Аспирационен метод за микробиологично вземане на проби от въздух. Планиране и създаване на безопасни продукти. Диагностика на вирусни инфекции

Микроорганизмите са малки, предимно едноклетъчни същества, които са широко разпространени в природата. Те се намират във всички среди (въздух, почва, вода), в човешкото и животинското тяло и в растенията.

Качественото разнообразие и броят на микроорганизмите зависи преди всичко от хранителните съставки. Въпреки това, влажността, температурата, проветряването, излагането на слънчева светлина и други фактори също са важни.

Методи за санитарно микробиологично изследване естествени средиви позволяват да идентифицирате наличието на патогенни микроорганизми, да определите тяхното количество и в съответствие с получените резултати да разработите мерки за елиминиране или предотвратяване инфекциозни заболявания. В допълнение, количественото отчитане е необходимо за моделиране на екосистеми и разработване на принципи за управление на природни процеси. Нека разгледаме по-нататък какви са те.

Почвата

Учените го смятат за един от възможните пътища за предаване на инфекциозни патологии. Патогенните микроорганизми проникват в почвата със секретите на болни хора или животни. Някои от тях, по-специално тези, носещи спори, могат да оцелеят в земята дълго време (понякога няколко десетилетия). Патогени като тези навлизат в почвата опасни инфекции, като тетанус, антракс, ботулизъм и др. Методи за санитарно и микробиологично изследване на почватави позволяват да определите „микробното число“ (броя на микроорганизмите в грам почва), както и коли индекса (броя на Е. coli).

Анализ на почвата: обща информация

ДА СЕ методи за микробиологично изследване на почватаНа първо място трябва да се има предвид директната микроскопия и засяването на плътни микроорганизми.Популациите на микроорганизмите и техните групи, обитаващи почвата, се различават по таксономично положение и екологични функции. В науката те се обединяват под общото понятие почвена биота. Почвата е местообитание за огромен брой микроорганизми. В грам почва има от 1 до 10 милиарда техни клетки. В тази среда активно се извършва разграждането на органични вещества с участието на различни сапрофитни микроорганизми.

Микроскопски метод на микробиологично изследване: етапи

Анализът на околната среда започва с вземане на проби. За да направите това, използвайте нож, който предварително е почистен и избърсан с алкохол (можете да използвате лопата). След това се приготвя пробата. Следващата стъпка е преброяването на клетките върху оцветените петна. Нека разгледаме всеки етап поотделно.

Вземане на проби

При анализиране на обработваема почва по правило се вземат проби от дълбочината на целия слой. Първо се отстраняват 2-3 см от горната част на почвата, тъй като в нея може да има чужда микрофлора. След това се вземат монолити от изследваната площ на почвата. Дължината на всяка от тях трябва да съответства на дебелината на слоя, от който ще се вземе пробата.

На парцел от 100-200 кв. m Вземат се 7-10 проби. Всяка тежест е около 0,5 кг. Пробите трябва да се смесят старателно в торбата. След това се взема средна проба с тегло приблизително 1 kg. Трябва да се постави в пергаментова (стерилна) торбичка, поставена в чанта от плат. Пробата се съхранява в хладилник до незабавен анализ.

Подготовка за изследването

Смесената почва се изсипва върху сухо стъкло. Първо трябва да се избърше с алкохол и да се изгори над горелка. С помощта на шпатула почвата се смесва добре и се разстила на равномерен слой. Наложително е да се премахнат корени и други чужди елементи. За това се използват пинсети. Преди работа пинсетите и шпатулата се нагряват над горелка и се охлаждат.

Малки порции се избират от различни области на почвата, разпределени върху стъклото. Претеглят се в порцеланова чаша на техническа везна. Задължителен етапмикроскопичен микробиологичен метод на изследванее специална обработка на проби. Необходимо е предварително да подготвите 2 стерилни колби. Вместимостта им не трябва да надвишава 250 мл. В една от колбите се наливат 100 мл чешмяна вода. Вземете от него 0,4-0,8 ml течност и навлажнете проба от почвата до пастообразно състояние. Сместа трябва да се разтрива с пръст или гумен пестик за 5 минути.

Използвайки вода от първата колба, почвената маса се прехвърля в празна колба. След това отново се втрива. След това масата се прехвърля в колбата близо до пламъка на горелката. Контейнерът с почвената суспензия се разклаща на люлеещ се стол за 5 минути. След това се оставя да се утаи за около 30 s. Това е необходимо за утаяване на големи частици. След половин минута масата се използва за приготвяне на лекарството.

Преброяване на клетки върху фиксирани цитонамазки

Извършва се директно микроскопско изследване на почвата с помощта на микробиологичен метод на изследване, разработен от Winogradsky. В определен обем от приготвената суспензия се изчислява броят на клетките на микроорганизма. Изследването на фиксирани петна ви позволява да съхранявате препарати за дълго време и да извършвате изчисления по всяко удобно време.

Приготвянето на лекарството се извършва, както следва. Определен обем суспензия (обикновено 0,02-0,05 ml) се нанася с помощта на микропипета върху предметно стъкло. Към него се добавя капка разтвор на агар-агар (смес от полизахариди агаропектин и агароза, извлечени от черноморски кафяви и червени водорасли), бързо се разбърква и се разпределя на площ от 4-6 квадратни метра. см. Намазката се изсушава на въздух и се фиксира за 20-30 минути. алкохол (96%). След това лекарството се навлажнява с дестилирана вода и се поставя в разтвор на карболов еритрозин за 20-30 минути.

След боядисване се измива и суши на въздух. Преброяването на клетките се извършва с имерсионен обектив.

Засяване върху плътни среди

Микроскопичен микробиологични методи за изследванепозволяват идентифицирането на голям брой микроорганизми. Но въпреки засяването, той се счита за най-често срещания на практика. Същността му се състои в засяване на обем от препарата (почвена суспензия) в петриево блюдо върху твърда среда.

Това микробиологичен метод на изследванедава възможност да се вземе предвид не само количеството, но и груповият, а в някои случаи и видовият състав на микроскопичната флора. Броят на колониите обикновено се брои от дъното на петриево блюдо в пропусната светлина. Върху изчислената площ се поставя точка с маркер или мастило.

Анализ на водата

Микрофлората на водно тяло, като правило, отразява микробния състав на почвата около него. В това отношение методи за санитарно-микробиологично изследване на водата и почватаса от особено практическо значение при изследване на състоянието на определена екосистема. Сладководните тела обикновено съдържат коки, пръчковидни бактерии.

Анаеробите се намират в малки количества във водата. По правило те се размножават на дъното на резервоари, в тиня, участвайки в процесите на пречистване. Микрофлората на океаните и моретата е представена главно от солелюбиви (халофилни) бактерии.

Във водата на артезианските кладенци практически няма микроорганизми. Това се дължи на филтриращата способност на почвения слой.

Общоприето методи за микробиологично изследване на водатаРазглеждат се определянето на микробния брой и коли титъра или коли индекса. Първият индикатор характеризира броя на бактериите в 1 ml течност. Коли индексът е броят на Е. coli, присъстващи в литър вода, а коли титърът е минималното количество или максималното разреждане на течността, в което те все още могат да бъдат открити.

