, аборти.

Патологоанатомичните промени не са специфични, при бременни крави се засягат белите дробове, мембраните и матката, огнища на фибринозен мастит, уголемяване и хиперемия на супрагленоидните лимфни възли, уголемяване на далака с ивичести и точковидни кръвоизливи, оток на междулобуларната съединителна тъкан на белите дробове и се наблюдават дегенеративни промени в черния дроб и бъбреците.

Характеристики на патогена

Морфологични и тинкториални свойства.

Рикетсиите на Бърнет (Coxiella burnetii) са плеоморфни микроорганизми, предимно кокоидни и пръчковидни форми с ширина 0,2-0,4 µm и дължина 0,4-1 µm, по-рядко нишковидни до 10-12 µm, разположени поединично, по двойки, понякога в къси вериги. Те образуват филтрируеми форми и са способни на фазова променливост. В природата се срещат във фаза I, а след дълги пасажи преминават във фаза II. Фаза II рикетсии са склонни към спонтанна аглутинация и аглутинация в нормален кръвен серум и се фагоцитират в отсъствието на антитела. Понякога те образуват споровидни форми, осигуряващи устойчивост на високи температури и изсушаване.

Културни ценности.

В лабораторни условия Coxiella се култивира в REC, тялото на лабораторни животни (бели мишки, морски свинчета, хамстери, зайци), по-рядко в иксодидни кърлежи, както и в клетъчни култури (фибробласти, L клетки и други).

Антигенна структура.

Антигенната структура на рикетсията на Burnett се различава от микроорганизмите от семейство Rickettsiaceae; серологично кръстосване с други рикетсии не е установено. Те имат два антигена: повърхностен (разтворим) полизахарид, присъстващ във фаза 1 на рикетсиите, и соматичен (корпускуларен) във фаза 2. И двата антигена са имунологично активни и предизвикват образуването на антитела при експериментално и естествено заразени животни. Диагностичният титър на антителата към антигените от фаза 1 се появява на 40-60 дни, а към антигените от фаза 2 на 7-10 дни.

При хората антигените от втора фаза се използват за имунизация и като алерген за интрадермално изследване.

устойчивост

Rickettsia на Burnet е по-устойчива на фактори външна средав сравнение с други рикетсии, както във влажен, така и в сух материал. Coxiella оцелява в изсъхналата урина на заразени животни в продължение на няколко седмици, в сухи изпражнения до две години, в изсушена кръв, взета от болни животни в продължение на 180 дни, в изпражненията на иксодидни кърлежи и мъртви кърлежи в продължение на много месеци. В стерилна чешмяна вода – до 160 дни. В стерилно мляко Coxiella остава жизнеспособна до 257 дни.

В прясно месо, когато се съхранява в ледник, Coxiella оцелява най-малко 30 дни, в осолено месо - до 80 дни или повече, в масло и сирене при 4 градуса те остават жизнеспособни повече от година.

Coxiella оцелява върху вълна, в зависимост от температурата на съхранение, от 4 до 16 месеца. Патогенът е много устойчив на ултравиолетово облъчване (до 5 часа) и повишени температури (почасово нагряване до 80-90 градуса не гарантира неговата смърт). Кипенето убива Coxiella в рамките на една минута.

Ниските температури (от –4 до –70 градуса) създават особено благоприятни условия за запазване на рикетсиите, а комбинацията със сушене чрез замразяване в протеинова среда осигурява тяхното „запазване“ в продължение на много години. В същото време вирулентните свойства на Coxiella не се променят изобщо или намаляват по време на съхранение, но се възстановяват доста бързо при благоприятни условия.

Неутрализирането на Coxiella изисква използването на по-високи концентрации на химикали и по-голяма експозиция, отколкото за други рикетсии. Използвайки 3-5% разтвор на фенол, 3% разтвор на хлорамин, 2% разтвор на белина, последният причинява смъртта на Coxiella в рамките на 2-5 минути. Във ветеринарната практика 2% разтвори на NaOH и формалдехид, 3% разтвор на креолин и разтвор на белина с 2% активен хлор се използват за дезинфекция на помещения и предмети за грижа за добитъка.

Устойчивостта на Coxiella Burnet към факторите на околната среда определя тяхната устойчивост при транспортиране със замърсени суровини от животински и растителен произход на всякакви разстояния и създава предпоставки за възникване на заболявания от Ку-треска в райони, много отдалечени от ензоотични райони.

Лабораторна диагностика на Ку-рикетсиоза.

Извършва се в съответствие с „Ръководство за лабораторна диагностика на Ку-треска“, одобрено от Главната ветеринарна дирекция на Държавния агропромишлен комитет на СССР на 3 юни 1986 г., № 432-5.

При съмнение за наличие на Ку-треска при селскостопански животни, както и при поява във фермата на заболяване с неизвестна етиология със симптоми, наподобяващи Ку-треска, се извършва лабораторна диагностика чрез изследване на кърлежи и гризачи.

Материал за изследване.

Обекти на лабораторно изследване могат да бъдат: по време на живота на животното - кръв, взета от югуларната вена (2-1,5 ml), кърлежи, събрани от животни на пасище, ​​малки животни, гризачи (полевки, плъхове) или техни пресни трупове, ексудат от матката и влагалището, плацентата на абортирано животно, от мъртви или умъртвени за диагностични цели селскостопански животни, части от засегнатия бял дроб, мозък, далак, регионални лимфни възли, паренхим на вимето, кръв.

Материалът се изпраща в специализирана лаборатория в запечатани контейнери, като се поддържа температура в контейнерите +4 0C.

Лабораторната диагностика на Ку треска се състои от:

откриване на специфични антитела в кръвния серум на селскостопански животни и гризачи в дългосрочната реакция на фиксиране на комплемента (LDCR) с помощта на антиген от фаза 1 на патогена Q треска (ретроспективна диагноза);

откриване и идентифициране на причинителя на това заболяване в патологичен материал от гризачи и селскостопански животни, както и от кърлежи, събрани в естествено огнище и от животни, чрез извършване на биологичен тест и микроскопия на натривки.

Серологична диагностика на Ку треска

Извършва се в съответствие с „Ръководство за серологична диагностика на Ку-треска при животни“, одобрено от Главната ветеринарна дирекция на Министерството на земеделието на СССР на 14 септември 1984 г., № 115-6а.

Серодиагностиката се основава на RDSC, а също така са разработени RSK, RP, RA, RIF (индиректен метод).

Микроскопско изследване на петна за наличие на причинителя на Ку-треска

Извършете с помощта на петна за оцветяване по метода на Zdrodovsky. Изсушените на въздух петна се фиксират по обичайния начин върху пламък и се оцветяват с основен Ziehl fuchsin, разреден с бидестилирана вода в размер на 15-18 капки fuchsin на 10 ml вода. Намазките се оцветяват в продължение на 5 минути, след което фуксинът се измива с вода, препаратът се потапя за 2-3 секунди в 0,5% разтвор на лимонена киселина и се измива с вода. След това в продължение на 15-30 секунди те се оцветяват с 0,5% воден разтвор на метиленово синьо и се промиват отново с вода, намазката се изсушава с филтърна хартия и се изследва микроскопски в система за потапяне при увеличение 7 * 90. При това В този случай рикетсиите изглеждат като червени пръчки или коки на син фон.

