Metode aspirasi mikrobiologi pengambilan sampel udara. Merencanakan dan menciptakan produk yang aman. Diagnosis infeksi virus

Mikroorganisme adalah makhluk kecil, sebagian besar bersel tunggal, dan tersebar luas di alam. Mereka ditemukan di semua lingkungan (udara, tanah, air), di tubuh manusia dan hewan, dan di tumbuhan.

Keanekaragaman kualitatif dan jumlah mikroorganisme terutama bergantung pada senyawa nutrisi. Namun kelembaban, suhu, aerasi, paparan sinar matahari dan faktor lainnya juga penting.

Metode penelitian mikrobiologi sanitasi lingkungan alam memungkinkan Anda mengidentifikasi keberadaan mikroorganisme patogen, menentukan kuantitasnya dan, sesuai dengan hasil yang diperoleh, mengembangkan tindakan untuk menghilangkan atau mencegah penyakit menular. Selain itu, penghitungan kuantitatif diperlukan untuk memodelkan ekosistem dan mengembangkan prinsip-prinsip pengelolaan proses alam. Mari kita pertimbangkan lebih jauh apa itu.

Tanah

Hal ini dianggap oleh para ilmuwan sebagai salah satu cara penularan patologi menular. Mikroorganisme patogen menembus tanah dengan sekresi orang atau hewan yang sakit. Beberapa di antaranya, khususnya yang mengandung spora, mampu bertahan hidup di dalam tanah dalam waktu yang lama (terkadang beberapa dekade). Patogen seperti ini masuk ke dalam tanah infeksi berbahaya, seperti tetanus, antraks, botulisme, dll. Metode pengujian sanitasi dan mikrobiologi tanah memungkinkan Anda menentukan “nomor mikroba” (jumlah mikroorganisme dalam satu gram tanah), serta indeks coli (jumlah E. coli).

Analisis tanah: informasi umum

KE metode penelitian mikrobiologi tanah Pertama-tama, mikroskop langsung dan pembenihan mikroorganisme padat harus dipertimbangkan.Populasi mikroorganisme dan kelompoknya yang menghuni tanah berbeda dalam posisi taksonomi dan fungsi ekologis. Dalam ilmu pengetahuan mereka disatukan dalam istilah umum “biota tanah”. Tanah merupakan habitat bagi sejumlah besar mikroorganisme. Ada 1 hingga 10 miliar sel mereka dalam satu gram tanah. Dalam lingkungan ini, penguraian zat organik secara aktif terjadi dengan partisipasi berbagai mikroorganisme saprofit.

Metode mikroskopis penelitian mikrobiologi: tahapan

Analisis lingkungan dimulai dengan pengambilan sampel. Caranya, gunakan pisau yang sudah dibersihkan sebelumnya dan dilap dengan alkohol (bisa menggunakan sekop). Setelah itu, sampel disiapkan. Langkah selanjutnya adalah menghitung sel pada apusan yang diwarnai. Mari kita lihat setiap tahap secara terpisah.

Contoh

Saat menganalisis tanah subur, biasanya, sampel diambil dari kedalaman seluruh lapisan. Pertama, 2-3 cm bagian atas tanah dihilangkan, karena mungkin terdapat mikroflora asing di dalamnya. Setelah itu, monolit diambil dari area tanah yang diteliti. Panjang masing-masingnya harus sesuai dengan ketebalan lapisan tempat sampel akan diambil.

Di sebidang 100-200 meter persegi. m 7-10 sampel diambil. Setiap beratnya sekitar 0,5 kg. Sampel harus tercampur rata di dalam kantong. Setelah itu diambil sampel sedang dengan berat kurang lebih 1 kg. Itu harus ditempatkan dalam kantong perkamen (steril), dimasukkan ke dalamnya tas kain. Sampel disimpan di lemari es sampai segera dianalisis.

Mempersiapkan studi

Campuran tanah dituangkan ke gelas kering. Pertama-tama harus dibersihkan dengan alkohol dan dibakar di atas kompor. Dengan menggunakan spatula, tanah tercampur rata dan disebar secara merata. Sangat penting untuk menghilangkan akar dan unsur asing lainnya. Pinset digunakan untuk ini. Sebelum bekerja, pinset dan spatula dipanaskan di atas kompor dan didinginkan.

Porsi kecil dipilih dari berbagai area tanah yang didistribusikan di atas kaca. Mereka ditimbang dalam cangkir porselen dengan timbangan teknis. Tahap wajib mikroskopis metode penelitian mikrobiologi adalah pemrosesan sampel khusus. Perlu menyiapkan 2 botol steril terlebih dahulu. Kapasitasnya tidak boleh melebihi 250 ml. 100 ml air keran dituangkan ke dalam salah satu labu. Ambil 0,4-0,8 ml cairan dari dalamnya dan basahi sampel tanah hingga menjadi seperti pasta. Campuran tersebut harus digosok dengan jari atau alu karet selama 5 menit.

Dengan menggunakan air dari labu pertama, massa tanah dipindahkan ke labu kosong. Kemudian digosok lagi. Setelah itu, massa dipindahkan ke labu dekat nyala api pembakar. Wadah yang berisi suspensi tanah dikocok di atas kursi goyang selama 5 menit. Setelah itu, dibiarkan selama kurang lebih 30 detik. Hal ini diperlukan agar partikel besar dapat mengendap. Setelah setengah menit, massa digunakan untuk menyiapkan obat.

Menghitung sel pada apusan tetap

Pemeriksaan mikroskopis langsung terhadap tanah dilakukan dengan menggunakan metode penelitian mikrobiologi, dikembangkan oleh Winogradsky. Dalam volume tertentu suspensi yang disiapkan dihitung jumlah sel mikroorganisme. Mempelajari apusan tetap memungkinkan Anda menyimpan sediaan untuk waktu yang lama dan melakukan perhitungan kapan saja.

Persiapan obat dilakukan sebagai berikut. Suspensi dengan volume tertentu (biasanya 0,02-0,05 ml) dioleskan menggunakan mikropipet ke kaca objek. Setetes larutan agar-agar (campuran polisakarida agaropektin dan agarosa yang diekstraksi dari ganggang coklat dan merah Laut Hitam) ditambahkan ke dalamnya, dicampur dengan cepat dan didistribusikan ke area seluas 4-6 meter persegi. cm Apusan dikeringkan di udara dan difiksasi selama 20-30 menit. alkohol (96%). Selanjutnya obat dibasahi dengan air suling dan dimasukkan ke dalam larutan karbol eritrosin selama 20-30 menit.

Setelah diwarnai, dicuci dan dikeringkan di udara. Penghitungan sel dilakukan dengan tujuan perendaman.

Menabur pada media padat

Mikroskopis metode penelitian mikrobiologi memungkinkan identifikasi sejumlah besar mikroorganisme. Namun, meskipun disemai, ini dianggap yang paling umum dalam praktiknya. Esensinya adalah menaburkan sejumlah volume sediaan (suspensi tanah) ke dalam cawan petri pada media padat.

Ini metode penelitian mikrobiologi memungkinkan untuk memperhitungkan tidak hanya kuantitas, tetapi juga kelompok, dan dalam beberapa kasus, komposisi spesies flora mikroskopis. Jumlah koloni biasanya dihitung dari dasar cawan Petri dalam cahaya yang ditransmisikan. Sebuah titik ditempatkan pada area yang dihitung dengan spidol atau tinta.

Analisis air

Mikroflora suatu badan air, pada umumnya, mencerminkan komposisi mikroba tanah di sekitarnya. Dalam kasus ini metode penelitian sanitasi-mikrobiologi air dan tanah sangat penting secara praktis ketika mempelajari keadaan ekosistem tertentu. Perairan tawar biasanya mengandung kokus, bakteri berbentuk batang.

Anaerob ditemukan dalam jumlah kecil di air. Biasanya, mereka berkembang biak di dasar waduk, di lumpur, mengambil bagian dalam proses pemurnian. Mikroflora lautan dan lautan terutama diwakili oleh bakteri yang menyukai garam (halofilik).

Praktis tidak ada mikroorganisme di dalam air sumur artesis. Hal ini disebabkan kemampuan penyaringan lapisan tanah.

Diterima secara umum metode penelitian mikrobiologi air Penentuan jumlah mikroba dan titer coli atau indeks coli dipertimbangkan. Indikator pertama mencirikan jumlah bakteri dalam 1 ml cairan. Indeks coli adalah jumlah E. coli yang ada dalam satu liter air, dan titer coli adalah jumlah minimum atau maksimum pengenceran cairan yang masih dapat dideteksi.

