Μέθοδος αναρρόφησης μικροβιολογίας δειγματοληψίας αέρα. Σχεδιασμός και δημιουργία ασφαλών προϊόντων. Διάγνωση ιογενών λοιμώξεων

Οι μικροοργανισμοί είναι μικροσκοπικά, κυρίως μονοκύτταρα πλάσματα που είναι ευρέως διαδεδομένα στη φύση. Βρίσκονται σε όλα τα περιβάλλοντα (αέρας, έδαφος, νερό), στο σώμα των ανθρώπων και των ζώων και στα φυτά.

Η ποιοτική ποικιλομορφία και ο αριθμός των μικροοργανισμών εξαρτώνται κυρίως από τις θρεπτικές ενώσεις. Ωστόσο, η υγρασία, η θερμοκρασία, ο αερισμός, η έκθεση στο ηλιακό φως και άλλοι παράγοντες είναι επίσης σημαντικοί.

Μέθοδοι υγειονομικής μικροβιολογικής έρευνας φυσικά περιβάλλοντασας επιτρέπουν να προσδιορίσετε την παρουσία παθογόνων μικροοργανισμών, να προσδιορίσετε την ποσότητα τους και, σύμφωνα με τα αποτελέσματα που προέκυψαν, να αναπτύξετε μέτρα για την εξάλειψη ή την πρόληψη μεταδοτικές ασθένειες. Επιπλέον, η ποσοτική λογιστική είναι απαραίτητη για τη μοντελοποίηση οικοσυστημάτων και την ανάπτυξη αρχών για τη διαχείριση φυσικών διεργασιών. Ας εξετάσουμε περαιτέρω τι είναι.

Το χώμα

Θεωρείται από τους επιστήμονες ως μια από τις πιθανές οδούς μετάδοσης μολυσματικών παθολογιών. Οι παθογόνοι μικροοργανισμοί διεισδύουν στο έδαφος με τις εκκρίσεις ασθενών ή ζώων. Μερικά από αυτά, ιδιαίτερα αυτά που φέρουν σπόρους, μπορούν να επιβιώσουν στο έδαφος για μεγάλο χρονικό διάστημα (μερικές φορές αρκετές δεκαετίες). Παθογόνα όπως αυτά εισέρχονται στο έδαφος επικίνδυνες λοιμώξεις, όπως ο τέτανος, ο άνθρακας, η αλλαντίαση κ.λπ. Μέθοδοι για υγειονομικές και μικροβιολογικές δοκιμές εδάφουςσας επιτρέπουν να προσδιορίσετε τον «μικροβιακό αριθμό» (τον αριθμό των μικροοργανισμών σε ένα γραμμάριο εδάφους), καθώς και τον δείκτη coli (τον αριθμό του E. coli).

Ανάλυση εδάφους: γενικές πληροφορίες

ΠΡΟΣ ΤΗΝ μέθοδοι μικροβιολογικής έρευνας εδάφουςΠρώτα απ 'όλα, πρέπει να ληφθεί υπόψη η άμεση μικροσκοπία και η σπορά πυκνών μικροοργανισμών.Οι πληθυσμοί των μικροοργανισμών και οι ομάδες τους που κατοικούν στο έδαφος διαφέρουν ως προς την ταξινομική θέση και τις οικολογικές λειτουργίες. Στην επιστήμη ενώνονται με τον γενικό όρο «ζωή του εδάφους». Το έδαφος αποτελεί βιότοπο για έναν τεράστιο αριθμό μικροοργανισμών. Υπάρχουν από 1 έως 10 δισεκατομμύρια κύτταρά τους σε ένα γραμμάριο χώματος. Σε αυτό το περιβάλλον, η αποσύνθεση οργανικών ουσιών λαμβάνει χώρα ενεργά με τη συμμετοχή διαφόρων σαπροφυτικών μικροοργανισμών.

Μικροσκοπική μέθοδος μικροβιολογικής έρευνας: στάδια

Η περιβαλλοντική ανάλυση ξεκινά με τη δειγματοληψία. Για να το κάνετε αυτό, χρησιμοποιήστε ένα μαχαίρι που έχει προηγουμένως καθαριστεί και σκουπιστεί με οινόπνευμα (μπορείτε να χρησιμοποιήσετε ένα φτυάρι). Μετά από αυτό, παρασκευάζεται το δείγμα. Το επόμενο βήμα είναι η καταμέτρηση των κυττάρων σε λεκιασμένα επιχρίσματα. Ας δούμε κάθε στάδιο ξεχωριστά.

Δειγματοληψία

Κατά την ανάλυση του αρόσιμου εδάφους, κατά κανόνα, λαμβάνονται δείγματα από το βάθος ολόκληρου του στρώματος. Αρχικά, αφαιρούνται 2-3 cm από την κορυφή του εδάφους, καθώς μπορεί να υπάρχει ξένη μικροχλωρίδα σε αυτό. Μετά από αυτό, λαμβάνονται μονόλιθοι από την περιοχή του εδάφους που μελετήθηκε. Το μήκος καθενός από αυτά πρέπει να αντιστοιχεί στο πάχος του στρώματος από το οποίο θα ληφθεί το δείγμα.

Σε οικόπεδο 100-200 τ. m Λαμβάνονται δείγματα 7-10. Κάθε βάρος είναι περίπου 0,5 κιλά. Τα δείγματα πρέπει να αναμιγνύονται επιμελώς στη σακούλα. Μετά από αυτό, λαμβάνεται ένα μεσαίο δείγμα βάρους περίπου 1 kg. Θα πρέπει να τοποθετηθεί σε μια περγαμηνή (αποστειρωμένη) σακούλα, να μπει μέσα υφασμάτινη τσάντα. Το δείγμα φυλάσσεται στο ψυγείο μέχρι την άμεση ανάλυση.

Προετοιμασία για τη μελέτη

Το ανακατεμένο χώμα χύνεται σε στεγνό γυαλί. Πρέπει πρώτα να σκουπιστεί με οινόπνευμα και να καεί πάνω από έναν καυστήρα. Χρησιμοποιώντας μια σπάτουλα, το χώμα αναμειγνύεται καλά και απλώνεται σε ένα ομοιόμορφο στρώμα. Είναι επιτακτική ανάγκη να αφαιρέσετε ρίζες και άλλα ξένα στοιχεία. Για αυτό χρησιμοποιούνται λαβίδες. Πριν από την εργασία, τα τσιμπιδάκια και η σπάτουλα θερμαίνονται πάνω από έναν καυστήρα και ψύχονται.

Μικρές μερίδες επιλέγονται από διάφορες περιοχές χώματος που κατανέμονται πάνω από το ποτήρι. Ζυγίζονται σε πορσελάνινο κύπελλο σε τεχνική ζυγαριά. Υποχρεωτικό στάδιομικροσκοπικός μικροβιολογική μέθοδος έρευναςείναι ειδική επεξεργασία δειγμάτων. Είναι απαραίτητο να προετοιμάσετε 2 αποστειρωμένες φιάλες εκ των προτέρων. Η χωρητικότητά τους δεν πρέπει να υπερβαίνει τα 250 ml. 100 ml νερού βρύσης χύνονται σε μία από τις φιάλες. Πάρτε 0,4-0,8 ml υγρού από αυτό και βρέξτε ένα δείγμα χώματος σε κατάσταση πάστας. Το μείγμα πρέπει να τρίβεται με το δάχτυλό σας ή με λαστιχένιο γουδοχέρι για 5 λεπτά.

Χρησιμοποιώντας νερό από την πρώτη φιάλη, η μάζα του εδάφους μεταφέρεται σε άδεια φιάλη. Μετά τρίβεται ξανά. Μετά από αυτό, η μάζα μεταφέρεται στη φιάλη κοντά στη φλόγα του καυστήρα. Το δοχείο με το αιώρημα χώματος ανακινείται σε κουνιστή πολυθρόνα για 5 λεπτά. Μετά από αυτό, αφήνεται να ηρεμήσει για περίπου 30 δευτερόλεπτα. Αυτό είναι απαραίτητο για να καθιζάνουν μεγάλα σωματίδια. Μετά από μισό λεπτό, η μάζα χρησιμοποιείται για την παρασκευή του φαρμάκου.

Καταμέτρηση κυττάρων σε σταθερά επιχρίσματα

Η άμεση μικροσκοπική εξέταση του εδάφους πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας μικροβιολογική μέθοδος έρευνας, που αναπτύχθηκε από τον Winogradsky. Σε έναν ορισμένο όγκο του παρασκευασμένου εναιωρήματος, υπολογίζεται ο αριθμός των κυττάρων μικροοργανισμών. Η μελέτη σταθερών επιχρισμάτων σάς επιτρέπει να αποθηκεύετε παρασκευάσματα για μεγάλο χρονικό διάστημα και να κάνετε υπολογισμούς σε οποιαδήποτε κατάλληλη στιγμή.

Η παρασκευή του φαρμάκου πραγματοποιείται ως εξής. Ένας ορισμένος όγκος εναιωρήματος (συνήθως 0,02-0,05 ml) εφαρμόζεται χρησιμοποιώντας μικροσιφώνιο σε γυάλινη πλάκα. Μια σταγόνα διαλύματος άγαρ-άγαρ (ένα μείγμα πολυσακχαριτών αγαροπηκτίνης και αγαρόζης που εξάγεται από καφέ και κόκκινα φύκια της Μαύρης Θάλασσας) προστίθεται σε αυτό, αναμειγνύεται γρήγορα και κατανέμεται σε μια περιοχή 4-6 τετραγωνικών μέτρων. εκ. Το επίχρισμα στεγνώνει στον αέρα και σταθεροποιείται για 20-30 λεπτά. αλκοόλ (96%). Στη συνέχεια, το φάρμακο υγραίνεται με απεσταγμένο νερό και τοποθετείται σε διάλυμα καρβολικής ερυθροσίνης για 20-30 λεπτά.

Μετά τη βαφή, πλένεται και στεγνώνεται στον αέρα. Η μέτρηση κυττάρων πραγματοποιείται με στόχο εμβάπτισης.

Σπορά σε πυκνά μέσα

Μικροσκοπικός μικροβιολογικές μεθόδους έρευναςεπιτρέπουν την ταυτοποίηση μεγάλου αριθμού μικροοργανισμών. Όμως, παρά τη σπορά, θεωρείται το πιο κοινό στην πράξη. Η ουσία του είναι να σπείρεται ένας όγκος του παρασκευάσματος (εδαφικό εναιώρημα) σε ένα τρυβλίο Petri σε ένα στερεό μέσο.

Αυτό μικροβιολογική μέθοδος έρευναςκαθιστά δυνατό να λαμβάνεται υπόψη όχι μόνο η ποσότητα, αλλά και η ομάδα, και σε ορισμένες περιπτώσεις, η σύνθεση των ειδών της μικροσκοπικής χλωρίδας. Ο αριθμός των αποικιών μετριέται συνήθως από τον πυθμένα ενός τρυβλίου Petri στο εκπεμπόμενο φως. Μια κουκκίδα τοποθετείται στην υπολογιζόμενη περιοχή με δείκτη ή μελάνι.

Ανάλυση νερού

Η μικροχλωρίδα ενός υδάτινου σώματος, κατά κανόνα, αντανακλά τη μικροβιακή σύνθεση του εδάφους γύρω του. Από αυτή την άποψη μέθοδοι υγειονομικής-μικροβιολογικής έρευνας νερού και εδάφουςέχουν ιδιαίτερη πρακτική σημασία κατά τη μελέτη της κατάστασης ενός συγκεκριμένου οικοσυστήματος. Τα σώματα γλυκού νερού περιέχουν συνήθως κόκκους, βακτήρια σε σχήμα ράβδου.

Τα αναερόβια βρίσκονται σε μικρές ποσότητες στο νερό. Κατά κανόνα, αναπαράγονται στον πυθμένα των δεξαμενών, σε λάσπη, συμμετέχοντας σε διαδικασίες καθαρισμού. Η μικροχλωρίδα των ωκεανών και των θαλασσών αντιπροσωπεύεται κυρίως από αλατόφιλα (αλόφιλα) βακτήρια.

Δεν υπάρχουν πρακτικά μικροοργανισμοί στο νερό των αρτεσιανών πηγαδιών. Αυτό οφείλεται στην ικανότητα φιλτραρίσματος του εδαφικού στρώματος.

ΓΕΝΙΚΑ αποδεκτο μέθοδοι μικροβιολογικής έρευνας του νερούΟ προσδιορισμός του μικροβιακού αριθμού και του τίτλου ή του δείκτη coli λαμβάνεται υπόψη. Ο πρώτος δείκτης χαρακτηρίζει τον αριθμό των βακτηρίων σε 1 ml υγρού. Ο δείκτης coli είναι ο αριθμός των E. coli που υπάρχουν σε ένα λίτρο νερού και ο τίτλος coli είναι η ελάχιστη ποσότητα ή η μέγιστη αραίωση του υγρού στο οποίο μπορούν ακόμη να ανιχνευθούν.