Ако в цитонамазките няма патоген, при първия пасаж се извършват 3 последователни пасажа.

Диференциация на причинителя на Ку-треската

При диференциране се изключват хламидия, бруцелоза, пастьорелоза и листериоза, които могат да се появят самостоятелно и под формата на смесени инфекции.

Диагнозата Ку-треска се счита за установена, когато се получи един от следните резултати:

Откриване на специфични антитела в кръвния серум на селскостопански животни и гризачи в реакцията на дългосрочно фиксиране на комплемента с помощта на антиген от патогена на фаза I Q треска (ретроспективна диагноза);

откриване и идентифициране на причинителя на това заболяване в патологичен материал от гризачи и селскостопански животни, както и от кърлежи, събрани в естествено огнище и от животни, чрез извършване на биологичен тест и микроскопия на натривки.

Окончателна диагноза

Окончателната диагноза Ку-треска се установява въз основа на епидемиологични, клинични и патологични данни, като се вземат предвид лабораторните изследвания.

Диагностична оценка на резултатите от изследването

Ако патогенът е изолиран от кърлежи и гризачи или специфични антитела са открити в кръвния серум на морско свинче по време на биоанализ, зоната (регионът) се счита за естествено огнище на Ку-треска и ако патогенът е изолиран от тялото на селскостопански животни (фермата), се счита за неблагоприятна за това заболяване.

При естествено огнище и в нефункционираща ферма се провеждат мерки съгласно „Временни инструкции за профилактика и ликвидиране на Ку-треската по селскостопанските животни“.

Продължителност на изследването.

Продължителност на изследването: биопроби върху морски свинчета - до 30 дни, върху бели мишки и пилешки ембриони - до 13 дни.

Имунитетът не е достатъчно проучен. При заразени животни (крави, овце и др.). Отбелязано е дългосрочно (над 2 месеца) носителство на патогена. През този период са възможни повторни и суперинфекции и се развива свръхчувствителност от забавен тип.

След възстановяване се формира силен имунитет.

Във ветеринарната практика все още не са разработени подходящи за употреба ваксини и серуми. В медицината добър ефект има имунизацията с жива ваксина М-44 (предложена от P. F. Zdrodovsky и V. A. Genig, 1960-1968). Те имунизират както животни, така и хора, изложени на риск от инфекция.

За серологична диагностика RDSC използва сух антиген от рикетсия фаза I на Бърнет.

Животни с тежки симптоми на Ку-треска, реагиращи положително на RDSC, както и без клинични признаци, но с повишена температура, се лекуват два или повече дни с тетрациклин и неговите производни. Хлортетрациклин се прилага перорално, окситетрациклин и тетрациклин се прилагат интрамускулно в размер на 25-30 mg / kg тегло на животното 2-3 пъти на ден до възстановяване и още три дни след това. В същото време се провежда симптоматично лечение.

Причинителят на рикетсиален кератоконюнктивит при говеда

Инфекциозен кератоконюнктивит, инфекциозен кератит, инфекциозно възпаление на очите.

Остро заболяване, засягащо роговицата и конюнктивата на окото, главно при говеда.

Рикетсиалният кератоконюнктивит е описан за първи път от D. Coles (1931) в Южна Африка и наименува причинителя Chlamydozoon conjunctivae.

По-късно патогенът е изследван по-подробно и е причислен към род Rickettsia, вид R. conjunctivae.

Кратки епидемиологични данни

През 1953-1954г. в бившия СССР тази рикетсиоза е диагностицирана (V.P. Panin и L.A. Dorofeev). Възприемчиви към него са едър и дребен рогат добитък, камили, свине, коне, птици; от лабораторните животни са податливи само зайци; хората не са податливи. Най-чувствителни са телетата на възраст от 3 месеца до 1,5 години и агнетата над 15-дневна възраст.

Източник на патогена са болни животни и рикетсионосители, които го отделят с конюнктивален секрет и слуз от носа.

Основният път на предаване е въздушно-капков, контактен или с участието на насекоми, механични носители (мухи, кърлежи и др.). Болестта се характеризира с изключително бързо разпространение, особено когато животните се държат в големи групи; регистрира се по всяко време на годината, но по-често през пролетта и лятото; болестта има тенденция да бъде стационарна. Степента на увреждане на животните се влияе негативно от лошите условия на живот и липсата на витамин А.

Патогенеза

рикетсиите проникват в стромата на роговицата и попадат в междуклетъчното вещество сред леко дезорганизирани колагенови фибрили, което води до развитие на стромален кератит. Това се улеснява от ендотоксин, продуциран от микроорганизми, инфекциозно-алергична реакция от забавен тип (V. A. Ado, 1985, E. A. Kiryanov, 1988).

Основни клинични признаци

Инкубационният период на инфекциозния кератоконюнктивит е от 2 до 12 дни. Основният симптом на заболяването е конюнктивит, често едностранен. От болното око се появява секрет, клепачите се подуват и се появява реакция на светлина (фотофобия). По повърхността на едематозната конюнктива има фина грануларност. Възпалението може да се разпространи до роговицата, причинявайки кератит. Роговицата става мътна, придобива жълтеникав оттенък, в нея се образува абсцес, телесната температура се повишава, състоянието на животното е депресирано и апетитът намалява. След това абсцесът се отваря и се образува язва - улцеративен некротизиращ кератит, може да се наблюдава пълна перфорация на роговицата. Появява се мукопурулен секрет. След 8-10 дни животните обикновено се възстановяват, но заболяването може да продължи 20-35 дни. След възстановяването в окото се образува белег (трън).

Характеристики на патогена

Rickettsia conjunctivae са малки полиморфни организми с пръчковидна, пръстеновидна, подковообразна, бобовидна, но по-често кокоидна форма, с размери 0,5-3 микрона.

Културни ценности

Отглеждането се извършва в RKE. Заразяват се пилешки ембриони на 5-6 дни и жълтъчната торбичка. В процеса на култивиране на рикетсии се извършват 4-6 „слепи“ пасажа, като се използват мембрани от жълтъчен сак, промити в стерилен физиологичен разтвор, смлени и суспендирани. При положителен случай се отбелязва смърт или изоставане в развитието (в сравнение с контролата) на заразени ембриони.

устойчивост

Към факторите на околната среда и химикалине високо. В 0,85% разтвор на NaCl при температура 20-22 градуса рикетсиите запазват вирулентността си за 24 часа.

Върху овчата вълна патогенът умира след 96 часа, 5% разтвор на коларгол ги инактивира за 15 минути.

