पाश्चर ओवन. नसबंदी के तरीके और तरीके। जीवाणु फिल्टर का उपयोग करके यांत्रिक नसबंदी

सूक्ष्मजीवों पर तापमान का प्रभाव.

तापमान - महत्वपूर्ण कारक, सूक्ष्मजीवों के जीवन को प्रभावित कर रहा है। सूक्ष्मजीवों के लिए न्यूनतम, इष्टतम और अधिकतम तापमान होते हैं। इष्टतम- वह तापमान जिस पर रोगाणुओं का सर्वाधिक गहन प्रसार होता है। न्यूनतम- वह तापमान जिसके नीचे सूक्ष्मजीव महत्वपूर्ण गतिविधि प्रदर्शित नहीं करते हैं। अधिकतम- वह तापमान जिसके ऊपर सूक्ष्मजीवों की मृत्यु हो जाती है।

तापमान के संबंध में, सूक्ष्मजीवों के 3 समूह प्रतिष्ठित हैं:

2. मेसोफाइल।अनुकूलतम - 30-37°С. न्यूनतम - 15-20°C.अधिकतम - 43-45°C.वे गर्म खून वाले जानवरों के शरीर में रहते हैं। इनमें अधिकांश रोगजनक और अवसरवादी सूक्ष्मजीव शामिल हैं।

3. थर्मोफाइल।अनुकूलतम - 50-60°से.न्यूनतम - 45°से.अधिकतम - 75°С. वे गर्म झरनों में रहते हैं और खाद और अनाज को स्वयं गर्म करने की प्रक्रियाओं में भाग लेते हैं। वे गर्म रक्त वाले जानवरों के शरीर में प्रजनन करने में सक्षम नहीं हैं, इसलिए उनका कोई चिकित्सीय महत्व नहीं है।

अनुकूल कार्यवाहीइष्टतम तापमान सूक्ष्मजीवों को बढ़ाने में उपयोग किया जाता है के उद्देश्य के साथ प्रयोगशाला निदान, टीके और अन्य दवाओं की तैयारी।

ब्रेक लगाने की क्रिया कम तामपान भंडारण के लिए उपयोग किया जाता है रेफ्रिजरेटर में सूक्ष्मजीवों के उत्पाद और संवर्धन। कम तापमान सड़न और किण्वन प्रक्रियाओं को रोक देता है। कम तापमान की क्रिया का तंत्र कोशिका में चयापचय प्रक्रियाओं का निषेध और निलंबित एनीमेशन की स्थिति में संक्रमण है।

अपचायक दोष उच्च तापमान(अधिकतम से ऊपर) नसबंदी के लिए उपयोग किया जाता है . तंत्रक्रियाएँ - प्रोटीन (एंजाइम) का विकृतीकरण, राइबोसोम को नुकसान, आसमाटिक बाधा का विघटन। साइकोफाइल और मेसोफाइल उच्च तापमान के प्रति सबसे अधिक संवेदनशील होते हैं। विशेष वहनीयतादिखाओ विवादोंबैक्टीरिया.

सूक्ष्मजीवों पर दीप्तिमान ऊर्जा और अल्ट्रासाउंड का प्रभाव।

गैर-आयनीकरण (पराबैंगनी और अवरक्त किरणें) हैं सूरज की रोशनी) और आयनकारी विकिरण (जी-किरणें और उच्च-ऊर्जा इलेक्ट्रॉन)।

आयनित विकिरणइसका एक शक्तिशाली मर्मज्ञ प्रभाव होता है और सेलुलर जीनोम को नुकसान पहुँचाता है। तंत्रहानिकारक प्रभाव: आयनीकरण मैक्रोमोलेक्युलस, जो उत्परिवर्तन या कोशिका मृत्यु के विकास के साथ होता है। इसके अलावा, सूक्ष्मजीवों के लिए घातक खुराक जानवरों और पौधों की तुलना में अधिक है।

तंत्रहानिकारक प्रभाव यूवी किरणें: डीएनए अणु में थाइमिन डिमर का निर्माण , जो कोशिका विभाजन को रोकता है और उनकी मृत्यु का मुख्य कारण है। जानवरों और पौधों की तुलना में सूक्ष्मजीवों पर यूवी किरणों का हानिकारक प्रभाव अधिक स्पष्ट होता है।

अल्ट्रासाउंड(ध्वनि तरंगें 20 हजार हर्ट्ज) में जीवाणुनाशक प्रभाव होता है। तंत्र: शिक्षा कोशिका के कोशिकाद्रव्य में गुहिकायन गुहाएँ जो तरल वाष्प से भरे होते हैं और उनमें 10 हजार एटीएम तक का दबाव उत्पन्न होता है। इससे अत्यधिक प्रतिक्रियाशील हाइड्रॉक्सिल रेडिकल्स का निर्माण होता है, सेलुलर संरचनाओं का विनाश और ऑर्गेनेल का डीपोलाइमराइजेशन, अणुओं का विकृतीकरण होता है।

आयोनाइजिंग विकिरण, यूवी किरणें और अल्ट्रासाउंड का उपयोग किया जाता है नसबंदी के लिए.

सूक्ष्मजीवों पर सूखने का प्रभाव.

सूक्ष्मजीवों के सामान्य कामकाज के लिए पानी आवश्यक है। पर्यावरणीय आर्द्रता में कमी से कोशिकाएं आराम की स्थिति में चली जाती हैं और फिर मृत्यु की ओर ले जाती हैं। तंत्रसुखाने के हानिकारक प्रभाव: साइटोप्लाज्म का निर्जलीकरण और प्रोटीन का विकृतीकरण।

रोगजनक सूक्ष्मजीव सूखने के प्रति अधिक संवेदनशील होते हैं: गोनोरिया, मेनिनजाइटिस के रोगजनक, टाइफाइड ज्वर, पेचिश, सिफलिस, आदि। बैक्टीरियल बीजाणु, प्रोटोजोअन सिस्ट और थूक बलगम (ट्यूबरकुलोसिस बेसिली) द्वारा संरक्षित बैक्टीरिया अधिक प्रतिरोधी होते हैं।

व्यवहार मेंसुखाने का प्रयोग किया जाता है डिब्बाबंदी के लिए मांस, मछली, सब्जियाँ, फल, औषधीय जड़ी-बूटियाँ तैयार करते समय.

जमी हुई अवस्था से वैक्यूम के तहत सुखाना - लियोफिलाइजेशन या फ्रीज सुखाने।उसका उपयोग किया जा रहा है फसल संरक्षण के लिएसूक्ष्मजीव जो इस अवस्था में वर्षों (10-20 वर्ष) तक अपनी व्यवहार्यता नहीं खोते हैं और अपने गुणों को नहीं बदलते हैं। सूक्ष्मजीव निलंबित एनीमेशन की स्थिति में हैं। लियोफिलाइजेशन का उपयोग किया जाता है दवाओं के उत्पादन मेंजीवित सूक्ष्मजीवों से: यूबायोटिक्स, फेज, जीवित टीकेतपेदिक, प्लेग, टुलारेमिया, ब्रुसेलोसिस, इन्फ्लूएंजा, आदि के खिलाफ।

कार्रवाई रासायनिक कारकसूक्ष्मजीवों को.

