उच्च तापमान नसबंदी. प्रयोगशाला कांच के बर्तनों का बंध्याकरण रासायनिक बंध्याकरण विधि

बंध्याकरण को भौतिक, रासायनिक, यांत्रिक और जैविक तरीकों और विभिन्न विधियों द्वारा दर्शाया जाता है। किसी विशेष स्टरलाइज़ेशन विधि और उसके तरीकों का उपयोग करने की व्यवहार्यता स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री की विशेषताओं, उसके भौतिक और रासायनिक गुणों पर निर्भर करती है। स्टरलाइज़ेशन की अवधि स्टरलाइज़ की जा रही वस्तु, स्टरलाइज़िंग एजेंट और उसकी खुराक, वातावरण के तापमान और आर्द्रता पर निर्भर करती है।

शारीरिक बंध्याकरण विधि भौतिक बंध्याकरण के तरीकों में सुखाना, जलाना और कैल्सीनेशन, उबालना, पास्चुरीकरण और टिंडाइजेशन शामिल हैं। गरम हवा (शुष्क ताप), अल्ट्रासाउंड, पराबैंगनी और रेडियोधर्मी विकिरण, उच्च आवृत्ति धारा, सूर्य का प्रकाश। उच्च तापमान के संपर्क में आने वाली वस्तुओं को स्टरलाइज़ करने का सबसे आम तरीका आग, गर्म हवा और दबाव में संतृप्त भाप से स्टरलाइज़ करना है। आग का उपयोग उन संक्रमित वस्तुओं को जलाने के लिए किया जाता है जिनका कोई मूल्य नहीं है (अनावश्यक कागजात, पुराने वॉलपेपर, लत्ता, कचरा), तपेदिक के रोगियों के थूक को कीटाणुरहित करने के लिए, विशेष रूप से खतरनाक संक्रमण से मरने वाले लोगों और जानवरों की लाशों को कीटाणुरहित करने के लिए, साथ ही साथ विभिन्न वस्तुओं को जलाना और शांत करना। उपकरणों, प्रयोगशाला और फार्मास्युटिकल कांच के बर्तनों के कीटाणुशोधन के लिए सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में जलने और कैल्सीनेशन का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। बर्नर की लौ में कैल्सीनेशन या फ्लेम्बिंग नसबंदी की एक विधि है जिसमें वस्तु पूरी तरह से निष्फल हो जाती है, क्योंकि वनस्पति कोशिकाएं, सिस्ट और सूक्ष्मजीवों के बीजाणु मर जाते हैं। आमतौर पर, लूप, स्पैटुला, पिपेट, स्लाइड और कवरस्लिप, छोटे उपकरण और अन्य दूषित वस्तुओं को कैल्सीनेशन द्वारा निष्फल कर दिया जाता है यदि उन्हें उबाला नहीं जा सकता है। कैंची और स्केलपेल को गर्म करके कीटाणुरहित करने की अनुशंसा नहीं की जाती है, क्योंकि आग के संपर्क में आने पर काटने की सतह सुस्त हो जाती है। चिकित्सा पद्धति में उपयोग की जाने वाली शारीरिक नसबंदी की सबसे सरल और सबसे आम विधियों में से एक गर्म हवा नसबंदी (शुष्क गर्मी) है। सूखी गर्मी नसबंदी सुखाने वाले ओवन (पाश्चर ओवन) में की जाती है। शुष्क गर्म हवा में जीवाणुनाशक, विषाणुनाशक, बीजाणुनाशक प्रभाव होता है और इसका उपयोग मुख्य रूप से कांच के उत्पादों (प्रयोगशाला कांच के बर्तन - पेट्री डिश, फ्लास्क, पिपेट, टेस्ट ट्यूब, आदि) के नसबंदी के लिए किया जाता है, साथ ही धातु उत्पादों को भाप से कीटाणुरहित किया जा सकता है। दबाव में। इसके अलावा, सूखी गर्मी का उपयोग चीनी मिट्टी के बरतन और गर्मी प्रतिरोधी पदार्थों (तालक, सफेद मिट्टी), साथ ही खनिज और वनस्पति तेल, वसा, पेट्रोलियम जेली, लैनोलिन और मोम से बनी वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। इस नसबंदी विधि के लिए सबसे प्रभावी तरीका, जो वनस्पति रूपों और बीजाणुओं की मृत्यु सुनिश्चित करता है, 15 मिनट के लिए 160 - 180 डिग्री का तापमान है। आप खाद्य पदार्थों, आइसोटोनिक घोल, या रबर और सिंथेटिक सामग्री से बनी वस्तुओं को सूखी गर्मी से कीटाणुरहित नहीं कर सकते, क्योंकि तरल पदार्थ उबल जाते हैं और बाहर निकल जाते हैं, और रबर और सिंथेटिक सामग्री पिघल जाती है। ड्रेसिंग, पानी, कुछ दवाओं, कल्चर मीडिया, सॉफ्ट उपकरण, यंत्रों को स्टरलाइज़ करने के साथ-साथ अपशिष्ट दूषित सामग्री को कीटाणुरहित करने के लिए दबाव में संतृप्त भाप के साथ स्टरलाइज़ेशन सबसे विश्वसनीय और सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला तरीका है। सर्जिकल अभ्यास में, ऑपरेशन किए गए रोगी के लिए ड्रेसिंग, सर्जन के गाउन और अंडरवियर को आटोक्लेव में भाप का उपयोग करके कीटाणुरहित किया जाता है। दबाव में भाप की नसबंदी विशेष उपकरणों - आटोक्लेव में की जाती है। आटोक्लेविंग सभी सूक्ष्मजीवों और बीजाणुओं को पूरी तरह से नष्ट कर देता है। भाप दबाव नसबंदी विधि वायुमंडलीय दबाव के ऊपर दबाव में संतृप्त जल वाष्प के साथ सामग्री को गर्म करने पर आधारित है। उच्च तापमान और भाप की संयुक्त क्रिया इस विधि को विशेष रूप से प्रभावी बनाती है। इस मामले में, वनस्पति कोशिकाएं और माइक्रोबियल बीजाणु दोनों मर जाते हैं। संतृप्त जल वाष्प के प्रभाव में माइक्रोबियल बीजाणु 10 मिनट के भीतर मर जाते हैं, और वनस्पति रूप 1 से 4 मिनट के भीतर मर जाते हैं। संतृप्त भाप की उच्च जीवाणुनाशक शक्ति इस तथ्य के कारण है कि, दबाव में जल वाष्प के प्रभाव में, माइक्रोबियल कोशिका के प्रोटीन सूज जाते हैं और जम जाते हैं, जिसके परिणामस्वरूप माइक्रोबियल कोशिकाएं मर जाती हैं। संतृप्त जलवाष्प का जीवाणुनाशक प्रभाव अतिरिक्त दबाव से बढ़ जाता है। आटोक्लेव में स्टरलाइज़ेशन विभिन्न तरीकों से किया जाता है। इस प्रकार, सरल पोषक माध्यम (मांस - पेप्टोन अगर और मांस - पेप्टोन शोरबा) को 120 डिग्री (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। लेकिन इस मोड के साथ प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट और अन्य पदार्थों वाले मीडिया को स्टरलाइज़ करना असंभव है जो आसानी से गर्म करने पर बदल जाते हैं। कार्बोहाइड्रेट युक्त मीडिया को 0.5 एटीएम पर आटोक्लेव में निष्फल किया जाता है। 10 - 15 मिनट या आंशिक रूप से बहने वाली भाप। उच्च तापमान का उपयोग करके, आप न केवल कीटाणुरहित वस्तुओं की सतह पर, बल्कि उनकी गहराई में भी रोगजनक सूक्ष्मजीवों (बीजाणु बनाने वाले सहित) के सबसे लगातार रूपों को नष्ट कर सकते हैं। बंध्याकरण के विश्वसनीय साधन के रूप में उच्च तापमान का यह बहुत बड़ा लाभ है। हालाँकि, कुछ वस्तुएँ उच्च तापमान के प्रभाव में खराब हो जाती हैं और इन मामलों में कीटाणुशोधन के अन्य तरीकों और साधनों का सहारा लेना आवश्यक है। उन सामग्रियों और वस्तुओं की पूर्ण नसबंदी जो उच्च तापमान नसबंदी के उपयोग की अनुमति नहीं देती है, 100 डिग्री से अधिक नहीं के तापमान पर कोच उपकरण में जल वाष्प के साथ बार-बार नसबंदी द्वारा प्राप्त की जाती है। इस विधि को फ्रैक्शनल स्टरलाइज़ेशन कहा जाता है। यह इस तथ्य पर उबलता है कि रोगाणुओं के शेष अकुशल बीजाणु रूप, 37 डिग्री पर थर्मोस्टेट में एक दिन के बाद, वनस्पति कोशिकाओं में अंकुरित होते हैं, जिनकी मृत्यु बहती भाप के साथ इस वस्तु के बाद के नसबंदी के दौरान होती है। तरल भाप से उपचार 30-40 मिनट तक तीन बार किया जाता है। किसी सामग्री को 100 डिग्री से कम तापमान पर एक बार गर्म करना पास्चुरीकरण कहलाता है। पाश्चरीकरण पाश्चर द्वारा प्रस्तावित किया गया था और इसका उद्देश्य मुख्य रूप से ज्यादातर गैर-बीजाणु सूक्ष्मजीवों को नष्ट करना है। पाश्चुरीकरण 60-70 डिग्री पर 15 से 30 मिनट के लिए, 80 डिग्री पर 10 से 15 मिनट के लिए किया जाता है। सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में, पास्चुरीकरण बीज सामग्रीअक्सर बीजाणु बनाने वाले सूक्ष्मजीवों की शुद्ध संस्कृतियों को अलग करने और बीजाणु बनाने के लिए सूक्ष्मजीवों की क्षमता निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है। उन तरल पदार्थों के लिए जो उच्च तापमान (दूध, बेरी और फलों के रस, बीयर, कार्बोहाइड्रेट या यूरिया युक्त पोषक माध्यम, आदि) के संपर्क में आने पर स्वाद और अन्य मूल्यवान गुण खो देते हैं, बहती भाप के साथ नसबंदी 15 के लिए 50 - 60 डिग्री पर की जाती है - 33333330 मिनट या 5-10 मिनट के लिए 70-80 डिग्री पर। इस मामले में, औसत प्रतिरोध वाले रोगाणु मर जाते हैं, जबकि अधिक प्रतिरोधी रोगाणु और बीजाणु संरक्षित रहते हैं। 1 घंटे के लिए 60 डिग्री पर फ्रैक्शनल 5-6 गुना स्टरलाइज़ेशन को टाइन्डलाइज़ेशन कहा जाता है। अनेक चिकित्सा उत्पाद बनाए जाते हैं पॉलिमर सामग्री, नसबंदी का सामना न करें भाप विधि आम तौर पर स्वीकृत तरीकों के अनुसार। कई उत्पादों के लिए, उनमें मौजूद तरल पदार्थों (परिरक्षकों, दवाओं और अन्य उत्पादों) की विशेषताओं के कारण, आम तौर पर स्वीकृत तरीकों और विधियों का उपयोग करके स्टरलाइज़ करना असंभव है। ऐसे उत्पादों के लिए, वस्तुओं की विश्वसनीय नसबंदी सुनिश्चित करने के लिए व्यक्तिगत नसबंदी व्यवस्था विकसित की जाती है। इस प्रकार, रक्त को अंशों में अलग करने के लिए रोटर की नसबंदी 45 मिनट के लिए 120 डिग्री के तापमान पर जल वाष्प के साथ की जाती है। परिरक्षक कंटेनरों की बाँझपन 60 मिनट के लिए 110 डिग्री पर प्राप्त किया जाता है। उबालना एक नसबंदी विधि है जिसका उपयोग पुन: प्रयोज्य सीरिंज, सर्जिकल उपकरणों, रबर ट्यूब, कांच और धातु के बर्तनों को नष्ट करने के लिए किया जाता है। स्टरलाइज़र में उबालकर स्टरलाइज़ेशन किया जाता है। उबलते पानी में बीजाणु 20-30 मिनट के बाद मर जाते हैं। 45 मिनट तक उबालने का उपयोग व्यापक रूप से स्राव और अन्य संक्रामक सामग्री, लिनन, व्यंजन, खिलौने और रोगी देखभाल वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। गंदगी और सूक्ष्मजीवों को यांत्रिक रूप से हटाने के लिए धोने और सफाई करते समय डिटर्जेंट के साथ गर्म पानी (60 - 100 डिग्री) का उपयोग किया जाता है। अधिकांश वनस्पति कोशिकाएं 30 मिनट के बाद 70 डिग्री पर मर जाती हैं। निस्पंदन स्टरलाइज़ेशन का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां सब्सट्रेट हीटिंग का सामना नहीं कर सकते हैं, विशेष रूप से प्रोटीन, सीरम, कुछ एंटीबायोटिक्स, विटामिन और वाष्पशील पदार्थों वाले मीडिया के लिए। किसी कल्चर तरल को स्टरलाइज़ करने के लिए इस तकनीक का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, जब इसे माइक्रोबियल कोशिकाओं से मुक्त करना आवश्यक होता है, लेकिन इसमें मौजूद सभी चयापचय उत्पादों को अपरिवर्तित बनाए रखना आवश्यक होता है। इस विधि में विशेष फिल्टर के माध्यम से तरल पदार्थ को फ़िल्टर करना शामिल है जिसमें बारीक छिद्रपूर्ण विभाजन होते हैं और इसलिए माइक्रोबियल कोशिकाएं बरकरार रहती हैं। फिल्टर के दो सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले प्रकार झिल्ली फिल्टर और सेइट्ज फिल्टर हैं। झिल्ली फिल्टर कोलोडियन, एसीटेट, सेलूलोज़ और अन्य सामग्रियों से तैयार किए जाते हैं। सेट्ज़ फिल्टर एस्बेस्टस और सेल्युलोज के मिश्रण से बनाए जाते हैं। इसके अलावा, क्वार्ट्ज रेत, इन्फ्यूसर पृथ्वी और अन्य सामग्रियों (चेम्बरलान, बर्कफेल्ड द्वारा "मोमबत्तियाँ") के मिश्रण के साथ काओलिन से बने फिल्टर का उपयोग नसबंदी के लिए किया जाता है। मेम्ब्रेन और एस्बेस्टस फिल्टर एक बार उपयोग के लिए डिज़ाइन किए गए हैं। पराबैंगनी विकिरण के साथ, जीवाणुनाशक प्रभाव 200 - 450 एनएम की लंबाई वाली किरणों द्वारा प्रदान किया जाता है, जिसका स्रोत जीवाणुनाशक लैंप है। जीवाणुनाशक लैंप की मदद से, चिकित्सा और निवारक संस्थानों, सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशाला बक्से और उद्यमों में हवा को पराबैंगनी किरणों से निष्फल किया जाता है खाद्य उद्योग, टीके और सीरम के उत्पादन के लिए बक्सों में, ऑपरेटिंग रूम, हेरफेर रूम, बच्चों के संस्थानों आदि में। पराबैंगनी किरणों में उच्च रोगाणुरोधी गतिविधि होती है और यह न केवल वनस्पति कोशिकाओं, बल्कि उनके बीजाणुओं की भी मृत्यु का कारण बन सकती है। क्रिया के परिणामस्वरूप सूर्य का प्रकाश सूक्ष्मजीवों की मृत्यु का कारण बनता है पराबैंगनी विकिरणऔर सूखना. धूप में सुखाने से कई प्रकार के सूक्ष्मजीवों पर हानिकारक प्रभाव पड़ता है, लेकिन इसका प्रभाव सतही होता है और इसलिए सूर्य की रोशनी नसबंदी अभ्यास में सहायक भूमिका निभाती है। हाल ही में, घावों और जलने के उपचार में सिंथेटिक और प्राकृतिक पॉलिमर से बने कोटिंग्स का उपयोग जैल के रूप में किया जाने लगा है। घावों और जलने के स्थानीय उपचार के लिए पॉलिमर एंटीसेप्टिक फिल्मों का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। इनमें कैटापोल, डाइऑक्साइडिन, ब्लू आयोडीन, साथ ही ग्लूटाराल्डिहाइड युक्त सोर्बिटोल जैसे व्यापक स्पेक्ट्रम रोगाणुरोधी एजेंट होते हैं। इन फिल्मों को स्टरलाइज़ करने के लिए 20.0 kGy की खुराक पर आयनीकृत विकिरण का उपयोग किया जाता है। पॉलिमर एंटीसेप्टिक फिल्मों और सॉर्बेंट्स के औद्योगिक उत्पादन के दौरान, इस नसबंदी व्यवस्था के तहत उनकी बाँझपन पूरी तरह से सुनिश्चित की जाती है। रेडियोधर्मी विकिरण वनस्पति और बीजाणु दोनों रूपों में सभी प्रकार के सूक्ष्मजीवों को मारता है। इसका उपयोग व्यापक रूप से बाँझ उत्पादों और बाँझ डिस्पोजेबल चिकित्सा उपकरणों का उत्पादन करने वाले उद्यमों में, अपशिष्ट जल और पशु मूल के कच्चे माल के कीटाणुशोधन के लिए किया जाता है।

यांत्रिक बंध्याकरण विधि यांत्रिक नसबंदी विधियाँ वस्तुओं की सतह से कीटाणुओं को हटा देती हैं। इनमें धुलाई, झाड़ना, झाड़ना, गीला पोंछना, हवा देना, वेंटिलेशन, वैक्यूमिंग, धुलाई शामिल है।

रासायनिक विधिनसबंदी चिकित्सा पद्धति में प्लास्टिक का अब तेजी से उपयोग हो रहा है। इनका उपयोग दंत चिकित्सा, मैक्सिलोफेशियल सर्जरी, ट्रॉमेटोलॉजी, आर्थोपेडिक्स और सर्जरी में किया जाता है। अधिकांश प्लास्टिक दबाव और शुष्क गर्मी (शुष्क गर्म हवा) के तहत भाप की गर्मी नसबंदी विधियों का सामना नहीं कर सकते हैं। ऐसी वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए उपयोग किए जाने वाले अल्कोहल, डायोसाइड और टर्नरी समाधान के समाधान संसाधित किए जा रहे उत्पादों की बाँझपन सुनिश्चित नहीं करते हैं। इसलिए, प्लास्टिक उत्पादों को कीटाणुरहित करने के लिए गैस और विकिरण विधियों के साथ-साथ रसायनों के समाधान का उपयोग किया जाता है। थर्मोलैबाइल सामग्रियों से बने बड़ी संख्या में उत्पादों के चिकित्सा संस्थानों के अभ्यास में परिचय विकिरण की शुरूआत में योगदान देता है, गैस विधियाँकीटाणुनाशक समाधानों के साथ कीटाणुशोधन और नसबंदी। रासायनिक नसबंदी के दौरान, विभिन्न रासायनिक समूहों (पेरोक्साइड, फेनोलिक, हैलोजन युक्त, एल्डिहाइड, क्षार और एसिड, सर्फेक्टेंट, आदि) से गैसों और एजेंटों का उपयोग किया जाता है। रोजमर्रा के उपयोग के लिए, डिटर्जेंट, सफाई, ब्लीचिंग और अन्य तैयारी का उत्पादन किया जाता है जिनकी संरचना में विभिन्न रसायनों की शुरूआत के कारण रोगाणुरोधी प्रभाव होता है। इन तैयारियों का उपयोग सैनिटरी उपकरण, बर्तन, लिनेन आदि की सफाई और कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। फॉर्मल्डिहाइड स्टीम (स्टीमफॉर्म) का उपयोग किया जा सकता है चिकित्सा संस्थाननसबंदी के लिए धातु उत्पादचिकित्सा प्रयोजन (स्केलपेल, सुई, चिमटी, जांच, क्लैंप, हुक, तार कटर, आदि)। फॉर्मेल्डिहाइड वाष्प के साथ नसबंदी से पहले, उत्पादों को पूर्व-नसबंदी सफाई से गुजरना चाहिए और अच्छी तरह से सूखना चाहिए। जब किसी भी प्रकार से निष्फल कर दिया जाए रासायनिककिसी विशेष वस्तु के प्रसंस्करण के नियम कीटाणुरहित की जाने वाली वस्तु की विशेषताओं, रोगाणुओं के प्रतिरोध और गुणों की विशेषताओं पर निर्भर करते हैं। रासायनिक तैयारी, परिवेश का तापमान, आर्द्रता और अन्य कारक। इस प्रकार, धातु उपकरणों की बाँझपन कम से कम 20 डिग्री के तापमान और 95-98% की सापेक्ष आर्द्रता पर भाप के साथ एक सीलबंद कक्ष में भंडारण के पांच घंटे के बाद हासिल की जाती है; 15 डिग्री के तापमान पर, इन वस्तुओं की पूर्ण बाँझपन 16 घंटे बाद ही प्राप्त हो जाता है। ग्लूटाराल्डिहाइड की स्पोरिसाइडल गतिविधि तापमान पर निर्भर करती है। इसकी सर्वोत्तम क्रिया 15 - 25 डिग्री के तापमान पर होती है। जैसे-जैसे तापमान बढ़ता है, इस दवा की स्पोरिसाइडल गतिविधि कम हो जाती है। रासायनिक बंध्याकरण का उपयोग कुछ हद तक सीमित सीमा तक किया जाता है। अक्सर, इस पद्धति का उपयोग कल्चर मीडिया और इम्युनोबायोलॉजिकल तैयारी (टीके और सीरम) के जीवाणु संदूषण को रोकने के लिए किया जाता है। क्लोरोफॉर्म, टोल्यूनि और ईथर जैसे पदार्थ अक्सर पोषक मीडिया में जोड़े जाते हैं। यदि माध्यम को इन परिरक्षकों से मुक्त करना आवश्यक हो, तो इसे पानी के स्नान में 56 डिग्री पर गर्म किया जाता है और परिरक्षक वाष्पित हो जाते हैं। टीकों या सीरम को संरक्षित करने के लिए मेरथिओलेट, बोरिक एसिड और फॉर्मेलिन का उपयोग किया जाता है।

