Visokotemperaturna sterilizacija. Sterilizacija suvom toplotom Pasteur pećnica

Provođenje 1. faze bakteriološke metode za izolaciju aeroba:

Od proučavanog materijala pripremamo fiksirani preparat, bojimo ga Gram metodom, mikroskopijom i identifikujemo otkrivene mikroorganizme po morfotinktorskim svojstvima.

Ispitani materijal posijemo na polovicu posude s gustim hranljivim medijumom metodom „poteza sa platformom“ (materijal nanosimo na površinu guste hranljive podloge u Petrijevoj zdjelici na ograničenom prostoru, a zatim ga distribuiramo pomoću sjetva u česte paralelne nizove)

Potpišemo čaše sa naznakom datuma sjetve i stavimo ih naopačke u termostat na temperaturi od 37° 18-24 sata.

Parni sterilizator (autoklav) - sterilizacija parom pod pritiskom.

Najpouzdanija i univerzalna metoda sterilizacije u medicinskoj i mikrobiološkoj praksi je sterilizacija parom pod pritiskom. Proizvodi se u autoklavu u kojem se zagrijavaju predmeti koji se sterilišu zasićena para pod pritiskom iznad atmosferskog. Postoji sljedeći odnos između očitavanja manometra i temperature zasićene pare

Nulti pritisak uzmite u obzir normalan atmosferski pritisak (760 mm Hg).

Sterilizacija se postiže samo kada je autoklav u punom radnom stanju i pravilnom rukovanju od strane posebno obučenog osoblja.Stoga je neophodno stalno praćenje režima sterilizacije, koji se sprovodi fizički (maksimalni termometar i sl.), biološki (biotest sa sporama test kultura mikroorganizama) i hemijski (hemijska ispitivanja, indikatori tipa IP) načini

Vrši se kontrola režima sterilizacije autoklava hemijski pri svakom punjenju autoklava Hemijski test - staklena epruveta sa hemijskom supstancom određene tačke topljenja, antipirin, rezorcin - 110±2°, benzojeva kiselina - 120±2°, benzamid - 126+1°, urea, nikotinamid, D (+)-manoza - 132+2°. U hemijska ispitivanja se uvodi anilinska boja (fuksin, gentsnan violet, itd.), koja ravnomerno boji supstancu kada se topi. Trenutno se češće koriste indikatori tipa IS (Vinar, Rusija), koji su traka papira na koju se nanosi sloj indikatorske mješavine i namijenjeni su za operativno vizualno praćenje ne samo temperature, već i vremena sterilizacije. (IS-120, IS-132) Režim sterilizacije se prati kvartalno korišćenjem biotesta sa sporama test kulture Bacillus stearotermophilus BKM B-718

Pasteur pećnica- sterilizacija suvom toplotom.

Staklo, metal i gumeni proizvodi na bazi silikonske gume steriliziraju se u Pasteur pećnici. Način sterilizacije: 160°C - 150 min; 180°C - 60 min Kontrola režima sterilizacije tokom svakog ciklusa vrši se pomoću indikatora sterilizacije IS-160, IS-180; tromjesečno - korištenjem biotesta sa sporama test kulture Bacillus licheniformis

Sterilizacija Tabela 1.

Dezinfekcija Tabela 2.

Sterilizacija suhom toplinom ili toplim zrakom se vrši u Pasteur pećnicama (sušenje peći na suvo grijanje). Pasteur pećnica je dvoslojni ormarić od materijala otpornih na toplinu - metala i azbesta. Zagrijte ormar pomoću plinskih gorionika ili električnih uređaja za grijanje. Električno grijani ormari opremljeni su regulatorima koji osiguravaju potrebna temperatura. Za kontrolu temperature, termometar je umetnut u otvor na gornjem zidu ormarića.

Suva toplota se koristi za sterilizaciju laboratorijskog staklenog posuđa. Posuđe pripremljeno za sterilizaciju se lagano stavlja u pećnicu kako bi se osiguralo jednolično i pouzdano zagrijavanje materijala koji se sterilizira. Čvrsto zatvorite vrata ormarića, uključite uređaj za grijanje, zagrijte temperaturu na 160-165 °C i sterilizirajte na ovoj temperaturi 1 sat. Na kraju sterilizacije isključite grijanje, ali ne otvarajte vrata ormarića do pećnica se ohladila; inače hladan vazduh, ulazak u ormarić može uzrokovati pukotine na vrućem posuđu.