Προσδιορισμός μικροβιακού αριθμού

Αυτή η μέθοδος υγειονομικής μικροβιολογικής εξέτασης του νερού είναι η εξής. Σε 1 ml νερού, προσδιορίστε τον αριθμό των προαιρετικών αναερόβιων και των μεσόφιλων (ενδιάμεσων) αερόβιων που μπορούν να αναπτυχθούν σε άγαρ πεπτόνης κρέατος (το κύριο θρεπτικό μέσο) στους 37 βαθμούς. όλη την ημέρα, σχηματίστε αποικίες ορατές σε μεγέθυνση 2-5 r. ή με γυμνό μάτι.

Το βασικό στάδιο αυτού μέθοδος μικροβιολογικής έρευνας του νερούσπέρνει. Από κάθε δείγμα, ενοφθαλμίζονται τουλάχιστον 2 διαφορετικοί όγκοι. Προσθέστε 1-0,1 ml καθαρού υγρού και 0,01-0,001 ml μολυσμένου υγρού σε κάθε φλιτζάνι. Για ενοφθαλμισμό 0,1 ml ή λιγότερο, το υγρό αραιώνεται με απεσταγμένο (αποστειρωμένο) νερό. Οι δεκαπλάσιες αραιώσεις παρασκευάζονται διαδοχικά. 1 ml από καθένα από αυτά προστίθεται σε δύο τρυβλία Petri.

Οι αραιώσεις γεμίζονται με θρεπτικό άγαρ. Πρέπει πρώτα να λιώσει και να κρυώσει στους 45 βαθμούς. Μετά την ενεργό ανάμειξη, το μέσο αφήνεται σε οριζόντια επιφάνειαγια σκλήρυνση. Στις 37 μοίρες. οι καλλιέργειες καλλιεργούνται καθ' όλη τη διάρκεια της ημέρας. Θεωρούνται μικροβιολογική μέθοδος δοκιμής νερούσας επιτρέπει να λάβετε υπόψη τα αποτελέσματα σε εκείνες τις πλάκες όπου ο αριθμός των αποικιών κυμαίνεται από 30 έως 300.

Αέρας

Θεωρείται μέσο διέλευσης μικροοργανισμών. Κύριος μέθοδοι μικροβιολογικής έρευνας του αέραείναι η καθίζηση (καταβύθιση) και η αναρρόφηση.

Η μικροχλωρίδα του ατμοσφαιρικού περιβάλλοντος χωρίζεται συμβατικά σε μεταβλητή και σταθερή. Η πρώτη ομάδα περιλαμβάνει ζυμομύκητες, κόκκους που σχηματίζουν χρωστική ουσία, βάκιλλους που φέρουν σπόρους, ράβδους και άλλους μικροοργανισμούς που είναι ανθεκτικοί στην ξήρανση και την έκθεση στο φως. Οι εκπρόσωποι της μεταβλητής μικροχλωρίδας, που διεισδύουν στον αέρα από τον συνήθη βιότοπό τους, δεν διατηρούν τη βιωσιμότητά τους για πολύ.

Υπάρχουν πολύ περισσότεροι μικροοργανισμοί στον αέρα των μεγάλων πόλεων παρά στον αέρα ατμοσφαιρικό περιβάλλοναγροτικές περιοχές. Υπάρχουν πολύ λίγα βακτήρια πάνω από τις θάλασσες και τα δάση. Κατακρήμνιση: το χιόνι και η βροχή βοηθούν στον καθαρισμό του αέρα. Υπάρχουν πολύ περισσότερα μικρόβια σε κλειστούς χώρους παρά σε ανοιχτούς χώρους. Ο αριθμός τους αυξάνεται το χειμώνα ελλείψει τακτικού αερισμού.

Καθίζηση

Αυτό μέθοδος μικροβιολογικής έρευνας στη μικροβιολογίαθεωρείται το πιο απλό. Βασίζεται στην καθίζηση σταγονιδίων και σωματιδίων στην επιφάνεια ενός άγαρ σε ανοιχτό τρυβλίο Petri υπό την επίδραση της βαρύτητας. Η μέθοδος καθίζησης δεν προσδιορίζει με ακρίβεια τον αριθμό των βακτηρίων στον αέρα. Το γεγονός είναι ότι είναι αρκετά δύσκολο να πιάσουμε μικρά κλάσματα σωματιδίων σκόνης και σταγονίδια βακτηρίων σε ένα ανοιχτό κύπελλο. Κυρίως μεγάλα σωματίδια συγκρατούνται στην επιφάνεια.

Αυτή η μέθοδος δεν χρησιμοποιείται κατά την ανάλυση του ατμοσφαιρικού αέρα. Αυτό το περιβάλλον χαρακτηρίζεται από μεγάλες διακυμάνσεις στην ταχύτητα κίνησης ροή αέρα. Η καθίζηση, ωστόσο, μπορεί να χρησιμοποιηθεί ελλείψει πιο προηγμένων οργάνων ή μιας πηγής ηλεκτρικής ενέργειας.

Ο μικροβιακός αριθμός προσδιορίζεται με τη μέθοδο Omelyansky. Σύμφωνα με αυτό, σε 5 λεπτά σε επιφάνεια άγαρ 100 τετραγωνικών μέτρων. cm ο αριθμός των βακτηρίων που εναποτίθενται που υπάρχει σε 10 λίτρα αέρα.

Διάταγμα 535 «Περί ενοποίησης μεθόδων μικροβιολογικής έρευνας»

Αξίζει να πούμε ότι η μικροβιολογική εξέταση σε αυτή την περίπτωση γενικά συνοδεύεται από ορισμένα προβλήματα. Οφείλονται στο γεγονός ότι στα κατώτερα τμήματα της αναπαραγωγικής οδού υπάρχει συνήθως μια ποικιλόμορφη μικροχλωρίδα που αλλάζει σε διαφορετικές ηλικιακές περιόδους. Για να αυξηθεί η αποτελεσματικότητα της μελέτης, αναπτύχθηκαν ενοποιημένοι κανόνες.

Διάγνωση ιογενών λοιμώξεων

Διεξάγεται με μεθόδους ταυτοποίησης παθογόνων RNA και DNA. Βασίζονται κυρίως στον προσδιορισμό των αλληλουχιών νουκλεοτιδίων σε παθολογικό υλικό. Για αυτό, χρησιμοποιούνται μοριακές ανιχνευτές. Είναι τεχνητά ληφθέντα νουκλεϊκά οξέα, συμπληρωματικά των ιικών οξέων, επισημασμένα με ραδιενεργό σήμα ή βιοτίνη.

Η ιδιαιτερότητα της μεθόδου είναι η επαναλαμβανόμενη αντιγραφή ενός συγκεκριμένου θραύσματος DNA, το οποίο περιλαμβάνει αρκετές εκατοντάδες (ή δεκάδες) ζεύγη νουκλεοτιδίων. Ο μηχανισμός αναπαραγωγής (αντιγραφής) είναι ότι η ολοκλήρωση μπορεί να ξεκινήσει μόνο σε ορισμένα μπλοκ. Για τη δημιουργία τους χρησιμοποιούνται αστάρια. Είναι συντιθέμενα ολιγονουκλεοτίδια.

PCR διαγνωστικά (πολυμεράση αλυσιδωτή αντίδραση) είναι εύκολο να εφαρμοστεί. Αυτή η μέθοδος σας επιτρέπει να αποκτήσετε γρήγορα αποτελέσματα χρησιμοποιώντας μικρό όγκο παθολογικού υλικού. Χρησιμοποιώντας διαγνωστικά PCR, ανιχνεύονται οξείες, χρόνιες και λανθάνουσες (κρυφές) λοιμώξεις.

Για ευαισθησία, αυτή η μέθοδος θεωρείται προτιμότερη. Ωστόσο, επί του παρόντος, τα συστήματα δοκιμών δεν είναι αρκετά αξιόπιστα, επομένως τα διαγνωστικά PCR δεν μπορούν να αντικαταστήσουν πλήρως τις παραδοσιακές μεθόδους.

Εικ.92. Συσκευή Krotov (γενική άποψη).
6811‘**8

Εικ.91. Διάγραμμα της συσκευής του Krotov, ([-κυλινδρικό σώμα, βάση 2 σώματος, 3-ηλεκτρικός κινητήρας, 4-φυγοκεντρικός ανεμιστήρας, πτερωτή 5 οκτώ πτερυγίων, 6-δίσκος, 7-ελατήριο, 8-τρυβλίο Petri, κάλυμμα 9 συσκευών ; Κλειδαριές 10-on - flip, 11 δίσκοι plexiglass, υποδοχή σε σχήμα T2, 13-split δακτύλιος, 14-fight με διάφραγμα, 15-out σωλήνας.
Πιο προηγμένες είναι οι μέθοδοι ενόργανης έρευνας της μικροχλωρίδας του αέρα με χρήση συσκευής Krotov και κρουστικών κρουστών (Εικ. 91, 92, 93). Η συσκευή του Krotov είναι ένα κυλινδρικό σώμα, κλειστό στην κορυφή με αφαιρούμενο καπάκι, κάτω από το οποίο είναι εγκατεστημένο ένα πιάτο Petri με MPA σε έναν περιστρεφόμενο δίσκο, ένας ηλεκτροκινητήρας τοποθετείται μέσα στον κύλινδρο, ο τελευταίος, περιστρέφεται με ταχύτητα 4-5 χιλιάδες στροφές ανά λεπτό, εξασφαλίζει αναρρόφηση αέρα μέσα από το καπάκι από πλεξιγκλάς, έχοντας μια σφηνοειδές σχισμή ή οπές. Ως αποτέλεσμα της τυρβώδους ροής αέρα, ένας δίσκος με ένα τρυβλίο Petri περιστρέφεται μέσα στον κύλινδρο, ο οποίος εξασφαλίζει ομοιόμορφη κατανομή της μικροχλωρίδας σε ολόκληρη την επιφάνεια του θρεπτικού μέσου και τα σωματίδια αερολύματος και των τριών φάσεων αναρροφούνται ενεργά. Χρησιμοποιώντας ένα περιστροφόμετρο, το οποίο έχει σχεδιαστεί για να προσδιορίζει την ποσότητα του αέρα που αναρροφάται, από 50 έως 200 λίτρα αέρα περνούν μέσω της συσκευής. Μετά τη δειγματοληψία, τα κύπελλα κλείνονται και τοποθετούνται σε θερμοστάτη στους 37° για 24 ώρες και στη συνέχεια για 24 ώρες σε θερμοκρασία δωματίου. Μετρώντας τον αριθμό των αναπτυσσόμενων αποικιών και γνωρίζοντας τον όγκο του αέρα που διέρχεται, είναι εύκολο να υπολογιστεί ο μικροβιακός αριθμός.
Εικ.93. Διάγραμμα κρουστικού εκκρεμούς Μαΐου τεσσάρων σταδίων (βλ. περιγραφή στο κείμενο).