जैविक बंध्याकरण विधि जैविक नसबंदी एंटीबायोटिक दवाओं के उपयोग पर आधारित है। वायरस की खेती में इस विधि का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

नसबंदी

बंध्याकरण नसबंदी है, अर्थात सूक्ष्मजीवों और उनके बीजाणुओं से पर्यावरणीय वस्तुओं की पूर्ण मुक्ति।

नसबंदी विभिन्न तरीकों से की जाती है:

1) भौतिक (उच्च तापमान, यूवी किरणों के संपर्क में, उपयोग)। जीवाणु फिल्टर);

2) रासायनिक (विभिन्न कीटाणुनाशक, एंटीसेप्टिक्स का उपयोग);

3) जैविक (एंटीबायोटिक दवाओं का उपयोग)।

प्रयोगशाला अभ्यास में, आमतौर पर नसबंदी के भौतिक तरीकों का उपयोग किया जाता है।

एक या किसी अन्य नसबंदी विधि का उपयोग करने की संभावना और व्यवहार्यता निष्फल की जाने वाली सामग्री की विशेषताओं, उसके भौतिक और रासायनिक गुणों से निर्धारित होती है।

भौतिक तरीके

बर्नर की लौ में कैल्सीनेशन या फ्लेम्बिंग नसबंदी की एक विधि है जिसमें वस्तु पूरी तरह से निष्फल हो जाती है, क्योंकि वनस्पति कोशिकाएं और माइक्रोबियल बीजाणु दोनों मर जाते हैं। आमतौर पर, बैक्टीरियोलॉजिकल लूप, स्पैटुला, पिपेट, स्लाइड और कवर ग्लास और छोटे उपकरणों को कैलक्लाइंड किया जाता है। कैंची और स्केलपेल को गर्म करके निष्फल नहीं किया जाना चाहिए, क्योंकि आग के प्रभाव में काटने की सतह सुस्त हो जाती है।

सूखी गर्मी नसबंदी

सूखी गर्मी या गर्म हवा के साथ नसबंदी पाश्चर ओवन (सुखाने) में की जाती है सूखी-गर्मी वाले ओवन). पाश्चर ओवन एक दोहरी दीवार वाली कैबिनेट है जो गर्मी प्रतिरोधी सामग्री - धातु और एस्बेस्टस से बनी होती है। कैबिनेट को गर्म करें गैस बर्नरया विद्युत ताप उपकरण। विद्युत रूप से गर्म अलमारियाँ नियामकों से सुसज्जित हैं जो सुनिश्चित करती हैं आवश्यक तापमान. तापमान को नियंत्रित करने के लिए कैबिनेट की ऊपरी दीवार के छेद में एक थर्मामीटर डाला जाता है।

तरल पदार्थ (पोषक तत्व मीडिया, आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान, आदि), रबर और सिंथेटिक सामग्री से बनी वस्तुओं को सूखी गर्मी से निष्फल नहीं किया जा सकता है, क्योंकि तरल पदार्थ उबल कर बाहर निकल जाते हैं, और रबर और सिंथेटिक सामग्री पिघल जाती है।

उबालकर बंध्याकरण

उबालना एक रोगाणुनाशन विधि है जो बंध्यता की गारंटी देती है बशर्ते कि निष्फल सामग्री में कोई बीजाणु न हों। सीरिंज, उपकरण, कांच और धातु के बर्तन, रबर ट्यूब आदि के प्रसंस्करण के लिए उपयोग किया जाता है। दबाव में भाप नसबंदी एक आटोक्लेव में की जाती है। यह स्टरलाइज़ेशन विधि स्टरलाइज़ की जा रही सामग्रियों को वायुमंडलीय दबाव से ऊपर संतृप्त जल वाष्प में उजागर करने पर आधारित है। इस तरह की नसबंदी के परिणामस्वरूप, सूक्ष्मजीवों के वानस्पतिक और बीजाणु दोनों रूप एक ही उपचार से मर जाते हैं। एक आटोक्लेव (चित्र 12) एक विशाल बॉयलर है, जो बाहर की तरफ एक धातु के आवरण से ढका होता है, जिसे एक ढक्कन के साथ भली भांति बंद करके सील किया जाता है, जो हिंग वाले बोल्ट के साथ बॉयलर से कसकर जुड़ा होता है।

पोषक तत्व मीडिया के ऑटोक्लेविंग का तापमान और अवधि पोषक माध्यम तैयार करने के लिए नुस्खा में निर्दिष्ट उनकी संरचना द्वारा निर्धारित की जाती है। उदाहरण के लिए, साधारण मीडिया (मीट-पेप्टोन अगर, मीट-पेप्टोन शोरबा) को 120 डिग्री सेल्सियस (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। हालाँकि, इस तापमान पर देशी प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट और अन्य पदार्थों से युक्त मीडिया को स्टरलाइज़ करना असंभव है जो गर्म करने पर आसानी से बदल जाते हैं। कार्बोहाइड्रेट वाले मीडिया को आंशिक रूप से 100 डिग्री सेल्सियस पर या आटोक्लेव में 112 डिग्री सेल्सियस (0.5 एटीएम) पर 10-15 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। विभिन्न तरल पदार्थ, रबर की नली, प्लग, बैक्टीरियल मोमबत्तियाँ और फिल्टर वाले उपकरणों को 120 डिग्री सेल्सियस (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है।

कोच उपकरण में बहती भाप से बंध्याकरण किया जाता है। इस विधि का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां निर्जलित की जाने वाली वस्तु 100 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान पर बदल जाती है। यूरिया, कार्बोहाइड्रेट, दूध, आलू, जिलेटिन इत्यादि युक्त पोषक तत्व मीडिया को बहती भाप से निर्जलित किया जाता है।

कोच उपकरण (बॉयलर) एक धातु सिलेंडर है जो बाहर की तरफ (गर्मी हस्तांतरण को कम करने के लिए) फेल्ट या एस्बेस्टस से ढका होता है। सिलेंडर को शंक्वाकार ढक्कन के साथ बंद किया जाता है जिसमें भाप निकलने के लिए एक छेद होता है। सिलेंडर के अंदर एक स्टैंड होता है, जिसके लेवल तक पानी डाला जाता है। स्टैंड पर एक छेद वाली बाल्टी रखी जाती है जिसमें स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री रखी जाती है। कोच उपकरण को गैस या बिजली का उपयोग करके गर्म किया जाता है। नसबंदी का समय ढक्कन के किनारों पर और भाप आउटलेट से जोरदार भाप निकलने के क्षण से गिना जाता है। 30-60 मिनट के लिए स्टरलाइज़ करें। नसबंदी के अंत में, हीटिंग बंद कर दिया जाता है। उपकरण से सामग्री की बाल्टी निकालें और इसे अगले दिन तक कमरे के तापमान पर छोड़ दें। वार्मिंग को लगातार 3 दिनों तक 100°C के तापमान पर 30-60 मिनट तक किया जाता है। इस विधि को फ्रैक्शनल स्टरलाइज़ेशन कहा जाता है। पहले ताप के दौरान, रोगाणुओं के वानस्पतिक रूप मर जाते हैं, जबकि बीजाणु रूप संरक्षित रहते हैं। एक दिन के भीतर, बीजाणु अंकुरित होकर वानस्पतिक रूपों में बदल जाते हैं, जो नसबंदी के दूसरे दिन मर जाते हैं। चूँकि यह संभव है कि कुछ बीजाणुओं को अंकुरित होने का समय नहीं मिला, सामग्री को अगले 24 घंटों के लिए रखा जाता है, और फिर तीसरी नसबंदी की जाती है। कोच उपकरण में बहती भाप से बंध्याकरण की आवश्यकता नहीं होती है विशेष नियंत्रण, चूंकि तैयार पोषक तत्व मीडिया की बाँझपन डिवाइस के सही संचालन का एक संकेतक है। आप आटोक्लेव में ढक्कन खोलकर और आउटलेट वाल्व खुला रखकर बहती भाप से भी स्टरलाइज़ कर सकते हैं।

पराबैंगनी विकिरण द्वारा बंध्याकरण

यूवी किरणों के साथ नसबंदी विशेष प्रतिष्ठानों - जीवाणुनाशक लैंप का उपयोग करके की जाती है। यूवी किरणों में उच्च रोगाणुरोधी गतिविधि होती है और यह न केवल वनस्पति कोशिकाओं, बल्कि बीजाणुओं की भी मृत्यु का कारण बन सकती है। यूवी विकिरण का उपयोग अस्पतालों, ऑपरेटिंग रूम, बच्चों के संस्थानों आदि में हवा को स्टरलाइज़ करने के लिए किया जाता है। एक सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशाला में, काम से पहले एक बॉक्स को यूवी किरणों से उपचारित किया जाता है।

रासायनिक विधियाँ

इस प्रकार की नसबंदी का उपयोग सीमित सीमा तक किया जाता है, और यह मुख्य रूप से कल्चर मीडिया और इम्युनोबायोलॉजिकल तैयारियों (टीके और सीरम) के जीवाणु संदूषण को रोकने के लिए कार्य करता है।

क्लोरोफॉर्म, टोल्यूनि और ईथर जैसे पदार्थ अक्सर पोषक मीडिया में जोड़े जाते हैं। यदि माध्यम को इन परिरक्षकों से मुक्त करना आवश्यक हो, तो इसे पानी के स्नान में 56°C पर गर्म किया जाता है (परिरक्षक वाष्पित हो जाते हैं)।

टीकों और सीरम को संरक्षित करने के लिए मेरथिओलेट का उपयोग करें। बोरिक एसिड, फॉर्मेलिन, आदि।

जैविक बंध्याकरण

जैविक नसबंदी एंटीबायोटिक दवाओं के उपयोग पर आधारित है। इस विधि का उपयोग वायरस की खेती के लिए किया जाता है।

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यदि वर्तमान परिस्थितियों ने हमें बूचड़खाने में सीरम का उत्पादन करने के लिए प्रेरित किया है, तो यह स्पष्ट है कि यह एक अस्थायी उपाय है, क्योंकि हेमटोजेन और औषधीय सीरम का उत्पादन केवल एक विशेष संस्थान में ही किया जा सकता है।

पशु चयन. ल्योन में, बूचड़खाने के मुख्य पशुचिकित्सक डॉ. गुइर और पशुचिकित्सा निरीक्षक डॉ. फोंटेने स्वयं हमारे शहर को मांस उपलब्ध कराने के उद्देश्य से पशुधन में से दानदाताओं का चयन करते हैं। आगे नियंत्रण की सुविधा के लिए चयनित जानवर को दाहिने कंधे पर ब्रांड किया गया है।

वध के बाद जानवरों के अंगों की सावधानीपूर्वक जांच की जाती है। यह ज्ञात है कि तपेदिक का पता लगाने के लिए शव परीक्षण सबसे विश्वसनीय तरीका है।

बाद के ऑपरेशनों से पता चलेगा कि रोगग्रस्त जानवर के सीरम का सेवन कभी नहीं किया गया था।

जानवरों से खून लेना. रक्त संग्रह कक्ष में, दाता बैल को एक स्वचालित योक द्वारा सुरक्षित रूप से पकड़ लिया जाता है।

पशुचिकित्सक जानवर की गर्दन के स्तर पर आयोडीन के साथ त्वचा को कीटाणुरहित करता है और एक स्केलपेल के साथ गले की नस के क्षेत्र में एक चीरा लगाता है। शिरापरक पंचर लंबे समय तक उबालकर निष्फल ट्रोकार के साथ किया जाता है। एक बार जब रक्त दिखाई देता है, तो इसे डिफाइब्रिनेटर से सीधे और एसेप्टिक रूप से जोड़ने के लिए ट्रोकार से एक ऑटोक्लेव रबर नली जुड़ी होती है।

डिफाइब्रिनेटिंग तकनीक और डिफाइब्रिनेटर को स्टरलाइज़ करने की विधि नीचे वर्णित है।

प्रत्येक जानवर से 8-10 लीटर रक्त प्राप्त होता है, जिसे उपकरण के नीचे स्थित तराजू पर तौला जाता है।

बंध्याकरण के तरीके

स्वच्छता नियंत्रण ऑपरेशन को सुविधाजनक बनाने के लिए, प्रत्येक डिफाइब्रिनेटर पर दाता जानवर के डेटा के साथ एक लेबल होता है।

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि सभी घटकों के एक बंद सर्किट के कारण रक्त का नमूना सड़न रोकनेवाला तरीके से किया जाता है: ट्रोकार, रबर की नली और डिफाइब्रिनेटर, जो पूर्व-निष्फल होते हैं।

रक्त संग्रह की तारीख वाला एक लेबल एकत्रित रक्त के साथ शिरापरक पंचर के क्षण से लेकर सीरम में परिवर्तित होने और रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत होने तक होता है।

रक्त विच्छेदन. अधिकांश सेरोथेरेपी प्रतिष्ठानों में, कांच के बर्तनों में डाला गया रक्त भार के दबाव में सीरम को अलग कर देता है। इन परिस्थितियों में, सबसे पहले मवेशियों से प्राप्त रक्त में थोड़ा सीरम (लगभग 10%) होता है।

इसलिए, ल्योन में सेरोथेरेपी केंद्र उपयोग करता है विशेष तकनीक, 50% मट्ठा देना, और वह भी कम समय में।

रॉटरडैम में रॉयल इंस्टीट्यूट और मिलान में सेरोथेराप्यूटिक इंस्टीट्यूट में किए गए निष्कर्षों के बाद डॉ. मेरियर आंशिक रूप से इस पद्धति को विकसित करने में सक्षम हुए।

एक बार जब इन संस्थानों से रक्त प्राप्त हो जाता है, तो इसे मथने जैसी बाँझ मशीनों में डीफाइब्रिन किया जाता है।

5 मिनट के भीतर रक्त को हवा से सुरक्षित बर्तन में एकत्र कर लिया जाता है। डिफिब्रेशन समय का सख्ती से पालन करना आवश्यक है: यदि यह अपर्याप्त है, तो जमावट हो सकती है, और यदि यह बहुत अधिक है, तो हेमोलिसिस हो सकता है (लाल रक्त कोशिकाओं के टूटने के कारण)। एक प्रयोगशाला घड़ी का उपयोग करना आवश्यक है जो आपको डिफाइब्रिनेशन के ठीक 15 मिनट को चिह्नित करने की अनुमति देती है।

चित्र के शीर्ष पर. 4 से पता चलता है कि रक्त लेने वालों की संख्या 1000 तक पहुंच गई है, जो केंद्र के प्रतीक पर दर्ज है।

केन्द्रापसारण.

डिफिब्रिबेशन के तुरंत बाद, उपकरणों को प्रयोगशाला में स्थानांतरित कर दिया जाता है, जो रक्त संग्रह कक्ष से कुछ मीटर की दूरी पर स्थित है। प्रत्येक डिफाइब्रिनेटर की सामग्री को अलग से संसाधित किया जाता है ताकि बीमार पड़ने वाले जानवर का सीरम हटाया जा सके।

डिफिब्रिनेशन के बाद जो रक्त नहीं जमता, उसे अल्फ़ा लवल सेपरेटर (एक दूध विभाजक जिसे हमने मट्ठा के उत्पादन के लिए अनुकूलित किया है) के माध्यम से पारित किया जाता है।

केन्द्रापसारक बल के प्रभाव में, रक्त को समान भागों में विभाजित किया जाता है: लाल भाग में लाल गेंदें होती हैं, और पारदर्शी भाग सीरम बनाता है (फाइब्रिन डिफाइब्रिनेटर ब्लेड पर रहता है)।

एक जानवर से 8-10 लीटर रक्त या लगभग 4-5 लीटर सीरम प्राप्त होता है, जिसे 180°C पर निष्फल करके पाइरेक्स बोतल में डाला जाता है।

बोतल से एक डिफाइब्रिनेटर लेबल जुड़ा होता है, और सैनिटरी नियंत्रण सुनिश्चित करने के लिए उसी नंबर के तहत एक कार्ड भरा जाता है।

सीरम में एक विशेष एंटीसेप्टिक मिलाया जाता है, जिसे इस तरह डिज़ाइन किया गया है कि यह सीरम की पारदर्शिता और स्वाद को परेशान किए बिना पर्याप्त रूप से सक्रिय रहे। 1 लीटर सीरम के लिए, 1:1000 फॉर्मेल्डिहाइड और 1:5000 सियुनक्सोल युक्त 100 मिलीलीटर घोल भी मिलाएं।

(तैयारियों के बीच, सेंट्रीफ्यूज को एक एंटीसेप्टिक के साथ पूरी तरह से कीटाणुरहित किया जाता है।)

सिद्धांत रूप में, रक्त का लाल अंश रक्त सॉसेज बनाने के लिए कसाईयों को लौटाया जाना चाहिए, लेकिन अक्सर यह अप्रयुक्त रहता है, इसलिए नीचे वर्णित तकनीक का उपयोग करके इससे सिरप तैयार किया जा सकता है।

रक्त सिरप तैयार करने के विशेष मामले. सिरप के दो फायदे हैं: यह सीरम प्राप्त करने के बाद बचे हुए रक्त के लाल भाग का उपयोग करना संभव बनाता है, और इसका सुखद स्वाद होता है जो बच्चों को पसंद आता है।

ग्लिसरीन की कमी के कारण इसका सिरप बनाना कठिन होता है दीर्घावधि संग्रहण, लेकिन आप पानी में एक बहुत ही सक्रिय उत्पाद बना सकते हैं और इसे बच्चों को दिन में 2-3 बड़े चम्मच दे सकते हैं। रक्त के लाल भाग में 20% जोड़ें पेय जलऔर स्वच्छता नियंत्रण के दौरान सिरप को ग्लेशियरों में संग्रहित करें।

फिर जोड़िए एक समान भाग 100% चीनी सिरप (चीनी उन समूहों के कार्ड से प्राप्त की जा सकती है जिनके लिए सिरप का इरादा है)।

खून के स्वाद को बेअसर करने के लिए सिरप में नींबू या संतरे का अर्क मिलाया जाता है और 250 मिलीलीटर की बोतलों में डाला जाता है।

मट्ठा का टिंडलाइजेशन.