Penentuan nomor mikroba

Cara pemeriksaan mikrobiologi sanitasi air adalah sebagai berikut. Dalam 1 ml air, tentukan jumlah anaerob fakultatif dan aerob mesofilik (menengah) yang mampu tumbuh pada agar pepton daging (media nutrisi utama) pada suhu 37 derajat. sepanjang hari, membentuk koloni yang terlihat pada perbesaran 2-5 r. atau dengan mata telanjang.

Tahapan kuncinya metode penelitian mikrobiologi air sedang menabur. Dari setiap sampel, setidaknya 2 volume berbeda diinokulasi. Tambahkan 1-0,1 ml cairan bersih dan 0,01-0,001 ml cairan terkontaminasi ke dalam setiap cangkir. Untuk inokulasi 0,1 ml atau kurang, cairan diencerkan dengan air suling (steril). Pengenceran sepuluh kali lipat disiapkan berturut-turut. 1 ml dari masing-masingnya ditambahkan ke dua cawan Petri.

Pengenceran diisi dengan agar nutrisi. Pertama-tama harus dicairkan dan didinginkan hingga 45 derajat. Setelah pencampuran aktif, media dibiarkan permukaan horisontal untuk pengerasan. Pada 37 derajat. tanaman ditanam sepanjang hari. Dipertimbangkan metode pengujian air mikrobiologi memungkinkan Anda memperhitungkan hasil pada cawan yang jumlah koloninya berkisar antara 30 hingga 300.

Udara

Ini dianggap sebagai media transit bagi mikroorganisme. Utama metode penelitian mikrobiologi udara adalah sedimentasi (subsiden) dan aspirasi.

Mikroflora lingkungan udara secara kondisional dibagi menjadi variabel dan konstan. Kelompok pertama meliputi ragi, kokus pembentuk pigmen, basil pembawa spora, batang dan mikroorganisme lain yang tahan terhadap pengeringan dan paparan cahaya. Perwakilan mikroflora variabel, yang menembus ke udara dari habitat biasanya, tidak mempertahankan kelangsungan hidupnya untuk waktu yang lama.

Ada lebih banyak mikroorganisme di udara kota-kota besar dibandingkan di udara lingkungan udara daerah pedesaan. Hanya ada sedikit bakteri di atas laut dan hutan. Curah hujan: salju dan hujan membantu memurnikan udara. Kuman di ruang tertutup jauh lebih banyak dibandingkan di ruang terbuka. Jumlah mereka meningkat di musim dingin karena tidak adanya ventilasi teratur.

Pengendapan

Ini metode penelitian mikrobiologi dalam mikrobiologi dianggap paling sederhana. Hal ini didasarkan pada pengendapan tetesan dan partikel pada permukaan agar-agar dalam cawan Petri terbuka di bawah pengaruh gravitasi. Metode sedimentasi tidak menentukan jumlah bakteri di udara secara akurat. Faktanya adalah cukup sulit untuk menangkap sebagian kecil partikel debu dan tetesan bakteri pada wadah terbuka. Sebagian besar partikel besar tertahan di permukaan.

Metode ini tidak digunakan saat menganalisis udara atmosfer. Lingkungan ini ditandai dengan fluktuasi besar dalam kecepatan gerakan aliran udara. Namun sedimentasi dapat digunakan jika tidak ada instrumen yang lebih canggih atau tidak adanya sumber listrik.

Jumlah mikroba ditentukan dengan menggunakan metode Omeliansky. Menurutnya, dalam 5 menit pada permukaan agar-agar seluas 100 meter persegi. cm jumlah bakteri yang tersimpan dalam 10 liter udara.

Perintah 535 "Tentang penyatuan metode penelitian mikrobiologi"

Patut dikatakan bahwa pemeriksaan mikrobiologi dalam kasus ini umumnya disertai dengan masalah-masalah tertentu. Hal ini disebabkan oleh fakta bahwa di bagian bawah saluran reproduksi biasanya terdapat beragam mikroflora yang berubah pada periode usia yang berbeda. Untuk meningkatkan efisiensi penelitian, aturan terpadu dikembangkan.

Diagnosis infeksi virus

Ini dilakukan dengan metode mengidentifikasi patogen RNA dan DNA. Mereka terutama didasarkan pada penentuan urutan nukleotida dalam bahan patologis. Untuk ini, probe molekuler digunakan. Mereka adalah asam nukleat yang diperoleh secara artifisial, melengkapi asam virus, diberi label radioaktif atau biotin.

Keunikan metode ini adalah penyalinan berulang-ulang dari fragmen DNA tertentu, yang mencakup beberapa ratus (atau puluhan) pasangan nukleotida. Mekanisme replikasi (penyalinan) adalah penyelesaian hanya dapat dimulai pada blok tertentu. Untuk membuatnya, primer digunakan. Mereka adalah oligonukleotida yang disintesis.

Diagnostik PCR (polimerase reaksi berantai) mudah diterapkan. Metode ini memungkinkan Anda memperoleh hasil dengan cepat menggunakan sejumlah kecil bahan patologis. Dengan menggunakan diagnostik PCR, infeksi akut, kronis dan laten (tersembunyi) terdeteksi.

Untuk sensitivitas, metode ini dianggap lebih disukai. Namun, saat ini, sistem pengujian tidak cukup dapat diandalkan, sehingga diagnostik PCR tidak dapat sepenuhnya menggantikan metode tradisional.

Gambar.92. Perangkat Krotov (tampilan umum).
6811‘**8

Gambar.91. Diagram perangkat Krotov, ([-badan silinder; alas 2 badan; 3 motor listrik; 4 kipas sentrifugal; 5-baling-baling berbilah delapan; 6-cakram; 7-pegas; 8-piring Petri; 9-penutup perangkat ; 10-on - kunci lipat; 11-disk kaca plexiglass; slot berbentuk baji T2; 13-cincin split; 14-pas dengan diafragma; 15-tabung keluar.
Yang lebih maju adalah metode penelitian instrumental mikroflora udara menggunakan peralatan Krotov dan penabrak (Gbr. 91, 92, 93). Perangkat Krotov adalah badan silinder, ditutup di atasnya dengan penutup yang dapat dilepas, di mana cawan Petri dengan MPA dipasang pada disk yang berputar, motor listrik ditempatkan di dalam silinder, yang terakhir, berputar dengan kecepatan 4-5 ribu putaran per menit, memastikan pengisapan udara melalui tutup kaca plexiglass, yang memiliki slot atau lubang berbentuk baji. Sebagai hasil dari aliran udara yang bergejolak, piringan dengan cawan Petri berputar di dalam silinder, yang memastikan distribusi mikroflora yang seragam ke seluruh permukaan media nutrisi, dan partikel aerosol dari ketiga fase secara aktif tersedot ke dalamnya. Menggunakan rotameter, yang dirancang untuk menentukan jumlah udara yang dihisap, 50 hingga 200 liter udara dilewatkan melalui perangkat. Setelah pengambilan sampel, cangkir ditutup dan ditempatkan dalam termostat pada suhu 37° selama 24 jam, dan kemudian selama 24 jam pada suhu kamar. Dengan menghitung jumlah koloni yang tumbuh dan mengetahui volume udara yang melewatinya, jumlah mikroba dapat dengan mudah dihitung.
Gambar.93. Diagram penabrak Mei empat tahap (lihat deskripsi di teks).

