सुखाने वाले ओवन का ऑपरेटिंग मोड। नसबंदी के तरीके और तरीके पराबैंगनी विकिरण द्वारा नसबंदी

सूक्ष्मजीवों का जीवन पर्यावरणीय परिस्थितियों पर बहुत अधिक निर्भर है। सूक्ष्मजीवों को प्रभावित करने वाले सभी पर्यावरणीय कारकों को तीन समूहों में विभाजित किया जा सकता है: भौतिक, रासायनिक और जैविक, जिसका लाभकारी या हानिकारक प्रभाव कारक की प्रकृति और सूक्ष्मजीव के गुणों दोनों पर निर्भर करता है।

भौतिक कारक

भौतिक कारकों से सबसे बड़ा प्रभावसूक्ष्मजीवों का विकास तापमान, शुष्कन, दीप्तिमान ऊर्जा और अल्ट्रासाउंड से प्रभावित होता है।

तापमान. प्रत्येक सूक्ष्मजीव की जीवन गतिविधि कुछ तापमान सीमाओं द्वारा सीमित होती है। यह तापमान निर्भरता आमतौर पर तीन मुख्य बिंदुओं द्वारा व्यक्त की जाती है: न्यूनतम - वह तापमान जिसके नीचे माइक्रोबियल कोशिकाओं का प्रजनन रुक जाता है; इष्टतम - सूक्ष्मजीवों की वृद्धि और विकास के लिए सर्वोत्तम तापमान; अधिकतम - वह तापमान जिसके ऊपर कोशिकाओं की महत्वपूर्ण गतिविधि कमजोर हो जाती है या रुक जाती है। इष्टतम तापमानआमतौर पर तापमान की स्थिति से मेल खाता है प्रकृतिक वातावरणएक वास।

तापमान के संबंध में सभी सूक्ष्मजीवों को साइकोफाइल, मेसोफाइल और थर्मोफाइल में विभाजित किया गया है।

साइक्रोफाइल्स (ग्रीक साइक्रोस से - ठंडा, फिलियो - प्यार), या ठंड से प्यार करने वाले सूक्ष्मजीव, अपेक्षाकृत कम तापमान पर बढ़ते हैं: न्यूनतम तापमान- 0 डिग्री सेल्सियस, इष्टतम - 10-20 डिग्री सेल्सियस, अधिकतम - 30 डिग्री सेल्सियस। इस समूह में रहने वाले सूक्ष्मजीव शामिल हैं उत्तरी समुद्रऔर महासागर, मिट्टी, अपशिष्ट. इसमें चमकदार और लौह बैक्टीरिया के साथ-साथ सूक्ष्म जीव भी शामिल हैं जो ठंड (0 डिग्री सेल्सियस से नीचे) में भोजन को खराब करते हैं।

मेसोफाइल्स (ग्रीक मेसोस से - मध्य) सबसे व्यापक समूह हैं, जिनमें अधिकांश सैप्रोफाइट्स और सभी रोगजनक सूक्ष्मजीव शामिल हैं। उनके लिए इष्टतम तापमान 28-37°C, न्यूनतम 10°C, अधिकतम 45°C है।

थर्मोफाइल (ग्रीक टर्मोस से - गर्मी, गर्मी), या गर्मी-प्रेमी सूक्ष्मजीव, 55 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान पर विकसित होते हैं, उनके लिए न्यूनतम तापमान 30 डिग्री सेल्सियस, इष्टतम 50-60 डिग्री सेल्सियस और अधिकतम 70 डिग्री सेल्सियस होता है। -75 डिग्री सेल्सियस। वे गर्म खनिज झरनों, मिट्टी की सतह परत, स्व-हीटिंग सब्सट्रेट्स (खाद, घास, अनाज) और मनुष्यों और जानवरों की आंतों में पाए जाते हैं। थर्मोफाइल्स के बीच कई बीजाणु रूप हैं।

उच्च और निम्न तापमान का सूक्ष्मजीवों पर अलग-अलग प्रभाव पड़ता है। कुछ उच्च तापमान के प्रति अधिक संवेदनशील होते हैं। इसके अलावा, अधिकतम तापमान जितना अधिक होता है, माइक्रोबियल कोशिकाओं की मृत्यु उतनी ही तेजी से होती है, जो सेल प्रोटीन के विकृतीकरण (जमावट) के कारण होता है।

मेसोफिलिक बैक्टीरिया के वानस्पतिक रूप 60°C के तापमान पर 30-60 मिनट के लिए और 80-100°C पर 1-2 मिनट के बाद मर जाते हैं। जीवाणु बीजाणु उच्च तापमान के प्रति अधिक प्रतिरोधी होते हैं। उदाहरण के लिए, एंथ्रेक्स बेसिली के बीजाणु 10-20 मिनट तक उबलने का सामना कर सकते हैं, और क्लोस्ट्रीडियम बोटुलिज़्म के बीजाणु - 6 घंटे तक। बीजाणु सहित सभी सूक्ष्मजीव, एक घंटे के लिए 165-170 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर मर जाते हैं (सूखी गर्मी में) ओवन) या 30 मिनट के लिए 1 एटीएम (एक आटोक्लेव में) दबाव में भाप के संपर्क में आने पर।

सूक्ष्मजीवों पर उच्च तापमान का प्रभाव नसबंदी का आधार है - सूक्ष्मजीवों और उनके बीजाणुओं से विभिन्न वस्तुओं की पूर्ण मुक्ति (नीचे देखें)।

कई सूक्ष्मजीव कम तापमान के प्रति बेहद प्रतिरोधी होते हैं। साल्मोनेला टाइफस और विब्रियो कॉलेरी बर्फ में लंबे समय तक जीवित रहते हैं। कुछ सूक्ष्मजीव तरल हवा के तापमान (-190°C) पर व्यवहार्य रहते हैं, और जीवाणु बीजाणु -250°C तक तापमान का सामना कर सकते हैं।

केवल व्यक्तिगत प्रजातिरोगजनक बैक्टीरिया कम तापमान के प्रति संवेदनशील होते हैं (उदाहरण के लिए, बोर्डेटेला पर्टुसिस और पैरापर्टुसिस, निसेरिया मेनिंगोकोकस, आदि)। सूक्ष्मजीवों के इन गुणों को ध्यान में रखा जाता है प्रयोगशाला निदानऔर अध्ययन के तहत सामग्री को परिवहन करते समय, इसे प्रशीतन से संरक्षित प्रयोगशाला में पहुंचाया जाता है।

कम तापमान की क्रिया सड़न और किण्वन प्रक्रियाओं को रोकती है, जिसका व्यापक रूप से संरक्षण के लिए उपयोग किया जाता है खाद्य उत्पादप्रशीतन इकाइयों, तहखानों, ग्लेशियरों में। 0 डिग्री सेल्सियस से नीचे के तापमान पर, रोगाणु निलंबित एनीमेशन की स्थिति में आ जाते हैं - चयापचय प्रक्रियाएं धीमी हो जाती हैं और प्रजनन रुक जाता है। हालाँकि, यदि उपयुक्त हैं तापमान की स्थितिऔर पोषक माध्यम, माइक्रोबियल कोशिकाओं के महत्वपूर्ण कार्यों को बहाल किया जाता है। सूक्ष्मजीवों की इस संपत्ति का उपयोग कम तापमान पर माइक्रोबियल संस्कृतियों को संरक्षित करने के लिए प्रयोगशाला अभ्यास में किया जाता है। उच्च और निम्न तापमान (ठंड और पिघलना) में तेजी से बदलाव का भी सूक्ष्मजीवों पर हानिकारक प्रभाव पड़ता है - इससे कोशिका झिल्ली टूट जाती है।

सुखाने. सूक्ष्मजीवों के सामान्य कामकाज के लिए पानी आवश्यक है। सूखने से साइटोप्लाज्म का निर्जलीकरण होता है, साइटोप्लाज्मिक झिल्ली की अखंडता में व्यवधान होता है, जिसके परिणामस्वरूप माइक्रोबियल कोशिकाओं का पोषण बाधित होता है और उनकी मृत्यु हो जाती है।

सुखाने के प्रभाव में विभिन्न प्रकार के सूक्ष्मजीवों की मृत्यु का समय काफी भिन्न होता है। उदाहरण के लिए, रोगजनक निसेरिया (मेनिंगोकोकी, गोनोकोकी), लेप्टोस्पाइरा, ट्रेपोनेमा पैलिडम और अन्य कुछ मिनटों के बाद सूखने पर मर जाते हैं। विब्रियो कॉलेरी 2 दिनों तक, साल्मोनेला टाइफाइड - 70 दिन, और माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस - 90 दिनों तक सूखने का सामना कर सकता है। लेकिन तपेदिक के रोगियों का सूखा थूक, जिसमें रोगजनकों को सूखे प्रोटीन आवरण द्वारा संरक्षित किया जाता है, 10 महीने तक संक्रामक रहता है।

बीजाणु विशेष रूप से सूखने के साथ-साथ अन्य पर्यावरणीय प्रभावों के प्रति प्रतिरोधी होते हैं। एंथ्रेक्स बेसिली के बीजाणु 10 वर्षों तक अंकुरित होने की क्षमता बनाए रखते हैं, और मोल्ड कवक के बीजाणु 20 वर्षों तक अंकुरित होने की क्षमता बनाए रखते हैं।

सूक्ष्मजीवों पर सूखने के प्रतिकूल प्रभाव का उपयोग लंबे समय से सब्जियों, फलों, मांस, मछली आदि को संरक्षित करने के लिए किया जाता रहा है औषधीय जड़ी बूटियाँ. साथ ही, खुद को परिस्थितियों में पाया उच्च आर्द्रता, ऐसे उत्पाद माइक्रोबियल गतिविधि की बहाली के कारण जल्दी खराब हो जाते हैं।

फ़्रीज़-सुखाने की विधि का उपयोग सूक्ष्मजीवों, टीकों और अन्य जैविक तैयारियों की संस्कृतियों के भंडारण के लिए व्यापक रूप से किया जाता है। विधि का सार यह है कि सूक्ष्मजीवों या तैयारियों को पहले जमे हुए किया जाता है और फिर वैक्यूम परिस्थितियों में सुखाया जाता है। इस मामले में, माइक्रोबियल कोशिकाएं निलंबित एनीमेशन की स्थिति में प्रवेश करती हैं और कई महीनों या वर्षों तक अपने जैविक गुणों को बरकरार रखती हैं।

दीप्तिमान ऊर्जा. प्रकृति में, सूक्ष्मजीव लगातार संपर्क में रहते हैं सौर विकिरण. प्रकाश संश्लेषक बैक्टीरिया (हरे और बैंगनी सल्फर बैक्टीरिया) को छोड़कर, सीधी धूप कुछ ही घंटों में कई सूक्ष्मजीवों की मृत्यु का कारण बनती है। सूर्य के प्रकाश के हानिकारक प्रभाव पराबैंगनी किरणों (यूवी किरणों) की गतिविधि के कारण होते हैं। वे कोशिका एंजाइमों को निष्क्रिय कर देते हैं और डीएनए को नुकसान पहुंचाते हैं। सैप्रोफाइट्स की तुलना में रोगजनक बैक्टीरिया यूवी किरणों की क्रिया के प्रति अधिक संवेदनशील होते हैं। इसलिए, माइक्रोबियल कल्चर को प्रयोगशाला में अंधेरे में संग्रहित करना बेहतर है। इस संबंध में, बुचनर का अनुभव प्रदर्शनात्मक है।

के साथ एक पेट्री डिश में पतली परतअगर का उत्पादन किसी भी जीवाणु संवर्धन के प्रचुर मात्रा में टीकाकरण से होता है। काले कागज से काटे गए अक्षरों को बीज वाले कप की बाहरी सतह पर चिपका दिया जाता है, जिससे उदाहरण के लिए, "टाइफस" शब्द बनता है। कप, जिसका निचला भाग ऊपर की ओर है, सीधा विकिरणित है सूरज की किरणें 1 घंटे के लिए। फिर कागजात हटा दिए जाते हैं, और कप को 37 डिग्री सेल्सियस पर एक दिन के लिए थर्मोस्टेट में रखा जाता है। बैक्टीरिया की वृद्धि केवल अगर के उन स्थानों पर देखी जाती है जो चिपके अक्षरों द्वारा यूवी किरणों से सुरक्षित थे। आगर का शेष भाग पारदर्शी रहता है, अर्थात सूक्ष्मजीवों की वृद्धि नहीं होती है (चित्र 11)।

बाहरी वातावरण के स्वास्थ्य को बेहतर बनाने में प्राकृतिक कारक के रूप में सूर्य के प्रकाश का महत्व बहुत अधिक है। यह प्राकृतिक जलाशयों की हवा, पानी और मिट्टी की ऊपरी परतों को रोगजनक बैक्टीरिया से मुक्त करता है।

यूवी किरणों के जीवाणुनाशक (बैक्टीरिया को नष्ट करने वाले) प्रभाव का उपयोग हवा को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है बंद परिसर(ऑपरेटिंग रूम, ड्रेसिंग रूम, बक्से, आदि), साथ ही पानी और दूध। इन किरणों का स्रोत दीपक हैं पराबैंगनी विकिरण, जीवाणुनाशक लैंप।

