Kako napraviti korak po korak laboratorijski test zraka. Sanitarna i bakteriološka studija vazduha. Mikrobiološke studije vazduha

Sa sanitarno-mikrobiološkog stanovišta, vazduh je okruženje u kojem se mikroorganizmi ne mogu razmnožavati, jer nema hranljive materije i vlage, a sunčeve zrake imaju baktericidni efekat. Ipak, u zraku su stalno prisutne koke koje stvaraju pigment, spore bakterija, plijesni i aktinomicete. Mikrobno zagađenje vazduha je promenljivo i zavisi od mnogih faktora. Tako patogeni mikrobi ulaze u zrak s prašinom iz tla i s izlučevinama bolesnih ljudi i životinja. Vazduh u zatvorenom prostoru postaje zagađen tokom hemijskog čišćenja, kihanja i kašljanja. U isto vrijeme, aerosolne kapljice u zraku služe kao izvor aerogene kontaminacije drugih. Brzina taloženja kapljica ovisi o promjeru aerosola.

Bakterijski aerosoli se dijele u tri faze:

1. Faza velikih kapljica sa prečnikom čestica aerosola većim od 0,1 mm; Trajanje boravka takvih čestica u zraku je nekoliko sekundi, a kapljice se brzo talože.

2. Kapljično-nuklearna faza imaju prečnik čestica od 0,1 mm ili manje. Čestice su u vazduhu dugo vrijeme i raspršuju se na velike udaljenosti strujama zraka, zajedno s kojima se šire razni mikroorganizmi, uključujući i patogene.

3. Faza bakterijske prašine ima čestice različitih prečnika od 1 do 0,01 mm. Ova faza ima najveće epizootološke i epidemiološki značaj kako duboko prodire u Airways. Zarazne bolesti se uglavnom prenose u zatvorenim prostorima aerogenim putem.

Stopa preživljavanja patogenih mikroorganizama u suspenziji ovisi o biološka svojstva patogena, kao i temperatura i vlažnost zraka. Na primjer, uzročnici tuberkuloze i antraksa, koji dobro podnose sušenje, dugo opstaju u okolišu.

Radi se mikrobiološko ispitivanje vazduha radi utvrđivanja broja MAFAnM, odnosno ukupnog mikrobnog broja i broja sanitarnih indikatorskih mikroorganizama. Količina MAFAnM u vazduhu određuje se setvom na površini MPA; broj sanitarno-indikativnih mikroba određuje se inokulacijom na krvni agar, agar od žumanca i soli. Da biste utvrdili prisustvo plijesni i spora kvasca, koristite agar od sladovine ili medij Sabouraud i Czapek. Postoji mnogo metoda bakteriološko istraživanje zraka, najpristupačnije metode su Koch i Krotov.

Kochova metoda sedimentacije(lat. sedimentum - sediment). Suština metode je taloženje mikrobnih čestica i kapljice aerosola na površinu gustog hranljivog medija pod uticajem gravitacije.

Metodologija. Petrijeve posude sa MPA i Sabouraudovim medijumom ostave se otvorene 5-20 minuta u prostoriji koja se proučava (učionica, radionice mljekare, pogon za preradu mesa, itd.). Zatim se posude zatvaraju i stavljaju u termostat na temperaturu od +30_C, ako je u pitanju MPA ili krvni agar, nakon čega se uzgajaju 48 sati; ako je Sabouraudova podloga, uzgaja se na temperaturi od +25_C 4-7 dana. Zatim se broje narasle kolonije u cijeloj posudi.

Nakon brojanja uzgojenih kolonija u Petrijevoj zdjelici, broj mikroorganizama u 1 m3 zraka određuje se pomoću formule Omelyansky, prema kojoj se onoliko mikrobnih ćelija smjesti u posude s hranljivim medijem površine 100 cm2 unutar 5 minuta koje se nalaze u 10 litara zraka:

X = a*100*1000*5/b*10*T

Gdje X- broj mikroba u 1 m3 (1000 l) vazduha; A- broj uzgojenih kolonija u posudama; b- površina čaše (80 cm2); 5- vrijeme ekspozicije prema pravilu Omeljanskog; T- vrijeme tokom kojeg je čaša bila otvorena; 10 - 10 litara vazduha prema pravilu Omeljanskog; 1000 - 1 m3 vazduha; 100 -100 cm2 hranljiva podloga.

Krotovljeva metoda aspiracije je preciznije, jer je uređaj opremljen mikromanometrom koji pokazuje broj (volumen) litara posijanog zraka. Aparat Krotov je cilindrični uređaj, unutar kojeg se nalazi elektromotor sa centrifugalnim ventilatorom. Kada se ventilator okreće iz prostorije koja se proučava, zrak se usisava kroz uski klinasti prorez na poklopcu uređaja, ispod kojeg se nalazi rotirajuća platforma s Petrijevom posudom, struja zraka udara u mokru površinu uređaja. hranljivi medij, a mikroorganizmi iz vazduha se talože. Čaše sa usjevima stavljaju se u termostat na 24-48 sati na temperaturi od +30_C. Kolonije se broje na isti način kao i metodom sedimentacije. Nakon toga, broj mikroba u 1 m3 zraka određuje se formulom

Gdje X- broj mikroba u 1 m3 vazduha; A- broj uzgojenih kolonija; 1000 l - 1 m3 vazduha; b- količina posijanog vazduha.

Zahtjevi za mikrobiološke parametre zraka prikazani su u tabeli. 19 (pregleda se jednom mjesečno).

Svaka bakteriološka laboratorija ima boks za vršenje inokulacija i subkultura, najmanje dva puta sedmično proveravati vazduh u boksu na bakterijsku kontaminaciju, a na kvalitet vazduha u boksu postavljaju se posebni zahtevi. Za izvođenje studije, Petrijeve posude sa MPA i Sabouraudovim medijumom ostave se otvorene u kutiji 15 minuta, zatim posude sa MPA medijumom se drže u termostatu 48 sati na temperaturi od +37_C, posude sa Sabouraudovim medijumom se čuvaju. 96 sati na temperaturi od +25...+27_C. Dozvoljeno je prisustvo 5 kolonija plijesni u čašama.

Razvoj istraživanja u oblasti aerobiologije pokazao je da u vazduhu zatvorene prostorije uz veliki broj saprofitnih mikroorganizama mogu postojati patogene bakterije i virusi; meningokoka, patogenih stafilokoka, uzročnika difterije, tuberkuloze, hripavca, virusa gripe, malih boginja, adenovirusa itd. Sanitarne i bakteriološke pretrage vazduha se redovno rade u jaslicama i vrtićima, bolnicama, operacionim salama, apotekama i apotekama Ispituje se i atmosferski vazduh.

Prilikom sanitarno-bakteriološkog ispitivanja zraka provodi se sljedeće:

1) određivanje ukupne bakterijske kontaminacije vazduha (ukupan broj bakterija u 1 m 3);

2) identifikaciju sanitarno-indikativnih mikroorganizama;

3) prema epidemijskim indikacijama izolacija virusa i patogenih bakterija iz vazduha zatvorenih prostora;

4) prilikom proučavanja atmosferskog vazduha dodatna definicija kvalitativni sastav mikroflore, uzimajući u obzir prisustvo aeroba i anaeroba koji stvaraju spore, koji služe kao indikator zagađenosti zraka mikroorganizmima u tlu.

Metode uzorkovanja zraka za bakteriološka istraživanja dijele se na:

1) aspiracija, zasnovana na aktivnom usisu vazduha uz pomoć različitih uređaja;

2) sedimentacija, zasnovana na principu mehaničke sedimentacije mikroba.

Uzorci vazduha se uzimaju u nivou sjedenja ili stojeći čovek, identifikujući jednu tačku uzorkovanja na svakih 20 m 2 površine.

Metode aspiracije koristi se u proučavanju zraka, kako u zatvorenom prostoru tako i u atmosferi. Najrasprostranjeniji uređaj posljednjih godina bio je aparat Krotov (slika 44), koji omogućava prolaz od 25 do 50 litara zraka u minuti. U Krotovljevom aparatu, zrak se usisava kroz uski prorez na poklopcu uređaja i udara u površinu gustog hranjivog medija u Petrijevoj posudi, koja se polako rotira na pokretnom stolu. Površina hranljive podloge je ravnomerno zasejana mikroorganizmima.

Postoje i drugi uređaji: POV-1, zamka bakterija Rechmensky, Dyakonov, u kojoj se vazduh usisava kroz pumpe, duvaljke, aspiratore kroz materijal koji zadržava bakterijski aerosol. Kao takvi materijali koriste se sterilna voda, hranljivi mediji, sterilni pamučni štapići, pjenasti ili prah filteri napravljeni od topljivih materijala. Zapremina uvučenog vazduha se meri pomoću gasnog sata. Nakon uzimanja uzorka, 1 ml tekućine se inokulira u ploču s mesnim pepton agarom kako bi se odredio ukupan broj bakterija. Nakon 24 sata inkubacije u termostatu na 37°C, broj kolonija se broji i preračunava na 1 m 3 zraka. U cilju određivanja sanitarnih indikativnih mikroorganizama i patogenih mikroba, kulture se rade na različitim elektivnim podlogama.

Metoda sedimentacije je najstarija (Kochova metoda sedimentacije). Koristi se samo pri proučavanju vazduha u zatvorenom prostoru. U tu svrhu, Petrijeve posude s hranjivim podlogama prilikom proučavanja općeg bakterijskog zagađenja zraka ostavljaju se otvorene na mjestima uzorkovanja 5-10 minuta. Na kraju ekspozicije, čaše se zakopavaju i stavljaju u termostat na 37°C 24 sata, a zatim na sobnoj temperaturi traje još jedan dan. Stepen zagađenosti vazduha se ocenjuje prema broju kolonija koje su narasle. Uprkos nepreciznosti, ova metoda je pogodna za uporedne procjene čistoće zraka.