Impactor adalah perangkat yang dilengkapi dengan tabung dengan nozel berbentuk kerucut - kaskade tempat udara dihisap. Di depan ujung sempit setiap nosel, ditempatkan pelat penerima, yaitu kaca objek yang dilumasi dengan gliserin dan garam. Apakah udara bocor melalui tabung dengan nozel? menyentuh pelat penerima, mikroorganisme menetap di sana. Setelah udara diambil sampelnya, slide dikeluarkan dari alat penabrak dan mikroba yang menetap diperiksa baik menggunakan mikroskop, atau kaca dicuci dengan larutan fisiologis, yang kemudian mikroba tersebut diinokulasi ke media nutrisi.
Metode filtrasi untuk mempelajari udara didasarkan pada penyaringan atau aspirasi (pengisapan) melalui filter khusus, cairan, bubuk, dll, yang menyerap mikroflora.
Filter yang digunakan untuk analisis udara bisa tidak larut - kapas, kertas, membran, milipore, dan larut - gliserol-gelatin, natrium alginat, gula
і
bubuk
Pelat filter yang terbuat dari bahan yang sesuai ditempatkan dalam peralatan Seitz dan sejumlah udara disedot melalui filter menggunakan pompa vakum. Kemudian pelat filter dilepas, direndam dalam larutan fisiologis dan dikocok, mikroorganisme diserap ke dalam larutan dan inokulasi kuantitatif dilakukan ke media nutrisi. Jika bahan larut digunakan sebagai filter, kemudian setelah dihisap udaranya, bahan tersebut dilarutkan dalam larutan fisiologis steril.
Udara dapat dihisap melalui cairan steril (air, larutan garam, kaldu pepton daging, dll.) menggunakan alat Dyakonov (Gbr. 94)
(G
T
VT
Gambar.94. Perangkat Dyakonov

Alat ini terdiri dari silinder kaca berkapasitas 100-200 ml, ke dalam sumbat yang tertutup rapat dimasukkan dua buah tabung kaca, ujung tabung masuk yang panjang berada di bagian paling bawah, dan tabung keluar (pendek) berakhir tepat di bawah sumbat. Saat mempelajari udara, 10-20 ml air dituangkan ke dalam perangkat, manik-manik kaca ditempatkan dan disterilkan. Setelah sterilisasi, tabung saluran keluar dihubungkan ke pompa vakum, yang dipasangi rheometer untuk mengukur volume udara yang melewati alat, dan udara dihisap sebanyak 100-200 liter. Setelah alat dimatikan, ambil 1 ml air yang telah disaring udaranya, masukkan ke dalam cawan Petri steril yang kosong dan tuangkan 15 ml MPA cair (+ 45°). Piring yang diinokulasi diinkubasi dalam termostat pada suhu 37° selama 1-2 hari, kemudian jumlah koloni yang tumbuh dihitung dan, dengan mengetahui volume udara yang disaring, jumlah mikroba dihitung.
Kehadiran mikroorganisme indikatif sanitasi ditentukan di udara dalam ruangan, serta di air dan tanah.
Mereka dikenali sebagai Streptococcus viridans (viridans streptococcus) (tipe L.), Str.haemolyticus (hemolytic streptococcus Staphylococcus aureus, yang memiliki sifat hemolitik. Kehadiran mikroba ini di udara menunjukkan bahwa ia terkontaminasi dengan mikroflora di bagian atas. saluran pernafasan orang. Jumlah mikroorganisme indikatif sanitasi yang dikandungnya
TENTANG
terkandung dalam I m (1000 liter) udara disebut indeks streptokokus.
Untuk mengidentifikasi mikroba udara indikatif sanitasi, semua metode yang dijelaskan di atas digunakan, namun inokulasi dilakukan pada media diagnostik selektif dan diferensial, yang memungkinkan untuk dengan cepat mendeteksi bakteri ini dan memisahkannya dari perwakilan mikroflora udara lainnya. Media tersebut termasuk agar darah, di mana stafilokokus hemolitik dan streptokokus memberikan zona hemolisis (penghancuran sel darah merah), agar garam kuning, dll.
Hasil penilaian udara di lingkungan perumahan pada musim dingin dan musim panas disajikan pada Tabel 10.
Tabel 10
Kriteria penilaian sanitasi udara di tempat tinggal
TENTANG
(jumlah mikroorganisme dalam m pertama udara) Penilaian udara Periode musim panas Periode musim dingin total penghijauan dan total streptokokus organ mikrohemolitik
mikro-
organisasi
viridans dan streptokokus hemolitik Murni 1500 16 4500 36 Terkontaminasi.... 2500 36 7000 124 Tujuan pekerjaan : menentukan jumlah mikroba udara dan kandungan mikroorganisme indikatif sanitasi.
Bahan: Cawan petri dengan MPA, wort agar dan agar darah, alat Krotov.
Kemajuan. I. Menentukan jumlah mikroba dengan metode Koch: biarkan cawan petri berisi MPA, agar darah dan agar wort terbuka di berbagai bagian laboratorium selama 5 menit. Tutup cangkir dan letakkan dalam termostat pada suhu 37°C selama 48 jam. Hitung jumlah koloni yang tumbuh, tentukan jumlah mikroba di udara (lihat di atas).
Tentukan jumlah mikroba dan jumlah mikroorganisme indikatif sanitasi dengan menggunakan alat Krotov. Gunakan pelat MPA, agar darah, dan agar wort. Untuk setiap
cangkir, buang 200 liter udara dengan kecepatan 20-30 l/menit. Setelah mengambil sampel, tutup cangkir dan tempatkan dalam termostat pada suhu 37° selama 48 jam. Hitung koloni yang tumbuh, mikroskopi, siapkan apusan dan warnai dengan Gram. Perhatikan adanya zona hemolisis pada agar darah.
Bandingkan hasil yang diperoleh kedua metode tersebut. Kaji kebersihan udaranya. Sajikan hasilnya dalam bentuk tabel.
Penilaian kesehatan udara
Sedang Jumlah koloni pada cawan saat ditentukan
Metode Koch pada peralatan Krotov
IPA
agar darah, agar wort
Nomor mikroba
Jumlah hijau dan
hemolitik
streptokokus
literatur
Labinskaya A.S. Mikrobiologi dengan teknologi penelitian mikrobiologi. M., 1972.
Pereti L.G. Pentingnya mikroflora normal bagi tubuh manusia. Megiz., 1955.
P i t k i n K.D., Krivoshein V.S. Mikrobiologi.M. ,1980. Mikrobiologi sanitasi. Ed. GP Kalina dan G.K.Chistovich. M., 1969.
Tep V.I. Mikrobiologi sanitasi. 1958.
T saya m a k o v V.D. Mikrobiologi. M., 1973. .

Pengendapan- paling metode lama, banyak digunakan karena kesederhanaan dan ketersediaannya, namun tidak tepat. Metode ini dikemukakan oleh R. Koch dan terdiri dari kemampuan mikroorganisme di bawah pengaruh gravitasi dan di bawah pengaruh pergerakan udara (bersama dengan partikel debu dan tetesan aerosol) untuk menetap di permukaan media nutrisi dalam cawan Petri terbuka. Cangkir dipasang pada titik pengambilan sampel pada permukaan horizontal. Saat menentukan kontaminasi mikroba total, piring dengan agar pepton daging dibiarkan terbuka selama 5-10 menit atau lebih, tergantung pada tingkat dugaan kontaminasi bakteri. Untuk mengidentifikasi mikroba indikatif sanitasi, gunakan media Garro atau Turzhetsky (untuk mendeteksi streptokokus), agar garam susu atau garam kuning telur (untuk mendeteksi stafilokokus), agar wort atau media Sabouraud (untuk mendeteksi ragi dan jamur). Saat menentukan mikroorganisme indikatif sanitasi, cangkir dibiarkan terbuka selama 40-60 menit.

Pada akhir pemaparan, semua cawan ditutup, ditempatkan dalam termostat selama sehari untuk budidaya pada suhu optimal untuk perkembangan mikroorganisme yang diisolasi, kemudian (jika diperlukan penelitian) dibiarkan selama 48 jam pada suhu kamar untuk pembentukan. pigmen oleh mikroorganisme pembentuk pigmen.

Metode sedimentasi memiliki sejumlah kelemahan: hanya sebagian besar aerosol yang mengendap di permukaan medium; koloni seringkali terbentuk bukan dari satu sel, tetapi dari sekelompok mikroba; Hanya sebagian mikroflora udara yang tumbuh pada media nutrisi yang digunakan. Selain itu, metode ini sama sekali tidak cocok untuk mempelajari polusi bakteri di udara atmosfer.

Metode yang lebih maju adalah aspirasi, berdasarkan pengendapan paksa mikroorganisme dari udara ke permukaan media nutrisi padat atau ke dalam cairan perangkap (kaldu daging-pepton, larutan buffer, larutan natrium klorida isotonik, dll.). Dalam praktek layanan sanitasi Saat mengambil sampel aspirasi, alat Krotov, perangkap bakteri Rechmensky, alat pengambilan sampel udara (POV-1), alat pengambilan sampel bakteriologis aerosol (PAB-1), alat presipitator bakteri-virus (BVEP-1), alat Kiktenko, Andersen , Dyakonov, perangkat MB digunakan, dll. Untuk mempelajari atmosfer, filter membran No. 4 juga dapat digunakan, di mana udara dihisap menggunakan peralatan Seitz. Beragamnya instrumen menunjukkan tidak adanya peralatan universal dan tingkat ketidaksempurnaannya yang lebih besar atau lebih kecil.