Sterilizacija u Pasteur pećnici može se vršiti na različite načine temperaturni uslovi i izlaganje (vreme sterilizacije) (tabela 1).

Tabela 1. Režim sterilizacije

Tečnosti (hranjivi mediji, izotonični rastvor natrijum hlorida itd.), predmeti od gume i sintetičkih materijala ne mogu se sterilisati suvom toplotom, jer tečnosti ključaju i izlivaju se, a guma i sintetički materijali tope.

Za kontrolu sterilizacije u Pasteur pećnici, svilene niti se navlaže u kulturi bakterija koje stvaraju spore, osuše se, stave u sterilnu Petrijevu posudu i stave u Pasteurovu peć. Sterilizacija se vrši na temperaturi od 165°C u trajanju od 1 sata (radi kontrole, dio niti se ostavi na sobnoj temperaturi). Zatim se sterilizirane i kontrolne niti stavljaju na površinu agara u Petrijevoj posudi ili stavljaju u epruvete sa bujonom i inkubiraju u termostatu na 37°C 2 dana. At pravilan rad Pasterova pećnica u epruvetama ili posudama sa hranljivim podlogama u koje su postavljene sterilisane niti, neće biti rasta, jer će bakterijske spore umrijeti, dok će bakterijske spore na nitima koje nisu sterilizirane (kontrola) proklijati i rast će se zabilježiti na hranljivim podlogama. .

Da biste odredili temperaturu unutar Pasteurove pećnice, možete koristiti saharozu ili granulirani šećer, koji se karamelizira na temperaturi od 165-170 ° C.

Priprema laboratorijskog staklenog posuđa za sterilizaciju u Pasteur pećnici. Prije sterilizacije, laboratorijsko stakleno posuđe (Petrijeve zdjelice, graduirane i Pasteurove pipete, bočice, tikvice, epruvete) mora se dobro oprati, osušiti i umotati u papir, jer se u suprotnom nakon sterilizacije može ponovo kontaminirati zračnim bakterijama.

Petrijeve zdjelice se umotaju u papir jedan ili više komada odjednom ili se stavljaju u posebne metalne kutije.

Pamučni štapići se ubacuju u gornje krajeve pipete kako bi se spriječilo da ispitni materijal uđe u usta. Graduirane pipete se umotaju u dugačke trake papira širine 4-5 cm.Zapremina umotane pipete je označena na papiru. U kutijama za olovke, graduirane pipete se sterilišu bez dodatnog umotavanja u papir.

Bilješka. Ako je gradacija na pipetama slabo vidljiva, ona se vraća prije sterilizacije. Nanesite na pipetu uljane boje i, ne dopuštajući da se boja osuši, u nju se krpom utrlja prah barijum sulfata. Nakon toga krpom uklonite višak boje, koja ostaje samo u zarezima za diplomiranje. Ovako tretirane pipete treba isprati.

Oštri krajevi Pasteurovih pipeta zapečaćeni su u plamenu plamenika i umotani u papir, po 3-5 komada. Pasteurove pipete moraju se pažljivo umotati kako se ne bi odlomili zapečaćeni krajevi kapilara.

Bočice, tikvice, epruvete se zatvaraju čepovima od pamučne gaze. Pluto treba da stane u grlo posude 2/3 dužine, ne previše čvrsto, ali ni labavo. Preko čepova svake posude (osim epruveta) stavlja se papirna kapica. Epruvete su povezane u grupe od 5-50 i omotane papirom.

Bilješka. Na visokim temperaturama papir u koji su umotane čaše i pipete i vata požute i mogu čak i da se ugljene, tako da svaki nova sorta papir primljen u laboratoriju treba testirati na prihvaćenim temperaturnim uslovima.

Kontrolna pitanja

1. Šta se podrazumijeva pod pojmom sterilizacija?

2. Kako se vrši sterilizacija?

3. Šta se steriliše kalcinacijom na vatri?

4. Opišite strukturu i način rada Pasteurove peći.

5. Šta se steriliše u Pasteur pećnici?

6. Kako se stakleno posuđe priprema za sterilizaciju?

7. Zašto se hranljivi mediji i gumeni predmeti ne mogu sterilisati u Pasteur pećnici?

Vježbajte

Pripremite Petrijeve zdjelice, graduirane pipete, Pasteurove pipete, epruvete, tikvice i bočice za sterilizaciju.