अन्य प्रकार की दीप्तिमान ऊर्जा - एक्स-रे, α-, β-, γ-किरणें केवल 440-280 J/kg के क्रम में बड़ी खुराक में सूक्ष्मजीवों पर हानिकारक प्रभाव डालती हैं। रोगाणुओं की मृत्यु परमाणु संरचनाओं और सेलुलर डीएनए के विनाश के कारण होती है। विकिरण की कम खुराक माइक्रोबियल कोशिकाओं के विकास को उत्तेजित करती है। उच्चतर जीवों की तुलना में सूक्ष्मजीव रेडियोधर्मी विकिरण के प्रति अधिक प्रतिरोधी होते हैं। थियोनिक बैक्टीरिया को यूरेनियम अयस्क भंडार में रहने के लिए जाना जाता है। पानी में बैक्टीरिया पाए गए परमाणु रिएक्टर 20-30 kJ/kg की आयनकारी विकिरण की सांद्रता पर।

आयनकारी विकिरण के जीवाणुनाशक प्रभाव का उपयोग कुछ खाद्य उत्पादों के संरक्षण, जैविक तैयारियों (सीरा, टीके, आदि) की नसबंदी के लिए किया जाता है, जबकि निष्फल सामग्री के गुण नहीं बदलते हैं।

हाल के वर्षों में, डिस्पोजेबल उत्पादों जैसे पॉलीस्टाइरीन पिपेट, पेट्री डिश, सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं के लिए कुएं, सीरिंज, साथ ही सिवनी सामग्री - कैटगट, आदि को विकिरण विधि का उपयोग करके निष्फल किया गया है।

अल्ट्रासाउंडमाइक्रोबियल कोशिकाओं को महत्वपूर्ण क्षति पहुंचाता है। अल्ट्रासाउंड के प्रभाव में, साइटोप्लाज्म के तरल वातावरण में स्थित गैसें सक्रिय हो जाती हैं, और ए उच्च दबाव(10000 एटीएम तक)। इससे कोशिका झिल्ली टूट जाती है और कोशिका मृत्यु हो जाती है। अल्ट्रासाउंड का उपयोग खाद्य उत्पादों (दूध, फलों के रस) को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। पेय जल.

उच्च दबाव. बैक्टीरिया और विशेषकर उनके बीजाणु यांत्रिक दबाव के प्रति प्रतिरोधी होते हैं। प्रकृति में ऐसे बैक्टीरिया पाए जाते हैं जो समुद्र और महासागरों में 100 से 900 एटीएम के दबाव में 1000-10000 मीटर की गहराई पर रहते हैं। कुछ प्रकार के बैक्टीरिया 3000-5000 एटीएम तक के दबाव का सामना कर सकते हैं, और जीवाणु बीजाणु - 20,000 एटीएम तक भी।

रासायनिक कारक

सूक्ष्मजीवों पर रसायनों का प्रभाव रासायनिक यौगिक की प्रकृति, उसकी सांद्रता और माइक्रोबियल कोशिकाओं के संपर्क की अवधि के आधार पर भिन्न होता है। सांद्रता के आधार पर, एक रासायनिक पदार्थ पोषण का स्रोत हो सकता है या सूक्ष्मजीवों की महत्वपूर्ण गतिविधि पर निरोधात्मक प्रभाव डाल सकता है। उदाहरण के लिए, 0.5-2% ग्लूकोज समाधान रोगाणुओं के विकास को उत्तेजित करता है, और 20-40% ग्लूकोज समाधान माइक्रोबियल कोशिकाओं के प्रसार को रोकता है।

अनेक रासायनिक यौगिक, जिनका सूक्ष्मजीवों पर हानिकारक प्रभाव पड़ता है, चिकित्सा पद्धति में कीटाणुनाशक और एंटीसेप्टिक्स के रूप में उपयोग किया जाता है।

कीटाणुशोधन के लिए उपयोग किए जाने वाले रसायनों को कीटाणुनाशक कहा जाता है। कीटाणुशोधन से तात्पर्य विभिन्न पर्यावरणीय वस्तुओं में रोगजनक सूक्ष्मजीवों को नष्ट करने के उपायों से है। निस्संक्रामक में हैलाइड यौगिक, फिनोल और उनके डेरिवेटिव, भारी धातुओं के लवण, कुछ एसिड, क्षार, अल्कोहल आदि शामिल हैं। वे एक निश्चित समय के लिए इष्टतम सांद्रता में कार्य करके माइक्रोबियल कोशिकाओं की मृत्यु का कारण बनते हैं। कई कीटाणुनाशक मैक्रोऑर्गेनिज्म के ऊतकों पर हानिकारक प्रभाव डालते हैं।

इन्हें एंटीसेप्टिक्स कहा जाता है रासायनिक पदार्थ, जो सूक्ष्मजीवों की मृत्यु का कारण बन सकता है या उनके विकास और प्रजनन को रोक सकता है। इनका उपयोग चिकित्सीय उद्देश्यों (कीमोथेरेपी) के साथ-साथ घावों, त्वचा और मानव श्लेष्म झिल्ली के कीटाणुशोधन के लिए किया जाता है। हाइड्रोजन पेरोक्साइड, आयोडीन के अल्कोहल समाधान, ब्रिलियंट ग्रीन, पोटेशियम परमैंगनेट के समाधान आदि में एंटीसेप्टिक गुण होते हैं। कुछ एंटीसेप्टिक पदार्थ (एसिटिक, सल्फ्यूरस, बेंजोइक एसिड, आदि) खुराक में जो मनुष्यों के लिए हानिरहित होते हैं, खाद्य संरक्षण के लिए उपयोग किए जाते हैं।

क्रिया के तंत्र के अनुसार, रोगाणुरोधी गतिविधि वाले रासायनिक पदार्थों को कई समूहों में विभाजित किया जा सकता है।

1. सर्फेक्टेंट (फैटी एसिड, साबुन और अन्य डिटर्जेंट) सतह के तनाव में कमी का कारण बनते हैं, जिससे सूक्ष्मजीवों की कोशिका दीवार और साइटोप्लाज्मिक झिल्ली के कामकाज में व्यवधान होता है।

2. फिनोल, क्रेसोल और उनके डेरिवेटिव माइक्रोबियल प्रोटीन के जमाव का कारण बनते हैं। इनका उपयोग सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास और संक्रामक रोग अस्पतालों में संक्रामक सामग्री को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है।

3. ऑक्सीकरण एजेंट, माइक्रोबियल प्रोटीन के साथ बातचीत करके, एंजाइमों की गतिविधि को बाधित करते हैं और प्रोटीन विकृतीकरण का कारण बनते हैं। सक्रिय ऑक्सीकरण एजेंट क्लोरीन और ओजोन हैं, जिनका उपयोग पीने के पानी को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। कीटाणुशोधन उद्देश्यों के लिए क्लोरीन डेरिवेटिव (ब्लीच, क्लोरैमाइन) का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। हाइड्रोजन पेरोक्साइड, पोटेशियम परमैंगनेट, आयोडीन आदि में ऑक्सीकरण गुण होते हैं।

4. कीटाणुशोधन के लिए फॉर्मेल्डिहाइड का उपयोग 40% घोल (फॉर्मेलिन) के रूप में किया जाता है। यह सूक्ष्मजीवों के वानस्पतिक और बीजाणु रूपों को मारता है। फॉर्मेलिन माइक्रोबियल सेल प्रोटीन के अमीनो समूहों को अवरुद्ध करता है और उनके विकृतीकरण का कारण बनता है।

5. भारी धातुओं (पारा, सीसा, जस्ता, सोना, आदि) के लवण माइक्रोबियल कोशिका के प्रोटीन को जमा देते हैं, जिससे उनकी मृत्यु हो जाती है। कई धातुएं (चांदी, सोना, पारा, आदि) नगण्य सांद्रता में सूक्ष्मजीवों पर जीवाणुनाशक प्रभाव डालती हैं। इस संपत्ति को ऑलिगोडायनामिक क्रिया कहा जाता है (लैटिन ऑलिगोस से - छोटा, डायनामिस - ताकत)। यह सिद्ध हो चुका है कि चाँदी के बर्तनों में रखा पानी चाँदी के आयनों के जीवाणुनाशक प्रभाव के कारण सड़ता नहीं है। ब्लेनोरिया की रोकथाम के लिए * नवजात शिशु कब कासिल्वर नाइट्रेट का 1% घोल इस्तेमाल किया गया। कार्बनिक सिल्वर यौगिकों (प्रोटार्गोल, कॉलरगोल) के कोलाइडल घोल का उपयोग स्थानीय एंटीसेप्टिक्स के रूप में भी किया जाता है।

* (ब्लेनोरिया गोनोकोकी के कारण आंख के कंजंक्टिवा की सूजन है।)

पारा की तैयारी में एक मजबूत रोगाणुरोधी प्रभाव होता है। प्राचीन काल से, कीटाणुशोधन के लिए मरकरी बाइक्लोराइड, या मरक्यूरिक क्लोराइड (1:1000 के तनुकरण पर) का उपयोग किया जाता रहा है। हालाँकि, उसके पास है विषैला प्रभावमैक्रोऑर्गेनिज्म के ऊतक पर और इसका उपयोग सीमित है।

6. रंगों (डायमंड ग्रीन, रिवेनॉल आदि) में बैक्टीरिया की वृद्धि को रोकने का गुण होता है। कई रंगों के घोल का उपयोग एंटीसेप्टिक्स के रूप में किया जाता है, और माइक्रोफ्लोरा के विकास को रोकने के लिए कुछ पोषक तत्व मीडिया में भी मिलाया जाता है।

सूक्ष्मजीवों पर कई भौतिक और रासायनिक कारकों का विनाशकारी प्रभाव सड़न रोकनेवाला और एंटीसेप्टिक तरीकों का आधार बनता है, जिनका व्यापक रूप से चिकित्सा और स्वच्छता अभ्यास में उपयोग किया जाता है।

एसेप्टिस निवारक उपायों की एक प्रणाली है जो किसी वस्तु (घाव, आदि) के माइक्रोबियल संदूषण को रोकती है। शल्य चिकित्सा क्षेत्र, सूक्ष्मजीवों की संस्कृतियाँ, आदि) भौतिक विधियों पर आधारित।

एंटीसेप्टिक्स उपायों का एक समूह है जिसका उद्देश्य विभिन्न कीटाणुनाशक रसायनों का उपयोग करके घाव, पूरे शरीर या पर्यावरणीय वस्तुओं पर सूक्ष्मजीवों को नष्ट करना है।

जैविक कारक

प्राकृतिक आवासों में, सूक्ष्मजीव अलगाव में मौजूद नहीं होते हैं, बल्कि जटिल संबंधों में होते हैं, जो मुख्य रूप से सहजीवन, मेटाबायोसिस और विरोध के रूप में सामने आते हैं।

सहजीवन विभिन्न प्रजातियों के जीवों का सहवास है, जिससे उन्हें पारस्परिक लाभ होता है। साथ ही, एक साथ मिलकर उनका विकास अलग-अलग होने की तुलना में बेहतर होता है।

नोड्यूल बैक्टीरिया और फलीदार पौधों के बीच, फिलामेंटस कवक और नीले-हरे शैवाल (लाइकेन) के बीच सहजीवी संबंध मौजूद हैं: लैक्टिक एसिड बैक्टीरिया और अल्कोहलिक यीस्ट के सहजीवन का उपयोग कुछ लैक्टिक एसिड उत्पादों (केफिर, कौमिस) को तैयार करने के लिए किया जाता है।

मेटाबायोसिस एक प्रकार का संबंध है जिसमें एक प्रकार के सूक्ष्मजीवों के चयापचय उत्पाद बनते हैं आवश्यक शर्तेंदूसरों के विकास के लिए. उदाहरण के लिए, पुटीय सक्रिय सूक्ष्मजीव जो प्रोटीन पदार्थों को तोड़ते हैं, पर्यावरण में अमोनियम यौगिकों के संचय में योगदान करते हैं और नाइट्रिफाइंग बैक्टीरिया के विकास और विकास के लिए अनुकूल परिस्थितियों का निर्माण करते हैं। और अच्छी तरह से वातित मिट्टी में अवायवीय जीवों का विकास उन एरोबिकों के बिना असंभव होगा जो मुक्त ऑक्सीजन को अवशोषित करते हैं।

मेटाबायोटिक संबंध मिट्टी के सूक्ष्मजीवों के बीच व्यापक हैं और प्रकृति में पदार्थों के चक्र का आधार हैं।

विरोध संबंध का एक रूप है जिसमें एक सूक्ष्मजीव दूसरे के विकास को रोकता है या उसकी पूर्ण मृत्यु का कारण बन सकता है। अस्तित्व के संघर्ष में सूक्ष्मजीवों के बीच विरोधी संबंध विकसित हो गए हैं। वे जहां भी रहते हैं, उनके बीच खाद्य स्रोतों, वायु ऑक्सीजन और आवास के लिए निरंतर संघर्ष होता रहता है। इस प्रकार, अधिकांश रोगजनक बैक्टीरिया, रोगियों के स्राव में प्रवेश कर जाते हैं बाहरी वातावरण(मिट्टी, पानी), यहां असंख्य सैप्रोफाइट्स के साथ दीर्घकालिक प्रतिस्पर्धा का सामना नहीं करते हैं और अपेक्षाकृत जल्दी मर जाते हैं।

विरोध एक दूसरे पर सूक्ष्मजीवों के सीधे प्रभाव या उनके चयापचय उत्पादों की कार्रवाई के कारण हो सकता है। उदाहरण के लिए, प्रोटोजोआ बैक्टीरिया को निगल जाता है और फेज उन्हें नष्ट कर देता है। नवजात शिशुओं की आंतें लैक्टिक एसिड बैक्टीरिया बिफीडोबैक्टीरियम बिफिडम द्वारा उपनिवेशित होती हैं। लैक्टिक एसिड जारी करके, वे पुटीय सक्रिय बैक्टीरिया के विकास को रोकते हैं और इस तरह अभी भी नाजुक जीव को आंतों के विकारों से बचाते हैं शिशुओं. जीवन की प्रक्रिया में कुछ सूक्ष्मजीव विभिन्न पदार्थ उत्पन्न करते हैं जिनका बैक्टीरिया और अन्य रोगाणुओं पर हानिकारक प्रभाव पड़ता है। इन पदार्थों में एंटीबायोटिक्स शामिल हैं (देखें "एंटीबायोटिक्स")।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. कौन से भौतिक कारक सूक्ष्मजीवों की जीवन गतिविधि को प्रभावित करते हैं?