Οι κρουστήρες είναι συσκευές εξοπλισμένες με σωλήνες με κωνικά ακροφύσια - καταρράκτες μέσω των οποίων αναρροφάται αέρας. Μπροστά από το στενό άκρο κάθε ακροφυσίου, τοποθετούνται πλάκες υποδοχής, οι οποίες είναι γυάλινες πλάκες λιπασμένες με γλυκερίνη και φυσιολογικό ορό. Διαρρέει αέρας μέσα από τους σωλήνες με ακροφύσια; χτυπά τις πλάκες υποδοχής, μικροοργανισμοί εγκαθίστανται πάνω τους. Μετά τη δειγματοληψία αέρα, οι αντικειμενοφόρες πλάκες αφαιρούνται από τους κρουστικούς εκκρεμείς και τα καθιζάνοντα μικρόβια εξετάζονται είτε με μικροσκοπία είτε το γυαλί ξεπλένεται με φυσιολογικό διάλυμα, από το οποίο τα μικρόβια στη συνέχεια εμβολιάζονται σε θρεπτικά μέσα.
Οι μέθοδοι διήθησης για τη μελέτη του αέρα βασίζονται στη διήθηση ή στην αναρρόφηση (αναρρόφηση) μέσω ειδικών φίλτρων, υγρών, σκονών κ.λπ., που προσροφούν τη μικροχλωρίδα.
Τα φίλτρα που χρησιμοποιούνται για την ανάλυση αέρα μπορεί να είναι αδιάλυτα - βαμβάκι, χαρτί, μεμβράνη, millipore και διαλυτά - γλυκερίνη-ζελατίνη, αλγινικό νάτριο, ζάχαρη
і
σκόνες
Μια πλάκα φίλτρου από κατάλληλο υλικό τοποθετείται σε μια συσκευή Seitz και μια ορισμένη ποσότητα αέρα αναρροφάται μέσω του φίλτρου χρησιμοποιώντας μια αντλία κενού. Στη συνέχεια η πλάκα φίλτρου αφαιρείται, βυθίζεται σε ένα φυσιολογικό διάλυμα και ανακινείται, μικροοργανισμοί εκροφούνται στο διάλυμα και γίνονται ποσοτικοί εμβολιασμοί από αυτό σε θρεπτικά μέσα. Εάν χρησιμοποιούνται διαλυτά υλικά ως φίλτρα, τότε μετά την απορρόφηση του αέρα διαλύονται σε στείρο φυσιολογικό διάλυμα.
Ο αέρας μπορεί να αναρροφηθεί μέσω ενός αποστειρωμένου υγρού (νερό, αλατούχο διάλυμα, ζωμός πεπτόνης κρέατος, κ.λπ.) χρησιμοποιώντας τη συσκευή Dyakonov (Εικ. 94)
(ΣΟΛ
t
VT
Εικ.94. Η συσκευή του Dyakonov

Αυτή η συσκευή αποτελείται από έναν γυάλινο κύλινδρο χωρητικότητας 100-200 ml, σε ένα ερμητικά σφραγισμένο πώμα εισάγονται δύο γυάλινοι σωλήνες, ο μακρύς σωλήνας εισαγωγής καταλήγει στο κάτω μέρος και ο σωλήνας εξόδου (κοντός) καταλήγει ακριβώς κάτω από το πώμα. Κατά τη μελέτη του αέρα, 10-20 ml νερού χύνεται στη συσκευή, τοποθετούνται γυάλινες χάντρες και αποστειρώνονται. Μετά την αποστείρωση, ο σωλήνας εξόδου συνδέεται με μια αντλία κενού, στην οποία συνδέεται ένα ροόμετρο για τη μέτρηση του όγκου του αέρα που διέρχεται από τη συσκευή και αναρροφάται αέρας σε ποσότητα 100-200 λίτρων. Αφού απενεργοποιήσετε τη συσκευή, πάρτε 1 ml νερού μέσω του οποίου έχει φιλτραριστεί ο αέρας, προσθέστε το σε ένα άδειο αποστειρωμένο τρυβλίο Petri και ρίξτε μέσα 15 ml τηγμένου MPA (+ 45°). Τα ενοφθαλμισμένα τρυβλία επωάζονται σε θερμοστάτη στους 37° για 1-2 ημέρες, και στη συνέχεια μετράται ο αριθμός των αναπτυσσόμενων αποικιών και, γνωρίζοντας τον όγκο του φιλτραρισμένου αέρα, υπολογίζεται ο μικροβιακός αριθμός.
Η παρουσία υγειονομικών-ενδεικτικών μικροοργανισμών προσδιορίζεται στον αέρα των κλειστών χώρων, καθώς και στο νερό και το έδαφος.
Αναγνωρίζονται ως Streptococcus viridans (viridans streptococcus) (τύπος L.), Str.haemolyticus (αιμολυτικός στρεπτόκοκκος Staphylococcus aureus, ο οποίος έχει αιμολυτικές ιδιότητες. Η παρουσία αυτών των μικροβίων στον αέρα υποδηλώνει τη μόλυνση της ανώτερης μικροχλωρίδας του αναπνευστικής οδούπρόσωπο. Ο αριθμός των υγειονομικών ενδεικτικών μικροοργανισμών που περιέχουν
ΣΧΕΤΙΚΑ ΜΕ
που περιέχεται σε I m (1000 λίτρα) αέρα ονομάζεται στρεπτοκοκκικός δείκτης.
Για την αναγνώριση υγειονομικών ενδεικτικών μικροβίων αέρα, χρησιμοποιούνται όλες οι μέθοδοι που περιγράφονται παραπάνω, αλλά ο εμβολιασμός πραγματοποιείται σε επιλεκτικά και διαφορικά διαγνωστικά μέσα, τα οποία καθιστούν δυνατή την ταχεία ανίχνευση αυτών των βακτηρίων και τον διαχωρισμό τους από άλλους εκπροσώπους της μικροχλωρίδας του αέρα. Τέτοια μέσα περιλαμβάνουν το άγαρ αίματος, στο οποίο οι αιμολυτικοί σταφυλόκοκκοι και οι στρεπτόκοκκοι δίνουν μια ζώνη αιμόλυσης (καταστροφή ερυθρών αιμοσφαιρίων), άγαρ κίτρινου άλατος κ.λπ.
Τα αποτελέσματα της αξιολόγησης του αέρα σε οικιστικές εγκαταστάσεις το χειμώνα και το καλοκαίρι παρουσιάζονται στον Πίνακα 10.
Πίνακας 10
Κριτήρια για την υγειονομική εκτίμηση του αέρα σε οικιστικούς χώρους
ΣΧΕΤΙΚΑ ΜΕ
(αριθμός μικροοργανισμών στα πρώτα μέτρα αέρα) Εκτίμηση αέρα Θερινή περίοδος Χειμερινή περίοδος Ολική πρασίνιση και μικροαιμολυτικοί οργανισμοί- σύνολο στρεπτόκοκκων
μικρο-
org
viridans και αιμολυτικοί στρεπτόκοκκοι Pure 1500 16 4500 36 Contaminated.... 2500 36 7000 124 Σκοπός της εργασίας: προσδιορισμός του μικροβιακού αριθμού του αέρα και της περιεκτικότητας σε υγειονομικούς ενδεικτικούς μικροοργανισμούς.
Υλικά: Πιάτα Petri με MPA, άγαρ βαλσαμόχορτου και αιματηρό άγαρ, συσκευή Krotov.
Πρόοδος. I. Προσδιορίστε τον μικροβιακό αριθμό χρησιμοποιώντας τη μέθοδο Koch: αφήστε τα τρυβλία Petri με MPA, άγαρ αίματος και άγαρ βαλσαμόχορτου ανοιχτά σε διαφορετικά σημεία του εργαστηρίου για 5 λεπτά. Κλείστε τα κύπελλα και τοποθετήστε τα σε θερμοστάτη στους 37°C για 48 ώρες. Μετρήστε τον αριθμό των αναπτυσσόμενων αποικιών, προσδιορίστε τον μικροβιακό αριθμό του αέρα (βλ. παραπάνω).
Προσδιορίστε τον μικροβιακό αριθμό και τον αριθμό των υγειονομικών ενδεικτικών μικροοργανισμών χρησιμοποιώντας μια συσκευή Krotov. Χρησιμοποιήστε πλάκες MPA, άγαρ αίματος και άγαρ μούστου. Για κάθε
φλιτζάνια, περάστε 200 λίτρα αέρα με ταχύτητα 20-30 l/min. Μετά τη λήψη δειγμάτων, κλείστε τα κύπελλα και βάλτε τα σε θερμοστάτη στους 37° για 48 ώρες. Μετρήστε τις αναπτυγμένες αποικίες, μικροσκοπήστε τις, ετοιμάστε επιχρίσματα και χρωματίστε τις με Gram. Σημειώστε την παρουσία ζωνών αιμόλυσης στο άγαρ αίματος.
Συγκρίνετε τα αποτελέσματα που προέκυψαν με τις δύο μεθόδους. Αξιολογήστε την καθαριότητα του αέρα. Παρουσιάστε τα αποτελέσματα σε μορφή πίνακα.
Αξιολόγηση της υγείας του αέρα
Μεσαίος Αριθμός αποικιών στο πιάτο όταν προσδιορίζεται
Μέθοδος Koch στη συσκευή Krotov
IPA
άγαρ αίματος βαλσαμόχορτο
Μικροβιακός αριθμός
Ο αριθμός των πράσινων και
αιμολυτικό
στρεπτόκοκκους
Βιβλιογραφία
Labinskaya A.S. Μικροβιολογία με τεχνολογία μικροβιολογική έρευνα. Μ., 1972.
Περέτη Λ.Γ. Η σημασία της φυσιολογικής μικροχλωρίδας για τον ανθρώπινο οργανισμό. Medgiz., 1955.
P i t k i n K.D., Krivoshein V.S. Μικροβιολογία.Μ. 1980. Υγειονομική μικροβιολογία. Εκδ. G.P. Kalina και G.K.Chistovich. Μ., 1969.
Tep V.I. Υγειονομική μικροβιολογία. 1958.
T i m a k o v V.D. Μικροβιολογία. Μ., 1973. .

Καθίζηση- οι περισσότεροι παλιά μέθοδος, χρησιμοποιείται ευρέως λόγω της απλότητας και της διαθεσιμότητάς του, αλλά είναι ανακριβής. Η μέθοδος προτάθηκε από τον R. Koch και συνίσταται στην ικανότητα μικροοργανισμών υπό την επίδραση της βαρύτητας και υπό την επίδραση της κίνησης του αέρα (μαζί με σωματίδια σκόνης και σταγονίδια αερολύματος) να καθιζάνουν στην επιφάνεια του θρεπτικού μέσου σε ανοιχτά τρυβλία Petri. Τα κύπελλα τοποθετούνται σε σημεία δειγματοληψίας σε οριζόντια επιφάνεια. Κατά τον προσδιορισμό της συνολικής μικροβιακής μόλυνσης, οι πλάκες με άγαρ πεπτόνης κρέατος αφήνονται ανοιχτές για 5-10 λεπτά ή περισσότερο, ανάλογα με τον βαθμό υποψίας βακτηριακής μόλυνσης. Για να αναγνωρίσετε υγειονομικά ενδεικτικά μικρόβια, χρησιμοποιήστε μέσο Garro ή Turzhetsky (για την ανίχνευση στρεπτόκοκκων), άγαρ γάλακτος-αλατιού ή κρόκου-αλατιού (για ανίχνευση σταφυλόκοκκων), άγαρ βαλσαμόχορτου ή μέσο Sabouraud (για ανίχνευση ζυμομυκήτων και μυκήτων). Κατά τον προσδιορισμό των υγειονομικών ενδεικτικών μικροοργανισμών, τα κύπελλα αφήνονται ανοιχτά για 40-60 λεπτά.

Στο τέλος της έκθεσης, όλα τα πιάτα κλείνουν, τοποθετούνται σε θερμοστάτη για μια ημέρα για καλλιέργεια σε θερμοκρασία βέλτιστη για την ανάπτυξη του απομονωμένου μικροοργανισμού και στη συνέχεια (εάν το απαιτεί η έρευνα) αφήνονται για 48 ώρες σε θερμοκρασία δωματίου για τον σχηματισμό. της χρωστικής από μικροοργανισμούς που σχηματίζουν χρωστική ουσία.

Η μέθοδος καθίζησης έχει μια σειρά από μειονεκτήματα: μόνο χονδροειδή κλάσματα του αερολύματος κατακάθονται στην επιφάνεια του μέσου. Οι αποικίες σχηματίζονται συχνά όχι από ένα μόνο κύτταρο, αλλά από ένα σύμπλεγμα μικροβίων. Μόνο ένα μέρος της μικροχλωρίδας του αέρα αναπτύσσεται στα θρεπτικά μέσα που χρησιμοποιούνται. Επιπλέον, αυτή η μέθοδος είναι εντελώς ακατάλληλη για τη μελέτη της βακτηριακής ρύπανσης του ατμοσφαιρικού αέρα.

Είναι πιο προηγμένες μέθοδοι φιλοδοξία, με βάση την αναγκαστική εναπόθεση μικροοργανισμών από τον αέρα στην επιφάνεια ενός πυκνού θρεπτικού μέσου ή σε ένα υγρό παγίδευσης (ζωμός κρέατος-πεπτόνης, ρυθμιστικό διάλυμα, ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου κ.λπ.). Στην πράξη υγειονομική υπηρεσίαΚατά τη λήψη δειγμάτων αναρρόφησης, μια συσκευή Krotov, μια παγίδα βακτηριδίων Rechmensky, μια συσκευή δειγματοληψίας αέρα (POV-1), μια βακτηριολογική δειγματοληψία αερολύματος (PAB-1), μια βακτηριακή-ιική ηλεκτροκατακρήμνιση (BVEP-1), μια συσκευή Kiktenko, Andersen Χρησιμοποιούνται συσκευές , Dyakonov, MB κ.λπ. Για τη μελέτη της ατμόσφαιρας, μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν φίλτρα μεμβράνης Νο. 4, μέσω των οποίων αναρροφάται αέρας χρησιμοποιώντας μια συσκευή Seitz. Η μεγάλη ποικιλία οργάνων υποδηλώνει την απουσία μιας καθολικής συσκευής και έναν μεγαλύτερο ή μικρότερο βαθμό ατέλειάς τους.