Sterilizacija suvom toplotom vrši se u suvim pećima (Pasterova pećnica). Suva toplota steriliše laboratorijsko stakleno posuđe. Labavo se stavlja u rernu tako da se materijal ravnomerno zagreva. Čvrsto zatvorite vrata ormarića, uključite električni uređaj za grijanje i zagrijte temperaturu na 160-165 0 C i sterilizirajte 1 sat. Na kraju sterilizacije isključite grijanje, ali ne otvarajte vrata ormarića dok se pećnica ne ohladi (u suprotnom će hladan zrak izazvati pukotine na posuđu). Način sterilizacije: 160°C - 60 min, 180°C - 15 min, 200°C - 5 min. Tečnosti, podloge za kulturu, guma i sintetički materijali ne mogu se sterilisati suvom toplotom.

Sterilizacija parom pod pritiskom podvrgnuti oblačenje, hirurška posteljina, hirurški instrumenti, podloge za kulturu, laboratorijsko stakleno posuđe, inficirani materijal, rastvori za injekcije. Materijal se stavlja u kontejnere (kutije). Jastučići od tkanine se postavljaju na dno biksa kako bi apsorbirali vlagu nakon sterilizacije. Sterilnost materijala se održava 3 dana. Zaraženi materijal u posudama i epruvetama steriliše se u metalnim rezervoarima sa poklopcem.

Sterilizacija parom pod pritiskom se vrši u autoklavu. Sa jednim tretmanom, i vegetativni i sporni oblici bakterija umiru. Para pod pritiskom steriliše hranljive podloge, osim medija koji sadrže prirodne proteine, tečnosti i uređaje sa gumenim delovima. Jednostavni mediji (MPA, MPB) se sterilišu 20 minuta na 120°C (1 atm). Mediji koji sadrže prirodne proteine ​​i ugljikohidrate ne mogu se sterilizirati na ovoj temperaturi, jer su to tvari koje se lako mijenjaju zagrijavanjem. Mediji sa ugljenim hidratima se sterilišu frakciono na 100 0 C ili u autoklavu na 112 0 C (5 atm.) 10-15 minuta. Razne tečnosti, uređaji sa gumenim crevima, utikači, bakterijske sveće i filteri se sterilišu na 120 0 C (1 atm.) 20 minuta.

Inficirani materijal (u epruvetama, čašama) stavlja se u posebne metalne kante ili rezervoare sa otvorima za prodor pare i steriliše na 126 0 C (1,5 atm.) 1 sat. Instrumenti se takođe sterilišu nakon rada sa spornim bakterijama.

Postoje 2 načina sterilizacije:

1. Protočna para u autoklavu ili u Koch aparatu sa odvrnutim poklopcem i otvorenim izlaznim ventilom, kada se antibakterijski efekat pare manifestuje na vegetativne oblike. Tako se sterilišu podloge koje sadrže vitamine i ugljene hidrate, ureu, mleko, krompir i želatin. Za potpunu desterilizaciju koristi se frakciona sterilizacija (na 100 0 C) u trajanju od 20-30 minuta 3 dana za redom. Takođe ubija spore.
2. Najviše je sterilizacija parom pod pritiskom efikasan metod deprivacija. Zavoji i posteljina se sterilišu na 1 atm. 15-20 minuta, inficirani materijal na 1,5-2 atm 20-25 minuta.

Sterilizacija je predstavljena fizičkim, hemijskim, mehaničkim i biološkim metodama i raznim metodama. Izvodljivost upotrebe određene metode sterilizacije i njenih metoda ovisi o karakteristikama materijala koji se sterilizira, njegovim fizičkim i hemijska svojstva. Trajanje sterilizacije zavisi od predmeta koji se steriliše, sredstva za sterilizaciju i njegove doze, temperature i vlažnosti okruženje.