रसायन सूक्ष्मजीवों को विभिन्न तरीकों से प्रभावित करते हैं। यह क्रिया की प्रकृति, एकाग्रता और समय पर निर्भर करता है रासायनिक पदार्थ. वे कर सकते हैं विकास को प्रोत्साहित करें(ऊर्जा स्रोतों के रूप में प्रयुक्त), प्रदान करें माइक्रोबायिसाइडल, माइक्रोबोस्टैटिक, उत्परिवर्ती प्रभावया महत्वपूर्ण प्रक्रियाओं के प्रति उदासीन हो सकते हैं

उदाहरण के लिए: 0.5-2% ग्लूकोज समाधान रोगाणुओं के लिए पोषण का एक स्रोत है, और 20-40% समाधान में निरोधात्मक प्रभाव होता है।

सूक्ष्मजीवों के लिए यह आवश्यक है इष्टतम मूल्यपर्यावरण का pH. मानव रोगों के अधिकांश सहजीवन और रोगजनकों के लिए - एक तटस्थ, थोड़ा क्षारीय या थोड़ा अम्लीय वातावरण। जैसे-जैसे पीएच बढ़ता है, यह अक्सर अम्लीय पक्ष में स्थानांतरित हो जाता है और सूक्ष्मजीवों का विकास रुक जाता है। और फिर मौत आती है. तंत्र:हाइड्रॉक्सिल आयनों द्वारा एंजाइमों का विकृतीकरण, कोशिका झिल्ली के आसमाटिक अवरोध का विघटन।

रसायन जो है रोगाणुरोधी प्रभाव, कीटाणुशोधन, नसबंदी और संरक्षण के लिए उपयोग किया जाता है।

सूक्ष्मजीवों पर जैविक कारकों का प्रभाव।

जैविक कारक- यह विभिन्न आकारएक दूसरे पर रोगाणुओं का प्रभाव, साथ ही मैक्रोऑर्गेनिज्म में रहने के दौरान सूक्ष्मजीवों पर प्रतिरक्षा कारकों (लाइसोजाइम, एंटीबॉडी, अवरोधक, फागोसाइटोसिस) का प्रभाव। विभिन्न जीवों का सह-अस्तित्व - सिम्बायोसिस. निम्नलिखित प्रतिष्ठित हैं: फार्मसहजीविता.

पारस्परिक आश्रय का सिद्धांत- सहवास का एक रूप जहां दोनों भागीदारों को पारस्परिक लाभ प्राप्त होता है (उदाहरण के लिए, नोड्यूल बैक्टीरिया और फलियां)।

विरोध- संबंध का एक रूप जब एक जीव अपने चयापचय उत्पादों (एसिड, एंटीबायोटिक्स, बैक्टीरियोसिन) के साथ दूसरे जीव को नुकसान पहुंचाता है (यहां तक ​​कि मृत्यु भी), पर्यावरणीय परिस्थितियों के लिए बेहतर अनुकूलनशीलता के कारण, सीधे विनाश के माध्यम से (उदाहरण के लिए, सामान्य आंतों के माइक्रोफ्लोरा और रोगजनकों के) आंतों में संक्रमण)।

मेटाबायोसिस- सहवास का एक रूप जब एक जीव दूसरे के कारण होने वाली प्रक्रिया को जारी रखता है (अपने अपशिष्ट उत्पादों का उपयोग करता है) और पर्यावरण को इन उत्पादों से मुक्त करता है। इसलिए, आगे के विकास (नाइट्रिफाइंग और अमोनिफाइंग बैक्टीरिया) के लिए स्थितियां बनाई जाती हैं।

उपग्रहवाद- सहवासियों में से एक दूसरे के विकास को उत्तेजित करता है (उदाहरण के लिए, यीस्ट और सार्सिना ऐसे पदार्थ उत्पन्न करते हैं जो अन्य, अधिक पोषक तत्व की मांग करने वाले बैक्टीरिया के विकास को बढ़ावा देते हैं)।

Commensalism– एक जीव दूसरे जीव (लाभ) की कीमत पर उसे नुकसान पहुंचाए बिना रहता है (उदाहरण के लिए, ई. कोलाई और मानव शरीर)।

शिकार- जीवों के बीच विरोधी संबंध, जब एक दूसरे को पकड़ता है, अवशोषित करता है और पचाता है (उदाहरण के लिए, आंतों का अमीबा आंतों के बैक्टीरिया को खाता है)।

बंध्याकरण।

नसबंदीकिसी वस्तु में बीजाणुओं सहित रोगाणुओं के सभी व्यवहार्य रूपों के पूर्ण विनाश की प्रक्रिया है।

नसबंदी विधियों के 3 समूह हैं: भौतिक, रासायनिक और भौतिक-रासायनिक।भौतिक विधियाँ:उच्च तापमान द्वारा बंध्याकरण, यूवी विकिरण, आयनीकरण विकिरण, अल्ट्रासाउंड, बाँझ फिल्टर के माध्यम से निस्पंदन। रासायनिक विधियाँ- रसायनों का उपयोग, साथ ही गैस नसबंदी। भौतिक-रासायनिक विधियाँ – बंटवारेशारीरिक और रासायनिक तरीके. उदाहरण के लिए, उच्च तापमान और एंटीसेप्टिक्स।

उच्च तापमान नसबंदी .

इस विधि में शामिल हैं: 1) सूखी गर्मी नसबंदी; 2) दबाव में भाप नसबंदी; 3) प्रवाहित भाप नसबंदी; 4) टिंडियलाइजेशन और पाश्चराइजेशन; 5) पकाना; 6) उबलना.

सूखी गर्मी नसबंदी.

विधि आधारित है 45 मिनट के लिए 165-170 डिग्री सेल्सियस तक गर्म की गई हवा के जीवाणुनाशक प्रभाव पर।

उपकरण: शुष्क ताप ओवन (पाश्चर ओवन). पाश्चर ओवन - धातु कैबिनेटदोहरी दीवारों के साथ, बाहर की ओर ऐसी सामग्री से मढ़ा हुआ है जो गर्मी का अच्छी तरह से संचालन नहीं करता (एस्बेस्टस)। गर्म हवा दीवारों के बीच की जगह में घूमती है और विशेष छिद्रों से बाहर निकलती है। काम करते समय, आवश्यक तापमान और नसबंदी समय की सख्ती से निगरानी करना आवश्यक है। यदि तापमान अधिक है, तो रुई के प्लग और कागज, जिसमें बर्तन लपेटे गए हैं, जल जाएंगे और कम तापमान पर लंबे समय तक कीटाणुशोधन की आवश्यकता होगी। स्टरलाइज़ेशन पूरा होने के बाद, कैबिनेट को ठंडा होने के बाद ही खोला जाता है, अन्यथा तापमान में अचानक बदलाव के कारण कांच के बर्तन फट सकते हैं।

ए) कांच, धातु, चीनी मिट्टी के सामान, बर्तन, कागज में लपेटे हुए और बाँझपन बनाए रखने के लिए कपास-धुंध स्टॉपर्स के साथ बंद (165-170 डिग्री सेल्सियस, 45 मिनट);

बी) गर्मी प्रतिरोधी पाउडर दवाइयाँ- तालक, सफेद मिट्टी, जिंक ऑक्साइड (180-200°C, 30-60 मिनट);

ग) खनिज और वनस्पति तेल, वसा, लैनोलिन, पेट्रोलियम जेली, मोम (180-200°C, 20-40 मिनट)।

दबाव में भाप नसबंदी.