Определяне на микробно число

Този метод за санитарно микробиологично изследване на водата е както следва. В 1 ml вода се определя броят на факултативните анаероби и мезофилните (междинни) аероби, способни да растат върху месопептонен агар (основната хранителна среда) при 37 градуса. през целия ден образуват колонии, видими при увеличение от 2-5 r. или с просто око.

Ключовият етап от това метод за микробиологично изследване на водатасе сее. От всяка проба се инокулират поне 2 различни обема. Добавете 1-0,1 ml чиста течност и 0,01-0,001 ml замърсена течност във всяка чаша. За инокулация от 0,1 ml или по-малко, течността се разрежда с дестилирана (стерилна) вода. Последователно се приготвят десетократни разреждания. По 1 ml от всяка от тях се добавя към две петриеви панички.

Разрежданията се пълнят с хранителен агар. Първо трябва да се разтопи и охлади до 45 градуса. След активно смесване средата се оставя да престои хоризонтална повърхностза закаляване. На 37 град. културите се отглеждат през целия ден. Разглеждан метод за микробиологично изследване на водатави позволява да вземете предвид резултатите от тези плочи, където броят на колониите е в диапазона от 30 до 300.

Въздух

Счита се за транзитна среда за микроорганизми. Основен методи за микробиологично изследване на въздухаса седиментация (слягане) и аспирация.

Микрофлората на въздушната среда условно се разделя на променлива и постоянна. Първата група включва дрожди, пигмент-образуващи коки, спороносни бацили, пръчки и други микроорганизми, които са устойчиви на изсушаване и излагане на светлина. Представители на променлива микрофлора, проникващи във въздуха от обичайното си местообитание, не запазват дълго жизнеспособността си.

Във въздуха на големите градове има много повече микроорганизми, отколкото в въздушна средаселски райони. Над моретата и горите има много малко бактерии. Валежи: сняг и дъжд помагат за пречистване на въздуха. В затворените пространства има много повече микроби, отколкото в откритите пространства. Броят им се увеличава през зимата при липса на редовно проветряване.

Утаяване

Това микробиологичен метод за изследване в микробиологиятасмятан за най-простият. Основава се на утаяването на капчици и частици върху повърхността на агар в отворено петриево блюдо под въздействието на гравитацията. Методът на утаяване не определя точно броя на бактериите във въздуха. Факт е, че е доста трудно да се уловят малки фракции прахови частици и бактериални капчици върху отворена чаша. На повърхността се задържат предимно големи частици.

Този метод не се използва при анализ на атмосферния въздух. Тази среда се характеризира с големи колебания в скоростта на движение въздушно течение. Утаяването обаче може да се използва при липса на по-модерни инструменти или източник на електричество.

Микробният брой се определя по метода на Омелянски. Според нея за 5 минути върху агар от 100 кв.м. cm броят на отложените бактерии, присъстващи в 10 литра въздух.

Заповед 535 "За унифицирането на методите за микробиологично изследване"

Струва си да се каже, че микробиологичното изследване в този случай обикновено е придружено от определени проблеми. Те се дължат на факта, че в долните части на репродуктивния тракт обикновено има разнообразна микрофлора, която се променя в различни възрастови периоди. За да се повиши ефективността на изследването, са разработени единни правила.

Диагностика на вирусни инфекции

Извършва се чрез методи за идентифициране на РНК и ДНК патогени. Те се основават предимно на определяне на нуклеотидни последователности в патологичен материал. За това се използват молекулярни сонди. Те са изкуствено получени нуклеинови киселини, комплементарни на вирусните киселини, белязани с радиоактивен етикет или биотин.

Особеността на метода е многократното копиране на специфичен ДНК фрагмент, който включва няколкостотин (или десетки) нуклеотидни двойки. Механизмът на репликация (копиране) е, че завършването може да започне само в определени блокове. За създаването им се използват грундове. Те са синтезирани олигонуклеотиди.

PCR диагностика (полимераза верижна реакция) е лесен за изпълнение. Този метод ви позволява бързо да получите резултати, като използвате малък обем патологичен материал. С помощта на PCR диагностика се откриват остри, хронични и латентни (скрити) инфекции.

За чувствителност този метод се счита за по-предпочитан. Понастоящем обаче тестовите системи не са достатъчно надеждни, така че PCR диагностиката не може напълно да замени традиционните методи.

Фиг.92. Устройството на Кротов (общ изглед).
6811‘**8

Фиг.91. Диаграма на устройството на Кротов, ([-цилиндрично тяло; 2-основа на тялото; 3-електродвигател; 4-центробежен вентилатор; 5-осемлопатково работно колело; 6-диск; 7-пружина; 8-блюдо на Петри; 9-капак на устройството ;10-on - флип брави;11-плексигласови дискове;T2-клиновиден слот;13-разцепен пръстен;14-фитинг с диафрагма;15-изходна тръба.
По-напреднали са методите за инструментално изследване на микрофлората на въздуха с помощта на апарат Кротов и импактори (фиг. 91, 92, 93). Устройството на Кротов е цилиндрично тяло, затворено отгоре с подвижен капак, под което е монтирано петриево блюдо с MPA върху въртящ се диск, вътре в цилиндъра е поставен електрически мотор, последният се върти със скорост 4-5 хил. обороти в минута, осигурява засмукване на въздух през плексигласовия капак, имащ клиновиден прорез или отвори. В резултат на турбулентния въздушен поток вътре в цилиндъра се върти диск с петриево блюдо, което осигурява равномерно разпределение на микрофлората по цялата повърхност на хранителната среда, а аерозолните частици от трите фази се засмукват активно. С помощта на ротаметър, който е предназначен да определя количеството засмукан въздух, през устройството се пропускат от 50 до 200 литра въздух. След вземане на пробата чашите се затварят и се поставят в термостат при 37° за 24 часа и след това за 24 часа при стайна температура. Чрез преброяване на броя на порасналите колонии и познаване на обема на преминалия въздух е лесно да се изчисли микробният брой.
Фиг.93. Схема на четиристепенен ударен елемент May (виж описанието в текста).

Импакторите са устройства, оборудвани с тръби с конични дюзи - каскади, през които се засмуква въздух. Пред тесния край на всяка дюза се поставят приемни пластини, които представляват предметни стъкла, смазани с глицерин и физиологичен разтвор. Изтича ли въздух през тръбите с дюзи? удари приемните плочи, върху тях се установяват микроорганизми. След като се вземе проба от въздух, предметните стъкла се отстраняват от импакторите и утаените микроби се изследват или чрез микроскопия, или стъклото се измива с физиологичен разтвор, от който след това микробите се инокулират върху хранителна среда.
Методите за филтриране на въздуха се основават на филтриране или аспирация (изсмукване) през специални филтри, течности, прахове и др., Които адсорбират микрофлората.
Филтрите, използвани за анализ на въздуха, могат да бъдат неразтворими - памук, хартия, мембрана, милипор и разтворими - глицерин-желатин, натриев алгинат, захар
і
прахове
Филтърна плоча, изработена от подходящ материал, се поставя в апарат на Seitz и определено количество въздух се засмуква през филтъра с помощта на вакуумна помпа. След това филтърната плоча се отстранява, потапя се във физиологичен разтвор и се разклаща, микроорганизмите се десорбират в разтвора и от него се правят количествени инокулации върху хранителни среди. Ако като филтри се използват разтворими материали, след засмукване на въздуха те се разтварят в стерилен физиологичен разтвор.
Въздухът може да се засмуква през стерилна течност (вода, физиологичен разтвор, месен пептонен бульон и др.) С помощта на устройството на Дяконов (фиг. 94)
(Г
T
VT
Фиг.94. Устройството на Дяконов