2. किन पदार्थों को कीटाणुनाशक के रूप में वर्गीकृत किया गया है और सूक्ष्मजीवों पर उनकी क्रिया के तंत्र में वे कैसे भिन्न हैं?

3. सूचीबद्ध करें कि सूक्ष्मजीवों के बीच क्या संबंध मौजूद हैं?

नसबंदी

बंध्याकरण नसबंदी है, अर्थात सूक्ष्मजीवों और उनके बीजाणुओं से पर्यावरणीय वस्तुओं की पूर्ण मुक्ति।

नसबंदी विभिन्न तरीकों से की जाती है:

1) भौतिक (उच्च तापमान, यूवी किरणों के संपर्क में, उपयोग)। जीवाणु फिल्टर);

2) रासायनिक (विभिन्न कीटाणुनाशक, एंटीसेप्टिक्स का उपयोग);

3) जैविक (एंटीबायोटिक दवाओं का उपयोग)।

प्रयोगशाला अभ्यास में, आमतौर पर नसबंदी के भौतिक तरीकों का उपयोग किया जाता है।

एक या किसी अन्य नसबंदी विधि का उपयोग करने की संभावना और व्यवहार्यता निष्फल की जाने वाली सामग्री की विशेषताओं, उसके भौतिक और रासायनिक गुणों से निर्धारित होती है।

भौतिक तरीके

बर्नर की लौ में कैल्सीनेशन या फ्लेम्बिंग नसबंदी की एक विधि है जिसमें वस्तु पूरी तरह से निष्फल हो जाती है, क्योंकि वनस्पति कोशिकाएं और माइक्रोबियल बीजाणु दोनों मर जाते हैं। आमतौर पर, बैक्टीरियोलॉजिकल लूप, स्पैटुला, पिपेट, स्लाइड और कवर ग्लास और छोटे उपकरणों को कैलक्लाइंड किया जाता है। कैंची और स्केलपेल को गर्म करके निष्फल नहीं किया जाना चाहिए, क्योंकि आग के प्रभाव में काटने की सतह सुस्त हो जाती है।

सूखी गर्मी नसबंदी

पाश्चर ओवन (सुखाने वाले ओवन) में सूखी गर्मी या गर्म हवा के साथ नसबंदी की जाती है। पाश्चर ओवन एक दोहरी दीवार वाली कैबिनेट है जो गर्मी प्रतिरोधी सामग्री - धातु और एस्बेस्टस से बनी होती है। कैबिनेट को गर्म करें गैस बर्नरया विद्युत ताप उपकरण। विद्युत रूप से गर्म अलमारियाँ नियामकों से सुसज्जित हैं जो सुनिश्चित करती हैं आवश्यक तापमान. तापमान को नियंत्रित करने के लिए कैबिनेट की ऊपरी दीवार के छेद में एक थर्मामीटर डाला जाता है।

सूखी गर्मी का उपयोग प्रयोगशाला के कांच के बर्तनों को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। स्टरलाइज़ेशन के लिए तैयार किए गए बर्तनों को स्टरलाइज़ की जा रही सामग्री की एक समान और विश्वसनीय हीटिंग सुनिश्चित करने के लिए ओवन में लोड किया जाता है। कैबिनेट के दरवाज़े को कसकर बंद करें, हीटिंग डिवाइस चालू करें, तापमान को 160-165 डिग्री सेल्सियस पर लाएं और 1 घंटे के लिए इस तापमान पर स्टरलाइज़ करें। स्टरलाइज़ेशन के अंत में, हीटिंग बंद कर दें, लेकिन कैबिनेट का दरवाज़ा तब तक न खोलें जब तक ओवन ठंडा हो गया है; अन्यथा ठंडी हवा, कैबिनेट में प्रवेश करने से गर्म कुकवेयर में दरारें पड़ सकती हैं।

पाश्चर ओवन में स्टरलाइज़ेशन अलग-अलग तापमान और एक्सपोज़र (नसबंदी समय) पर किया जा सकता है (तालिका 1)।

तरल पदार्थ (पोषक तत्व मीडिया, आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान, आदि), रबर और सिंथेटिक सामग्री से बनी वस्तुओं को सूखी गर्मी से निष्फल नहीं किया जा सकता है, क्योंकि तरल पदार्थ उबल कर बाहर निकल जाते हैं, और रबर और सिंथेटिक सामग्री पिघल जाती है।

पाश्चर ओवन में नसबंदी को नियंत्रित करने के लिए, रेशम के धागों को बीजाणु बनाने वाले बैक्टीरिया के कल्चर में गीला किया जाता है, सुखाया जाता है, एक बाँझ पेट्री डिश में रखा जाता है और पाश्चर ओवन में रखा जाता है। 1 घंटे के लिए 165 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर स्टरलाइज़ेशन किया जाता है (नियंत्रण के लिए, कुछ धागों को कमरे के तापमान पर छोड़ दिया जाता है)। फिर निष्फल और नियंत्रण धागों को पेट्री डिश में अगर की सतह पर रखा जाता है या शोरबा के साथ टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है और 2 दिनों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोस्टेट में रखा जाता है। पाश्चर ओवन के उचित संचालन के साथ, पोषक तत्व मीडिया वाले टेस्ट ट्यूब या बर्तनों में कोई वृद्धि नहीं होगी जिसमें निष्फल धागे रखे गए थे, क्योंकि जीवाणु बीजाणु मर जाएंगे, जबकि धागे पर जीवाणु बीजाणु जो निष्फल नहीं थे (नियंत्रण) पोषक तत्व पर अंकुरित होंगे मीडिया विकास पर ध्यान दिया जाएगा.

पाश्चर ओवन के अंदर का तापमान निर्धारित करने के लिए, आप सुक्रोज या दानेदार चीनी का उपयोग कर सकते हैं, जो 165-170 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर कारमेलाइज़ होता है।

पाश्चर ओवन में नसबंदी के लिए प्रयोगशाला कांच के बर्तन तैयार करना. प्रयोगशाला कांच के बने पदार्थ(पेट्री डिश, स्नातक और पाश्चर पिपेट, बोतलें, फ्लास्क, टेस्ट ट्यूब) को नसबंदी से पहले अच्छी तरह से धोया जाना चाहिए, सुखाया जाना चाहिए और कागज में लपेटा जाना चाहिए, अन्यथा नसबंदी के बाद यह फिर से वायु बैक्टीरिया से दूषित हो सकता है।

पेट्री डिश को एक समय में एक या अधिक टुकड़ों में कागज में लपेटा जाता है या विशेष धातु के बक्सों में रखा जाता है।

परीक्षण सामग्री को मुंह में प्रवेश करने से रोकने के लिए पिपेट के ऊपरी सिरों में रुई के फाहे डाले जाते हैं। स्नातक पिपेट को 4-5 सेमी चौड़ी कागज की लंबी पट्टियों में लपेटा जाता है। लपेटे गए पिपेट का आयतन कागज पर अंकित होता है। पेंसिल केस में, स्नातक किए गए पिपेट को कागज में अतिरिक्त लपेटे बिना निष्फल किया जाता है।

टिप्पणी. यदि पिपेट पर ग्रेजुएशन खराब दिखाई देता है, तो इसे नसबंदी से पहले बहाल कर दिया जाता है। पिपेट पर लगाएं ऑइल पेन्टऔर, पेंट को सूखने की अनुमति दिए बिना, बेरियम सल्फेट पाउडर को कपड़े से इसमें रगड़ दिया जाता है। इसके बाद कपड़े से अतिरिक्त पेंट हटा दें, जो केवल ग्रेजुएशन नॉच में ही रह जाता है। इस तरह से उपचारित पिपेट को धोना चाहिए।

पाश्चर पिपेट के नुकीले सिरों को बर्नर की लौ में सील कर दिया जाता है और एक बार में 3-5 टुकड़ों में कागज में लपेट दिया जाता है। पाश्चर पिपेट को सावधानी से लपेटा जाना चाहिए ताकि केशिकाओं के सीलबंद सिरे टूट न जाएं।

शीशियाँ, फ्लास्क, टेस्ट ट्यूब कपास-धुंध स्टॉपर्स के साथ बंद हैं। कॉर्क को बर्तन की गर्दन में उसकी लंबाई का 2/3 भाग फिट होना चाहिए, बहुत तंग नहीं, लेकिन ढीला भी नहीं। प्रत्येक बर्तन (टेस्ट ट्यूब को छोड़कर) पर स्टॉपर्स के ऊपर एक पेपर कैप लगाई जाती है। टेस्ट ट्यूबों को 5-50 के समूह में एक साथ बांधा जाता है और कागज से लपेटा जाता है।

टिप्पणी. पर उच्च तापमानकागज जिसमें कप और पिपेट लपेटे जाते हैं, और रूई पीली हो जाती है और जल भी सकती है, इसलिए हर कोई नई किस्मप्रयोगशाला द्वारा प्राप्त कागज का परीक्षण स्वीकृत तापमान स्थितियों पर किया जाना चाहिए।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. नसबंदी शब्द का क्या अर्थ है?

2. नसबंदी कैसे की जाती है?

3. आग पर कैल्सीनेशन द्वारा क्या निष्फल किया जाता है?

4. पाश्चर ओवन की संरचना और संचालन मोड का वर्णन करें।

5. पाश्चर ओवन में क्या निष्फल किया जाता है?

6. नसबंदी के लिए कांच के बर्तन कैसे तैयार किए जाते हैं?

7. पाश्चर ओवन में पोषक तत्व मीडिया और रबर की वस्तुओं को निष्फल क्यों नहीं किया जा सकता है?

व्यायाम

स्टरलाइज़ेशन के लिए पेट्री डिश, ग्रेजुएटेड पिपेट, पाश्चर पिपेट, टेस्ट ट्यूब, फ्लास्क और शीशियाँ तैयार करें।

उबालकर बंध्याकरण

उबालना एक रोगाणुनाशन विधि है जो बंध्यता की गारंटी देती है बशर्ते कि निष्फल सामग्री में कोई बीजाणु न हों। सीरिंज, उपकरण, कांच और धातु के बर्तन, रबर ट्यूब आदि के प्रसंस्करण के लिए उपयोग किया जाता है।

आमतौर पर उबालकर स्टरलाइज़ेशन एक स्टरलाइज़र में किया जाता है - धातु बॉक्स आयत आकारएक टाइट-फिटिंग ढक्कन के साथ. स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री को स्टरलाइज़र में उपलब्ध जाली पर रखा जाता है और पानी से भर दिया जाता है। क्वथनांक बढ़ाने और पानी की कठोरता को खत्म करने के लिए, 1-2% सोडियम बाइकार्बोनेट मिलाएं (आसुत जल का उपयोग करना बेहतर है)। स्टरलाइज़र को ढक्कन से बंद करके गर्म किया जाता है। स्टरलाइज़ेशन की शुरुआत पानी के उबलने के क्षण से मानी जाती है, उबलने का समय 15-30 मिनट है। नसबंदी के अंत में, उपकरणों के साथ जाल को विशेष हुक के साथ साइड हैंडल द्वारा हटा दिया जाता है, और इसमें मौजूद उपकरणों को बाँझ चिमटी या संदंश के साथ लिया जाता है, जिसे बाकी उपकरणों के साथ उबाला जाता है।

भाप नसबंदी दो तरीकों से की जाती है: 1) दबाव में भाप; 2) बहती हुई भाप।

दबाव भाप नसबंदीएक आटोक्लेव में उत्पादित. यह स्टरलाइज़ेशन विधि स्टरलाइज़ की जा रही सामग्रियों को वायुमंडलीय दबाव से ऊपर संतृप्त जल वाष्प में उजागर करने पर आधारित है। इस तरह की नसबंदी के परिणामस्वरूप, सूक्ष्मजीवों के वानस्पतिक और बीजाणु दोनों रूप एक ही उपचार से मर जाते हैं।