सूक्ष्मजीवविज्ञानी और नैदानिक ​​​​अभ्यास में सबसे प्रभावी और व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली विधि।

विधि आधारित हैमाइक्रोबियल कोशिका के प्रोटीन पर दबाव के तहत भाप के हाइड्रोलाइजिंग प्रभाव पर। उच्च तापमान और भाप की संयुक्त क्रिया प्रदान करती है उच्च दक्षतायह नसबंदी, जो सबसे लगातार बने रहने वाले बीजाणु बैक्टीरिया को मार देती है।

उपकरण – आटोक्लेव.आटोक्लेव में 2 धातु सिलेंडर होते हैं जो एक दूसरे में भली भांति बंद करके सील किए गए ढक्कन के साथ डाले जाते हैं। बाहरी बॉयलर एक जल-भाप कक्ष है, आंतरिक बॉयलर एक नसबंदी कक्ष है। इसमें एक दबाव नापने का यंत्र, भाप रिलीज वाल्व, सुरक्षा वाल्व और जल मीटर ग्लास है। स्टरलाइज़ेशन कक्ष के शीर्ष पर एक छेद होता है जिसके माध्यम से भाप जल-भाप कक्ष से गुजरती है। दबाव नापने का यंत्र का उपयोग नसबंदी कक्ष में दबाव निर्धारित करने के लिए किया जाता है। दबाव और तापमान के बीच एक निश्चित संबंध है: 0.5 एटीएम - 112 डिग्री सेल्सियस, 1-01.1 एटीएम - 119-121 डिग्री सेल्सियस, 2 एटीएम - 134 डिग्री सेल्सियस। सुरक्षा वाल्व - अत्यधिक दबाव से बचाने के लिए। जब दबाव निर्धारित मूल्य से ऊपर बढ़ जाता है, तो वाल्व खुल जाता है और अतिरिक्त भाप छोड़ता है। परिचालन प्रक्रिया।पानी को आटोक्लेव में डाला जाता है, जिसके स्तर की निगरानी वॉटर मीटर ग्लास का उपयोग करके की जाती है। सामग्री को स्टरलाइज़ेशन कक्ष में रखा जाता है और ढक्कन को कसकर कस दिया जाता है। भाप वाल्व खुला है. हीटिंग चालू करें. पानी उबलने के बाद, नल तभी बंद किया जाता है जब सारी हवा विस्थापित हो जाती है (भाप एक निरंतर मजबूत सूखी धारा में बहती है)। यदि नल पहले बंद कर दिया गया है, तो दबाव नापने का यंत्र की रीडिंग मेल नहीं खाएगी सही तापमान. नल बंद करने के बाद बॉयलर में दबाव धीरे-धीरे बढ़ता है। नसबंदी की शुरुआत वह क्षण है जब दबाव नापने का यंत्र सुई निर्धारित दबाव दिखाती है। नसबंदी की अवधि समाप्त होने के बाद, हीटिंग बंद कर दें और आटोक्लेव को तब तक ठंडा करें जब तक कि दबाव गेज सुई 0 पर वापस न आ जाए। यदि आप पहले भाप छोड़ते हैं, तो दबाव में तेजी से बदलाव के कारण तरल उबल सकता है और प्लग को बाहर धकेल सकता है (बांझपन ख़राब होता है)। जब दबाव नापने का यंत्र सुई 0 पर लौट आए, तो भाप रिलीज वाल्व को सावधानीपूर्वक खोलें, भाप छोड़ें और फिर निष्फल की जाने वाली वस्तुओं को हटा दें। यदि सुई के 0 पर लौटने के बाद भाप नहीं निकलती है, तो पानी संघनित हो सकता है और प्लग को गीला कर सकता है और सामग्री को निष्फल किया जा सकता है (बाँझपन क्षीण हो जाएगा)।

सामग्री और नसबंदी मोड:

क) कांच, धातु, चीन, अंडरवियर, रबर और कॉर्टिकल प्लग, रबर, सेलूलोज़, लकड़ी, ड्रेसिंग (कपास ऊन, धुंध) से बने उत्पाद (119 - 121 डिग्री सेल्सियस, 20-40 मिनट));

बी) शारीरिक समाधान, इंजेक्शन के लिए समाधान, आई ड्रॉप, आसुत जल, सरल पोषक मीडिया - एमपीबी, एमपीए (119-121 डिग्री सेल्सियस, 20-40 मिनट);

ग) भली भांति बंद करके सील किए गए बर्तनों में खनिज और वनस्पति तेल (119-121 डिग्री सेल्सियस, 120 मिनट);

बहती भाप से बंध्याकरण।

विधि आधारित हैकेवल वनस्पति कोशिकाओं के विरुद्ध भाप (100°C) के जीवाणुनाशक प्रभाव पर।

उपकरण- बिना पेंच वाला ढक्कन वाला एक आटोक्लेव या कोच उपकरण.

कोच उपकरण -यह दोहरे तले वाला धातु का सिलेंडर है, जिसका 2/3 भाग पानी से भरा होता है। ढक्कन में थर्मामीटर और भाप निकलने के लिए छेद होते हैं। बाहरी दीवार ऐसी सामग्री से बनी है जो गर्मी का खराब संचालन करती है (लिनोलियम, एस्बेस्टस)। नसबंदी की शुरुआत पानी के उबलने और भाप के नसबंदी कक्ष में प्रवेश से होने वाला समय है।

सामग्री और नसबंदी मोड।यह विधि सामग्री को कीटाणुरहित करती है जो 100°C से अधिक तापमान सहन नहीं कर सकता: विटामिन, कार्बोहाइड्रेट (हिस, एंडो, प्लॉस्कीरेव, लेविन मीडिया), जिलेटिन, दूध के साथ पोषक तत्व मीडिया।

100°C पर बीजाणु नहीं मरते, इसलिए नसबंदी कई बार की जाती है - आंशिक नसबंदी - 3 दिनों तक प्रतिदिन 20-30 मिनट।

नसबंदी के बीच के अंतराल में, सामग्री को रखा जाता है कमरे का तापमानताकि बीजाणु वानस्पतिक रूपों में अंकुरित हो सकें। बाद में 100°C पर गर्म करने पर वे मर जाएंगे।

टिंडलाइजेशन और पास्चुरीकरण।

टिंडलाइज़ेशन - 100°C से कम तापमान पर आंशिक रोगाणुनाशन की विधि। इसका उपयोग वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है, जो 100°C का सामना नहीं कर सकता: सीरम, जलोदर द्रव, विटामिन . टिंडलाइज़ेशन 56 डिग्री सेल्सियस पर 5-6 दिनों के लिए 1 घंटे के लिए पानी के स्नान में किया जाता है।

pasteurization - आंशिक बंध्याकरण (बीजाणु मारे नहीं जाते), जो अपेक्षाकृत कम तापमान पर किया जाता है एक बार। पाश्चुरीकरण 70-80°C, 5-10 मिनट या 50-60°C, 15-30 मिनट पर किया जाता है। पाश्चराइजेशन का उपयोग उन वस्तुओं के लिए किया जाता है जो उच्च तापमान पर अपनी गुणवत्ता खो देते हैं। उदाहरण के लिए, पाश्चराइजेशन, उपयोग के लिए कुछ खाद्य उत्पाद: दूध, शराब, बीयर . इससे उनके वाणिज्यिक मूल्य को नुकसान नहीं पहुंचता है, लेकिन बीजाणु व्यवहार्य बने रहते हैं, इसलिए इन उत्पादों को प्रशीतित में संग्रहित किया जाना चाहिए।