Metoda fizičke sterilizacije Na načine fizička metoda sterilizacija uključuje sušenje, spaljivanje i kalcinaciju, prokuhavanje, pasterizaciju i tindizaciju, vrući zrak(suha toplota), ultrazvuk, ultraljubičasto i radioaktivno zračenje, struja visoke frekvencije, sunčeva svetlost. Najčešći način sterilizacije predmeta koji mogu biti izloženi visokim temperaturama je sterilizacija vatrom, vrućim zrakom i zasićenom parom pod pritiskom. Vatra se koristi za spaljivanje zaraženih predmeta koji ne predstavljaju nikakvu vrijednost (nepotrebni papiri, stare tapete, krpe, smeće), za dezinfekciju ispljuvka tuberkuloznih bolesnika, leševa ljudi i životinja koje su uginule od posebno opasne infekcije, kao i za spaljivanje i kalciniranje raznih predmeta. Spaljivanje i kalcinacija se široko koriste u mikrobiološkoj praksi za dezinfekciju instrumenata, laboratorijskog i farmaceutskog staklenog posuđa. Kalcinacija u plamenu plamenika ili flambiranje je metoda sterilizacije u kojoj se predmet potpuno steriliše, jer vegetativne ćelije, ciste i spore mikroorganizama umiru. Obično se petlje, lopatice, pipete, stakalca i pokrovni stakalci, mali instrumenti i drugi kontaminirani predmeti steriliziraju kalcinacijom ako se ne mogu prokuhati. Ne preporučuje se sterilizacija makaza i skalpela zagrijavanjem, jer površina rezanja postaje tupa kada je izložena vatri. Jedna od najjednostavnijih i najčešćih metoda fizičke sterilizacije koja se koristi u medicinskoj praksi je sterilizacija toplim zrakom (suha toplina). Sterilizacija suvom toplotom se vrši u sušarama (Pasterove peći). Suvi topli zrak ima baktericidno, viruscidno, sporicidno djelovanje i koristi se uglavnom za sterilizaciju staklenih proizvoda (laboratorijski posuđe - šolje Petrijeve tikvice, pipete, epruvete itd.), kao i metalni proizvodi koji se mogu sterilizirati parom pod pritiskom. Osim toga, suva toplota se koristi za sterilizaciju predmeta od porculana i materija otpornih na toplotu (talk, bijela glina), kao i mineralnih i biljna ulja, masti, vazelin, lanolin, vosak. Najefikasniji način za ovu metodu sterilizacije, koji osigurava smrt vegetativnih oblika i spora, je temperatura od 160 - 180 stepeni u trajanju od 15 minuta. Namirnice, izotonične otopine ili predmete od gume i sintetičkih materijala ne možete sterilizirati suhom toplinom, jer tekućine ključaju i izlijevaju se, a guma i sintetički materijali se tope. Sterilizacija zasićenom parom pod pritiskom je najpouzdanija i najčešće isprobana metoda sterilizacije zavoja, vode i nekih lijekovi, hranljive podloge, mekanu opremu, alate, kao i za dezinfekciju otpadom kontaminiranog materijala. U hirurškoj praksi zavoji, hirurški ogrtači i donji veš za operisanog pacijenta dezinfikuju se parom u autoklavu. Sterilizacija parom pod pritiskom se vrši u specijalnih uređaja– autoklavi. Autoklaviranje u potpunosti uništava sve mikroorganizme i spore. Metoda sterilizacije pod pritiskom se zasniva na zagrijavanju materijala zasićenom vodenom parom pod pritiskom iznad atmosferskog. Kombinirano djelovanje visoke temperature i pare čini ovu metodu posebno učinkovitom. U tom slučaju umiru i vegetativne stanice i mikrobne spore. Mikrobne spore umiru u roku od 10 minuta pod uticajem zasićene vodene pare, a vegetativni oblici umiru za 1 do 4 minuta. Visoka baktericidna moć zasićene pare posljedica je činjenice da, pod utjecajem vodene pare pod pritiskom, proteini mikrobne stanice bubre i koaguliraju, uslijed čega mikrobne stanice umiru. Baktericidno dejstvo zasićene vodene pare pojačava se prekomernim pritiskom. Sterilizacija u autoklavu se vrši na različite načine. Dakle, jednostavne hranljive podloge (meso - pepton agar i meso - pepton bujon) se sterilišu 20 minuta na 120 stepeni (1 atm.). Ali ovim načinom rada nemoguće je sterilizirati medije koji sadrže proteine, ugljikohidrate i druge tvari koje se lako mijenjaju zagrijavanjem. Mediji sa ugljenim hidratima se sterilišu u autoklavu na 0,5 atm. 10 – 15 minuta ili pare sa parom. Visokom temperaturom možete uništiti najupornije oblike patogenih mikroorganizama (uključujući i one koji stvaraju spore) ne samo na površini predmeta koji se dezinficiraju, već iu njihovoj dubini. To je velika prednost visoke temperature kao pouzdanog sredstva za sterilizaciju. Međutim, neki artikli se pod utjecajem visokih temperatura pokvare i u tim slučajevima potrebno je pribjeći drugim metodama i sredstvima dezinfekcije. Potpuna sterilizacija materijala i predmeta koji se ne mogu sterilisati visoke temperature, postiže se ponovnom sterilizacijom vodenom parom u Koch aparatu na temperaturi koja ne prelazi 100 stepeni. Ova metoda se zove frakciona sterilizacija. Svodi se na to da preostali neubijeni sporni oblici mikroba, nakon jednog dana u termostatu na 37 stepeni, klijaju u vegetativne ćelije, do čije smrti dolazi prilikom naknadne sterilizacije. ovog objekta tekuća para. Tretman tečnom parom izvodi se tri puta po 30-40 minuta. Jednokratno zagrijavanje