У дома · уреди · Стерилизация и други микробиологични цели. Стерилизация със суха топлина Сушилна фурна и стерилизация с горещ въздух

Стерилизация и други микробиологични цели. Стерилизация със суха топлина Сушилна фурна и стерилизация с горещ въздух

Калциниране на огън.Това е надежден метод за стерилизация, но има ограничена употреба поради разваляне на елементите. Бактериологичните бримки се стерилизират по този начин.

Суха стерилизациятреска. Провежда се в пещ на Пастьор (сухожилие ------

фурна) при температура 160-170°C за 1 час. Този метод се използва за стерилизиране на лабораторни стъклени съдове, пипети, увити в хартия, и епруветки, затворени с памучни тапи. При температури над 170°C започва овъгляване на хартия, вата и марля.

Парна стерилизация под налягане (автоклавиране).Най-универсалният метод за стерилизация. Извършва се в автоклав - водно-парен стерилизатор. Принципът на действие на автоклава се основава на зависимостта на температурата на кипене на водата от налягането.

Автоклавът представлява двустенен метален котел с херметически затворен капак. На дъното на автоклава се налива вода, стерилизиращите се предмети се поставят в работната камера и капакът се затваря, без предварително да се завинтва добре. Включете котлона и оставете водата да заври. Получената пара измества въздуха от работната камера, който излиза през отворения изходен клапан. Когато целият въздух е изместен и от крана излиза непрекъснат поток пара, кранът се затваря и капакът се затваря. Парата се довежда до желаното налягане под контрола на манометър. Температурата на парата зависи от налягането: при нормално атмосферно налягане стрелката на манометъра е на 0 atm. - температура на парата 100°C, при 0,5 атм. - 112°C, при 1 atm. -121°C, при 1,5 atm. - 127°C, при 2 atm. - 134°С. В края на стерилизацията изключете автоклава, изчакайте, докато налягането спадне, постепенно изпускайте пара и отворете капака. Обикновено при налягане от 1 atm. в рамките на 20-40 минути се стерилизират прости хранителни среди и разтвори, които не съдържат протеини и въглехидрати, дресинг, бельо. Материалите, които ще се стерилизират, трябва да са пропускливи за пара. При стерилизиране на материали в големи обеми ( хирургически материали) времето се увеличава до 2 часа. При налягане 2 атм. дезинфекцират патологичен материал и отработени микробни култури.

Хранителните среди, съдържащи захари, не могат да бъдат стерилизирани при 1 atm, тъй като те се карамелизират, така че се подлагат на фракционна стерилизация с течаща пара или автоклавиране при 0,5 atm.

За контрол на режима на стерилизация се използват биологични и физични методи. Биологичният метод се основава на това, че едновременно с материала за стерилизация се поставят спори на Bacillus stearothermophilus, които умират при 121°C за 15 минути. След стерилизация спорите не трябва да растат върху хранителната среда. Физически методсе основава на използването на вещества, които имат определена точка на топене, например сяра (119 ° C), бензоена киселина (120 ° C). Запечатани епруветки, съдържащи веществото, смесено със сухо багрило (фуксин), се поставят в автоклав заедно с материала за стерилизация. Ако температурата в автоклава е достатъчна, веществото ще се стопи и ще промени цвета на багрилото.

Течна стерилизацияПарата се извършва в апарат на Кох или в автоклав с отвинтен капак и отворен изходен клапан. Водата в апарата се загрява до 100°C. Получената пара преминава през вградения материал и го стерилизира. Еднократно третиране при 100°C не убива спорите. Затова се използва метод на фракционна стерилизация - 3 дни подред по 30 минути, между които се оставя за един ден на стайна температура. Затоплянето при 100°C предизвиква термична активация на спорите, в резултат на което те покълват във вегетативни форми до следващия ден и умират при второто и третото нагряване. В резултат на това само хранителни среди могат да бъдат стерилизирани с течаща пара, т.к За да покълнат спорите, е необходимо наличието на хранителни вещества.

Представлява двустенен метален цилиндър, покрит отвън с метален корпус. Затваря се херметически с масивен капак с помощта на няколко винта. Оборудвана е с манометър с предпазен клапан и парен клапан.