सेंट्रीफ्यूजेशन के तुरंत बाद, यानी रक्त संग्रह के एक घंटे से भी कम समय के बाद, सीरम को एक घंटे के लिए 56°C पर लाइज़ किया जाता है।

ऐसा करने के लिए, इसे स्वचालित रूप से बनाए रखे गए तापमान के साथ पानी के स्नान में उतारा जाता है। इस तापमान पर टाइन्डालाइज़ेशन (उच्च तापमान पर मट्ठा जम जाता है) मट्ठा की आंशिक नसबंदी के लिए आवश्यक है, हालांकि इसकी तैयारी की गति अपने आप में सड़न रोकने की गारंटी है।

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि प्रत्येक पांच लीटर की बोतल मूल डिफाइब्रिनेटर लेबल के साथ प्रदान की जाती है, इस प्रकार सीरम की संख्या दाता जानवरों की संख्या से मेल खाती है।

नियंत्रण कार्ड फ़ाइल. कार्ड आपको किसी भी समय दाता जानवर की उत्पत्ति, मट्ठा तैयार करने के चरण, बोतलबंद करने की तारीख, साथ ही मट्ठा के वितरण की जांच करने की अनुमति देता है।

स्वच्छता नियंत्रण. जबकि जहाजों को प्रशीतन कक्ष में संग्रहीत किया जाता है, पशुचिकित्सा निरीक्षक दाता जानवरों के स्वच्छता नियंत्रण में लगे हुए हैं। उनके वध के बाद, तपेदिक के मामूली लक्षण प्रकट करने के लिए पूरी तरह से शव परीक्षण किया जाता है।

यदि किसी बीमारी का पता चलता है, तो संबंधित सीरम को आसानी से वापस लिया जा सकता है। यह ज्ञात है कि प्रत्येक जानवर के रक्त को अलग से संसाधित किया जाता है और सीरम को अलग-अलग, क्रमांकित बोतलों में रखा जाता है।

सेरोथेरेपी केंद्र सार्वजनिक समितिल्योन बूचड़खानों में बचपन की स्वच्छता

नियंत्रण संख्या …

गोजातीय मट्ठा लीटर में

कार्ड और लेबल

उपरोक्त कार्ड और लेबल किसी भी भ्रम को रोकता है।

ल्योन में, स्वच्छता उपाय विशेष रूप से सख्त हैं, क्योंकि वही पशुचिकित्सक जानवरों का चयन करते हैं, खून निकालते हैं और मांस की जांच करते हैं।

उपकरणों का बंध्याकरण. पशु सीरम रोगाणुओं के लिए एक उत्कृष्ट प्रजनन भूमि है और इसे केवल आंशिक रूप से निष्फल किया जा सकता है। 56° से ऊपर के तापमान पर वे जम जाते हैं और एक मजबूत एंटीसेप्टिक मिलाने पर बादल बन जाते हैं। इसलिए, सभी सीरम उत्पादन कार्यों के दौरान, अधिकतम बाँझपन की आवश्यकता होती है; उपयोग से पहले उपकरण को कीटाणुरहित किया जाना चाहिए।

व्यक्तिगत डिफिब्रिनेटर्स को निम्नलिखित तरीके से निष्फल किया जाता है: रक्त संग्रह से एक रात पहले, उन्हें एक एंटीसेप्टिक समाधान से भर दिया जाता है, और रक्त संग्रह से कुछ घंटे पहले, उन्हें डिवाइस के निचले हिस्से में स्थित एक नल का उपयोग करके एंटीसेप्टिक से खाली कर दिया जाता है। सीरम का उत्पादन करने के लिए उपयोग किए जाने वाले सेंट्रीफ्यूज को एक एंटीसेप्टिक के साथ भी इलाज किया जाता है, जिसमें प्रत्येक डिफाइब्रिनेटर की सामग्री को संसाधित करना भी शामिल है।

मट्ठा भंडारण के लिए पांच लीटर के बर्तन सहित सभी कांच के बर्तनों को 180 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एक इलेक्ट्रिक ओवन में निष्फल किया जाता है।

सीरम के लिए 250 मिलीलीटर की बोतलों को भी 180°C पर रोगाणुरहित किया जाता है। ऑपरेशन को सरल बनाने के लिए, व्यंजन बक्सों में रखे जाते हैं, जिनका उपयोग बोतलबंद करने और जनता में वितरण के दौरान किया जाता है।

वोस्करेन्स्क को फूलों की डिलीवरी

बंध्याकरण को भौतिक, रासायनिक, यांत्रिक और जैविक तरीकों और विभिन्न विधियों द्वारा दर्शाया जाता है।

किसी विशेष स्टरलाइज़ेशन विधि और उसके तरीकों का उपयोग करने की व्यवहार्यता स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री की विशेषताओं, उसके भौतिक और रासायनिक गुणों पर निर्भर करती है।

स्टरलाइज़ेशन की अवधि स्टरलाइज़ की जा रही वस्तु, स्टरलाइज़िंग एजेंट और उसकी खुराक, वातावरण के तापमान और आर्द्रता पर निर्भर करती है।

शारीरिक बंध्याकरण विधि

नसबंदी की भौतिक विधि के तरीकों में सुखाना, जलाना और कैल्सीनेशन, उबालना, पास्चुरीकरण और टिंडलाइजेशन, गर्म हवा (शुष्क गर्मी), अल्ट्रासाउंड, पराबैंगनी और रेडियोधर्मी विकिरण, उच्च आवृत्ति धारा, सूरज की रोशनी शामिल हैं।

उच्च तापमान के संपर्क में आने वाली वस्तुओं को स्टरलाइज़ करने का सबसे आम तरीका आग, गर्म हवा और दबाव में संतृप्त भाप से स्टरलाइज़ करना है।

आग का उपयोग उन संक्रमित वस्तुओं को जलाने के लिए किया जाता है जिनका कोई मूल्य नहीं है (अनावश्यक कागजात, पुराने वॉलपेपर, लत्ता, कचरा), तपेदिक के रोगियों के थूक को कीटाणुरहित करने के लिए, विशेष रूप से खतरनाक संक्रमण से मरने वाले लोगों और जानवरों की लाशों को कीटाणुरहित करने के लिए, साथ ही साथ विभिन्न वस्तुओं को जलाना और शांत करना।

उपकरणों, प्रयोगशाला और फार्मास्युटिकल कांच के बर्तनों के कीटाणुशोधन के लिए सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में जलने और कैल्सीनेशन का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

बर्नर की लौ में कैल्सीनेशन या फ्लेम्बिंग नसबंदी की एक विधि है जिसमें वस्तु पूरी तरह से निष्फल हो जाती है, क्योंकि वनस्पति कोशिकाएं, सिस्ट और सूक्ष्मजीवों के बीजाणु मर जाते हैं।

आमतौर पर, लूप, स्पैटुला, पिपेट, स्लाइड और कवरस्लिप, छोटे उपकरण और अन्य दूषित वस्तुओं को कैल्सीनेशन द्वारा निष्फल कर दिया जाता है यदि उन्हें उबाला नहीं जा सकता है। कैंची और स्केलपेल को गर्म करके कीटाणुरहित करने की अनुशंसा नहीं की जाती है, क्योंकि आग के संपर्क में आने पर काटने की सतह सुस्त हो जाती है।

चिकित्सा पद्धति में उपयोग की जाने वाली शारीरिक नसबंदी की सबसे सरल और सबसे आम विधियों में से एक गर्म हवा नसबंदी (शुष्क गर्मी) है। सूखी गर्मी नसबंदी सुखाने वाले ओवन (पाश्चर ओवन) में की जाती है। शुष्क गर्म हवा में जीवाणुनाशक, विषाणुनाशक, बीजाणुनाशक प्रभाव होता है और इसका उपयोग मुख्य रूप से कांच के उत्पादों (प्रयोगशाला कांच के बर्तन - पेट्री डिश, फ्लास्क, पिपेट, टेस्ट ट्यूब, आदि) के नसबंदी के लिए किया जाता है, साथ ही धातु उत्पादों को भाप से कीटाणुरहित किया जा सकता है। दबाव में।

इसके अलावा, सूखी गर्मी का उपयोग चीनी मिट्टी के बरतन और गर्मी प्रतिरोधी पदार्थों (तालक, सफेद मिट्टी), साथ ही खनिज और वनस्पति तेल, वसा, पेट्रोलियम जेली, लैनोलिन और मोम से बनी वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। इस नसबंदी विधि के लिए सबसे प्रभावी तरीका, जो वनस्पति रूपों और बीजाणुओं की मृत्यु सुनिश्चित करता है, 15 मिनट के लिए 160 - 180 डिग्री का तापमान है।

आप खाद्य पदार्थों, आइसोटोनिक घोल, या रबर और सिंथेटिक सामग्री से बनी वस्तुओं को सूखी गर्मी से कीटाणुरहित नहीं कर सकते, क्योंकि तरल पदार्थ उबल जाते हैं और बाहर निकल जाते हैं, और रबर और सिंथेटिक सामग्री पिघल जाती है।

ड्रेसिंग, पानी, कुछ दवाओं, कल्चर मीडिया, सॉफ्ट उपकरण, यंत्रों को स्टरलाइज़ करने के साथ-साथ अपशिष्ट दूषित सामग्री को कीटाणुरहित करने के लिए दबाव में संतृप्त भाप के साथ स्टरलाइज़ेशन सबसे विश्वसनीय और सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला तरीका है।

सर्जिकल अभ्यास में, ऑपरेशन किए गए रोगी के लिए ड्रेसिंग, सर्जन के गाउन और अंडरवियर को आटोक्लेव में भाप का उपयोग करके कीटाणुरहित किया जाता है। दबाव में भाप की नसबंदी विशेष उपकरणों - आटोक्लेव में की जाती है।

आटोक्लेविंग सभी सूक्ष्मजीवों और बीजाणुओं को पूरी तरह से नष्ट कर देता है। भाप दबाव नसबंदी विधि वायुमंडलीय दबाव के ऊपर दबाव में संतृप्त जल वाष्प के साथ सामग्री को गर्म करने पर आधारित है। उच्च तापमान और भाप की संयुक्त क्रिया इस विधि को विशेष रूप से प्रभावी बनाती है। इस मामले में, वनस्पति कोशिकाएं और माइक्रोबियल बीजाणु दोनों मर जाते हैं।

संतृप्त जल वाष्प के प्रभाव में माइक्रोबियल बीजाणु 10 मिनट के भीतर मर जाते हैं, और वनस्पति रूप 1 से 4 मिनट के भीतर मर जाते हैं।

संतृप्त भाप की उच्च जीवाणुनाशक शक्ति इस तथ्य के कारण है कि, दबाव में जल वाष्प के प्रभाव में, माइक्रोबियल कोशिका के प्रोटीन सूज जाते हैं और जम जाते हैं, जिसके परिणामस्वरूप माइक्रोबियल कोशिकाएं मर जाती हैं।

संतृप्त जलवाष्प का जीवाणुनाशक प्रभाव अतिरिक्त दबाव से बढ़ जाता है।

आटोक्लेव में स्टरलाइज़ेशन विभिन्न तरीकों से किया जाता है।

इस प्रकार, सरल पोषक माध्यम (मांस - पेप्टोन अगर और मांस - पेप्टोन शोरबा) को 120 डिग्री (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। लेकिन इस मोड के साथ प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट और अन्य पदार्थों वाले मीडिया को स्टरलाइज़ करना असंभव है जो आसानी से गर्म करने पर बदल जाते हैं।

कार्बोहाइड्रेट युक्त मीडिया को 0.5 एटीएम पर आटोक्लेव में निष्फल किया जाता है। 10 - 15 मिनट या आंशिक रूप से बहने वाली भाप।

उच्च तापमान का उपयोग करके, आप न केवल कीटाणुरहित वस्तुओं की सतह पर, बल्कि उनकी गहराई में भी रोगजनक सूक्ष्मजीवों (बीजाणु बनाने वाले सहित) के सबसे लगातार रूपों को नष्ट कर सकते हैं।

बंध्याकरण के विश्वसनीय साधन के रूप में उच्च तापमान का यह बहुत बड़ा लाभ है। हालाँकि, कुछ वस्तुएँ उच्च तापमान के प्रभाव में खराब हो जाती हैं और इन मामलों में कीटाणुशोधन के अन्य तरीकों और साधनों का सहारा लेना आवश्यक है।

उन सामग्रियों और वस्तुओं की पूर्ण नसबंदी जो उच्च तापमान नसबंदी के उपयोग की अनुमति नहीं देती है, 100 डिग्री से अधिक नहीं के तापमान पर कोच उपकरण में जल वाष्प के साथ बार-बार नसबंदी द्वारा प्राप्त की जाती है। इस विधि को फ्रैक्शनल स्टरलाइज़ेशन कहा जाता है। यह इस तथ्य पर उबलता है कि रोगाणुओं के शेष अकुशल बीजाणु रूप, 37 डिग्री पर थर्मोस्टेट में एक दिन के बाद, वनस्पति कोशिकाओं में अंकुरित होते हैं, जिनकी मृत्यु बहती भाप के साथ इस वस्तु के बाद के नसबंदी के दौरान होती है।

तरल भाप से उपचार 30-40 मिनट तक तीन बार किया जाता है। किसी सामग्री को 100 डिग्री से कम तापमान पर एक बार गर्म करना पास्चुरीकरण कहलाता है। पाश्चरीकरण पाश्चर द्वारा प्रस्तावित किया गया था और इसका उद्देश्य मुख्य रूप से ज्यादातर गैर-बीजाणु सूक्ष्मजीवों को नष्ट करना है। पाश्चुरीकरण 60-70 डिग्री पर 15 से 30 मिनट के लिए, 80 डिग्री पर 10 से 15 मिनट के लिए किया जाता है।

सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में, बीजाणु बनाने वाले सूक्ष्मजीवों की शुद्ध संस्कृतियों को अलग करने और बीजाणु बनाने के लिए सूक्ष्मजीवों की क्षमता की पहचान करने के लिए बीज सामग्री के पास्चुरीकरण का उपयोग अक्सर किया जाता है।

उन तरल पदार्थों के लिए जो उच्च तापमान (दूध, बेरी और फलों के रस, बीयर, कार्बोहाइड्रेट या यूरिया युक्त पोषक माध्यम, आदि) के संपर्क में आने पर स्वाद और अन्य मूल्यवान गुण खो देते हैं, बहती भाप के साथ नसबंदी 15 के लिए 50 - 60 डिग्री पर की जाती है - 33333330 मिनट या 5-10 मिनट के लिए 70-80 डिग्री पर। इस मामले में, औसत प्रतिरोध वाले रोगाणु मर जाते हैं, जबकि अधिक प्रतिरोधी रोगाणु और बीजाणु संरक्षित रहते हैं।

1 घंटे के लिए 60 डिग्री पर फ्रैक्शनल 5-6 गुना स्टरलाइज़ेशन को टाइन्डलाइज़ेशन कहा जाता है।

पॉलिमर सामग्री से बने कई चिकित्सा उत्पाद आम तौर पर स्वीकृत नियमों के अनुसार भाप नसबंदी का सामना नहीं कर सकते हैं। कई उत्पादों के लिए, उनमें मौजूद तरल पदार्थों (परिरक्षकों, दवाओं और अन्य उत्पादों) की विशेषताओं के कारण, आम तौर पर स्वीकृत तरीकों और विधियों का उपयोग करके स्टरलाइज़ करना असंभव है। ऐसे उत्पादों के लिए, वस्तुओं की विश्वसनीय नसबंदी सुनिश्चित करने के लिए व्यक्तिगत नसबंदी व्यवस्था विकसित की जाती है।

इस प्रकार, रक्त को अंशों में अलग करने के लिए रोटर की नसबंदी 45 मिनट के लिए 120 डिग्री के तापमान पर जल वाष्प के साथ की जाती है।

परिरक्षक कंटेनरों की बाँझपन 60 मिनट के लिए 110 डिग्री पर प्राप्त किया जाता है।

उबालना एक नसबंदी विधि है जिसका उपयोग पुन: प्रयोज्य सीरिंज, सर्जिकल उपकरणों, रबर ट्यूब, कांच और धातु के बर्तनों को नष्ट करने के लिए किया जाता है।

स्टरलाइज़र में उबालकर स्टरलाइज़ेशन किया जाता है। उबलते पानी में बीजाणु 20-30 मिनट के बाद मर जाते हैं। 45 मिनट तक उबालने का उपयोग व्यापक रूप से स्राव और अन्य संक्रामक सामग्री, लिनन, व्यंजन, खिलौने और रोगी देखभाल वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है।

गंदगी और सूक्ष्मजीवों को यांत्रिक रूप से हटाने के लिए धोने और सफाई करते समय डिटर्जेंट के साथ गर्म पानी (60 - 100 डिग्री) का उपयोग किया जाता है।

अधिकांश वनस्पति कोशिकाएं 30 मिनट के बाद 70 डिग्री पर मर जाती हैं।

निस्पंदन स्टरलाइज़ेशन का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां सब्सट्रेट हीटिंग का सामना नहीं कर सकते हैं, विशेष रूप से प्रोटीन, सीरम, कुछ एंटीबायोटिक्स, विटामिन और वाष्पशील पदार्थों वाले मीडिया के लिए। किसी कल्चर तरल को स्टरलाइज़ करने के लिए इस तकनीक का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, जब इसे माइक्रोबियल कोशिकाओं से मुक्त करना आवश्यक होता है, लेकिन इसमें मौजूद सभी चयापचय उत्पादों को अपरिवर्तित बनाए रखना आवश्यक होता है।

इस विधि में विशेष फिल्टर के माध्यम से तरल पदार्थ को फ़िल्टर करना शामिल है जिसमें बारीक छिद्रपूर्ण विभाजन होते हैं और इसलिए माइक्रोबियल कोशिकाएं बरकरार रहती हैं।

फिल्टर के दो सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले प्रकार झिल्ली फिल्टर और सेइट्ज फिल्टर हैं।

झिल्ली फिल्टर कोलोडियन, एसीटेट, सेलूलोज़ और अन्य सामग्रियों से तैयार किए जाते हैं।

सेट्ज़ फिल्टर एस्बेस्टस और सेल्युलोज के मिश्रण से बनाए जाते हैं।

इसके अलावा, क्वार्ट्ज रेत, इन्फ्यूसर पृथ्वी और अन्य सामग्रियों (चेम्बरलान, बर्कफेल्ड द्वारा "मोमबत्तियाँ") के मिश्रण के साथ काओलिन से बने फिल्टर का उपयोग नसबंदी के लिए किया जाता है।

मेम्ब्रेन और एस्बेस्टस फिल्टर एक बार उपयोग के लिए डिज़ाइन किए गए हैं।

पराबैंगनी विकिरण के साथ, जीवाणुनाशक प्रभाव 200 - 450 एनएम की लंबाई वाली किरणों द्वारा प्रदान किया जाता है, जिसका स्रोत जीवाणुनाशक लैंप है।

जीवाणुनाशक लैंप की मदद से, चिकित्सा और निवारक संस्थानों में, सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशालाओं में बक्सों में, खाद्य उद्योग उद्यमों में, टीकों और सीरम के उत्पादन के लिए बक्सों में, ऑपरेटिंग कमरे, हेरफेर कक्ष, बच्चों के संस्थानों आदि में हवा को पराबैंगनी किरणों से निष्फल किया जाता है। .