Това устройство се състои от стъклен цилиндър с вместимост 100-200 ml, в херметически затворена запушалка са поставени две стъклени тръби, дългата входна тръба завършва в самото дъно, а изходната (къса) тръба завършва директно под запушалката. При изследване на въздуха в апарата се наливат 10-20 ml вода, поставят се стъклени перли и се стерилизират. След стерилизация изходящата тръба се свързва с вакуумна помпа, към която е прикрепен реометър за измерване на обема на въздуха, преминаващ през апарата, и се засмуква въздух в количество от 100-200 литра. След като изключите устройството, вземете 1 ml вода, през която е филтриран въздухът, добавете я в празна стерилна петриева паничка и налейте 15 ml разтопен MPA (+ 45°). Инокулираните съдове се инкубират в термостат при 37 ° в продължение на 1-2 дни, след което се преброява броят на порасналите колонии и, като се знае обемът на филтрирания въздух, се изчислява микробното число.
Наличието на санитарно-показателни микроорганизми се определя във въздуха на затворените помещения, както и във водата и почвата.
Те се разпознават като Streptococcus viridans (viridans streptococcus) (тип L.), Str.haemolyticus (хемолитичен стрептокок Staphylococcus aureus, който има хемолитични свойства. Наличието на тези микроби във въздуха показва замърсяване на горната му микрофлора респираторен трактчовек. Броят на санитарно-показателните микроорганизми, съдържащи
ОТНОСНО
съдържащ се в I m (1000 литра) въздух се нарича стрептококов индекс.
За идентифициране на санитарно-показателни въздушни микроби се използват всички описани по-горе методи, но инокулацията се извършва върху селективна и диференциална диагностична среда, която позволява бързо откриване на тези бактерии и отделянето им от други представители на въздушната микрофлора. Такива среди включват кръвен агар, върху който хемолитични стафилококи и стрептококи дават зона на хемолиза (разрушаване на червени кръвни клетки), жълт солен агар и др.
Резултатите от оценката на въздуха в жилищните помещения през зимата и лятото са представени в таблица 10.
Таблица 10
Критерии за санитарна оценка на въздуха в жилищни помещения
ОТНОСНО
(брой микроорганизми в първия m въздух) Оценка на въздуха Летен период Зимен период Общо озеленяване и микрохемолитични органи- стрептококи Общо
микро-
орг
viridans и хемолитични стрептококи Чисти 1500 16 4500 36 Замърсени.... 2500 36 7000 124 Цел на работата: да се определи микробното число на въздуха и съдържанието на санитарно-показателни микроорганизми.
Материали: петриеви панички с MPA, пивна мъст и кръвен агар, апарат на Кротов.
Напредък. I. Определете микробния брой, като използвате метода на Кох: оставете петриеви панички с MPA, кръвен агар и мъст агар отворени в различни части на лабораторията за 5 минути. Затворете чашите и ги поставете в термостат при 37°C за 48 часа. Пребройте броя на израсналите колонии, определете микробния брой на въздуха (вижте по-горе).
Определяне на микробното число и броя на санитарно-показателните микроорганизми с помощта на апарат на Кротов. Използвайте MPA, кръвен агар и плаки с мъст агар. За всеки
чаши, пропускат 200 литра въздух със скорост 20-30 л/мин. След вземане на проби чашите се затварят и се поставят в термостат при 37° за 48 часа. Пребройте порасналите колонии, микроскопирайте ги, пригответе петна и ги оцветете по Грам. Обърнете внимание на наличието на зони на хемолиза върху кръвния агар.
Сравнете резултатите, получени по двата метода. Оценете чистотата на въздуха. Представете резултатите под формата на таблица.
Здравна оценка на въздуха
Среден Брой колонии в плаката при определяне
Метод на Кох в апарата на Кротов
IPA
кръвен агар пивна мъст агар
Микробно число
Броят на зелените и
хемолитичен
стрептококи
Литература
Лабинская А.С. Микробиология с технология микробиологични изследвания. М., 1972.
Перети Л.Г. Значението на нормалната микрофлора за човешкото тяло. Медгиз., 1955.
P i t k i n K.D., Кривошеин V.S. Микробиология.М. ,1980. Санитарна микробиология. Изд. Г. П. Калина и Г. К. Чистович. М., 1969.
Теп В.И. Санитарна микробиология. 1958 г.
Т и м а к о в В.Д. микробиология. М., 1973. .

Утаяване- повечето стар метод, се използва широко поради своята простота и достъпност, но е неточен. Методът е предложен от R. Koch и се състои в способността на микроорганизмите под въздействието на гравитацията и под въздействието на движението на въздуха (заедно с прахови частици и аерозолни капчици) да се установят на повърхността на хранителната среда в отворени петриеви панички. Чашите се монтират в точките за вземане на проби върху хоризонтална повърхност. При определяне на общото микробно замърсяване плочките с месопептонен агар се оставят отворени за 5-10 минути или повече в зависимост от степента на предполагаемо бактериално замърсяване. За идентифициране на санитарно-показателни микроби използвайте среда Garro или Turzhetsky (за откриване на стрептококи), млечно-солев или жълтъчно-солев агар (за откриване на стафилококи), пивна агар или среда на Sabouraud (за откриване на дрожди и гъбички). При определяне на санитарно показателни микроорганизми чашките се оставят отворени за 40-60 минути.

В края на експозицията всички съдове се затварят, поставят се в термостат за едно денонощие за култивиране при температура, оптимална за развитието на изолирания микроорганизъм, след което (ако изследването го изисква) се оставят за 48 часа на стайна температура за образуване на пигмент от микроорганизми, образуващи пигмент.

Методът на утаяване има редица недостатъци: само груби фракции от аерозола се утаяват на повърхността на средата; колониите често се образуват не от една клетка, а от група микроби; Само част от въздушната микрофлора се развива върху използваните хранителни среди. Освен това този метод е напълно неподходящ за изследване на бактериалното замърсяване на атмосферния въздух.

По-напредналите методи са аспирация, въз основа на принудителното отлагане на микроорганизми от въздуха върху повърхността на плътна хранителна среда или в улавяне на течност (месен пептонен бульон, буферен разтвор, изотоничен разтвор на натриев хлорид и др.). На практика санитарно обслужванеПри вземане на аспирационни проби, апарат Кротов, капан за бактерии Rechmensky, устройство за вземане на проби от въздух (POV-1), аерозолен бактериологичен пробоотборник (PAB-1), бактериално-вирусен електроутаител (BVEP-1), устройство Kiktenko, Andersen Използват се апарати , Дяконов, MB и др.. За изследване на атмосферата могат да се използват и мембранни филтри № 4, през които се засмуква въздух с помощта на апарат Seitz. Голямото разнообразие от инструменти показва липсата на универсален апарат и по-голяма или по-малка степен на тяхното несъвършенство.