R. conjunctivae е чувствителен към тетрациклинови антибиотици.

Лабораторна диагностика

Патологичен материал - остъргвания от конюнктивата на горния клепач и роговицата на засегнатите очи на болни животни, слуз от носа, слъзна течност на втория - петия ден от заболяването. Изследва се само пресен материал. При продължително транспортиране материалът се замразява при температура –5-10 0C и се транспортира в термос с лед.

Лабораторната диагностика на рикетсиален кератоконюнктивит включва:

1. Микроскопски метод,

2. Изолиране на култура на рикетсии върху RKE,

3. Биологичен метод.

Микроскопски метод:

1) Светлинна микроскопия: препарати за намазка от патологичен материал, оцветени по методите на Романовски-Гимза или Здродовски, се микроскопират три пъти с интервал от 1-2 дни (за техниката на оцветяване вижте раздела „Общи характеристики на патогенни рикетсии“, „Тинкториал“ Имоти").

При оцветяване по Romanovsky-Giemsa, рикетсиите се оцветяват в червено-виолетово (лилаво с червени гранули), според Zdrodovsky - червено.

Луминесцентна микроскопия: За откриване на рикетсии под луминесцентен микроскоп се използва флуорохромно покритие. Лекарството се фиксира в метанол в продължение на 5 минути, третира се с разтвор на акридин оранжево (1:3000, рН 3,8), промива се с дестилирана вода, изсушава се и се гледа под потапяща леща, като се използва нефлуоресцентно потапящо масло (филтри - SZS-7 , Ж-1, БС-8 и КС-18).

Рикетсиите флуоресцират в зелено и червено и ясно се открояват на тъмния фон на препарата.

Изолиране на култура на RKE.

Биологичен метод:

За идентифициране и определяне на патогенността на рикетсията - причинителите на кератоконюнктивит - бикове на възраст 2-5 месеца или зайци се заразяват чрез въвеждане на материал в окото на животното. От оригиналния патологичен материал или от ембрионална култура се приготвя суспензия (1:5). Заболяването при бикове се проявява след 7-12 дни под формата на кератоконюнктивит и продължава 8-10 дни или повече. При зайци болестта се проявява на 2-4 мрежи в 90% от случаите. При отварянето им, в допълнение към възпалителните явления в областта на заразеното око, се разкрива фокално катарално възпаление на белите дробове.

Серологичната диагноза на рикетсиален кератоконюнктивит не е разработена.

Рикетсиозният кератоконюнктивит трябва да се диференцира от конюнктивит, причинен от хламидия, телиазия, пастерела, както и от травматични увреждания.

Диагнозата се поставя въз основа на епизоотични и клинични данни и се потвърждава от лабораторни изследвания (откриване на патогена чрез микроскопия на намазки).

Продължителността на лабораторните изследвания е 1,5 месеца.

Имунитет, средства за специфична профилактика и терапия

Животните, които са се възстановили от рикетсиален кератоконюнктивит, развиват дълготраен имунитет - до една година.

Не са разработени специфични превантивни мерки.

Болните животни се изолират в тъмна стая и се лекуват: промиване на очите с разтвор на фурацилин (1: 5000), капки за очи (0,5% разтвор на цинков сулфат и 3% разтвор на борна киселина), новокаин-хлортетрациклинов мехлем (новокаин 5,0, хлортетрациклин - 5,0, вазелин - 30,0) и др., емулсия на синтомицин, 5% протаргол, кортикостероидни мехлеми с антибиотици, разтвори на албуцид и мехлеми.

Причинител на анаплазмоза по говеда и дребни преживни животни

Анаплазмозата е трансмисионно заболяване на едрия и дребния рогат добитък, както и на други домашни и диви животни, протичащо остро или хронично с признаци на остра анемия, периодична треска, смущения в сърдечно-съдовата система и стомашно-чревния тракт.

Причинителят на анаплазмозата при говедата е Anaplasma marginale (Theiler, 1910) и A.centrale (Theiler, 1911), при овцете и козите A.ovis (Lestoguard, 1924).

Кратки епидемиологични данни

Лосове, северни елени, овце, кози, зебу, сърни, антилопи и биволи са податливи на A. marginale.

A. ovis включва овце, кози, архари, муфлони, сайги, антилопи, сърни, лосове и елени, което дава възможност да се класифицира анаплазмозата като естествено огнищно заболяване. Животните зебу (млади животни) са по-податливи от домашните животни. Най-податливи на заболяването са бременните и високопродуктивните крави.

Анаплазмите се предават трансфазно, трансовариално и в една зряла фаза на кърлежа по време на периодично хранене. Възможно е механично пренасяне на патогена.

Анаплазмите могат да се прехвърлят от болни животни на здрави животни по време на вземане на кръв и различни операции, извършвани със същия инструмент.

Възможна е вътрематочна инфекция.

Има сезонност на анаплазмозата, записва се през лятото и есента, рядко през зимата. Заболяването при овцете се регистрира от април до октомври. Често се диагностицира заедно с бабезиоза, тейлериоза и еперитрозооноза. Протича тежко при смесени хелминтозни инвазии, както и в комбинация с инфекциозни заболявания. През зимата анаплазмозата се диагностицира по-често при животни при условия, които намаляват резистентността: лошо качество на хранене, дефицит на йод, кобалт или витамин.

Анаплазмозата се характеризира със стационарност. Заболеваемостта е 40-50%. Смъртността достига 40%.

Патогенеза

Развитието на болестния процес започва с въвеждането на анаплазми в еритроцитите и освобождаването им от метаболитни продукти. В резултат на това се нарушават физиологичните функции на червените кръвни клетки и тяхната хемопоеза. В същото време се променя дейността на централната нервна система и възниква патология на вътрешните органи. Тялото реагира на въвеждането на анаплазми чрез мобилизиране на клетъчни и хуморални механизми с образуването на антитела срещу патогена, което води до повишена еритрофагоцитоза. Продължителността на живота на засегнатите червени кръвни клетки е средно около 20 дни, докато здравите червени кръвни клетки живеят около 90-120 дни. Броят на червените кръвни клетки и хемоглобина при тежко болни животни намалява 2,5 пъти. В организма възникват хипоксемия и хипоксия, което води до още по-голямо разрушаване на централната нервна система, така че някои животни развиват пареза на задните крайници и нарушена координация на движението. Загубата на тегло прогресира. Поради нарушаване на автономната система се развива чревна атония. При потискане на имунобиологичните механизми съпротивителните сили на организма намаляват и тогава процесът често завършва със смърт.

Основни симптоми и патологични промени

Инкубационният период е от 10 до 175 дни.