Преди стерилизация в автоклава се налива дестилирана вода през фуния с водомерно стъкло до линията, посочена на корпуса. Материалът за стерилизация се зарежда в стерилизиращата камера, затваря се плътно с капак, завинтва се и се включва източникът на топлина. В този случай парният клапан остава отворен. Парата, генерирана при кипенето, преминава между стените на автоклава и навлиза в камерата през отворите във вътрешната стена. При нагряване от автоклава първо излиза въздух през парния клапан, а след това пара. Освобождаването на непрекъснат поток от суха пара показва пълно изместване на въздуха от автоклава: кранът е затворен и от този момент налягането в автоклава започва постепенно да се увеличава, стрелката на манометъра се издига. За начало на стерилизацията се счита моментът, в който стрелката на манометъра достигне желаното налягане.

Фиг.3

Показанието на манометъра съответства на определена температурапара в автоклав: 0,50 MPa - 112 °C, 0,1 MPa - 120, 0,15 MPa - 127, 0,2 MPa - 134 °C.

Материалът в автоклав най-често се стерилизира при 0,1 MPa за 20-30 минути. В края на стерилизацията изключете източника на отопление (стрелката на манометъра постепенно достига нула). След това отворете парния клапан и изпуснете останалата пара. След това внимателно развийте капака и го отворете. След пълно охлаждане извадете стерилизирания материал.

Автоклавът може да се използва за стерилизиране на съдове, инструменти, хранителни среди (с изключение на желатин и въглехидратни среди), превръзки и др. При работа трябва да спазвате правилата за безопасност. До работа се допускат лица, притежаващи удостоверение за право на ползване на автоклав. Изправността на автоклава се проверява от котелна инспекция.

Апаратът на Кох (фиг. 4) представлява метален цилиндър, облицован отвън с материал (линолеум, азбест), който не провежда топлина добре. На дъното се налива вода и върху стойката се поставя стерилизиращият материал. Уредът се затваря с коничен капак, който има отвори за термометър и отвор за пара. На дъното има кран за източване на водата. Стерилизацията се извършва с течаща пара при 100 °C за 30-60 минути. При този режим умират вегетативни клетки на спорообразуващи и неспорообразуващи форми на микроби. Фракционната стерилизация (три пъти) за 30-60 минути в продължение на три дни с интервал от 18-20 часа ви позволява да създадете условия за покълване на спори във вегетативни клетки и да се отървете от тях. В интервалите от време между стерилизацията спорите покълват и умират при последващо нагряване. Апаратът на Кох стерилизира онези материали, които не могат да издържат на температури над 100 °C (желатин, мляко, въглехидратни среди и др.).

Протеинова среда и кръвен серум, които не могат да понасят температури от 100 °C, се стерилизират фракционно при 56-58 °C във водна баня.

Шкаф за сушене (Фурна на Пастьор) (фиг. 5) е метален двустенен шкаф, покрит с азбест отгоре. Горната стена има отвори за термометър и вентилация. Загрятият въздух се издига отдолу между стените и през горния отвор влиза в шкафа, където върху рафтовете се поставя материалът за стерилизация. Стерилизацията се извършва на суха топлина при 150 °С за 2 часа, при 165-170 °С - 45 мин., при 180 °С - 15 мин. Стъклените изделия се стерилизират в пещ на Пастьор.След стерилизацията шкафът се изключва от източник на отопление и се отваря само след пълно охлаждане.

Бактериални филтриизползва се за стерилизиране на течности без нагряване. Те включват свещи Chamberlant, Berkefeld и азбестови филтри (плочи) Seitz.

Филтърните свещи (фиг. 6) са кухи цилиндри, изработени от фино порести вещества: каолин с примес кварцов пясък(свещи Chamberlant) и инфузорна пръст (свещи Berkefeld). Свещите Chamberlant имат различни размерипори, през които преминават микробите. Свещите, които позволяват преминаването на големи бактерии, се обозначават с буквите L9, L1(bis), L3, средните - L5, L7, най-малките - L9, Л11 , Л13 Свещите Berkefeld се обозначават с порьозност У, н, V(свещите с марка U са с най-големи пори).

Филтрите Seitz са азбестови плочи с различни размери. При монтиране на уреда за стерилизация плочата се поставя върху мрежата между метални дискове(с дупка в средата), които се притискат плътно с винтове. Монтираният филтър се вкарва през запушалка в колба със страничен изход (бунзенова колба) и гумена тръба, увита в хартия и стерилизирана в автоклав при 120 °C за 20-30 минути.

За да филтрирате материала, създайте вакуум в Бунзенова колба, като свържете към нея гумена тръба с разредено масло ръчна помпаКомовски или електрическа вакуумна помпа.