Устройството на Кротов.В момента това устройство се използва широко при изследване на въздуха в затворени помещения и се предлага в лаборатории

Принципът на действие на апарата на Кротов (фиг. 22) се основава на факта, че въздухът, засмукан през клинообразен прорез в капака на апарата, удря повърхността на хранителната среда, докато частиците прах и аерозол се задържат към средата, а с тях и микроорганизмите във въздуха. Петри с тънък слойСредата се фиксира върху въртяща се маса на апарата, което осигурява равномерно разпределение на бактериите по нейната повърхност. Устройството работи от електрическата мрежа. След вземане на проба с определена експозиция чашата се изважда, покрива се с капак и се поставя в термостат за 48 часа. Обикновено вземането на проби се извършва при скорост 20-25 l/min за 5 минути. Така се определя флората в 100-125 литра въздух. При откриване на санитарно-показателни микроорганизми обемът на изследвания въздух се увеличава до 250 литра.

Преди вземане на проба от въздух приемникът се напълва с 3-5 ml събирателна течност (вода, месно-пептонен бульон, изотоничен разтвор на натриев хлорид).

Устройството на РечменскиРаботи на принципа на спрея: когато въздухът преминава през тесния отвор на фунията, течността от приемника през капиляр се издига в цилиндъра под формата на капчици. Капките течност се раздробяват допълнително, удряйки стъклена шпатула и стените на съда, създавайки облак от малки капчици, върху които се адсорбират микроорганизми във въздуха. Течни капки, наситени с бактерии, се вливат в приемника и след това се разпръскват отново, което осигурява максимално улавяне на бактериите от въздуха. По време на работа уредът се поставя под ъгъл 15-25°, което осигурява изтичане на събирателната течност в приемника. Скоростта на вземане на проби от въздуха чрез апарата на Речменски е 10-20 l/min. В края на работата течността се взема от приемника със стерилна пипета и се инокулира (0,2 ml всяка) върху повърхността на твърда хранителна среда. Предимството на капана за бактерии Rechmensky е висока ефективностулавяне на бактериални аерозоли. Недостатъците на устройството са трудността на производството му, нестандартността на получените устройства, тяхната голяма крехкост и относително ниска производителност.

Големите предимства са серийното производство на този уред (което направи възможно оборудването на лаборатории с него), неговата преносимост и по-висока производителност (20-25 l/min). Колбата на апарата, в която се поставя събирателната течност, е изработена от топлоустойчив плексиглас, капилярката е от неръждаема стомана. Бутилка със спрей е вградена в колбата, причинявайки дисперсия на улавящата течност при засмукване на въздух. Такова устройство дава възможност за лесно почистване и стерилизиране на колбата с диспергиращо устройство чрез просто кипене в продължение на 30 минути (автоклавирането е неприемливо, тъй като причинява деформация на цилиндъра).

Преди да вземете проби от въздух, добавете 5-10 ml събирателна течност (най-често бульон от месен екстракт) в колбата и я нагласете под ъгъл от 10 °, което осигурява естествено оттичане на течността след диспергиране. Въздухът, преминаващ през колбата и спрей бутилката, причинява образуването на малки капчици улавяща течност, върху която се утаяват микроорганизми. Устройството POV-1 се използва за изследване на въздуха в затворени помещения за общо микробно замърсяване, за откриване на патогенни бактерии (например Mycobacterium tuberculosis) и респираторни вируси във въздуха на болничните отделения.

Бактериологичният пробоотборник Typhoon P-40 (M) е предназначен за определяне на общото бактериално замърсяване на въздуха с последващо изолиране на различни патогенни и санитарно-показателни микроорганизми.

Инокулацията на микроорганизми от околния въздух се извършва през калибриран отвор в отделението за наблюдение върху петриево блюдо с хранителна среда, монтирано върху въртяща се маса на устройството. Въздухът се изпомпва с помощта на бактериологична ротационна пневматична помпа, вградена в пробоотборника Typhoon R-40 (M); монтажът на въртяща се маса е универсален, което позволява използването на петриеви панички с различни модификации.

В бактериологичния пробоотборник "Тайфун" Р- 40 (M) осигурява херметичност на вътрешната камера и лесен достъп до тестовата среда.

Скоростта на въртене на чашата се настройва плавно с помощта на регулатора на скоростта, разположен на предния панел на пробоотборника (фиг. 23) “Тайфун” R-40 (M).

Аерозолен бактериологичен пробоотборник (PAB-1).Механизмът на действие на PAB-1 се основава на принципа на електростатично отлагане на аерозолни частици (и, следователно, микроорганизми) от въздуха, когато той преминава през устройство, в което тези частици получават електрически заряд и се отлагат върху електроди с противоположен знак. Електродите за събиране на аерозоли се поставят в хоризонтално положение метални палетис твърда среда в петриеви панички или течна хранителна среда (15-20 ml). Уредът е преносим с висока производителност 150-250 л/мин, т.е. за 1 час можете да вземете 5-6 m3 въздух. Препоръчва се да се използва за изследване на големи обеми въздух при откриване на опортюнистични и патогенни микроорганизми, например при идентифициране на патогени на нозокомиални инфекции (Pseudomonas aeruginosa. Staph, aureus и др.) Във въздуха на болничните стаи, определяне на салмонела и ешерихия в атмосферния въздух в зони за разпръскване при напояване на селскостопански площи с отпадъчни води.

Бактериално-вирусен електроутаител (BVEP-1).Устройството се основава на аспирационно-йонизационен принцип на работа. BVEP-1 се състои от камера за утаяване, в която са монтирани електроди: отрицателен под формата на водеща тръба, през която влиза въздух (и аерозолните частици съответно са заредени отрицателно), и положителен, върху който се установяват бактерии.

MB устройство.Това устройство служи не само за определяне на общото микробно замърсяване, но и за вземане на проби от въздух с аерозолни частици с различни размери. Устройството MB е изградено на принципа на „сито” и представлява цилиндър, разделен на 6 хоризонтални ивици, върху всяка от които са поставени петриеви панички с МРА. Въздухът се засмуква, като се започне от най-горната степен, в чиято плоча са най-големите отвори, а колкото по-ниска е степента, толкова по-малки са отворите (през последните преминават само фини фракции въздушен аерозол). Устройството е проектирано да улавя аерозолни частици с размер над 1 микрон при скорост на вземане на проби от въздуха 30 l/min. Намаляването на броя на отворите осигурява по-равномерно разпределение на аерозола от въздуха в хранителната среда. За да уловите още по-малки аерозолни частици, можете да добавите допълнителен филтър, изработен от филтърен материал AFA.

При използване на някое от изброените устройства получените резултати са приблизителни, но дават по-правилна оценка на замърсяването на въздуха в сравнение с метода на утаяване. Тъй като вземането на проби и санитарно-микробиологичните изследвания на въздуха не се регулират от GOST, всяко устройство може да се използва за оценка на бактериалното замърсяване на въздуха. В много случаи вземането на проби се комбинира с етапа на инокулация.

За намаляване на броя на микроорганизмите във въздуха на затворените помещения се използват следните средства: а) химически - обработка с озон, азотен диоксид, пръскане с млечна киселина, б) механични - преминаване на въздуха през специални филтри, в) физически - ултравиолетови. облъчване.