Trenutno se bakteriološko ispitivanje vazduha vrši uglavnom u bolnicama u skladu sa „Uputstvima za bakteriološku kontrolu kompleksa sanitarno-higijenskih mera u medicinskim ustanovama: hirurškim odeljenjima, odeljenjima i jedinicama intenzivne nege“ (Dodatak Naredbi br. 720 od 31. jula 1978. Ministarstvo zdravlja SSSR). Određuje se ukupna bakterijska kontaminacija i prisustvo Staph, aureus.

Za utvrđivanje opće bakterijske kontaminacije zraka u zatvorenom prostoru, prema uputama, uzimaju se dva uzorka zraka pomoću Krotov aparata, po 100 litara.

Za ispitivanje prisustva stafilokoka u vazduhu uzimaju se uzorci vazduha na dve ploče sa agarom od žumanca-so ili mlečno-žumančane soli, propuštajući 250 litara vazduha.

Sanitarno-bakteriološko ispitivanje vazduha ima veliki značaj u hirurškim odeljenjima bolnica, porodilištima, gde postoji rizik od bolničke infekcije. Detekcija Staph, aureusa u ovim odjelima je neprihvatljiva. Povećanje broja Staph, aureusa određenih fagotipova trebalo bi smatrati strašnim predznakom moguće pojave bolničke infekcije.

Identifikacija virusa i patogenih bakterija iz vazduha zatvorenih prostora vrši se prema epidemiološkim indikacijama prilikom procene efikasnosti dezinfekcije vazduha, uz praćenje sanitarnog i mikrobiološkog sadržaja. bolničke ustanove itd.

Za identifikaciju mikobakterije tuberkuloze, uzorkovanje se provodi pomoću uređaja POV-I, u kojem se medij Shkolnikova koristi kao medij za hvatanje. Ispitati 250-500 litara vazduha (vidi Mikrobiološka dijagnoza tuberkuloze).

Standard čistoće atmosferskog zraka smatra se pokazateljem bakterijske kontaminacije u zelenoj zoni (zelena zona VDNKh—350 mikroba po 1 m 3). Primjer značajne kontaminacije zraka su mjesta na kojima se okupljaju ljudi i vozila. Zrak u operacijskoj sali prije operacije ne bi trebao sadržavati više od 500, a nakon nje - ne više od 1000 mikroba po 1 m 3. Staph, aureus ne treba otkriti pri pregledu 250 litara zraka. U preoperativnim i svlačionicama, prije početka rada, broj mikroba u 1 m 3 ne bi trebao biti veći od 750. bolničkih odjeljenja ljeti broj mikroba trebao bi biti manji od 3500, a zimi - manji od 5000 po 1 m 3. Ovdje je dozvoljeno prisustvo stafilokoka u zraku: ljeti - 24, zimi - 52 kada se ispituje 250 litara zraka.

Početkom 60-ih, V. F. Krotov je razvio novu metodu za rješavanje varijacijskih problema, koja se temelji na dovoljnom uvjetu optimalnosti, kasnije nazvan Krotov princip optimalnosti. Ali prije nego što se upoznamo s ovim principom, razmotrimo općenitiju formulaciju problema optimalnog upravljanja.

Rješenje problema optimalnog upravljanja u klasi komadno kontinuiranih kontrola i komadno glatkih putanja ne postoji uvijek. Preporučljivo je generalizirati ga na način da se proširi klasa problema optimalnog upravljanja koji imaju rješenje.

Neka objekt, ograničenja i granični uslovi budu specificirani na sljedeći način:

Ovdje je za svaki fiksni određeni skup prostora. Označimo skupom parova podjelično neprekidnih funkcija i djelomično glatkih (kontinuiranih i djelomično diferencibilnih) funkcija definiranih na i koje zadovoljavaju jednadžbu na ovom intervalu, s izuzetkom konačnog broja tačaka, ograničenje na cijeli interval i granični uslovi (10.70). Skup se naziva dopuštenim

skup, a njegovi elementi su dozvoljeni parovi, a skupu je data funkcionalnost

Potrebno je pronaći niz dopuštenih parova na kojem funkcional (10.71) teži svojoj najmanjoj vrijednosti na skupu

Takav niz se zove minimiziranje. Niz dopuštenih parova također će se zvati dopušteni niz.

Glavna generalizirajuća tačka u novoj formulaciji je da se minimizirajući niz uzima kao rješenje za problem optimalne kontrole, a ne kao specifičan dopušteni par. U posebnom slučaju kada postoji dopušteni par koji daje minimum funkcionalu (10.71), svi članovi minimizirajućeg niza jednaki su ovom paru: .

Primjer 10.12. Razmotrimo Boltzov malo modificirani primjer [11]:

Najmanja vrijednost (tačan infimum) funkcionala jednaka je nuli i postiže se na nizu

Velika grupa instrumenata i uređaja namenjena je koncentrisanju mikroorganizama u uzorcima iz objekata životne sredine (voda, vazduh), kao i u uzorcima patološkog materijala pacijenata.

Kao što je poznato, ekološki objekti mogu biti izvor masovnih infekcija ljudi i životinja ako su kontaminirani patogenim mikroorganizmima. Za procjenu prisutnosti patogenih mikroorganizama u objektima okoliša, najpouzdaniji kriterij je njihovo direktno otkrivanje. Međutim, metode koje se koriste u mikrobiološkoj praksi ne dozvoljavaju uvijek da se to učini. Patogene mikroorganizme je teško identificirati u objektima okoliša, jer ih je mnogo manje od saprofita. Stoga, zbog antagonističkog djelovanja na hranjive podloge, rast patogene flore često je potisnut rastom saprofita. Primarni zadatak pri proučavanju nekog okolišnog objekta kao što je zrak je koncentracija mikroorganizama suspendiranih u njemu u maloj količini tekućine (hranjivog medija).

Jedan od vodećih pokazatelja bakterijske kontaminacije objekata životne sredine je indikator mikrobnog broja. Ovi sanitarni mikrobiološki podaci se bilježe prebrojavanjem kolonija uzgojenih na Petrijevim zdjelicama, nakon čega slijedi ponovno izračunavanje.

Značajan broj radova posvećen je metodama uzorkovanja zraka. Predloženo veliki broj sve vrste uređaja koji hvataju bakterijske aerosole.

Jedan od prvih instrumenata za proučavanje aeromikroflore, koji je uveden u masovnu proizvodnju u našoj zemlji, bio je uređaj Krotov. Unatoč relativno velikom vremenu od početka njegove serijske proizvodnje (pedesetih godina), uređaj nije izgubio na značaju u proučavanju sanitarnog i bakteriološkog stanja zraka u zatvorenom prostoru i još uvijek se široko koristi u sanitarno-bakteriološkoj praksi. laboratorije.

Uređaj za bakteriološku analizu vazduha(Krotovljev uređaj) (Sl. 58) je cilindar zatvoren poklopcem, ispod kojeg se nalazi sto za postavljanje Petrijeve zdjelice s gustom hranjivom podlogom. Unutar cilindra se nalazi elektromotor koji rotira sto sa čašom i turbina koja usisava vazduh u uređaj kroz prorez na poklopcu. Količina zraka koji se usisa u minuti određuje se pomoću mjerača protoka s plovkom i regulira se pomoću ventila. Uređaj se napaja iz mreže 220 V. Dimenzije uređaja u kućištu su 229X200X280 mm. Težina - 8 kg.

Rice. 58. Uređaj za bakteriološku analizu vazduha.
1 - rotametarski ventil, 2 - rotametar; 3 - brave za kapice; 4 - rotirajući disk; 5 - poklopac; 6 - disk; 7 - klinasti razmak; 8 - tijelo; 9 - baza.

Priprema uređaja za rad svodi se na odabir standardnih Petrijevih posuda prečnika 100 mm i visine 20 mm i prethodno punjenje hranljivim podlogom u količini od 15 ml. Punjenje i hlađenje hranljivih podloga vrši se na strogo horizontalnoj površini, sušeći u normalnim uslovima.

Još jedan uređaj za sličnu namjenu je uzorkivač zraka POV-1(Sl. 59).

Rice. 59. Uzorkivač zraka POV-1

Uzorci zraka se uzimaju u tekući hranljivi medij, što omogućava korištenje specifičnih selektivnih medija i provođenje posebnih (ciljanih) bakterioloških istraživanja.

Tehničke karakteristike uređaja POV-1
Kapacitet………… 20 l/min
AC napajanje….. 127/220 V
Potrošnja energije……….ne veća od 18 VA
Dimenzije uređaja………………………………..170x255x285 mm
» polaganje………………………………..170X270X350 »
Težina (sa pakovanjem)………………………………..ne veća od 15 kg

Aspirator za uzorkovanje zraka model 822, koji proizvodi udruženje Krasnogvardeets, namenjen je za analizu nečistoća sadržanih u vazduhu. Na prednjoj ploči uređaja (Sl. 60) nalaze se: blok za povezivanje uređaja na mrežu 1, prekidač za uključivanje i isključivanje uređaja 2, utičnica za osigurač 3, ventil za pražnjenje koji štiti struju motor od preopterećenja prilikom uzimanja uzoraka vazduha pri malim brzinama 4, rotametri (konusne staklene cevi sa plovcima) za određivanje protoka vazduha 5, ručke rotametarskog ventila za podešavanje brzine uzorkovanja 6, vijci za pričvršćivanje panela na kućište uređaja 7, okovi za spajanje gumenih cijevi sa filterima 8 i terminalom za uzemljenje uređaja 9.

Rice. 60. Aspirator za uzorkovanje vazduha. Objašnjenja u tekstu.

Na sl. 61 prikazano opšti oblik aspirator sa držačem filtera.