Завършване на работата. Микробите се култивират при оптимални температурни условия. За тази цел в лабораториите се използват въздушни или водни термостати.

(фиг. 7) е метален шкафс двойни стени, между които има слой вода или въздух. Външната част на термостата е покрита с материал, който провежда лошо топлина (азбест, линолеум).

Ориз. 4, 5, 6.

Вътре в термостата има рафтове за поставяне на посевен материал от отглеждани микроорганизми. Постоянна температура в термостата се поддържа с помощта на термостат, който е вграден в горния капак на термостата. Термостатното устройство се основава на принципа на линейното разширение на веществата. Терморегулаторите са сплав от всеки два метала с различни коефициенти на топлинно разширение (месинг, цинк) или метална „възглавница“, пълна с алкохол, смес от алкохол и етер, живак или други вещества, които променят обема си при определена температура. Когато термостатът се нагрее над установената норма, металите се разширяват, контактите се отварят и по-нататъшният топлинен поток автоматично се забавя. След спадане на температурата се включва електричествои потокът от топлина се възобновява.

Стерилизация със суха топлина или горещ въздух се извършва в пещи на Пастьор (сушене пещи със сухо нагряване). Фурната Pasteur е двустенен шкаф, изработен от топлоустойчиви материали - метал и азбест. Загрейте шкафа с газови горелкиили електрически нагреватели. Шкафовете с електрическо отопление са оборудвани с регулатори, които гарантират необходимата температура. За контрол на температурата има термометър, поставен в отвора в горната стена на шкафа.

Сухата топлина се използва за стерилизиране на лабораторни стъклени съдове. Съдовете, подготвени за стерилизация, се зареждат свободно във фурната, за да се осигури равномерно и надеждно нагряване на материала, който се стерилизира. Затворете плътно вратата на шкафа, включете нагревателя, доведете температурата до 160-165 ° C и стерилизирайте при тази температура за 1 час.В края на стерилизацията изключете отоплението, но не отваряйте вратата на шкафа, докато не фурната е изстинала; в противен случай студен въздух, влизането в шкафа може да причини пукнатини в горещите съдове за готвене.

Стерилизацията във фурната на Пастьор може да се извърши при различни температурни условияи експозиция (време на стерилизация) (Таблица 1).


Таблица 1. Режим на стерилизация

Течности (хранителни среди, изотоничен разтвор на натриев хлорид и др.), Предмети от каучук и синтетични материали не могат да бъдат стерилизирани със суха топлина, тъй като течностите кипят и се изливат, а каучукът и синтетичните материали се стопяват.

За да се контролира стерилизацията в пещ на Пастьор, копринените нишки се навлажняват в култура от спорообразуващи бактерии, изсушават се, поставят се в стерилна паничка на Петри и се поставят в пещ на Пастьор. Стерилизацията се извършва при температура 165°С за 1 час (за контрол част от конците се оставят на стайна температура). След това стерилизираните и контролните нишки се поставят върху повърхността на агара в петриево блюдо или се поставят в епруветки с бульон и се инкубират в термостат при 37°С в продължение на 2 дни. При правилна работаПещ на Пастьор в епруветки или съдове с хранителни среди, където са поставени стерилизирани нишки, няма да има растеж, тъй като бактериалните спори ще умрат, докато бактериалните спори върху нишки, които не са били стерилизирани (контрола), ще покълнат и ще бъде отбелязан растеж върху хранителните среди .

За да определите температурата във фурната на Пастьор, можете да използвате захароза или гранулирана захар, която се карамелизира при температура 165-170 ° C.

Подготовка на лабораторна стъклария за стерилизация в пещ на Пастьор. Преди стерилизация лабораторните съдове от стъкло (Петриеви панички, градуирани и пастьорови пипети, флакони, колби, епруветки) трябва да бъдат добре измити, подсушени и опаковани в хартия, в противен случай след стерилизация те могат отново да се заразят с въздушни бактерии.



Петриевите блюда се опаковат в хартия едно или повече парчета наведнъж или се поставят в специални метални кутии.

В горните краища на пипетите се поставят памучни тампони, за да се предотврати навлизането на тестовия материал в устата. Градуираните пипети се увиват в дълги ивици хартия с ширина 4-5 см. Обемът на увитата пипета се отбелязва върху хартията. В моливниците градуираните пипети се стерилизират без допълнително опаковане в хартия.