पराबैंगनी किरणों में उच्च रोगाणुरोधी गतिविधि होती है और यह न केवल वनस्पति कोशिकाओं, बल्कि उनके बीजाणुओं की भी मृत्यु का कारण बन सकती है।

सूरज की रोशनी पराबैंगनी विकिरण और सूखने के परिणामस्वरूप सूक्ष्मजीवों की मृत्यु का कारण बनती है।

धूप में सुखाने से कई प्रकार के सूक्ष्मजीवों पर हानिकारक प्रभाव पड़ता है, लेकिन इसका प्रभाव सतही होता है और इसलिए सूर्य की रोशनी नसबंदी अभ्यास में सहायक भूमिका निभाती है।

हाल ही में, घावों और जलने के उपचार में सिंथेटिक और प्राकृतिक पॉलिमर से बने कोटिंग्स का उपयोग जैल के रूप में किया जाने लगा है।

घावों और जलने के स्थानीय उपचार के लिए पॉलिमर एंटीसेप्टिक फिल्मों का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। इनमें कैटापोल, डाइऑक्साइडिन, ब्लू आयोडीन, साथ ही ग्लूटाराल्डिहाइड युक्त सोर्बिटोल जैसे व्यापक स्पेक्ट्रम रोगाणुरोधी एजेंट होते हैं। इन फिल्मों को स्टरलाइज़ करने के लिए 20.0 kGy की खुराक पर आयनीकृत विकिरण का उपयोग किया जाता है। पॉलिमर एंटीसेप्टिक फिल्मों और सॉर्बेंट्स के औद्योगिक उत्पादन के दौरान, इस नसबंदी व्यवस्था के तहत उनकी बाँझपन पूरी तरह से सुनिश्चित की जाती है।

रेडियोधर्मी विकिरण वनस्पति और बीजाणु दोनों रूपों में सभी प्रकार के सूक्ष्मजीवों को मारता है। इसका उपयोग व्यापक रूप से बाँझ उत्पादों और बाँझ डिस्पोजेबल चिकित्सा उपकरणों का उत्पादन करने वाले उद्यमों में, अपशिष्ट जल और पशु मूल के कच्चे माल के कीटाणुशोधन के लिए किया जाता है।

यांत्रिक बंध्याकरण विधि

यांत्रिक नसबंदी विधियाँ वस्तुओं की सतह से कीटाणुओं को हटा देती हैं। इनमें धुलाई, झाड़ना, झाड़ना, गीला पोंछना, हवा देना, वेंटिलेशन, वैक्यूमिंग, धुलाई शामिल है।

रासायनिक बंध्याकरण विधि

चिकित्सा पद्धति में प्लास्टिक का अब तेजी से उपयोग हो रहा है।

इनका उपयोग दंत चिकित्सा, मैक्सिलोफेशियल सर्जरी, ट्रॉमेटोलॉजी, आर्थोपेडिक्स और सर्जरी में किया जाता है। अधिकांश प्लास्टिक दबाव और शुष्क गर्मी (शुष्क गर्म हवा) के तहत भाप की गर्मी नसबंदी विधियों का सामना नहीं कर सकते हैं। ऐसी वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए उपयोग किए जाने वाले अल्कोहल, डायोसाइड और टर्नरी समाधान के समाधान संसाधित किए जा रहे उत्पादों की बाँझपन सुनिश्चित नहीं करते हैं।

इसलिए, प्लास्टिक उत्पादों को कीटाणुरहित करने के लिए गैस और विकिरण विधियों के साथ-साथ रसायनों के समाधान का उपयोग किया जाता है।

चिकित्सा संस्थानों के अभ्यास में बड़ी संख्या में थर्मोलैबाइल सामग्रियों से बने उत्पादों की शुरूआत कीटाणुशोधन समाधानों के साथ कीटाणुशोधन और नसबंदी के विकिरण और गैस तरीकों की शुरूआत में योगदान देती है।

रासायनिक नसबंदी के दौरान, विभिन्न रासायनिक समूहों (पेरोक्साइड, फेनोलिक, हैलोजन युक्त, एल्डिहाइड, क्षार और एसिड, सर्फेक्टेंट, आदि) से गैसों और एजेंटों का उपयोग किया जाता है। रोजमर्रा के उपयोग के लिए, डिटर्जेंट, सफाई, ब्लीचिंग और अन्य तैयारी का उत्पादन किया जाता है जिनकी संरचना में विभिन्न रसायनों की शुरूआत के कारण रोगाणुरोधी प्रभाव होता है।

इन तैयारियों का उपयोग सैनिटरी उपकरण, बर्तन, लिनेन आदि की सफाई और कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है।

फॉर्मेल्डिहाइड स्टीम (स्टीमफॉर्म) का उपयोग चिकित्सा संस्थानों में धातु चिकित्सा उत्पादों (स्केलपेल, सुई, चिमटी, जांच, क्लैंप, हुक, वायर कटर, आदि) को स्टरलाइज़ करने के लिए किया जा सकता है।

फॉर्मेल्डिहाइड वाष्प के साथ नसबंदी से पहले, उत्पादों को पूर्व-नसबंदी सफाई से गुजरना चाहिए और अच्छी तरह से सूखना चाहिए।

किसी भी रासायनिक विधि द्वारा स्टरलाइज़ करते समय, किसी विशेष वस्तु के प्रसंस्करण की प्रक्रिया कीटाणुरहित की जाने वाली वस्तु की विशेषताओं, रोगाणुओं के प्रतिरोध, रसायन के गुणों की विशेषताओं, परिवेश के तापमान, आर्द्रता और अन्य कारकों पर निर्भर करती है।

इस प्रकार, धातु उपकरणों की बाँझपन कम से कम 20 डिग्री के तापमान और 95-98% की सापेक्ष आर्द्रता पर भाप के साथ एक सीलबंद कक्ष में भंडारण के पांच घंटे के बाद हासिल की जाती है; 15 डिग्री के तापमान पर, इन वस्तुओं की पूर्ण बाँझपन 16 घंटे बाद ही प्राप्त हो जाता है।

ग्लूटाराल्डिहाइड की स्पोरिसाइडल गतिविधि तापमान पर निर्भर करती है। इसकी सर्वोत्तम क्रिया 15 - 25 डिग्री के तापमान पर होती है। जैसे-जैसे तापमान बढ़ता है, इस दवा की स्पोरिसाइडल गतिविधि कम हो जाती है।

रासायनिक बंध्याकरण का उपयोग कुछ हद तक सीमित सीमा तक किया जाता है। अक्सर, इस पद्धति का उपयोग कल्चर मीडिया और इम्युनोबायोलॉजिकल तैयारी (टीके और सीरम) के जीवाणु संदूषण को रोकने के लिए किया जाता है। क्लोरोफॉर्म, टोल्यूनि और ईथर जैसे पदार्थ अक्सर पोषक मीडिया में जोड़े जाते हैं। यदि माध्यम को इन परिरक्षकों से मुक्त करना आवश्यक हो, तो इसे पानी के स्नान में 56 डिग्री पर गर्म किया जाता है और परिरक्षक वाष्पित हो जाते हैं।

टीकों या सीरम को संरक्षित करने के लिए मेरथिओलेट, बोरिक एसिड और फॉर्मेलिन का उपयोग किया जाता है।

जैविक बंध्याकरण विधि

जैविक नसबंदी एंटीबायोटिक दवाओं के उपयोग पर आधारित है।

वायरस की खेती में इस विधि का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

बंध्याकरण (लैटिन स्टेरिलिस से - बाँझ) में संसाधित वस्तुओं पर रोगाणुओं की पूर्ण निष्क्रियता शामिल है।

पाश्चर ओवन - सूखी गर्मी नसबंदी।

नसबंदी की तीन मुख्य विधियाँ हैं: ताप, विकिरण, रसायन।

आयोडीन.

हीट स्टरलाइज़ेशन उच्च तापमान के प्रति रोगाणुओं की संवेदनशीलता पर आधारित है।

60 डिग्री सेल्सियस और पानी की उपस्थिति पर, एंजाइमों सहित प्रोटीन का विकृतीकरण होता है, जिसके परिणामस्वरूप रोगाणुओं के वानस्पतिक रूप मर जाते हैं। बहुत कम मात्रा में बंधे पानी वाले और घने आवरण वाले बीजाणु 160-170 डिग्री सेल्सियस पर निष्क्रिय हो जाते हैं। ऊष्मा स्टरलाइज़ेशन के लिए मुख्य रूप से सूखी ऊष्मा और दबाव वाली भाप का उपयोग किया जाता है।
ड्राई हीट स्टरलाइज़ेशन ड्राई हीट ओवन या पाश्चर ओवन में किया जाता है। पाश्चर ओवन एक कसकर बंद धातु कैबिनेट है, जिसे बिजली से गर्म किया जाता है और थर्मामीटर से सुसज्जित किया जाता है।

इसमें मौजूद सामग्री का कीटाणुशोधन 160-170 डिग्री सेल्सियस पर 60-120 मिनट तक होता है। इस पद्धति का नुकसान यह है कि केवल कुछ रोगाणुहीन वस्तुएं, जैसे प्रयोगशाला कांच, ही इतने उच्च तापमान का सामना कर सकती हैं।
नसबंदी की सबसे सार्वभौमिक विधि आटोक्लेव में दबाव के तहत भाप उपचार है, जिसमें ड्रेसिंग, लिनन, कई उपकरण, संस्कृति मीडिया, समाधान, संक्रामक सामग्री आदि को निष्फल किया जाता है।

आटोक्लेव मजबूत दीवारों वाला एक धातु सिलेंडर है, जो भली भांति बंद करके सील किया गया है, जिसमें एक जल-भाप और स्टरलाइज़िंग कक्ष होता है। यह उपकरण एक दबाव नापने का यंत्र, थर्मामीटर और अन्य निगरानी उपकरणों से सुसज्जित है। आटोक्लेव में दबाव बढ़ जाता है, जिससे पानी का क्वथनांक बढ़ जाता है। तो, 0.5 एटीएम पर क्वथनांक 80 डिग्री सेल्सियस, 1 एटीएम पर - 100 डिग्री सेल्सियस, 2 एटीएम पर - 121 डिग्री सेल्सियस और 3 एटीएम पर - 136 डिग्री सेल्सियस है।

इस तथ्य के कारण कि, उच्च तापमान के अलावा, भाप सूक्ष्मजीवों पर कार्य करती है, बीजाणु 120 डिग्री सेल्सियस पर पहले ही मर जाते हैं। सबसे आम आटोक्लेव ऑपरेटिंग मोड 2 एटीएम, 121 डिग्री सेल्सियस, 15-20 मिनट है। नसबंदी का समय बढ़ने के साथ घटता जाता है वायु - दाब, और इसलिए क्वथनांक। सूक्ष्मजीव कुछ सेकंड में मर जाते हैं, लेकिन सामग्री को लंबे समय तक संसाधित किया जाता है, क्योंकि, सबसे पहले, निष्फल की जाने वाली सामग्री के अंदर तापमान अधिक होना चाहिए, और दूसरी बात, एक तथाकथित सुरक्षा क्षेत्र होता है, जिसे संभावित विचलन के लिए डिज़ाइन किया गया है आटोक्लेव ऑपरेशन करते समय निर्दिष्ट पैरामीटर।

टैग: शरीर, विकास, बंध्याकरण, एंजाइम

सूक्ष्मजीवों का जीवन पर्यावरणीय परिस्थितियों पर बहुत अधिक निर्भर है। सूक्ष्मजीवों को प्रभावित करने वाले सभी पर्यावरणीय कारकों को तीन समूहों में विभाजित किया जा सकता है: भौतिक, रासायनिक और जैविक, जिसका लाभकारी या हानिकारक प्रभाव कारक की प्रकृति और सूक्ष्मजीव के गुणों दोनों पर निर्भर करता है।

भौतिक कारक

भौतिक कारकों में से तापमान, शुष्कन, दीप्तिमान ऊर्जा और अल्ट्रासाउंड का सूक्ष्मजीवों के विकास पर सबसे अधिक प्रभाव पड़ता है।

तापमान. प्रत्येक सूक्ष्मजीव की जीवन गतिविधि कुछ तापमान सीमाओं द्वारा सीमित होती है। यह तापमान निर्भरता आमतौर पर तीन मुख्य बिंदुओं द्वारा व्यक्त की जाती है: न्यूनतम - वह तापमान जिसके नीचे माइक्रोबियल कोशिकाओं का प्रजनन रुक जाता है; अनुकूलतम - सर्वोत्तम तापमानसूक्ष्मजीवों की वृद्धि और विकास के लिए; अधिकतम - वह तापमान जिसके ऊपर कोशिकाओं की महत्वपूर्ण गतिविधि कमजोर हो जाती है या रुक जाती है। इष्टतम तापमान आमतौर पर प्राकृतिक आवास की तापमान स्थितियों से मेल खाता है।

तापमान के संबंध में सभी सूक्ष्मजीवों को साइकोफाइल, मेसोफाइल और थर्मोफाइल में विभाजित किया गया है।

साइक्रोफाइल्स (ग्रीक साइक्रोस से - ठंडा, फिलियो - प्यार), या शीत-प्रेमी सूक्ष्मजीव, अपेक्षाकृत रूप से बढ़ते हैं कम तामपान: न्यूनतम तापमान - 0 डिग्री सेल्सियस, इष्टतम - 10-20 डिग्री सेल्सियस, अधिकतम - 30 डिग्री सेल्सियस। इस समूह में रहने वाले सूक्ष्मजीव शामिल हैं उत्तरी समुद्रऔर महासागर, मिट्टी, अपशिष्ट जल। इसमें चमकदार और लौह बैक्टीरिया के साथ-साथ सूक्ष्म जीव भी शामिल हैं जो ठंड (0 डिग्री सेल्सियस से नीचे) में भोजन को खराब करते हैं।

मेसोफाइल्स (ग्रीक मेसोस से - मध्य) सबसे व्यापक समूह हैं, जिनमें अधिकांश सैप्रोफाइट्स और सभी रोगजनक सूक्ष्मजीव शामिल हैं। उनके लिए इष्टतम तापमान 28-37°C, न्यूनतम 10°C, अधिकतम 45°C है।

थर्मोफाइल (ग्रीक टर्मोस से - गर्मी, गर्मी), या गर्मी-प्रेमी सूक्ष्मजीव, 55 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान पर विकसित होते हैं, उनके लिए न्यूनतम तापमान 30 डिग्री सेल्सियस, इष्टतम 50-60 डिग्री सेल्सियस और अधिकतम 70 डिग्री सेल्सियस होता है। -75 डिग्री सेल्सियस। वे गर्म खनिज झरनों, मिट्टी की सतह परत, स्व-हीटिंग सब्सट्रेट्स (खाद, घास, अनाज) और मनुष्यों और जानवरों की आंतों में पाए जाते हैं। थर्मोफाइल्स के बीच कई बीजाणु रूप हैं।

उच्च और निम्न तापमान का सूक्ष्मजीवों पर अलग-अलग प्रभाव पड़ता है। कुछ उच्च तापमान के प्रति अधिक संवेदनशील होते हैं। इसके अलावा, अधिकतम तापमान जितना अधिक होता है, माइक्रोबियल कोशिकाओं की मृत्यु उतनी ही तेजी से होती है, जो सेल प्रोटीन के विकृतीकरण (जमावट) के कारण होती है।

मेसोफिलिक बैक्टीरिया के वानस्पतिक रूप 60°C के तापमान पर 30-60 मिनट के लिए और 80-100°C पर 1-2 मिनट के बाद मर जाते हैं। जीवाणु बीजाणु उच्च तापमान के प्रति अधिक प्रतिरोधी होते हैं। उदाहरण के लिए, एंथ्रेक्स बेसिली के बीजाणु 10-20 मिनट तक उबलने का सामना कर सकते हैं, और क्लोस्ट्रीडियम बोटुलिज़्म के बीजाणु - 6 घंटे तक। बीजाणु सहित सभी सूक्ष्मजीव, एक घंटे के लिए 165-170 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर मर जाते हैं (सूखी गर्मी में) ओवन) या 30 मिनट के लिए 1 एटीएम (एक आटोक्लेव में) दबाव में भाप के संपर्क में आने पर।

सूक्ष्मजीवों पर उच्च तापमान का प्रभाव नसबंदी का आधार है - सूक्ष्मजीवों और उनके बीजाणुओं से विभिन्न वस्तुओं की पूर्ण मुक्ति (नीचे देखें)।

कई सूक्ष्मजीव कम तापमान के प्रति बेहद प्रतिरोधी होते हैं। साल्मोनेला टाइफस और विब्रियो कॉलेरी बर्फ में लंबे समय तक जीवित रहते हैं। कुछ सूक्ष्मजीव तरल हवा के तापमान (-190°C) पर व्यवहार्य रहते हैं, और जीवाणु बीजाणु -250°C तक तापमान का सामना कर सकते हैं।

केवल व्यक्तिगत प्रजातिरोगजनक बैक्टीरिया कम तापमान के प्रति संवेदनशील होते हैं (उदाहरण के लिए, बोर्डेटेला पर्टुसिस और पैरापर्टुसिस, निसेरिया मेनिंगोकोकस, आदि)। सूक्ष्मजीवों के इन गुणों को प्रयोगशाला निदान में ध्यान में रखा जाता है और परीक्षण सामग्री को परिवहन करते समय - इसे ठंडा होने से संरक्षित प्रयोगशाला में पहुंचाया जाता है।

कम तापमान की क्रिया सड़न और किण्वन प्रक्रियाओं को रोक देती है, जिसका व्यापक रूप से प्रशीतन इकाइयों, तहखानों और ग्लेशियरों में भोजन को संरक्षित करने के लिए उपयोग किया जाता है। 0 डिग्री सेल्सियस से नीचे के तापमान पर, रोगाणु निलंबित एनीमेशन की स्थिति में आ जाते हैं - चयापचय प्रक्रियाएं धीमी हो जाती हैं और प्रजनन रुक जाता है। हालाँकि, यदि उपयुक्त हैं तापमान की स्थितिऔर पोषक माध्यम, माइक्रोबियल कोशिकाओं के महत्वपूर्ण कार्यों को बहाल किया जाता है। सूक्ष्मजीवों की इस संपत्ति का उपयोग कम तापमान पर माइक्रोबियल संस्कृतियों को संरक्षित करने के लिए प्रयोगशाला अभ्यास में किया जाता है। उच्च और निम्न तापमान (ठंड और पिघलना) में तेजी से बदलाव का भी सूक्ष्मजीवों पर हानिकारक प्रभाव पड़ता है - इससे कोशिका झिल्ली टूट जाती है।

सुखाने. सूक्ष्मजीवों के सामान्य कामकाज के लिए पानी आवश्यक है। सूखने से साइटोप्लाज्म का निर्जलीकरण होता है, साइटोप्लाज्मिक झिल्ली की अखंडता में व्यवधान होता है, जिसके परिणामस्वरूप माइक्रोबियल कोशिकाओं का पोषण बाधित होता है और उनकी मृत्यु हो जाती है।

सुखाने के प्रभाव में विभिन्न प्रकार के सूक्ष्मजीवों की मृत्यु का समय काफी भिन्न होता है। उदाहरण के लिए, रोगजनक निसेरिया (मेनिंगोकोकी, गोनोकोकी), लेप्टोस्पाइरा, ट्रेपोनेमा पैलिडम और अन्य कुछ मिनटों के बाद सूखने पर मर जाते हैं। विब्रियो कॉलेरी 2 दिनों तक, साल्मोनेला टाइफाइड - 70 दिन, और माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस - 90 दिनों तक सूखने का सामना कर सकता है। लेकिन तपेदिक के रोगियों का सूखा थूक, जिसमें रोगजनकों को सूखे प्रोटीन आवरण द्वारा संरक्षित किया जाता है, 10 महीने तक संक्रामक रहता है।

बीजाणु विशेष रूप से सूखने के साथ-साथ अन्य पर्यावरणीय प्रभावों के प्रति प्रतिरोधी होते हैं। एंथ्रेक्स बेसिली के बीजाणु 10 वर्षों तक अंकुरित होने की क्षमता बनाए रखते हैं, और मोल्ड कवक के बीजाणु 20 वर्षों तक अंकुरित होने की क्षमता बनाए रखते हैं।

सूक्ष्मजीवों पर सूखने के प्रतिकूल प्रभाव का उपयोग लंबे समय से सब्जियों, फलों, मांस, मछली आदि को संरक्षित करने के लिए किया जाता रहा है औषधीय जड़ी बूटियाँ. साथ ही, उच्च आर्द्रता की स्थिति के संपर्क में आने पर, माइक्रोबियल गतिविधि की बहाली के कारण ऐसे उत्पाद जल्दी खराब हो जाते हैं।

फ़्रीज़-सुखाने की विधि का उपयोग सूक्ष्मजीवों, टीकों और अन्य जैविक तैयारियों की संस्कृतियों के भंडारण के लिए व्यापक रूप से किया जाता है। विधि का सार यह है कि सूक्ष्मजीवों या तैयारियों को पहले जमे हुए किया जाता है और फिर वैक्यूम परिस्थितियों में सुखाया जाता है। इस मामले में, माइक्रोबियल कोशिकाएं निलंबित एनीमेशन की स्थिति में प्रवेश करती हैं और कई महीनों या वर्षों तक अपने जैविक गुणों को बरकरार रखती हैं।

दीप्तिमान ऊर्जा. प्रकृति में, सूक्ष्मजीव लगातार सौर विकिरण के संपर्क में रहते हैं। प्रकाश संश्लेषक बैक्टीरिया (हरे और बैंगनी सल्फर बैक्टीरिया) को छोड़कर, सीधी धूप कुछ ही घंटों में कई सूक्ष्मजीवों की मृत्यु का कारण बनती है। सूर्य के प्रकाश के हानिकारक प्रभाव गतिविधि के कारण होते हैं पराबैंगनी किरण(यूवी किरणें)। वे कोशिका एंजाइमों को निष्क्रिय कर देते हैं और डीएनए को नुकसान पहुंचाते हैं। सैप्रोफाइट्स की तुलना में रोगजनक बैक्टीरिया यूवी किरणों की क्रिया के प्रति अधिक संवेदनशील होते हैं। इसलिए, माइक्रोबियल कल्चर को प्रयोगशाला में अंधेरे में संग्रहित करना बेहतर है। इस संबंध में, बुचनर का अनुभव प्रदर्शनात्मक है।