एक आटोक्लेव (चित्र 12) एक विशाल बॉयलर है, जो बाहर की तरफ एक धातु के आवरण से ढका होता है, जिसे एक ढक्कन के साथ भली भांति बंद करके सील किया जाता है, जो हिंग वाले बोल्ट के साथ बॉयलर से कसकर जुड़ा होता है। एक और, छोटे व्यास वाला, जिसे स्टरलाइज़ेशन कक्ष कहा जाता है, बाहरी बॉयलर में डाला जाता है। इस कक्ष में विसंक्रमित की जाने वाली वस्तुओं को रखा जाता है। दोनों बॉयलरों के बीच एक खाली जगह होती है जिसे जल-भाप कक्ष कहा जाता है। इस कक्ष में पानी को एक विशेष जल-मापने वाली ट्यूब पर अंकित एक निश्चित स्तर तक बाहर की ओर लगे फ़नल के माध्यम से डाला जाता है। जब पानी को जल-भाप कक्ष में उबाला जाता है, तो भाप उत्पन्न होती है। नसबंदी कक्ष एक सुरक्षा वाल्व के साथ एक आउटलेट कॉक से सुसज्जित है ताकि दबाव आवश्यक स्तर से ऊपर बढ़ने पर भाप को बाहर निकलने की अनुमति मिल सके। नसबंदी कक्ष में बनाए गए दबाव को निर्धारित करने के लिए एक दबाव नापने का यंत्र का उपयोग किया जाता है।

चावल। 12. आटोक्लेव आरेख. एम - दबाव नापने का यंत्र; पीसी - सुरक्षा वाल्व; बी - पानी के लिए फ़नल; के 2 - पानी छोड़ने के लिए नल; के 3 - भाप छोड़ने के लिए वाल्व

सामान्य वायुमंडलीय दबाव (760 मिमी एचजी) को शून्य माना जाता है। दबाव गेज रीडिंग और तापमान (तालिका 2) के बीच एक निश्चित संबंध है।

वर्तमान में, ऑपरेटिंग मोड के स्वचालित नियंत्रण वाले आटोक्लेव हैं। सामान्य दबाव नापने का यंत्र के अलावा, वे एक विद्युत संपर्क दबाव नापने का यंत्र से सुसज्जित होते हैं, जो दबाव को पूर्व निर्धारित मूल्य से ऊपर बढ़ने से रोकता है और इस तरह निरंतर सुनिश्चित करता है वांछित तापमानएक आटोक्लेव में.

दबाव में भाप विभिन्न पोषक मीडिया (देशी प्रोटीन युक्त मीडिया को छोड़कर), तरल पदार्थ (आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान, पानी, आदि) को निर्जलित करती है; उपकरण, विशेष रूप से रबर भागों वाले।

पोषक तत्व मीडिया के ऑटोक्लेविंग का तापमान और अवधि पोषक माध्यम तैयार करने के लिए नुस्खा में निर्दिष्ट उनकी संरचना द्वारा निर्धारित की जाती है। उदाहरण के लिए, साधारण मीडिया (मीट-पेप्टोन अगर, मीट-पेप्टोन शोरबा) को 120 डिग्री सेल्सियस (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। हालाँकि, इस तापमान पर देशी प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट और अन्य पदार्थों से युक्त मीडिया को स्टरलाइज़ करना असंभव है जो गर्म करने पर आसानी से बदल जाते हैं। कार्बोहाइड्रेट वाले मीडिया को आंशिक रूप से 100 डिग्री सेल्सियस पर या आटोक्लेव में 112 डिग्री सेल्सियस (0.5 एटीएम) पर 10-15 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। विभिन्न तरल पदार्थ, रबर की नली, प्लग, बैक्टीरियल मोमबत्तियाँ और फिल्टर वाले उपकरणों को 120 डिग्री सेल्सियस (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है।

ध्यान! संक्रमित सामग्री को आटोक्लेव में भी निष्क्रिय कर दिया जाता है। सूक्ष्मजीवों के कल्चर वाले कप और टेस्ट ट्यूब को भाप के प्रवेश के लिए ढक्कन में छेद वाले विशेष धातु की बाल्टियों या टैंकों में रखा जाता है और 1 घंटे के लिए 126 डिग्री सेल्सियस (1.5 एटीएम) पर एक आटोक्लेव में स्टरलाइज़ किया जाता है। काम करने के बाद उपकरणों को उसी तरह से स्टरलाइज़ किया जाता है बैक्टीरिया के साथ, विवाद बनाते हैं।

केवल विशेष रूप से प्रशिक्षित व्यक्तियों को ही आटोक्लेव के साथ काम करने की अनुमति है, जिन्हें डिवाइस के साथ दिए गए निर्देशों में निर्दिष्ट नियमों का सख्ती से और सटीक रूप से पालन करना होगा।

आटोक्लेविंग तकनीक. 1. काम से पहले, सभी भागों की सेवाक्षमता और नल की ग्राइंडिंग की जांच करें।

2. पानी (पैमाने के गठन को रोकने के लिए आसुत या उबला हुआ) बॉयलर के बाहर लगे फ़नल के माध्यम से पानी के मीटर ग्लास के शीर्ष निशान तक डाला जाता है। फ़नल के नीचे का नल बंद है।

3. स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री को एक विशेष जाली पर स्टरलाइज़ेशन कक्ष में रखा जाता है। वस्तुओं को बहुत कसकर लोड नहीं किया जाना चाहिए, क्योंकि भाप को उनके बीच स्वतंत्र रूप से गुजरना चाहिए, अन्यथा वे आवश्यक तापमान तक गर्म नहीं होंगे और अस्थिर रह सकते हैं।

4. बेहतर सीलिंग के लिए ढक्कन पर रबर गैसकेट को चाक से रगड़ा जाता है।

5. ढक्कन को बंद कर दिया जाता है और आटोक्लेव बॉडी पर बोल्ट लगा दिया जाता है, और बोल्ट को जोड़े में क्रॉसवर्ड में पेंच कर दिया जाता है।

6. स्टरलाइज़ेशन कक्ष को बाहरी हवा से जोड़ने वाले आउटलेट वाल्व को पूरी तरह से खोलें, और आटोक्लेव को गर्म करना शुरू करें। आटोक्लेव को आमतौर पर गैस या बिजली का उपयोग करके गर्म किया जाता है।

जब आटोक्लेव को गर्म किया जाता है, तो पानी उबलता है, जिसके परिणामस्वरूप भाप बॉयलर की दीवारों के बीच और आंतरिक बॉयलर की दीवार में विशेष छेद के माध्यम से ऊपर उठती है (चित्र 12 देखें), नसबंदी कक्ष में प्रवेश करती है और खुले आउटलेट वाल्व के माध्यम से बाहर निकलती है। सबसे पहले, भाप आटोक्लेव में हवा के साथ निकल जाती है। यह आवश्यक है कि सभी हवा को आटोक्लेव से बाहर निकाला जाए, अन्यथा दबाव नापने का यंत्र की रीडिंग आटोक्लेव में तापमान के अनुरूप नहीं होगी।

भाप की निरंतर मजबूत धारा की उपस्थिति आटोक्लेव से हवा को पूरी तरह से हटाने का संकेत देती है; इसके बाद, आउटलेट वाल्व बंद हो जाता है और आटोक्लेव के अंदर दबाव धीरे-धीरे बढ़ने लगता है।

7. नसबंदी की शुरुआत उस क्षण को माना जाता है जब दबाव गेज की रीडिंग निर्दिष्ट मूल्य तक पहुंच जाती है। हीटिंग को समायोजित किया जाता है ताकि आटोक्लेव में दबाव एक निश्चित अवधि में न बदले।

8. नसबंदी का समय समाप्त होने के बाद, आटोक्लेव का ताप बंद कर दिया जाता है, और भाप को आउटलेट वाल्व के माध्यम से छोड़ दिया जाता है। जब दबाव नापने की सुई शून्य पर गिर जाए, तो ढक्कन खोलें। आटोक्लेव में बची भाप से जलने से बचने के लिए ढक्कन आपकी ओर खुला होना चाहिए।

आटोक्लेव में तापमान स्तर, यानी दबाव गेज रीडिंग की शुद्धता की जांच की जा सकती है। ऐसा करने के लिए, विभिन्न पदार्थों का उपयोग करें जिनका एक निश्चित गलनांक होता है: एंटीपाइरिन (113° C), रेसोरिसिनॉल और सल्फर (119° C), बेंजोइक एसिड (120° C)। इनमें से एक पदार्थ को नगण्य मात्रा में डाई (मचसिन या मिथाइलीन ब्लू) के साथ मिलाया जाता है और एक ग्लास ट्यूब में डाला जाता है, जिसे सील कर दिया जाता है और निष्फल की जाने वाली सामग्री के बीच एक ऊर्ध्वाधर स्थिति में रखा जाता है। यदि तापमान पर्याप्त है, तो पदार्थ पिघल जाएगा और संबंधित डाई का रंग बदल देगा।

नसबंदी की प्रभावशीलता की जांच करने के लिए, ज्ञात बीजाणु संस्कृति के साथ एक टेस्ट ट्यूब को आटोक्लेव में रखा जाता है। ऑटोक्लेविंग के बाद, ट्यूब को 24-48 घंटों के लिए थर्मोस्टेट में स्थानांतरित कर दिया जाता है, विकास की अनुपस्थिति या उपस्थिति नोट की जाती है। वृद्धि की कमी डिवाइस के उचित संचालन को इंगित करती है।

बहती भाप से बंध्याकरणकोच तंत्र में उत्पादित। इस विधि का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां निर्जलित की जाने वाली वस्तु 100 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान पर बदल जाती है। यूरिया, कार्बोहाइड्रेट, दूध, आलू, जिलेटिन इत्यादि युक्त पोषक तत्व मीडिया को बहती भाप से निर्जलित किया जाता है।

कोच उपकरण (बॉयलर) एक धातु सिलेंडर है जो बाहर की तरफ (गर्मी हस्तांतरण को कम करने के लिए) फेल्ट या एस्बेस्टस से ढका होता है। सिलेंडर को शंक्वाकार ढक्कन के साथ बंद किया जाता है जिसमें भाप निकलने के लिए एक छेद होता है। सिलेंडर के अंदर एक स्टैंड होता है, जिसके लेवल तक पानी डाला जाता है। स्टैंड पर एक छेद वाली बाल्टी रखी जाती है जिसमें स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री रखी जाती है। कोच उपकरण को गैस या बिजली का उपयोग करके गर्म किया जाता है। नसबंदी का समय ढक्कन के किनारों पर और भाप आउटलेट से जोरदार भाप निकलने के क्षण से गिना जाता है। 30-60 मिनट के लिए स्टरलाइज़ करें। नसबंदी के अंत में, हीटिंग बंद कर दिया जाता है। उपकरण से सामग्री की बाल्टी निकालें और इसे अगले दिन तक कमरे के तापमान पर छोड़ दें। वार्मिंग को लगातार 3 दिनों तक 100°C के तापमान पर 30-60 मिनट तक किया जाता है। इस विधि को फ्रैक्शनल स्टरलाइज़ेशन कहा जाता है। पहले ताप के दौरान, रोगाणुओं के वानस्पतिक रूप मर जाते हैं, जबकि बीजाणु रूप संरक्षित रहते हैं। एक दिन के भीतर, बीजाणु अंकुरित होकर वानस्पतिक रूपों में बदल जाते हैं, जो नसबंदी के दूसरे दिन मर जाते हैं। चूँकि यह संभव है कि कुछ बीजाणुओं को अंकुरित होने का समय नहीं मिला, सामग्री को अगले 24 घंटों के लिए रखा जाता है, और फिर तीसरी नसबंदी की जाती है। कोच उपकरण में बहती भाप से बंध्याकरण की आवश्यकता नहीं होती है विशेष नियंत्रण, चूंकि तैयार पोषक तत्व मीडिया की बाँझपन डिवाइस के सही संचालन का एक संकेतक है। आप आटोक्लेव में ढक्कन खोलकर और आउटलेट वाल्व खुला रखकर बहती भाप से भी स्टरलाइज़ कर सकते हैं।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. कौन से पोषक माध्यम को भाप से निष्फल किया जाता है?

2. स्टरलाइज़र क्या है और यह कैसे काम करता है?

3. उबालकर रोगाणुनाशन करते समय आसुत जल का उपयोग क्यों करना चाहिए?

4. आटोक्लेव की संरचना और संचालन मोड का वर्णन करें।

5. आटोक्लेव में क्या स्टरलाइज़ किया जाता है?

6. ऑटोक्लेविंग के दौरान उचित स्टरलाइज़ेशन के लिए नियंत्रण के रूप में क्या कार्य करता है?

7. प्रवाहित भाप स्टरलाइज़ेशन क्या है?