Uzorkovanje se vrši usisavanjem zraka kroz posebne filtere određenom brzinom. Zrak koji prolazi kroz filtere ostavlja za sobom nečistoće koje sadrži. Znajući brzinu zraka i vrijeme prolaska, možete odrediti količinu zraka koji prolazi kroz filter. Određivanjem količine nečistoća na filteru, možete izračunati količinu nečistoća po jedinici volumena zraka.

Aspirator za uzorkovanje vazduha proizvodi francuska kompanija Baudard. Aspirator je zapečaćeni aparat sa uređajem za ojačavanje filtera s finim porama, koji se lako uklanja nakon usisavanja zadate zapremine vazduha kroz aspirator i, u zavisnosti od svrhe studije, proučava se ili bakteriološki (inkubiranje filtera sa mikroorganizmima). na njemu u hranljivim medijima) ili mikroskopski (određivanje prirode čestica koje filter zadržava, njihovo brojanje itd.).

Fino porozni filteri koji se koriste mogu biti papirni ili stakloplastični. Prečnik filtera je 110 mm.

Centrifugalni ventilator ima dvije brzine i dizajniran je za napajanje iz mrežnog napona 220 V; snaga motora - 50 W; Produktivnost aspiratora - od 360 do 1000 l/min, ovisno o otpornosti korištenog filtera s finim porama.

Prilikom proučavanja vode i drugih objekata životne sredine (tla), kao i bioloških tečnosti ljudi i životinja (sputum, eksudati i transudati) na prisustvo patogene flore, kao kod proučavanja vazduha, preliminarna koncentracija mikroorganizama u maloj zapremini neophodan je hranljivi medij koji se naknadno podvrgava bakteriološkom pregledu (mikroskopija, kultura, biohemijske i serološke reakcije itd.).

Rice. 61. Aspirator sa držačem filtera.

Međutim, napredak u oblasti metoda koncentriranja mikroorganizama iz objekata okoline je mali, te se uglavnom moramo ograničiti na stare metode koje predstavljaju razne načine uštede:
- taloženje mehaničkim putem- filtracija, centrifugiranje, isparavanje vode;
- taloženje mikroba fizičkim i hemijskim metodama korišćenjem različitih koagulansa;
- koncentracija mikroba metodom flotacije;
- precipitacija mikroba specifičnim aglutinirajućim serumima;
- korištenje kombiniranih metoda za koncentriranje mikroorganizama, koje se sastoje od kombinacije metoda precipitacije s naknadnim zasijavanjem na hranjive podloge ili infekcijom osjetljive laboratorijske životinje.

Nove metode koncentriranja mikroorganizama temelje se na primjeni određenih fizičkih principa. Jedan takav fizički princip je elektroforeza. Upotreba ove metode osigurava kretanje mikrobne ćelije do jedne od elektroda smještenih u tečnom mediju pod utjecajem vanjskog elektromotorna sila(EMF). Ovaj princip čini osnovu uređaja EFM-1 (Sl. 62). Uređaj vam omogućava da koncentrirate mikrobne ćelije s pozitivnim ili negativnim površinskim nabojem u maloj količini izolirane tekućine (0,01-0,02 ml).

Rice. 62. Uređaj za elektroforezu mikobakterija EFM-1.

Pored studija vode, uređaj se može koristiti i za bakteriološke studije vodenih suspenzija prehrambenih proizvoda, razna pranja i sl. Uređaj se može koristiti i za otkrivanje mikroorganizama u razni materijali, dobijen od pacijenata, posebno za otkrivanje Mycobacterium tuberculosis u materijalima kao što su cerebrospinalna tekućina, ispiranje bronha i želuca, sve vrste punktata i urin. U brisevima pripremljenim od suspenzije Mycobacterium tuberculosis u fiziološkom rastvoru i podvrgnutim elektroforetskoj koncentraciji, broj mikrobnih ćelija se povećava 10-15 puta u odnosu na briseve iz nativnog materijala.

Uređaj je opremljen setom pribora koji uključuje 20 nelomljivih kiveta kapaciteta 12 ml, elektrode i pipete. Uređaj se napaja iz mreže naizmjenične struje napona 220 V± ±10%, 50 Hz. Potrošnja energije - ne više od 20 W. Dimenzije - 405X165X205 mm. Težina uređaja sa setom dodatne opreme je 6 kg.

Princip rada uređaja. 10 ml materijala za ispitivanje se sipa u posebne kivete koje se isporučuju sa uređajem. Pipeta u koju je postavljena grafitna elektroda je pričvršćena iznad svake kivete pomoću držača stezaljke. Dio tekućine koja se ispituje diže se 4-5 mm duž kapilare pipete i dodiruje elektrodu. U zavisnosti od svrhe studije, utvrđuje se polaritet primenjenog EMF-a. Elektroforezu se preporučuje da se izvodi 1-3 sata.

Nakon isključivanja struje, tečnost iz kapilare se pomoću gumenog balona istiskuje u kapljicu seruma (obični konjski ili zečji serum razblažen 1:10), prethodno nanesenu na površinu stakalca i dobro pomešanu sa Zapečaćenom Pasteur-ovom pipetom, preparat se suši, fiksira nad plamenom plamenika i boji po Gramu, Ziehl-Nielsenu ili nekom drugom metodu.

Kako bi se eliminirala mogućnost dijagnostičkih grešaka, sve manipulacije se provode pažljivo obrađenim kivetama, pipetama i staklenim predmetima. Grafitne elektrode se moraju mijenjati nakon svake studije.

Otopine boja i kiselina moraju se pažljivo bakteriološki ispitati.

Za povećanje tačnosti brojanja uzgojenih kolonija mikroba u tvornici u Kijevu medicinska oprema Proizvodi se uređaj za brojanje kolonija bakterija. Za brojanje kolonija električnom olovkom, na dnu čašice se označavaju tačke na mjestu svake kolonije, dok su kontakti električne olovke zatvoreni i električni impuls koji brojač prima brojilo. Izgled uređaja je prikazano na slici 63.

Rice. 63. Uređaj za brojanje kolonija.

Za prebrojavanje broja kolonija na zatvorenoj posudi, olovkom ili olovkom se označava poleđina posude, čime se eliminiše mogućnost da se ista kolonija prebroji dva puta.

Univerzalni brojač za brojanje kolonija na hranljivoj podlozi Bactronic opremljen elektronskim vrhom za brojanje kolonija na otvorenim pločama. Nakon kontakta sa bilo kojom agar podlogom, vrh aktivira elektromagnetski mehanizam za brojanje i ostavlja trag na površini podloge.

Ovaj uređaj eliminiše električna pražnjenja do kojih dolazi pri korištenju drugih sistema.

Prilikom brojanja kolonija na pločama sa rijetkim rastom možete koristiti dugme na instrument tabli, a po potrebi i daljinski prekidač koji olakšava rad.

Kompanija Millipore proizvodi specijal kofer za mikrobiološka istraživanja. Kofer, koji je u suštini prenosiva laboratorija (Sl. 64), pruža sve potrebni materijali i opremu za istraživanje bakterijske kontaminacije vode, detekciju mikroorganizama u zraku i tlu, praćenje temperature i rasta bakterija, identifikaciju kvasca u okolišu, proizvodnju plina kvascem, određivanje djelotvornosti dezinficijensa itd.

Rice. 64. Kutija za skladištenje mikrobioloških studija.

Za utvrđivanje kvaliteta prehrambenih proizvoda izdaje se luminoskop LPK-1. Uz njegovu pomoć možete odrediti vrstu mesa, rano kvarenje svinjske i svinjske masti, omjer komponente mleveno meso, ispitivanje jestivih ulja, masti, meda i drugih proizvoda (Sl. 65).

Uređaj koristi princip vizuelne luminiscentne analize. Pod uticajem ultraljubičastih zraka Ovisno o svojstvima i kvaliteti, prehrambeni proizvodi počinju svijetliti u različitim bojama, a svjetlosni filteri ističu odgovarajuće dijelove spektra. Prilikom rada sa uređajem nema potrebe za zamračenjem prostorije, istraživač je zaštićen od izlaganja ultraljubičastim zracima.

Režim rada uređaja je isprekidan. Radno vrijeme - 1 sat, pauza - 25 minuta. Istraživanje proizvoda ne traje više od 1 minute. Uređaj se napaja iz AC mreže - 220 V±10%. Potrošnja energije - ne više od 350 W. dimenzije- 366X185X240 mm. Težina - 6 kg.

Rice. 65. Uređaj za određivanje kvaliteta proizvoda LPK-1.

Search Lectures

Sanitarna i mikrobiološka ispitivanja zraka mogu se podijeliti u 4 faze:

1) uzorkovanje;

2) obradu, transport, skladištenje uzoraka, dobijanje koncentrata mikroorganizama (po potrebi);

3) bakteriološko sejanje, uzgoj mikroorganizama;

4) identifikacija izolovane kulture.

Izbor uzorka:

Pravilno uzorkovanje osigurava tačnost studije. U zatvorenim prostorima, tačke uzorkovanja se postavljaju u količini od jednog uzorka vazduha na svakih 20 m2 površine, poput omotača: 4 tačke u uglovima prostorije (na udaljenosti od 0,5 m od zidova) i 5. tačka u centar. Uzorci vazduha se uzimaju na visini od 1,6-1,8 m od poda - na nivou disanja u stambenim prostorijama. Uzorci se moraju uzimati tokom dana (u periodu aktivne ljudske aktivnosti), nakon mokrog čišćenja i ventilacije prostorije. Atmosferski vazduh se ispituje u stambenim prostorima na visini od 0,5-2 m od tla u blizini izvora zagađenja, kao iu zelenim površinama (parkovi, bašte i sl.) radi procene njihovog uticaja na mikrofloru vazduha.

Treba napomenuti da se prilikom uzimanja uzoraka zraka u mnogim slučajevima inokulira na hranljivu podlogu.