1.1 Общи положения.
Организацията трябва да планира и развива процесите, необходими за създаване на безопасни продукти.
Организацията изпълнява, изпълнява и осигурява ефективността на планираните дейности и всички промени в тях. Това включва плана за управление на безопасността, както и оперативния план за управление на безопасността и/или плана за НАССР.
1.2Основни програми (BPR).
1.2.1 Организацията трябва да създаде, внедри и поддържа основни програми (BP) за управление на:
а) вероятността от въвеждане на фактори, причиняващи опасност за хранителния продукт, в продукта чрез работната среда,
б) биологично, химическо и физическо замърсяване на продукта(ите), включително кръстосано замърсяване между продуктите, и
в) нива на опасности в продукта и неговата среда на обработка.
1.2.2 BDP трябва:
а) отговаря на нуждите на организацията във връзка с безопасността на храните,
б) да са подходящи за мащаба и вида на производството и естеството на произвежданите и/или преработените продукти,
в) да бъдат вградени в мрежата вътрешна системапроизводство, като програми, прилагани универсално, или като програми, прилагани към конкретен продукт или производствена линия, и
г) да бъдат одобрени от групата по безопасност на храните.
Организацията трябва да идентифицира законовите и правните изисквания, свързани с горното.
1.2.3 При избора и/или установяването на PBP, организацията трябва да вземе предвид и използва съответната информация [напр. законови и законови изисквания, изисквания на клиентите, признати насоки, принципи (Кодекс) на Комисията на Codex Alimentarius, кодекси на практиката, национални, международни или индустриални стандарти ].
ЗАБЕЛЕЖКА. Приложение C предоставя списък на съответните публикации на Codex.
При установяването на тези програми организацията трябва да вземе предвид следното:
а) проектирането и оформлението на сградите и свързаните с тях услуги;
г) оформление на помещенията, включително работни места и помощни зони за работниците;
в) доставки на въздух, вода, електричество и други комунални услуги;
г) помощни услуги, включително управление на отпадъци и отпадъчни води;
е) годност на оборудването и неговата достъпност за почистване, поддръжка и профилактика;
f) управление на закупени материали (например: суровини, съставки, химикали и опаковки), доставка (например: вода, въздух, пара и лед), изхвърляне (например: отпадъци и отпадъчни води) и обработка на продукта (например : съхранение и транспорт);
ж) мерки за предотвратяване на кръстосано замърсяване;
з) почистване и хигиенизиране;
i) борба с вредителите;
й) хигиена на персонала;
k) други съответни аспекти.
Трябва да се планира проверка на FDP (вижте 1.8) и FBP трябва да бъде модифициран, ако е необходимо (вижте 1.1). Трябва да се поддържат записи за проверки и модификации.
Документите трябва да описват как се управляват дейностите, включени във финансовия отчет.
1.3 Предварителни стъпки за анализ на опасностите.
1.3.1 Общи положения.
Цялата информация, необходима за извършване на анализ на опасността, трябва да бъде събрана, поддържана, актуализирана и документирана. Записите трябва да се пазят.
1.3.2 Група за безопасност на храните.
Трябва да се назначи екип по безопасност на храните.
Екипът по безопасност на храните трябва да има мултидисциплинарни знания и опит в разработването и прилагането на система за безопасност на храните. Това включва, но не се ограничава до познания за продукта, процесите, оборудването и опасностите при храните на организацията в обхвата на системата за безопасност на храните.
Трябва да се поддържат записи, за да се докаже, че групата има необходимите знания и опит (вижте 6.2.2).
1.3.3 Характеристики на продукта.
1.3.3.1 Суровини, съставки и материали в контакт с продуктите.
Всички суровини, съставки и материали в контакт с продуктите трябва да бъдат документирани до степента, необходима за извършване на анализа на опасността (вижте 1.4), включително следното, ако е приложимо:
а) биологични, химични и физически характеристики,
б) състава на съставките на рецептата, включително добавки и технологични помощни средства,
в) произход,
г) производствен метод,
е) методи за опаковане и доставка,
е) условия на съхранение и срок на годност,
ж) подготовка и/или обработка преди употреба или обработка,
з) критерии за приемане, свързани с безопасността на храните или спецификации на закупените материали и съставки според предназначението им.
Организацията трябва да идентифицира законовите и правните изисквания за безопасност на храните, свързани с горното.