Perangkat Krotov. Saat ini perangkat ini banyak digunakan dalam studi udara dalam ruangan dan tersedia di laboratorium

Prinsip pengoperasian peralatan Krotov (Gbr. 22) didasarkan pada fakta bahwa udara, yang dihisap melalui celah berbentuk baji pada tutup peralatan, mengenai permukaan media nutrisi, sedangkan partikel debu dan aerosol menempel. ke medium, dan bersamanya mikroorganisme di udara. Cawan petri dengan lapisan tipis Media dipasang pada meja putar peralatan, yang menjamin pemerataan bakteri di permukaannya. Perangkat beroperasi dari listrik. Setelah pengambilan sampel dengan paparan tertentu, cawan dikeluarkan, ditutup dengan penutup dan ditempatkan dalam termostat selama 48 jam. Biasanya pengambilan sampel dilakukan dengan kecepatan 20-25 l/menit selama 5 menit. Dengan demikian, flora dalam 100-125 liter udara ditentukan. Jika mikroorganisme indikatif sanitasi terdeteksi, volume udara yang diuji ditingkatkan menjadi 250 liter.

Sebelum mengambil sampel udara, receiver diisi dengan 3-5 ml cairan pengumpul (air, kaldu daging-pepton, larutan natrium klorida isotonik).

Perangkat Rechmensky Ia bekerja berdasarkan prinsip semprotan: ketika udara melewati lubang sempit corong, cairan dari penerima melalui kapiler dalam bentuk tetesan naik ke dalam silinder. Tetesan cairan selanjutnya dihancurkan, mengenai spatula kaca dan dinding bejana, menciptakan awan tetesan kecil tempat mikroorganisme di udara teradsorpsi. Tetesan cairan yang jenuh dengan bakteri mengalir ke penerima dan kemudian disebarkan kembali, sehingga memastikan penangkapan bakteri dari udara secara maksimal. Selama pengoperasian, perangkat ditempatkan pada sudut 15-25°, yang memastikan cairan pengumpul mengalir ke penerima. Kecepatan pengambilan sampel udara melalui peralatan Rechmensky adalah 10-20 l/menit. Di akhir pekerjaan, cairan diambil dari receiver dengan pipet steril dan diinokulasi (masing-masing 0,2 ml) ke permukaan media nutrisi padat. Keuntungan dari perangkap bakteri Rechmensky adalah efisiensi tinggi penangkapan aerosol bakteri. Kerugian dari perangkat ini adalah sulitnya pembuatannya, sifat perangkat yang dihasilkan tidak standar, kerapuhannya yang besar, dan produktivitas yang relatif rendah.

Keuntungan besarnya adalah produksi serial perangkat ini (yang memungkinkan laboratorium dilengkapi dengannya), portabilitasnya, dan produktivitas yang lebih tinggi (20-25 l/mnt). Labu alat tempat cairan pengumpul ditempatkan terbuat dari kaca plexiglass tahan panas, kapilernya terbuat dari baja tahan karat. Botol semprot dipasang di dalam labu, menyebabkan cairan yang terperangkap tersebar saat udara dihisap. Alat semacam itu memudahkan pembersihan dan sterilisasi labu dengan alat pendispersi hanya dengan merebusnya selama 30 menit (autoklaf tidak dapat diterima, karena menyebabkan deformasi silinder).

Sebelum mengambil sampel udara, tambahkan 5-10 ml cairan pengumpul (paling sering kaldu ekstrak daging) ke dalam labu dan atur pada sudut 10°, yang memastikan drainase alami cairan setelah dispersi. Udara yang melewati labu dan botol semprot menyebabkan terbentuknya tetesan kecil cairan yang memerangkap tempat mikroorganisme menetap. Perangkat POV-1 digunakan untuk mempelajari kontaminasi mikroba umum di udara dalam ruangan, untuk mendeteksi bakteri patogen (misalnya, Mycobacterium tuberkulosis) dan virus pernapasan di udara bangsal rumah sakit.

Pengambil sampel bakteriologis Typhoon P-40 (M) dirancang untuk menentukan kontaminasi bakteri umum di udara dengan isolasi selanjutnya berbagai mikroorganisme patogen dan indikasi sanitasi.

Inokulasi mikroorganisme dari udara sekitar dilakukan melalui lubang yang dikalibrasi pada kompartemen penglihatan ke dalam cawan petri dengan media nutrisi yang dipasang pada meja putar alat. Udara dipompa menggunakan pompa pneumatik putar bakteriologis yang terpasang pada sampler Typhoon R-40 (M); pemasangan pada meja berputar bersifat universal, yang memungkinkan penggunaan cawan Petri dengan berbagai modifikasi.

Dalam sampler bakteriologis "Typhoon" R- 40 (M) memastikan kekencangan ruang internal dan akses mudah ke media uji.

Kecepatan putaran cangkir diatur dengan lancar menggunakan pengatur kecepatan yang terletak di panel depan sampler (Gbr. 23) “Typhoon” R-40 (M).

Sampler bakteriologis aerosol (PAB-1). Mekanisme kerja PAB-1 didasarkan pada prinsip pengendapan elektrostatik partikel aerosol (dan, akibatnya, mikroorganisme) dari udara saat melewati perangkat di mana partikel-partikel ini menerima muatan listrik dan diendapkan pada elektroda dengan tanda yang berlawanan. Elektroda untuk mengumpulkan aerosol ditempatkan pada posisi horizontal palet logam dengan media padat dalam cawan Petri atau media nutrisi cair (15-20 ml). Perangkat ini portabel dengan produktivitas tinggi 150-250 l/mnt, yaitu. dalam 1 jam Anda dapat mengambil 5-6 m3 udara. Direkomendasikan untuk digunakan untuk mempelajari volume udara yang besar ketika mendeteksi mikroorganisme oportunistik dan patogen, misalnya ketika mengidentifikasi patogen infeksi nosokomial (Pseudomonas aeruginosa. Staph, aureus, dll.) di udara kamar rumah sakit, menentukan Salmonella dan Escherichia di udara atmosfer di area sprinkler saat mengairi lahan pertanian dengan air limbah.

Elektropresipitator bakteri-virus (BVEP-1). Perangkat ini didasarkan pada prinsip operasi aspirasi-ionisasi. BVEP-1 terdiri dari ruang presipitasi di mana elektroda dipasang: elektroda negatif dalam bentuk tabung utama tempat masuknya udara (dan partikel aerosol bermuatan negatif), dan positif tempat bakteri menetap.

perangkat MB. Alat ini tidak hanya berfungsi untuk mengetahui kontaminasi mikroba secara umum, tetapi juga untuk mengambil sampel udara dengan partikel aerosol dengan berbagai ukuran. Perangkat MB dibuat berdasarkan prinsip “ayakan” dan merupakan silinder yang dibagi menjadi 6 strip horizontal, yang masing-masing ditempatkan cawan Petri dengan MPA. Udara dihisap mulai dari tahap atas, yang pada pelatnya lubangnya paling besar, dan semakin rendah tahapnya, semakin kecil lubangnya (hanya sebagian kecil aerosol udara yang melewati tahap terakhir). Perangkat ini dirancang untuk menangkap partikel aerosol yang berukuran lebih besar dari 1 mikron pada laju pengambilan sampel udara 30 l/menit. Mengurangi jumlah lubang memastikan distribusi aerosol dari udara yang lebih merata ke seluruh media nutrisi. Untuk menangkap partikel aerosol yang lebih kecil lagi, Anda dapat menambahkan filter tambahan yang terbuat dari bahan filter AFA.

Saat menggunakan salah satu perangkat yang terdaftar, hasil yang diperoleh merupakan perkiraan, namun memberikan penilaian kontaminasi udara yang lebih tepat dibandingkan dengan metode sedimentasi. Karena pengambilan sampel dan studi sanitasi-mikrobiologi udara tidak diatur oleh GOST, perangkat apa pun dapat digunakan untuk menilai polusi udara akibat bakteri. Dalam banyak kasus, pengambilan sampel digabungkan dengan tahap inokulasi.

Untuk mengurangi jumlah mikroorganisme di udara ruang tertutup, cara-cara berikut digunakan: a) kimia - pengolahan dengan ozon, nitrogen dioksida, penyemprotan asam laktat, b) mekanis - melewatkan udara melalui filter khusus, c) fisik - ultraviolet penyinaran.