Sedimentacija- većina stara metoda, široko se koristi zbog svoje jednostavnosti i dostupnosti, ali je neprecizan. Metodu je predložio R. Koch i sastoji se u sposobnosti mikroorganizama da se pod uticajem gravitacije i pod uticajem kretanja vazduha (zajedno sa česticama prašine i kapljicama aerosola) talože na površini hranljive podloge u otvorenim Petrijevim posudama. Čaše se postavljaju na mjestima uzorkovanja na horizontalnoj površini.

Instrumenti i uređaji za sanitarnu mikrobiologiju

Prilikom određivanja ukupne mikrobne kontaminacije, ploče sa mesnim pepton agarom ostavljaju se otvorene 5-10 minuta ili duže, ovisno o stupnju sumnje na bakterijsku kontaminaciju. Za identifikaciju sanitarno-indikativnih mikroba koristite podlogu Garro ili Turzhetsky (za otkrivanje streptokoka), agar od mlijeka i soli ili žumanca (za otkrivanje stafilokoka), agar od sladovine ili medij Sabouraud (za otkrivanje kvasaca i gljivica). Prilikom određivanja sanitarnih indikativnih mikroorganizama, čaše se ostavljaju otvorene 40-60 minuta.

Na kraju ekspozicije, sve posude se zatvaraju, stavljaju u termostat na jedan dan za uzgoj na temperaturi optimalnoj za razvoj izolovanog mikroorganizma, a zatim (ako istraživanja zahtijevaju) ostavljaju 48 sati na sobnoj temperaturi za stvaranje pigmenta mikroorganizmima koji stvaraju pigment.

Metoda sedimentacije ima brojne nedostatke: samo grube frakcije aerosola se talože na površini medija; kolonije se često ne formiraju iz jedne ćelije, već iz klastera mikroba; Samo dio mikroflore zraka raste na korištenim hranjivim podlogama. Osim toga, ova metoda je potpuno neprikladna za proučavanje bakterijskog zagađenja atmosferskog zraka.

Naprednije metode su aspiracija, zasnovan na prisilnom taloženju mikroorganizama iz zraka na površinu gustog hranjivog medija ili u tečnost za hvatanje (mesno-peptonski bujon, puferski rastvor, izotonični rastvor natrijum hlorida itd.). U praksi sanitarna služba Prilikom uzimanja aspiracijskih uzoraka koristi se aparat Krotov, klopka za bakterije Rechmensky, uređaj za uzorkovanje zraka (POV-1), aerosolni bakteriološki uzorkivač (PAB-1), bakterijsko-virusni elektroprecipitator (BVEP-1), uređaj Kiktenko, Andersen Koriste se uređaji , Dyakonov, MB itd. Za proučavanje atmosfere mogu se koristiti i membranski filteri br. 4, kroz koje se vazduh usisava pomoću Seitz aparata. Širok izbor instrumenata ukazuje na nepostojanje univerzalnog aparata i veći ili manji stepen njihove nesavršenosti.

Krotovljev uređaj. Trenutno se ovaj uređaj široko koristi u proučavanju zraka u zatvorenom prostoru i dostupan je u laboratorijima

Krotovljev aparat

Princip rada aparata Krotov (Sl. 22) zasniva se na činjenici da vazduh, usisan kroz klinasti prorez na poklopcu aparata, udara o površinu hranljivog medijuma, dok se čestice prašine i aerosola lepe. u medijum, a sa njima i mikroorganizmi u vazduhu.

Bakterijsko-virusni elektroprecipitator (BVEP-1). Uređaj je baziran na principu rada aspiracijsko-jonizacijskim. BVEP-1 se sastoji od precipitacijske komore u koju su montirane elektrode: negativna u obliku vodeće cijevi kroz koju ulazi zrak (i čestice aerosola se shodno tome negativno nabijaju) i pozitivna na kojoj se naseljavaju bakterije.

MB uređaj. Ovaj uređaj služi ne samo za određivanje opće mikrobne kontaminacije, već i za uzimanje uzoraka zraka s česticama aerosola različitih veličina. MB uređaj je izgrađen na principu “sito” i predstavlja cilindar podijeljen na 6 horizontalnih traka, na svaku od kojih su postavljene Petrijeve zdjelice sa MPA. Vazduh se usisava počevši od gornjeg stepena, u čijoj su ploči rupe najveće, a što je stepen niži, to su rupe manje (kroz potonje prolaze samo sitne frakcije vazdušnog aerosola). Uređaj je dizajniran da uhvati čestice aerosola veće od 1 mikrona pri brzini uzorkovanja zraka od 30 l/min. Smanjenje broja rupa osigurava ravnomjerniju distribuciju aerosola iz zraka kroz hranjivi medij. Da biste uhvatili još manje čestice aerosola, možete dodati dodatni filter od AFA materijala za filter.

Kada se koristi bilo koji od navedenih uređaja, dobijeni rezultati su približni, ali daju tačniju procjenu kontaminacije zraka u odnosu na metodu sedimentacije. Budući da GOST ne regulira ni uzorkovanje ni sanitarno-mikrobiološke studije zraka, za procjenu bakterijskog zagađenja zraka može se koristiti bilo koji uređaj. U mnogim slučajevima, uzorkovanje se kombinuje sa fazom inokulacije.

Za smanjenje broja mikroorganizama u vazduhu zatvorenih prostora koriste se sledeća sredstva: a) hemijska - tretman ozonom, azot-dioksidom, prskanje mlečne kiseline, b) mehanička - propuštanje vazduha kroz posebne filtere, c) fizičko - ultraljubičasto zračenje .

©2015-2018 poisk-ru.ru
Sva prava pripadaju njihovim autorima. Ova stranica ne tvrdi autorstvo, ali omogućava besplatno korištenje.
Kršenje autorskih prava i povreda ličnih podataka

Predmet. Analiza mikroflore vazduha u zatvorenom prostoru.

Cilj rada:

— sticanje vještina i sposobnosti za kvantitativno određivanje mikroorganizama metodom ploče.

Zadaci:

Istražiti kvantitativna metoda određivanje zračnih mikroorganizama metodom čašice;

— izvršiti mikrobiološko zasijavanje iz vazduha razne sobe metoda sedimentacije;

- brojite kolonije prema pravilu Omeljanskog.

Suština metode:

— Prvo, supstrat koji se proučava se inokulira u Petrijevu zdjelu s gustom hranjivom podlogom. Usjevi su termostatirani, a uzgojene kolonije se broje. Metoda se široko koristi za određivanje mikroorganizama u hrani, vodi i zraku.

Mikroflora vazduha

Mikrobno zagađenje vazduha poštuje zakone aerobiologije i nestabilan je i lokalne prirode. Ljeti je kontaminacija zraka nekoliko puta veća nego zimi. Vazduh iznad velikih gradova posebno je jako zasićen mikroorganizmima. Mikroflora atmosferskog zraka i mikroflora stambenog zraka se razlikuju.

Mikroflora atmosferskog vazduha. U atmosferskom zraku, stafilokoki i streptokoki se nalaze u samo 3,7% uzoraka uzetih na mjestima s puno ljudi. Među mikroorganizmima dominiraju vrste koje žive u tlu. Tri grupe mikroorganizama se uglavnom nalaze u atmosferskom zraku.

Koke koje stvaraju pigmente V sunčanih danačine do 70-80% ukupne flore (pigment štiti bakterije od insolacije).

· Spore u tlu i truli mikroorganizmi. Njihov sadržaj naglo raste po suhom i vjetrovitom vremenu.

· Plijesni i kvasci. Njihov sadržaj se povećava sa povećanjem vlažnosti vazduha.

Za razliku od vazduha u zatvorenom prostoru, u atmosferskom vazduhu se stalno dešavaju procesi samopročišćavanja. Ovaj proces nastaje usled padavina, insolacije, uticaja temperature i drugih faktora. Zauzvrat, sam atmosferski zrak je faktor u pročišćavanju zraka u stambenim prostorijama.

Mikroflora unutrašnjeg vazduha ujednačeniji i relativno stabilniji. Među mikroorganizmima dominiraju stanovnici ljudskog nazofarinksa, uključujući i patogene vrste koje ulaze u zrak prilikom kašljanja, kihanja ili razgovora.

Metode bakteriološke kontrole vazduha u zatvorenom prostoru

Glavni izvor zagađenja zraka patogenim vrstama su prenosioci bakterija. Nivo mikrobne kontaminacije uglavnom zavisi od gustine naseljenosti, aktivnosti ljudskog saobraćaja, sanitarno stanje prostorija, uključujući zagađenje prašinom, ventilaciju, učestalost ventilacije, način čišćenja, stepen osvetljenosti i druge uslove. dakle, redovno provetravanje a mokro čišćenje prostorija smanjuje kontaminaciju zraka za 30 puta (u odnosu na kontrolne sobe). Ne dolazi do samočišćenja zraka u zatvorenom prostoru.

Znakovi kolonija mikroorganizama.

Važne karakteristike kolonija su njihova veličina i oblik. Kolonije mogu biti velike ili male.

Veličina kolonija, veličina kolonija je znak koji vam omogućava da razlikujete različite vrste, rodovi, pa čak i vrste bakterija. U većini slučajeva kolonije gram-pozitivnih bakterija su manje od kolonija gram-negativnih bakterija.

Kolonije bakterija mogu biti ravne, uzdignute, konveksne, imaju udubljeni ili izdignuti centar.

Još jedan važan znak je oblik rubova kolonije. Prilikom studiranja kolonijalne forme uzmite u obzir prirodu njegove površine: mat, sjajna, glatka ili hrapava. Kolonijalne ivice može biti glatka, valovita, režnjeva (duboko izrezana), nazubljena, erodirana, sa resama, itd.

Određivanje broja mikroorganizama

U vazduhu sobe.

Vazduh je nepovoljna sredina za mikroorganizme, jer mu nedostaju hranljive materije i stalna optimalna temperatura.