1.3.3.2 Характеристики на крайния продукт.
Характеристиките на крайните продукти се документират до степента, необходима за подкрепа на анализа на опасността (вижте 1.4), включително следната информация, ако е приложимо:
а) име на продукта или друга идентификация,
б) състав,
в) биологични, химични и физични характеристики, свързани с безопасността на храните,
г) установен срок на годност и условия на съхранение,
д) опаковка,
е) етикетиране за безопасност на храните и/или инструкции за боравене, приготвяне и употреба,
ж) метод(и) на разпространение.
Организацията трябва да идентифицира законовите и правните изисквания за безопасност на храните, свързани с горното.
Описанията трябва да бъдат актуализирани, включително, ако е необходимо, разпоредбите на параграф 1.1.
1.3.4 Употреба по предназначение.
Предвидената употреба, разумно очакваното боравене с крайния продукт и всяко непреднамерено, но разумно предвидимо неправилно боравене и злоупотреба с крайния продукт трябва да бъдат прегледани и документирани до степента, в която може да се извърши анализ на опасността (вижте 1.4.).
Потребителските групи и, когато е уместно, потребителските групи трябва да бъдат идентифицирани за всеки продукт и трябва да се вземат предвид особено уязвимите потребителски групи към определени опасности.
Описанията трябва да бъдат актуализирани, включително, ако е необходимо, разпоредбите на параграф 1.1.
1.3.5 Диаграми на последователност, стъпки на процеса и контроли.
1.3.5.1 Диаграми на последователност.
Диаграмите на потока трябва да бъдат изготвени за категориите продукти или процеси, обхванати от системата за управление на безопасността на храните. Блок-диаграмите трябва да формират основата за оценка на потенциалната поява, увеличаване или въвеждане на опасности за храните.
Диаграмите трябва да са ясни, точни и достатъчно подробни.
Диаграмите на последователността трябва да включват следното, ако е приложимо:
а) последователността и взаимодействието на всички етапи в производството,
б) всякакви процеси, извършвани от трети страни и работа на подизпълнители,
в) където се произвеждат суровини, съставки и междинни продукти,
г) когато се извършва преработка и повторна употреба,
е) когато крайни или междинни продукти, както и странични продукти и отпадъци се освобождават или обезвреждат,
В съответствие с параграф 1.8 екипът по безопасност на храните трябва да провери точността на текущата диаграма на място. Валидираните диаграми на последователности трябва да се поддържат като записи.
1.3.5.2 Описание на стъпките на процеса и контролите.
Съществуващите контроли, параметрите на процеса и/или прецизността, с която се извършват, или процедурите, засягащи безопасността на храните, трябва да бъдат описани до степента, необходима за анализа на опасността (вижте 1.4).
Трябва също да бъдат описани външни изисквания (напр. законодатели или клиенти), които могат да повлияят на избора и точността на контролните мерки.
Описанията трябва да бъдат актуализирани, включително, ако е необходимо, разпоредбите на параграф 1.1.
1.4 Анализ на опасностите.
1.4.1 Общи положения.
Екипът по безопасност на храните трябва да извърши анализ на опасностите, за да определи кои опасности трябва да бъдат контролирани, степента на контрол, за да се гарантира безопасността на храните, и какъв набор от контроли е необходим.
1.4.2 Идентифициране на опасностите и установяване на приемливи нива.
1.4.2.1 Всички опасности, които е разумно вероятно да възникнат в зависимост от вида на продукта, вида на процеса и действителното производствени помещения, трябва да бъдат идентифицирани и регистрирани. Идентификацията трябва да се основава на:
а) предварителна информация и данни, събрани в съответствие с точка 1.3.,
б) опит,
в) външна информация, включително колкото е възможно повече епидемиологични и други исторически данни, и
г) информация за безопасността на храните, получена по веригата за производство на храни, която може да има отношение към безопасността на крайните или междинните продукти и храните, когато се консумират.
Всеки етап (от суровини, производство до дистрибуция), на който може да бъде въведен някой от факторите, причиняващи опасност за храната, трябва да бъде посочен.
1.4.2.2 При идентифициране на опасностите трябва да се вземе предвид следното:
а) етапите, предхождащи и следващи въпросната операция,
б) технологично оборудване, услуги и околна среда, и
в) връзки нагоре и надолу по веригата във веригата за производство на храни.
1.4.2.3 За всяка идентифицирана хранителна опасност трябва да се установи приемливо ниво на опасност в крайния продукт, когато е възможно.
Законовите и нормативните изисквания, изискванията на клиентите за безопасност на храните, употребата, предвидена от клиента, и други подходящи данни трябва да бъдат взети под внимание при установяването на това ниво.
Валидността и резултатите от определянето трябва да бъдат записани.
1.4.3 Оценка на опасността.
Трябва да се извърши оценка на опасността, за да се определи, за всяка хранителна опасност (виж 1.4.2), дали нейното елиминиране или намаляване до приемливи нива е от съществено значение за производството на безопасна храна и, ако се контролира, необходимо, за да се гарантира, че идентифицираните приемливи нива са постигнати.
Всяка хранителна опасност трябва да бъде оценена според възможната й сериозност. вредни ефективърху здравето и вероятността от възникването му.
Използваната методология следва да бъде описана и резултатите от оценката на опасността да бъдат записани.
1.4.4 Избор и оценка на контролните мерки.
Въз основа на оценката на опасностите съгласно точка 1.4.3 трябва да бъде избран подходящ набор от контролни мерки, които ще могат да предотвратят, премахнат или намалят факторите, причиняващи опасност за хранителните продукти, до определени приемливи нива.
С този избор всяка контролна мярка съгласно параграф 1.3.5.2 трябва да бъде анализирана, като се вземе предвид нейната ефективност по отношение на идентифицираните опасности.
Избраните контролни мерки трябва да бъдат класирани (оценени) по отношение на необходимостта да се контролират, като се използва или оперативен план за управление, или HACCP план.
Изборът и класирането на мерките трябва да се извършва с помощта на логичен подход, включително оценка, като се вземе предвид следното:
а) въздействието му върху идентифицираните опасности по отношение на установената точност,
б) осъществимостта на неговото наблюдение (напр. възможността за редовно наблюдение, за да се осигури незабавна корекция);
в) мястото му в системата по отношение на другите контроли;
г) вероятността от повреда на управлението или значителна променливост на процеса;
е) тежестта на последиците при неизправност на функционирането му;
е) дали контролната мярка е установена и прилагана специално за премахване или значително намаляване на нивото на опасността(ите);
g) синергични ефекти (т.е. взаимодействието, което възниква между две или повече контролни мерки, в резултат на което крайният резултат надвишава сумата от техните индивидуални резултати).
Мерките за контрол, класифицирани като подходящи за плана НАССР, трябва да се прилагат в съответствие с точка 1.6. Други мерки за управление трябва да се прилагат като оперативни BDP в съответствие с точка 1.5.
Методологията и параметрите, използвани за това класиране, трябва да бъдат документирани и резултатите от оценките трябва да бъдат записани.
1.5 Монтаж на операционни зали основни програми(BPR).
Оперативните BPR трябва да бъдат документирани и трябва да включват следната информация за всяка програма:
а) фактор(и), причиняващ опасности за храните, контролирани от програмата (вижте точка 1.4.4.),
б) мерки за контрол (виж параграф 1.4.4.),
в) процедури за мониторинг, демонстриращи изпълнението на оперативния план за управление;
d) корекции и коригиращи действия, предприети в случай на откриване на загуба на контрол по време на наблюдение на оперативния BDP (виж съответно точка 1.10.1 и точка 1.10.2),
е) отговорности и правомощия,
е) записи от мониторинга.
1.6 Създаване на НАССР план.
1.6.1 НАССР план.
HACCP планът трябва да бъде документиран и трябва да включва следната информация за всяка критична контролна точка (CCP):
а) факторите, причиняващи опасност за хранителните продукти, трябва да се управляват в CTU (вижте точка 1.4.4.),
б) мерки за контрол (виж параграф 1.4.4.),
в) критични граници (вижте точка 1.6.3.)
г) процедура(и) за мониторинг (виж 1.6.4),
е) корекции и коригиращи действия, които трябва да бъдат предприети, ако критичните граници са превишени (виж 1.6.5);
е) отговорности и правомощия;
ж) записи от мониторинга.
1.6.2 Идентифициране на критични контролни точки (CCP).
За всяка опасност, която се контролира съгласно плана НАССР, трябва да се идентифицират KTU за идентифицираните контролни мерки (виж параграф 1.4.4.).
1.6.3 Определяне на критични граници за критични контролни точки.
Критичните граници трябва да бъдат определени за мониторинга, установен за всяка CTU.
Трябва да се установят критични граници, за да се гарантира, че идентифицираното приемливо ниво на опасност в крайния продукт (виж 1.4.2.) не е превишено.
Критичните граници трябва да бъдат измерими.
Обосновката за избраните критични граници трябва да бъде документирана.
Критичните граници, базирани на субективни данни (като визуална проверка на продукта, процеса, обработката и т.н.), трябва да бъдат подкрепени от инструкции или спецификации и/или образование и обучение.
1.6.4 Система за мониторинг на критични контролни точки.
За всяка CTU трябва да се инсталира система за мониторинг, за да се демонстрира, че CTU е под контрол. Тази системавключва всички планирани измервания или наблюдения, свързани с критични граници.
Системата за мониторинг трябва да се състои от подходящи процедури, инструкции и записи, обхващащи следното:
а) измервания или наблюдения, които дават резултати в подходяща времева рамка,
б) използваните устройства за наблюдение,