8. कोच तंत्र की संरचना का वर्णन करें।

9. फ्रैक्शनल स्टरलाइज़ेशन का उद्देश्य क्या है?

व्यायाम

प्रपत्र भरिये।

कोच कौयगुलांट में आंशिक नसबंदी भी की जा सकती है।

कोच के कौयगुलांट का उपयोग मट्ठा और अंडा संस्कृति मीडिया को जमा करने के लिए किया जाता है, और साथ ही माध्यम के संघनन के साथ, इसे निष्फल किया जाता है।

कोच का कौयगुलांटयह एक सपाट, दोहरी दीवारों वाला धातु का बक्सा है जो बाहर से ढका हुआ है थर्मल इन्सुलेशन सामग्री. बाहरी दीवार के ऊपरी भाग में स्थित एक विशेष छेद के माध्यम से दीवारों के बीच की जगह में पानी डाला जाता है। छेद को एक डाट से बंद किया जाता है जिसमें एक थर्मामीटर डाला जाता है। उपकरण दो ढक्कनों से बंद है: कांच और धातु। कांच के ढक्कन के माध्यम से आप जमावट प्रक्रिया का निरीक्षण कर सकते हैं। मीडिया के साथ टेस्ट ट्यूब को कोगुलेटर के नीचे झुकी हुई स्थिति में रखा जाता है।

कोगुलेटर को गैस या बिजली का उपयोग करके गर्म किया जाता है। मीडिया को एक बार 90°C के तापमान पर 1 घंटे के लिए या आंशिक रूप से - लगातार 3 दिनों में 80°C पर 1 घंटे के लिए निष्फल किया जाता है।

टिंडलाइज़ेशन* - कम तापमान पर आंशिक नसबंदी - उन पदार्थों के लिए उपयोग किया जाता है जो 60 डिग्री सेल्सियस (उदाहरण के लिए, प्रोटीन तरल पदार्थ) के तापमान पर आसानी से नष्ट हो जाते हैं और विकृत हो जाते हैं। निष्फल की जाने वाली सामग्री को पानी के स्नान में या थर्मोस्टैट वाले विशेष उपकरणों में 56-58 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर लगातार 5 दिनों तक एक घंटे तक गर्म किया जाता है।

* (नसबंदी विधि का नाम टाइन्डल के नाम पर रखा गया है, जिन्होंने इसे प्रस्तावित किया था।)

pasteurization- रोगाणुओं के गैर-बीजाणु रूपों को नष्ट करने के लिए पाश्चर द्वारा प्रस्तावित 1 घंटे के लिए 65-70 डिग्री सेल्सियस पर नसबंदी। दूध, वाइन, बीयर, फलों के रस और अन्य उत्पादों को पास्चुरीकृत किया जाता है। लैक्टिक एसिड और रोगजनक बैक्टीरिया (ब्रुसेला, माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस, शिगेला, साल्मोनेला, स्टेफिलोकोकस, आदि) को हटाने के लिए दूध को पास्चुरीकृत किया जाता है। बीयर, फलों के रस और वाइन को पास्चुरीकृत करते समय, विभिन्न प्रकार के किण्वन का कारण बनने वाले सूक्ष्मजीव मर जाते हैं। पाश्चुरीकृत खाद्य पदार्थों को प्रशीतित में रखना सबसे अच्छा है।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. कोच कोगुलेटर का उद्देश्य और संरचना क्या है?

2. क्लॉटिंग मशीन में स्टरलाइज़ेशन की क्या विधियाँ हैं?

3. टिंडलाइजेशन क्या है?

4. पास्चुरीकरण क्या है?

नसबंदी पराबैंगनी विकिरण

यूवी किरणों से नसबंदी का उपयोग किया जाता है विशेष स्थापनाएँ- जीवाणुनाशक लैंप. यूवी किरणों में उच्च रोगाणुरोधी गतिविधि होती है और यह न केवल वनस्पति कोशिकाओं, बल्कि बीजाणुओं की भी मृत्यु का कारण बन सकती है। यूवी विकिरण का उपयोग अस्पतालों, ऑपरेटिंग रूम, बच्चों के संस्थानों आदि में हवा को स्टरलाइज़ करने के लिए किया जाता है। एक सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशाला में, काम से पहले एक बॉक्स को यूवी किरणों से उपचारित किया जाता है।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. पराबैंगनी किरणों में क्या गुण होते हैं?

2. पराबैंगनी विकिरण का उपयोग करके नसबंदी का उपयोग किन मामलों में किया जाता है?

जीवाणु फिल्टर का उपयोग करके यांत्रिक नसबंदी

निस्पंदन स्टरलाइज़ेशन का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां विसंक्रमित की जाने वाली वस्तुएं गर्म होने पर बदल जाती हैं। विभिन्न महीन-छिद्रपूर्ण सामग्रियों से बने जीवाणु फिल्टर का उपयोग करके निस्पंदन किया जाता है। बैक्टीरिया की यांत्रिक अवधारण सुनिश्चित करने के लिए फिल्टर के छिद्र काफी छोटे (1 माइक्रोन तक) होने चाहिए, इसलिए कुछ लेखक निस्पंदन को इस प्रकार कहते हैं यांत्रिक तरीकेनसबंदी.

निस्पंदन विधि का उपयोग प्रोटीन, सीरम और कुछ एंटीबायोटिक्स युक्त पोषक मीडिया को स्टरलाइज़ करने के लिए किया जाता है, और वायरस, फ़ेज और एक्सोटॉक्सिन से बैक्टीरिया को अलग करने के लिए भी किया जाता है।

सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में, सेट्ज़ एस्बेस्टस फिल्टर, झिल्ली फिल्टर और चेम्बरलेंट और बर्कफेल्ड फिल्टर (मोमबत्तियाँ) का उपयोग किया जाता है।

सेट्ज़ फिल्टर एस्बेस्टस और सेल्युलोज के मिश्रण से बनी डिस्क हैं। इनकी मोटाई 3-5 मिमी, व्यास 35-140 मिमी है। घरेलू उद्योग दो ब्रांडों के फिल्टर का उत्पादन करता है: "एफ" (फ़िल्टरिंग) - निलंबित कणों को बनाए रखता है लेकिन बैक्टीरिया को गुजरने देता है; "एसएफ" (स्टरलाइज़िंग) - छोटे छिद्रों के साथ, बैक्टीरिया को बनाए रखता है, लेकिन वायरस को अंदर जाने देता है। टूटी हुई एस्बेस्टस प्लेटें, साथ ही टूटी हुई और दरार वाली प्लेटें काम के लिए अनुपयुक्त हैं।

मेम्ब्रेन फिल्टर नाइट्रोसेल्यूलोज से बनाए जाते हैं। वे डिस्क हैं सफ़ेद 0.1 मिमी मोटा और 35 मिमी व्यास। छिद्र के आकार के आधार पर, उन्हें क्रमांक 1, 2, 3, 4 और 5 (तालिका 3) नामित किया गया है।

फ़िल्टर नंबर 1 नसबंदी के लिए सबसे उपयुक्त है। सूचीबद्ध लोगों के अलावा, वे एक तथाकथित प्री-फ़िल्टर भी बनाते हैं, जो फ़िल्टर किए गए तरल को इसमें मौजूद बड़े कणों से मुक्त करने के लिए डिज़ाइन किया गया है।

चेम्बरलेंट और बर्कफेल्ड फिल्टर (मोमबत्तियाँ) खोखले सिलेंडर हैं, जो एक सिरे पर बंद होते हैं। चेम्बरलेंट मोमबत्तियाँ रेत और क्वार्ट्ज के साथ मिश्रित काओलिन से बनाई जाती हैं। उन्हें छिद्र आकार द्वारा मानकीकृत किया जाता है और एल 1, एल 2, एल 3 ... एल 13 नामित किया जाता है। बर्कफेल्ड फिल्टर (मोमबत्तियाँ) इन्फ्यूसर मिट्टी से तैयार किए जाते हैं; उनके छिद्रों के आकार के अनुसार उन्हें वी, एन, डब्ल्यू नामित किया जाता है, जो 3-4, 4-7, 8-12 माइक्रोन के छिद्र व्यास से मेल खाता है।

जीवाणु फिल्टर के साथ कार्य निम्नानुसार किया जाता है। फ़िल्टर को एक विशेष धारक में सुरक्षित किया जाना चाहिए, जिसे फ़िल्टर रिसीवर में डाला जाता है। रिसीवर आमतौर पर बन्सेन फ्लास्क होता है। अधिकांश मामलों में स्टेनलेस स्टील से बने धारकों में दो भाग होते हैं: ऊपरी, बिना तली के सिलेंडर के आकार का, और निचला, एक सहायक भाग जो एक ट्यूब में समाप्त होता है। ऊपर की ओर खुरदरी सतह वाले सेट्ज़ फिल्टर को एक धातु की जाली पर रखा जाता है और शीर्ष और के बीच स्क्रू से कसकर बांध दिया जाता है तलधारक। माउंटेड फिल्टर को बुन्सेन फ्लास्क की गर्दन में डाले गए रबर स्टॉपर में सुरक्षित किया गया है। फ्लास्क के आउटलेट ट्यूब में एक कपास झाड़ू डाला जाता है, जो वैक्यूम पंप से जुड़ा होता है। तैयार इंस्टॉलेशन को कागज में लपेटा जाता है और 20-30 मिनट के लिए 1 एटीएम के दबाव में एक आटोक्लेव में निष्फल किया जाता है। संपूर्ण असेंबल डिवाइस को सेइट्ज़ फ़िल्टर भी कहा जाता है (चित्र 13)।

निस्पंदन से तुरंत पहले, बन्सेन फ्लास्क का आउटलेट सिरा एक रबर ट्यूब द्वारा एक तेल या जल जेट पंप से जुड़ा होता है। एक मजबूत सील बनाने के लिए विभिन्न भागों के जंक्शनों को पैराफिन से भर दिया जाता है। फ़िल्टर किए गए तरल को उपकरण के सिलेंडर में डाला जाता है और पंप चालू कर दिया जाता है, जिससे रिसीवर में एक वैक्यूम बन जाता है। परिणामी दबाव अंतर के परिणामस्वरूप, फ़िल्टर किया गया तरल फ़िल्टर के छिद्रों से होकर रिसीवर में चला जाता है, और रोगाणु फ़िल्टर की सतह पर बने रहते हैं।

उपयोग से पहले, झिल्ली फिल्टर को आसुत जल में उबालकर निष्फल किया जाता है। फिल्टर को मुड़ने से रोकने के लिए, उन्हें पहले आसुत जल में रखा जाता है, 50-60 डिग्री सेल्सियस के तापमान तक गर्म किया जाता है, और 30 मिनट तक कम गर्मी पर उबाला जाता है, पानी को 2-3 बार बदला जाता है। फ़िल्टर होल्डर और रिसीवर को पहले से कीटाणुरहित किया जाता है, और डिवाइस को सड़न रोकने वाली परिस्थितियों में लगाया जाता है। धातु की जाली पर झिल्ली फिल्टर को फटने से बचाने के लिए, इसके नीचे स्टेराइल फिल्टर पेपर के मग रखें। फिर, चिकनी युक्तियों के साथ बाँझ चिमटी का उपयोग करके, स्टेरलाइज़र से झिल्ली फ़िल्टर लें और इसे चमकदार सतह के साथ समर्थन ग्रिड पर रखें।

आटोक्लेव में निष्फल मोमबत्तियाँ (चैम्बरलेंट) एक रबर ट्यूब के माध्यम से एक रिसीवर से जुड़ी होती हैं और फ़िल्टर किए गए तरल के साथ एक बर्तन (आमतौर पर एक सिलेंडर) में उतारी जाती हैं। निस्पंदन एक वैक्यूम पंप का उपयोग करके होता है। एक बाँझ निस्पंद रिसीवर में प्रवेश करता है, और बैक्टीरिया मोमबत्ती के छिद्रों द्वारा बनाए रखा जाता है।

मेम्ब्रेन और एस्बेस्टस फिल्टर एकल उपयोग के लिए डिज़ाइन किए गए हैं। उपयोग के बाद, मोमबत्तियों को नल के पानी में उबाला जाता है और फिर मफल भट्टी में कैलक्लाइंड किया जाता है।

बाद के उपयोग से पहले, मोमबत्तियों की अखंडता की जाँच की जाती है। मोमबत्ती को पानी के एक बर्तन में उतारा जाता है और उसमें से हवा प्रवाहित की जाती है। यदि मोमबत्ती की सतह पर हवा के बुलबुले दिखाई देते हैं, तो इसका मतलब है कि मोमबत्ती में दरारें पड़ गई हैं और यह अनुपयोगी है।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. फ़िल्टर स्टरलाइज़ेशन विधि क्या है? इस विधि से क्या निष्फल किया जाता है?

2. आप कौन से जीवाणु फिल्टर जानते हैं? फ़िल्टरिंग उपकरण कैसे स्थापित किया जाता है, किन शर्तों का पालन किया जाना चाहिए?