Η συσκευή του Κρότοφ.Επί του παρόντος, αυτή η συσκευή χρησιμοποιείται ευρέως στη μελέτη του εσωτερικού αέρα και είναι διαθέσιμη σε εργαστήρια

Η αρχή λειτουργίας της συσκευής Krotov (Εικ. 22) βασίζεται στο γεγονός ότι ο αέρας, που αναρροφάται μέσω μιας σφηνοειδούς σχισμής στο καπάκι της συσκευής, προσκρούει στην επιφάνεια του θρεπτικού μέσου, ενώ τα σωματίδια σκόνης και αεροζόλ κολλάνε στο μέσο, ​​και μαζί τους μικροοργανισμούς στον αέρα . Πετρί με λεπτό στρώμαΤο μέσο είναι στερεωμένο σε ένα περιστρεφόμενο τραπέζι της συσκευής, το οποίο εξασφαλίζει ομοιόμορφη κατανομή βακτηρίων στην επιφάνειά του. Η συσκευή λειτουργεί από το δίκτυο. Μετά τη λήψη δείγματος με συγκεκριμένη έκθεση, το κύπελλο αφαιρείται, καλύπτεται με καπάκι και τοποθετείται σε θερμοστάτη για 48 ώρες. Τυπικά, η δειγματοληψία πραγματοποιείται με ταχύτητα 20-25 l/min για 5 λεπτά. Έτσι, προσδιορίζεται η χλωρίδα σε 100-125 λίτρα αέρα. Εάν εντοπιστούν υγειονομικοί ενδεικτικοί μικροοργανισμοί, ο όγκος του αέρα που ελέγχεται αυξάνεται στα 250 λίτρα.

Πριν από τη λήψη δείγματος αέρα, ο δέκτης γεμίζεται με 3-5 ml συλλεκτικού υγρού (νερό, ζωμός κρέατος-πεπτόνης, ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου).

Η συσκευή του RechmenskyΛειτουργεί με την αρχή ενός ψεκασμού: όταν ο αέρας διέρχεται από το στενό άνοιγμα της χοάνης, υγρό από τον δέκτη μέσω ενός τριχοειδούς με τη μορφή σταγονιδίων ανεβαίνει στον κύλινδρο. Οι σταγόνες υγρού συνθλίβονται περαιτέρω, χτυπώντας μια γυάλινη σπάτουλα και τα τοιχώματα του δοχείου, δημιουργώντας ένα σύννεφο μικρών σταγονιδίων πάνω στα οποία προσροφούνται μικροοργανισμοί στον αέρα. Τα υγρά σταγονίδια κορεσμένα με βακτήρια ρέουν στον δέκτη και στη συνέχεια διασκορπίζονται ξανά, γεγονός που εξασφαλίζει τη μέγιστη δέσμευση βακτηρίων από τον αέρα. Κατά τη λειτουργία, η συσκευή τοποθετείται υπό γωνία 15-25°, η οποία διασφαλίζει ότι το υγρό συλλογής ρέει στον δέκτη. Η ταχύτητα δειγματοληψίας αέρα μέσω της συσκευής του Rechmensky είναι 10-20 l/min. Στο τέλος της εργασίας, το υγρό λαμβάνεται από τον δέκτη με μια αποστειρωμένη πιπέτα και εμβολιάζεται (0,2 ml το καθένα) στην επιφάνεια στερεών θρεπτικών μέσων. Το πλεονέκτημα της παγίδας βακτηρίων Rechmensky είναι υψηλής απόδοσηςδέσμευση βακτηριακών αερολυμάτων. Τα μειονεκτήματα της συσκευής είναι η δυσκολία κατασκευής της, η μη τυποποιημένη φύση των συσκευών που προκύπτουν, η μεγάλη ευθραυστότητα και η σχετικά χαμηλή παραγωγικότητά τους.

Τα μεγάλα πλεονεκτήματα είναι η σειριακή παραγωγή αυτής της συσκευής (που επέτρεψε τον εξοπλισμό εργαστηρίων με αυτήν), η φορητότητά της και η υψηλότερη παραγωγικότητα (20-25 l/min). Η φιάλη της συσκευής, στην οποία τοποθετείται το συλλεκτικό υγρό, είναι κατασκευασμένη από ανθεκτικό στη θερμότητα plexiglass, το τριχοειδές από ανοξείδωτο χάλυβα. Ένα μπουκάλι ψεκασμού είναι ενσωματωμένο στη φιάλη, προκαλώντας διασπορά του υγρού παγίδευσης όταν αναρροφάται αέρας. Μια τέτοια συσκευή καθιστά δυνατό τον εύκολο καθαρισμό και την αποστείρωση της φιάλης με συσκευή διασποράς απλά βράζοντας για 30 λεπτά (το αυτόκαυστο είναι απαράδεκτο, καθώς προκαλεί παραμόρφωση του κυλίνδρου).

Πριν από τη λήψη δειγμάτων αέρα, προσθέστε 5-10 ml συλλεκτικού υγρού (συχνότερα ζωμό από εκχύλισμα κρέατος) στη φιάλη και ρυθμίστε τη σε γωνία 10°, γεγονός που εξασφαλίζει τη φυσική αποστράγγιση του υγρού μετά τη διασπορά. Ο αέρας που διέρχεται από τη φιάλη και το μπουκάλι ψεκασμού προκαλεί το σχηματισμό μικρών σταγονιδίων παγιδευτικού υγρού πάνω στα οποία κατακάθονται μικροοργανισμοί. Η συσκευή POV-1 χρησιμοποιείται για τη μελέτη του εσωτερικού αέρα για γενική μικροβιακή μόλυνση, για την ανίχνευση παθογόνων βακτηρίων (για παράδειγμα, Mycobacterium tuberculosis) και αναπνευστικών ιών στον αέρα των νοσοκομείων.

Ο βακτηριολογικός δειγματολήπτης Typhoon P-40 (M) έχει σχεδιαστεί για να προσδιορίζει τη γενική βακτηριακή μόλυνση του αέρα με την επακόλουθη απομόνωση διαφόρων παθογόνων και υγειονομικών ενδεικτικών μικροοργανισμών.

Ο εμβολιασμός μικροοργανισμών από τον ατμοσφαιρικό αέρα πραγματοποιείται μέσω μιας βαθμονομημένης οπής στο διαμέρισμα προβολής σε ένα τρυβλίο Petri με ένα θρεπτικό μέσο τοποθετημένο στο περιστρεφόμενο τραπέζι της συσκευής. Ο αέρας αντλείται χρησιμοποιώντας μια βακτηριολογική περιστροφική πνευματική αντλία ενσωματωμένη στο δειγματολήπτη Typhoon R-40 (M), η τοποθέτηση σε ένα περιστρεφόμενο τραπέζι είναι καθολική, γεγονός που επιτρέπει τη χρήση πιάτων Petri διαφόρων τροποποιήσεων.

Στο βακτηριολογικό δειγματολήπτη "Typhoon" R- 40 (M) εξασφαλίζει στεγανότητα του εσωτερικού θαλάμου και εύκολη πρόσβαση στο μέσο δοκιμής.

Η ταχύτητα περιστροφής του κυπέλλου ρυθμίζεται ομαλά χρησιμοποιώντας τον ρυθμιστή ταχύτητας που βρίσκεται στο μπροστινό πλαίσιο του δειγματολήπτη (Εικ. 23) "Typhoon" R-40 (M).

Βακτηριολογική δειγματοληψία αερολύματος (PAB-1).Ο μηχανισμός δράσης του PAB-1 βασίζεται στην αρχή της ηλεκτροστατικής εναπόθεσης σωματιδίων αερολύματος (και, κατά συνέπεια, μικροοργανισμών) από τον αέρα καθώς διέρχεται από μια συσκευή στην οποία αυτά τα σωματίδια λαμβάνουν ηλεκτρικό φορτίο και εναποτίθενται σε ηλεκτρόδια με αντίθετο σημάδι. Τα ηλεκτρόδια για τη συλλογή αερολυμάτων τοποθετούνται σε οριζόντια θέση μεταλλικές παλέτεςμε στερεά μέσα σε τρυβλία Petri ή υγρό θρεπτικό υλικό (15-20 ml). Η συσκευή είναι φορητή με υψηλή παραγωγικότητα 150-250 l/min, δηλ. σε 1 ώρα μπορείς να πάρεις 5-6 m3 αέρα. Συνιστάται να χρησιμοποιείται για τη μελέτη μεγάλων όγκων αέρα κατά την ανίχνευση ευκαιριακών και παθογόνων μικροοργανισμών, για παράδειγμα, κατά τον εντοπισμό παθογόνων νοσοκομειακών λοιμώξεων (Pseudomonas aeruginosa. Staph, aureus, κ.λπ.) στον αέρα των δωματίων του νοσοκομείου, για προσδιορισμό σαλμονέλας και Escherichia στον ατμοσφαιρικό αέρα σε περιοχές με καταιονισμό κατά την άρδευση γεωργικών αγρών με λύματα.

Βακτηριακός-ιικός ηλεκτροκαθιζητής (BVEP-1).Η συσκευή βασίζεται στην αρχή λειτουργίας της αναρρόφησης-ιονισμού. Το BVEP-1 αποτελείται από έναν θάλαμο καθίζησης στον οποίο είναι τοποθετημένα ηλεκτρόδια: ένα αρνητικό με τη μορφή ενός οδηγού σωλήνα μέσω του οποίου εισέρχεται αέρας (και τα σωματίδια αερολύματος φορτίζονται ανάλογα αρνητικά) και ένα θετικό στον οποίο εγκαθίστανται βακτήρια.

MB συσκευή.Αυτή η συσκευή χρησιμεύει όχι μόνο για τον προσδιορισμό της γενικής μικροβιακής μόλυνσης, αλλά και για τη λήψη δειγμάτων αέρα με σωματίδια αερολύματος διαφόρων μεγεθών. Η συσκευή MB είναι κατασκευασμένη με βάση την αρχή "κόσκινο" και είναι ένας κύλινδρος χωρισμένος σε 6 οριζόντιες λωρίδες, σε κάθε μία από τις οποίες τοποθετούνται πιάτα Petri με MPA. Ο αέρας αναρροφάται ξεκινώντας από την επάνω βαθμίδα, στην πλάκα της οποίας οι οπές είναι οι μεγαλύτερες, και όσο χαμηλότερη είναι η βαθμίδα, τόσο μικρότερες είναι οι οπές (μόνο λεπτά κλάσματα αερολύματος περνούν από την τελευταία). Η συσκευή έχει σχεδιαστεί για να συλλαμβάνει σωματίδια αερολύματος μεγέθους μεγαλύτερου από 1 micron με ρυθμό δειγματοληψίας αέρα 30 l/min. Η μείωση του αριθμού των οπών εξασφαλίζει μια πιο ομοιόμορφη κατανομή του αερολύματος από τον αέρα σε όλο το θρεπτικό μέσο. Για να συλλάβετε ακόμη μικρότερα σωματίδια αερολύματος, μπορείτε να προσθέσετε ένα επιπλέον φίλτρο από υλικό φίλτρου AFA.

Όταν χρησιμοποιείτε οποιαδήποτε από τις αναφερόμενες συσκευές, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται είναι κατά προσέγγιση, αλλά παρέχουν μια πιο σωστή εκτίμηση της μόλυνσης του αέρα σε σύγκριση με τη μέθοδο καθίζησης. Δεδομένου ότι τόσο η δειγματοληψία όσο και οι υγειονομικές-μικροβιολογικές μελέτες του αέρα δεν ρυθμίζονται από την GOST, οποιαδήποτε συσκευή μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την αξιολόγηση της βακτηριακής ατμοσφαιρικής ρύπανσης. Σε πολλές περιπτώσεις η δειγματοληψία συνδυάζεται με το στάδιο του εμβολιασμού.

Για τη μείωση του αριθμού των μικροοργανισμών στον αέρα των κλειστών χώρων χρησιμοποιούνται τα ακόλουθα μέσα: α) χημική - επεξεργασία με όζον, διοξείδιο του αζώτου, ψεκασμός γαλακτικού οξέος, β) μηχανική - διέλευση αέρα από ειδικά φίλτρα, γ) φυσική - υπεριώδης ακτινοβολία.