При говедата анаплазмозата протича остро и хронично. В острия ход телесната температура се повишава до 41, лигавиците стават бледи до цвета на порцелан - развива се прогресивна анемия (броят на червените кръвни клетки намалява до 1,5-2 милиона / mm кръв, хемоглобинът - 2-4% ), понякога се развива жълтеница. Сърдечно-съдовата дейност и дишането са нарушени, често се появява кашлица. Животните бързо губят тегло и се развива чревна атония. Може да има аборти.

Микроскопията разкрива анизоцитоза, пойкилоцитоза и полихромазия.

Хроничният курс се характеризира с по-слабо изразени симптоми и продължава 20-30 дни.

При овцете анаплазмозата протича остро, хронично и асимптоматично, с по същество същите симптоми като при говедата. Има намаляване на количеството и качеството на вълната, може да има пареза.

Кръвта на едрия и дребния добитък е бледочервена и водниста. Болните животни изостават от стадото, лежат много и се отдалечават от слънцето на сянка. Постепенно се развива слабост и загуба на сила, а понякога настъпва смърт поради симптоми на кома.

При аутопсия се отбелязва силно изтощение на труповете, лигавиците са анемични, понякога с оттенък на жълтеникавост. Скелетната мускулатура е бледорозова, кръвта е светла и течна. Сърдечният мускул е отпуснат, под епикарда има ивичести и петнисти кръвоизливи. Слезката е увеличена 2-3 пъти, с кръвоизливи. Черният дроб в повечето случаи е увеличен, с тъпи задебелени ръбове, иктеричен и петнист, жлъчният мехур е изпълнен с гъста жлъчка.

При смесени заболявания промените в трупа съответстват на болестите, причинили смъртта на животното.

Характеристики на патогена

Морфология и тинкториални свойства

Грам-отрицателен, оцветява добре според Romanovsky-Giemsa в тъмночервен цвят. Можете да оцветите с азур-еозин и ускорения метод според Shchurenkova.

устойчивост

Анаплазмите са устойчиви на ниски температури, при замразяване до минус 70 0С и минус 196 0С те се запазват с години, но бързо умират при плюс 50 0С.

Лабораторна диагностика

Лабораторната диагностика се извършва в съответствие с „Инструкции за борба с анаплазмозата при едри и дребни преживни животни“, одобрени на 31 юли 1970 г., Приложение № 1 (Антонов B.I., 1987).

Материалът за изследването е кръвта на болно животно, както и кръвен серум (3-5 ml).

Лабораторната диагностика включва:

1. Микроскопски метод - откриване на анаплазми в кръвни натривки, оцветени по Romanovsky-Giemsa, азур-еозин или ускорен метод на Shchurenkova;

2. Серологичен метод - RSK.

Анаплазмите са боядисани в тъмно червено, имат кръгла форма (като точки) и са разположени по периферията на червените кръвни клетки. Размери 0,2-2,2 микрона.

Степента на инфекция на червените кръвни клетки варира - от незначителна до 50% или повече инфектирани червени кръвни клетки. За разлика от телцата на Jolly, анаплазмите обикновено са по-малки и по-малко интензивно оцветени.

Анаплазмата не трябва да се бърка с базофилната грануларност на еритроцитите, която в повечето случаи се проявява чрез множество различни форми на включване в един еритроцит.

При съмнителни случаи кръвният серум в количество от 3-5 ml се изпраща в лабораторията за изследване на RSC, което се извършва съгласно „Метод за изследване на RSC за диагностика на анаплазмоза при говеда и дребни преживни животни“. Одобрен на 29.09.1971 г

Диагнозата анаплазмоза се поставя въз основа на епизоотични, клинични, патологични данни и резултати от лабораторни изследвания.

Анаплазмозата трябва да се диференцира от тейлероза, пироплазмоза, бабезиоза, франкиелоза, лептоспироза, а при овцете - допълнително от еперитрозооноза.

Диагнозата анаплазмоза се счита за установена в един от следните случаи: когато патогенът се открие в кръвни натривки чрез светлинна микроскопия.

При лептоспироза, изразена жълтеникавост на лигавиците и кожата, краткотрайна треска, хеморагична диатеза, некроза на лигавиците на кожата, хемоглобинурия, което се потвърждава от лабораторни изследвания.

Имунитет, средства за специфична профилактика и терапия

Клетъчният имунитет играе водеща роля в защитата на организма от анаплазма. Хуморалните антитела не са от голямо значение за защита срещу анаплазма.

За лечение се използват тетрациклинови антибиотици, които се разтварят в 1-2% разтвор на новокаин, в продължение на 4-6 дни подред, доза от 5-10 хиляди единици / kg телесно тегло на животното.

Използват се и сулфонамиди и е показано въвеждането на диамидин.

Необходима патогенетична терапия: прилагане на микроелементи (магнезиев сулфат, меден сулфат, кобалтов хлорид), витамини (В12), сърдечни лекарства - кофеин, камфор и др.

В епизоотичната зона се борят с кърлежите. Нововъведените във фермата животни трябва да бъдат изследвани с помощта на серодиагностични методи.

Причинителят на епиритрозооноза по свинете

Заболяването е описано за първи път от Дойл в Индиана през 1933 г. като „подобно на рикетсия или подобно на анаплазма заболяване при свинете“ (Дойл, 1932 г.). Splitter и Williamson (1950) описват организъм, който причинява жълтеница при прасетата --- Eperythrozoon suis и други подобни патогени, които причиняват еперитрозооноза -- при говеда -- E. wenyonii и при овце -- E. ovis.

Различни видове причинители на еперитрозооноза също са идентифицирани при тези животни през 1977 г. (Gothe и Kreier) патогенността и клиничната изява са доказани само - E. suis (при свине), E. wenyonii (при говеда), E. ovis (при овце). ) и E. coccoides (при мишки).

Кратки епидемиологични данни

Епиритризоонозата е видоспецифично заболяване. Причинява се само от Eperythrozoon suis и се наблюдава само при домашни свине.

Еперитрозоонозата се регистрира на всички континенти. Освен свинете боледуват гризачи и преживни животни. Заболяването е регистрирано в Англия, Германия, Румъния, Чехия, Словакия, Франция, Югославия, Сардиния, Канада, Тайван и Полша.

Прасетата от всички възрасти са податливи на болестта. Отбитите прасенца и прасенцата в рамките на няколко дни след кастрацията са особено податливи на болестта. Прасенцата боледуват по-често на възраст 1-14 дни и до 3-6 месеца.

Източник на инфекциозния агент са болни животни.

Патогенът се освобождава във външната среда с телесни секрети, съдържащи кръв.

Факторите на предаване включват предмети за грижа, постелки, подове, хранилки, замърсени с кръв фуражи, както и различни инструменти по време на ветеринарно лечение.

Заразяването става чрез хранителен, контактен, вътрематочен и трансмисивен път (кърлежи, комари, мухи, въшки).

Еперитрозоонозата се характеризира със стационарност, което може да се обясни с дългосрочното носителство на патогена в тялото на възстановени и клинично здрави животни.