आग पर कैल्सीनेशन.यह नसबंदी का एक विश्वसनीय तरीका है, लेकिन वस्तुओं के खराब होने के कारण इसका उपयोग सीमित है। बैक्टीरियोलॉजिकल लूप्स को इस तरह से स्टरलाइज़ किया जाता है।

सूखी नसबंदीबुखार। एक पाश्चर ओवन में आयोजित (कण्डरा ------

ओवन) 1 घंटे के लिए 160-170 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर। इस विधि का उपयोग प्रयोगशाला के कांच के बर्तनों, कागज में लिपटे पिपेट और कपास प्लग के साथ बंद परीक्षण ट्यूबों को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। 170 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान पर, कागज, रूई और धुंध का जलना शुरू हो जाता है।

दबाव में भाप नसबंदी (आटोक्लेविंग)।सबसे सार्वभौमिक नसबंदी विधि। यह एक आटोक्लेव में किया जाता है - एक जल-भाप स्टरलाइज़र। आटोक्लेव के संचालन का सिद्धांत दबाव पर पानी के क्वथनांक की निर्भरता पर आधारित है।

आटोक्लेव एक दोहरी दीवार वाली धातु की कड़ाही है जिसमें भली भांति बंद करके सील किया गया ढक्कन होता है। आटोक्लेव के तल में पानी डाला जाता है, निष्फल की जाने वाली वस्तुओं को कार्य कक्ष में रखा जाता है, और ढक्कन को पहले कसकर पेंच किए बिना बंद कर दिया जाता है। आंच चालू करें और पानी को उबाल लें। परिणामी भाप कार्य कक्ष से हवा को विस्थापित करती है, जो खुले आउटलेट वाल्व के माध्यम से बाहर आती है। जब सारी हवा विस्थापित हो जाती है और भाप की एक सतत धारा नल से निकलती है, तो नल बंद कर दिया जाता है और ढक्कन सील कर दिया जाता है। दबाव नापने का यंत्र के नियंत्रण में भाप को वांछित दबाव में लाया जाता है। भाप का तापमान दबाव पर निर्भर करता है: सामान्य वायुमंडलीय दबाव पर, दबाव नापने का यंत्र सुई 0 एटीएम पर होती है। - भाप का तापमान 100°C, 0.5 एटीएम पर। - 112°C, 1 बजे। -121°C, 1.5 बजे। - 127°सेल्सियस, 2 बजे। - 134°C. नसबंदी के अंत में, आटोक्लेव को बंद कर दें, दबाव कम होने तक प्रतीक्षा करें, धीरे-धीरे भाप छोड़ें और ढक्कन खोलें। आमतौर पर 1 एटीएम के दबाव पर। 20-40 मिनट के भीतर, सरल पोषक मीडिया और समाधान जिनमें प्रोटीन और कार्बोहाइड्रेट नहीं होते हैं, ड्रेसिंग और लिनन को निष्फल कर दिया जाता है। विसंक्रमित की जाने वाली सामग्री भाप के लिए पारगम्य होनी चाहिए। बड़ी मात्रा में सामग्रियों को स्टरलाइज़ करते समय ( शल्य चिकित्सा सामग्री) समय बढ़ाकर 2 घंटे कर दिया गया है। 2 एटीएम के दबाव पर. पैथोलॉजिकल सामग्री और खर्च किए गए माइक्रोबियल संस्कृतियों को कीटाणुरहित करें।

शर्करा युक्त पोषक तत्व मीडिया को 1 एटीएम पर निष्फल नहीं किया जा सकता है, क्योंकि वे कारमेलाइज़ होते हैं, इसलिए उन्हें बहने वाली भाप के साथ आंशिक नसबंदी, या 0.5 एटीएम पर ऑटोक्लेविंग के अधीन किया जाता है।

नसबंदी व्यवस्था को नियंत्रित करने के लिए जैविक और भौतिक तरीकों का उपयोग किया जाता है। जैविक विधि इस तथ्य पर आधारित है कि बैसिलस स्टीयरोथर्मोफिलस बीजाणुओं को निष्फल की जाने वाली सामग्री के साथ एक साथ रखा जाता है, जो 15 मिनट में 121 डिग्री सेल्सियस पर मर जाते हैं। बंध्याकरण के बाद पोषक माध्यम पर बीजाणु नहीं उगने चाहिए। भौतिक विधियह उन पदार्थों के उपयोग पर आधारित है जिनका एक निश्चित गलनांक होता है, उदाहरण के लिए, सल्फर (119°C), बेंजोइक एसिड (120°C)। सूखी डाई (फुचिन) के साथ मिश्रित पदार्थ वाली सीलबंद ट्यूबों को निष्फल की जाने वाली सामग्री के साथ एक आटोक्लेव में रखा जाता है। यदि आटोक्लेव में तापमान पर्याप्त है, तो पदार्थ पिघल जाएगा और डाई का रंग बदल देगा।

प्रवाह योग्य नसबंदीभाप को कोच उपकरण में या आटोक्लेव में ढक्कन खोलकर और आउटलेट वाल्व खुला रखकर बाहर निकाला जाता है। उपकरण में पानी को 100°C तक गर्म किया जाता है। परिणामी भाप एम्बेडेड सामग्री से होकर गुजरती है और उसे निष्फल कर देती है। 100°C पर एक भी उपचार बीजाणुओं को नहीं मारता है। इसलिए, आंशिक नसबंदी विधि का उपयोग किया जाता है - 30 मिनट के लिए लगातार 3 दिन, बीच में कमरे के तापमान पर एक दिन के लिए छोड़ दिया जाता है। 100°C पर गर्म करने से बीजाणुओं का तापीय सक्रियण होता है, जिसके परिणामस्वरूप वे अगले दिन तक वानस्पतिक रूप में अंकुरित हो जाते हैं और दूसरे और तीसरे तापन के दौरान मर जाते हैं। परिणामस्वरूप, केवल पोषक माध्यम को बहती भाप से निष्फल किया जा सकता है, क्योंकि बीजाणुओं के अंकुरण के लिए पोषक तत्वों की उपस्थिति आवश्यक है।