в) използваните методи за калибриране (виж 8.3);
г) честота на мониторинга;
е) отговорности и правомощия, свързани с мониторинга и оценката на резултатите от мониторинга;
е) изисквания към записите и методи за водене на записи
Методите и честотата на наблюдение трябва да могат да откриват кога критичните нива са превишени навреме, за да се изолира продуктът, преди да бъде използван или консумиран.
1.6.5 Действия, предприети при превишаване на критичните граници въз основа на резултатите от мониторинга.
Планираните корекции и коригиращи действия, предприети при превишаване на критичните граници, трябва да бъдат описани в плана НАССР. Тези действия трябва да гарантират, че причината за несъответствията е идентифицирана, че параметрите, контролирани в контролния блок, са върнати под контрол и че повторната поява на несъответствието е предотвратена (вижте точка 1.10.2).
Трябва да бъдат установени и следвани документирани процедури, за да се гарантира, че потенциално опасните продукти се обработват по подходящ начин и да се гарантира, че те не се освобождават без предварителна оценка (виж 1.10.3).
1.7 Актуализиране на предварителна информация и документи, описващи плана за управление на безопасността и НАССР плана.
След одобрение на оперативния план за управление на безопасността (вижте точка 1.5) и/или плана за НАССР (вижте точка 1.6), организацията актуализира следната информация, ако е необходимо:
а) характеристики на продукта (вижте точка 1.3.3);
b) предназначение (вижте точка 1.3.4);
в) диаграми на последователности (виж 1.5.5.1);
d) етапи на процеса (виж 1.3.5.2);
е) мерки за контрол (вижте точка 1.3.5.2).
Ако е необходимо, трябва да се направят промени в плана за HACCP (вижте точка 1.6.1) и в процедурите и инструкциите, описващи процедурата за управление на безопасността (вижте точка 1.2).
1.8 Планиране на проверката.
При планирането на проверката трябва да се определят целите, методите, честотата и отговорностите за извършване на проверка. Дейностите по проверка трябва да потвърдят, че:
а) БДП се извършват (вижте точка 1.2),
б) входните данни за анализ на опасността (вижте точка 1.3) се актуализират непрекъснато,
в) оперативните планове за управление на безопасността (вижте точка 1.5) и елементите в плана за HACCP (вижте точка 1.6.1) са изпълнени и ефективни,
г) нивата на опасност са в рамките на приемливите нива (вижте 1.4.2), и
е) други процедури, изисквани от организацията, са въведени и ефективни.
Резултатът от това планиране трябва да бъде във форма, адекватна на методите на функциониране на организацията.
Резултатите от проверката трябва да бъдат записани и докладвани на екипа по безопасност на храните.
Резултатите от проверката трябва да бъдат предоставени в подкрепа на анализа на резултатите от дейностите по проверка (вижте точка 8.4.3).
Ако системата за проверка се основава на изпитване на проби от крайния продукт и ако такова изпитване на проби разкрие несъответствие с приемливото ниво на опасност (вижте 1.4.2), съответните партиди от продукта трябва да се третират като потенциално опасни в съответствие с 1.10.3.
1.9Система за проследяване.
Организацията трябва да създаде и поддържа система за проследимост, която гарантира идентификацията на продуктовите партиди по отношение на партидите суровини, производствените и доставките.
Системата за проследяване трябва да може да идентифицира входящия материал от директния доставчик и първоначалния път на разпространение на крайния продукт.
Записите за проследимост трябва да се поддържат за определен период, за да се оцени системата, за да се гарантира боравенето с потенциално опасни продукти и в случай на изтегляне на продукта. Записите трябва да се поддържат в съответствие със законовите, правните и клиентските изисквания и могат, например, да се основават на идентификация на партидата на крайния продукт.
1.10 Управление на несъответствието.
1.10.1 Корекции.
Организацията трябва да гарантира, че в случай на превишаване на критична граница за CTU (виж 1.6.5) или загуба на контрол върху оперативните BDPs, засегнатите продукти са идентифицирани и контролирани, като се вземат предвид тяхната употреба и освобождаване.
Трябва да се установи и следва документирана процедура. Той трябва да дефинира:
а) идентифициране и оценка на засегнатите крайни продукти, за да се определи тяхното подходящо боравене (виж 1.10.3), и
б) анализ на направените корекции.
Продуктите, произведени в условия, при които критичните нива са превишени, са потенциално опасни и трябва да се обработват в съответствие с точка 1.10.3. Продуктите, произведени в несъответствие с разпоредбите за оперативна безопасност, трябва да бъдат оценени по отношение на причините за несъответствията и техните последици за безопасността на храните и, когато е подходящо, с тях да се работи в съответствие с 1.10.3. Оценката трябва да се записва.
Всички корекции трябва да бъдат одобрени отговорно лице(от лица) и трябва да се записва заедно с информация относно естеството на несъответствията, техните причини и последствия, включително информация, необходима за целите на проследяването по отношение на несъответстващи партиди.
1.10.2 Коригиращи действия.
Данните, получени в резултат на мониторинг на оперативни BDP и CTU, трябва да бъдат оценени от определено лице(а) с достатъчно познания (вижте точка 6.2) и правомощия (вижте точка 5.4), за да инициирате коригиращи действия.
Трябва да се предприемат коригиращи действия, когато критичните граници са превишени (вижте точка 1.6.5) или когато има липса на съответствие с оперативния BPR.
Организацията трябва да установи и прилага документирани процедури, които определят подходящи действия за идентифициране и коригиране на причините за откритите несъответствия, предотвратяване на повторната им поява и връщане на процеса или системата под контрол, след като бъде открито несъответствие.
Тези действия включват:
а) анализ на несъответствия (включително оплаквания на клиенти);
б) анализ на тенденциите в резултатите от мониторинга, които могат да показват развитие към загуба на контрол;
в) определяне на причините за несъответствията,
d) оценяване на действията, необходими за предотвратяване на повторна поява на несъответствия;
е) идентифициране и изпълнение на необходимите действия;
f) записване на резултатите от предприетите коригиращи действия, и
ж) анализ на предприетите коригиращи действия за потвърждаване на тяхната ефективност.
Коригиращите действия трябва да бъдат записани.
1.10.3 Работа с потенциално опасни продукти.
1.10.3.1 Общи положения.
Организацията трябва да борави с несъответстващи продукти, като предприема мерки за предотвратяване навлизането на несъответстващи продукти във веригата за производство на храни, докато не се увери, че:
а) опасностите от храната са намалени до идентифицираните приемливи нива,
b) въпросните опасности от храни ще бъдат намалени до идентифицирани приемливи нива (виж 1.4.2), преди да влязат във веригата за производство на храни, или
в) продуктите отговарят на допустимото ниво на разглежданата опасност за храните, въпреки несъответствието.
Всички продуктови партиди, засегнати от несъответстващата ситуация, остават под контрола на организацията, докато не бъдат оценени.
Ако продуктите, които са изгубили контрола на организацията, са определени като опасни, организацията трябва да уведоми съответните заинтересовани страни и да инициира изтегляне (вижте 1.10.4).
ЗАБЕЛЕЖКА. Терминът "припадък" включва изземване на храна.
Мерките за контрол и подходящите реакции и разрешения за работа с потенциално опасни продукти трябва да бъдат документирани.
1.10.3.2 Оценка за пускане на продукт.
Всяка партида продукти, засегната от несъответствието, се освобождава като безопасна само когато е изпълнено едно от следните условия:
а) доказателства, различни от системата за мониторинг, показват, че мерките за контрол са били ефективни,
б) комбинираният резултат от контролните мерки за продукта е потвърден, че отговаря на предвидения критерий (т.е. идентифицираните приемливи нива в съответствие с 1.4.2);
в) резултатите от пробни изпитвания, анализи и/или други дейности по проверка показват, че партидата от продукти, засегнати от несъответствието, отговаря на идентифицираните приемливи нива на въпросните опасности.
1.10.3.3 Боравене с несъответстващи продукти.
Ако дадена партида продукт не е приемлива за освобождаване, тогава върху нея трябва да се извърши едно от следните действия:
а) повторна обработка или допълнителна обработка, в рамките на или извън организацията, която елиминира или намалява опасността до приемливи нива;
б) унищожаване и/или обезвреждане като отпадък.
1.10.4 Оттегляне.
За да се осигури и улесни пълното и навременно отстраняване на партиди крайни продукти, които са идентифицирани като опасни:
а) висшето ръководство трябва да назначи персонал, който има правомощия да инициира изтеглянето и да назначи отговорен персонал за извършване на изтеглянето, и
б) организацията установява и прилага документирана процедура за:
1) уведомления до съответните заинтересовани страни (например: законодателни и регулаторни органи, клиенти и/или потребители),
2) обработка на конфискувани продукти, както и опасни пратки от продукти, които все още са на склад, и
3) установяване на последователността на необходимите действия.
Премахването на продуктите трябва да бъде осигурено или контролирано, докато не бъдат унищожени, използвани за цел, различна от първоначалната им цел, определено като безопасни за първоначалната им цел (или по друг начин) или обработени по начин, който гарантира, че са направени безопасни.
Информацията за причината, степента и ефекта от оттеглянето трябва да бъде записана и докладвана на висшето ръководство като вход за преглед от ръководството (вижте 5.8.2).
Организацията проверява и записва ефективността на програмата за изтегляне чрез използване на подходящи методи (напр. симулирано изтегляне или действително изтегляне).