materijala na temperaturi ispod 100 stepeni poznato je kao pasterizacija. Pasterizaciju je predložio Pasteur i namijenjena je uglavnom uništavanju mikroorganizama koji nisu spori. Pasterizacija se vrši na 60 - 70 stepeni 15 do 30 minuta, na 80 stepeni 10 do 15 minuta. U mikrobiološkoj praksi pasterizacija sjemenski materijalčesto se koristi za izolaciju čistih kultura mikroorganizama koji stvaraju spore i za određivanje sposobnosti mikroorganizama da formiraju spore. Za tekućine koje gube okus i druge vrijedne kvalitete kada su izložene visokim temperaturama (mlijeko, bobičasti i voćni sokovi, pivo, hranljive podloge koje sadrže ugljikohidrate ili ureu, itd.), sterilizacija tekućom parom se vrši na 50 - 60 stepeni u trajanju od 15 - 33333330 minuta ili na 70 - 80 stepeni 5 - 10 minuta. U tom slučaju mikrobi prosječne otpornosti umiru, dok se otporniji mikrobi i spore čuvaju. Frakciona 5-6-struka sterilizacija na 60 stepeni u trajanju od 1 sata naziva se tindalizacija. Mnogi medicinski proizvodi napravljeni od polimernih materijala, ne podnose sterilizaciju parna metoda prema opšteprihvaćenim režimima. Za mnoge proizvode, zbog karakteristika tekućina koje sadrže (konzervansi, lijekovi i drugi proizvodi), nemoguće je sterilizirati općeprihvaćenim metodama i metodama. Za takve proizvode razvijeni su individualni režimi sterilizacije kako bi se osigurala pouzdana sterilizacija predmeta. Dakle, sterilizacija rotora za razdvajanje krvi na frakcije se provodi vodenom parom na temperaturi od 120 stepeni u trajanju od 45 minuta. Sterilnost kontejnera za konzerviranje postiže se na 110 stepeni u trajanju od 60 minuta. Kuhanje je metoda sterilizacije koja se koristi za desterilizaciju špriceva za višekratnu upotrebu, hirurški instrumenti, gumene cijevi, stakleni i metalni pribor. Sterilizacija kuhanjem se vrši u sterilizatorima. Forme spora u kipućoj vodi umiru nakon 20 - 30 minuta. Kuhanje od 45 minuta se široko koristi za dezinfekciju izlučevina i drugih infektivnih materijala, posteljine, posuđa, igračaka i predmeta za njegu pacijenata. Topla voda (60 - 100 stepeni) so deterdženti koristi se za pranje i čišćenje mehaničko uklanjanje kontaminanti i mikroorganizmi. Većina vegetativnih ćelija umire na 70 stepeni nakon 30 minuta. Filtraciona sterilizacija se koristi u slučajevima kada supstrati ne mogu izdržati zagrijavanje, posebno za medije koji sadrže proteine, serume, neke antibiotike, vitamine i isparljive tvari. Ova tehnika se dosta široko koristi za sterilizaciju tečnosti kulture, kada je potrebno osloboditi je od mikrobnih ćelija, ali sačuvati nepromenjene sve metaboličke produkte koje sadrži. Metoda uključuje filtriranje tekućina kroz posebne filtere koji imaju fino porozne pregrade i stoga zadržavaju mikrobne stanice. Dva najčešće korištena tipa filtera su membranski filteri i Seitz filteri. Membranski filteri se pripremaju od kolodijuma, acetata, celuloze i drugih materijala. Seitz filteri su napravljeni od mješavine azbesta i celuloze. Osim toga, za sterilizaciju se koriste filteri od kaolina sa dodatkom. kvarcni pijesak, od tla infuzora i od drugih materijala („svijeće“ od Chamberlana, Berkfelda). Membranski i azbestni filteri su dizajnirani za jednokratnu upotrebu. Uz ultraljubičasto zračenje, baktericidni učinak pružaju zraci dužine 200 - 450 nm, čiji su izvor baktericidne lampe. Uz pomoć baktericidnih lampi, zrak se sterilizira ultraljubičastim zracima u terapeutske svrhe. preventivne ustanove, kutije mikrobioloških laboratorija, u preduzećima Prehrambena industrija, u kutijama za proizvodnju vakcina i seruma, u operacionim salama, manipulacionim salama, dečijim ustanovama itd. Ultraljubičasti zraci imaju visoku antimikrobnu aktivnost i mogu izazvati odumiranje ne samo vegetativnih ćelija, već i njihovih spora. Sunčeva svjetlost uzrokuje smrt mikroorganizama kao rezultat djelovanja ultraljubičasto zračenje i sušenje. Sušenje na sunčevoj svjetlosti štetno djeluje na mnoge vrste mikroorganizama, ali je njegovo djelovanje površno i stoga sunčeva svjetlost ima pomoćnu ulogu u praksi sterilizacije. IN U poslednje vreme u liječenju rana i opekotina koriste se premazi od sintetičkih i prirodnih polimera u obliku gelova. Polimerni antiseptički filmovi se široko koriste za lokalno liječenje rana i opekotina. Sadrže antimikrobne agense širokog spektra kao što su katapol, dioksidin, plavi jod, kao i sorbitol koji sadrži glutaraldehid. Za sterilizaciju ovih filmova koristi se jonizujuće zračenje u dozi od 20,0 kGy. Prilikom industrijske proizvodnje polimernih antiseptičkih filmova i sorbenata njihova sterilnost u ovom režimu sterilizacije je u potpunosti osigurana. Radioaktivno zračenje ubija sve vrste mikroorganizama, kako u vegetativnom, tako iu obliku spora. Široko se koristi za sterilizaciju u preduzećima koja proizvode sterilne proizvode i sterilne medicinske uređaje za jednokratnu upotrebu, za dezinfekciju Otpadne vode i sirovine životinjskog porijekla.