1.1 Ketentuan Umum.
Organisasi harus merencanakan dan mengembangkan proses yang diperlukan untuk menciptakan produk yang aman.
Organisasi harus melaksanakan, melaksanakan dan memastikan efektivitas kegiatan yang direncanakan dan setiap perubahannya. Hal ini mencakup rencana manajemen keselamatan, serta rencana manajemen keselamatan operasional dan/atau rencana HACCP.
1.2Program dasar (BPR).
1.2.1 Organisasi harus menetapkan, menerapkan dan memelihara program dasar (BPs) untuk mengelola:
a) kemungkinan masuknya faktor-faktor penyebab bahaya produk pangan ke dalam produk melalui lingkungan kerja,
b) kontaminasi biologis, kimia dan fisik pada produk, termasuk kontaminasi silang antar produk, dan
c) tingkat bahaya pada produk dan lingkungan pemrosesannya.
1.2.2 BDP harus:
a) memenuhi kebutuhan organisasi terkait keamanan pangan,
b) sesuai dengan skala dan jenis produksi serta sifat produk yang dihasilkan dan/atau diolah,
c) tertanam dalam jaringan sistem internal produksi, sebagai program yang diterapkan secara universal, atau sebagai program yang diterapkan pada produk atau lini produksi tertentu, dan
d) disetujui oleh kelompok keamanan pangan.
Organisasi harus mengidentifikasi persyaratan undang-undang dan hukum yang relevan dengan hal di atas.
1.2.3 Ketika memilih dan/atau menetapkan PBP, organisasi harus mempertimbangkan dan menggunakan informasi yang relevan [misalnya persyaratan undang-undang dan undang-undang, persyaratan pelanggan, pedoman yang diakui, prinsip-prinsip Codex Alimentarius Commission (Kode), kode praktik, standar nasional, internasional atau industri ].
CATATAN. Lampiran C berisi daftar publikasi Codex yang relevan.
Dalam menetapkan program-program ini, organisasi harus mempertimbangkan hal-hal berikut:
a) desain dan tata letak bangunan dan layanan terkait;
d) tata letak tempat, termasuk tempat kerja dan area pendukung bagi pekerja;
c) pasokan udara, air, listrik dan utilitas lainnya;
d) layanan pendukung, termasuk pengelolaan limbah dan air limbah;
f) kesesuaian peralatan dan aksesibilitasnya untuk pembersihan, pemeliharaan dan pemeliharaan preventif;
f) pengelolaan bahan yang dibeli (misalnya: bahan mentah, bahan-bahan, bahan kimia dan kemasan), penyediaan (misalnya: air, udara, uap dan es), pembuangan (misalnya: limbah dan air limbah) dan penanganan produk (misalnya : penyimpanan dan pengangkutan) ;
g) tindakan untuk mencegah kontaminasi silang;
h) pembersihan dan sanitasi;
i) pengendalian hama;
j) kebersihan personel;
k) aspek lain yang relevan.
Verifikasi FDP harus direncanakan (lihat 1.8) dan FBP harus dimodifikasi jika perlu (lihat 1.1). Catatan verifikasi dan modifikasi harus dipelihara.
Dokumen harus menjelaskan bagaimana aktivitas yang termasuk dalam laporan keuangan dikelola.
1.3 Langkah-langkah awal untuk analisis bahaya.
1.3.1 Ketentuan umum.
Semua informasi yang diperlukan untuk melakukan analisis bahaya harus dikumpulkan, dipelihara, diperbarui dan didokumentasikan. Catatan harus disimpan.
1.3.2 Kelompok Keamanan Pangan.
Tim keamanan pangan harus ditunjuk.
Tim keamanan pangan harus memiliki pengetahuan dan pengalaman multidisiplin dalam mengembangkan dan menerapkan sistem keamanan pangan. Hal ini mencakup, namun tidak terbatas pada, pengetahuan tentang produk, proses, peralatan, dan bahaya pangan organisasi dalam lingkup sistem keamanan pangan.
Catatan harus disimpan untuk menunjukkan bahwa kelompok tersebut memiliki pengetahuan dan pengalaman yang diperlukan (lihat 6.2.2).
1.3.3 Karakteristik produk.
1.3.3.1 Bahan mentah, bahan dan bahan yang bersentuhan dengan produk.
Semua bahan mentah, bahan-bahan dan bahan-bahan yang bersentuhan dengan produk harus didokumentasikan sejauh diperlukan untuk melakukan analisis bahaya (lihat 1.4), termasuk yang berikut ini, jika berlaku:
a) biologi, kimia dan karakter fisik,
b) komposisi bahan resep, termasuk bahan tambahan dan bantuan teknologi,
c) asal,
d) metode produksi,
f) metode pengemasan dan pengiriman,
f) kondisi penyimpanan dan tanggal kadaluarsa,
g) penyiapan dan/atau penanganan sebelum digunakan atau diolah,
h) kriteria penerimaan yang berkaitan dengan keamanan pangan atau spesifikasi bahan dan bahan yang dibeli sesuai dengan tujuan penggunaannya.
Organisasi harus mengidentifikasi persyaratan keamanan pangan menurut undang-undang dan hukum yang relevan dengan hal di atas.