रासायनिक विधियाँ

इस प्रकार की नसबंदी का उपयोग सीमित सीमा तक किया जाता है, और यह मुख्य रूप से कल्चर मीडिया और इम्युनोबायोलॉजिकल तैयारियों (टीके और सीरम) के जीवाणु संदूषण को रोकने के लिए कार्य करता है।

क्लोरोफॉर्म, टोल्यूनि और ईथर जैसे पदार्थ अक्सर पोषक मीडिया में जोड़े जाते हैं। यदि माध्यम को इन परिरक्षकों से मुक्त करना आवश्यक हो, तो इसे पानी के स्नान में 56°C पर गर्म किया जाता है (परिरक्षक वाष्पित हो जाते हैं)।

टीकों और सीरम को संरक्षित करने के लिए मेरथिओलेट, बोरिक एसिड, फॉर्मेल्डिहाइड आदि का उपयोग किया जाता है।

जैविक बंध्याकरण

जैविक नसबंदी एंटीबायोटिक दवाओं के उपयोग पर आधारित है। इस विधि का उपयोग वायरस की खेती के लिए किया जाता है।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. क्या है रासायनिक बंध्याकरणऔर इसका उपयोग कब किया जाता है?

2. जैविक बंध्याकरण क्या है?

नसबंदी की मुख्य विधियाँ तालिका में प्रस्तुत की गई हैं। 4.

1 (स्टरलाइज़ेशन अधूरा है: स्टरलाइज़ की गई सामग्री में बीजाणु बने रहते हैं।)

2 (स्टरलाइज़ेशन अधूरा है: वायरस स्टरलाइज़ की गई सामग्री में रह जाते हैं।)

कीटाणुशोधन

सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में, विभिन्न कीटाणुनाशकों का उपयोग किया जाता है: 3-5% फिनोल समाधान, 5-10% लाइसोल समाधान, 1-5% क्लोरैमाइन समाधान, 3-6% हाइड्रोजन पेरोक्साइड समाधान, 1-5% फॉर्मेल्डिहाइड समाधान, कमजोर पड़ने में मर्क्यूरिक क्लोराइड समाधान 1:1000 (0.1%), 70° अल्कोहल, आदि।

खर्च की गई पैथोलॉजिकल सामग्री (मवाद, मल, मूत्र, थूक, रक्त, मस्तिष्कमेरु द्रव) को सीवर में बहाने से पहले कीटाणुरहित किया जाता है। कीटाणुशोधन सूखे ब्लीच या 3-5% क्लोरैमाइन घोल से किया जाता है।

पैथोलॉजिकल सामग्री या सूक्ष्मजीवों की संस्कृतियों से दूषित पिपेट (स्नातक और पाश्चर), ग्लास स्पैटुला, स्लाइड और कवरस्लिप को एक दिन के लिए फिनोल या हाइड्रोजन पेरोक्साइड के 3% समाधान के साथ ग्लास जार में डुबोया जाता है।

संक्रामक सामग्री के साथ काम खत्म करने के बाद, प्रयोगशाला तकनीशियन को इसे कीटाणुनाशक समाधान के साथ इलाज करना चाहिए। कार्यस्थलऔर हाथ. कार्य तालिका की सतह को 3% फिनोल घोल में भिगोए रूई के टुकड़े से पोंछा जाता है। हाथों को 1% क्लोरैमाइन घोल से कीटाणुरहित किया जाता है। इसके लिए एक कॉटन बॉल या पट्टी का टुकड़ाएक कीटाणुनाशक घोल से गीला करें और बाएं हाथ को पोंछें, फिर दाएं हाथ को, और फिर अपने हाथों को गर्म पानी और साबुन से धो लें।

एक निस्संक्रामक का चुनाव, इसकी सांद्रता और जोखिम (एक्सपोज़र) की अवधि सूक्ष्म जीव के जैविक गुणों और उस वातावरण पर निर्भर करती है जिसमें निस्संक्रामक रोगजनक सूक्ष्मजीवों के संपर्क में आएगा। उदाहरण के लिए, मर्क्यूरिक क्लोराइड, फिनोल और अल्कोहल प्रोटीन सब्सट्रेट्स (मवाद, रक्त, थूक) कीटाणुरहित करने के लिए अनुपयुक्त हैं, क्योंकि उनके प्रभाव में प्रोटीन का जमाव होता है, और जमा हुआ प्रोटीन कीटाणुनाशकों के प्रभाव से सूक्ष्मजीवों की रक्षा करता है।

सूक्ष्मजीवों के बीजाणु रूपों से संक्रमित सामग्री को कीटाणुरहित करते समय, क्लोरैमाइन का 5% घोल, सक्रिय क्लोरैमाइन का 1-2.5% घोल, फॉर्मेलिन का 5-10% घोल और अन्य पदार्थों का उपयोग किया जाता है।

कीटाणुशोधन, जो काम के दौरान पूरे दिन किया जाता है, को वर्तमान कहा जाता है, और काम के अंत में - अंतिम।

कीटाणुनाशक और उनसे कार्यशील समाधान तैयार करने के निर्देश. चूने का क्लोराइड एक सफेद, गांठदार पाउडर है जिसमें क्लोरीन की तीखी गंध होती है; यह पानी में पूरी तरह से नहीं घुलता है। जीवाणुनाशक प्रभाव सक्रिय क्लोरीन की सामग्री पर निर्भर करता है, जिसकी मात्रा 28 से 36% तक होती है। 25% से कम सक्रिय क्लोरीन युक्त क्लोरीन कीटाणुशोधन के लिए अनुपयुक्त है।

यदि अनुचित तरीके से संग्रहीत किया जाता है, तो ब्लीच विघटित हो जाता है और अपना कुछ सक्रिय क्लोरीन खो देता है। गर्मी, नमी और सूरज की रोशनी से अपघटन को बढ़ावा मिलता है, इसलिए ब्लीच को एक सूखी, अंधेरी जगह, कसकर बंद कंटेनर में संग्रहित किया जाना चाहिए।

सूखी ब्लीच का उपयोग मानव और पशु स्राव कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है (200 ग्राम प्रति 1 लीटर मल और 10 ग्राम प्रति 1 लीटर मूत्र की दर से)।

मूल 10% स्पष्ट ब्लीच समाधान तैयार करना। 1 किलो सूखा ब्लीच लें, इसे इनेमल बाल्टी में रखें और पीस लें। फिर डालो ठंडा पानी 10 लीटर की मात्रा में, अच्छी तरह मिलाएं, ढक्कन के साथ बंद करें और एक दिन के लिए ठंडे स्थान पर छोड़ दें। इसके बाद, परिणामी 10% स्पष्ट समाधान को सावधानीपूर्वक सूखाया जाता है और धुंध की कई परतों के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है या एक मोटे कपड़े के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है। गहरे रंग की कांच की बोतलों में, लकड़ी के डाट से बंद करके, ठंडे स्थान पर 10 दिनों से अधिक न रखें। उपयोग से तुरंत पहले स्टॉक समाधान से आवश्यक एकाग्रता के कार्यशील समाधान तैयार किए जाते हैं। 0.2-10% स्पष्ट ब्लीच समाधान तैयार करने के लिए आवश्यक मूल समाधान की मात्रा तालिका में दी गई है। 5.

0.2 से 10% तक स्पष्ट ब्लीच समाधानों की सांद्रता का चयन कीटाणुरहित वस्तु की प्रकृति और रोगज़नक़ के प्रतिरोध के आधार पर किया जाता है।

क्लोरैमाइन सफेद या पीले रंग का एक क्रिस्टलीय पदार्थ है, जिसमें 24-28% सक्रिय क्लोरीन होता है। यह कमरे के तापमान पर पानी में अच्छी तरह से घुल जाता है, इसलिए कीटाणुशोधन से तुरंत पहले घोल तैयार किया जाता है। 0.2-10% क्लोरैमाइन घोल का प्रयोग करें। घोल की प्रतिशत सांद्रता और प्रति 1 और 10 लीटर ग्राम में क्लोरैमाइन की मात्रा के बीच संबंध तालिका में दिया गया है। 6.

ग्लास में क्लोरैमाइन घोलें या तामचीनी व्यंजन. ग्राउंड-इन स्टॉपर के साथ गहरे कांच के कंटेनरों में क्लोरैमाइन समाधानों को संग्रहीत करते समय, उनकी गतिविधि 15 दिनों तक बनी रहती है।

सक्रिय क्लोरैमाइन. क्लोरैमाइन के कीटाणुनाशक गुणों को इसमें 1:1 या 1:2 के अनुपात में एक एक्टिवेटर जोड़कर बढ़ाया जाता है। उत्प्रेरक के रूप में अमोनियम यौगिकों का उपयोग किया जाता है - अमोनियम क्लोराइड, सल्फेट, अमोनियम नाइट्रेट। सक्रिय क्लोरैमाइन का उपयोग 0.5, 1 और 2.5% की सांद्रता में किया जाता है। इन्हें उपयोग से तुरंत पहले तैयार किया जाता है। क्लोरैमाइन और अमोनियम नमक को अलग-अलग तौला जाता है। सबसे पहले, क्लोरैमाइन को पानी में घोला जाता है, और फिर एक एक्टिवेटर मिलाया जाता है।

पारंपरिक क्लोरैमाइन समाधानों की तुलना में सक्रिय क्लोरैमाइन समाधानों का लाभ यह है कि एक एक्टिवेटर जोड़ने से सक्रिय क्लोरीन की रिहाई तेज हो जाती है। इसलिए, दवा का न केवल सूक्ष्मजीवों के वानस्पतिक रूपों पर, बल्कि उनके बीजाणुओं पर भी हानिकारक प्रभाव पड़ता है। सक्रिय क्लोरैमाइन का उपयोग कम सांद्रता में और कम एक्सपोज़र के साथ किया जाता है।

फिनोल (कार्बोलिक एसिड) एक रंगहीन, सुई के आकार का क्रिस्टल है जिसमें तीखी, विशिष्ट गंध होती है। प्रकाश, हवा और नमी के संपर्क में आने पर, क्रिस्टल लाल-लाल रंग प्राप्त कर लेते हैं। सग्रह करना बंद बैंकअंधेरे कांच से बना और प्रकाश से सुरक्षित स्थान पर।

फिनोल पानी, अल्कोहल, ईथर और वसायुक्त तेलों में घुलनशील है। अत्यधिक आर्द्रताग्राही होने के कारण, यह पर्यावरण से नमी को अवशोषित करता है और तरल बन जाता है। तरल कार्बोलिक एसिड में 90% क्रिस्टलीय फिनोल और 10% पानी होता है।

तालिका में दी गई योजना के अनुसार क्रिस्टलीय फिनोल और तरल कार्बोलिक एसिड से तैयार कार्बोलिक एसिड के 3-5% जलीय घोल का उपयोग करें। 7. फिनोल को घोलने पर उसकी सक्रियता बढ़ जाती है गर्म पानी(40-50 डिग्री सेल्सियस)।

ध्यान! क्रिस्टलीय फिनोल या तरल कार्बोलिक एसिड, अगर यह त्वचा पर लग जाए, तो जलन पैदा कर सकता है, और उच्च सांद्रता में - गंभीर जलन हो सकती है। इसलिए, कार्बोलिक एसिड को बहुत सावधानी से संभालना चाहिए। समाधान तैयार करते समय, आपको रबर के दस्ताने पहनने चाहिए या एक अंतिम उपाय के रूप मेंअपने हाथों को वैसलीन से चिकना करें।

यदि कार्बोलिक एसिड आपकी त्वचा पर लग जाए, तो इसे तुरंत गर्म पानी और साबुन या 40° एथिल अल्कोहल से धो लें।

टिप्पणी। फिनोल का कीटाणुनाशक घोल तैयार करने के लिए तरल कार्बोलिक एसिड का उपयोग करना अधिक सुविधाजनक और सुरक्षित है।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में कौन से कीटाणुनाशकों का उपयोग किया जाता है?

2. वर्णन करें उपस्थितिऔर ब्लीच, क्लोरैमाइन, फिनोल के मूल गुण।

3. सूक्ष्मजीवों के बीजाणु रूपों से संक्रमित सामग्री को कीटाणुरहित करने के लिए कीटाणुनाशकों के किस घोल का उपयोग किया जाता है?