Sanitarna procjena zraka u stambenim i industrijskim prostorijama vrši se korištenjem ukupnog mikrobnog broja (TMC). U vazduhu industrijskih prostorija, TMC se određuje po jedinici zapremine vazduha metodom Omelyansky - metoda sedimentacije. Metoda se zasniva na sposobnosti mikroorganizama da se talože i padaju pod uticajem gravitacije.

Omeljansko pravilo:

Na osnovu ovog pravila izveo je formulu za izračunavanje broja mikroorganizama u 1 m3 vazduha:

X– broj mikroorganizama u 1 m2 vazduha

A– broj kolonija uzgojenih na Petrijevoj posudi tokom analize

100 – broj za konverziju na 1 m3 sa 10 dm3

5 – Omeljanski vremenski koeficijent

100 – površina Omelyansky Petrijeve posude (cm2)

IN– površina Petrijeve posude uzeta za analizu (cm2)

t– trajanje vremena (min) tokom kojeg je čaša otvorena (5 min).

Napredak

1. Pripremite gusti hranljivi medij za uzgoj mikroorganizama - MPA (mesni pepton agar): prema shemi rastvorite MPA u destilovanoj vodi (3,8 g suvog MPA + 100 ml destilovane vode), kuvajte 30 minuta, malo ohladite i sipajte u sterilne čaše Petri. Nakon što se MPA stvrdne na dnu posuda, čvrsti medij treba sušiti u rerni na 450C 10 minuta (ploča sa agarom treba da bude okrenuta nadole).

2. Inokulirati mikroorganizme iz zraka raznih prostorija obrazovne ustanove: otvoriti Petrijeve posude sa medijumom u prostoriji koja se proučava 5 minuta, zatvoriti i staviti u termostat (na 300C) na 72 sata za određivanje TMC, za određivanje gljivica kvasca i buđi - (na 250C) 5-7 dana. Termostatiranje se vrši okretanjem Petrijeve posude naopako.

3. Nakon termostatiranja, kolonije uzgojene na Petrijevim zdjelicama se broje i preračunavaju na 1 m2 zraka prema pravilu Omelyanskyja. Brojanje kolonija se vrši pomoću brojača kolonija. Prilikom brojanja, čaše se postavljaju odozdo prema gore na tamnoj pozadini.

Prilikom brojanja kolonija pridržavajte se sljedećih pravila:

— ako je na ploči izrastao mali broj kolonija (do 100), sve kolonije se broje;

- ako su kolonije ravnomjerno raspoređene i njihov broj je oko 200-300, čaše se markerom dijele na 6 sektora i broje se kolonije u dva suprotna sektora, izračunava se prosjek i množi sa 6.

zaključci

Prema regulatornim dokumentima, zrak u zatvorenom prostoru se smatra čistim kada sadrži do 2000 bakterija u 1 m3.

Zrak u radionicama za proizvodnju hrane ne smije sadržavati više od 100-500 bakterija po 1 m3, ovisno o prirodi proizvodnje. U vazduhu prehrambena preduzeća Sadržaj sredstava za kvarenje hrane – plijesni i kvasca – je standardiziran.

Kontrolna pitanja

1. Od kojih faktora zavisi vazdušna mikroflora?

2. Kako odrediti stepen zagađenosti vazduha mikroorganizmima?

3. Koji oblici mikroorganizama su najčešće patogeni?

Laboratorijski rad br. 12

B. Metode uzorkovanja zraka

1. Metoda gravitacije zasniva se na činjenici da se guste čestice suspendovane u vazduhu talože pod uticajem gravitacije. Za prikupljanje uzoraka gravitacijskom metodom koristi se Durham uzorkivač (vidi sliku 3.1). U držač uređaja ubacuje se staklena pločica obložena glicerinskim gelom, koja se priprema na sljedeći način: 5 g želatine, 40 ml vode, 4 g fenola pomiješa se sa 195 g glicerina i zagrije; tokom zagrevanja u gel se unosi 2 ml rastvora kalberijuma - 5 ml glicerina, 10 ml 95% etil alkohol i 2 kapi zasićene vodene otopine bazičnog fuksina. Aparat se ostavlja na vazduhu 24 sata, a čestice nošene strujom vazduha pod dejstvom gravitacije se talože na staklenom predmetu. Sastav i broj čestica određuju se pod mikroskopom. Rezultati su izraženi kao broj deponiranih čestica po 1 cm2 u 24 sata Ova metoda je jednostavna i jeftina, ali ima sljedeće nedostatke.

A. Na rezultate istraživanja utječu smjer i brzina vjetra, vlažnost zraka i padavine.

b. U roku od 24 sata mala količina čestica se taloži.

V. Uglavnom se krupne čestice talože na staklu.

2. Volumetrijske metode zasnivaju se na činjenici da se čestice suspendirane u zraku zadržavaju preprekom koja se nalazi na putu protoka zraka.

A. Rotacioni uzorkivač. Sabirna površina, obložena posebnom supstancom, rotira određeno vrijeme određenom brzinom. Rezultat ispitivanja se izražava kao broj deponiranih čestica po 1 cm2 u 24 sata.Ova metoda eliminira utjecaj brzine i smjera vjetra na rezultate studije. U sakupljaču uzoraka Rotorod (Sampling Technologies Inc., slika 3.2), površina za sakupljanje je akrilne šipke obložene tanki sloj silikonska mast. Kod ostalih uređaja sabirna površina se ne okreće stalno, već periodično, čime se izbjegava prelijevanje, a između rotacija je prekrivena klapnama. Američka akademija za alergiju i imunologiju preporučuje upotrebu ovih uređaja kao standardnih volumetrijskih uzorkovača.

b. Aspiracioni uzorkivači Oni prolaze vazduh kroz membranske filtere sa poznatim prečnikom pora, tako da se čestice određene veličine talože na sabirnoj površini. Na ovom principu se zasniva Burchardova zamka za spore (vidi sliku 3.3), čija se sabirna površina kreće brzinom od 2 mm/h, što omogućava praćenje promena koncentracije čestica u vazduhu tokom čitavog posmatranja. period. Budući da uređaj ima lopaticu, na rezultate testa ne utiče smjer vjetra. Složeniji AkkuVol uzorkivač (vidi sliku 3.4) hvata čestice manje od 1 mikrona u prečniku.

Evaluacija rezultata

A. Korišćenjem gravitacionih metoda Samo velike čestice (prečnika više od 20 mikrona), kao što je polen ambrozije, mogu se otkriti u uzorcima zraka. U naučne svrhe koriste se preciznije volumetrijske metode. Postoje smjernice za identifikaciju spora i polena gljivica. Tabele sastavljene na osnovu rezultata kvantitativnog mikroskopskog ispitivanja uzoraka vazduha omogućavaju određivanje sezonskih pikova koncentracije polena i spora gljivica u različitim stanjima u jednom ili drugom periodu godine (vidi Dodatak VI). Ne postoji jasna veza između egzacerbacije atopijske bolesti i prosječne dnevne koncentracije alergena u zraku, utvrđene kvantitativnim mikroskopskim pregledom. To se objašnjava činjenicom da uz nisku prosječnu dnevnu koncentraciju alergena, pogoršanje atopijske bolesti može biti izazvano kratkotrajnim povećanjem njihove koncentracije. Osim toga, kvantitativni mikroskopski pregled ne omogućava uvijek tačnu procjenu koncentracije alergena u zraku.

b. Za kvantificiranje alergena imunološkim metodama koriste se obilježena antitijela. Utvrđena je veza između koncentracije alergena utvrđene imunološkim metodama i egzacerbacije atopijske bolesti, posebno egzogene bronhijalne astme. Međutim, takvih studija je malo, objavljeni su samo podaci o E antigenu ambrozije, alergenima insekata i gljiva roda Alternaria. Imunološke metode za proučavanje alergena u zraku koji se ne mogu mikroskopski otkriti, kao što su čestice epiderme životinja i insekata, vrlo su precizne. U nekim slučajevima ove studije mogu utvrditi uzrok alergije.

B. Polenski alergeni. Polen se sastoji od mnogih polenovih zrnaca koji sadrže muške gamete i služi za seksualnu reprodukciju sjemenskih biljaka. U entomofilnim (oprašivanim insektima) biljkama sa svijetlim i mirisnim cvjetovima, polen je velik, ljepljiv, širi se u pravilu na kratke udaljenosti, a njegova koncentracija u zraku je niska. Anemofilne (oprašivane vjetrom) biljke imaju male, neupadljive cvjetove bez mirisa, a polen je sitan, neljepljiv, gladak i ravna povrsina. Uzročnik alergije najčešće je polen anemofilnih biljaka, jer je njegova koncentracija u zraku u periodu cvatnje znatno veća od koncentracije polena entomofilnih biljaka. Oslobađanje polena kod većine anemofilnih biljaka događa se u ranim jutarnjim satima, ali njegova koncentracija u zraku obično dostiže vrhunac u poslijepodnevnim ili ranim večernjim satima. To je zbog činjenice da se cirkulacija zraka povećava tokom dana. Po suvom vremenu, čak i pod uticajem slabog vjetra, polen se može širiti na velike udaljenosti, pa čak i u glavni gradovi Koncentracija polena u zraku može biti vrlo visoka. Iako polen gubi vitalnost nakon nekoliko sati, njegova alergena svojstva ostaju dugo vremena. Dodatak VI daje florističku kartu SAD-a i Kanade i popis cvjetnica uobičajenih u različitim florističkim regijama.

1. Ambrozija. Glavni uzrok alergijskog rinokonjunktivitisa u Sjedinjenim Državama je polen ambrozije (Ambrosia spp.), član porodice Asteraceae. Na sjeveroistoku Sjedinjenih Država i u slivu rijeke Mississippi ambrozija je posebno rasprostranjena jer je plodno, kultivirano tlo u ovim područjima idealno za njen rast. Postoje dva polena antigena ambrozije - antigen E (Amb aI) i antigen K (Amb aII).