Забележка. Ако градуирането на пипетите е слабо видимо, то се възстановява преди стерилизация. Нанесете върху пипета маслена бояи, без да се оставя боята да изсъхне, в нея се втрива прах от бариев сулфат с кърпа. След това отстранете с парцал излишната боя, която остава само в прорезите. Обработените по този начин пипети трябва да се изплакнат.

Острите краища на пастьоровите пипети се затварят в пламъка на горелка и се увиват в хартия, по 3-5 парчета наведнъж. Пипетите на Пастьор трябва да се опаковат внимателно, за да не се счупят запечатаните краища на капилярите.

Флакони, колби, епруветки се затварят с памучно-марлени запушалки. Корковата тапа трябва да влезе в гърлото на съда на 2/3 от дължината му, не много стегнато, но и не хлабаво. Върху запушалките на всеки съд (с изключение на епруветките) се поставя хартиена капачка. Епруветките се завързват една в друга в групи от 5-50 и се увиват с хартия.

Забележка. При високи температурихартията, в която са опаковани чашите и пипетите, и памучната вата пожълтяват и дори могат да се овъглят, така че всички нов сортхартията, получена от лабораторията, трябва да бъде тествана при приетите температурни условия.

Контролни въпроси

1. Какво се разбира под термина стерилизация?

2. Как се извършва стерилизацията?

3. Какво се стерилизира чрез калциниране на огън?

4. Опишете устройството и режима на работа на пещта на Пастьор.

5. Какво се стерилизира във фурната на Пастьор?

6. Как се подготвят стъклените съдове за стерилизация?

7. Защо хранителните среди и гумените предмети не могат да бъдат стерилизирани в пещ на Пастьор?

Упражнение

Подгответе петриеви панички, градуирани пипети, пипети на Пастьор, епруветки, колби и флакони за стерилизация.

Стерилизация- безплодие; унищожаване на патогенни и непатогенни микроорганизми във вегетативна и спорова форма във всякакъв материал.

Подготовка на съдове за стерилизация. Стъклариятрябва да бъдат чисто измити и стерилизирани. За измиване използвайте сапун или химически разтвори перилни препарати. Новите ястия се варят предварително в 1-2% разтвор на солна киселина, за да избегнете последващо излугване на стъклото. Измитите в течаща вода съдове се изплакват с дестилирана вода и се изсушават.

Бактериологични епруветки. Коничните, матирани колби се затварят с памучно-марлени запушалки, състоящи се от плътно усукани ролки памучна вата, покрити със слой марля. Разработени са и метални запушалки под формата на външни капачки за бактериологични епруветки. Трябва да се има предвид, че стерилизирането на памучни тампони при високи температури води до отделяне на вещества от памучната вата, които потискат растежа на някои чувствителни бактерии, като Brucella.

Когато инсталирате пипети, поставете памучен тампон в горния край. Пипетите на Пастьор трябва да имат запечатана капилярка. Всяка мерителна пипета се увива в дълга хартиена лента с ширина 4-5 cm, започвайки от чучура, спираловидно по цялата й дължина. Пипетите на Пастьор са опаковани в хартия, по 10-20 броя, епруветки - по 15-20 броя. По-добре е да съхранявате всички видове пипети преди и след стерилизация в специални метални кутии. Запушалките на колбите са допълнително покрити с хартиени капачки.

Преди стерилизация чистите, сглобени петриеви панички се опаковат в хартия, по 3 до 4 броя всяка. След стерилизация хартията предпазва стерилната стъклария от замърсяване с микрофлора.

Преди стерилизация съдовете се поставят в сушилнята не плътно, за да се осигури циркулация на въздуха, като се внимава температурата да не надвишава 180°С, тъй като при по-висока температура хартията и памукът се овъгляват. След приключване на стерилизацията сушилният шкаф не се отваря дотогава. Докато температурата в него падне до 70-80?С, т.к рязък спадтемпературите могат да причинят счупване на стъклото.

Ако съдовете са предназначени за стерилизация на хранителните среди в тях чрез автоклавиране под налягане най-малко 1 atm, тогава те не са предварително стерилизирани. При стерилизиране на среда с течаща пара или в автоклав под налягане не повече от 0,5 atm. Трябва да се използват стерилни контейнери.