При вземане на проба от въздух за определяне на нивото на микробно замърсяване е необходимо да се спазват следните задължителни условия: пробата от въздух се взема не по-рано от 30 минути след почистване на помещението, докато прозорците и вратите трябва да бъдат затворени, височината от пробата трябва да отговаря на височината на работната маса. Контролът трябва да се извършва със стерилно техническо облекло от плат без власинки и ръкавици.

Преди да пренесете устройството в „чиста“ стая, то трябва да се избърше с кърпа без влакна с обработени ръбове, навлажнена с 76% етилов алкохол. Прехвърлянето на устройството в производствени помещения от класове 1 и 2 и за предпочитане клас 3 на чистота трябва да се извършва през въздушен шлюз за материали. Контролът на чистотата на въздуха трябва да се извършва най-малко 2 пъти седмично преди и по време производствен процесв препоръчаните точки.

Определяне на микробно замърсяване на въздуха в помещенията по метода утаяванесе състои от утаяване (утаяване) на микрофлора (разположена във въздуха), под въздействието на гравитацията, върху повърхността на хранителната среда.

Този метод се използва за приблизителна оценка на микробното замърсяване на въздуха в промишлени помещения, предимно в помещения с повишено замърсяване на въздуха и в случаите, когато изследването е невъзможно метод на аспирация(когато се използва в производството на запалими или експлозивни вещества).

В промишлени помещения контролът на съдържанието на микроорганизми се извършва главно в тези работни зони, където се намират най-вероятните източници на микробно замърсяване на въздуха (места с голям брой персонал, повишен риск от образуване на прах и др.), както и в зони, където веществата, спомагателните вещества и готовият продукт са в пряк контакт с околната среда.

Засяването се извършва върху отворени петриеви панички с месопептонен агар (за определяне на броя на бактериите) и отделно с агар на Сабуро (за определяне на броя на гъбите). Чашите се поставят на няколко места в помещенията: в дълги и тесни - на 4 точки хоризонтално на разстояние не повече от 5 m една от друга; в помещения до 15 м2 - в две срещуположни точки на помещението; над 100 м2 - във всяка от 4 срещуположни точки и в центъра на помещението. След 10 минути експозиция в отворено състояние, чашите се затварят и се поставят в термостат.

Инокулациите върху месо-пептонен агар се инкубират при температура 32,5 ± 2,5 ° C, върху агар Sabouraud - при 22,5 ± 2,5 ° C в продължение на 5 дни.

Отчитане на резултатите от изследванията. За да се определи общият брой бактерии (гъбички) в 1 m3 въздух, броят на израсналите колонии върху съда се умножава по един от факторите, представени в таблицата „изчисляване на броя на микроорганизмите в 1 m3 въздух за 10 минути на експозиция”:

Например: 50 колонии от бактерии растат върху чаша с диаметър 10 см. По отношение на 1 m3 въздух, общият брой на бактериите е 50 x 60 = 3000.

Този метод обаче не дава пълна картина на количественото съдържание на микроорганизмите. Това се дължи на факта, че утаяването на микроорганизмите зависи от скоростта на движение на въздуха, която може да се различава в различни точки на помещението. Освен това, когато се използва този метод, фините фракции на бактериалния аерозол се улавят слабо и при засяване на една частица от аерозол, който съдържа няколко жизнеспособни микроорганизми, расте само една колония, което намалява общото микробно замърсяване на въздуха.

Следователно методът на утаяване е приблизителен при оценката на реалната степен на микробно замърсяване на въздуха в помещенията. Въпреки това може да служи за определяне на микробното замърсяване на въздуха във времето и за оценка на ефективността на провежданите противоепидемични мерки.

Определяне на микробно замърсяване на въздуха метод на аспирацияизвършва се с помощта на пробоотборници от инерционен тип - импактор или устройство за бактериологичен анализ на въздуха (прорезен апарат на Кротов, оттук и друго име на метода: метод на прорез за улавяне на бактерии). Работата на устройството се основава на принципа на удар на въздушна струя върху повърхността на хранителна среда, която се поставя в петриево блюдо.

При използване на апарата на Кротов въздухът се засмуква през клиновиден процеп, разположен радиално над петриевото блюдо, с помощта на центробежен вентилатор. Дискът, върху който е фиксирана паничката на Петри, се върти със скорост 1 оборот/сек, в резултат на което инокулацията на микроорганизмите става равномерно по цялата повърхност на хранителната среда.

Местоположението и броят на точките за вземане на проби от въздуха се определят в зависимост от размера на помещението (виж метода на утаяване).

Петриевото блюдо с хранителната среда се поставя върху диска на устройството и капакът се затваря внимателно с помощта на скоби, монтирани на тялото му. Уредът се включва и с реометър се настройва скоростта на въздуха - 25 или 40 l/min. Средно проба от въздух се взема за 5 минути при скорост 40 l/min.

След вземане на проба от въздух (от всяка конкретна точка в две успоредни петриеви панички с МРА и среда на Сабуро), съдовете се затварят с капаци и се поставят в термостат. Хранителната среда, температурните условия и времето за инкубация на културите са същите като при изследване на въздуха чрез метода на утаяване (виж по-горе).

Отчитане на резултатите. Изчислението се извършва по формулата:

X = a x 1000 / b, където X е броят на микроорганизмите в 1 m3 въздух; a е броят на колониите, израснали върху петриевата паничка след инкубационния период; c е обемът на изследваната въздушна проба, намален до нормални условия(виж формулата за привеждане на обема на въздуха в нормални условия за метода на аспирация).

Друг метод за изчисление: пребройте броя на колониите от гъбички и бактерии, които са се развили върху паралелни чинии, определете средното аритметично и го умножете по 5.

Получените резултати се сравняват с допустимите граници на микробно замърсяване на въздуха на дадено помещение съгласно съответните таблици: „Класификация на производствените помещения според допустимото съдържание на микроорганизми и механични частици във въздуха за производство на стерилни продукти“ и „класификация на помещенията за производство на нестерилни лекарстваспоред допустимия брой частици и микроорганизми във въздуха.”

Изчисляване на минималния общ обем на въздушната пробавъв всяка контролна точка се извършва в съответствие с методическите препоръки за мониторинг на съдържанието на микроорганизми и частици във въздуха на промишлени помещения (Заповед на Министерството на здравеопазването на Украйна от 14 декември 2001 г. № 502).