व्यायाम

स्पष्टीकृत ब्लीच का 5% कार्यशील घोल 2 लीटर तैयार करें; 3% क्लोरैमाइन घोल का 500 मिली, 1% सक्रिय क्लोरैमाइन घोल का 300 मिली।

ध्यान! इससे पहले कि आप समाधान तैयार करना शुरू करें, गणना करें।

थर्मोस्टेट- स्थिर तापमान बनाए रखने के लिए एक उपकरण - सूक्ष्मजीवों की बढ़ती संस्कृतियों के लिए उपयोग किया जाता है। यह एक कैबिनेट (चित्र 1) है जिसमें एक निश्चित तापमान लंबे समय तक बनाए रखा जाता है। कई सूक्ष्मजीवों के प्रजनन के लिए इष्टतम तापमान 37 ºС है। थर्मोस्टैट शुष्क हवा और पानी के प्रकार में उपलब्ध हैं।

सुखाने की कैबिनेट (पाश्चर ओवन)व्यंजन, उपकरण और सूखी सामग्री, जैसे स्टार्च, चाक (चित्रा 2) की सूखी गर्मी नसबंदी के लिए उपयोग किया जाता है। कीटाणुरहित की जाने वाली सामग्री को पहले कागज में लपेटा जाता है और एक कैबिनेट में रखा जाता है ताकि यह दीवारों को न छुए। नसबंदी दो घंटे के लिए 160 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर की जाती है। तापमान को 180 से ऊपर बढ़ाने की अनुशंसा नहीं की जाती है: कपास के प्लग और कागज खराब होने लगते हैं (भूरा हो जाना, भंगुर हो जाना)। कैबिनेट को बंद करने और ठंडा करने के बाद निष्फल सामग्री को हटा दिया जाता है, अधिमानतः जब कैबिनेट में तापमान कमरे के तापमान के बराबर होता है।

कॉलोनी गिनती उपकरण(चित्र 3) - एक अर्ध-स्वचालित काउंटर जो इलेक्ट्रिक पेन से सुसज्जित है स्प्रिंग डिवाइस, पेट्री डिश में बैक्टीरिया कालोनियों की गिनती के लिए डिज़ाइन किया गया। कप
बैक्टीरिया कालोनियों वाली एक पेट्री को स्कैनिंग ग्लास पर उल्टा रखा जाता है। कॉलोनी की स्थिति के अनुरूप पेट्री डिश के नीचे के क्षेत्र पर इलेक्ट्रिक पेन का हल्का दबाव कांच पर एक निशान छोड़ देता है। इस स्थिति में, धारक ऊपर उठ जाता है, सर्किट बंद हो जाता है और मीटर रीडिंग एक से बढ़ जाती है। गिनती शुरू होने से पहले और खत्म होने के बाद पल्स काउंटर की रीडिंग में अंतर की गणना करके बैक्टीरिया कालोनियों की संख्या की गणना की जाती है।

आटोक्लेव(चित्र 4) एक मोटी दीवार वाला उपकरण है जिसे दबाव में भाप के साथ व्यंजन और कल्चर मीडिया को स्टरलाइज़ करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। यह एक सीलबंद कड़ाही है जिसमें दोहरी धातु की दीवारें और एक ढक्कन है। दीवारों के बीच का स्थान (जलवाष्प कक्ष) पानी से भरा होता है। आंतरिक भाग(नसबंदी कक्ष) एक दबाव नापने का यंत्र, सुरक्षा वाल्व और पानी और भाप निकालने के लिए एक नल से सुसज्जित है। एक टाइट सील बनाने के लिए, आटोक्लेव को रबर गैस्केट वाले ढक्कन से कसकर बंद कर दिया जाता है। 20...30 मिनट के लिए 0.5 से 1.0 एमपीए के दबाव में कल्चर मीडिया को स्टरलाइज़ करने के लिए उपयोग किया जाता है।

1 – शरीर; 2 - थर्मामीटर; 1 - आवरण; 2 - शरीर;

3 - दरवाजा; 4 - पोटेंशियोमीटर; 3 - गियरबॉक्स; 4 - नियंत्रण इकाई;

5 - टॉगल स्विच; 6 - दीपक; 5 - अंकन; 6-थर्मामीटर

7 - वेंटिलेशन छेद

चित्र 1 - थर्मोस्टेट चित्र 2 - सुखाने वाला कैबिनेट

1 - पेट्री डिश के लिए टेबल; 2 - स्प्रिंग डिवाइस के साथ पेन;

3 - काउंटर संकेतक; 4 - पल्स काउंटर चालू करने के लिए टॉगल स्विच; 5 - मीटर लाइटिंग लैंप चालू करने के लिए टॉगल स्विच

चित्र 3 - सूक्ष्मजीवों की कॉलोनियों की गिनती के लिए उपकरण

नसबंदी- बांझपन; किसी भी सामग्री में वनस्पति और बीजाणु रूपों में रोगजनक और गैर-रोगजनक सूक्ष्मजीवों का विनाश।

नसबंदी के लिए व्यंजन तैयार करना। प्रयोगशाला के कांच के बर्तनों को साफ-सुथरा धोना और कीटाणुरहित करना चाहिए। धोने के लिए साबुन या रासायनिक घोल का उपयोग करें डिटर्जेंट. कांच के बाद के लीचिंग से बचने के लिए नए व्यंजनों को हाइड्रोक्लोरिक एसिड के 1-2% घोल में पहले से उबाला जाता है। बहते पानी में धोए गए बर्तनों को आसुत जल से धोया जाता है और सुखाया जाता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल ट्यूब. शंक्वाकार, मैट फ्लास्क कपास-धुंध स्टॉपर्स के साथ बंद होते हैं, जिसमें धुंध की एक परत से ढके कपास ऊन के कसकर मुड़े हुए रोल होते हैं। बैक्टीरियोलॉजिकल टेस्ट ट्यूब के लिए बाहरी कैप के रूप में धातु स्टॉपर्स भी विकसित किए गए हैं। यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि उच्च तापमान पर कपास प्लग को स्टरलाइज़ करने से कपास ऊन से ऐसे पदार्थ निकलते हैं जो ब्रूसेला जैसे कुछ संवेदनशील बैक्टीरिया के विकास को रोकते हैं।

पिपेट स्थापित करते समय, ऊपरी सिरे में एक कपास झाड़ू डालें। पाश्चर पिपेट में एक सीलबंद केशिका होनी चाहिए। प्रत्येक मापने वाले पिपेट को टोंटी से शुरू करके, उसकी पूरी लंबाई के साथ पेचदार तरीके से, 4-5 सेमी चौड़ी कागज की एक लंबी पट्टी में लपेटा जाता है। पाश्चर पिपेट को कागज में लपेटा जाता है, प्रत्येक 10-20 टुकड़े, टेस्ट ट्यूब - 15-20 टुकड़े प्रत्येक। नसबंदी से पहले और बाद में सभी प्रकार के पिपेट को विशेष धातु के डिब्बों में संग्रहित करना बेहतर होता है। फ्लास्क पर लगे स्टॉपर्स अतिरिक्त रूप से पेपर कैप से ढके होते हैं।

स्टरलाइज़ेशन से पहले, साफ, एकत्रित पेट्री डिश को 3 से 4 टुकड़ों में कागज में लपेटा जाता है। नसबंदी के बाद, कागज रोगाणुहीन कांच के बर्तनों को माइक्रोफ्लोरा द्वारा संदूषण से बचाता है।

स्टरलाइज़ेशन से पहले, हवा के संचार को सुनिश्चित करने के लिए बर्तनों को सुखाने वाले कैबिनेट में बहुत कसकर नहीं रखा जाता है, और इस बात का ध्यान रखा जाता है कि तापमान 180 डिग्री सेल्सियस से अधिक न हो, क्योंकि उच्च तापमान पर कागज और रूई जल जाएगी। स्टरलाइज़ेशन पूरा होने के बाद, तब तक सुखाने वाली कैबिनेट नहीं खोली जाती है। जब तक इसमें तापमान 70-80?C तक न गिर जाए, क्योंकि तेज़ गिरावटतापमान के कारण कांच टूट सकता है।

यदि बर्तनों का उद्देश्य कम से कम 1 एटीएम के दबाव में आटोक्लेविंग द्वारा उनमें पोषक तत्व मीडिया को स्टरलाइज़ करना है, तो वे पूर्व-स्टेरलाइज़ नहीं हैं। मीडिया को बहती भाप से या आटोक्लेव में 0.5 एटीएम से अधिक के दबाव में स्टरलाइज़ करते समय। बाँझ कंटेनरों का उपयोग किया जाना चाहिए।

शुष्क गर्म हवा से बंध्याकरण। इस विधि का उपयोग साफ कांच के बर्तनों को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। इस प्रयोजन के लिए, एक पाश्चर ओवन का उपयोग किया जाता है - दोहरी दीवारों वाला एक विशेष सुखाने वाला कैबिनेट। बाहर गर्मी-रोधी सामग्री से सुसज्जित है। सबसे ऊपर एक थर्मामीटर है. तापरोधी अस्तर और भीतरी भाग के बीच धातु शरीरनीचे एक स्वचालित विद्युत ताप तत्व रखा गया है। जब सुखाने वाली कैबिनेट चालू होती है, तो उसके अंदर की हवा गर्म हो जाती है। एक बार निर्धारित तापमान पर पहुंचने के बाद, नसबंदी का प्रारंभ समय नोट किया जाता है। नसबंदी मोड: 155-160 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर - 2 घंटे के लिए एक्सपोज़र, 165-170 डिग्री सेल्सियस पर - 1-1.5 घंटे, 180 डिग्री सेल्सियस पर - 1 घंटा। नसबंदी समय के बाद, हीटिंग बंद कर दिया जाता है।

आटोक्लेविंग। यह उच्च तापमान के साथ संयुक्त दबाव में भाप नसबंदी है विशेष उपकरण- आटोक्लेव. जब संतृप्त भाप किसी ठंडी वस्तु का सामना करती है, तो भाप पानी में संघनित हो जाती है, जिससे बड़ी मात्रा में गर्मी निकलती है। इसके अलावा, भाप की मात्रा कम हो जाती है, जिससे निष्फल की जा रही सामग्री के आंतरिक भागों में इसके प्रवेश की सुविधा मिलती है। एक शर्त वास्तव में संतृप्त भाप की आपूर्ति है, ताकि किसी ठंडी वस्तु के साथ इसके संपर्क से तत्काल संघनन और ताप हो सके। उद्योग ऊर्ध्वाधर और क्षैतिज आटोक्लेव का उत्पादन करता है।

ऊर्ध्वाधर आटोक्लेव एक दोहरी दीवार वाली बेलनाकार धातु की कड़ाही है, जिसे ढक्कन से सील किया जाता है। एक फ़नल वाले विशेष नल के माध्यम से दीवारों के बीच एक निश्चित स्तर तक पानी डाला जाता है। बॉयलर की आंतरिक दीवार ऊपरी हिस्से में छेद और निचले हिस्से में एक नल से सुसज्जित है, जिसके माध्यम से पानी गर्म होने पर भाप बॉयलर से हवा को विस्थापित करती है। आटोक्लेव के शीर्ष पर एक धातु सुरक्षात्मक फ्रेम रखा गया है, और इसके और आटोक्लेव के बीच खाली जगह होनी चाहिए। आटोक्लेव को विद्युत नेटवर्क से जोड़कर गर्म किया जाता है।

आटोक्लेव में स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री भरी हुई है, ढक्कन और नल जिसके माध्यम से पानी डाला गया था, बंद कर दिया गया है, और नीचे का नल अस्थायी रूप से खुला छोड़ दिया गया है। आटोक्लेव की दीवारों के बीच गर्म पानी उबलता है, जिसके परिणामस्वरूप भाप ऊपर उठती है और भीतरी दीवार के ऊपरी छिद्रों से होकर बॉयलर में गुजरती है, निचले खुले नल के माध्यम से हवा को बाहर धकेलती है। जब सारी हवा विस्थापित हो जाती है और भाप एक समान धारा में बाहर आने लगती है, तो निचला वाल्व बंद हो जाता है। परिणामस्वरूप, आटोक्लेव के अंदर भाप का दबाव बढ़ जाता है। नसबंदी की शुरुआत उस क्षण को माना जाता है जब दबाव किसी दिए गए मान (दबाव गेज के अनुसार) तक पहुंच जाता है। नसबंदी के दौरान गर्मी को समायोजित किया जाता है, जिससे भाप का दबाव समान स्तर पर बना रहता है। यदि आटोक्लेव के अंदर दबाव अत्यधिक बढ़ जाता है, तो एक सुरक्षा वाल्व होता है जिसके माध्यम से अतिरिक्त भाप स्वचालित रूप से निकल जाती है।

जैसे-जैसे भाप का दबाव बढ़ता है, आटोक्लेव में तापमान तदनुसार बढ़ता जाता है।

दबाव नापने का यंत्र आसपास को ध्यान में रखे बिना भाप का दबाव दिखाता है वायु - दाब(760 एमएमएचजी)। नसबंदी का समय समाप्त होने के बाद, आटोक्लेव बंद कर दिया जाता है। ठंडा होने के बाद, जब दबाव नापने का यंत्र की रीडिंग शून्य हो, तो भाप छोड़ने के लिए वाल्व खोलें।

क्षैतिज आटोक्लेव डिज़ाइन में ऊर्ध्वाधर आटोक्लेव से भिन्न होता है, लेकिन इसका संचालन सिद्धांत समान होता है।

वायरोलॉजिकल नसबंदी पैथोलॉजिकल जानवर

रोग संबंधी सामग्री को प्रयोगशाला में भेजते समय भरे जाने वाले प्रपत्रों के नमूने

पाश्चर ओवन (सुखाने वाले ओवन) में सूखी गर्मी या गर्म हवा के साथ नसबंदी की जाती है। पाश्चर ओवन एक दोहरी दीवार वाली कैबिनेट है जो गर्मी प्रतिरोधी सामग्री - धातु और एस्बेस्टस से बनी होती है। गैस बर्नर या इलेक्ट्रिक हीटिंग उपकरणों का उपयोग करके कैबिनेट को गर्म करें। आवश्यक तापमान सुनिश्चित करने के लिए विद्युत रूप से गर्म अलमारियाँ नियामकों से सुसज्जित हैं। तापमान को नियंत्रित करने के लिए कैबिनेट की ऊपरी दीवार के छेद में एक थर्मामीटर डाला जाता है।