Mehanička metoda sterilizacija Metode mehaničke sterilizacije uklanjaju klice sa površine predmeta. To uključuje pranje, istresanje, metenje, mokro brisanje, provjetravanje, ventilaciju, usisavanje, pranje.

Metoda hemijske sterilizacije Plastika se danas sve više koristi u medicinskoj praksi. Koriste se u stomatologiji, maksilofacijalnoj hirurgiji, traumatologiji, ortopediji i hirurgiji. Većina plastike ne može izdržati metode toplotne sterilizacije parom pod pritiskom i suvom toplotom (suhi zagrijani vazduh). Rastvori alkohola, diocida i ternarni rastvori koji se koriste za sterilizaciju takvih predmeta ne osiguravaju sterilnost proizvoda koji se obrađuju. Stoga se za sterilizaciju plastičnih proizvoda koriste plinske i radijacijske metode, kao i otopine kemikalija. Uvođenje u praksu zdravstvenih ustanova veliki broj proizvodi od termolabilnih materijala doprinose uvođenju zračenja, gasne metode dezinfekcija i sterilizacija dezinfekcionim rastvorima. At hemijska sterilizacija koristiti plinove i agense iz različitih kemijskih grupa (peroksid, fenol, halogen koji sadrži, aldehide, alkalije i kiseline, tenzide, itd.). Za svakodnevnu upotrebu proizvode se deterdženti, sredstva za čišćenje, izbjeljivanje i drugi preparati koji imaju antimikrobni učinak zbog uvođenja raznih hemijske supstance. Ovi preparati se koriste za čišćenje i dezinfekciju sanitarnih čvorova tehnička oprema, posuđe, posteljina, itd. Formaldehidna para (u obliku pare) se može koristiti u medicinske ustanove za sterilizaciju metalni proizvodi medicinske svrhe (skalpeli, igle, pincete, sonde, stege, kuke, rezači žice, itd.). Prije sterilizacije s parama formaldehida, proizvodi moraju biti podvrgnuti predsterilizacijskom čišćenju i temeljito osušeni. Kod sterilizacije bilo kojom hemijskom metodom, pravila za obradu određenog predmeta zavise od karakteristika predmeta koji se dezinfikuje, otpornosti mikroba i karakteristika predmeta. hemijska priprema, temperatura okoline, vlažnost i drugi faktori. Tako se sterilnost metalnih instrumenata postiže držanjem u zatvorenoj komori sa parom pet sati na temperaturi od najmanje 20 stepeni i relativna vlažnost 95 - 98%, pri temperaturi od 15 stepeni potpuna sterilnost ovih predmeta postiže se tek nakon 16 sati. Spocidna aktivnost glutaraldehida zavisi od temperature. Njegovo optimalno djelovanje se javlja na temperaturi od 15 – 25 stepeni. Kako temperatura raste, sporicidna aktivnost ovog lijeka se smanjuje. Sterilizacija hemijska metoda Upotreba je donekle ograničena. Najčešće se ova metoda koristi za sprječavanje bakterijske kontaminacije medija kulture i imunobioloških preparata (cjepiva i seruma). Supstance kao što su hloroform, toluen i eter najčešće se dodaju u hranljive podloge. Ukoliko je potrebno osloboditi medij od ovih konzervansa, zagreva se u vodenom kupatilu na 56 stepeni i konzervansi isparavaju. Za čuvanje vakcina ili seruma koristi se mertiolat, borna kiselina, formalin.