1.1 Γενικές διατάξεις.
Ο οργανισμός πρέπει να σχεδιάσει και να αναπτύξει τις απαραίτητες διαδικασίες για τη δημιουργία ασφαλών προϊόντων.
Ο οργανισμός εφαρμόζει, εφαρμόζει και διασφαλίζει την αποτελεσματικότητα των προγραμματισμένων δραστηριοτήτων και τυχόν αλλαγές σε αυτές. Αυτό περιλαμβάνει το σχέδιο διαχείρισης ασφάλειας, καθώς και το σχέδιο διαχείρισης επιχειρησιακής ασφάλειας ή/και σχέδιο HACCP.
1.2Βασικά προγράμματα (BPR).
1.2.1 Ο οργανισμός πρέπει να καθιερώσει, να εφαρμόσει και να διατηρήσει βασικά προγράμματα (BPs) για τη διαχείριση:
α) την πιθανότητα εισαγωγής παραγόντων που προκαλούν κίνδυνο για το τρόφιμο στο προϊόν μέσω του εργασιακού περιβάλλοντος,
β) βιολογική, χημική και φυσική μόλυνση του προϊόντος(ων), συμπεριλαμβανομένης της διασταυρούμενης μόλυνσης μεταξύ προϊόντων, και
γ) επίπεδα κινδύνου στο προϊόν και στο περιβάλλον επεξεργασίας του.
1.2.2 Το BDP πρέπει:
α) ανταποκρίνεται στις ανάγκες του οργανισμού σε σχέση με την ασφάλεια των τροφίμων,
β) να είναι κατάλληλη για την κλίμακα και τον τύπο παραγωγής και τη φύση των προϊόντων που παράγονται ή/και μεταποιούνται,
γ) να είναι ενσωματωμένα στο δίκτυο εσωτερικό σύστημαπαραγωγή, ως προγράμματα που εφαρμόζονται καθολικά, ή ως προγράμματα που εφαρμόζονται σε ένα συγκεκριμένο προϊόν ή γραμμή παραγωγής, και
δ) έχουν εγκριθεί από την ομάδα ασφάλειας τροφίμων.
Ο οργανισμός προσδιορίζει τις νομικές και νομικές απαιτήσεις που σχετίζονται με τα παραπάνω.
1.2.3 Κατά την επιλογή ή/και τη δημιουργία PBP, ο οργανισμός θα εξετάζει και θα χρησιμοποιεί σχετικές πληροφορίες [π. ].
ΣΗΜΕΙΩΣΗ. Το Παράρτημα Γ παρέχει κατάλογο των σχετικών εκδόσεων του Codex.
Κατά τη δημιουργία αυτών των προγραμμάτων, ο οργανισμός θα πρέπει να λάβει υπόψη τα ακόλουθα:
α) ο σχεδιασμός και η διάταξη των κτιρίων και των συναφών υπηρεσιών·
δ) διάταξη των χώρων, συμπεριλαμβανομένων των χώρων εργασίας και των χώρων υποστήριξης για τους εργαζόμενους·
γ) προμήθειες αέρα, νερού, ηλεκτρισμού και άλλων υπηρεσιών κοινής ωφέλειας·
δ) υπηρεσίες υποστήριξης, συμπεριλαμβανομένης της διαχείρισης αποβλήτων και λυμάτων·
στ) καταλληλότητα του εξοπλισμού και προσβασιμότητα για καθαρισμό, συντήρηση και προληπτική συντήρηση.
στ) διαχείριση υλικών που αγοράστηκαν (για παράδειγμα: πρώτες ύλες, συστατικά, χημικά προϊόντα και συσκευασία), προμήθεια (για παράδειγμα: νερό, αέρας, ατμός και πάγος), διάθεση (για παράδειγμα: απόβλητα και λύματα) και χειρισμός προϊόντων (π.χ. : αποθήκευση και μεταφορά) ;
ζ) μέτρα για την πρόληψη της διασταυρούμενης μόλυνσης.
η) καθαριότητα και αποχέτευση·
θ) έλεγχος παρασίτων·
ι) υγιεινή του προσωπικού.
ια) άλλες σχετικές πτυχές.
Θα πρέπει να προγραμματιστεί η επαλήθευση του FDP (βλ. 1.8) και το FBP θα πρέπει να τροποποιηθεί εάν είναι απαραίτητο (βλ. 1.1). Πρέπει να τηρούνται αρχεία επαληθεύσεων και τροποποιήσεων.
Τα έγγραφα πρέπει να περιγράφουν τον τρόπο διαχείρισης των δραστηριοτήτων που περιλαμβάνονται στην οικονομική κατάσταση.
1.3 Προκαταρκτικά βήματα για την ανάλυση κινδύνου.
1.3.1 Γενικές διατάξεις.
Όλες οι απαραίτητες πληροφορίες για τη διεξαγωγή ανάλυσης κινδύνου πρέπει να συλλέγονται, να διατηρούνται, να ενημερώνονται και να τεκμηριώνονται. Πρέπει να τηρούνται αρχεία.
1.3.2 Ομάδα Ασφάλειας Τροφίμων.
Πρέπει να οριστεί ομάδα ασφάλειας τροφίμων.
Η ομάδα ασφάλειας τροφίμων πρέπει να διαθέτει διεπιστημονική γνώση και εμπειρία στην ανάπτυξη και εφαρμογή ενός συστήματος ασφάλειας τροφίμων. Αυτό περιλαμβάνει, αλλά δεν περιορίζεται σε, γνώση του προϊόντος, των διαδικασιών, του εξοπλισμού και των κινδύνων τροφίμων του οργανισμού εντός του πεδίου εφαρμογής του συστήματος ασφάλειας τροφίμων.
Πρέπει να τηρούνται αρχεία για να αποδεικνύεται ότι η ομάδα έχει τις απαιτούμενες γνώσεις και εμπειρία (βλ. 6.2.2).
1.3.3 Χαρακτηριστικά προϊόντος.
1.3.3.1 Πρώτες ύλες, συστατικά και υλικά σε επαφή με προϊόντα.
Όλες οι πρώτες ύλες, τα συστατικά και τα υλικά που έρχονται σε επαφή με προϊόντα πρέπει να τεκμηριώνονται στον βαθμό που απαιτείται για τη διεξαγωγή της ανάλυσης κινδύνου (βλ. 1.4), συμπεριλαμβανομένων των εξής, εάν υπάρχουν:
α) βιολογικά, χημικά και φυσικά χαρακτηριστικά,
β) τη σύνθεση των συστατικών της συνταγής, συμπεριλαμβανομένων των προσθέτων και των τεχνολογικών βοηθημάτων,
γ) καταγωγή,
δ) μέθοδος παραγωγής,
στ) μέθοδοι συσκευασίας και παράδοσης,
στ) συνθήκες αποθήκευσης και ημερομηνία λήξης,
ζ) προετοιμασία και/ή χειρισμός πριν από τη χρήση ή την επεξεργασία,
η) κριτήρια αποδοχής που σχετίζονται με την ασφάλεια των τροφίμων ή τις προδιαγραφές των αγορασθέντων υλικών και συστατικών σύμφωνα με τη χρήση για την οποία προορίζονται.
Ο οργανισμός προσδιορίζει τις νομικές και νομικές απαιτήσεις ασφάλειας τροφίμων που σχετίζονται με τα παραπάνω.