1.3.3.2 Karakteristik produk akhir.
Karakteristik produk akhir harus didokumentasikan sejauh diperlukan untuk mendukung analisis bahaya (lihat 1.4), termasuk informasi berikut, jika ada:
a) nama produk atau identifikasi lainnya,
b) komposisi,
c) karakteristik biologis, kimia dan fisik yang relevan dengan keamanan pangan,
d) menetapkan umur simpan dan kondisi penyimpanan,
e) pengemasan,
f) pelabelan keamanan pangan, dan/atau petunjuk penanganan, penyiapan dan penggunaan,
g) metode distribusi.
Organisasi harus mengidentifikasi persyaratan keamanan pangan menurut undang-undang dan hukum yang relevan dengan hal di atas.
Deskripsi harus diperbarui, termasuk, jika diperlukan, ketentuan paragraf 1.1.
1.3.4 Tujuan penggunaan.
Tujuan penggunaan, penanganan produk akhir yang diharapkan secara wajar, dan setiap kesalahan penanganan dan penyalahgunaan produk akhir yang tidak disengaja namun dapat diperkirakan secara wajar harus ditinjau dan didokumentasikan sejauh analisis bahaya dapat dilakukan (lihat 1.4.).
Kelompok pengguna, dan bila perlu, kelompok konsumen, harus diidentifikasi untuk setiap produk, dan khususnya kelompok konsumen yang rentan terhadap bahaya tertentu harus diperhitungkan.
Deskripsi harus diperbarui, termasuk, jika diperlukan, ketentuan paragraf 1.1.
1.3.5 Diagram urutan, langkah proses dan kontrol.
1.3.5.1 Diagram urutan.
Diagram alir harus disiapkan untuk kategori produk atau proses yang tercakup dalam sistem manajemen keamanan pangan. Diagram alur harus menjadi dasar untuk menilai potensi terjadinya, peningkatan atau masuknya bahaya pangan.
Diagram alir harus jelas, tepat, dan cukup rinci.
Diagram urutan harus mencakup hal berikut, jika ada:
a) urutan dan interaksi semua tahapan produksi,
b) setiap proses yang dilakukan oleh pihak ketiga dan pekerjaan subkontrak,
c) di mana bahan mentah, bahan baku dan produk setengah jadi diproduksi,
d) di mana pengerjaan ulang dan penggunaan kembali terjadi,
f) apabila produk akhir atau produk antara, serta produk sampingan dan limbah dilepaskan atau dibuang,
Sesuai dengan paragraf 1.8, tim keamanan pangan harus memverifikasi keakuratan diagram yang ada di lokasi. Diagram urutan yang divalidasi harus disimpan sebagai catatan.
1.3.5.2 Deskripsi langkah-langkah proses dan pengendalian.
Pengendalian yang ada, parameter proses dan/atau ketepatan pelaksanaannya, atau prosedur yang mempengaruhi keamanan pangan harus dijelaskan sejauh yang diperlukan untuk analisis bahaya (lihat 1.4).
Persyaratan eksternal (misalnya pembuat undang-undang atau pelanggan) yang dapat mempengaruhi pemilihan dan keakuratan tindakan pengendalian juga harus dijelaskan.
Deskripsi harus diperbarui, termasuk, jika diperlukan, ketentuan paragraf 1.1.
1.4 Analisis bahaya.
1.4.1 Ketentuan Umum.
Tim keamanan pangan harus melakukan analisis bahaya untuk menentukan bahaya mana yang perlu dikendalikan, sejauh mana pengendalian untuk menjamin keamanan pangan, dan rangkaian pengendalian apa yang diperlukan.
1.4.2 Identifikasi bahaya dan penetapan tingkat yang dapat diterima.
1.4.2.1 Semua bahaya yang mungkin timbul tergantung pada jenis produk, jenis proses dan kondisi aktualnya. tempat produksi, harus diidentifikasi dan didaftarkan. Identifikasi harus didasarkan pada:
a) informasi awal dan data yang dikumpulkan sesuai dengan pasal 1.3.,
b) pengalaman,
c) informasi eksternal, termasuk sebanyak mungkin data epidemiologi dan data historis lainnya, dan
d) informasi keamanan pangan yang diperoleh di seluruh rantai produksi pangan, yang mungkin relevan dengan keamanan produk akhir atau produk antara dan pangan saat dikonsumsi.
Setiap tahap (mulai dari bahan mentah, produksi hingga distribusi) di mana salah satu faktor penyebab bahaya pangan dapat terjadi harus ditentukan.
1.4.2.2 Saat mengidentifikasi bahaya, hal-hal berikut harus dipertimbangkan:
a) tahapan sebelum dan sesudah operasi yang bersangkutan,
b) peralatan teknologi, jasa dan lingkungan, dan
c) keterkaitan hulu dan hilir dalam rantai produksi pangan.
1.4.2.3 Untuk setiap bahaya pangan yang teridentifikasi, tingkat bahaya yang dapat diterima pada produk akhir harus ditetapkan, bila memungkinkan.
Persyaratan undang-undang dan undang-undang, persyaratan keamanan pangan pelanggan, tujuan penggunaan pelanggan, dan data relevan lainnya harus diperhitungkan dalam menetapkan tingkat ini.
Keabsahan dan hasil penetapannya harus dicatat.
1.4.3 Penilaian bahaya.
Penilaian bahaya harus dilakukan untuk menentukan, untuk setiap bahaya pangan (lihat 1.4.2), apakah penghapusan atau pengurangan bahaya tersebut ke tingkat yang dapat diterima merupakan hal yang penting untuk produksi pangan yang aman dan, jika dikendalikan, perlu untuk memastikan bahwa tingkat yang dapat diterima yang teridentifikasi adalah dicapai.
Setiap bahaya pangan harus dinilai berdasarkan tingkat keparahannya. efek berbahaya tentang kesehatan dan kemungkinan terjadinya.
Metodologi yang digunakan harus dijelaskan dan hasil penilaian bahaya harus dicatat.
1.4.4 Pemilihan dan evaluasi tindakan pengendalian.
Berdasarkan penilaian bahaya menurut pasal 1.4.3, serangkaian tindakan pengendalian yang tepat harus dipilih yang mampu mencegah, menghilangkan atau mengurangi faktor-faktor penyebab bahaya terhadap produk pangan sampai tingkat tertentu yang dapat diterima.
Dengan pilihan ini, setiap tindakan pengendalian berdasarkan paragraf 1.3.5.2 harus dianalisis dengan mempertimbangkan efektivitasnya relatif terhadap bahaya yang teridentifikasi.
Tindakan pengendalian yang dipilih harus diberi peringkat (dievaluasi) berdasarkan kebutuhan pengendaliannya menggunakan rencana pengelolaan operasional atau rencana HACCP.
Pemilihan dan pemeringkatan tindakan harus dilakukan dengan menggunakan pendekatan yang logis, termasuk penilaian dengan mempertimbangkan hal-hal berikut:
a) dampaknya terhadap bahaya yang teridentifikasi sehubungan dengan keakuratan yang ditetapkan,
b) kelayakan pemantauannya (misalnya kemungkinan pemantauan rutin untuk memastikan koreksi segera);
c) tempatnya dalam sistem relatif terhadap pengendalian lainnya;
d) kemungkinan kegagalan pengendalian atau variabilitas proses yang signifikan;
f) beratnya akibat jika terjadi kegagalan dalam pengoperasiannya;
f) apakah tindakan pengendalian ditetapkan dan diterapkan secara khusus untuk menghilangkan atau mengurangi tingkat bahaya secara signifikan;
g) efek sinergis (yaitu, interaksi yang terjadi antara dua atau lebih tindakan pengendalian, yang mengakibatkan hasil akhir melebihi jumlah hasil masing-masing).
Tindakan pengendalian yang dianggap relevan dengan rencana HACCP harus diterapkan sesuai dengan klausul 1.6. Tindakan pengelolaan lainnya harus diterapkan sebagai BDP operasional sesuai dengan klausul 1.5.
Metodologi dan parameter yang digunakan untuk pemeringkatan ini harus didokumentasikan dan hasil penilaian harus dicatat.
1.5 Pemasangan ruang operasi program dasar(BPR).
Operasional BPR harus terdokumentasi dan harus menyertakan informasi berikut untuk setiap program:
a) faktor penyebab bahaya pangan yang dikendalikan oleh program (lihat klausul 1.4.4.),
b) tindakan pengendalian (lihat paragraf 1.4.4.),
c) prosedur pemantauan yang menunjukkan pelaksanaan rencana pengelolaan operasional;
d) koreksi dan tindakan korektif yang diambil jika terdeteksi hilangnya kendali selama pemantauan operasional BDP (lihat klausul 1.10.1 dan klausul 1.10.2.), masing-masing),
f) tanggung jawab dan wewenang,
f) catatan pemantauan.
1.6 Pembentukan rencana HACCP.
1.6.1 Rencana HACCP.
Rencana HACCP harus didokumentasikan dan harus mencakup informasi berikut untuk setiap titik kendali kritis (CCP):
a) faktor penyebab bahaya terhadap produk pangan harus dikelola di CTU (lihat pasal 1.4.4.),
b) tindakan pengendalian (lihat paragraf 1.4.4.),
c) batas kritis (lihat pasal 1.6.3.)
d) prosedur pemantauan (lihat 1.6.4),
f) koreksi dan tindakan korektif yang harus dilakukan jika batas kritis terlampaui (lihat 1.6.5);
f) tanggung jawab dan wewenang;
g) catatan pemantauan.
1.6.2 Identifikasi titik kendali kritis (CCP).
Untuk setiap bahaya yang dikendalikan sesuai dengan rencana HACCP, KTU untuk tindakan pengendalian yang teridentifikasi harus diidentifikasi (lihat paragraf 1.4.4.).
1.6.3 Penentuan batas kritis titik kendali kritis.
Batas kritis harus ditentukan untuk pemantauan yang ditetapkan untuk setiap CTU.
Batas kritis harus ditetapkan untuk memastikan bahwa tingkat bahaya yang dapat diterima pada produk akhir (lihat 1.4.2.) tidak terlampaui.
Batas kritis harus dapat diukur.
Alasan penetapan batas kritis yang dipilih harus didokumentasikan.
Batasan kritis berdasarkan data subjektif (seperti inspeksi visual terhadap produk, proses, perlakuan, dll) harus didukung dengan instruksi atau spesifikasi dan/atau pendidikan dan pelatihan.
1.6.4 Sistem pemantauan titik kendali kritis.
Sistem pemantauan harus dipasang untuk setiap CTU untuk menunjukkan bahwa CTU terkendali. Sistem ini harus mencakup seluruh rencana pengukuran atau pengamatan yang berkaitan dengan batas kritis.
Sistem pemantauan harus terdiri dari prosedur, instruksi dan catatan yang sesuai yang mencakup hal-hal berikut:
a) pengukuran atau pengamatan yang memberikan hasil dalam jangka waktu yang memadai,
b) perangkat pemantauan yang digunakan,
c) metode kalibrasi yang digunakan (lihat 8.3);