Няма изразена сезонност, тъй като пациентите се откриват през цялата година, но повечето случаи на заболяването се срещат през лятото. При свинете заболяването се наблюдава по-често в периода на масово опрасване.

Клинични признаци: анемия, треска, жълтеница, некроза ще се наблюдават само в отслабено тяло на животно. Стресовите фактори, незадоволителните условия на живот и хранене, хроничните генерализирани инфекции предразполагат към клиничната изява на заболяването.

Епиритрозоонозата усложнява хода на съпътстващите заболявания, от своя страна редица заболявания, причиняващи рецидиви. Отбелязано е взаимодействие на епиритрозоони с анаплазми, бабезии и други протозои.

Заболеваемостта зависи от имунния статус на добитъка и достига 30% или повече. Смъртността е под 1%.

Патогенеза

Еперитрозооните имат тропност към еритроцитите, тромбоцитите и левкоцитите. Патогенът може да се локализира отделно или във верига върху външната мембрана на еритроцита, а може да се локализира и вътре в еритроцита.

Свободни микроорганизми се наблюдават само в кръвната плазма. Тези деформирани червени кръвни клетки се отстраняват и след това се хемолизират в далака. Киселинно-алкалният баланс в кръвта се нарушава и се развива ацидоза. В остри случаи може да се появи генилизирана хемолитична жълтеница.

Епиритризоонозата причинява автоимунна хемолитична анемия, свързана със студова аглутинация. По време на взаимодействието на Eperythrozoon suis с повърхността (мембраната) на еритроцита, структурата на мембраната се променя, завършвайки с освобождаване на маскирани антигени или модификация на съществуващи антигени - т.е. чужд отговор на имунната система на организма.

След като микроорганизмът се прилепи към мембраната на червените кръвни клетки, се произвеждат автоантитела като част от защитния механизъм и атакуват червените кръвни клетки, заразявайки животното.

Наличието на микроорганизми в плазмата води до микроаглутинация на червените кръвни клетки в онези части на тялото, където температурата е по-ниска, особено ушите, опашката и крайниците. При недостатъчен приток на кръв ушите посиняват, което води до по-късна исхемия. Клинично това може да се прояви като некроза.

Основни симптоми и патологични промени

При експериментално заразени и болни свине инкубационният период продължава средно 7 дни (но може да бъде от 2 до 26 дни), след въвеждането на заразени кърлежи от 8 до 90 дни.

Еперитрозоонозата може да се появи остро и хронично.

Може да има субклинични, генитални и латентни форми.

Инкубационният период зависи от вирулентността на E. suis, възрастта и състоянието на имунната система на организма, както и от дозата на инфекцията, условията на живот и хранене на животните. Най-характерните клинични признаци на епиритрозооноза при прасета се появяват при кърмещи прасенца между раждането и първия ден от живота, повишаване на телесната температура на 1-3 дни след заразяването в диапазона от 40,0 - 41,5 ° C. При болните прасенца първият клиничен признак е краткотрайна (1-3 дни) треска до 41,5 ° C, бледа кожа, апатия, анемия или периодично проявено пожълтяване. Тези признаци изчезват след няколко дни. Клиничните признаци може да не се появят при всички прасенца в котилото. След няколко дни се появяват промени в кръвта. Чернодробна дисфункция - повишена жлъчна секреция.

Прасенцата за угояване изпитват апатия, краткотрайна треска, затруднено дишане (диспнея), загуба на апетит, анемия и понякога жълтеница. При болни животни, сълзене, хиперемия и след това бледност на лигавиците, понякога жълтеница, периодична диария, запек и понякога клонични гърчове. Болните прасенца умират поради кома, хипотермия и остра анемия.

Клинични признаци в остро протичане: бледност, температура до 42°C, жълтеница, както и цианоза на крайниците, особено в областта на хрущялната тъкан на ушите. Тези процеси водят до отслабване и смърт на млади индивиди.

Класическата форма на жълтеница е много рядка. В зависимост от степента на анемията се появяват анорексия (диария), апатия, затруднено дишане (задух). Наддаването на тегло на прасетата намалява.

Мраморността или кървенето на ушите възниква поради влошаване на кръвоснабдяването в микросъдовете на ушите. Характерен признак на така наречената студова аглутинация в острия ход на заболяването е тъмночервеното оцветяване на крайниците и върховете на ушите. Това се дължи на микроаглутинация и тромбоцитоза в капилярите на кръвния поток. В отделни случаи се наблюдава цианоза, особено при прасенцата след ветеринарни и зоотехнически мерки - кастрация, отбиване. Също така при кърмачета, отбити и угоени прасенца се наблюдава анемия в цялата област на ухото, опашката и крайниците на краката. Некроза ушии големи участъци от хрущял на ухото могат да се появят в резултат на продължителна експозиция на Eperythrozoon suis или в резултат на острия ход на заболяването. Некрозата може да бъде не само на върховете на ушите, но и отстрани, в корема. Излекувано животно (стадо) може да се разболее отново в резултат на отслабен имунитет. Повторното заразяване е възможно по всяко време на годината. При повторни инфекции клиничните признаци са леки.

Хроничният ход на заболяването се характеризира с бледност и някои алергични кожни реакции под формата на "уртикария". Характерен признак е некрозата на върховете на ушите. При хронично протичане на заболяването при прасетата в по-възрастните групи за угояване лезиите са изразени по ушите, отстрани и по корема между предните и задните крайници. При по-възрастните прасета промените отстрани са с размер на малка чиния. Болните прасенца често развиват съпътстваща вторична инфекциозни заболяванияпоради отслабена имунна система. Някои прасета за угояване проявяват апатия, загуба на апетит, треска от 40,5 - 41,5 °C, затруднено дишане и намалено наддаване на тегло.

При свинете майки клиничните признаци се появяват 3 - 4 дни след опрасването и се характеризират с анорексия, температура до 42 ° C и се появяват в гръдната или гениталната форма за 1 - 3 дни. Тези прасета се характеризират с понижено производство на мляко и изхвърляне и необичайно или липсващо поведение на майката. Клиничните признаци могат да се появят и в следродилния период. След няколко дни след заразяването прасетата изпитват треска за 1-3 дни и загуба на апетит, а производството на мляко е потиснато.

С гениталната форма прасетата изпитват репродуктивни проблеми: нередовен цикъл, слаба плодовитост, аборт, раждане на все още или слаби (нежизнеспособни) прасенца. Тези признаци се наблюдават при серологично положителни стада. В стада, заразени с Eperythrozoon suis, 65% от прасенцата след отбиване за 7 дни са без видими клинични признаци на заболяването. Проблемите с нередовни полови цикли (анеструс) могат да достигнат до 60% от популацията на свинете.

При субклиничната форма нивото на хемоглобина е ниско, телесната температура е субфебрилна, младите животни боледуват по-тежко. Те изпитват депресия, загуба на апетит, треска, слабост, задух и анемия на лигавиците.