1.3.3.2 Χαρακτηριστικά του τελικού προϊόντος.
Τα χαρακτηριστικά των τελικών προϊόντων τεκμηριώνονται στο βαθμό που απαιτείται για την υποστήριξη της ανάλυσης κινδύνου (βλ. 1.4), συμπεριλαμβανομένων των ακόλουθων πληροφοριών, εάν υπάρχουν:
α) όνομα προϊόντος ή άλλη ταυτότητα,
β) σύνθεση,
γ) βιολογικά, χημικά και φυσικά χαρακτηριστικά σχετικά με την ασφάλεια των τροφίμων,
δ) καθορισμένες συνθήκες ζωής και αποθήκευσης,
ε) συσκευασία,
στ) επισήμανση ασφάλειας τροφίμων ή/και οδηγίες για το χειρισμό, την προετοιμασία και τη χρήση,
ζ) μέθοδος διανομής.
Ο οργανισμός προσδιορίζει τις νομικές και νομικές απαιτήσεις ασφάλειας τροφίμων που σχετίζονται με τα παραπάνω.
Οι περιγραφές πρέπει να ενημερώνονται, συμπεριλαμβανομένων, εάν απαιτείται, των διατάξεων της παραγράφου 1.1.
1.3.4 Προβλεπόμενη χρήση.
Η προβλεπόμενη χρήση, ο εύλογα αναμενόμενος χειρισμός του τελικού προϊόντος και κάθε ακούσιος αλλά εύλογα προβλέψιμος λάθος χειρισμός και κακή χρήση του τελικού προϊόντος πρέπει να επανεξετάζονται και να τεκμηριώνονται στο βαθμό που μπορεί να διεξαχθεί ανάλυση κινδύνου (βλ. 1.4.) .
Θα πρέπει να προσδιορίζονται ομάδες χρηστών και, κατά περίπτωση, ομάδες καταναλωτών, για κάθε προϊόν και θα πρέπει να λαμβάνονται υπόψη ιδιαίτερα ευάλωτες ομάδες καταναλωτών σε συγκεκριμένους κινδύνους.
Οι περιγραφές πρέπει να ενημερώνονται, συμπεριλαμβανομένων, εάν απαιτείται, των διατάξεων της παραγράφου 1.1.
1.3.5 Διαγράμματα ακολουθίας, βήματα διαδικασίας και έλεγχοι.
1.3.5.1 Διαγράμματα ακολουθίας.
Θα πρέπει να καταρτίζονται διαγράμματα ροής για τις κατηγορίες προϊόντων ή διεργασιών που καλύπτονται από το σύστημα διαχείρισης ασφάλειας τροφίμων. Τα διαγράμματα ροής θα πρέπει να αποτελούν τη βάση για την αξιολόγηση της πιθανής εμφάνισης, αύξησης ή εισαγωγής κινδύνων για τα τρόφιμα.
Τα διαγράμματα ροής πρέπει να είναι σαφή, ακριβή και επαρκώς λεπτομερή.
Τα διαγράμματα ακολουθίας πρέπει να περιλαμβάνουν τα ακόλουθα, εάν υπάρχουν:
α) την αλληλουχία και την αλληλεπίδραση όλων των σταδίων στην παραγωγή,
β) τυχόν διεργασίες που πραγματοποιούνται από τρίτους και εργασίες υπεργολαβίας,
γ) όπου παράγονται πρώτες ύλες, συστατικά και ενδιάμεσα προϊόντα,
δ) όπου γίνεται εκ νέου επεξεργασία και επαναχρησιμοποίηση,
στ) όταν απελευθερώνονται ή απορρίπτονται τελικά ή ενδιάμεσα προϊόντα, καθώς και υποπροϊόντα και απόβλητα,
Σύμφωνα με την παράγραφο 1.8, η ομάδα ασφάλειας τροφίμων πρέπει να επαληθεύσει την ακρίβεια του τρέχοντος διαγράμματος επί τόπου. Τα επικυρωμένα διαγράμματα ακολουθίας θα πρέπει να διατηρούνται ως αρχεία.
1.3.5.2 Περιγραφή των βημάτων της διαδικασίας και των ελέγχων.
Οι υπάρχοντες έλεγχοι, οι παράμετροι της διαδικασίας ή/και η ακρίβεια με την οποία εκτελούνται ή διαδικασίες που επηρεάζουν την ασφάλεια των τροφίμων θα πρέπει να περιγράφονται στο βαθμό που είναι απαραίτητο για την ανάλυση κινδύνου (βλ. 1.4).
Θα πρέπει επίσης να περιγραφούν εξωτερικές απαιτήσεις (π.χ. νομοθέτες ή πελάτες) που μπορεί να επηρεάσουν την επιλογή και την ακρίβεια των μέτρων ελέγχου.
Οι περιγραφές πρέπει να ενημερώνονται, συμπεριλαμβανομένων, εάν απαιτείται, των διατάξεων της παραγράφου 1.1.
1.4 Ανάλυση κινδύνου.
1.4.1 Γενικές διατάξεις.
Η ομάδα ασφάλειας τροφίμων πρέπει να διεξάγει ανάλυση κινδύνου για να προσδιορίσει ποιοι κίνδυνοι πρέπει να ελέγχονται, την έκταση του ελέγχου για τη διασφάλιση της ασφάλειας των τροφίμων και το σύνολο των ελέγχων που απαιτούνται.
1.4.2 Προσδιορισμός κινδύνων και καθορισμός αποδεκτών επιπέδων.
1.4.2.1 Όλοι οι κίνδυνοι που είναι εύλογα πιθανό να προκύψουν ανάλογα με τον τύπο του προϊόντος, τον τύπο της διαδικασίας και την πραγματική εγκαταστάσεις παραγωγής, πρέπει να ταυτοποιηθεί και να καταχωρηθεί. Η αναγνώριση πρέπει να βασίζεται σε:
α) προκαταρκτικές πληροφορίες και δεδομένα που συλλέγονται σύμφωνα με την ενότητα 1.3.,
β) εμπειρία,
γ) εξωτερικές πληροφορίες, συμπεριλαμβανομένων όσο το δυνατόν περισσότερων επιδημιολογικών και άλλων ιστορικών δεδομένων, και
δ) πληροφορίες για την ασφάλεια των τροφίμων που λαμβάνονται σε όλη την αλυσίδα παραγωγής τροφίμων, οι οποίες ενδέχεται να σχετίζονται με την ασφάλεια των τελικών ή ενδιάμεσων προϊόντων και των τροφίμων όταν καταναλώνονται.
Κάθε στάδιο (από τις πρώτες ύλες, την παραγωγή έως τη διανομή) στο οποίο μπορεί να εισαχθεί οποιοσδήποτε από τους παράγοντες που προκαλούν κίνδυνο για τα τρόφιμα πρέπει να προσδιορίζεται.
1.4.2.2 Κατά τον προσδιορισμό των κινδύνων, πρέπει να λαμβάνονται υπόψη τα ακόλουθα:
α) τα στάδια που προηγούνται και μετά την εν λόγω πράξη,
β) τεχνολογικό εξοπλισμό, υπηρεσίες και περιβάλλον, και
γ) ανάντη και κατάντη κρίκους στην αλυσίδα παραγωγής τροφίμων.
1.4.2.3 Για κάθε εντοπισμένο κίνδυνο για τα τρόφιμα, πρέπει να καθορίζεται ένα αποδεκτό επίπεδο επικινδυνότητας στο τελικό προϊόν, όποτε είναι δυνατόν.
Κατά τον καθορισμό αυτού του επιπέδου θα πρέπει να λαμβάνονται υπόψη οι νομικές και θεσμικές απαιτήσεις, οι απαιτήσεις για την ασφάλεια των τροφίμων των πελατών, η χρήση για την οποία προορίζεται ο πελάτης και άλλα σχετικά δεδομένα.
Η εγκυρότητα και τα αποτελέσματα του προσδιορισμού πρέπει να καταγράφονται.
1.4.3 Εκτίμηση επικινδυνότητας.
Πρέπει να διενεργείται εκτίμηση επικινδυνότητας για να προσδιοριστεί, για κάθε τροφικό κίνδυνο (βλ. 1.4.2), εάν η εξάλειψή του ή η μείωσή του σε αποδεκτά επίπεδα είναι απαραίτητη για την παραγωγή ασφαλών τροφίμων και, εάν ελέγχεται, είναι απαραίτητη για να διασφαλιστεί ότι τα καθορισμένα αποδεκτά επίπεδα είναι επιτεύχθηκε.
Κάθε τροφικός κίνδυνος πρέπει να αξιολογείται ανάλογα με την πιθανή σοβαρότητά του. βλαβερές συνέπειεςγια την υγεία και την πιθανότητα εμφάνισής της.
Θα πρέπει να περιγράφεται η χρησιμοποιούμενη μεθοδολογία και να καταγράφονται τα αποτελέσματα της εκτίμησης επικινδυνότητας.
1.4.4 Επιλογή και αξιολόγηση μέτρων ελέγχου.
Με βάση την αξιολόγηση των κινδύνων σύμφωνα με την ενότητα 1.4.3, πρέπει να επιλεγεί ένα κατάλληλο σύνολο μέτρων ελέγχου που θα είναι σε θέση να αποτρέπουν, να εξαλείφουν ή να μειώνουν παράγοντες που προκαλούν κίνδυνο για τα τρόφιμα σε ορισμένα αποδεκτά επίπεδα.
Με αυτήν την επιλογή, κάθε μέτρο ελέγχου σύμφωνα με την παράγραφο 1.3.5.2 πρέπει να αναλυθεί λαμβάνοντας υπόψη την αποτελεσματικότητά του σε σχέση με τους εντοπισθέντες κινδύνους.
Τα επιλεγμένα μέτρα ελέγχου πρέπει να ταξινομηθούν (αξιολογηθούν) ως προς την ανάγκη ελέγχου τους χρησιμοποιώντας είτε σχέδιο επιχειρησιακής διαχείρισης είτε σχέδιο HACCP.
Η επιλογή και η κατάταξη των μέτρων θα πρέπει να γίνεται με τη χρήση λογικής προσέγγισης, συμπεριλαμβανομένης της αξιολόγησης λαμβάνοντας υπόψη τα ακόλουθα:
α) την επίδρασή του στους εντοπισθέντες κινδύνους σε σχέση με τη διαπιστωμένη ακρίβεια,
β) τη σκοπιμότητα της παρακολούθησής του (π.χ. δυνατότητα τακτικής παρακολούθησης για την εξασφάλιση άμεσης διόρθωσης).
γ) τη θέση του εντός του συστήματος σε σχέση με άλλους ελέγχους·
δ) την πιθανότητα αποτυχίας του ελέγχου ή σημαντικής μεταβλητότητας της διαδικασίας.
στ) τη σοβαρότητα των συνεπειών σε περίπτωση αποτυχίας της λειτουργίας του.
στ) εάν το μέτρο ελέγχου έχει θεσπιστεί και εφαρμοστεί ειδικά για την εξάλειψη ή τη σημαντική μείωση του επιπέδου του(των) κινδύνου(ων)·
ζ) συνεργιστικές επιδράσεις (δηλαδή η αλληλεπίδραση που συμβαίνει μεταξύ δύο ή περισσότερων μέτρων ελέγχου, με αποτέλεσμα το τελικό αποτέλεσμα να υπερβαίνει το άθροισμα των επιμέρους αποτελεσμάτων τους).
Τα μέτρα ελέγχου που κατατάσσονται ως συναφή με το σχέδιο HACCP πρέπει να εφαρμόζονται σύμφωνα με την ενότητα 1.6. Άλλα μέτρα διαχείρισης πρέπει να εφαρμόζονται ως επιχειρησιακά BDP σύμφωνα με την ενότητα 1.5.
Η μεθοδολογία και οι παράμετροι που χρησιμοποιούνται για αυτή την κατάταξη πρέπει να τεκμηριώνονται και τα αποτελέσματα των αξιολογήσεων πρέπει να καταγράφονται.
1.5 Εγκατάσταση χειρουργείων βασικά προγράμματα(BPR).
Τα επιχειρησιακά BPR πρέπει να τεκμηριώνονται και να περιλαμβάνουν τις ακόλουθες πληροφορίες για κάθε πρόγραμμα:
α) παράγοντας ή παράγοντες που προκαλούν κινδύνους για τα τρόφιμα που ελέγχονται από το πρόγραμμα (βλ. ενότητα 1.4.4.),
β) μέτρα ελέγχου (βλέπε παράγραφο 1.4.4.),
γ) διαδικασίες παρακολούθησης που αποδεικνύουν την εφαρμογή του επιχειρησιακού σχεδίου διαχείρισης.
δ) διορθώσεις και διορθωτικές ενέργειες σε περίπτωση εντοπισμού απώλειας ελέγχου κατά την παρακολούθηση του λειτουργικού BDP (βλ. ενότητα 1.10.1 και ενότητα 1.10.2, αντίστοιχα),
στ) αρμοδιότητες και εξουσίες,
στ) αρχεία παρακολούθησης.
1.6 Καθιέρωση σχεδίου HACCP.
1.6.1 Σχέδιο HACCP.
Το σχέδιο HACCP πρέπει να είναι τεκμηριωμένο και πρέπει να περιλαμβάνει τις ακόλουθες πληροφορίες για κάθε κρίσιμο σημείο ελέγχου (CCP):
α) Οι παράγοντες που προκαλούν κίνδυνο για τα τρόφιμα πρέπει να αντιμετωπίζονται στο CTU (βλ. ενότητα 1.4.4.),
β) μέτρα ελέγχου (βλέπε παράγραφο 1.4.4.),
γ) κρίσιμα όρια (βλ. ενότητα 1.6.3.)
δ) διαδικασία(εις) παρακολούθησης (βλ. 1.6.4),
στ) διορθώσεις και διορθωτικές ενέργειες που πρέπει να γίνουν σε περίπτωση υπέρβασης των κρίσιμων ορίων (βλ. 1.6.5).
στ) αρμοδιότητες και εξουσίες.
ζ) αρχεία παρακολούθησης.
1.6.2 Προσδιορισμός κρίσιμων σημείων ελέγχου (CCP).
Για κάθε κίνδυνο που ελέγχεται σύμφωνα με το σχέδιο HACCP, πρέπει να προσδιορίζονται KTU για τα προσδιορισμένα μέτρα ελέγχου (βλ. παράγραφο 1.4.4.).
1.6.3 Προσδιορισμός κρίσιμων ορίων για κρίσιμα σημεία ελέγχου.
Πρέπει να καθοριστούν κρίσιμα όρια για την παρακολούθηση που καθορίζεται για κάθε CTU.
Πρέπει να καθοριστούν κρίσιμα όρια για να διασφαλιστεί ότι δεν γίνεται υπέρβαση του προσδιορισμένου αποδεκτού επιπέδου κινδύνου στο τελικό προϊόν (βλ. 1.4.2.).
Τα κρίσιμα όρια πρέπει να είναι μετρήσιμα.
Το σκεπτικό για τα επιλεγμένα κρίσιμα όρια πρέπει να τεκμηριώνεται.
Τα κρίσιμα όρια που βασίζονται σε υποκειμενικά δεδομένα (όπως οπτική επιθεώρηση του προϊόντος, διαδικασία, θεραπεία κ.λπ.) πρέπει να υποστηρίζονται από οδηγίες ή προδιαγραφές ή/και εκπαίδευση και κατάρτιση.
1.6.4 Σύστημα παρακολούθησης κρίσιμων σημείων ελέγχου.
Θα πρέπει να εγκατασταθεί ένα σύστημα παρακολούθησης για κάθε CTU για να αποδειχθεί ότι η CTU είναι υπό έλεγχο. Αυτό το σύστημαπεριλαμβάνει όλες τις προγραμματισμένες μετρήσεις ή παρατηρήσεις που σχετίζονται με κρίσιμα όρια.
Το σύστημα παρακολούθησης θα πρέπει να αποτελείται από κατάλληλες διαδικασίες, οδηγίες και αρχεία που να καλύπτουν τα ακόλουθα:
α) μετρήσεις ή παρατηρήσεις που παρέχουν αποτελέσματα εντός επαρκούς χρονικού πλαισίου,
β) τις συσκευές παρακολούθησης που χρησιμοποιούνται,
γ) τις χρησιμοποιούμενες μεθόδους βαθμονόμησης (βλ. 8.3).