d) frekuensi pemantauan;
f) tanggung jawab dan wewenang terkait pemantauan dan evaluasi hasil pemantauan;
f) persyaratan pencatatan dan metode pencatatan
Metode dan frekuensi pemantauan harus mampu mendeteksi kapan tingkat kritis terlampaui, untuk mengisolasi produk sebelum digunakan atau dikonsumsi.
1.6.5 Tindakan yang diambil apabila batas kritis terlampaui berdasarkan hasil pemantauan.
Rencana koreksi dan tindakan perbaikan yang diambil ketika batas kritis terlampaui harus dijelaskan dalam rencana HACCP. Tindakan ini harus memastikan bahwa penyebab ketidaksesuaian dapat diidentifikasi, bahwa parameter yang dikontrol di unit kendali dapat dikendalikan kembali, dan terulangnya ketidaksesuaian dapat dicegah (lihat klausul 1.10.2).
Prosedur terdokumentasi harus ditetapkan dan diikuti untuk memastikan bahwa produk yang berpotensi berbahaya ditangani dengan tepat dan untuk memastikan bahwa produk tersebut tidak dilepaskan tanpa evaluasi sebelumnya (lihat 1.10.3).
1.7 Memperbarui informasi awal dan dokumen yang menjelaskan rencana manajemen keselamatan dan rencana HACCP.
Setelah rencana manajemen keselamatan operasional disetujui (lihat klausul 1.5) dan/atau rencana HACCP (lihat klausul 1.6), organisasi harus memperbarui informasi berikut, jika diperlukan:
a) karakteristik produk (lihat pasal 1.3.3);
b) tujuan penggunaan (lihat pasal 1.3.4);
c) diagram urutan (lihat 1.5.5.1);
d) langkah-langkah proses (lihat 1.3.5.2);
f) tindakan pengendalian (lihat pasal 1.3.5.2).
Jika perlu, perubahan harus dilakukan pada rencana HACCP (lihat klausul 1.6.1), dan pada prosedur dan instruksi yang menjelaskan tindakan pencegahan keselamatan (lihat klausul 1.2).
1.8 Perencanaan verifikasi.
Saat merencanakan verifikasi, tujuan, metode, frekuensi dan tanggung jawab melakukan verifikasi harus ditentukan. Kegiatan verifikasi harus memastikan bahwa:
a) BDP dilaksanakan (lihat pasal 1.2),
b) data masukan untuk analisis bahaya (lihat klausul 1.3) terus diperbarui,
c) rencana manajemen keselamatan operasional (lihat klausul 1.5) dan elemen-elemen dalam rencana HACCP (lihat klausul 1.6.1) diterapkan dan efektif,
d) tingkat bahaya berada dalam tingkat yang dapat diterima (lihat 1.4.2), dan
f) prosedur lain yang diperlukan oleh organisasi diterapkan dan efektif.
Keluaran dari perencanaan ini harus dalam bentuk yang sesuai dengan metode berfungsinya organisasi.
Hasil verifikasi harus dicatat dan dilaporkan kepada tim keamanan pangan.
Hasil verifikasi harus disediakan untuk mendukung analisis hasil kegiatan verifikasi (lihat klausul 8.4.3).
Jika sistem verifikasi didasarkan pada pengujian sampel produk akhir, dan jika pengujian sampel tersebut menunjukkan ketidakpatuhan terhadap tingkat bahaya yang dapat diterima (lihat 1.4.2), batch produk yang relevan harus diperlakukan sebagai produk yang berpotensi berbahaya. sesuai dengan 1.10.3.
1.9Sistem ketertelusuran.
Organisasi harus menetapkan dan memelihara sistem ketertelusuran yang menjamin identifikasi lot produk sehubungan dengan lot bahan mentah, catatan produksi dan pasokan.
Sistem penelusuran harus mampu mengidentifikasi material yang masuk dari pemasok langsung dan jalur distribusi awal produk akhir.
Catatan ketertelusuran harus disimpan selama jangka waktu tertentu untuk mengevaluasi sistem guna memastikan penanganan produk yang berpotensi berbahaya dan jika terjadi penarikan produk. Catatan harus dipelihara sesuai dengan undang-undang, hukum dan persyaratan pelanggan dan mungkin, misalnya, didasarkan pada identifikasi bets produk akhir.
1.10 Manajemen ketidaksesuaian.
1.10.1 Koreksi.
Organisasi harus memastikan bahwa, jika batas kritis CTU (lihat 1.6.5) terlampaui, atau kendali operasional BDP hilang, produk yang terkena dampak diidentifikasi dan dikendalikan, dengan mempertimbangkan penggunaan dan pelepasannya.
Prosedur terdokumentasi harus ditetapkan dan diikuti. Ini harus mendefinisikan:
a) mengidentifikasi dan menilai produk akhir yang terkena dampak untuk menentukan penanganan yang tepat (lihat 1.10.3), dan
b) analisis koreksi yang dilakukan.
Produk yang diproduksi dalam kondisi di mana tingkat kritis terlampaui berpotensi berbahaya dan harus ditangani sesuai dengan pasal 1.10.3. Produk yang diproduksi tanpa mematuhi peraturan keselamatan operasional harus dinilai mengenai penyebab ketidaksesuaian dan konsekuensi keamanan pangannya dan, jika perlu, ditangani sesuai dengan 1.10.3. Penilaian harus dicatat.
Semua koreksi harus disetujui penanggung jawab(oleh orang) dan harus dicatat bersama dengan informasi mengenai sifat ketidaksesuaian, penyebab dan konsekuensinya, termasuk informasi yang diperlukan untuk tujuan penelusuran mengenai bidang ketidaksesuaian.
1.10.2 Tindakan perbaikan.
Data yang diperoleh dari pemantauan operasional BDP dan CTU harus dinilai oleh orang yang ditunjuk dengan pengetahuan yang memadai (lihat klausul 6.2) dan wewenang (lihat klausul 5.4) untuk memulai tindakan perbaikan.
Tindakan perbaikan harus diambil bila batas kritis terlampaui (lihat klausul 1.6.5) atau bila terdapat ketidakpatuhan terhadap operasional BPR.
Organisasi harus menetapkan dan menerapkan prosedur terdokumentasi yang menentukan tindakan yang tepat untuk mengidentifikasi dan memperbaiki penyebab ketidaksesuaian yang terdeteksi, mencegah terulangnya kembali, dan mengendalikan proses atau sistem setelah ketidaksesuaian terdeteksi.
Tindakan ini meliputi:
a) analisis ketidaksesuaian (termasuk keluhan pelanggan);
b) analisis tren hasil pemantauan yang mungkin mengindikasikan perkembangan menuju hilangnya kendali;
c) menentukan penyebab ketidaksesuaian,
d) menilai tindakan yang diperlukan untuk mencegah terulangnya ketidaksesuaian;
f) identifikasi dan pelaksanaan tindakan yang diperlukan;
f) mencatat hasil tindakan perbaikan yang dilakukan, dan
g) analisis tindakan perbaikan yang diambil untuk memastikan efektivitasnya.
Tindakan perbaikan harus dicatat.
1.10.3 Menangani produk yang berpotensi berbahaya.
1.10.3.1 Ketentuan umum.
Organisasi harus menangani produk yang tidak sesuai dengan mengambil tindakan untuk mencegah produk yang tidak sesuai memasuki rantai produksi pangan sampai organisasi tersebut yakin bahwa:
a) bahaya pangan telah dikurangi hingga tingkat yang dapat diterima,
b) bahaya pangan yang dimaksud akan dikurangi ke tingkat yang dapat diterima (lihat 1.4.2) sebelum memasuki rantai produksi pangan, atau
c) produk memenuhi tingkat bahaya pangan yang dapat diterima, meskipun terdapat ketidakpatuhan.
Semua lot produk yang terkena dampak situasi ketidaksesuaian harus tetap berada di bawah kendali organisasi sampai dievaluasi.
Jika produk yang telah kehilangan kendali organisasi dinyatakan berbahaya, organisasi harus memberi tahu pemangku kepentingan yang berwenang dan memulai penarikan (lihat 1.10.4).
CATATAN. Istilah “kejang” mencakup penarikan kembali makanan.
Tindakan pengendalian dan tanggapan yang tepat serta otorisasi untuk menangani produk yang berpotensi berbahaya harus didokumentasikan.
1.10.3.2 Evaluasi pelepasan produk.
Setiap batch produk yang terkena ketidaksesuaian harus dilepaskan sebagai produk aman hanya jika salah satu kondisi berikut terpenuhi:
a) bukti selain sistem pemantauan menunjukkan bahwa tindakan pengendalian efektif,
b) hasil gabungan dari tindakan pengendalian produk dipastikan memenuhi kriteria yang diinginkan (yaitu tingkat yang dapat diterima yang teridentifikasi sesuai dengan 1.4.2);
c) hasil pengujian sampel, analisis dan/atau kegiatan verifikasi lainnya menunjukkan bahwa banyak produk yang terkena dampak ketidaksesuaian memenuhi tingkat bahaya yang dapat diterima dan diidentifikasi.
1.10.3.3 Penanganan produk yang tidak sesuai.
Jika suatu batch produk tidak dapat diterima untuk dikeluarkan, maka salah satu tindakan berikut harus dilakukan terhadap produk tersebut:
a) pemrosesan ulang atau pemrosesan lebih lanjut, di dalam atau di luar organisasi, yang menghilangkan atau mengurangi bahaya ke tingkat yang dapat diterima;
b) pemusnahan dan/atau pembuangan sebagai limbah.
1.10.4 Penarikan.
Untuk memastikan dan memfasilitasi pembuangan produk akhir yang teridentifikasi berbahaya secara lengkap dan tepat waktu:
a) manajemen senior harus menunjuk personel yang mempunyai wewenang untuk memulai penarikan dan menugaskan personel yang bertanggung jawab untuk melaksanakan penarikan, dan
b) organisasi harus menetapkan dan menerapkan prosedur terdokumentasi untuk:
1) pemberitahuan kepada pihak-pihak terkait yang berkepentingan (misalnya: otoritas legislatif dan regulator, pelanggan dan/atau konsumen),
2) penanganan produk yang disita, serta pengiriman produk berbahaya yang masih dalam penyimpanan, dan
3) menetapkan urutan tindakan yang diperlukan.
Pengeluaran produk harus diamankan atau diawasi sampai produk tersebut dimusnahkan, digunakan untuk tujuan selain dari tujuan aslinya, ditentukan aman untuk tujuan awalnya (atau sebaliknya), atau diproses dengan cara yang memastikan produk tersebut dianggap aman.
Informasi tentang penyebab, luas dan dampak penarikan dana harus dicatat dan dilaporkan kepada manajemen senior sebagai masukan untuk tinjauan manajemen (lihat 5.8.2).
Organisasi harus memverifikasi dan mencatat efektivitas program penarikan melalui penggunaan metode yang tepat (misalnya penarikan simulasi atau penarikan sebenarnya).