Латентната форма не се проявява клинично.

Патоанатомичните промени в повечето случаи са нехарактерни и зависят от придружаващи инфекции. При прасенцата се наблюдават изтощение, пожълтяване на кожата и понякога дерматит зад ушите. При аутопсията се наблюдава увеличение на далака, лимфните възли и стената (лигавицата) на стомаха и се наблюдава пожълтяване на обвивките на кръвоносните съдове. Лигавиците и серозните мембрани, подкожната тъкан са иктерични. Жълтеница може да се появи и в други органи. Черният дроб е жълт или жълто-кафяв. Понякога се наблюдават хидроторакс, хидроперикардит и асцит. Възможни са петехии под серозната мембрана на бъбреците и пикочния мехур. Съдържанието на стомаха и червата е жълтеникаво на цвят.

Хистопатологично се открива повишено съдържание на хемосидерин в клетките на Купфер на черния дроб, както и в клетките на ретикуларния клетъчен слой на стомаха.

Характеристики на патогена

Морфология и тинкториални свойства.

Причинителят на еперитрозоонозата е полиморфен, може да има кръгла, овална, пръчковидна, дъмбеловидна, пръстеновидна форма, може да се появи под формата на запетая и да бъде гранулиран. Размер от 0,2 до 2 µm, в групи от 1,0 до 2,5 µm. В кръвните препарати те лежат поотделно или във верига върху външната мембрана на еритроцита и могат да бъдат разположени вътре в еритроцита. При фебрилно състояние могат да се открият свободно разположени бактерии.

Лабораторна диагностика.

За лабораторна диагностика е необходим кръвен серум или цяла кръв, стабилизирана с хепарин или друг антикоагулант.

Диагнозата Eperythrozoon suis се поставя комплексно въз основа на епидемиологични данни, клинични признаци и патологични промени. Лабораторната диагностика е определяща при поставяне на диагнозата. Лабораторната диагностика включва:

Микроскопски метод - изготвяне на кръвни натривки, оцветяване по Романовски - Гимза и Здродовски, микроскопия за откриване на еперитрозоони;

Серологичен метод - откриване на специфични антитела в кръвен серум с помощта на RSK, ELISA, идентифициране на антиген в ELISA;

Молекулярно-генетичен метод – полимеразна верижна реакция (PCR);

Биологичен метод - заразяване на животни, възприемчиви към еперитрозооноза;

Хематологични изследвания - левкограма, определяне на хемоглобин, еритроцити, хематокрит и нива на желязо в кръвта.

Хистологичен метод - извършва се хистологично изследване на черния дроб, бъбреците и далака за установяване на натрупвания на хемосидерин.

Микроскопски метод.

При болни и съмнителни животни кръвта се взема от периферните съдове (ухо, върха на опашката, понякога синусите на окото), предотвратявайки хемолизата на червените кръвни клетки. Кръвта се стабилизира с трилон Б, хепарин и натриев цитрат. Най-добри резултати за животни се получават при изследване на кръв от животни с остра еперитрозооноза. Кръвните натривки се приготвят по стандартните методи веднага след вземането на кръв. Слайдовете трябва да са идеално чисти и без мазнини. Температурата на кръвта трябва да бъде 37 °C, в противен случай червените кръвни клетки ще аглутинират поради студова аглутинация, което затруднява откриването на Eperythrozoon suis в цитонамазките. След приготвяне на кръвни натривки те се изсушават и фиксират химически: метилов алкохол - 5 минути, етилов алкохол - 30 минути, течност на Никифоров (ректифициран етилов алкохол 96˚ и етер за анестезия в съотношение 1: 1) - 30 минути.

Намазките се оцветяват според Романовски - Гимза или Здродовски.

Техника на оцветяване по Романовски - Гимза.

Нанесете боя, разредена с дестилирана вода (pH 7,0 - 7,2) върху фиксираното петно ​​в съотношение 3 капки боя на 2 ml вода, боядисвайте 30 - 45 минути. Промива се с дестилирана вода, изсушава се на въздух и се микроскопира при общо увеличение 900 - 1800 пъти.

Eperythrozoon suis е оцветен в синьо с различни нюанси като полиморфни микроорганизми върху еритроцитната мембрана. Червените кръвни клетки са розови.

Техника на рисуване според Здродовски.

Разтвор на Ziehl carbol, предварително разтворен в бидестилирана вода или фосфатен буфер с pH 7,4, се нанася върху фиксираната петна в съотношение 10 - 15 капки боя на 10 ml вода или буфер за 5 минути. След това бързо (1 - 3 секунди) диференцирайте в 0,5% лимонена или 0,15% оцетна киселина чрез потапяне на цитонамазката в киселинна баня. Измийте с вода (обилно) и завършете боядисването с 0,5% разтвор на метиленово синьо за 10 секунди. Измийте, изсушете на въздух и микроскопирайте.

Еперитрозооните са боядисани в рубиненочервено, клетъчните елементи са сини (протоплазма) или сини (ядра).

В остри случаи рикетсията под формата на зърна засяга 80 - 100% от червените кръвни клетки; за хронични и субклинични - 10 - 30% червени кръвни клетки с единични зърна; не се откриват в латентна форма.

Откриването на микроорганизми с характерна морфология и тинкториални свойства е основа за поставяне на диагнозата еперитрозооноза.

Серологичен метод

Включва изследване на кръвен серум в RSK и ELISA за откриване на антитела. ELISA може да се използва за идентифициране на патогена. Серологичните реакции се извършват в съответствие с инструкциите за използване на тест системи.

Молекулярно-генетичен метод.

Осигурява PCR изследване. Този метод е най-чувствителният и специфичен за идентифициране на Eperythrozoon suis.

Биологичен метод.

Извършва се на прасенца на възраст 2-4 месеца. Прасенцата се заразяват чрез кръв или кръвопреливане от болно животно на здраво. Клиничните признаци на заболяването се появяват след 3 до 4 седмици. Биоанализът се счита за положителен, ако клиничната картина е характерна и патогенът се открива чрез микроскопски метод.

Хематологични изследвания.

Кръвта, взета директно по време на треска, има лъскава повърхност и не се отлага по стените на епруветката, а аглутинира, когато стайна температура. Микроаглутинацията е характерна особеност на Eperythrozoon suis. Кръвта се изследва веднага след вземането. Температурата на кръвта и материалите трябва да бъде 37 °C.

Eperythrozoon suis причинява хемолитична анемия с характерни нормохромни и хромоцитни анемии. Показатели за заболяването и неговата тежест са броят на червените кръвни клетки в кръвта на животните, съдържанието на хемоглобин и хематокрит. При болните животни се наблюдава намаляване на броя на еритроцитите до 2,6 милиона/ml и 80% от еритроцитите са засегнати. Неутрофилната левкоцитоза също прогресира, броят на тромбоцитите намалява и кръвната плазма става жълтеникава.