Sve metode uzorkovanja zraka mogu se podijeliti na sedimentaciju i aspiraciju.

Oba su dobro proučena. Antigen E je polipeptid sa molekularna težina 37 800, antigen K je polipeptid molekulske težine 38 000. Antigen E čini samo 6% proteinske frakcije ekstrakta polena, ali je 200 puta aktivniji od antigena K.

2. Žitarice. Polen žitarica teško je razlikovati morfološke karakteristike, dakle, kada se detektuje u uzorcima vazduha, pre svega uzimaju u obzir koje su žitarice uobičajene na datom području.

A. Na jugu SAD-a i južnoj obali pacifik Rasprostranjena je svinja; na sjeveroistoku i u sjevernom dijelu sliva rijeke Mississippi - plava trava, timotejeva trava, petlića i bijela trava (vidi Dodatak VI).

b. Alergija na polen trava, pa tako i žitarica, razvija se samo u periodu njihovog cvetanja, što zavisi od klimatskih uslova, pa svaka regija ima svoje sezonske vrhunce incidencije. Tako se u sjevernim regijama vrhunac incidencije javlja u proljeće i ljeto; u južnim regijama učestalost egzacerbacija ostaje gotovo nepromijenjena tijekom cijele godine. On velika visina iznad nivoa mora, na primjer u Rocky Mountains, iu sjevernim državama SAD-a (Wisconsin, Michigan, Maine) koncentracija polena je niska.

V. U Sjedinjenim Državama, polen trava zauzima drugo mjesto nakon polena ambrozije po učestalosti i težini alergijskih reakcija koje uzrokuje. U drugim zemljama je najznačajniji alergen u vazduhu.

G. Polen modrice, timofejke, bele trave i ježeve trave imaju slične antigene i izazivaju unakrsne alergijske reakcije. Polen svinjske trave značajno se razlikuje po antigenskom sastavu od polena drugih trava i ne izaziva unakrsne reakcije.

3. Drveće. Alergije obično izaziva polen sa anemofilnih stabala. Polen entomofilnih stabala, poput voćaka i ukrasnog drveća, izuzetno rijetko uzrokuje alergije. Polen anemofilnih stabala, prekrivena gustom vanjskom ljuskom, također ne uzrokuje alergije.

A. Polen različitih stabala ima jasne morfološke karakteristike. Osim toga, stabla se razlikuju po trajanju, intenzitetu i sezoni cvatnje.

b. Budući da polen drveća različitih rodova ima vrlo malo unakrsnih antigena, a stabla određenog roda obično preovlađuju unutar jedne florističke regije, u njoj se uočava alergija na polen sa stabala samo jednog roda.

V. Budući da je period cvjetanja drveća obično kratak, kratkotrajne su i egzacerbacije alergija na njihov polen.

G. Cvjetanje listopadnog drveća počinje prije, za vrijeme ili ubrzo nakon pojave lišća. U umjerenoj klimi sezona cvatnje završava u kasno proljeće, kada su stabla potpuno prekrivena lišćem. U toplijim krajevima sezona cvatnje traje duže (vidi Dodatak VI).

1. Struktura gljiva. Prema morfološkim karakteristikama, sve gljive se dijele na kvasne i micelijske. Gljive kvasca sastoje se od pojedinačnih ćelija koje se razmnožavaju aseksualno - diobom ili pupanjem. Filamentne gljive pripadaju višećelijskim organizmima i predstavljaju mrežu razgranatih niti - hifa, koje mogu formirati spore. Spore gljivica se šire vodom, vjetrom i životinjama. Plijesan je reproduktivni organi koji se nalaze na površini hranjivog supstrata. različite vrste pečurke Plijesan se sastoji od isprepletenih hifa i spora i predstavlja amorfnu masu koja može imati različite boje, oblike i konzistenciju. Plijesni nisu taksonomski, već tradicionalni naziv za gljive koje formiraju plijesan.

2. Klasifikacija gljiva na osnovu načina reprodukcije. Gljive se razmnožavaju fragmentacijom hifa i spora, koje nastaju aseksualno (jednostavna dioba stanica) i spolno (fuzija dviju stanica u zigotu). IN životni ciklus Većina gljiva izmjenjuje faze aseksualnog – nesavršenog stadija – i spolnog – savršenog stadija – razmnožavanja. Prema modernoj klasifikaciji, gljive se dijele u 4 klase: Ascomycetes, Basidiomycetes, Zygomycetes i Oomycetes. Gljive iz rodova Alternaria, Penicillium i Aspergillus su ranije pripadale klasi Deuteromycetes (nesavršene gljive koje se razmnožavaju samo aseksualno), a prema savremenoj klasifikaciji spadaju u podklasu Hyphomycetes klase Ascomycetes (vidi tabelu 3.1). Upravo ove gljive najčešće izazivaju alergije. Pošto se klasifikacija Hyphomycetes zasniva samo na morfologiji spora i ne odražava druge karakteristike, različite gljive uključene u ovu podklasu značajno se razlikuju jedna od druge po antigenskom sastavu.

3. Prevalencija gljivica. Zbog svoje ogromne raznolikosti i izuzetne sposobnosti preživljavanja u različitim klimatskim uslovima, gljive su sveprisutne. Oni ostaju održivi čak i na niskim temperaturama. Malo ih je u sušnim i visokoplaninskim područjima gdje nema dovoljno vlage i kisika. Gljive koje žive u kućama često su uzročnici alergijskih bolesti tokom cijele godine. U stambenim naseljima posebno je mnogo gljiva u starim presvlakama namještaja, sobni ovlaživači zrak, na tuš zavjese, vodovodne instalacije, kante za smeće, otpad od hrane, vlažne podrume.

4. Kontakt sa gljivama. Alergijske bolesti uzrokovane gljivama javljaju se s periodičnim pogoršanjima uzrokovanim povećanjem koncentracije gljivica u zraku, na primjer, nakon posjete šumi ili farmi, žetve sijena ili žita, sakupljanja opalog lišća, u vlažnom, toplom ljetu i jeseni nakon lista. pada (vidi tabelu 3.1). Predstavnici određenih profesija - uzgajivači žitarica, baštovani, radnici u papirnici - posebno su skloni kontaktu sa gljivama. Takozvano novogodišnje pogoršanje alergija na gljive uzrokovano je činjenicom da ih ima puno na stablima smreke, a oštar miris borovih iglica i prašine s ukrasa za božićno drvce doprinose pogoršanju bolesti. Metode za suzbijanje gljiva su navedene u poglavlju. 4, stav III.D.

5. Laboratorijsko istraživanje. Najbolji način prevencije alergija na gljive je stalno praćenje njihovog sadržaja u okolini i suzbijanje. Laboratorijski testovi su neophodni za: 1) identifikaciju gljivica koje izazivaju alergijsko oboljenje, kao što je egzogeni alergijski alveolitis, 2) procenu efikasnosti kontrole gljivica, 3) određivanje vrsta gljivica koje su uobičajene u tom području.

Kvantitativno određivanje gljivica u vazduhu zasniva se na mikroskopskom pregledu uzoraka dobijenih volumetrijskim metodama i kultura dobijenih inokulacijom ovih uzoraka. Za uzgoj gljiva obično se koristi Sabouraudova podloga i agar s krumpirovim škrobom ili kukuruznim brašnom. Identifikacija gljiva zahtijeva vrijeme, posebnu opremu i profesionalne vještine. Mora se uzeti u obzir da određeni uslovi uzgoja, kao što su temperatura, vlažnost vazduha, Atmosferski pritisak, pogoduju rastu gljivica koje nemaju klinički značaj. Plijesni koje posebno često izazivaju alergije navedene su u tabeli. 3.1 i Dodatak VI.

D. Epidermalni alergeni. Najčešće alergije izaziva epiderma pasa i mačaka, kao i vuna (najčešće kozja ili ovčja) i perje (na primjer pačje) koje se koristi za punjenje namještaja, jastuka i perjanica. Tretirana vuna i kože imaju manje šanse da izazovu alergije jer su najsnažniji alergeni rastvorljivi u vodi i uklanjaju se tokom obrade. Mnogi epidermalni alergeni se također nalaze u pljuvački i urinu životinja. Epidermalni alergeni su vrlo aktivni, pa čak i kratak kontakt s njima može izazvati tešku alergijsku reakciju. Najaktivniji epidermalni alergeni uključuju mačje epidermalne antigene. Čestice epiderme mačaka su vrlo male (manje od 2,5 mikrona), polako se talože i akumuliraju u zraku, pa čak i kratak boravak u prostoriji u kojoj mačka živi može izazvati burnu alergijsku reakciju. Budući da se radi o epidermalnim alergenima, alergiju uzrokuju i dugodlake i kratkodlake životinje koje se ne linjaju. U kućama i stanovima širenje epidermalnih alergena olakšavaju centralni sistemi grijanje zraka. Čišćenje prostorija i pranje životinja su privremene i neefikasne antialergijske mjere. Epidermalni alergeni mogu uzrokovati profesionalne alergijske bolesti. Ljudi koji žive u stambenim i loše održavanim zgradama često imaju alergijske reakcije na epidermu i urin glodara.