Стерилизация със сух загрят въздух. Методът се използва за стерилизиране на чисти стъклени съдове. За целта се използва пещ на Пастьор - специален сушилен шкаф с двойни стени. Отвън е облицована с термоустойчив материал. В горната част има термометър. Между термоустойчивата подплата и вътрешната част метален корпусНа дъното е поставен автоматичен електрически нагревател. Когато сушилният шкаф е включен, въздухът в него се нагрява. След достигане на зададената температура се отбелязва началният час на стерилизацията. Режим на стерилизация: при температура 155-160 ° C - експозиция за 2 часа, при 165-170 ° C - 1-1,5 часа, при 180 ° C - 1 час След времето за стерилизация нагряването се спира.

Автоклавиране. Това е парна стерилизация под налягане, комбинирана с висока температура специален апарат- автоклав. Когато наситената пара срещне по-хладен обект, парата кондензира във вода, което води до освобождаване на голям бройтоплина. Освен това се намалява обемът на парата, което улеснява проникването й във вътрешните части на материала, който се стерилизира. Задължително условие е подаването на наистина наситена пара, така че контактът й със студен предмет да доведе до незабавна кондензация и нагряване. Индустрията произвежда вертикални и хоризонтални автоклави.

Вертикалният автоклав е двустенен цилиндричен метален котел, запечатан с капак. Водата се излива между стените през специален кран с фуния до определено ниво. Вътрешната стена на котела е снабдена с отвори в горната част и кран в долната част, през който при нагряване на водата парата измества въздуха от котела. Върху автоклава се поставя метална защитна рамка, която трябва да има между нея и самия автоклав свободно пространство. Автоклавът се загрява чрез свързване към електрическата мрежа.

Автоклавът се зарежда с материала за стерилизация, капакът и кранът, през който е налята вода, се затварят, а долният кран временно се оставя отворен. Нагрятата вода между стените на автоклава кипи, получената пара се издига нагоре и преминава през горните отвори на вътрешната стена в котела, изтласквайки въздуха през долния отворен кран. Когато целият въздух е изместен и парата започне да излиза в равномерна струя, долният клапан се затваря. В резултат на това налягането на парата вътре в автоклава се увеличава. За начало на стерилизация се счита моментът, в който налягането достигне зададена стойност (според манометъра). Топлината се регулира по време на стерилизацията, като налягането на парата се поддържа на същото ниво. Ако налягането вътре в автоклава се повиши прекомерно, има предпазен клапан, през който автоматично излиза излишната пара.

С увеличаването на налягането на парата температурата в автоклава се повишава съответно.

Манометърът показва налягането на парата, без да отчита околната среда атмосферно налягане(760 mmHg). След изтичане на времето за стерилизация автоклавът се изключва. След охлаждане, когато показанието на манометъра е нула, отворете клапана, за да изпуснете пара.

Хоризонталният автоклав се различава от вертикалния по дизайн, но принципът му на работа е същият.

вирусологична стерилизация патологично животно

Образци на формуляри, които се попълват при изпращане на патологичен материал в лабораторията

1. Фламбиране(от лат. flamma - пламък и фр. flamb é - изгаряне) - стерилизация чрез калциниране на малки метални или стъклени предмети в пламък. По този начин се стерилизират бактериологични бримки, метални пинсети, стъклени шпатули и тръбички, предметни стъкла и др.Температурата на пламъка е около 1000ºC. При калциниране всички микроорганизми (вегетативни и спорови форми) изгарят. Това е бърз и надежден метод за стерилизация.

2. кипене. Е един от най прости начинистерилизация. Извършва се в стерилизатор - метален правоъгълна кутияс капак и мрежа на дъното за поставяне на стерилизирани предмети. Налейте вода и я загрейте до кипене (на електричество или на огън). Варенето може да продължи от 15-30 минути до 2 часа при температура около 100 ºС. Стерилизирайте малки метални или стъклени предмети - спринцовки, игли, стъклени тръби и др. В този случай загиват вегетативни форми на микроорганизми и някои спори. Практикува се и попарване на стерилизирания материал с вряща вода.

3. Стерилизация със суха топлина.Произвежда се с горещ въздух в пещ или пещ на Пастьор. Фурната на Пастьор е шкаф с двойни стени, облицован с азбест отвън за топлоизолация. Вътре в шкафа има метални рафтовес отвори, върху които се поставя материалът за стерилизация. Електрическо отопление. Стерилизацията се извършва при температура 160-180 ºС за 1-2 часа от момента на достигане на тези температури (контролира се с термометър). Сухата топлина се използва за стерилизиране предимно на стъклени съдове - петриеви панички, пипети, шпатули (увити в хартия), както и епруветки и колби. Тази техника е надеждна - неспоровите и споровите форми на микроорганизмите умират. Опакован в хартия и стерилизиран, материалът може да се съхранява.