ड्राई हीट स्टरलाइज़ेशन ड्राई हीट ओवन (पाश्चर ओवन) में किया जाता है। सूखी गर्मी रोगाणुरहित करती है प्रयोगशाला कांच के बने पदार्थ. इसे ओवन में ढीला रूप से लोड किया जाता है ताकि सामग्री समान रूप से गर्म हो जाए। कैबिनेट का दरवाज़ा कसकर बंद करें, इलेक्ट्रिक हीटिंग डिवाइस चालू करें और तापमान 160-165 0 C पर लाएँ और 1 घंटे के लिए स्टरलाइज़ करें। स्टरलाइज़ेशन के अंत में, हीटिंग बंद कर दें, लेकिन कैबिनेट का दरवाज़ा तब तक न खोलें जब तक ओवन ठंडा न हो जाए (अन्यथा ठंडी हवाबर्तनों में दरारें आ जाएंगी)। स्टरलाइज़ेशन मोड: 160°C - 60 मिनट, 180°C - 15 मिनट, 200°C - 5 मिनट। तरल पदार्थ, कल्चर मीडिया, रबर और सिंथेटिक सामग्री को सूखी गर्मी से कीटाणुरहित नहीं किया जा सकता है।

दबाव भाप नसबंदीविषय ड्रेसिंग सामग्री, सर्जिकल लिनन, सर्जिकल उपकरण, पोषक तत्व मीडिया, प्रयोगशाला कांच के बर्तन, संक्रमित सामग्री, इंजेक्शन समाधान। सामग्री को कंटेनरों (बक्सों) में रखा जाता है। स्टरलाइज़ेशन के बाद नमी को अवशोषित करने के लिए फैब्रिक पैड को बिक्स के नीचे रखा जाता है। सामग्री की बाँझपन 3 दिनों तक बनी रहती है। बर्तनों और टेस्ट ट्यूबों में संक्रमित सामग्री को ढक्कन वाले धातु के टैंकों में निष्फल कर दिया जाता है।

दबाव के तहत भाप निर्जलीकरण एक आटोक्लेव में किया जाता है। एक ही उपचार से, जीवाणुओं के वानस्पतिक और बीजाणु दोनों रूप मर जाते हैं। दबाव में भाप देशी प्रोटीन, तरल पदार्थ और रबर भागों वाले उपकरणों वाले मीडिया को छोड़कर, पोषक मीडिया को निर्जलित कर देती है। सरल मीडिया (एमपीए, एमपीबी) को 120 डिग्री सेल्सियस (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। देशी प्रोटीन और कार्बोहाइड्रेट युक्त मीडिया को इस तापमान पर निष्फल नहीं किया जा सकता है, क्योंकि ये ऐसे पदार्थ हैं जो गर्म करने पर आसानी से बदल जाते हैं। कार्बोहाइड्रेट वाले मीडिया को आंशिक रूप से 100 0 C पर या एक आटोक्लेव में 112 0 C (5 एटीएम) पर 10-15 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। विभिन्न तरल पदार्थ, रबर की नली, प्लग, बैक्टीरियल मोमबत्तियाँ और फिल्टर वाले उपकरणों को 120 0 C (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है।

संक्रमित सामग्री (टेस्ट ट्यूब, कप में) को भाप के प्रवेश के लिए छेद वाले विशेष धातु की बाल्टियों या टैंकों में रखा जाता है और 1 घंटे के लिए 126 0 C (1.5 एटीएम) पर निष्फल किया जाता है। बीजाणु बैक्टीरिया के साथ काम करने के बाद उपकरणों को भी निष्फल कर दिया जाता है।

नसबंदी के 2 तरीके हैं:

1. आटोक्लेव में या कोच उपकरण में ढक्कन खोलकर और आउटलेट वाल्व खुला रखकर भाप प्रवाहित करना, जब भाप का जीवाणुरोधी प्रभाव वनस्पति रूपों के खिलाफ प्रकट होता है। इस प्रकार विटामिन और कार्बोहाइड्रेट, यूरिया, दूध, आलू और जिलेटिन युक्त मीडिया को निष्फल किया जाता है। पूर्ण नसबंदी के लिए, आंशिक नसबंदी का उपयोग लगातार 3 दिनों तक 20-30 मिनट के लिए (100 0 C पर) किया जाता है। यह बीजाणुओं को भी मारता है।
2. प्रेशर स्टीम स्टरलाइजेशन सबसे ज्यादा है प्रभावी तरीकाअभाव. ड्रेसिंग, लिनन को 1 एटीएम पर निष्फल किया जाता है। 15-20 मिनट, संक्रमित सामग्री 20-25 मिनट के लिए 1.5-2 एटीएम पर।

थर्मोस्टेट- स्थिर तापमान बनाए रखने के लिए एक उपकरण - सूक्ष्मजीवों की बढ़ती संस्कृतियों के लिए उपयोग किया जाता है। यह एक कैबिनेट (चित्र 1) है जिसमें इसे लंबे समय तक बनाए रखा जाता है निश्चित तापमान. कई सूक्ष्मजीवों के प्रजनन के लिए इष्टतम तापमान 37 ºС है। थर्मोस्टैट शुष्क हवा और पानी के प्रकार में उपलब्ध हैं।

सुखाने की कैबिनेट (पाश्चर ओवन)व्यंजन, उपकरण और सूखी सामग्री, जैसे स्टार्च, चाक (चित्रा 2) की सूखी गर्मी नसबंदी के लिए उपयोग किया जाता है। कीटाणुरहित की जाने वाली सामग्री को पहले कागज में लपेटा जाता है और एक कैबिनेट में रखा जाता है ताकि यह दीवारों को न छुए। नसबंदी दो घंटे के लिए 160 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर की जाती है। तापमान को 180 से ऊपर बढ़ाने की अनुशंसा नहीं की जाती है: कपास के प्लग और कागज खराब होने लगते हैं (भूरा हो जाना, भंगुर हो जाना)। कैबिनेट को बंद करने और ठंडा करने के बाद निष्फल सामग्री को हटा दिया जाता है, अधिमानतः जब कैबिनेट में तापमान कमरे के तापमान के बराबर होता है।

कॉलोनी गिनती उपकरण(चित्र 3) - एक अर्ध-स्वचालित काउंटर जो इलेक्ट्रिक पेन से सुसज्जित है स्प्रिंग डिवाइस, पेट्री डिश में बैक्टीरिया कालोनियों की गिनती के लिए डिज़ाइन किया गया। कप
बैक्टीरिया कालोनियों वाली एक पेट्री को स्कैनिंग ग्लास पर उल्टा रखा जाता है। कॉलोनी की स्थिति के अनुरूप पेट्री डिश के नीचे के क्षेत्र पर इलेक्ट्रिक पेन का हल्का दबाव कांच पर एक निशान छोड़ देता है। इस स्थिति में, धारक ऊपर उठ जाता है, सर्किट बंद हो जाता है और मीटर रीडिंग एक से बढ़ जाती है। गिनती शुरू होने से पहले और खत्म होने के बाद पल्स काउंटर की रीडिंग में अंतर की गणना करके बैक्टीरिया कालोनियों की संख्या की गणना की जाती है।

आटोक्लेव(चित्र 4) एक मोटी दीवार वाला उपकरण है जिसे दबाव में भाप के साथ व्यंजन और कल्चर मीडिया को स्टरलाइज़ करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। यह एक सीलबंद कड़ाही है जिसमें दोहरी धातु की दीवारें और एक ढक्कन है। दीवारों के बीच का स्थान (जलवाष्प कक्ष) पानी से भरा होता है। आंतरिक भाग(नसबंदी कक्ष) एक दबाव नापने का यंत्र, सुरक्षा वाल्व और पानी और भाप निकालने के लिए एक नल से सुसज्जित है। एक टाइट सील बनाने के लिए, आटोक्लेव को रबर गैस्केट वाले ढक्कन से कसकर बंद कर दिया जाता है। 20...30 मिनट के लिए 0.5 से 1.0 एमपीए के दबाव में कल्चर मीडिया को स्टरलाइज़ करने के लिए उपयोग किया जाता है।