Prethodna45678910111213141516171819Sljedeća

VIDJETI VIŠE:

Aspiratori i uređaji za uzorkovanje

Uzorci atmosferskog zraka uzimaju se u posude ograničenog kapaciteta, obično aspiracijom. Ova metoda se zasniva na ekstrakciji analita apsorpcionim rastvorom ili čvrstim sorbentima sa velikom apsorbujućom površinom (silika gel, aluminijum gel, aktivni ugljen itd.). Rasprostranjena je i upotreba filter materijala od finih vlakana (celulozni acetat, poliakrilonitril, poliakrilat itd.). Kao i kod svih analitičkih studija, pravilno uzorkovanje je ključno. Rezultati najpreciznije i najpažljivije obavljene analize gube svaki smisao ako je priprema za uzimanje uzoraka netačna i izvršena nepravilno. U pravilu, mjesto za uzorkovanje zraka treba odabrati tako da u neposrednoj blizini nema drveća ili zidova zgrada. Uzorkovanje takođe ne treba vršiti tokom kiše ili snežnih padavina. Prilikom uzorkovanja, takođe je potrebno uzeti u obzir stanje agregacije i svojstva zagađivača koja se utvrđuje. Najčešće se prilikom analize zraka direktno tokom procesa uzorkovanja vrši separacija i koncentracija komponenti zraka koje treba odrediti. U zavisnosti od očekivanog nivoa zagađivača vazduha koji se utvrđuje, uzorkovanje se može izvršiti sa ili bez koncentracije. U potonjem slučaju, staklene špriceve, plinske pipete i vrećice od polimernih filmova, gumene komore itd. Za koncentriranje mikronečistoća koriste se konvencionalni čvrsti sorbenti i apsorpcioni rastvori. Zrak se uvlači kroz sorbente ili apsorpcionu otopinu određenom brzinom u određenom vremenskom periodu. Prilikom uzorkovanja potrebno je dobiti statistički prosječan uzorak. Statistički prosječan uzorak zraka može se dobiti pumpanjem velikih količina kroz posebne filtere ili tečne apsorbere, a zatim ispiranjem apsorbovanog zagađivača posebnim rastvorima. Ponekad se filteri apsorbera mogu pepeliti ili direktno analizirati (na primjer, metodom neutronske aktivacije). Povećanje koncentracija zagađivača zraka korištenjem konvencionalnih adsorbenata u svrhu njihove naknadne desorpcije i kvantifikacije je pripremna faza na analizu gasnom hromatografijom. Kada se koristi plinsko-tečna hromatografija za određivanje niskih koncentracija tvari sadržanih u zraku, koriste se dvije glavne metode predkoncentriranja. Prema prvom, analizirani zrak se propušta kroz koncentrator u tolikoj količini da je sorbent potpuno zasićen tvari koja se utvrđuje. Najčešće se u ovom slučaju koristi hlađenje (tečni dušik, suhi led s acetonom). Ova metoda je najprikladnija za analizu niskoisparljivih tvari. Prema drugoj metodi, analizirani vazduh se propušta kroz koncentrator u tolikoj količini da nastane ravnoteža između sorbenta i gasne faze. Ova metoda je uglavnom prikladna za određivanje visoko hlapljivih tvari u zraku radnog prostora. Koncentracija analiziranih materija u atmosferskom vazduhu (C, mg/m 3) izračunava se po formuli C = m/V, gde je m masa supstance koja se nalazi u analiziranom uzorku, μg; V – zapremina ispitivanog uzorka vazduha, smanjena na normalnim uslovima(t = 0 oC, p0 = 101080 Pa), l. V = 273 p Vt / , gde je p – atmosferski pritisak tokom uzorkovanja, Pa; t – temperatura zraka na mjestu uzorkovanja, oC; Vt – zapremina uzorka vazduha na temperaturi t, l.

Metoda aspiracije ima niz nedostataka: prvo je radno intenzivna i, drugo, zahtijeva dugo (do 30 minuta) aspiracije, što može dovesti do usrednjavanja koncentracije toksičnih tvari, dok koncentracija tvari u zraku se mijenjaju prilično brzo.

7) Metode za određivanje zagađenja atmosferskog vazduha

Ekološki monitoring atmosferskog vazduha obuhvata proučavanje izvora zagađenja, proučavanje hemijskih i fotohemijskih transformacija zagađujućih materija, identifikaciju najotrovnijih materija, proučavanje distribucije zagađujućih materija u atmosferskom vazduhu strujanjima vazduha, određivanje koncentracija zagađivača i prognoza promjena u ekosistemima pod uticajem zagađenja vazduha. Analiza zagađivača zraka je prilično složena, jer je potrebno, s jedne strane, analizirati složenu višekomponentnu smjesu, as druge strane izvršiti selektivno određivanje štetne materije kada je njihova koncentracija u vazduhu na nivou maksimalno dozvoljenih koncentracija i ispod. Osim toga, određivanje ne bi trebalo da bude dugo (prema GOST-u, trajanje uzorkovanja ne bi trebalo da prelazi 30 minuta). Priprema uzorka zavisi od metode koja se koristi za analizu atmosferskih zagađivača. U zavisnosti od prirode zagađivača i njegove koncentracije u vazduhu, koriste se gasna i gasno-tečna hromatografija, neutronska aktivacija, atomska apsorpciona, polarografska, fotometrijska i spektrofotometrijska i druge metode. Određivanje zagađenosti vazduha obuhvata sledeće radnje: uzorkovanje vazduha i koncentracija mikronečistoća štetnih materija; priprema uzorka za analizu; analiza mikro-nečistoća, obrada rezultata analize i predviđanje promjena stanja životne sredine. Uzorci atmosferskog zraka uzimaju se u posude ograničenog kapaciteta, obično aspiracijom. Ova metoda se zasniva na ekstrakciji analita apsorpcionim rastvorom ili čvrstim sorbentima sa velikom apsorbujućom površinom (silika gel, aluminijum gel, aktivni ugljen itd.). Rasprostranjena je i upotreba filter materijala od finih vlakana (celulozni acetat, poliakrilonitril, poliakrilat itd.). Kao i kod svih analitičkih studija, pravilno uzorkovanje je ključno. Rezultati najpreciznije i najpažljivije obavljene analize gube svaki smisao ako je priprema za uzimanje uzoraka netačna i izvršena nepravilno. U pravilu, mjesto za uzorkovanje zraka treba odabrati tako da u neposrednoj blizini nema drveća ili zidova zgrada. Uzorkovanje takođe ne treba vršiti tokom kiše ili snežnih padavina. Prilikom uzorkovanja potrebno je uzeti u obzir i agregatno stanje i svojstva zagađivača koji se utvrđuje. Najčešće se prilikom analize zraka direktno tokom procesa uzorkovanja vrši separacija i koncentracija komponenti zraka koje treba odrediti. U zavisnosti od očekivanog nivoa zagađivača vazduha koji se utvrđuje, uzorkovanje se može izvršiti sa ili bez koncentracije. U potonjem slučaju kao posude za uzorkovanje koriste se staklene špriceve, plinske pipete, vrećice od polimernih filmova, gumene komore itd. Za koncentriranje mikronečistoća koriste se konvencionalni čvrsti sorbenti i apsorpcioni rastvori. Zrak se uvlači kroz sorbente ili apsorpcionu otopinu određenom brzinom u određenom vremenskom periodu. Prilikom uzorkovanja potrebno je dobiti statistički prosječan uzorak. Statistički prosječan uzorak zraka može se dobiti pumpanjem velikih količina kroz posebne filtere ili tečne apsorbere, a zatim ispiranjem apsorbovanog zagađivača posebnim rastvorima. Ponekad se filteri apsorbera mogu pepeliti ili direktno analizirati (na primjer, metodom neutronske aktivacije). Povećanje koncentracija zagađivača vazduha korišćenjem konvencionalnih adsorbenata u svrhu njihove naknadne desorpcije i kvantifikacije je pripremni korak za analizu gasnom hromatografijom. Kada se koristi plinsko-tečna hromatografija za određivanje niskih koncentracija tvari sadržanih u zraku, koriste se dvije glavne metode predkoncentriranja. Prema prvom, analizirani zrak se propušta kroz koncentrator u tolikoj količini da je sorbent potpuno zasićen tvari koja se utvrđuje. Najčešće se u ovom slučaju koristi hlađenje (tečni dušik, suhi led s acetonom). Ova metoda je najprikladnija za analizu niskoisparljivih tvari. Prema drugoj metodi, analizirani vazduh se propušta kroz koncentrator u tolikoj količini da nastane ravnoteža između sorbenta i gasne faze. Ova metoda je uglavnom prikladna za određivanje visoko hlapljivih tvari u zraku radnog prostora. Koncentracija analiziranih materija u atmosferskom vazduhu (C, mg/m 3) izračunava se po formuli C = m/V, gde je m masa supstance koja se nalazi u analiziranom uzorku, μg; V – zapremina ispitivanog uzorka vazduha, svedena na normalne uslove (t = 0 °C, p0 = 101080 Pa), l. V = 273 p Vt / , gde je p – atmosferski pritisak tokom uzorkovanja, Pa; t – temperatura zraka na mjestu uzorkovanja, oC; Vt – zapremina uzorka vazduha na temperaturi t, l.

Sanitarna i bakteriološka studija zraka - F. K. Cherkes

Među faktorima životne sredine koji utiču na ljudski život, vazduh zauzima vodeće mesto. Nauka koja proučava vazdušnu mikrofloru naziva se aeromikrobiologija.

Vazduh nije povoljno okruženje za razvoj mikroorganizama, jer ne sadrži hranljive materije i stalno se kreće. Stoga većina mikroorganizama brzo nestaje iz zraka. Međutim, neki od njih su stabilniji, na primjer bacil tuberkuloze, spore klostridija, gljivice i druge, i mogu dugo opstati u zraku.

U vazduhu gradova ima više mikroorganizama nego u vazduhu šuma i polja.

Broj mikroorganizama u zraku opada s visinom. Na primjer, na nadmorskoj visini od 500 m iznad Moskve, 2-3 bakterije se nalaze u 1 m3 zraka, a na visini od 1000 m - upola manje.

Broj mikroorganizama u zatvorenim prostorima obično je veći nego u zraku na otvorenom.

GOST ne standardizira metode za provođenje ispitivanja zraka. Ranije velika pažnja fokusiran na identifikaciju hemolitičkih streptokoka kao indikatora zagađenosti zraka u zatvorenom prostoru mikroflorom koja se nalazi u ljudskom nazofarinksu. Trenutno se više pažnje poklanja direktnom otkrivanju patogenih i oportunističkih mikroorganizama u zraku.