4. Стерилизация с течаща пара. Провежда се горещо влажен въздухв апарата на Кох. Апаратът на Кох (котел) е метален цилиндър, който може да бъде на крака и покрит с линолеум. В апарата се налива толкова вода, че да не стига до перваза, върху който се поставя метален кръг с дупки и върху него се поставя материалът за стерилизация. Апаратът се затваря плътно с коничен капак с отвор в средата за излизане на парата и се нагрява на огън. Когато водата заври, гореща водна пара с температура около 100 ºС ще „потече” със силна струя от отвора на капака. От този момент се отбелязва началният час на стерилизацията. Стерилизацията с течаща пара продължава от 45 минути до 1,5 часа в зависимост от обема на материала, който се стерилизира. Стерилизирайте хранителни среди, които не могат да се нагряват над 100 ºС, например MPG (при температури над 100 ºС се втечняват и не се втвърдяват). Този метод на стерилизация не е напълно надежден - само вегетативните форми на микроорганизмите умират напълно, но спорите се запазват. За постигане на пълна стерилизация на средата в апарата на Кох се използва фракционна стерилизация.

5. Парна стерилизация под налягане (автоклавиране).Извършва се с наситена водна пара в автоклав. Има автоклав различни дизайни. Вертикалният автоклав е масивен двустенен котел, обграден отвън с метален корпус, с тежък шарнирен капак, който е здраво завинтен към котела. В долната част на котела има фуния и кран, през които се налива вода в свободното пространство между вътрешния бойлер и корпуса. Материалът за стерилизация се поставя на дъното на котела, капакът се завинтва добре и се включва електрическото отопление. Когато водата заври, парата преминава във вътрешния котел. Налягането в автоклава се повишава и в същото време температурата се повишава. Когато манометърът покаже, че налягането в котела е достигнало зададената стойност, отбележете началния час на стерилизацията. Налягането се поддържа на определено ниво с помощта на предпазен клапан.

Обикновено в лабораторната практика стерилизацията под налягане се извършва при 1,5-2 atm и температура около 115-120 ºС за

20-30 мин. След изтичане на времето за стерилизация нагряването се спира, парният клапан се отваря и парата се изпуска. Стерилизирайте с пара под налягане хранителни среди MPB, MPA, стъклени съдове с вода, превързочен материал, хирургически инструментиАвтоклавирането е бърз и надежден метод за стерилизация, който убива всички форми на микроорганизми, дори и най-устойчивите спори.

6. Пастьоризация.Този метод на частична стерилизация е кръстен на френския учен Л. Пастьор, който го предлага. Методът е, че течността, излята в стерилен съд, се нагрява на водна баня при температура 60-90 ºС за

10-30 мин. Подходящ за течни среди, които променят своите физикохимични характеристикипри високи температури. Пастьоризират се мляко, сметана, вино, бира, сокове и др.. В същото време витамините и вкусови качествапродукти. Пастьоризирани продукти дългосрочно съхранениене подлежат, тъй като при този метод на стерилизация умират само вегетативни форми на микроорганизми и остават спори. В лабораторната практика този метод се използва главно за разделяне на спорообразуващите видове от неспорообразуващите.

7. Фракционна стерилизация. Основава се на обработване на материала за стерилизация на няколко етапа. Фракционното може да бъде варене или стерилизация с течаща пара в апарат на Кох. Обикновено стерилизацията се извършва в продължение на 3 дни по 30 минути дневно, като се използва един от посочените методи, като в почивките средата се оставя на стайна температура. Това се прави, за да се провокира растежа на спорите във вегетативни форми и тяхното унищожаване при последващи обработки, което повишава надеждността на тези техники.

8. Тиндализация.Това е вид фракционна стерилизация (фракционна пастьоризация). Техниката е кръстена на английския учен Д. Тиндал, който я предлага. Провежда се на водна баня при температура 56-58 ºС за 1 час, повтаря се 5-7 пъти след 24 ч. В интервалите между нагряванията материалът се поддържа при стайна температура. Тиндализацията се извършва върху хранителни среди, които са бедни на микроорганизми и също така съдържат вещества, които лесно се разрушават и денатурират при температури над 60 ºC (протеини, витамини). Това са кръвен серум, яйца и др. В резултат на тиндализацията се постига пълно унищожаване на микроорганизмите.