1 – शरीर; 2 - थर्मामीटर; 1 - आवरण; 2 - शरीर;

3 - दरवाजा; 4 - पोटेंशियोमीटर; 3 - गियरबॉक्स; 4 - नियंत्रण इकाई;

5 - टॉगल स्विच; 6 - दीपक; 5 - अंकन; 6-थर्मामीटर

7 - वेंटिलेशन छेद

चित्र 1 - थर्मोस्टेट चित्र 2 - सुखाने वाली कैबिनेट

1 - पेट्री डिश के लिए टेबल; 2 - स्प्रिंग डिवाइस के साथ पेन;

3 - काउंटर संकेतक; 4 - पल्स काउंटर चालू करने के लिए टॉगल स्विच; 5 - मीटर लाइटिंग लैंप चालू करने के लिए टॉगल स्विच

चित्र 3 - सूक्ष्मजीवों की कॉलोनियों की गिनती के लिए उपकरण

प्रयोगशाला अभ्यास में, सूक्ष्मजीवों के साथ काम करते समय, यह सुनिश्चित करने के लिए लगातार उपाय करना आवश्यक है कि काम के दौरान उपयोग किए जाने वाले व्यंजन, संस्कृति मीडिया और धातु उपकरणों में रोगाणु न हों। इस प्रयोजन के लिए, निम्नलिखित नसबंदी विधियों का उपयोग किया जाता है:

नसबंदी अतितापित भापदबाव में;

बहती भाप से बंध्याकरण;

गर्म हवा नसबंदी;

कीटाणुशोधन.

स्टरलाइज़ेशन की सबसे अच्छी विधि विभिन्न वस्तुओं को अत्यधिक गर्म भाप से उपचारित करना है विशेष उपकरण- आटोक्लेव.

दबाव में आटोक्लेव और अत्यधिक गरम भाप नसबंदी

आटोक्लेव धातु (स्टील, कच्चा लोहा या तांबा) बॉयलर हैं जिनमें दोहरी दीवारें और एक विशाल ढक्कन होता है जो बोल्ट और रबर गैसकेट के साथ भली भांति बंद करके सील किया जाता है। हीटिंग सिस्टम के आधार पर, आटोक्लेव भाप, बिजली और आग हैं (चित्र 42)। एक आटोक्लेव में 115-120 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर उच्च दबाव और अत्यधिक गर्म भाप का उत्पादन आपको 20-30 मिनट के भीतर वनस्पति कोशिकाओं और माइक्रोबियल बीजाणुओं दोनों को नष्ट करने की अनुमति देता है।

एक आटोक्लेव में, उन सभी वस्तुओं को निष्फल कर दिया जाता है जो उच्च तापमान पर खराब नहीं होती हैं: विभिन्न तरल पदार्थ (पानी, पोषक तत्व मीडिया जिसमें कार्बोहाइड्रेट घटक नहीं होते हैं), कांच के बर्तन, धातु के उपकरण, कपास ऊन, धुंध, कागज, आदि।

ऐसे मामलों में जहां कुछ पदार्थ आटोक्लेव में सामान्य नसबंदी व्यवस्था का सामना नहीं करते हैं (विशेष रूप से, शर्करा युक्त पोषक तत्व मीडिया), उन्हें आटोक्लेव में 112 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 20 मिनट के लिए और साथ ही हल्की परिस्थितियों में निष्फल किया जाता है।

पर उच्च दबावआटोक्लेव में अत्यधिक गरम भाप, हीटिंग तापमान तदनुसार बढ़ जाता है; इससे कुछ कल्चर मीडिया में मिलाए गए शर्करा का कारमेलाइजेशन हो जाता है, जिससे मीडिया रोगाणुओं के शारीरिक गुणों को निर्धारित करने के लिए अनुपयुक्त हो जाता है।

आटोक्लेव के अंदर का दबाव आटोक्लेव के ढक्कन या बॉडी में लगे दबाव गेज का उपयोग करके मापा जाता है। यदि दबाव अत्यधिक बढ़ जाता है, तो एक सुरक्षा वाल्व स्वचालित रूप से सक्रिय हो जाता है, जो डिज़ाइन के आधार पर, ढक्कन पर या आटोक्लेव दीवार की साइड सतह पर स्थित होता है। सीटी के साथ सुरक्षा वाल्व से निकलने वाली भाप की एक धारा हीटिंग बंद करने की आवश्यकता की चेतावनी देती है। यदि हीटिंग बंद नहीं की गई तो आटोक्लेव फट सकता है।

एक थर्मामीटर को कभी-कभी आटोक्लेव के ढक्कन पर एक विशेष जेब में रखा जाता है, जिसके साथ नसबंदी तापमान मापा जाता है। आटोक्लेव के अंदर एक स्टैंड होता है, जिसके नीचे आटोक्लेव के बाहर स्थित फ़नल वाली ट्यूब के माध्यम से पानी डाला जाता है। इसके अलावा, आटोक्लेव भाप और हवा छोड़ने के लिए एक नल और पानी बाहर निकालने के लिए एक नल से सुसज्जित हैं।

नसबंदी के दौरान आटोक्लेव को संभालने के नियम इस प्रकार हैं: उपकरण को एक फ़नल और ट्यूब के माध्यम से पानी से भर दिया जाता है, जिसका स्तर स्टैंड के नीचे होना चाहिए। कीटाणुरहित की जाने वाली वस्तुओं को विशेष धातु की बोतलों में रखा जाता है और एक आटोक्लेव में लोड किया जाता है। आटोक्लेव का ढक्कन खराब हो गया है।

भाप और हवा को बाहर निकलने की अनुमति देने के लिए नल खोलने से हीटिंग शुरू हो जाती है। जैसे ही पानी उबलता है, परिणामी भाप आटोक्लेव से हवा को विस्थापित करना शुरू कर देती है। स्टीम आउटलेट वाल्व को तब तक खुला रखा जाता है जब तक कि सूखी भाप एक सतत धारा में बाहर न निकल जाए। यह आटोक्लेव से हवा को पूरी तरह हटाने का संकेत देता है। फिर नल बंद कर दिया जाता है. भाप, जो आगे गर्म करने पर अधिक से अधिक मात्रा में जमा हो जाती है, आटोक्लेव में दबाव और साथ ही तापमान बढ़ा देती है। आटोक्लेव के साथ काम करते समय, आपको भाप के दबाव और उसके तापमान (तालिका 4) के बीच संबंधों की तालिका द्वारा निर्देशित किया जा सकता है।