Biološka metoda sterilizacija Biološka sterilizacija se zasniva na upotrebi antibiotika. Ova metoda se široko koristi u uzgoju virusa.

Koristeći fizičke i hemijske faktore.

TO fizički faktori Metode sterilizacije uključuju visoke temperature, ultraljubičaste zrake, jonizujuće zračenje i kroz bakterijske filtere.

U laboratorijskoj praksi sterilizacija visokom temperaturom postiže se kalcinacijom u plamenu, zagrijavanjem suhom toplotom, ključanjem, obradom tekućom parom ili parom pod pritiskom.

Rice. 1. Bunsenov plamenik. Rice. 2. Teklu plamenik. Rice. 3. Raspodjela temperature u plamenu gorionika.

Rice. 4. Ormar za sušenje.

Rice. 5. Vodene kupke: 1 - sa stalnim protokom vode; 2 - cilindrični; 3 - okruglo dno. Rice. 6. Protočni parni sterilizator.

Sterilizacija plamenom je jednostavna i pouzdana metoda za obradu različitih predmeta otpornih na toplinu: igle, bakterijske petlje, mikrobiološke lopatice, pipete, dijapozitivi i pokrovne čaše, pincete itd. U tu svrhu imaju široku primjenu. plinski gorionici Bunsen (Sl. 1) ili Teklu sistemi (Sl. 2). Bunsenov plamenik je opremljen pokretnim držačem, pomicanjem kojeg možete podesiti pristup zraka. Kod Teklu gorionika količina ulaznog vazduha se reguliše pomeranjem diska (sl. 2,1), količina gasa se reguliše pomoću vijka (sl. 2, 2). U nedostatku ili nedostatku pristupa zraka nastaje zadimljeni plamen. Pristup zraka gorioniku je podešen do plavi plamen. Približna raspodjela temperature u plamenu gorionika prikazana je na Sl. 3.

Sterilizacija suvom toplotom se vrši u orman za sušenje(Pasterova pećnica). Ova metoda se koristi za sterilizaciju samo suhih predmeta - laboratorijskog staklenog posuđa i sl. Ormar za sušenje (sl. 4) je mali željezni ormarić sa duplim zidovima, između kojih se nalazi termoizolacioni materijal(azbest, staklena vuna). Čisto oprane epruvete i boce začepljene su pamučnim čepovima; pipete, vata, gaza se umotaju u papir i postave na police ormarića tako da predmeti koji se sterilišu ne dodiruju vruće zidove uređaja i zagrijani zrak slobodno prodire između njih. Sterilizacija u sušionici traje 45 minuta - 1 sat na t° 160-170° Na temperaturama iznad 175° papir i vata izgore.

Kuhanje u vodi uništava nesporne oblike mikroba za 1-3 minute. , igle, noževi, mali alati itd. mogu se skuvati u metalnim sterilizatorima, pa čak i u običnoj šerpi. Dodavanje male količine natrijum bikarbonata (natrijum bikarbonata) u vodu