δ) συχνότητα παρακολούθησης.
στ) αρμοδιότητες και εξουσίες που σχετίζονται με την παρακολούθηση και την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων της παρακολούθησης.
στ) Απαιτήσεις αρχείων και μέθοδοι τήρησης αρχείων
Οι μέθοδοι παρακολούθησης και η συχνότητα πρέπει να είναι σε θέση να ανιχνεύουν πότε γίνεται έγκαιρη υπέρβαση των κρίσιμων επιπέδων, προκειμένου να απομονωθεί το προϊόν πριν χρησιμοποιηθεί ή καταναλωθεί.
1.6.5 Ενέργειες που λαμβάνονται σε περίπτωση υπέρβασης των κρίσιμων ορίων με βάση τα αποτελέσματα της παρακολούθησης.
Οι προγραμματισμένες διορθώσεις και οι διορθωτικές ενέργειες που λαμβάνονται όταν γίνεται υπέρβαση των κρίσιμων ορίων πρέπει να περιγράφονται στο σχέδιο HACCP. Αυτές οι ενέργειες θα πρέπει να διασφαλίζουν ότι εντοπίζεται η αιτία των μη συμμορφώσεων, ότι οι παράμετροι που ελέγχονται στη μονάδα ελέγχου επανέρχονται υπό έλεγχο και ότι αποτρέπεται η επανάληψη της μη συμμόρφωσης (βλ. ενότητα 1.10.2).
Πρέπει να καθιερωθούν και να ακολουθηθούν τεκμηριωμένες διαδικασίες για να διασφαλιστεί ο κατάλληλος χειρισμός των δυνητικά επικίνδυνων προϊόντων και να διασφαλιστεί ότι δεν απελευθερώνονται χωρίς προηγούμενη αξιολόγηση (βλ. 1.10.3).
1.7 Ενημέρωση προκαταρκτικών πληροφοριών και εγγράφων που περιγράφουν το σχέδιο διαχείρισης ασφάλειας και το σχέδιο HACCP.
Μετά την έγκριση του σχεδίου διαχείρισης επιχειρησιακής ασφάλειας (βλ. ενότητα 1.5) ή/και του σχεδίου HACCP (βλ. ενότητα 1.6), ο οργανισμός ενημερώνει τις ακόλουθες πληροφορίες, εάν είναι απαραίτητο:
α) χαρακτηριστικά προϊόντος (βλ. ενότητα 1.3.3).
β) προβλεπόμενη χρήση (βλ. ενότητα 1.3.4).
γ) διαγράμματα αλληλουχίας (βλ. 1.5.5.1).
δ) βήματα διαδικασίας (βλ. 1.3.5.2).
στ) μέτρα ελέγχου (βλ. ενότητα 1.3.5.2).
Εάν είναι απαραίτητο, πρέπει να γίνουν αλλαγές στο σχέδιο HACCP (βλ. ενότητα 1.6.1) και στις διαδικασίες και οδηγίες που περιγράφουν τις προφυλάξεις ασφαλείας (βλ. ενότητα 1.2).
1.8 Σχεδιασμός επαλήθευσης.
Κατά τον σχεδιασμό της επαλήθευσης, πρέπει να καθορίζονται οι στόχοι, οι μέθοδοι, η συχνότητα και οι ευθύνες για τη διεξαγωγή της επαλήθευσης. Οι δραστηριότητες επαλήθευσης θα πρέπει να επιβεβαιώνουν ότι:
α) πραγματοποιούνται BDP (βλ. ενότητα 1.2),
β) τα δεδομένα εισόδου για ανάλυση κινδύνου (βλ. ενότητα 1.3) ενημερώνονται συνεχώς,
γ) τα σχέδια διαχείρισης επιχειρησιακής ασφάλειας (βλ. ενότητα 1.5) και στοιχεία εντός του σχεδίου HACCP (βλ. ενότητα 1.6.1) εφαρμόζονται και είναι αποτελεσματικά,
δ) τα επίπεδα κινδύνου είναι εντός αποδεκτών επιπέδων (βλ. 1.4.2) και
στ) άλλες διαδικασίες που απαιτούνται από τον οργανισμό εφαρμόζονται και είναι αποτελεσματικές.
Το αποτέλεσμα αυτού του σχεδιασμού πρέπει να είναι σε μορφή κατάλληλη για τις μεθόδους λειτουργίας του οργανισμού.
Τα αποτελέσματα της επαλήθευσης πρέπει να καταγράφονται και να αναφέρονται στην ομάδα ασφάλειας τροφίμων.
Τα αποτελέσματα επαλήθευσης πρέπει να παρέχονται για την υποστήριξη της ανάλυσης των αποτελεσμάτων των δραστηριοτήτων επαλήθευσης (βλ. ενότητα 8.4.3).
Εάν το σύστημα επαλήθευσης βασίζεται σε δοκιμές δειγμάτων του τελικού προϊόντος, και εάν αυτή η δοκιμή δειγμάτων αποκαλύψει μη συμμόρφωση με το αποδεκτό επίπεδο κινδύνου (βλ. 1.4.2), οι σχετικές παρτίδες του προϊόντος πρέπει να αντιμετωπίζονται ως δυνητικά επικίνδυνες σύμφωνα με το 1.10.3.
1.9Σύστημα ιχνηλασιμότητας.
Ο οργανισμός καθιερώνει και διατηρεί ένα σύστημα ιχνηλασιμότητας που διασφαλίζει την αναγνώριση των παρτίδων προϊόντων σε σχέση με τις παρτίδες πρώτων υλών, τα αρχεία παραγωγής και προμήθειας.
Το σύστημα ιχνηλασιμότητας πρέπει να μπορεί να αναγνωρίζει το εισερχόμενο υλικό από τον άμεσο προμηθευτή και την αρχική διαδρομή διανομής του τελικού προϊόντος.
Τα αρχεία ιχνηλασιμότητας πρέπει να διατηρούνται για μια καθορισμένη περίοδο για να αξιολογηθεί το σύστημα για να διασφαλιστεί ο χειρισμός δυνητικά επικίνδυνων προϊόντων και σε περίπτωση απόσυρσης του προϊόντος. Τα αρχεία θα πρέπει να τηρούνται σύμφωνα με τις νομικές, νομικές απαιτήσεις και τις απαιτήσεις των πελατών και μπορεί, για παράδειγμα, να βασίζονται στην αναγνώριση παρτίδας του τελικού προϊόντος.
1.10 Διαχείριση μη συμμόρφωσης.
1.10.1 Διορθώσεις.
Ο οργανισμός διασφαλίζει ότι, σε περίπτωση υπέρβασης ενός κρίσιμου ορίου για την CTU (βλ. 1.6.5) ή απώλειας του ελέγχου των λειτουργικών BDP, τα προϊόντα που επηρεάζονται αναγνωρίζονται και ελέγχονται, λαμβάνοντας υπόψη τη χρήση και την απελευθέρωσή τους.
Πρέπει να καθιερωθεί και να ακολουθηθεί μια τεκμηριωμένη διαδικασία. Θα πρέπει να ορίζει:
α) ταυτοποίηση και αξιολόγηση των τελικών προϊόντων που επηρεάζονται για να προσδιοριστεί ο κατάλληλος χειρισμός τους (βλ. 1.10.3) και
β) ανάλυση των διορθώσεων που έγιναν.
Τα προϊόντα που παράγονται σε συνθήκες υπέρβασης των κρίσιμων επιπέδων είναι δυνητικά επικίνδυνα και πρέπει να αντιμετωπίζονται σύμφωνα με την ενότητα 1.10.3. Τα προϊόντα που παράγονται με μη συμμόρφωση με τους κανονισμούς λειτουργικής ασφάλειας πρέπει να αξιολογούνται σχετικά με τα αίτια των μη συμμορφώσεων και τις συνέπειές τους για την ασφάλεια των τροφίμων και, όπου χρειάζεται, να αντιμετωπίζονται σύμφωνα με το σημείο 1.10.3. Η αξιολόγηση πρέπει να καταγράφεται.
Όλες οι διορθώσεις πρέπει να εγκριθούν υπεύθυνο άτομο(από άτομα) και θα πρέπει να καταγράφονται μαζί με πληροφορίες σχετικά με τη φύση των μη συμμορφώσεων, τις αιτίες και τις συνέπειές τους, συμπεριλαμβανομένων των πληροφοριών που είναι απαραίτητες για σκοπούς ιχνηλασιμότητας σχετικά με μη συμμορφούμενες παρτίδες.
1.10.2 Διορθωτικές ενέργειες.
Τα δεδομένα που λαμβάνονται ως αποτέλεσμα της παρακολούθησης των επιχειρησιακών BDP και CTU πρέπει να αξιολογούνται από εξουσιοδοτημένο άτομο με επαρκή γνώση (βλ. ενότητα 6.2) και εξουσιοδότηση (βλ. ενότητα 5.4) για την έναρξη διορθωτικών ενεργειών.
Πρέπει να λαμβάνονται διορθωτικά μέτρα όταν γίνεται υπέρβαση των κρίσιμων ορίων (βλ. ενότητα 1.6.5) ή όταν υπάρχει έλλειψη συμμόρφωσης με το λειτουργικό BPR.
Ο οργανισμός καθιερώνει και εφαρμόζει τεκμηριωμένες διαδικασίες που καθορίζουν τις κατάλληλες ενέργειες για τον εντοπισμό και τη διόρθωση των αιτιών των ανιχνευόμενων μη συμμορφώσεων, την πρόληψη της επανεμφάνισής τους και την επαναφορά της διαδικασίας ή του συστήματος υπό έλεγχο μόλις εντοπιστεί μια μη συμμόρφωση.
Αυτές οι ενέργειες περιλαμβάνουν:
α) ανάλυση μη συμμορφώσεων (συμπεριλαμβανομένων των παραπόνων πελατών)·
β) ανάλυση των τάσεων στα αποτελέσματα της παρακολούθησης που μπορεί να υποδηλώνουν εξέλιξη προς την απώλεια ελέγχου.
γ) τον προσδιορισμό των αιτιών των μη συμμορφώσεων,
δ) αξιολόγηση των αναγκαίων ενεργειών για την αποφυγή επανάληψης μη συμμορφώσεων.
στ) εντοπισμός και εφαρμογή των απαραίτητων ενεργειών.
στ) καταγραφή των αποτελεσμάτων των διορθωτικών ενεργειών που έγιναν και
ζ) ανάλυση των διορθωτικών ενεργειών που έγιναν για να επιβεβαιωθεί η αποτελεσματικότητά τους.
Οι διορθωτικές ενέργειες πρέπει να καταγράφονται.
1.10.3 Χειρισμός δυνητικά επικίνδυνων προϊόντων.
1.10.3.1 Γενικές διατάξεις.
Ο οργανισμός χειρίζεται μη συμμορφούμενα προϊόντα λαμβάνοντας μέτρα για να αποτρέψει τα μη συμμορφούμενα προϊόντα να εισέλθουν στην αλυσίδα παραγωγής τροφίμων μέχρι να βεβαιωθεί ότι:
α) οι κίνδυνοι για τα τρόφιμα έχουν μειωθεί σε καθορισμένα αποδεκτά επίπεδα,
β) οι εν λόγω κίνδυνοι για τα τρόφιμα θα μειωθούν σε καθορισμένα αποδεκτά επίπεδα (βλ. 1.4.2) πριν εισέλθουν στην αλυσίδα παραγωγής τροφίμων, ή
γ) τα προϊόντα συμμορφώνονται με το αποδεκτό επίπεδο του υπό εξέταση κινδύνου για τα τρόφιμα, παρά τη μη συμμόρφωση.
Όλες οι παρτίδες προϊόντων που επηρεάζονται από τη μη συμμόρφωση θα παραμείνουν υπό τον έλεγχο του οργανισμού μέχρι να αξιολογηθούν.
Εάν τα προϊόντα που έχουν χάσει τον έλεγχο του οργανισμού έχουν κριθεί επικίνδυνα, ο οργανισμός πρέπει να ενημερώσει τους κατάλληλους ενδιαφερόμενους και να ξεκινήσει την απόσυρση (βλ. 1.10.4).
ΣΗΜΕΙΩΣΗ. Ο όρος «κατάσχεση» περιλαμβάνει ανακλήσεις τροφίμων.
Τα μέτρα ελέγχου και οι κατάλληλες αντιδράσεις και οι άδειες για το χειρισμό δυνητικά επικίνδυνων προϊόντων πρέπει να τεκμηριώνονται.
1.10.3.2 Αξιολόγηση για την κυκλοφορία προϊόντος.
Κάθε παρτίδα προϊόντων που επηρεάζεται από τη μη συμμόρφωση θα αποδεσμεύεται ως ασφαλής μόνο όταν πληρούται μία από τις ακόλουθες προϋποθέσεις:
α) στοιχεία εκτός του συστήματος παρακολούθησης δείχνουν ότι τα μέτρα ελέγχου ήταν αποτελεσματικά,
β) το συνδυασμένο αποτέλεσμα των μέτρων ελέγχου για το προϊόν επιβεβαιώνεται ότι πληροί το επιδιωκόμενο κριτήριο (δηλαδή τα προσδιορισμένα αποδεκτά επίπεδα σύμφωνα με το σημείο 1.4.2).
γ) Αποτελέσματα δοκιμών δειγμάτων, ανάλυση και/ή άλλες δραστηριότητες επαλήθευσης αποδεικνύουν ότι η παρτίδα προϊόντων που επηρεάζονται από τη μη συμμόρφωση πληροί τα προσδιορισμένα αποδεκτά επίπεδα των εν λόγω κινδύνων.
1.10.3.3 Χειρισμός μη συμμορφούμενων προϊόντων.
Εάν μια παρτίδα προϊόντος δεν είναι αποδεκτή για αποδέσμευση, τότε πρέπει να πραγματοποιηθεί μία από τις ακόλουθες ενέργειες σε αυτήν:
α) επανεπεξεργασία ή περαιτέρω επεξεργασία, εντός ή εκτός του οργανισμού, που εξαλείφει ή μειώνει τον κίνδυνο σε αποδεκτά επίπεδα·
β) καταστροφή ή/και διάθεση ως απόβλητο.
1.10.4 Απόσυρση.
Για τη διασφάλιση και τη διευκόλυνση της πλήρους και έγκαιρης απομάκρυνσης των παρτίδων τελικού προϊόντος που έχουν αναγνωριστεί ως επικίνδυνα:
α) η ανώτερη διοίκηση πρέπει να ορίσει προσωπικό που έχει την εξουσία να ξεκινήσει την απόσυρση και να αναθέσει σε υπεύθυνο προσωπικό να πραγματοποιήσει την απόσυρση, και
β) ο οργανισμός θεσπίζει και εφαρμόζει τεκμηριωμένη διαδικασία για:
1) κοινοποιήσεις σε σχετικά ενδιαφερόμενα μέρη (για παράδειγμα: νομοθετικές και ρυθμιστικές αρχές, πελάτες ή/και καταναλωτές),
2) χειρισμός κατασχεθέντων προϊόντων, καθώς και επικίνδυνων αποστολών προϊόντων που βρίσκονται ακόμη σε αποθήκευση, και
3) καθορισμός της σειράς των απαραίτητων ενεργειών.
Η απομάκρυνση των προϊόντων πρέπει να διασφαλίζεται ή να επιτηρείται έως ότου καταστραφούν, χρησιμοποιούνται για σκοπό διαφορετικό από τον αρχικό τους σκοπό, διαπιστωθεί ότι είναι ασφαλή για τον αρχικό τους σκοπό (ή άλλως) ή υποβάλλονται σε επεξεργασία με τρόπο που να διασφαλίζει ότι είναι ασφαλή.
Πληροφορίες σχετικά με την αιτία, την έκταση και το αποτέλεσμα της απόσυρσης θα πρέπει να καταγράφονται και να αναφέρονται στα ανώτερα στελέχη ως στοιχεία για την επισκόπηση της διοίκησης (βλ. 5.8.2).
Ο οργανισμός επαληθεύει και καταγράφει την αποτελεσματικότητα του προγράμματος απόσυρσης μέσω της χρήσης κατάλληλων μεθόδων (π.χ. προσομοίωση απόσυρσης ή πραγματική απόσυρση).