दबाव नापने का यंत्र सुई पहुंचने के बाद आवश्यक सूचकदबाव (आटोक्लेव में तापमान स्वीकृत नसबंदी तापमान के अनुरूप होगा), आटोक्लेव के हीटिंग को समायोजित करें ताकि दबाव आवश्यक समय के लिए समान स्तर पर बना रहे। नसबंदी के अंत में, गर्म करना बंद कर दें। जब आटोक्लेव में तापमान गिर जाता है और दबाव नापने का यंत्र शून्य हो जाता है (आटोक्लेव में दबाव वायुमंडलीय दबाव के बराबर होता है), तो भाप रिलीज वाल्व को ध्यान से खोलें, भाप छोड़ें और, आटोक्लेव का ढक्कन खोलकर, सामग्री को हटा दें। आटोक्लेव में दबाव कम होने से पहले, भाप रिलीज वाल्व को समय से पहले खोलना असंभव है। आटोक्लेव कक्ष में दबाव में तेज कमी से 100 डिग्री सेल्सियस से अधिक तापमान तक गर्म किए गए तरल पदार्थों का हिंसक उबलना होगा, यानी। सामान्यतः क्वथनांक से ऊपर वायु - दाब. तरल पदार्थों को जोर से उबालने से रुई के प्लग गीले हो जाएंगे या यहां तक ​​कि बर्तनों से बाहर निकल जाएंगे - काम व्यर्थ हो जाएगा। पोषक तत्व मीडिया खराब हो जाएगा, क्योंकि हवा से आने वाला माइक्रोफ्लोरा आसानी से गीले प्लग पर विकसित होता है, अंदर प्रवेश करता है और मीडिया को संक्रमित करता है। इसके अलावा, उच्च दबाव के साथ आटोक्लेव खोलना कर्मचारी के लिए खतरनाक है।

हालाँकि, जैसे ही दबाव नापने का यंत्र शून्य पर रुकता है, आटोक्लेव को तुरंत खोला जाना चाहिए, अन्यथा प्लग पर संघनन प्रवाहित होने लगेगा और वे गीले भी हो जाएंगे। संघनन के पानी से प्लग को गीला होने से बचाने के लिए, उन्हें स्टरलाइज़ेशन से पहले कागज से ढक दिया जाता है।

यदि तापमान 120 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखा जाता है, जो 2 एटीएम (19.61 * 10000 एन/एम2) के दबाव या सामान्य से 1 एटीएम ऊपर दबाव गेज पर होता है, तो आटोक्लेव में रखी गई सामग्री 20-30 मिनट में विश्वसनीय रूप से निष्फल हो जाएगी। बहती भाप से मीडिया को स्टरलाइज़ करने के लिए आटोक्लेव का भी सफलतापूर्वक उपयोग किया जा सकता है; इस मामले में, आटोक्लेव का ढक्कन खराब नहीं होता है।

कोच बॉयलर और बहने वाली भाप नसबंदी

कोच बॉयलर गैल्वेनाइज्ड शीट या तांबे से बना एक सिलेंडर है जिसमें दोहरी दीवारें और शंक्वाकार हेलमेट के आकार का ढक्कन होता है (चित्र 43)। ढक्कन के बीच में थर्मामीटर के लिए एक छेद होता है। कोच बॉयलर का बाहरी भाग एक परत से ढका हुआ है गर्मी-इन्सुलेट सामग्री: एस्बेस्टस, लिनोलियम, आदि।

बॉयलर के अंदर एक विभाजन (स्टैंड) रखा गया है, जो बॉयलर के आंतरिक स्थान को दो खंडों में विभाजित करता है: ऊपरी और निचला। निचला भाग पानी से भरा हुआ है, जिसका स्तर जल मीटर ग्लास द्वारा निर्धारित किया जाता है: पानी को स्टैंड के ऊपरी हिस्से को कवर नहीं करना चाहिए। विसंक्रमित की जाने वाली वस्तुओं को बॉयलर के ऊपरी भाग में जालीदार बाल्टियों में एक के ऊपर एक रखकर रखा जाता है। बॉयलर को ढक्कन से बंद करके, वे उसमें पानी गर्म करना शुरू करते हैं। नसबंदी की शुरुआत उस क्षण को माना जाता है जब थर्मामीटर 98-100 डिग्री सेल्सियस दिखाता है। थर्मामीटर की अनुपस्थिति में, नसबंदी की शुरुआत उस क्षण से मानी जाती है जब बॉयलर के ढक्कन में छेद से भाप तेजी से निकलने लगती है। इस प्रकार, बॉयलर के संचालन के दौरान निष्फल की जाने वाली वस्तुएं हमेशा बहती भाप की धारा में रहेंगी।

बहती भाप से नसबंदी की विधि, इसकी सादगी और उपलब्धता के कारण, प्रयोगशाला अभ्यास में व्यापक रूप से उपयोग की जाती है। बहने वाली भाप का उपयोग मुख्य रूप से पोषक तत्व मीडिया को स्टरलाइज़ करने के लिए किया जाता है, जिनके गुण 100 डिग्री सेल्सियस से ऊपर गर्म होने पर बदल जाते हैं: प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट और जिलेटिन। इन वातावरणों के लिए, प्रवाहित भाप स्टरलाइज़ेशन विधि सबसे उपयुक्त है।

प्रवाहित भाप स्टरलाइज़ेशन विधि का नुकसान इसकी अवधि है, क्योंकि माध्यम को पूरी तरह से स्टरलाइज़ करने के लिए एक निश्चित समय के लिए बॉयलर में बार-बार हीटिंग करना आवश्यक है - 20 मिनट से 1.5 घंटे (औसतन 30-45 मिनट) के आधार पर। 24 घंटे के अंतराल पर तरल की मात्रा। थर्मोस्टेट में माध्यम को गर्म करने के बीच की पूरी अवधि को 25-30 डिग्री सेल्सियस पर रखने की सिफारिश की जाती है।

कोच बॉयलर में एक बार गर्म करने से केवल वनस्पति माइक्रोबियल कोशिकाएं मर जाती हैं, लेकिन बीजाणु जीवित रह सकते हैं। निष्फल पोषक माध्यम को अंदर रखते समय अनुकूल परिस्थितियां(कमरे के तापमान पर, या थर्मोस्टेट में भी बेहतर), कुछ शेष बीजाणु अंकुरित होंगे और अगले दिन तक वनस्पति कोशिकाओं में बदल जाएंगे। बार-बार गर्म करने से इन नव विकसित कोशिकाओं की मृत्यु हो जाएगी। अंत में, माध्यम को थर्मोस्टेट में रखने के एक दिन बाद तीसरी बार गर्म करने से पूर्ण बाँझपन सुनिश्चित हो जाएगा। इस विधि को फ्रैक्शनल स्टरलाइज़ेशन कहा जाता है। में व्यावहारिक कार्यकोच बॉयलर में बहती भाप से स्टरलाइज़ेशन के बजाय, आटोक्लेव में पारंपरिक स्टरलाइज़ेशन का उपयोग अक्सर 112 डिग्री सेल्सियस पर 15-20 मिनट के लिए 0.5 एटीएम के बैक प्रेशर के साथ किया जाता है।