Sanitarno-bakteriološko ispitivanje vazduha vrši se prema planu: u bolnicama, operacionim salama, dečijim ustanovama itd.

Tokom sanitarne i bakteriološke studije utvrđuje se:

1. Ukupan broj bakterija u 1 m3 vazduha.

2. Prisustvo patogenih i uslovno patogenih mikroorganizama u 1 m3 vazduha.

Detekcija mikroorganizama u zraku se vrši pomoću specijalnih uređaja i posebna okruženja (dijagnostička i diferencijalno dijagnostička).

Metode uzorkovanja zraka

Postoje dve glavne metode uzimanja uzoraka vazduha za istraživanje: 1) sedimentacija – zasnovana na mehaničkom taloženju mikroorganizama; 2) aspiracija - zasnovana na aktivnom usisu vazduha (ova metoda omogućava određivanje ne samo kvalitativnog, već i kvantitativnog sadržaja bakterija).

Uzorkovanje zraka

Metoda sedimentacije

U njih se stavljaju Petrijeve posude sa hranljivim medijumom (MPA). otvorena forma horizontalno, na različitim nivoima od poda. Metoda se zasniva na mehaničkom taloženju bakterija na površini agara u Petrijevim posudama. Čaše sa medijumom se izlažu 10 do 20 minuta, u zavisnosti od očekivanog zagađenja vazduha. Za identifikaciju patogene flore koriste se selektivni mediji. Ekspozicija se u ovim slučajevima produžava na 2-3 sata.Nakon izlaganja posude se zatvaraju, odvoze u laboratorij i stavljaju u termostat na 24 sata na temperaturi od 37°C. Sutradan se proučavaju izrasle kolonije. . Ova metoda se uglavnom koristi u zatvorenim prostorima.

Zamka bakterija Rechmensky. Prije upotrebe, uređaj se napuni sterilnom sodom. Rad uređaja se zasniva na uvlačenju vazduha kroz njega pomoću aspiratora. U tom slučaju se raspršuje tekućina u uređaju. Nakon završetka usisavanja, tečnost kroz koju je prošao vazduh inokuliše se sa 0,1-0,2 ml po MPA u Petrijevim posudama. Ako je potrebno koristiti selektivnu podlogu, doza sjemena se povećava (0,3-0,5 ml). Tekućina dobivena u prijemniku može se koristiti za zarazu životinja (na primjer, u studijama koje se provode za identifikaciju virusa, rikecija itd.).

Dyakonov uređaj takođe se zasniva na hvatanju bakterija u tečnosti kroz koju prolazi vazduh.

Aparat PAB-1 je dizajniran za bakteriološko istraživanje velikih količina vazduha u kratkom vremenskom periodu. Uzorci vazduha se dobijaju brzinom od 125-150 l/min. Princip rada uređaja zasniva se na hvatanju mikroorganizama na elektrodi suprotnog naboja. Velika brzina uzorkovanja zraka u ovom uređaju i mogućnost inokulacije na različite hranljive podloge važna je za otkrivanje patogenih i oportunističkih bakterija (npr. Pseudomonas aeruginosa na kirurškim odjelima itd.).

Krotovljev aparat. Djelovanje se zasniva na principu udaranja mlaza zraka na medij u Petrijevim posudama. Uređaj se sastoji od tri dijela: jedinice za uzorkovanje zraka, rotametra i električnog dijela mehanizma za dovod.

Pomoću centrifugalnog ventilatora koji se okreće brzinom od 4000-5000 o/min, zrak koji se testira se usisava u otvor uređaja i sa medijumom udara o površinu otvorene Petrijeve posude. Mikroorganizmi sadržani u zraku talože se na hranjivom agaru. Da bi se mikroorganizmi ravnomjerno rasporedili po cijeloj površini, stol sa čašom se okreće. Vazduh se iz uređaja uklanja kroz zračnu cijev, koja je povezana s rotametrom koji pokazuje brzinu zraka koji se uvlači kroz uređaj.

Nedostatak Krotovljevog uređaja je što zahtijeva struju, pa se ne može koristiti u svim uvjetima.

Prvi dan studija

Odabrani uzorci se stavljaju u termostat na 37°C 18-24 sata.

Drugi dan studija

Posuda se uklanja iz termostata i kolonije se broje. Bakterijsko zagađenje zraka izražava se ukupnim brojem mikroba u 1 m3.

Kalkulacija. Na primjer, za 10 minuta je prošlo 125 litara zraka, na površini je izraslo 100 kolonija.

Za određivanje Staphylococcus aureus, uzorak se sakuplja na agaru od žumanca i soli. Inokulirane posude se inkubiraju u termostatu na 37°C 24 sata i drže na sobnoj temperaturi 24 sata da bi se identificirao pigment. Kolonije za koje se sumnja da su S. aureus treba dalje identifikovati (vidi Poglavlje 14).

U dječjim ustanovama zrak se provjerava na prisustvo salmonele. Da bi se to postiglo, zrak se inokulira u posudu s bizmut-sulfitnom agar podlogom.

Detekcija patogenih bakterija i virusa u zraku zatvorenih prostora vrši se prema epidemiološkim indikacijama. Za identifikaciju uzročnika tuberkuloze koristi se POV uređaj; Shkolnikova podloga se koristi kao medij za hvatanje.

Kontrolna pitanja

1. Da li je vazduh povoljan ambijent za razvoj mikroorganizama?

2. Koje institucije sprovode rutinska istraživanja mikroflore vazduha?

3. Opišite strukturu Krotovovog aparata.

Zadatak

Za 10 minuta propušteno je 250 litara zraka. Naraslo je 150 kolonija. Izračunajte broj kolonija u 1 m zraka.

Vježbajte

Uzmite 4 Petrijeve posude sa MPA medijumom, otvorite ih i postavite na različite nivoe od poda. Nakon 20 minuta zatvorite čaše i stavite u termostat. Sledećeg dana prebrojite broj kolonija koje su narasle i odredite stepen zagađenosti vazduha.

Među faktorima životne sredine koji utiču na ljudski život, vazduh zauzima vodeće mesto. Nauka koja proučava vazdušnu mikrofloru naziva se aeromikrobiologija.

U vazduhu gradova ima više mikroorganizama nego u vazduhu šuma i polja.

Broj mikroorganizama u zraku opada s visinom. Na primjer, na nadmorskoj visini od 500 m iznad Moskve, 2-3 bakterije se nalaze u 1 m 3 zraka, a na visini od 1000 m - upola manje.

Broj mikroorganizama u zatvorenim prostorima obično je veći nego u zraku na otvorenom.

GOST ne standardizira metode za provođenje ispitivanja zraka. Ranije se velika pažnja poklanjala identifikaciji hemolitičkih streptokoka kao indikatora zagađenosti zraka u zatvorenom prostoru mikroflorom koja se nalazi u ljudskom nazofarinksu. Trenutno se više pažnje poklanja direktnom otkrivanju patogenih i oportunističkih mikroorganizama u zraku.

Sanitarno-bakteriološko ispitivanje vazduha vrši se prema planu: u bolnicama, operacionim salama, dečijim ustanovama itd.

Tokom sanitarne i bakteriološke studije utvrđuje se:

1. Ukupan broj bakterija u 1 m 3 vazduha.

2. Prisustvo patogenih i uslovno patogenih mikroorganizama u 1 m 3 vazduha.

Detekcija mikroorganizama u zraku vrši se pomoću posebnih instrumenata i posebnih medija (dijagnostičkih i diferencijalno dijagnostičkih).

Metode uzorkovanja zraka

Postoje dve glavne metode uzorkovanja vazduha za istraživanje: 1) sedimentacija – zasnovana na mehaničkom taloženju mikroorganizama; 2) aspiracija - zasnovana na aktivnom usisu vazduha (ova metoda omogućava određivanje ne samo kvalitativnog, već i kvantitativnog sadržaja bakterija).

Metoda sedimentacije

Petrijeve posude sa hranljivim medijumom (MPA) postavljaju se horizontalno, otvorene, na različitim nivoima od poda. Metoda se zasniva na mehaničkom taloženju bakterija na površini agara u Petrijevim posudama. Čaše sa medijumom se izlažu 10 do 20 minuta, u zavisnosti od očekivanog zagađenja vazduha. Za identifikaciju patogene flore koriste se selektivni mediji. Ekspozicija se u ovim slučajevima produžava na 2-3 sata.Nakon izlaganja posude se zatvaraju, odvoze u laboratorij i stavljaju u termostat na 24 sata na temperaturi od 37°C. Sutradan se proučavaju izrasle kolonije. . Ova metoda se uglavnom koristi u zatvorenim prostorima.

(Metoda aspiracije )

Dyakonov uređaj takođe se zasniva na hvatanju bakterija u tečnosti kroz koju prolazi vazduh.

Nedostatak Krotovljevog uređaja je što zahtijeva struju, pa se ne može koristiti u svim uvjetima.

Prvi dan studija

Odabrani uzorci se stavljaju u termostat na 37°C 18-24 sata.

Drugi dan studija

Posuda se uklanja iz termostata i kolonije se broje. Bakterijsko zagađenje zraka izražava se ukupnim brojem mikroba u 1 m3.

Kalkulacija. Na primjer, za 10 minuta je prošlo 125 litara zraka, na površini je izraslo 100 kolonija.

U dječjim ustanovama zrak se provjerava na prisustvo salmonele. Da bi se to postiglo, zrak se inokulira u posudu s bizmut-sulfitnom agar podlogom.

Kontrolna pitanja

1. Da li je vazduh povoljan ambijent za razvoj mikroorganizama?

2. Koje institucije sprovode rutinska istraživanja mikroflore vazduha?

3. Opišite strukturu Krotovovog aparata.

Zadatak

Za 10 minuta propušteno je 250 litara zraka. Naraslo je 150 kolonija. Izračunajte broj kolonija u 1 m zraka.