Saat mengambil sampel udara untuk mengetahui tingkat pencemaran mikroba, syarat wajib berikut harus dipenuhi: sampel udara diambil paling lambat 30 menit setelah ruangan dibersihkan, sedangkan jendela dan pintu harus ditutup, tingginya. sampel harus sesuai dengan ketinggian meja kerja. Pengendalian harus dilakukan dengan pakaian teknis steril yang terbuat dari kain bebas serabut dan sarung tangan.

Sebelum membawa perangkat ke ruangan yang “bersih”, perangkat harus diseka dengan kain tidak berbulu dengan tepi yang dirawat, dibasahi dengan etil alkohol 76%. Pemindahan perangkat ke tempat produksi kelas 1 dan 2 dan, lebih disukai, kebersihan kelas 3 harus dilakukan melalui ruang kedap udara untuk bahan. Pengendalian kemurnian udara sebaiknya dilakukan minimal 2 kali seminggu sebelum dan selama proses produksi pada titik-titik yang direkomendasikan.

Penentuan pencemaran mikroba udara dalam ruangan menggunakan metode pengendapan terdiri dari sedimentasi (pengendapan) mikroflora (terletak di udara), di bawah pengaruh gravitasi, pada permukaan media nutrisi.

Metode ini digunakan untuk memperkirakan kontaminasi mikroba pada udara di tempat industri, terutama di ruangan dengan polusi udara yang meningkat dan dalam kasus di mana penelitian tidak mungkin dilakukan. metode aspirasi(bila digunakan dalam produksi bahan yang mudah terbakar atau meledak).

Di kawasan industri, pengendalian kandungan mikroorganisme dilakukan terutama di area kerja di mana sumber kontaminasi mikroba di udara paling mungkin berada (tempat dengan banyak personel, peningkatan risiko pembentukan debu, dll.), serta di area dimana zat, zat pembantu dan produk jadi bersentuhan langsung dengan lingkungan.

Penaburan dilakukan pada cawan Petri terbuka dengan agar daging-pepton (untuk mengetahui jumlah bakteri) dan secara terpisah dengan agar Sabouraud (untuk mengetahui jumlah jamur). Cangkir ditempatkan di beberapa tempat di dalam ruangan: di tempat yang panjang dan sempit - di 4 titik secara horizontal pada jarak tidak lebih dari 5 m satu sama lain; di ruangan hingga 15 m2 - di dua titik berlawanan ruangan; lebih dari 100 m2 - di masing-masing 4 titik berlawanan dan di tengah ruangan. Setelah 10 menit pemaparan dalam keadaan terbuka, cangkir ditutup dan dimasukkan ke dalam termostat.

Inokulasi pada agar pepton daging diinkubasi pada suhu 32,5±2,5°C, pada agar Sabouraud - pada suhu 22,5±2,5°C selama 5 hari.

Akuntansi hasil penelitian. Untuk menentukan jumlah total bakteri (jamur) dalam 1 m3 udara, jumlah koloni yang tumbuh pada suatu cawan dikalikan dengan salah satu faktor yang disajikan pada tabel “perhitungan jumlah mikroorganisme dalam 1 m3 udara pada 10 menit. paparan”:

Contoh: 50 koloni bakteri tumbuh pada sebuah cangkir yang berdiameter 10 cm. Dalam 1 m3 udara, jumlah bakteri adalah 50 x 60 = 3000.

Namun metode ini tidak memberikan gambaran lengkap mengenai kandungan kuantitatif mikroorganisme. Hal ini disebabkan oleh fakta bahwa pengendapan mikroorganisme bergantung pada kecepatan pergerakan udara, yang mungkin berbeda di berbagai titik di dalam ruangan. Selain itu, saat menggunakan metode ini, sebagian kecil aerosol bakteri tidak ditangkap dengan baik dan saat satu partikel aerosol yang mengandung beberapa mikroorganisme hidup ditaburkan, hanya satu koloni yang tumbuh, yang mengurangi polusi udara mikroba secara keseluruhan.

Oleh karena itu, metode sedimentasi merupakan perkiraan dalam menilai tingkat kontaminasi mikroba yang sebenarnya di udara dalam ruangan. Namun, hal ini dapat berfungsi untuk menentukan kontaminasi mikroba di udara dari waktu ke waktu dan untuk menilai efektivitas tindakan anti-epidemi yang sedang berlangsung.

Penentuan pencemaran udara mikroba metode aspirasi dilakukan dengan menggunakan sampler tipe inersia - penabrak atau alat untuk analisis bakteriologis udara (alat celah Krotov, oleh karena itu nama lain dari metode ini: metode celah untuk menangkap bakteri). Pengoperasian alat ini didasarkan pada prinsip pancaran udara yang mengenai permukaan media nutrisi yang ditempatkan dalam cawan petri.

Saat menggunakan alat Krotov, udara dihisap melalui celah berbentuk baji yang terletak secara radial di atas cawan Petri menggunakan kipas sentrifugal. Cakram tempat cawan Petri dipasang berputar dengan kecepatan 1 putaran/detik, sehingga inokulasi mikroorganisme terjadi secara merata di seluruh permukaan media nutrisi.

Lokasi dan jumlah titik pengambilan sampel udara ditentukan tergantung pada ukuran ruangan (lihat metode sedimentasi).

Cawan petri yang berisi media nutrisi diletakkan pada piringan alat, dan tutupnya ditutup hati-hati menggunakan klem yang dipasang pada badannya. Perangkat dicolokkan dan kecepatan udara diatur menggunakan rheometer - 25 atau 40 l/mnt. Rata-rata sampel udara diambil selama 5 menit dengan kecepatan 40 l/menit.

Setelah mengambil sampel udara (dari setiap titik tertentu ke dalam dua cawan Petri paralel dengan media MPA dan Sabouraud), cawan tersebut ditutup dengan penutup dan ditempatkan dalam termostat. Media nutrisi, kondisi suhu dan waktu inkubasi tanaman sama seperti saat mempelajari udara dengan metode sedimentasi (lihat di atas).

Akuntansi untuk hasil. Perhitungannya dilakukan sesuai rumus:

X = a x 1000/b, dimana X adalah jumlah mikroorganisme dalam 1 m3 udara; a adalah jumlah koloni yang tumbuh pada cawan Petri setelah masa inkubasi; c adalah volume sampel udara yang diteliti, dikurangi menjadi kondisi normal(lihat rumus untuk membawa volume udara ke kondisi normal untuk metode aspirasi).

Cara perhitungan lainnya: hitung jumlah koloni jamur dan bakteri yang tumbuh pada piring paralel, tentukan mean aritmatika dan kalikan dengan 5.

Hasil yang diperoleh dibandingkan dengan batas kontaminasi mikroba yang diizinkan pada udara ruangan tertentu sesuai dengan tabel yang sesuai: “klasifikasi tempat produksi menurut kandungan mikroorganisme dan partikel mekanis yang diizinkan di udara untuk produksi produk steril” dan “klasifikasi tempat produksi yang tidak steril obat sesuai dengan jumlah partikel dan mikroorganisme yang diperbolehkan di udara.”

Perhitungan volume total minimum sampel udara di setiap titik kontrol dilakukan sesuai dengan rekomendasi metodologis untuk memantau kandungan mikroorganisme dan partikel di udara tempat industri (Perintah Kementerian Kesehatan Ukraina tanggal 14 Desember 2001 No. 502).