सुखाने की कैबिनेट और गर्म हवा नसबंदी

प्रयोगशाला अभ्यास में, सूक्ष्मजीवविज्ञानी कांच के बर्तनों को स्टरलाइज़ करने के लिए, एक सुखाने कैबिनेट या तथाकथित पाश्चर ओवन का होना आवश्यक है। सुखाने वाली कैबिनेट और पाश्चर ओवन का डिज़ाइन सिद्धांत समान है। चूल्हे ही बनते हैं आयत आकार, और सुखाने वाले अलमारियाँ न केवल आयताकार हो सकती हैं, बल्कि बेलनाकार आकार भी हो सकती हैं (चित्र 44 और 45)। इन उपकरणों में 1 घंटे के लिए 160 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर या 2 घंटे के लिए 150 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर गर्म हवा (शुष्क गर्मी) के साथ नसबंदी की जाती है।

पाश्चर ओवन और सुखाने वाले ओवन दोनों दोहरी दीवारों वाले उपकरणों के अंदर खोखले होते हैं, जिनमें दोहरे दरवाजे होते हैं जो कसकर बंद होते हैं। बाहर की ओर, वे थर्मल इन्सुलेशन के लिए एस्बेस्टस की एक परत से ढके होते हैं। दीवारों के बीच घूमता है गरम हवा, जिसका ताप विद्युत सर्पिल या गैस बर्नर द्वारा किया जाता है। कैबिनेट के अंदर कई (आमतौर पर दो या तीन) छेद वाली अलमारियां होती हैं। कैबिनेट के शीर्ष पर दो खुले स्थान हैं: एक थर्मामीटर के लिए है, और दूसरा वेंटिलेशन के लिए है। इलेक्ट्रिक सुखाने वाली अलमारियाँ सबसे सुविधाजनक हैं।

नवीनतम डिज़ाइन के सुखाने वाले कैबिनेट में चार हीटिंग चरण होते हैं, जिन्हें कैबिनेट की साइड की दीवार पर लगाए गए एक विशेष नियामक द्वारा सक्रिय किया जा सकता है। हीटिंग की वांछित डिग्री एक, दो, तीन या सभी चार को चालू करके प्राप्त की जाती है विद्युत सर्पिल, और सर्पिलों को चालू करने का क्रम कोई भी हो सकता है।

कांच के बर्तनों के अलावा, आप सुखाने वाले अलमारियाँ में धुंध और कपास ऊन को निर्जलित कर सकते हैं, हालांकि उन्हें आटोक्लेव में संसाधित करना अभी भी बेहतर है, क्योंकि वे 160 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर पीले हो जाते हैं। में निष्फल नहीं किया जा सकता सुखाने की कैबिनेटरबर उत्पाद, क्योंकि वे उच्च तापमान का सामना नहीं कर सकते, भंगुर हो जाते हैं और खराब हो जाते हैं। तरल पदार्थ 150-160 डिग्री सेल्सियस पर उबलते हैं और उनकी रासायनिक संरचना बदल जाती है।

हवा से रोगाणुओं द्वारा निष्फल वस्तुओं के बाद के संदूषण से बचने के लिए, उन्हें नसबंदी से पहले कागज में लपेटा जाता है। पेट्री डिश को 2 टुकड़ों में कागज में लपेटा जाता है, ताकि लपेटने में कोई गैप न रहे। ग्लास ट्यूब और पिपेट को भी कागज में लपेटा जाता है, पहले प्रत्येक को अलग से, और फिर 10-20 टुकड़ों के पैक में। ट्यूबों और पिपेटों को पूरी तरह से सुरक्षित रखने के लिए उन्हें लपेटने में बेहद सावधानी बरतनी चाहिए बाहरी सतहहवा के साथ संचार से. गर्म हवा से कीटाणुरहित करने से पहले फ्लास्क, टेस्ट ट्यूब, बोतलों को कॉटन स्टॉपर्स और पेपर कैप से बंद कर दिया जाता है।

सुखाने वाले कैबिनेट में तापमान 170 डिग्री सेल्सियस से ऊपर न बढ़ने दें, क्योंकि इस तापमान पर कपास के प्लग भूरे हो जाते हैं, और कागज के रैपर भंगुर हो जाते हैं और यहां तक ​​कि जल भी जाते हैं। नसबंदी की शुरुआत उस क्षण को माना जाता है जब थर्मामीटर 150-160 डिग्री सेल्सियस दिखाता है। स्टरलाइज़ेशन के लिए आवश्यक समय बीत जाने के बाद, हीटिंग बंद कर दिया जाता है। बर्तनों को टूटने से बचाने के लिए, आपको केवल सूखे बर्तनों को स्टरलाइज़ करना होगा और स्टरलाइज़ेशन के बाद कैबिनेट को तभी खोलना होगा जब उसमें तापमान 50-70 डिग्री सेल्सियस तक गिर जाए। छोटी प्रयोगशाला वस्तुएं, जैसे प्लैटिनम लूप, सुई, चिमटी, कैंची इत्यादि को केवल लौ में जलाकर निष्फल किया जा सकता है गैस बर्नर(या अल्कोहल लैंप)।

कीटाणुशोधन

सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशाला में कीटाणुशोधन का अक्सर सहारा लेना पड़ता है। सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले कीटाणुनाशक निम्नलिखित हैं: कार्बोलिक एसिड का 3-5% घोल और अन्य उच्च फिनोल का घोल, 50-70% घोल एथिल अल्कोहोल, ब्यूटाइल अल्कोहल की समान सांद्रता, 4% फॉर्मेल्डिहाइड घोल, क्लोरोफॉर्म और टोल्यूनि का 1-2% घोल, क्लोरैमाइन का 0.5% घोल, आदि।

कैनिंग कारखानों की सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशालाओं में, टेबल की सतहों, बर्तनों, फर्शों और परिसर की दीवारों को कीटाणुरहित किया जाता है। टेबल की सतहों को कीटाणुरहित करने के लिए, आप न केवल एथिल अल्कोहल समाधान, बल्कि कार्बोलिक एसिड समाधान का भी उपयोग कर सकते हैं।

कीटाणुशोधन सीवरेज उपकरणकैनरीज़ और अन्य में खाद्य उद्यमब्लीच के 5-10% घोल से निर्मित। परिसंचरण कीटाणुशोधन के लिए कांच के मर्तबानडिब्बाबंदी कारखानों में उपयोग किया जाता है क्लोरीन पानी, जिसमें प्रति लीटर कम से कम 100 मिलीग्राम सक्रिय क्लोरीन हो। ऐसा घोल तैयार करने के लिए, ब्लीच लें और इसे थोड़ी मात्रा में पानी के साथ मिलाएं जब तक कि गाढ़ा द्रव्यमान प्राप्त न हो जाए। दूध का. इस मिश्रण को पानी में मिलाया जाता है, अच्छी तरह हिलाया जाता है और एक दिन के लिए छोड़ दिया जाता है। ब्लीचिंग पाउडरकैल्शियम ऑक्साइड हाइड्रेट - Ca(OH)2 - और सक्रिय क्लोरीन बनाने के लिए प्रतिक्रिया करता है। Ca(OH)2 नीचे बैठ जाता है, स्पष्टीकरण के बाद तलछट के ऊपर का घोल पारदर्शी और हरे रंग का हो जाता है। इस घोल में कंटेनर को भिगोने का समय 10 मिनट तक रहता है। क्लोरीनीकरण के बाद, कंटेनर को बहते पानी में अच्छी तरह से धोना चाहिए।