के साथ एक पेट्री डिश में पतली परतअगर का उत्पादन किसी भी जीवाणु संवर्धन के प्रचुर मात्रा में टीकाकरण से होता है। काले कागज से काटे गए अक्षरों को बीज वाले कप की बाहरी सतह पर चिपका दिया जाता है, जिससे उदाहरण के लिए, "टाइफस" शब्द बनता है। कप को, जिसका निचला भाग ऊपर की ओर होता है, 1 घंटे के लिए सीधी धूप से विकिरणित किया जाता है। फिर कागज हटा दिए जाते हैं, और कप को एक दिन के लिए 37°C पर थर्मोस्टेट में रखा जाता है। बैक्टीरिया का विकास केवल उन्हीं स्थानों पर देखा जाता है आगर जिन्हें स्टिकर पत्रों द्वारा यूवी किरणों से संरक्षित किया गया था। आगर का शेष भाग पारदर्शी रहता है, अर्थात सूक्ष्मजीवों की वृद्धि नहीं होती है (चित्र 11)।

बाहरी वातावरण के स्वास्थ्य को बेहतर बनाने में प्राकृतिक कारक के रूप में सूर्य के प्रकाश का महत्व बहुत अधिक है। यह प्राकृतिक जलाशयों की हवा, पानी और मिट्टी की ऊपरी परतों को रोगजनक बैक्टीरिया से मुक्त करता है।

यूवी किरणों के जीवाणुनाशक (बैक्टीरिया को नष्ट करने वाले) प्रभाव का उपयोग बंद स्थानों (ऑपरेटिंग रूम, ड्रेसिंग रूम, बक्से, आदि) में हवा के साथ-साथ पानी और दूध को स्टरलाइज़ करने के लिए किया जाता है। इन किरणों का स्रोत पराबैंगनी विकिरण लैंप और जीवाणुनाशक लैंप हैं।

अन्य प्रकार की दीप्तिमान ऊर्जा - एक्स-रे, α-, β-, γ-किरणें केवल 440-280 J/kg के क्रम में बड़ी खुराक में सूक्ष्मजीवों पर हानिकारक प्रभाव डालती हैं। रोगाणुओं की मृत्यु परमाणु संरचनाओं और सेलुलर डीएनए के विनाश के कारण होती है। विकिरण की कम खुराक माइक्रोबियल कोशिकाओं के विकास को उत्तेजित करती है। उच्चतर जीवों की तुलना में सूक्ष्मजीव रेडियोधर्मी विकिरण के प्रति अधिक प्रतिरोधी होते हैं। थियोनिक बैक्टीरिया निक्षेपों में रहने के लिए जाने जाते हैं यूरेनियम अयस्क. परमाणु रिएक्टरों के पानी में 20-30 kJ/kg की आयनीकरण विकिरण की सांद्रता पर बैक्टीरिया पाए गए।

आयनकारी विकिरण के जीवाणुनाशक प्रभाव का उपयोग कुछ खाद्य उत्पादों के संरक्षण, जैविक तैयारियों (सीरा, टीके, आदि) की नसबंदी के लिए किया जाता है, जबकि निष्फल सामग्री के गुण नहीं बदलते हैं।

हाल के वर्षों में, डिस्पोजेबल उत्पादों जैसे पॉलीस्टाइरीन पिपेट, पेट्री डिश, सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं के लिए कुएं, सीरिंज, साथ ही सिवनी सामग्री - कैटगट, आदि को विकिरण विधि का उपयोग करके निष्फल किया गया है।

अल्ट्रासाउंडमाइक्रोबियल कोशिकाओं को महत्वपूर्ण क्षति पहुंचाता है। अल्ट्रासाउंड के प्रभाव में, साइटोप्लाज्म के तरल वातावरण में स्थित गैसें सक्रिय हो जाती हैं, और कोशिका के अंदर उच्च दबाव (10,000 एटीएम तक) उत्पन्न होता है। इससे कोशिका झिल्ली टूट जाती है और कोशिका मृत्यु हो जाती है। अल्ट्रासाउंड का उपयोग खाद्य उत्पादों (दूध, फलों के रस) और पीने के पानी को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है।

उच्च दबाव. बैक्टीरिया और विशेषकर उनके बीजाणु यांत्रिक दबाव के प्रति प्रतिरोधी होते हैं। प्रकृति में ऐसे बैक्टीरिया पाए जाते हैं जो समुद्र और महासागरों में 100 से 900 एटीएम के दबाव में 1000-10000 मीटर की गहराई पर रहते हैं। कुछ प्रकार के बैक्टीरिया 3000-5000 एटीएम तक के दबाव का सामना कर सकते हैं, और जीवाणु बीजाणु - 20,000 एटीएम तक भी।

रासायनिक कारक

सूक्ष्मजीवों पर रसायनों का प्रभाव रासायनिक यौगिक की प्रकृति, उसकी सांद्रता और माइक्रोबियल कोशिकाओं के संपर्क की अवधि के आधार पर भिन्न होता है। सांद्रता के आधार पर, एक रासायनिक पदार्थ पोषण का स्रोत हो सकता है या सूक्ष्मजीवों की महत्वपूर्ण गतिविधि पर निरोधात्मक प्रभाव डाल सकता है। उदाहरण के लिए, 0.5-2% ग्लूकोज समाधान रोगाणुओं के विकास को उत्तेजित करता है, और 20-40% ग्लूकोज समाधान माइक्रोबियल कोशिकाओं के प्रसार को रोकता है।

कई रासायनिक यौगिक जो सूक्ष्मजीवों पर हानिकारक प्रभाव डालते हैं, चिकित्सा पद्धति में कीटाणुनाशक और एंटीसेप्टिक्स के रूप में उपयोग किए जाते हैं।

कीटाणुशोधन के लिए उपयोग किए जाने वाले रसायनों को कीटाणुनाशक कहा जाता है। कीटाणुशोधन से तात्पर्य विभिन्न पर्यावरणीय वस्तुओं में रोगजनक सूक्ष्मजीवों को नष्ट करने के उपायों से है। निस्संक्रामक में हैलाइड यौगिक, फिनोल और उनके डेरिवेटिव, भारी धातुओं के लवण, कुछ एसिड, क्षार, अल्कोहल आदि शामिल हैं। वे एक निश्चित समय के लिए इष्टतम सांद्रता में कार्य करके माइक्रोबियल कोशिकाओं की मृत्यु का कारण बनते हैं। कई कीटाणुनाशक मैक्रोऑर्गेनिज्म के ऊतकों पर हानिकारक प्रभाव डालते हैं।

इन्हें एंटीसेप्टिक्स कहा जाता है रासायनिक पदार्थ, जो सूक्ष्मजीवों की मृत्यु का कारण बन सकता है या उनके विकास और प्रजनन को रोक सकता है। इनका उपयोग चिकित्सीय उद्देश्यों (कीमोथेरेपी) के साथ-साथ घावों, त्वचा और मानव श्लेष्म झिल्ली के कीटाणुशोधन के लिए किया जाता है। हाइड्रोजन पेरोक्साइड, आयोडीन के अल्कोहल समाधान, ब्रिलियंट ग्रीन, पोटेशियम परमैंगनेट के समाधान आदि में एंटीसेप्टिक गुण होते हैं। कुछ एंटीसेप्टिक पदार्थ (एसिटिक, सल्फ्यूरस, बेंजोइक एसिड, आदि) खुराक में जो मनुष्यों के लिए हानिरहित होते हैं, खाद्य संरक्षण के लिए उपयोग किए जाते हैं।

क्रिया के तंत्र के अनुसार, रोगाणुरोधी गतिविधि वाले रासायनिक पदार्थों को कई समूहों में विभाजित किया जा सकता है।

1. सर्फेक्टेंट (फैटी एसिड, साबुन और अन्य डिटर्जेंट) सतह के तनाव में कमी का कारण बनते हैं, जिससे सूक्ष्मजीवों की कोशिका दीवार और साइटोप्लाज्मिक झिल्ली के कामकाज में व्यवधान होता है।

2. फिनोल, क्रेसोल और उनके डेरिवेटिव माइक्रोबियल प्रोटीन के जमाव का कारण बनते हैं। इनका उपयोग सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास और संक्रामक रोग अस्पतालों में संक्रामक सामग्री को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है।

3. ऑक्सीकरण एजेंट, माइक्रोबियल प्रोटीन के साथ बातचीत करके, एंजाइमों की गतिविधि को बाधित करते हैं और प्रोटीन विकृतीकरण का कारण बनते हैं। सक्रिय ऑक्सीकरण एजेंट क्लोरीन और ओजोन हैं, जिनका उपयोग पीने के पानी को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। कीटाणुशोधन उद्देश्यों के लिए क्लोरीन डेरिवेटिव (ब्लीच, क्लोरैमाइन) का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। हाइड्रोजन पेरोक्साइड, पोटेशियम परमैंगनेट, आयोडीन आदि में ऑक्सीकरण गुण होते हैं।

4. कीटाणुशोधन के लिए फॉर्मेल्डिहाइड का उपयोग 40% घोल (फॉर्मेलिन) के रूप में किया जाता है। यह सूक्ष्मजीवों के वानस्पतिक और बीजाणु रूपों को मारता है। फॉर्मेलिन माइक्रोबियल सेल प्रोटीन के अमीनो समूहों को अवरुद्ध करता है और उनके विकृतीकरण का कारण बनता है।

5. भारी धातुओं (पारा, सीसा, जस्ता, सोना, आदि) के लवण माइक्रोबियल कोशिका के प्रोटीन को जमा देते हैं, जिससे उनकी मृत्यु हो जाती है। कई धातुएं (चांदी, सोना, पारा, आदि) नगण्य सांद्रता में सूक्ष्मजीवों पर जीवाणुनाशक प्रभाव डालती हैं। इस संपत्ति को ऑलिगोडायनामिक क्रिया कहा जाता है (लैटिन ऑलिगोस से - छोटा, डायनामिस - ताकत)। यह सिद्ध हो चुका है कि चाँदी के बर्तनों में रखा पानी चाँदी के आयनों के जीवाणुनाशक प्रभाव के कारण सड़ता नहीं है। ब्लेनोरिया की रोकथाम के लिए * नवजात शिशु कब कासिल्वर नाइट्रेट का 1% घोल इस्तेमाल किया गया। कोलाइडल समाधान कार्बनिक यौगिकचांदी (प्रोटार्गोल, कॉलरगोल) का उपयोग स्थानीय एंटीसेप्टिक्स के रूप में भी किया जाता है।

* (ब्लेनोरिया गोनोकोकी के कारण आंख के कंजंक्टिवा की सूजन है।)

पारा की तैयारी में एक मजबूत रोगाणुरोधी प्रभाव होता है। प्राचीन काल से, कीटाणुशोधन के लिए मरकरी बाइक्लोराइड, या मरक्यूरिक क्लोराइड (1:1000 के तनुकरण पर) का उपयोग किया जाता रहा है। हालाँकि, उसके पास है विषैला प्रभावमैक्रोऑर्गेनिज्म के ऊतक पर और इसका उपयोग सीमित है।

6. रंगों (डायमंड ग्रीन, रिवेनॉल आदि) में बैक्टीरिया की वृद्धि को रोकने का गुण होता है। कई रंगों के घोल का उपयोग एंटीसेप्टिक्स के रूप में किया जाता है, और माइक्रोफ्लोरा के विकास को रोकने के लिए कुछ पोषक तत्व मीडिया में भी मिलाया जाता है।

सूक्ष्मजीवों पर कई भौतिक और रासायनिक कारकों का विनाशकारी प्रभाव सड़न रोकनेवाला और एंटीसेप्टिक तरीकों का आधार बनता है, जिनका व्यापक रूप से चिकित्सा और स्वच्छता अभ्यास में उपयोग किया जाता है।

एसेप्टिस निवारक उपायों की एक प्रणाली है जो किसी वस्तु (घाव, आदि) के माइक्रोबियल संदूषण को रोकती है। शल्य चिकित्सा क्षेत्र, सूक्ष्मजीवों की संस्कृतियाँ, आदि) भौतिक विधियों पर आधारित।

एंटीसेप्टिक्स उपायों का एक समूह है जिसका उद्देश्य विभिन्न कीटाणुनाशक रसायनों का उपयोग करके घाव, पूरे शरीर या पर्यावरणीय वस्तुओं पर सूक्ष्मजीवों को नष्ट करना है।

जैविक कारक

प्राकृतिक आवासों में, सूक्ष्मजीव अलगाव में मौजूद नहीं होते हैं, बल्कि जटिल संबंधों में होते हैं, जो मुख्य रूप से सहजीवन, मेटाबायोसिस और विरोध के रूप में सामने आते हैं।

सहजीवन विभिन्न प्रजातियों के जीवों का सहवास है, जिससे उन्हें पारस्परिक लाभ होता है। साथ ही, एक साथ मिलकर उनका विकास अलग-अलग होने की तुलना में बेहतर होता है।

नोड्यूल बैक्टीरिया और फलीदार पौधों के बीच, फिलामेंटस कवक और नीले-हरे शैवाल (लाइकेन) के बीच सहजीवी संबंध मौजूद हैं: लैक्टिक एसिड बैक्टीरिया और अल्कोहलिक यीस्ट के सहजीवन का उपयोग कुछ लैक्टिक एसिड उत्पादों (केफिर, कौमिस) को तैयार करने के लिए किया जाता है।

मेटाबायोसिस एक प्रकार का संबंध है जिसमें एक प्रकार के सूक्ष्मजीवों के चयापचय उत्पाद दूसरों के विकास के लिए आवश्यक स्थितियां बनाते हैं। उदाहरण के लिए, पुटीय सक्रिय सूक्ष्मजीव जो प्रोटीन पदार्थों को तोड़ते हैं, पर्यावरण में अमोनियम यौगिकों के संचय में योगदान करते हैं और नाइट्रिफाइंग बैक्टीरिया के विकास और विकास के लिए अनुकूल परिस्थितियों का निर्माण करते हैं। और अच्छी तरह से वातित मिट्टी में अवायवीय जीवों का विकास उन एरोबिकों के बिना असंभव होगा जो मुक्त ऑक्सीजन को अवशोषित करते हैं।

मेटाबायोटिक संबंध मिट्टी के सूक्ष्मजीवों के बीच व्यापक हैं और प्रकृति में पदार्थों के चक्र का आधार हैं।

विरोध संबंध का एक रूप है जिसमें एक सूक्ष्मजीव दूसरे के विकास को रोकता है या उसकी पूर्ण मृत्यु का कारण बन सकता है। अस्तित्व के संघर्ष में सूक्ष्मजीवों के बीच विरोधी संबंध विकसित हो गए हैं। वे जहां भी रहते हैं, उनके बीच खाद्य स्रोतों, वायु ऑक्सीजन और आवास के लिए निरंतर संघर्ष होता रहता है। इस प्रकार, अधिकांश रोगजनक बैक्टीरिया, रोगियों के स्राव के साथ बाहरी वातावरण (मिट्टी, पानी) में प्रवेश कर चुके हैं, कई सैप्रोफाइट्स के साथ दीर्घकालिक प्रतिस्पर्धा का सामना नहीं कर सकते हैं और अपेक्षाकृत जल्दी मर जाते हैं।

विरोध एक दूसरे पर सूक्ष्मजीवों के सीधे प्रभाव या उनके चयापचय उत्पादों की कार्रवाई के कारण हो सकता है। उदाहरण के लिए, प्रोटोजोआ बैक्टीरिया को निगल जाता है और फेज उन्हें नष्ट कर देता है। नवजात शिशुओं की आंतें लैक्टिक एसिड बैक्टीरिया बिफीडोबैक्टीरियम बिफिडम द्वारा उपनिवेशित होती हैं। लैक्टिक एसिड जारी करके, वे पुटीय सक्रिय बैक्टीरिया के विकास को रोकते हैं और इस तरह शिशुओं के अभी भी नाजुक जीव को आंतों के विकारों से बचाते हैं। जीवन की प्रक्रिया में कुछ सूक्ष्मजीव विभिन्न पदार्थ उत्पन्न करते हैं जिनका बैक्टीरिया और अन्य रोगाणुओं पर हानिकारक प्रभाव पड़ता है। इन पदार्थों में एंटीबायोटिक्स शामिल हैं (देखें "एंटीबायोटिक्स")।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. क्या भौतिक कारकसूक्ष्मजीवों की जीवन गतिविधि को प्रभावित करते हैं?

2. किन पदार्थों को कीटाणुनाशक के रूप में वर्गीकृत किया गया है और सूक्ष्मजीवों पर उनकी क्रिया के तंत्र में वे कैसे भिन्न हैं?

3. सूचीबद्ध करें कि सूक्ष्मजीवों के बीच क्या संबंध मौजूद हैं?

नसबंदी

बंध्याकरण नसबंदी है, अर्थात सूक्ष्मजीवों और उनके बीजाणुओं से पर्यावरणीय वस्तुओं की पूर्ण मुक्ति।

नसबंदी विभिन्न तरीकों से की जाती है:

1) भौतिक (उच्च तापमान, यूवी किरणों के संपर्क में, जीवाणु फिल्टर का उपयोग);

2) रासायनिक (विभिन्न कीटाणुनाशक, एंटीसेप्टिक्स का उपयोग);

3) जैविक (एंटीबायोटिक दवाओं का उपयोग)।

प्रयोगशाला अभ्यास में, आमतौर पर नसबंदी के भौतिक तरीकों का उपयोग किया जाता है।

एक या किसी अन्य नसबंदी विधि का उपयोग करने की संभावना और व्यवहार्यता निष्फल की जाने वाली सामग्री की विशेषताओं, उसके भौतिक और रासायनिक गुणों से निर्धारित होती है।

भौतिक तरीके

बर्नर की लौ में कैल्सीनेशन या फ्लेम्बिंग नसबंदी की एक विधि है जिसमें वस्तु पूरी तरह से निष्फल हो जाती है, क्योंकि वनस्पति कोशिकाएं और माइक्रोबियल बीजाणु दोनों मर जाते हैं। आमतौर पर, बैक्टीरियोलॉजिकल लूप, स्पैटुला, पिपेट, स्लाइड और कवर ग्लास और छोटे उपकरणों को कैलक्लाइंड किया जाता है। कैंची और स्केलपेल को गर्म करके निष्फल नहीं किया जाना चाहिए, क्योंकि आग के प्रभाव में काटने की सतह सुस्त हो जाती है।

सूखी गर्मी नसबंदी

पाश्चर ओवन (सुखाने वाले ओवन) में सूखी गर्मी या गर्म हवा के साथ नसबंदी की जाती है। पाश्चर ओवन एक दोहरी दीवार वाली कैबिनेट है जो गर्मी प्रतिरोधी सामग्री - धातु और एस्बेस्टस से बनी होती है। गैस बर्नर या इलेक्ट्रिक हीटिंग उपकरणों का उपयोग करके कैबिनेट को गर्म करें। आवश्यक तापमान सुनिश्चित करने के लिए विद्युत रूप से गर्म अलमारियाँ नियामकों से सुसज्जित हैं। तापमान को नियंत्रित करने के लिए कैबिनेट की ऊपरी दीवार के छेद में एक थर्मामीटर डाला जाता है।

सूखी गर्मी का उपयोग प्रयोगशाला के कांच के बर्तनों को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। स्टरलाइज़ेशन के लिए तैयार किए गए बर्तनों को स्टरलाइज़ की जा रही सामग्री की एक समान और विश्वसनीय हीटिंग सुनिश्चित करने के लिए ओवन में लोड किया जाता है। कैबिनेट के दरवाज़े को कसकर बंद करें, हीटिंग डिवाइस चालू करें, तापमान को 160-165 डिग्री सेल्सियस पर लाएं और 1 घंटे के लिए इस तापमान पर स्टरलाइज़ करें। स्टरलाइज़ेशन के अंत में, हीटिंग बंद कर दें, लेकिन कैबिनेट का दरवाज़ा तब तक न खोलें जब तक ओवन ठंडा हो गया है; अन्यथा ठंडी हवा, कैबिनेट में प्रवेश करने से गर्म कुकवेयर में दरारें पड़ सकती हैं।

पाश्चर ओवन में स्टरलाइज़ेशन अलग-अलग तरीकों से किया जा सकता है तापमान की स्थितिऔर एक्सपोज़र (नसबंदी समय) (तालिका 1)।

तरल पदार्थ (पोषक तत्व मीडिया, आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान, आदि), रबर और सिंथेटिक सामग्री से बनी वस्तुओं को सूखी गर्मी से निष्फल नहीं किया जा सकता है, क्योंकि तरल पदार्थ उबल कर बाहर निकल जाते हैं, और रबर और सिंथेटिक सामग्री पिघल जाती है।

पाश्चर ओवन में नसबंदी को नियंत्रित करने के लिए, रेशम के धागों को बीजाणु बनाने वाले बैक्टीरिया के कल्चर में गीला किया जाता है, सुखाया जाता है, एक बाँझ पेट्री डिश में रखा जाता है और पाश्चर ओवन में रखा जाता है। 1 घंटे के लिए 165 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर स्टरलाइज़ेशन किया जाता है (नियंत्रण के लिए, कुछ धागों को कमरे के तापमान पर छोड़ दिया जाता है)। फिर निष्फल और नियंत्रण धागों को पेट्री डिश में अगर की सतह पर रखा जाता है या शोरबा के साथ टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है और 2 दिनों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोस्टेट में रखा जाता है। पाश्चर ओवन के उचित संचालन के साथ, पोषक तत्व मीडिया वाले टेस्ट ट्यूब या बर्तनों में कोई वृद्धि नहीं होगी जिसमें निष्फल धागे रखे गए थे, क्योंकि जीवाणु बीजाणु मर जाएंगे, जबकि धागे पर जीवाणु बीजाणु जो निष्फल नहीं थे (नियंत्रण) पोषक तत्व पर अंकुरित होंगे मीडिया विकास पर ध्यान दिया जाएगा.