Има намаляване на броя на червените кръвни клетки в кръвта и намаляване на стойностите на хемотокрита и хемоглобина.

Изследват се съдържанието на серумен билирубин и способността за свързване на желязо.

Резултатът от изследването се определя от: броят на еритроцитите от 1 до 2 * 1012 / l, хемоглобин 20-40 g / l, често 70-90 g / l, левкоцити 20-50 * 109 / l.

Левкограмата показва увеличение на броя на лимфоцитите и моноцитите.

В субклиничната форма броят на еритроцитите намалява до 2,4-5 милиона, левкоцитите се увеличават до 8,5 хиляди, ESR се ускорява, възможни са неутрофилия и еозинофилия. Честотата на червените кръвни клетки достига 90%.

Хистологичен метод.

Извършва се хистологично изследване на черния дроб, бъбреците и далака, за да се идентифицират натрупванията на хемосидерин. Не е определящо.

Диагнозата еперитрозооноза се счита за установена в един от следните случаи:

При откриване чрез микроскопски метод в кръвни натривки на клинично болни животни еперитрозоони с характерна морфология и тинкториални свойства;

Ако се открият специфични антитела в RSC, ELISA;

При идентифициране на патогена в ELISA или PCR.

Имунитет, средства за специфична профилактика и терапия.

Имунитетът не е напълно проучен. Установено е, че в резултат на заболяване имунният отговор е непълен и краткотраен. В хода на заболяването се произвеждат антитела от клас Ig M.

Не са разработени специфични средства за превенция или терапия.

На болните животни се дава почивка и се подобрява храненето. При прасета за угояване с признаци на остро протичане на заболяването се използва парентерално приложение на окситетрациклин за лечение в доза от 20 - 30 mg / kg живо тегло. Парентерален окситетрациклин може също да се дава на прасета в заразени (дисфункционални) стада от време на време по време на стрес: прегрупиране и след ветеринарни и зоотехнически процедури. Въпреки това, заедно с парентералното приложение, могат да се провеждат орални лечения, както и комбинирани лечения. Това може да намали появата на анемия.

На здрави и изостанали в растежа прасенца трябва да се дават допълнителни добавки с желязо.

На свинете се предписва и неоарсфенамин (новарсенол) - 15 - 45 mg на 1 kg живо тегло. Добри резултати дават препаратите с азидин и арсенова киселина. Симптоматични средства в зависимост от показанията.

Курсът на лечение е 3-4 седмици.

Рикетсиозата е група от остри векторни инфекциозни заболявания, причинени от рикетсии и характеризиращи се с развитие на генерализиран васкулит, интоксикация, увреждане на централната нервна система и специфични кожни обриви. Тази група не включва бартонелоза (доброкачествена лимфоретикулоза, болест на Карион, бациларна ангиоматоза, бациларен пурпурен хепатит) и ерлихиоза (треска Сенецу, моноцитна и гранулоцитна ерлихиоза).

Код по МКБ-10

A75 Тиф

A79 Други рикетсиозни заболявания

Епидемиология на рикетсиозите

Всички рикетсиозни заболявания се разделят на антропонози (тиф, рецидивиращ тиф) и природно-огнищни зоонози (други инфекции, причинени от рикетсии). В последния случай източник на инфекция са дребни гризачи, говеда и други животни, а носителят е кръвосмучещи членестоноги (кърлежи, бълхи и въшки).

Рикетсиите са широко разпространени заболявания, регистрирани на всички континенти. В развиващите се страни те представляват 15-25% от всички фебрилни заболявания с неизвестна етиология.

Патогенеза на рикетсиозите

Прониквайки през кожата, рикетсиите се размножават на мястото на проникване. При някои рикетсиози възниква локална възпалителна реакция с образуване на първичен афект. След това настъпва хематогенно разпространение на патогена, в резултат на което се развива генерализиран брадавичен васкулит (кожни обриви, увреждане на сърцето, мембраните и мозъчната субстанция с образуването на инфекциозно-токсичен синдром).

Симптоми на рикетсиозни заболявания

В повечето съвременни класификации се разграничават три групи рикетсиозни заболявания.

• Група тиф:
  • епидемичен тиф и неговата рецидивираща форма - болест на Brill (антропоноза, причинител - Rickettsia prowazekii Rocha-Lima,носители - въшки);
  • епидемичен (плъх) тиф (патоген Rickettsia mooseri,резервоар на патогена - плъхове и мишки, носители - бълхи);
  • Треска Цуцугамуши или японска речна треска (причинител - Rickettsia tsutsugamuchi,резервоар - гризачи и кърлежи, носители - кърлежи).
• Група петниста треска:
  • Петниста треска на Скалистите планини (причинена от Rickettsia rickettsii,резервоар - животни и птици, носители - кърлежи);
  • Марсилска или средиземноморска треска (патоген - Rickettsia conori,резервоар - кърлежи и кучета, носители - кърлежи);
  • Австралийска рикетсиоза, пренасяна от кърлежи, или северноавстралийски тиф, пренасян от кърлежи (патоген - Rickettsia australis,резервоар - дребни животни, носители - кърлежи);
  • тиф, пренасян от кърлежи в Северна Азия (патоген - Rickettsia sibirica,резервоар - гризачи и кърлежи, носители - кърлежи);
  • везикуларна или едра шарка, рикетсиоза (патоген - Рикетсия акарирезервоар - мишки, носители - кърлежи).
• Други рикетсиозни заболявания: Ку треска (патоген - Coxiella burneti,резервоар - много видове диви и домашни животни, кърлежи, вектори - кърлежи).

Диагностика на рикетсиозни заболявания

Клинична диагностика на рикетсиозите

Всички човешки рикетсиози са остри циклични заболявания (с изключение на Ку-треска, при която е възможно хронично протичане) с тежка интоксикация, характерни симптоми на увреждане на съдовата и централната нервна система и типична екзантема (с изключение на Ку-треска). Всяка рикетсиоза се характеризира със специфична клинична картина. По този начин симптомите на рикетсиоза, пренасяна от кърлежи, се появяват на 6-10-ия ден след ухапване от кърлеж и включват появата на първичен афект на мястото на засмукване на кърлежи, което е типична инокулативна краста („таче ноар“),и регионален лимфаденит.

Лабораторна диагностика на рикетсиозни заболявания

Лабораторната диагностика на рикетсиозата се състои в идентифициране на патогена и специфични антитела.

Изолирането на патогена е абсолютен диагностичен критерий. Рикетсиите се отглеждат в тъканни клетъчни култури. Те се изолират предимно от кръв, проби от биопсия (за предпочитане от зоната на инокулация на краста) или биомаса от акари. Работата с рикетсия е разрешена само в специално оборудвани лаборатории, които имат висока степен на защита, така че изолирането на патогена рядко се извършва (обикновено за научни цели).