Κατά τη λήψη δείγματος αέρα για τον προσδιορισμό του επιπέδου μικροβιακής μόλυνσης, είναι απαραίτητο να τηρούνται οι ακόλουθες υποχρεωτικές προϋποθέσεις: το δείγμα αέρα λαμβάνεται όχι νωρίτερα από 30 λεπτά μετά τον καθαρισμό του δωματίου, ενώ τα παράθυρα και οι πόρτες πρέπει να είναι κλειστά, το ύψος του δείγματος πρέπει να αντιστοιχεί στο ύψος του τραπεζιού εργασίας. Ο έλεγχος πρέπει να πραγματοποιείται με αποστειρωμένα τεχνικά ρούχα κατασκευασμένα από ύφασμα χωρίς χνούδι και γάντια.

Πριν φέρετε τη συσκευή σε ένα «καθαρό» δωμάτιο, πρέπει να σκουπιστεί με ένα πανί που δεν αφήνει χνούδι με επεξεργασμένες άκρες, βρεγμένο με αιθυλική αλκοόλη 76%. Η μεταφορά της συσκευής στις εγκαταστάσεις παραγωγής των κλάσεων 1 και 2 και, κατά προτίμηση, της τάξης 3 καθαριότητας θα πρέπει να πραγματοποιείται μέσω αεραγωγού για υλικά. Ο έλεγχος της καθαρότητας του αέρα πρέπει να πραγματοποιείται τουλάχιστον 2 φορές την εβδομάδα πριν και κατά τη διάρκεια διαδικασία παραγωγήςσε προτεινόμενα σημεία.

Προσδιορισμός μικροβιακής ρύπανσης του αέρα εσωτερικών χώρων με τη μέθοδο καθίζησησυνίσταται σε καθίζηση (καθίζηση) μικροχλωρίδας (που βρίσκεται στον αέρα), υπό την επίδραση της βαρύτητας, στην επιφάνεια του θρεπτικού μέσου.

Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται για μια κατά προσέγγιση εκτίμηση της μικροβιακής μόλυνσης του αέρα σε βιομηχανικές εγκαταστάσεις, κυρίως σε δωμάτια με αυξημένη ατμοσφαιρική ρύπανση και σε περιπτώσεις όπου η έρευνα είναι αδύνατη μέθοδος αναρρόφησης(όταν χρησιμοποιείται για την παραγωγή εύφλεκτων ή εκρηκτικών ουσιών).

Σε βιομηχανικούς χώρους, ο έλεγχος της περιεκτικότητας σε μικροοργανισμούς πραγματοποιείται κυρίως σε εκείνους τους χώρους εργασίας όπου βρίσκονται οι πιο πιθανές πηγές μικροβιακής μόλυνσης του αέρα (μέρη με μεγάλο αριθμό προσωπικού, αυξημένο κίνδυνο σχηματισμού σκόνης κ. καθώς και σε περιοχές όπου ουσίες, βοηθητικές ουσίες και το τελικό προϊόν βρίσκονται σε άμεση επαφή με το περιβάλλον.

Η σπορά πραγματοποιείται σε ανοιχτά τρυβλία Petri με άγαρ κρέατος-πεπτόνης (για τον προσδιορισμό του αριθμού των βακτηρίων) και χωριστά με άγαρ Sabouraud (για τον προσδιορισμό του αριθμού των μυκήτων). Τα κύπελλα τοποθετούνται σε πολλά σημεία στις εγκαταστάσεις: σε μακριές και στενές - σε 4 σημεία οριζόντια σε απόσταση όχι μεγαλύτερη από 5 m το ένα από το άλλο. σε δωμάτια έως 15 m2 - σε δύο αντίθετα σημεία του δωματίου. περισσότερα από 100 m2 - σε καθένα από τα 4 απέναντι σημεία και στο κέντρο του δωματίου. Μετά από 10 λεπτά έκθεσης σε ανοιχτή κατάσταση, τα κύπελλα κλείνουν και τοποθετούνται σε θερμοστάτη.

Οι εμβολιασμοί σε άγαρ κρέατος-πεπτόνης επωάζονται σε θερμοκρασία 32,5 ± 2,5 ° C, σε άγαρ Sabouraud - στους 22,5 ± 2,5 ° C για 5 ημέρες.

Λογιστική για τα αποτελέσματα της έρευνας. Για να προσδιοριστεί ο συνολικός αριθμός βακτηρίων (μύκητες) σε 1 m3 αέρα, ο αριθμός των αναπτυσσόμενων αποικιών σε ένα πιάτο πολλαπλασιάζεται με έναν από τους παράγοντες που παρουσιάζονται στον πίνακα «υπολογισμός του αριθμού των μικροοργανισμών σε 1 m3 αέρα σε 10 λεπτά της έκθεσης»:

Για παράδειγμα: 50 αποικίες βακτηρίων αναπτύχθηκαν σε ένα κύπελλο με διάμετρο 10 cm. Σε όρους 1 m3 αέρα, ο συνολικός αριθμός βακτηρίων είναι 50 x 60 = 3000.

Ωστόσο, αυτή η μέθοδος δεν παρέχει πλήρη εικόνα της ποσοτικής περιεκτικότητας των μικροοργανισμών. Αυτό οφείλεται στο γεγονός ότι η καθίζηση των μικροοργανισμών εξαρτάται από την ταχύτητα της κίνησης του αέρα, η οποία μπορεί να διαφέρει σε διαφορετικά σημεία του δωματίου. Επιπλέον, όταν χρησιμοποιείται αυτή η μέθοδος, τα λεπτά κλάσματα βακτηριακού αερολύματος συλλαμβάνονται ελάχιστα και κατά τη σπορά ενός σωματιδίου ενός αερολύματος που περιέχει αρκετούς βιώσιμους μικροοργανισμούς, αναπτύσσεται μόνο μία αποικία, γεγονός που μειώνει τη συνολική μικροβιακή ατμοσφαιρική ρύπανση.

Επομένως, η μέθοδος καθίζησης είναι κατά προσέγγιση για την εκτίμηση του πραγματικού βαθμού μικροβιακής μόλυνσης του εσωτερικού αέρα. Ωστόσο, μπορεί να χρησιμεύσει για τον προσδιορισμό της μικροβιακής μόλυνσης του αέρα με την πάροδο του χρόνου και για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας των συνεχιζόμενων αντιεπιδημικών μέτρων.

Προσδιορισμός μικροβιακής ατμοσφαιρικής ρύπανσης μέθοδος αναρρόφησηςπραγματοποιείται με χρήση δειγματοληπτών αδρανειακού τύπου - κρουστικό εκκρεμές ή συσκευή για βακτηριολογική ανάλυση του αέρα (συσκευή σχισμής του Krotov, εξ ου και ένα άλλο όνομα για τη μέθοδο: μέθοδος σχισμής για τη σύλληψη βακτηρίων). Η λειτουργία της συσκευής βασίζεται στην αρχή ότι ένας πίδακας αέρα χτυπά την επιφάνεια ενός θρεπτικού μέσου, το οποίο τοποθετείται σε ένα τρυβλίο Petri.

Κατά τη χρήση της συσκευής Krotov, ο αέρας αναρροφάται μέσω μιας σχισμής σε σχήμα σφήνας που βρίσκεται ακτινικά πάνω από το τρυβλίο Petri χρησιμοποιώντας έναν φυγοκεντρικό ανεμιστήρα. Ο δίσκος στον οποίο έχει στερεωθεί το τρυβλίο Petri περιστρέφεται με ταχύτητα 1 περιστροφής/δευτερόλεπτο, με αποτέλεσμα ο ενοφθαλμισμός των μικροοργανισμών να γίνεται ομοιόμορφα σε όλη την επιφάνεια του θρεπτικού μέσου.

Η θέση και ο αριθμός των σημείων δειγματοληψίας αέρα καθορίζονται ανάλογα με το μέγεθος του δωματίου (βλ. μέθοδο καθίζησης).

Το πιάτο Petri με το θρεπτικό μέσο τοποθετείται στο δίσκο της συσκευής και το καπάκι κλείνει προσεκτικά χρησιμοποιώντας σφιγκτήρες που είναι τοποθετημένοι στο σώμα του. Η συσκευή είναι συνδεδεμένη στην πρίζα και η ταχύτητα του αέρα ρυθμίζεται χρησιμοποιώντας ένα ροόμετρο - 25 ή 40 l/min. Κατά μέσο όρο, λαμβάνεται δείγμα αέρα για 5 λεπτά με ταχύτητα 40 l/min.

Μετά τη λήψη δείγματος αέρα (από κάθε συγκεκριμένο σημείο σε δύο παράλληλα τρυβλία Petri με MPA και μέσο Sabouraud), τα πιάτα κλείνονται με καπάκια και τοποθετούνται σε θερμοστάτη. Τα θρεπτικά μέσα, οι συνθήκες θερμοκρασίας και ο χρόνος επώασης των καλλιεργειών είναι τα ίδια όπως όταν μελετάται ο αέρας χρησιμοποιώντας τη μέθοδο καθίζησης (βλ. παραπάνω).

Λογιστική για τα αποτελέσματα. Ο υπολογισμός γίνεται σύμφωνα με τον τύπο:

X = a x 1000 / b, όπου X είναι ο αριθμός των μικροοργανισμών σε 1 m3 αέρα. α είναι ο αριθμός των αποικιών που αναπτύχθηκαν στο τρυβλίο Petri μετά την περίοδο επώασης. c είναι ο όγκος του υπό μελέτη δείγματος αέρα, μειωμένος σε φυσιολογικές συνθήκες(δείτε τον τύπο για να φέρετε τον όγκο του αέρα σε κανονικές συνθήκες για τη μέθοδο αναρρόφησης).

Μια άλλη μέθοδος υπολογισμού: μετρήστε τον αριθμό των αποικιών μυκήτων και βακτηρίων που αναπτύχθηκαν σε παράλληλα πιάτα, προσδιορίστε τον αριθμητικό μέσο όρο και πολλαπλασιάστε τον επί 5.

Τα αποτελέσματα που προέκυψαν συγκρίνονται με τα επιτρεπτά όρια μικροβιακής μόλυνσης του αέρα ενός δεδομένου δωματίου σύμφωνα με τους αντίστοιχους πίνακες: "Ταξινόμηση χώρων παραγωγής σύμφωνα με την επιτρεπόμενη περιεκτικότητα σε μικροοργανισμούς και μηχανικά σωματίδια στον αέρα για την παραγωγή αποστειρωμένων προϊόντων" και «ταξινόμηση χώρων παραγωγής μη αποστειρωμένων φάρμακασύμφωνα με τον επιτρεπόμενο αριθμό σωματιδίων και μικροοργανισμών στον αέρα».

Υπολογισμός του ελάχιστου συνολικού όγκου δείγματος αέρασε κάθε σημείο ελέγχου πραγματοποιείται σύμφωνα με μεθοδολογικές συστάσεις για την παρακολούθηση του περιεχομένου μικροοργανισμών και σωματιδίων στον αέρα των βιομηχανικών χώρων (Διάταγμα του Υπουργείου Υγείας της Ουκρανίας με ημερομηνία 14 Δεκεμβρίου 2001 Αρ. 502).