पाश्चर ओवन के अंदर का तापमान निर्धारित करने के लिए, आप सुक्रोज या दानेदार चीनी का उपयोग कर सकते हैं, जो 165-170 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर कारमेलाइज़ होता है।

पाश्चर ओवन में नसबंदी के लिए प्रयोगशाला कांच के बर्तन तैयार करना. नसबंदी से पहले, प्रयोगशाला के कांच के बर्तन (पेट्री डिश, स्नातक और पाश्चर पिपेट, शीशियां, फ्लास्क, टेस्ट ट्यूब) को अच्छी तरह से धोया जाना चाहिए, सुखाया जाना चाहिए और कागज में लपेटा जाना चाहिए, अन्यथा नसबंदी के बाद वे फिर से वायु बैक्टीरिया से दूषित हो सकते हैं।

पेट्री डिश को एक समय में एक या अधिक टुकड़ों में कागज में लपेटा जाता है या विशेष धातु के बक्सों में रखा जाता है।

परीक्षण सामग्री को मुंह में प्रवेश करने से रोकने के लिए पिपेट के ऊपरी सिरों में रुई के फाहे डाले जाते हैं। स्नातक पिपेट को 4-5 सेमी चौड़ी कागज की लंबी पट्टियों में लपेटा जाता है। लपेटे गए पिपेट का आयतन कागज पर अंकित होता है। पेंसिल केस में, स्नातक किए गए पिपेट को कागज में अतिरिक्त लपेटे बिना निष्फल किया जाता है।

टिप्पणी. यदि पिपेट पर ग्रेजुएशन खराब दिखाई देता है, तो इसे नसबंदी से पहले बहाल कर दिया जाता है। पिपेट पर ऑयल पेंट लगाया जाता है और, पेंट को सूखने दिए बिना, कपड़े का उपयोग करके बेरियम सल्फेट पाउडर को इसमें रगड़ा जाता है। इसके बाद कपड़े से अतिरिक्त पेंट हटा दें, जो केवल ग्रेजुएशन नॉच में ही रह जाता है। इस तरह से उपचारित पिपेट को धोना चाहिए।

पाश्चर पिपेट के नुकीले सिरों को बर्नर की लौ में सील कर दिया जाता है और एक बार में 3-5 टुकड़ों में कागज में लपेट दिया जाता है। पाश्चर पिपेट को सावधानी से लपेटा जाना चाहिए ताकि केशिकाओं के सीलबंद सिरे टूट न जाएं।

शीशियाँ, फ्लास्क, टेस्ट ट्यूब कपास-धुंध स्टॉपर्स के साथ बंद हैं। कॉर्क को बर्तन की गर्दन में उसकी लंबाई का 2/3 भाग फिट होना चाहिए, बहुत तंग नहीं, लेकिन ढीला भी नहीं। प्रत्येक बर्तन (टेस्ट ट्यूब को छोड़कर) पर स्टॉपर्स के ऊपर एक पेपर कैप लगाई जाती है। टेस्ट ट्यूबों को 5-50 के समूह में एक साथ बांधा जाता है और कागज से लपेटा जाता है।

टिप्पणी. उच्च तापमान पर, कागज जिसमें कप और पिपेट लपेटे जाते हैं, और रूई पीली हो जाती है और जल भी सकती है, इसलिए हर नई किस्मप्रयोगशाला द्वारा प्राप्त कागज का परीक्षण स्वीकृत तापमान स्थितियों पर किया जाना चाहिए।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. नसबंदी शब्द का क्या अर्थ है?

2. नसबंदी कैसे की जाती है?

3. आग पर कैल्सीनेशन द्वारा क्या निष्फल किया जाता है?

4. पाश्चर ओवन की संरचना और संचालन मोड का वर्णन करें।

5. पाश्चर ओवन में क्या निष्फल किया जाता है?

6. नसबंदी के लिए कांच के बर्तन कैसे तैयार किए जाते हैं?

7. पाश्चर ओवन में पोषक तत्व मीडिया और रबर की वस्तुओं को निष्फल क्यों नहीं किया जा सकता है?

व्यायाम

स्टरलाइज़ेशन के लिए पेट्री डिश, ग्रेजुएटेड पिपेट, पाश्चर पिपेट, टेस्ट ट्यूब, फ्लास्क और शीशियाँ तैयार करें।

उबालकर बंध्याकरण

उबालना एक रोगाणुनाशन विधि है जो बंध्यता की गारंटी देती है बशर्ते कि निष्फल सामग्री में कोई बीजाणु न हों। सीरिंज, उपकरण, कांच और धातु के बर्तन, रबर ट्यूब आदि के प्रसंस्करण के लिए उपयोग किया जाता है।

उबालकर बंध्याकरण आमतौर पर एक स्टरलाइज़र - एक धातु बॉक्स में किया जाता है आयत आकारएक टाइट-फिटिंग ढक्कन के साथ. स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री को स्टरलाइज़र में उपलब्ध जाली पर रखा जाता है और पानी से भर दिया जाता है। क्वथनांक बढ़ाने और पानी की कठोरता को खत्म करने के लिए, 1-2% सोडियम बाइकार्बोनेट मिलाएं (आसुत जल का उपयोग करना बेहतर है)। स्टरलाइज़र को ढक्कन से बंद करके गर्म किया जाता है। स्टरलाइज़ेशन की शुरुआत पानी के उबलने के क्षण से मानी जाती है, उबलने का समय 15-30 मिनट है। नसबंदी के अंत में, उपकरणों के साथ जाल को विशेष हुक के साथ साइड हैंडल से हटा दिया जाता है, और इसमें लगे उपकरणों को बाँझ चिमटी या संदंश के साथ लिया जाता है, जिन्हें बाकी उपकरणों के साथ उबाला जाता है।

भाप नसबंदी दो तरीकों से की जाती है: 1) दबाव में भाप; 2) बहती हुई भाप।

दबाव भाप नसबंदीएक आटोक्लेव में उत्पादित. यह स्टरलाइज़ेशन विधि स्टरलाइज़ की जा रही सामग्रियों को वायुमंडलीय दबाव से ऊपर संतृप्त जल वाष्प में उजागर करने पर आधारित है। इस तरह की नसबंदी के परिणामस्वरूप, सूक्ष्मजीवों के वानस्पतिक और बीजाणु दोनों रूप एक ही उपचार से मर जाते हैं।

एक आटोक्लेव (चित्र 12) एक विशाल बॉयलर है, जो बाहर की तरफ एक धातु के आवरण से ढका होता है, जिसे एक ढक्कन के साथ भली भांति बंद करके सील किया जाता है, जो हिंग वाले बोल्ट के साथ बॉयलर से कसकर जुड़ा होता है। एक और, छोटे व्यास वाला, जिसे स्टरलाइज़ेशन कक्ष कहा जाता है, बाहरी बॉयलर में डाला जाता है। इस कक्ष में विसंक्रमित की जाने वाली वस्तुओं को रखा जाता है। दोनों बॉयलर के बीच में है मुक्त स्थान, जिसे जलवाष्प कक्ष कहा जाता है। इस कक्ष में पानी को एक विशेष जल-मापने वाली ट्यूब पर अंकित एक निश्चित स्तर तक बाहर की ओर लगे फ़नल के माध्यम से डाला जाता है। जब पानी को जल-भाप कक्ष में उबाला जाता है, तो भाप उत्पन्न होती है। नसबंदी कक्ष एक सुरक्षा वाल्व के साथ एक आउटलेट कॉक से सुसज्जित है ताकि दबाव आवश्यक स्तर से ऊपर बढ़ने पर भाप को बाहर निकलने की अनुमति मिल सके। नसबंदी कक्ष में बनाए गए दबाव को निर्धारित करने के लिए एक दबाव नापने का यंत्र का उपयोग किया जाता है।

चावल। 12. आटोक्लेव आरेख. एम - दबाव नापने का यंत्र; पीसी - सुरक्षा वाल्व; बी - पानी के लिए फ़नल; के 2 - पानी छोड़ने के लिए नल; के 3 - भाप छोड़ने के लिए वाल्व

सामान्य वायुमंडलीय दबाव (760 मिमी एचजी) को शून्य माना जाता है। दबाव गेज रीडिंग और तापमान (तालिका 2) के बीच एक निश्चित संबंध है।

वर्तमान में, ऑपरेटिंग मोड के स्वचालित नियंत्रण वाले आटोक्लेव हैं। सामान्य दबाव नापने का यंत्र के अलावा, वे सुसज्जित हैं विद्युत संपर्क दबाव नापने का यंत्र, जो दबाव को किसी दिए गए मान से ऊपर बढ़ने से रोकता है और इस प्रकार स्थिरता सुनिश्चित करता है वांछित तापमानएक आटोक्लेव में.

दबाव में भाप विभिन्न पोषक मीडिया (देशी प्रोटीन युक्त मीडिया को छोड़कर), तरल पदार्थ (आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान, पानी, आदि) को निर्जलित करती है; उपकरण, विशेष रूप से रबर भागों वाले।

पोषक तत्व मीडिया के ऑटोक्लेविंग का तापमान और अवधि पोषक माध्यम तैयार करने के लिए नुस्खा में निर्दिष्ट उनकी संरचना द्वारा निर्धारित की जाती है। उदाहरण के लिए, साधारण मीडिया (मीट-पेप्टोन अगर, मीट-पेप्टोन शोरबा) को 120 डिग्री सेल्सियस (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। हालाँकि, इस तापमान पर देशी प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट और अन्य पदार्थों से युक्त मीडिया को स्टरलाइज़ करना असंभव है जो गर्म करने पर आसानी से बदल जाते हैं। कार्बोहाइड्रेट वाले मीडिया को आंशिक रूप से 100 डिग्री सेल्सियस पर या आटोक्लेव में 112 डिग्री सेल्सियस (0.5 एटीएम) पर 10-15 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। विभिन्न तरल पदार्थ, रबर की नली, प्लग, बैक्टीरियल मोमबत्तियाँ और फिल्टर वाले उपकरणों को 120 डिग्री सेल्सियस (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है।

ध्यान! संक्रमित सामग्री को आटोक्लेव में भी निष्क्रिय कर दिया जाता है। सूक्ष्मजीवों के कल्चर वाले कप और टेस्ट ट्यूब को भाप के प्रवेश के लिए ढक्कन में छेद वाले विशेष धातु की बाल्टियों या टैंकों में रखा जाता है और 1 घंटे के लिए 126 डिग्री सेल्सियस (1.5 एटीएम) पर एक आटोक्लेव में स्टरलाइज़ किया जाता है। काम करने के बाद उपकरणों को उसी तरह से स्टरलाइज़ किया जाता है बैक्टीरिया के साथ, विवाद बनाते हैं।

केवल विशेष रूप से प्रशिक्षित व्यक्तियों को ही आटोक्लेव के साथ काम करने की अनुमति है, जिन्हें डिवाइस के साथ दिए गए निर्देशों में निर्दिष्ट नियमों का सख्ती से और सटीक रूप से पालन करना होगा।

आटोक्लेविंग तकनीक. 1. काम से पहले, सभी भागों की सेवाक्षमता और नल की ग्राइंडिंग की जांच करें।

2. पानी (पैमाने के गठन को रोकने के लिए आसुत या उबला हुआ) बॉयलर के बाहर लगे फ़नल के माध्यम से पानी के मीटर ग्लास के शीर्ष निशान तक डाला जाता है। फ़नल के नीचे का नल बंद है।

3. स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री को एक विशेष जाली पर स्टरलाइज़ेशन कक्ष में रखा जाता है। वस्तुओं को बहुत कसकर लोड नहीं किया जाना चाहिए, क्योंकि भाप को उनके बीच स्वतंत्र रूप से गुजरना चाहिए, अन्यथा वे आवश्यक तापमान तक गर्म नहीं होंगे और अस्थिर रह सकते हैं।

4. बेहतर सीलिंग के लिए ढक्कन पर रबर गैसकेट को चाक से रगड़ा जाता है।

5. ढक्कन को बंद कर दिया जाता है और आटोक्लेव बॉडी पर बोल्ट लगा दिया जाता है, और बोल्ट को जोड़े में क्रॉसवर्ड में पेंच कर दिया जाता है।

6. स्टरलाइज़ेशन कक्ष को बाहरी हवा से जोड़ने वाले आउटलेट वाल्व को पूरी तरह से खोलें, और आटोक्लेव को गर्म करना शुरू करें। आटोक्लेव को आमतौर पर गैस या बिजली का उपयोग करके गर्म किया जाता है।

जब आटोक्लेव को गर्म किया जाता है, तो पानी उबलता है, जिसके परिणामस्वरूप भाप बॉयलर की दीवारों के बीच और आंतरिक बॉयलर की दीवार में विशेष छेद के माध्यम से ऊपर उठती है (चित्र 12 देखें), नसबंदी कक्ष में प्रवेश करती है और खुले आउटलेट वाल्व के माध्यम से बाहर निकलती है। सबसे पहले, भाप आटोक्लेव में हवा के साथ निकल जाती है। यह आवश्यक है कि सभी हवा को आटोक्लेव से बाहर निकाला जाए, अन्यथा दबाव नापने का यंत्र की रीडिंग आटोक्लेव में तापमान के अनुरूप नहीं होगी।

भाप की निरंतर मजबूत धारा की उपस्थिति आटोक्लेव से हवा को पूरी तरह से हटाने का संकेत देती है; इसके बाद, आउटलेट वाल्व बंद हो जाता है और आटोक्लेव के अंदर दबाव धीरे-धीरे बढ़ने लगता है।

7. नसबंदी की शुरुआत उस क्षण को माना जाता है जब दबाव गेज की रीडिंग निर्दिष्ट मूल्य तक पहुंच जाती है। हीटिंग को समायोजित किया जाता है ताकि आटोक्लेव में दबाव एक निश्चित अवधि में न बदले।

8. नसबंदी का समय समाप्त होने के बाद, आटोक्लेव का ताप बंद कर दिया जाता है, और भाप को आउटलेट वाल्व के माध्यम से छोड़ दिया जाता है। जब दबाव नापने की सुई शून्य पर गिर जाए, तो ढक्कन खोलें। आटोक्लेव में बची भाप से जलने से बचने के लिए ढक्कन आपकी ओर खुला होना चाहिए।

आटोक्लेव में तापमान स्तर, यानी दबाव गेज रीडिंग की शुद्धता की जांच की जा सकती है। ऐसा करने के लिए, विभिन्न पदार्थों का उपयोग करें जिनका एक निश्चित गलनांक होता है: एंटीपाइरिन (113° C), रेसोरिसिनॉल और सल्फर (119° C), बेंजोइक एसिड (120° C)। इनमें से एक पदार्थ को नगण्य मात्रा में डाई (मचसिन या मिथाइलीन ब्लू) के साथ मिलाया जाता है और एक ग्लास ट्यूब में डाला जाता है, जिसे सील कर दिया जाता है और निष्फल की जाने वाली सामग्री के बीच एक ऊर्ध्वाधर स्थिति में रखा जाता है। यदि तापमान पर्याप्त है, तो पदार्थ पिघल जाएगा और संबंधित डाई का रंग बदल देगा।

नसबंदी की प्रभावशीलता की जांच करने के लिए, ज्ञात बीजाणु संस्कृति के साथ एक टेस्ट ट्यूब को आटोक्लेव में रखा जाता है। ऑटोक्लेविंग के बाद, ट्यूब को 24-48 घंटों के लिए थर्मोस्टेट में स्थानांतरित कर दिया जाता है, विकास की अनुपस्थिति या उपस्थिति नोट की जाती है। वृद्धि की कमी डिवाइस के उचित संचालन को इंगित करती है।

बहती भाप से बंध्याकरणकोच तंत्र में उत्पादित। इस विधि का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां निर्जलित की जाने वाली वस्तु 100 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान पर बदल जाती है। यूरिया, कार्बोहाइड्रेट, दूध, आलू, जिलेटिन इत्यादि युक्त पोषक तत्व मीडिया को बहती भाप से निर्जलित किया जाता है।

कोच उपकरण (बॉयलर) एक धातु सिलेंडर है जो बाहर की तरफ (गर्मी हस्तांतरण को कम करने के लिए) फेल्ट या एस्बेस्टस से ढका होता है। सिलेंडर को शंक्वाकार ढक्कन के साथ बंद किया जाता है जिसमें भाप निकलने के लिए एक छेद होता है। सिलेंडर के अंदर एक स्टैंड होता है, जिसके लेवल तक पानी डाला जाता है। स्टैंड पर एक छेद वाली बाल्टी रखी जाती है जिसमें स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री रखी जाती है। कोच उपकरण को गैस या बिजली का उपयोग करके गर्म किया जाता है। नसबंदी का समय ढक्कन के किनारों पर और भाप आउटलेट से जोरदार भाप निकलने के क्षण से गिना जाता है। 30-60 मिनट के लिए स्टरलाइज़ करें। नसबंदी के अंत में, हीटिंग बंद कर दिया जाता है। उपकरण से सामग्री की बाल्टी निकालें और इसे अगले दिन तक कमरे के तापमान पर छोड़ दें। वार्मिंग को लगातार 3 दिनों तक 100°C के तापमान पर 30-60 मिनट तक किया जाता है। इस विधि को फ्रैक्शनल स्टरलाइज़ेशन कहा जाता है। पहले ताप के दौरान, रोगाणुओं के वानस्पतिक रूप मर जाते हैं, जबकि बीजाणु रूप संरक्षित रहते हैं। एक दिन के भीतर, बीजाणु अंकुरित होकर वानस्पतिक रूपों में बदल जाते हैं, जो नसबंदी के दूसरे दिन मर जाते हैं। चूँकि यह संभव है कि कुछ बीजाणुओं को अंकुरित होने का समय नहीं मिला, सामग्री को अगले 24 घंटों के लिए रखा जाता है, और फिर तीसरी नसबंदी की जाती है। कोच उपकरण में बहती भाप के साथ बंध्याकरण के लिए विशेष नियंत्रण की आवश्यकता नहीं होती है, क्योंकि तैयार कल्चर मीडिया की बंध्यता उपकरण के सही संचालन का एक संकेतक है। आप आटोक्लेव में ढक्कन खोलकर और आउटलेट वाल्व खुला रखकर बहती भाप से भी स्टरलाइज़ कर सकते हैं।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. कौन से पोषक माध्यम को भाप से निष्फल किया जाता है?

2. स्टरलाइज़र क्या है और यह कैसे काम करता है?

3. उबालकर रोगाणुनाशन करते समय आसुत जल का उपयोग क्यों करना चाहिए?

4. आटोक्लेव की संरचना और संचालन मोड का वर्णन करें।

5. आटोक्लेव में क्या स्टरलाइज़ किया जाता है?

6. ऑटोक्लेविंग के दौरान उचित स्टरलाइज़ेशन के लिए नियंत्रण के रूप में क्या कार्य करता है?

7. प्रवाहित भाप स्टरलाइज़ेशन क्या है?

8. कोच तंत्र की संरचना का वर्णन करें।

9. फ्रैक्शनल स्टरलाइज़ेशन का उद्देश्य क्या है?