Рикетсиалните инфекции се диагностицират с помощта на серологични методи: RIGA, RSK с рикетсиални антигени, RIF и RNIF, което ви позволява отделно да определяте IgM и IgG. Микроимунофлуоресценцията се счита за референтен метод. ELISA, която се използва за идентифициране на патогена, определяне на неговите антигени и специфични антитела, стана широко разпространена.

Досега Weil-Felix RA се използва въз основа на факта, че кръвният серум на пациенти с рикетсиоза е способен да аглутинира AC щамове, OX2 и OX3, Протей вулгарис.

Рикетсиозата е група от остри векторни инфекциозни заболявания, причинени от рикетсии и характеризиращи се с развитие на генерализиран васкулит, интоксикация, увреждане на централната нервна система и специфични кожни обриви.

Тази група не включва бартонелоза (доброкачествена лимфоретикулоза, болест на Карион, бациларна ангиоматоза, бациларен пурпурен хепатит) и ерлихиоза (треска Сенецу, моноцитна и гранулоцитна ерлихиоза).

Кодове по МКБ -10

A75. тиф.
A79.0. Други рикетсиози.

Етиология (причини) на рикетсиалните инфекции

Епидемиология на рикетсиозите

Всички рикетсиозни заболявания се разделят на антропонози (тиф, рецидивиращ тиф) и природно-огнищни зоонози (други инфекции, причинени от рикетсии). В последния случай източник на инфекция са дребни гризачи, говеда и други животни, а носителят е кръвосмучещи членестоноги (кърлежи, бълхи и въшки).

Рикетсиите са широко разпространени заболявания, регистрирани на всички континенти. В развиващите се страни те представляват 15–25% от всички фебрилни заболявания с неизвестна етиология, в Русия - не повече от 0,01% от всички инфекциозни заболявания.

Патогенеза на рикетсиозите

Прониквайки през кожата, рикетсиите се размножават на мястото на проникване. При някои рикетсиози възниква локална възпалителна реакция с образуване на първичен афект. След това настъпва хематогенно разпространение на патогена, в резултат на което се развива генерализиран брадавичен васкулит (кожни обриви, увреждане на сърцето, мембраните и мозъчната субстанция с образуването на инфекциозно-токсичен синдром).

Клинична картина (симптоми) на рикетсиозни инфекции

В повечето съвременни класификации се разграничават три групи рикетсиози.

Група тиф:
- епидемичен тиф и рецидивиращата му форма - болест на Brill (антропоноза, причинител - Rickettsia prowazekii Rocha-Lima, носители - въшки);
- епидемичен (плъх) тиф (причинител Rickettsia mooseri, резервоар на патогена - плъхове и мишки, носители - бълхи);
- Треска Tsutsugamushi, или японска речна треска (причинител - Rickettsia tsutsugamuchi, резервоар - гризачи и кърлежи, носители - кърлежи).
Група петниста треска:
- петниста треска на Скалистите планини (възбудител - Rickettsia rickettsii, резервоар - животни и птици, носители - кърлежи);
- Марсилска или средиземноморска треска (причинител - Rickettsia conori, резервоар - кърлежи и кучета, носители - кърлежи);
- австралийска рикетсиоза, пренасяна от кърлежи, или северноавстралийски тиф, пренасян от кърлежи (патоген - Rickettsia australis, резервоар - малки животни, носители - кърлежи);
- тиф, пренасян от кърлежи в Северна Азия (патоген - Rickettsia sibirica, резервоар - гризачи и кърлежи, носители - кърлежи);
- везикулозна или едра шарка, рикетсиоза (причинител - Rickettsia acari, резервоар - мишки, носители - кърлежи).
Други рикетсиози: Ку-треска (причинител - Coxiella burneti, резервоар - много видове диви и домашни животни, кърлежи, вектори - кърлежи).

Диагностика на рикетсиозни заболявания

Клинична диагностика на рикетсиозите

Всички човешки рикетсиози са остри циклични заболявания (с изключение на Ку-треска, при която е възможно хронично протичане) с тежка интоксикация, характерни симптоми на увреждане на съдовата и централната нервна система и типична екзантема (с изключение на Ку-треска). Всяка рикетсиоза се характеризира със специфична клинична картина. По този начин симптомите на рикетсиозата, пренасяна от кърлежи, се появяват 6-10 дни след ухапване от кърлеж и включват появата на първичен афект на мястото на засмукване на кърлежа, което е типична инокулативна краста ("tache noir") и регионален лимфаденит.

Лабораторна диагностика на рикетсиозни заболявания

Състои се от идентифициране на патогена и специфични антитела. Изолирането на патогена е абсолютен диагностичен критерий. Рикетсиите се отглеждат в тъканни клетъчни култури. Те се изолират предимно от кръв, проби от биопсия (за предпочитане от зоната на инокулация на краста) или биомаса от акари. Работата с рикетсия е разрешена само в специално оборудвани лаборатории, които имат висока степен на защита, така че изолирането на патогена рядко се извършва (обикновено за научни цели).

Рикетсиалните инфекции се диагностицират с помощта на серологични методи: RNGA, RSK с рикетсиални антигени, RIF и RNIF, което ви позволява да определяте отделно IgM и IgG. Микроимунофлуоресценцията се счита за референтен метод.

ELISA, която се използва за идентифициране на патогена, определяне на неговите антигени и специфични антитела, стана широко разпространена.

Досега се използва Weil-Felix RA въз основа на факта, че кръвният серум на пациенти с рикетсиоза е способен да аглутинира щамове OX 19, OX 2 и OX към Proteus vulgaris.

Лечение на рикетсиозни заболявания

Лечението на рикетсиалните инфекции се основава на етиотропна терапия. Лекарствата на избор са тетрациклин (1,2–2 g/ден в четири приема) и доксициклин (0,1–0,2 g/ден еднократно). Възможно е да се използва хлорамфеникол в доза от 2 g/ден в четири приема. Антибиотичната терапия се провежда до 2-3 дни след нормализиране на температурата.

Прогноза

При навременно пълно етиотропно лечение на рикетсиални инфекции в по-голямата част от случаите настъпва пълно възстановяване. В случай на злокачествени рикетсиози, например, тиф, пренасян от въшки (епидемичен), петниста треска на Скалистите планини и треска цуцугамуши, при липса на специфично лечение (антибактериална терапия), смъртта настъпва в 5–20% от случаите. При Ку-треска процесът може да хронифицира.

Предотвратяване

Профилактика на рикетсиоза: борба с вектори (например въшки при тиф), дезинсекция с помощта на съвременни ефективни инсектициди, използване на репеленти, защитни костюми (в случай на атаки от кърлежи).

Забранява се консумацията на мляко и месо от болни и принудително заклани животни. В случай на нападение от кърлежи или хора, пребиваващи в ендемично огнище, се препоръчва използването на доксициклин и азитромицин за спешна профилактика.

При някои рикетсиози (тиф, Ку-треска) се провежда активна имунизация.