व्यायाम

प्रपत्र भरिये।

कोच कौयगुलांट में आंशिक नसबंदी भी की जा सकती है।

कोच के कौयगुलांट का उपयोग मट्ठा और अंडा संस्कृति मीडिया को जमा करने के लिए किया जाता है, और साथ ही माध्यम के संघनन के साथ, इसे निष्फल किया जाता है।

कोच का कौयगुलांटदोहरी दीवारों वाला एक सपाट धातु का बक्सा है, जो बाहर की तरफ गर्मी-रोधक सामग्री से लेपित है। बाहरी दीवार के ऊपरी भाग में स्थित एक विशेष छेद के माध्यम से दीवारों के बीच की जगह में पानी डाला जाता है। छेद को एक डाट से बंद किया जाता है जिसमें एक थर्मामीटर डाला जाता है। उपकरण दो ढक्कनों से बंद है: कांच और धातु। कांच के ढक्कन के माध्यम से आप जमावट प्रक्रिया का निरीक्षण कर सकते हैं। मीडिया के साथ टेस्ट ट्यूब को कोगुलेटर के नीचे झुकी हुई स्थिति में रखा जाता है।

कोगुलेटर को गैस या बिजली का उपयोग करके गर्म किया जाता है। मीडिया को एक बार 90°C के तापमान पर 1 घंटे के लिए या आंशिक रूप से - लगातार 3 दिनों में 80°C पर 1 घंटे के लिए निष्फल किया जाता है।

टिंडलाइज़ेशन* - कम तापमान पर आंशिक नसबंदी - उन पदार्थों के लिए उपयोग किया जाता है जो 60 डिग्री सेल्सियस (उदाहरण के लिए, प्रोटीन तरल पदार्थ) के तापमान पर आसानी से नष्ट हो जाते हैं और विकृत हो जाते हैं। कीटाणुरहित की जाने वाली सामग्री को पानी के स्नान में या अंदर गर्म किया जाता है विशेष उपकरणलगातार 5 दिनों तक एक घंटे के लिए 56-58 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर थर्मोस्टैट के साथ।

* (नसबंदी विधि का नाम टाइन्डल के नाम पर रखा गया है, जिन्होंने इसे प्रस्तावित किया था।)

pasteurization- रोगाणुओं के गैर-बीजाणु रूपों को नष्ट करने के लिए पाश्चर द्वारा प्रस्तावित 1 घंटे के लिए 65-70 डिग्री सेल्सियस पर नसबंदी। दूध, वाइन, बीयर, फलों के रस और अन्य उत्पादों को पास्चुरीकृत किया जाता है। लैक्टिक एसिड और रोगजनक बैक्टीरिया (ब्रुसेला, माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस, शिगेला, साल्मोनेला, स्टेफिलोकोकस, आदि) को हटाने के लिए दूध को पास्चुरीकृत किया जाता है। बीयर, फलों के रस और वाइन को पास्चुरीकृत करते समय, सूक्ष्मजीव पैदा होते हैं विभिन्न प्रकारकिण्वन. पाश्चुरीकृत खाद्य पदार्थों को प्रशीतित में रखना सबसे अच्छा है।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. कोच कोगुलेटर का उद्देश्य और संरचना क्या है?

2. क्लॉटिंग मशीन में स्टरलाइज़ेशन की क्या विधियाँ हैं?

3. टिंडलाइजेशन क्या है?

4. पास्चुरीकरण क्या है?

पराबैंगनी विकिरण द्वारा बंध्याकरण

यूवी किरणों के साथ नसबंदी विशेष प्रतिष्ठानों - जीवाणुनाशक लैंप का उपयोग करके की जाती है। यूवी किरणों में उच्च रोगाणुरोधी गतिविधि होती है और यह न केवल वनस्पति कोशिकाओं, बल्कि बीजाणुओं की भी मृत्यु का कारण बन सकती है। यूवी विकिरण का उपयोग अस्पतालों, ऑपरेटिंग रूम, बच्चों के संस्थानों आदि में हवा को स्टरलाइज़ करने के लिए किया जाता है। एक सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशाला में, काम से पहले एक बॉक्स को यूवी किरणों से उपचारित किया जाता है।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. पराबैंगनी किरणों में क्या गुण होते हैं?

2. पराबैंगनी विकिरण का उपयोग करके नसबंदी का उपयोग किन मामलों में किया जाता है?

जीवाणु फिल्टर का उपयोग करके यांत्रिक नसबंदी

निस्पंदन स्टरलाइज़ेशन का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां विसंक्रमित की जाने वाली वस्तुएं गर्म होने पर बदल जाती हैं। विभिन्न महीन-छिद्रपूर्ण सामग्रियों से बने जीवाणु फिल्टर का उपयोग करके निस्पंदन किया जाता है। बैक्टीरिया की यांत्रिक अवधारण सुनिश्चित करने के लिए फिल्टर के छिद्र काफी छोटे (1 माइक्रोन तक) होने चाहिए, इसलिए कुछ लेखक निस्पंदन को इस प्रकार कहते हैं यांत्रिक तरीकेनसबंदी.

निस्पंदन विधि का उपयोग प्रोटीन, सीरम और कुछ एंटीबायोटिक्स युक्त पोषक मीडिया को स्टरलाइज़ करने के लिए किया जाता है, और वायरस, फ़ेज और एक्सोटॉक्सिन से बैक्टीरिया को अलग करने के लिए भी किया जाता है।

सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में, सेट्ज़ एस्बेस्टस फिल्टर, झिल्ली फिल्टर और चेम्बरलेंट और बर्कफेल्ड फिल्टर (मोमबत्तियाँ) का उपयोग किया जाता है।

सेट्ज़ फिल्टर एस्बेस्टस और सेल्युलोज के मिश्रण से बनी डिस्क हैं। इनकी मोटाई 3-5 मिमी, व्यास 35-140 मिमी है। घरेलू उद्योग दो ब्रांडों के फिल्टर का उत्पादन करता है: "एफ" (फ़िल्टरिंग) - निलंबित कणों को बनाए रखता है लेकिन बैक्टीरिया को गुजरने देता है; "एसएफ" (स्टरलाइज़िंग) - छोटे छिद्रों के साथ, बैक्टीरिया को बनाए रखता है, लेकिन वायरस को अंदर जाने देता है। टूटी हुई एस्बेस्टस प्लेटें, साथ ही टूटी हुई और दरार वाली प्लेटें काम के लिए अनुपयुक्त हैं।

मेम्ब्रेन फिल्टर नाइट्रोसेल्यूलोज से बनाए जाते हैं। वे डिस्क हैं सफ़ेद 0.1 मिमी मोटा और 35 मिमी व्यास। छिद्र के आकार के आधार पर, उन्हें क्रमांक 1, 2, 3, 4 और 5 (तालिका 3) नामित किया गया है।

फ़िल्टर नंबर 1 नसबंदी के लिए सबसे उपयुक्त है। सूचीबद्ध लोगों के अलावा, वे एक तथाकथित प्री-फ़िल्टर भी बनाते हैं, जो फ़िल्टर किए गए तरल को इसमें मौजूद बड़े कणों से मुक्त करने के लिए डिज़ाइन किया गया है।

चेम्बरलेंट और बर्कफेल्ड फिल्टर (मोमबत्तियाँ) खोखले सिलेंडर हैं, जो एक सिरे पर बंद होते हैं। चेम्बरलेंट मोमबत्तियाँ रेत और क्वार्ट्ज के साथ मिश्रित काओलिन से बनाई जाती हैं। उन्हें छिद्र आकार द्वारा मानकीकृत किया जाता है और एल 1, एल 2, एल 3 ... एल 13 नामित किया जाता है। बर्कफेल्ड फिल्टर (मोमबत्तियाँ) इन्फ्यूसर मिट्टी से तैयार किए जाते हैं; उनके छिद्रों के आकार के अनुसार उन्हें वी, एन, डब्ल्यू नामित किया जाता है, जो 3-4, 4-7, 8-12 माइक्रोन के छिद्र व्यास से मेल खाता है।

जीवाणु फिल्टर के साथ कार्य निम्नानुसार किया जाता है। फ़िल्टर को एक विशेष धारक में सुरक्षित किया जाना चाहिए, जिसे फ़िल्टर रिसीवर में डाला जाता है। रिसीवर आमतौर पर बन्सेन फ्लास्क होता है। अधिकांश मामलों में स्टेनलेस स्टील से बने धारकों में दो भाग होते हैं: ऊपरी, बिना तली के सिलेंडर के आकार का, और निचला, एक सहायक भाग जो एक ट्यूब में समाप्त होता है। ऊपर की ओर खुरदरी सतह वाले सेट्ज़ फिल्टर लगाए जाते हैं धातु जालऔर होल्डर के ऊपर और नीचे के बीच स्क्रू से सुरक्षित रूप से जकड़ा हुआ है। माउंटेड फिल्टर को बुन्सेन फ्लास्क की गर्दन में डाले गए रबर स्टॉपर में सुरक्षित किया गया है। फ्लास्क के आउटलेट ट्यूब में एक कपास झाड़ू डाला जाता है, जो वैक्यूम पंप से जुड़ा होता है। तैयार इंस्टॉलेशन को कागज में लपेटा जाता है और 20-30 मिनट के लिए 1 एटीएम के दबाव में एक आटोक्लेव में निष्फल किया जाता है। संपूर्ण असेंबल डिवाइस को सेइट्ज़ फ़िल्टर भी कहा जाता है (चित्र 13)।

निस्पंदन से तुरंत पहले, बन्सेन फ्लास्क का आउटलेट सिरा एक रबर ट्यूब द्वारा एक तेल या जल जेट पंप से जुड़ा होता है। एक मजबूत सील बनाने के लिए विभिन्न भागों के जंक्शनों को पैराफिन से भर दिया जाता है। फ़िल्टर किए गए तरल को उपकरण के सिलेंडर में डाला जाता है और पंप चालू कर दिया जाता है, जिससे रिसीवर में एक वैक्यूम बन जाता है। परिणामी दबाव अंतर के परिणामस्वरूप, फ़िल्टर किया गया तरल फ़िल्टर के छिद्रों से होकर रिसीवर में चला जाता है, और रोगाणु फ़िल्टर की सतह पर बने रहते हैं।

उपयोग से पहले, झिल्ली फिल्टर को आसुत जल में उबालकर निष्फल किया जाता है। फिल्टर को मुड़ने से रोकने के लिए, उन्हें पहले आसुत जल में रखा जाता है, 50-60 डिग्री सेल्सियस के तापमान तक गर्म किया जाता है, और 30 मिनट तक कम गर्मी पर उबाला जाता है, पानी को 2-3 बार बदला जाता है। फ़िल्टर होल्डर और रिसीवर को पहले से कीटाणुरहित किया जाता है, और डिवाइस को सड़न रोकने वाली परिस्थितियों में लगाया जाता है। धातु की जाली पर झिल्ली फिल्टर को फटने से बचाने के लिए, इसके नीचे स्टेराइल फिल्टर पेपर के मग रखें। फिर, चिकनी युक्तियों के साथ बाँझ चिमटी का उपयोग करके, स्टेरलाइज़र से झिल्ली फ़िल्टर लें और इसे चमकदार सतह के साथ समर्थन ग्रिड पर रखें।

आटोक्लेव में निष्फल मोमबत्तियाँ (चैम्बरलेंट) एक रबर ट्यूब के माध्यम से एक रिसीवर से जुड़ी होती हैं और फ़िल्टर किए गए तरल के साथ एक बर्तन (आमतौर पर एक सिलेंडर) में उतारी जाती हैं। निस्पंदन एक वैक्यूम पंप का उपयोग करके होता है। एक बाँझ निस्पंद रिसीवर में प्रवेश करता है, और बैक्टीरिया मोमबत्ती के छिद्रों द्वारा बनाए रखा जाता है।

मेम्ब्रेन और एस्बेस्टस फिल्टर एकल उपयोग के लिए डिज़ाइन किए गए हैं। उपयोग के बाद मोमबत्तियों को उबाला जाता है नल का जल, फिर मफल भट्टी में कैलक्लाइंड किया जाता है।

बाद के उपयोग से पहले, मोमबत्तियों की अखंडता की जाँच की जाती है। मोमबत्ती को पानी के एक बर्तन में उतारा जाता है और उसमें से हवा प्रवाहित की जाती है। यदि मोमबत्ती की सतह पर हवा के बुलबुले दिखाई देते हैं, तो इसका मतलब है कि मोमबत्ती में दरारें पड़ गई हैं और यह अनुपयोगी है।

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1. फ़िल्टर स्टरलाइज़ेशन विधि क्या है? इस विधि से क्या निष्फल किया जाता है?

2. आप कौन से जीवाणु फिल्टर जानते हैं? फ़िल्टरिंग उपकरण कैसे स्थापित किया जाता है, किन शर्तों का पालन किया जाना चाहिए?

रासायनिक विधियाँ

इस प्रकार की नसबंदी का उपयोग सीमित सीमा तक किया जाता है, और यह मुख्य रूप से कल्चर मीडिया और इम्युनोबायोलॉजिकल तैयारियों (टीके और सीरम) के जीवाणु संदूषण को रोकने के लिए कार्य करता है।

क्लोरोफॉर्म, टोल्यूनि और ईथर जैसे पदार्थ अक्सर पोषक मीडिया में जोड़े जाते हैं। यदि माध्यम को इन परिरक्षकों से मुक्त करना आवश्यक हो, तो इसे पानी के स्नान में 56°C पर गर्म किया जाता है (परिरक्षक वाष्पित हो जाते हैं)।

टीकों और सीरम को संरक्षित करने के लिए मेरथिओलेट, बोरिक एसिड, फॉर्मेल्डिहाइड आदि का उपयोग किया जाता है।

जैविक बंध्याकरण

जैविक नसबंदी एंटीबायोटिक दवाओं के उपयोग पर आधारित है। इस विधि का उपयोग वायरस की खेती के लिए किया जाता है।

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1. क्या है रासायनिक बंध्याकरणऔर इसका उपयोग कब किया जाता है?

2. जैविक बंध्याकरण क्या है?

नसबंदी की मुख्य विधियाँ तालिका में प्रस्तुत की गई हैं। 4.

1 (स्टरलाइज़ेशन अधूरा है: स्टरलाइज़ की गई सामग्री में बीजाणु बने रहते हैं।)

2 (स्टरलाइज़ेशन अधूरा है: वायरस स्टरलाइज़ की गई सामग्री में रह जाते हैं।)

कीटाणुशोधन

सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में, विभिन्न कीटाणुनाशकों का उपयोग किया जाता है: 3-5% फिनोल समाधान, 5-10% लाइसोल समाधान, 1-5% क्लोरैमाइन समाधान, 3-6% हाइड्रोजन पेरोक्साइड समाधान, 1-5% फॉर्मेल्डिहाइड समाधान, कमजोर पड़ने में मर्क्यूरिक क्लोराइड समाधान 1:1000 (0.1%), 70° अल्कोहल, आदि।

खर्च की गई पैथोलॉजिकल सामग्री (मवाद, मल, मूत्र, थूक, रक्त, मस्तिष्कमेरु द्रव) को सीवर में बहाने से पहले कीटाणुरहित किया जाता है। कीटाणुशोधन सूखे ब्लीच या 3-5% क्लोरैमाइन घोल से किया जाता है।

पैथोलॉजिकल सामग्री या सूक्ष्मजीवों की संस्कृतियों से दूषित पिपेट (स्नातक और पाश्चर), ग्लास स्पैटुला, स्लाइड और कवरस्लिप को एक दिन के लिए फिनोल या हाइड्रोजन पेरोक्साइड के 3% समाधान के साथ ग्लास जार में डुबोया जाता है।

संक्रामक सामग्री के साथ काम खत्म करने के बाद, प्रयोगशाला तकनीशियन को इसे कीटाणुनाशक समाधान के साथ इलाज करना चाहिए। कार्यस्थलऔर हाथ. कार्य तालिका की सतह को 3% फिनोल घोल में भिगोए रूई के टुकड़े से पोंछा जाता है। हाथों को 1% क्लोरैमाइन घोल से कीटाणुरहित किया जाता है। ऐसा करने के लिए, एक कपास की गेंद या धुंध को कीटाणुनाशक घोल से गीला करें और पहले बाएं हाथ को पोंछें, फिर दाएं हाथ को, और फिर अपने हाथों को गर्म पानी और साबुन से धो लें।

एक निस्संक्रामक का चुनाव, इसकी सांद्रता और जोखिम (एक्सपोज़र) की अवधि सूक्ष्म जीव के जैविक गुणों और उस वातावरण पर निर्भर करती है जिसमें निस्संक्रामक रोगजनक सूक्ष्मजीवों के संपर्क में आएगा। उदाहरण के लिए, मर्क्यूरिक क्लोराइड, फिनोल और अल्कोहल प्रोटीन सब्सट्रेट्स (मवाद, रक्त, थूक) कीटाणुरहित करने के लिए अनुपयुक्त हैं, क्योंकि उनके प्रभाव में प्रोटीन का जमाव होता है, और जमा हुआ प्रोटीन कीटाणुनाशकों के प्रभाव से सूक्ष्मजीवों की रक्षा करता है।

सूक्ष्मजीवों के बीजाणु रूपों से संक्रमित सामग्री को कीटाणुरहित करते समय, क्लोरैमाइन का 5% घोल, सक्रिय क्लोरैमाइन का 1-2.5% घोल, फॉर्मेलिन का 5-10% घोल और अन्य पदार्थों का उपयोग किया जाता है।

कीटाणुशोधन, जो काम के दौरान पूरे दिन किया जाता है, को वर्तमान कहा जाता है, और काम के अंत में - अंतिम।

कीटाणुनाशक और उनसे कार्यशील समाधान तैयार करने के निर्देश. चूने का क्लोराइड एक सफेद, गांठदार पाउडर है जिसमें क्लोरीन की तीखी गंध होती है; यह पानी में पूरी तरह से नहीं घुलता है। जीवाणुनाशक प्रभाव सक्रिय क्लोरीन की सामग्री पर निर्भर करता है, जिसकी मात्रा 28 से 36% तक होती है। 25% से कम सक्रिय क्लोरीन युक्त क्लोरीन कीटाणुशोधन के लिए अनुपयुक्त है।

यदि अनुचित तरीके से संग्रहीत किया जाता है, तो ब्लीच विघटित हो जाता है और अपना कुछ सक्रिय क्लोरीन खो देता है। गर्मी, नमी, धूप से अपघटन को बढ़ावा मिलता है, इसलिए भंडारण करें विरंजित करनाइसे सूखी, अंधेरी जगह, कसकर बंद कंटेनर में रखा जाना चाहिए।

सूखी ब्लीच का उपयोग मानव और पशु स्राव कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है (200 ग्राम प्रति 1 लीटर मल और 10 ग्राम प्रति 1 लीटर मूत्र की दर से)।

मूल 10% स्पष्ट ब्लीच समाधान तैयार करना। 1 किलो सूखा ब्लीच लें, इसे इनेमल बाल्टी में रखें और पीस लें। फिर 10 लीटर की मात्रा में ठंडा पानी डालें, अच्छी तरह मिलाएँ, ढक्कन से ढकें और एक दिन के लिए ठंडी जगह पर छोड़ दें। इसके बाद, परिणामी 10% स्पष्ट समाधान को सावधानीपूर्वक सूखाया जाता है और धुंध की कई परतों के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है या एक मोटे कपड़े के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है। गहरे रंग की कांच की बोतलों में, लकड़ी के डाट से बंद करके, ठंडे स्थान पर 10 दिनों से अधिक न रखें। उपयोग से तुरंत पहले स्टॉक समाधान से आवश्यक एकाग्रता के कार्यशील समाधान तैयार किए जाते हैं। 0.2-10% स्पष्ट ब्लीच समाधान तैयार करने के लिए आवश्यक मूल समाधान की मात्रा तालिका में दी गई है। 5.

0.2 से 10% तक स्पष्ट ब्लीच समाधानों की सांद्रता का चयन कीटाणुरहित वस्तु की प्रकृति और रोगज़नक़ के प्रतिरोध के आधार पर किया जाता है।

क्लोरैमाइन सफेद या पीले रंग का एक क्रिस्टलीय पदार्थ है, जिसमें 24-28% सक्रिय क्लोरीन होता है। यह कमरे के तापमान पर पानी में अच्छी तरह से घुल जाता है, इसलिए कीटाणुशोधन से तुरंत पहले घोल तैयार किया जाता है। 0.2-10% क्लोरैमाइन घोल का प्रयोग करें। घोल की प्रतिशत सांद्रता और प्रति 1 और 10 लीटर ग्राम में क्लोरैमाइन की मात्रा के बीच संबंध तालिका में दिया गया है। 6.

ग्लास में क्लोरैमाइन घोलें या तामचीनी व्यंजन. ग्राउंड-इन स्टॉपर के साथ गहरे कांच के कंटेनरों में क्लोरैमाइन समाधानों को संग्रहीत करते समय, उनकी गतिविधि 15 दिनों तक बनी रहती है।

सक्रिय क्लोरैमाइन. क्लोरैमाइन के कीटाणुनाशक गुणों को इसमें 1:1 या 1:2 के अनुपात में एक एक्टिवेटर जोड़कर बढ़ाया जाता है। उत्प्रेरक के रूप में अमोनियम यौगिकों का उपयोग किया जाता है - अमोनियम क्लोराइड, सल्फेट, अमोनियम नाइट्रेट। सक्रिय क्लोरैमाइन का उपयोग 0.5, 1 और 2.5% की सांद्रता में किया जाता है। इन्हें उपयोग से तुरंत पहले तैयार किया जाता है। क्लोरैमाइन और अमोनियम नमक को अलग-अलग तौला जाता है। सबसे पहले, क्लोरैमाइन को पानी में घोला जाता है, और फिर एक एक्टिवेटर मिलाया जाता है।

पारंपरिक क्लोरैमाइन समाधानों की तुलना में सक्रिय क्लोरैमाइन समाधानों का लाभ यह है कि एक एक्टिवेटर जोड़ने से सक्रिय क्लोरीन की रिहाई तेज हो जाती है। इसलिए, दवा का न केवल सूक्ष्मजीवों के वानस्पतिक रूपों पर, बल्कि उनके बीजाणुओं पर भी हानिकारक प्रभाव पड़ता है। सक्रिय क्लोरैमाइन का उपयोग कम सांद्रता में और कम एक्सपोज़र के साथ किया जाता है।

फिनोल (कार्बोलिक एसिड) एक रंगहीन, सुई के आकार का क्रिस्टल है जिसमें तीखी, विशिष्ट गंध होती है। प्रकाश, हवा और नमी के संपर्क में आने पर, क्रिस्टल लाल-लाल रंग प्राप्त कर लेते हैं। सग्रह करना बंद बैंकअंधेरे कांच से बना और प्रकाश से सुरक्षित स्थान पर।

फिनोल पानी, अल्कोहल, ईथर और वसायुक्त तेलों में घुलनशील है। अत्यधिक आर्द्रताग्राही होने के कारण, यह पर्यावरण से नमी को अवशोषित करता है और तरल बन जाता है। तरल कार्बोलिक एसिड में 90% क्रिस्टलीय फिनोल और 10% पानी होता है।

तालिका में दी गई योजना के अनुसार क्रिस्टलीय फिनोल और तरल कार्बोलिक एसिड से तैयार कार्बोलिक एसिड के 3-5% जलीय घोल का उपयोग करें। 7. गर्म पानी (40-50°C) में घोलने पर फिनोल की सक्रियता बढ़ जाती है।

ध्यान! क्रिस्टलीय फिनोल या तरल कार्बोलिक एसिड, अगर यह त्वचा पर लग जाए, तो जलन पैदा कर सकता है, और उच्च सांद्रता में - गंभीर जलन हो सकती है। इसलिए, कार्बोलिक एसिड को बहुत सावधानी से संभालना चाहिए। समाधान तैयार करते समय, आपको रबर के दस्ताने पहनने चाहिए या एक अंतिम उपाय के रूप मेंअपने हाथों को वैसलीन से चिकना करें।

यदि कार्बोलिक एसिड आपकी त्वचा पर लग जाए, तो इसे तुरंत गर्म पानी और साबुन या 40° एथिल अल्कोहल से धो लें।

टिप्पणी। फिनोल का कीटाणुनाशक घोल तैयार करने के लिए तरल कार्बोलिक एसिड का उपयोग करना अधिक सुविधाजनक और सुरक्षित है।

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1. सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में कौन से कीटाणुनाशकों का उपयोग किया जाता है?

2. वर्णन करें उपस्थितिऔर ब्लीच, क्लोरैमाइन, फिनोल के मूल गुण।

3. सूक्ष्मजीवों के बीजाणु रूपों से संक्रमित सामग्री को कीटाणुरहित करने के लिए कीटाणुनाशकों के किस घोल का उपयोग किया जाता है?

व्यायाम

स्पष्टीकृत ब्लीच का 5% कार्यशील घोल 2 लीटर तैयार करें; 3% क्लोरैमाइन घोल का 500 मिली, 1% सक्रिय क्लोरैमाइन घोल का 300 मिली।

ध्यान! इससे पहले कि आप समाधान तैयार करना शुरू करें, गणना करें।

नसबंदी- बांझपन; किसी भी सामग्री में वनस्पति और बीजाणु रूपों में रोगजनक और गैर-रोगजनक सूक्ष्मजीवों का विनाश।

नसबंदी के लिए व्यंजन तैयार करना। प्रयोगशाला के कांच के बर्तनों को साफ-सुथरा धोना और कीटाणुरहित करना चाहिए। धोने के लिए साबुन या रासायनिक घोल का उपयोग करें डिटर्जेंट. कांच के बाद के लीचिंग से बचने के लिए नए व्यंजनों को हाइड्रोक्लोरिक एसिड के 1-2% घोल में पहले से उबाला जाता है। बहते पानी में धोए गए बर्तनों को आसुत जल से धोया जाता है और सुखाया जाता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल ट्यूब. शंक्वाकार, मैट फ्लास्क कपास-धुंध स्टॉपर्स के साथ बंद होते हैं, जिसमें धुंध की एक परत से ढके कपास ऊन के कसकर मुड़े हुए रोल होते हैं। बैक्टीरियोलॉजिकल टेस्ट ट्यूब के लिए बाहरी कैप के रूप में धातु स्टॉपर्स भी विकसित किए गए हैं। यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि उच्च तापमान पर कॉटन प्लग को स्टरलाइज़ करने से कॉटन वूल से ऐसे पदार्थ निकलते हैं जो ब्रूसेला जैसे कुछ संवेदनशील बैक्टीरिया के विकास को रोकते हैं।

पिपेट स्थापित करते समय, ऊपरी सिरे में एक कपास झाड़ू डालें। पाश्चर पिपेट में एक सीलबंद केशिका होनी चाहिए। प्रत्येक मापने वाले पिपेट को टोंटी से शुरू करके, उसकी पूरी लंबाई के साथ पेचदार तरीके से, 4-5 सेमी चौड़ी कागज की एक लंबी पट्टी में लपेटा जाता है। पाश्चर पिपेट को कागज में लपेटा जाता है, प्रत्येक 10-20 टुकड़े, टेस्ट ट्यूब - 15-20 टुकड़े प्रत्येक। नसबंदी से पहले और बाद में सभी प्रकार के पिपेट को विशेष धातु के डिब्बों में संग्रहित करना बेहतर होता है। फ्लास्क पर लगे स्टॉपर्स अतिरिक्त रूप से पेपर कैप से ढके होते हैं।

स्टरलाइज़ेशन से पहले, साफ, एकत्रित पेट्री डिश को 3 से 4 टुकड़ों में कागज में लपेटा जाता है। नसबंदी के बाद, कागज रोगाणुहीन कांच के बर्तनों को माइक्रोफ्लोरा द्वारा संदूषण से बचाता है।

स्टरलाइज़ेशन से पहले, हवा के संचार को सुनिश्चित करने के लिए बर्तनों को सुखाने वाले कैबिनेट में बहुत कसकर नहीं रखा जाता है, और इस बात का ध्यान रखा जाता है कि तापमान 180 डिग्री सेल्सियस से अधिक न हो, क्योंकि उच्च तापमान पर कागज और रूई जल जाएगी। स्टरलाइज़ेशन पूरा होने के बाद, तब तक सुखाने वाली कैबिनेट नहीं खोली जाती है। जब तक इसमें तापमान 70-80?C तक न गिर जाए, क्योंकि तेज़ गिरावटतापमान के कारण कांच टूट सकता है।

यदि बर्तनों का उद्देश्य कम से कम 1 एटीएम के दबाव में आटोक्लेविंग द्वारा उनमें पोषक तत्व मीडिया को स्टरलाइज़ करना है, तो वे पूर्व-स्टेरलाइज़ नहीं हैं। मीडिया को बहती भाप से या आटोक्लेव में 0.5 एटीएम से अधिक के दबाव में स्टरलाइज़ करते समय। बाँझ कंटेनरों का उपयोग किया जाना चाहिए।

शुष्क गर्म हवा से बंध्याकरण। इस विधि का उपयोग साफ कांच के बर्तनों को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। इस प्रयोजन के लिए, एक पाश्चर ओवन का उपयोग किया जाता है - दोहरी दीवारों वाला एक विशेष सुखाने वाला कैबिनेट। बाहर गर्मी-रोधी सामग्री से सुसज्जित है। सबसे ऊपर एक थर्मामीटर है. ताप-रोधी आवरण और निचले भाग में आंतरिक धातु आवरण के बीच एक स्वचालित विद्युत ताप तत्व रखा जाता है। जब सुखाने वाली कैबिनेट चालू होती है, तो उसके अंदर की हवा गर्म हो जाती है। एक बार निर्धारित तापमान पर पहुंचने के बाद, नसबंदी का प्रारंभ समय नोट किया जाता है। नसबंदी मोड: 155-160 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर - 2 घंटे के लिए एक्सपोज़र, 165-170 डिग्री सेल्सियस पर - 1-1.5 घंटे, 180 डिग्री सेल्सियस पर - 1 घंटा। नसबंदी समय के बाद, हीटिंग बंद कर दिया जाता है।

आटोक्लेविंग। यह उच्च तापमान के साथ संयुक्त दबाव में भाप नसबंदी है विशेष उपकरण- आटोक्लेव. जब संतृप्त भाप किसी ठंडी वस्तु का सामना करती है, तो भाप पानी में संघनित हो जाती है, जिससे बड़ी मात्रा में गर्मी निकलती है। इसके अलावा, भाप की मात्रा कम हो जाती है, जिससे निष्फल की जा रही सामग्री के आंतरिक भागों में इसके प्रवेश की सुविधा मिलती है। एक शर्त वास्तव में संतृप्त भाप की आपूर्ति है, ताकि किसी ठंडी वस्तु के साथ इसके संपर्क से तत्काल संघनन और ताप हो सके। उद्योग ऊर्ध्वाधर और क्षैतिज आटोक्लेव का उत्पादन करता है।

ऊर्ध्वाधर आटोक्लेव एक दोहरी दीवार वाली बेलनाकार धातु की कड़ाही है, जिसे ढक्कन से सील किया जाता है। एक फ़नल वाले विशेष नल के माध्यम से दीवारों के बीच एक निश्चित स्तर तक पानी डाला जाता है। बॉयलर की आंतरिक दीवार ऊपरी हिस्से में छेद और निचले हिस्से में एक नल से सुसज्जित है, जिसके माध्यम से पानी गर्म होने पर भाप बॉयलर से हवा को विस्थापित करती है। आटोक्लेव के शीर्ष पर एक धातु सुरक्षात्मक फ्रेम रखा गया है, और इसके और आटोक्लेव के बीच खाली जगह होनी चाहिए। आटोक्लेव को विद्युत नेटवर्क से जोड़कर गर्म किया जाता है।

आटोक्लेव में स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री भरी हुई है, ढक्कन और नल जिसके माध्यम से पानी डाला गया था, बंद कर दिया गया है, और नीचे का नल अस्थायी रूप से खुला छोड़ दिया गया है। आटोक्लेव की दीवारों के बीच गर्म पानी उबलता है, जिसके परिणामस्वरूप भाप ऊपर उठती है और भीतरी दीवार के ऊपरी छिद्रों से होकर बॉयलर में गुजरती है, निचले खुले नल के माध्यम से हवा को बाहर धकेलती है। जब सारी हवा विस्थापित हो जाती है और भाप एक समान धारा में बाहर आने लगती है, तो निचला वाल्व बंद हो जाता है। परिणामस्वरूप, आटोक्लेव के अंदर भाप का दबाव बढ़ जाता है। नसबंदी की शुरुआत उस क्षण को माना जाता है जब दबाव किसी दिए गए मान (दबाव गेज के अनुसार) तक पहुंच जाता है। नसबंदी के दौरान गर्मी को समायोजित किया जाता है, जिससे भाप का दबाव समान स्तर पर बना रहता है। यदि आटोक्लेव के अंदर दबाव अत्यधिक बढ़ जाता है, तो एक सुरक्षा वाल्व होता है जिसके माध्यम से अतिरिक्त भाप स्वचालित रूप से निकल जाती है।

जैसे-जैसे भाप का दबाव बढ़ता है, आटोक्लेव में तापमान तदनुसार बढ़ता जाता है।

दबाव नापने का यंत्र परिवेशी वायुमंडलीय दबाव (760 मिमी एचजी) को ध्यान में रखे बिना भाप के दबाव को दर्शाता है। नसबंदी का समय समाप्त होने के बाद, आटोक्लेव बंद कर दिया जाता है। ठंडा होने के बाद, जब दबाव नापने का यंत्र की रीडिंग शून्य हो, तो भाप छोड़ने के लिए वाल्व खोलें।

क्षैतिज आटोक्लेव डिज़ाइन में ऊर्ध्वाधर आटोक्लेव से भिन्न होता है, लेकिन इसका संचालन सिद्धांत समान होता है।

वायरोलॉजिकल नसबंदी पैथोलॉजिकल जानवर

रोग संबंधी सामग्री को प्रयोगशाला में भेजते समय भरे जाने वाले प्रपत्रों के नमूने

पाश्चर ओवन (सुखाने वाले ओवन) में सूखी गर्मी या गर्म हवा के साथ नसबंदी की जाती है। पाश्चर ओवन एक दोहरी दीवार वाली कैबिनेट है जो गर्मी प्रतिरोधी सामग्री - धातु और एस्बेस्टस से बनी होती है। गैस बर्नर या इलेक्ट्रिक हीटिंग उपकरणों का उपयोग करके कैबिनेट को गर्म करें। आवश्यक तापमान सुनिश्चित करने के लिए विद्युत रूप से गर्म अलमारियाँ नियामकों से सुसज्जित हैं। तापमान को नियंत्रित करने के लिए कैबिनेट की ऊपरी दीवार के छेद में एक थर्मामीटर डाला जाता है।

सूखी गर्मी का उपयोग प्रयोगशाला के कांच के बर्तनों को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। स्टरलाइज़ेशन के लिए तैयार किए गए बर्तनों को स्टरलाइज़ की जा रही सामग्री की एक समान और विश्वसनीय हीटिंग सुनिश्चित करने के लिए ओवन में लोड किया जाता है। कैबिनेट के दरवाज़े को कसकर बंद करें, हीटिंग डिवाइस चालू करें, तापमान को 160-165 डिग्री सेल्सियस पर लाएं और 1 घंटे के लिए इस तापमान पर स्टरलाइज़ करें। स्टरलाइज़ेशन के अंत में, हीटिंग बंद कर दें, लेकिन कैबिनेट का दरवाज़ा तब तक न खोलें जब तक ओवन ठंडा हो गया है; अन्यथा, कैबिनेट में प्रवेश करने वाली ठंडी हवा गर्म कुकवेयर में दरारें पैदा कर सकती है।

पाश्चर ओवन में स्टरलाइज़ेशन अलग-अलग तापमान और एक्सपोज़र (नसबंदी समय) पर किया जा सकता है (तालिका 1)।

तालिका 1. बंध्याकरण मोड

तरल पदार्थ (पोषक तत्व मीडिया, आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान, आदि), रबर और सिंथेटिक सामग्री से बनी वस्तुओं को सूखी गर्मी से निष्फल नहीं किया जा सकता है, क्योंकि तरल पदार्थ उबल कर बाहर निकल जाते हैं, और रबर और सिंथेटिक सामग्री पिघल जाती है।

पाश्चर ओवन में नसबंदी को नियंत्रित करने के लिए, रेशम के धागों को बीजाणु बनाने वाले बैक्टीरिया के कल्चर में गीला किया जाता है, सुखाया जाता है, एक बाँझ पेट्री डिश में रखा जाता है और पाश्चर ओवन में रखा जाता है। 1 घंटे के लिए 165 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर स्टरलाइज़ेशन किया जाता है (नियंत्रण के लिए, कुछ धागों को कमरे के तापमान पर छोड़ दिया जाता है)। फिर निष्फल और नियंत्रण धागों को पेट्री डिश में अगर की सतह पर रखा जाता है या शोरबा के साथ टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है और 2 दिनों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोस्टेट में रखा जाता है। पाश्चर ओवन के उचित संचालन के साथ, पोषक तत्व मीडिया वाले टेस्ट ट्यूब या बर्तनों में कोई वृद्धि नहीं होगी जिसमें निष्फल धागे रखे गए थे, क्योंकि जीवाणु बीजाणु मर जाएंगे, जबकि धागे पर जीवाणु बीजाणु जो निष्फल नहीं थे (नियंत्रण) पोषक तत्व पर अंकुरित होंगे मीडिया विकास पर ध्यान दिया जाएगा.

पाश्चर ओवन के अंदर का तापमान निर्धारित करने के लिए, आप सुक्रोज या दानेदार चीनी का उपयोग कर सकते हैं, जो 165-170 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर कारमेलाइज़ होता है।

पाश्चर ओवन में नसबंदी के लिए प्रयोगशाला कांच के बर्तन तैयार करना. नसबंदी से पहले, प्रयोगशाला के कांच के बर्तन (पेट्री डिश, स्नातक और पाश्चर पिपेट, शीशियां, फ्लास्क, टेस्ट ट्यूब) को अच्छी तरह से धोया जाना चाहिए, सुखाया जाना चाहिए और कागज में लपेटा जाना चाहिए, अन्यथा नसबंदी के बाद वे फिर से वायु बैक्टीरिया से दूषित हो सकते हैं।

पेट्री डिश को एक समय में एक या अधिक टुकड़ों में कागज में लपेटा जाता है या विशेष धातु के बक्सों में रखा जाता है।

परीक्षण सामग्री को मुंह में प्रवेश करने से रोकने के लिए पिपेट के ऊपरी सिरों में रुई के फाहे डाले जाते हैं। स्नातक पिपेट को 4-5 सेमी चौड़ी कागज की लंबी पट्टियों में लपेटा जाता है। लपेटे गए पिपेट का आयतन कागज पर अंकित होता है। पेंसिल केस में, स्नातक किए गए पिपेट को कागज में अतिरिक्त लपेटे बिना निष्फल किया जाता है।

टिप्पणी. यदि पिपेट पर ग्रेजुएशन खराब दिखाई देता है, तो इसे नसबंदी से पहले बहाल कर दिया जाता है। पिपेट पर ऑयल पेंट लगाया जाता है और, पेंट को सूखने दिए बिना, कपड़े का उपयोग करके बेरियम सल्फेट पाउडर को इसमें रगड़ा जाता है। इसके बाद कपड़े से अतिरिक्त पेंट हटा दें, जो केवल ग्रेजुएशन नॉच में ही रह जाता है। इस तरह से उपचारित पिपेट को धोना चाहिए।

पाश्चर पिपेट के नुकीले सिरों को बर्नर की लौ में सील कर दिया जाता है और एक बार में 3-5 टुकड़ों में कागज में लपेट दिया जाता है। पाश्चर पिपेट को सावधानी से लपेटा जाना चाहिए ताकि केशिकाओं के सीलबंद सिरे टूट न जाएं।

शीशियाँ, फ्लास्क, टेस्ट ट्यूब कपास-धुंध स्टॉपर्स के साथ बंद हैं। कॉर्क को बर्तन की गर्दन में उसकी लंबाई का 2/3 भाग फिट होना चाहिए, बहुत तंग नहीं, लेकिन ढीला भी नहीं। प्रत्येक बर्तन (टेस्ट ट्यूब को छोड़कर) पर स्टॉपर्स के ऊपर एक पेपर कैप लगाई जाती है। टेस्ट ट्यूबों को 5-50 के समूह में एक साथ बांधा जाता है और कागज से लपेटा जाता है।

टिप्पणी. उच्च तापमान पर, कागज जिसमें कप और पिपेट लपेटे जाते हैं, और रूई पीली हो जाती है और जल भी सकती है, इसलिए प्रयोगशाला द्वारा प्राप्त प्रत्येक नए प्रकार के कागज का स्वीकृत तापमान स्थितियों पर परीक्षण किया जाना चाहिए।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

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व्यायाम

स्टरलाइज़ेशन के लिए पेट्री डिश, ग्रेजुएटेड पिपेट, पाश्चर पिपेट, टेस्ट ट्यूब, फ्लास्क और शीशियाँ तैयार करें।