सूखी गर्मी का उपयोग प्रयोगशाला के कांच के बर्तनों को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। स्टरलाइज़ेशन के लिए तैयार किए गए बर्तनों को स्टरलाइज़ की जा रही सामग्री की एक समान और विश्वसनीय हीटिंग सुनिश्चित करने के लिए ओवन में लोड किया जाता है। कैबिनेट के दरवाज़े को कसकर बंद करें, हीटिंग डिवाइस चालू करें, तापमान को 160-165 डिग्री सेल्सियस पर लाएं और 1 घंटे के लिए इस तापमान पर स्टरलाइज़ करें। स्टरलाइज़ेशन के अंत में, हीटिंग बंद कर दें, लेकिन कैबिनेट का दरवाज़ा तब तक न खोलें जब तक ओवन ठंडा हो गया है; अन्यथा, कैबिनेट में प्रवेश करने वाली ठंडी हवा गर्म कुकवेयर में दरारें पैदा कर सकती है।

तालिका 1. बंध्याकरण मोड

पाश्चर ओवन में नसबंदी के लिए प्रयोगशाला कांच के बर्तन तैयार करना. नसबंदी से पहले, प्रयोगशाला के कांच के बर्तन (पेट्री डिश, स्नातक और पाश्चर पिपेट, शीशियां, फ्लास्क, टेस्ट ट्यूब) को अच्छी तरह से धोया जाना चाहिए, सुखाया जाना चाहिए और कागज में लपेटा जाना चाहिए, अन्यथा नसबंदी के बाद वे फिर से वायु बैक्टीरिया से दूषित हो सकते हैं।

टिप्पणी. यदि पिपेट पर ग्रेजुएशन खराब दिखाई देता है, तो इसे नसबंदी से पहले बहाल कर दिया जाता है। पिपेट पर ऑयल पेंट लगाया जाता है और, पेंट को सूखने दिए बिना, कपड़े का उपयोग करके बेरियम सल्फेट पाउडर को इसमें रगड़ा जाता है। इसके बाद कपड़े से अतिरिक्त पेंट हटा दें, जो केवल ग्रेजुएशन नॉच में ही रह जाता है। इस तरह से उपचारित पिपेट को धोना चाहिए।

टिप्पणी. उच्च तापमान पर, कागज जिसमें कप और पिपेट लपेटे जाते हैं, और रूई पीली हो जाती है और जल भी सकती है, इसलिए प्रयोगशाला द्वारा प्राप्त प्रत्येक नए प्रकार के कागज का स्वीकृत तापमान स्थितियों पर परीक्षण किया जाना चाहिए।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. नसबंदी शब्द का क्या अर्थ है?

2. नसबंदी कैसे की जाती है?

3. आग पर कैल्सीनेशन द्वारा क्या निष्फल किया जाता है?

4. पाश्चर ओवन की संरचना और संचालन मोड का वर्णन करें।

5. पाश्चर ओवन में क्या निष्फल किया जाता है?

6. नसबंदी के लिए कांच के बर्तन कैसे तैयार किए जाते हैं?

व्यायाम

1. ज्वलनशील(अक्षांश से। फ्लेम्मा - लौ और फ्र। फ्लेम्ब ई - बर्न) - एक लौ में छोटी धातु या कांच की वस्तुओं को कैल्सीनेशन द्वारा नसबंदी। इस प्रकार, बैक्टीरियोलॉजिकल लूप, धातु चिमटी, ग्लास स्पैटुला और ट्यूब, ग्लास स्लाइड आदि को निष्फल कर दिया जाता है। लौ का तापमान लगभग 1000ºC होता है। जब कैल्सीन किया जाता है, तो सभी सूक्ष्मजीव (वानस्पतिक और बीजाणु रूप) जल जाते हैं। यह नसबंदी का एक तेज़ और विश्वसनीय तरीका है।

2. उबलना. यह नसबंदी के सबसे सरल तरीकों में से एक है। इसे एक स्टरलाइज़र में किया जाता है - एक धातु का आयताकार बॉक्स जिसमें एक ढक्कन होता है और स्टरलाइज़ की गई वस्तुओं को रखने के लिए नीचे एक जाली होती है। इसमें पानी डालें और उबाल आने तक गर्म करें (इलेक्ट्रिक हीटिंग या आग पर)। लगभग 100 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर उबालना 15-30 मिनट से 2 घंटे तक रह सकता है। छोटी धातु या कांच की वस्तुओं - सिरिंज, सुई, कांच की ट्यूब आदि को जीवाणुरहित करें। इस मामले में, सूक्ष्मजीवों के वानस्पतिक रूप और कुछ बीजाणु मर जाते हैं। कीटाणुरहित की जा रही सामग्री को उबलते पानी से जलाने का भी अभ्यास किया जाता है।

3. सूखी गर्मी नसबंदी.पाश्चर ओवन या ओवन में गर्म हवा के साथ उत्पादित। पाश्चर ओवन एक दोहरी दीवार वाली कैबिनेट है जो थर्मल इन्सुलेशन के लिए बाहर एस्बेस्टस से सुसज्जित है। कैबिनेट के अंदर हैं धातु की अलमारियाँउन छिद्रों के साथ जिन पर रोगाणुरहित की जाने वाली सामग्री रखी जाती है। बिजली की हीटिंग। इन तापमानों तक पहुंचने (थर्मामीटर द्वारा नियंत्रित) के क्षण से 1-2 घंटे के लिए 160-180 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर नसबंदी की जाती है। सूखी गर्मी का उपयोग मुख्य रूप से कांच के बर्तनों को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है - पेट्री डिश, पिपेट, स्पैटुला (कागज में लपेटा हुआ), साथ ही टेस्ट ट्यूब और फ्लास्क। यह तकनीक विश्वसनीय है - सूक्ष्मजीवों के गैर-बीजाणु और बीजाणु रूप मर जाते हैं। कागज में लपेटकर और कीटाणुरहित करके, सामग्री को संग्रहीत किया जा सकता है।

4. प्रवाहित भाप नसबंदी. गर्म आचरण किया नम हवाकोच तंत्र में. कोच उपकरण (बॉयलर) एक धातु सिलेंडर है, जो पैरों पर हो सकता है और लिनोलियम से ढका हो सकता है। उपकरण में इतना पानी डाला जाता है कि वह कगार तक न पहुंचे, जिस पर छेद वाला एक धातु का घेरा रखा जाता है और उसके ऊपर कीटाणुरहित करने वाली सामग्री रख दी जाती है। उपकरण को शंक्वाकार ढक्कन के साथ कसकर बंद कर दिया जाता है और भाप को बाहर निकालने और आग पर गर्म करने के लिए बीच में एक छेद होता है। जब पानी उबलता है, तो ढक्कन के छेद से लगभग 100 ºС के तापमान के साथ गर्म जल वाष्प एक मजबूत धारा में "प्रवाह" करेगा। इस क्षण से, नसबंदी का प्रारंभ समय नोट किया जाता है। बहती भाप से रोगाणुनाशन 45 मिनट से 1.5 घंटे तक चलता है, जो निर्जलित की जाने वाली सामग्री की मात्रा पर निर्भर करता है। ऐसे पोषक मीडिया को स्टरलाइज़ करें जिसे 100 डिग्री सेल्सियस से ऊपर गर्म नहीं किया जा सकता है, उदाहरण के लिए, एमपीजी (100 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान पर यह द्रवीभूत हो जाता है और जमता नहीं है)। नसबंदी की यह विधि पूरी तरह से विश्वसनीय नहीं है - सूक्ष्मजीवों के केवल वानस्पतिक रूप पूरी तरह से नष्ट हो जाते हैं, लेकिन बीजाणु संरक्षित रहते हैं। कोच तंत्र में मीडिया की पूर्ण नसबंदी प्राप्त करने के लिए, आंशिक नसबंदी का उपयोग किया जाता है।

5. दबाव में भाप नसबंदी (आटोक्लेविंग)।यह एक आटोक्लेव में संतृप्त जल वाष्प के साथ किया जाता है। आटोक्लेव विभिन्न डिज़ाइनों में आता है। ऊर्ध्वाधर आटोक्लेव एक विशाल डबल-दीवार वाला बॉयलर है, जो बाहर की तरफ एक धातु आवरण से घिरा होता है, जिसमें एक भारी टिका हुआ ढक्कन होता है जो बॉयलर से कसकर जुड़ा होता है। बॉयलर के निचले भाग में एक फ़नल और एक नल होता है जिसके माध्यम से आंतरिक बॉयलर और आवरण के बीच खाली जगह में पानी डाला जाता है। निष्फल की जाने वाली सामग्री को बॉयलर के निचले भाग में रखा जाता है, ढक्कन को कसकर कस दिया जाता है, और विद्युत ताप चालू कर दिया जाता है। जब पानी उबलता है, तो भाप भीतरी बॉयलर में चली जाती है। आटोक्लेव में दबाव बढ़ जाता है और साथ ही तापमान भी बढ़ जाता है। जब दबाव नापने का यंत्र दिखाता है कि बॉयलर में दबाव निर्दिष्ट मूल्य तक पहुंच गया है, तो नसबंदी के प्रारंभ समय को चिह्नित करें। सुरक्षा वाल्व का उपयोग करके दबाव को एक निश्चित स्तर पर बनाए रखा जाता है।

आमतौर पर प्रयोगशाला अभ्यास में, दबाव नसबंदी 1.5-2 एटीएम और लगभग 115-120 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर की जाती है।

20-30 मि. नसबंदी का समय समाप्त होने के बाद, हीटिंग बंद कर दिया जाता है, भाप वाल्व खोला जाता है और भाप निकल जाती है। पानी के साथ पोषक तत्व मीडिया एमपीबी, एमपीए, कांच के बर्तनों को दबाव में भाप से निष्फल किया जाता है। ड्रेसिंग, सर्जिकल उपकरण, आदि। ऑटोक्लेविंग नसबंदी का एक तेज़ और विश्वसनीय तरीका है, जो सभी प्रकार के सूक्ष्मजीवों को मारता है, यहां तक कि सबसे प्रतिरोधी बीजाणुओं को भी।

6. पाश्चुरीकरण।आंशिक नसबंदी की इस विधि का नाम फ्रांसीसी वैज्ञानिक एल. पाश्चर के नाम पर रखा गया है जिन्होंने इसे प्रस्तावित किया था। विधि यह है कि एक बाँझ कंटेनर में डाला गया तरल पानी के स्नान में 60-90 ºС के तापमान पर गरम किया जाता है

10-30 मिनट. तरल मीडिया के लिए उपयुक्त जो उन्हें बदलता है भौतिक रासायनिक विशेषताएँउच्च तापमान पर. वे दूध, क्रीम, वाइन, बीयर, जूस आदि को पास्चुरीकृत करते हैं। साथ ही, उत्पादों के विटामिन और स्वाद संरक्षित रहते हैं। पाश्चुरीकृत उत्पादों को लंबे समय तक संग्रहीत नहीं किया जा सकता है, क्योंकि इस नसबंदी विधि से सूक्ष्मजीवों के केवल वानस्पतिक रूप मर जाते हैं, जबकि बीजाणु बने रहते हैं। प्रयोगशाला अभ्यास में, इस विधि का उपयोग मुख्य रूप से बीजाणु बनाने वाली प्रजातियों को गैर-बीजाणु बनाने वाली प्रजातियों से अलग करने के लिए किया जाता है।

7. आंशिक नसबंदी. यह कई चरणों में निष्फल की जाने वाली सामग्री के प्रसंस्करण पर आधारित है। फ्रैक्शनल को कोच उपकरण में बहती भाप के साथ उबालना या निर्जलीकरण किया जा सकता है। आमतौर पर, बताए गए तरीकों में से किसी एक का उपयोग करके प्रतिदिन 3 दिन, 30 मिनट के लिए नसबंदी की जाती है, और ब्रेक के दौरान मीडिया को कमरे के तापमान पर छोड़ दिया जाता है। ऐसा बीजाणुओं को वानस्पतिक रूपों में विकसित करने और बाद के उपचारों के दौरान उनके विनाश को भड़काने के लिए किया जाता है, जिससे इन तकनीकों की विश्वसनीयता बढ़ जाती है।

8. टिंडलाइज़ेशन।यह एक प्रकार का फ्रैक्शनल स्टरलाइजेशन (फ्रैक्शनल पास्चुरीकरण) है। इस तकनीक का नाम अंग्रेजी वैज्ञानिक डी. टाइन्डल के नाम पर रखा गया है जिन्होंने इसे प्रस्तावित किया था। इसे 1 घंटे के लिए 56-58 ºС के तापमान पर पानी के स्नान में किया जाता है, 24 घंटों के बाद 5-7 बार दोहराया जाता है। हीटिंग के बीच के अंतराल में, सामग्री को कमरे के तापमान पर रखा जाता है। टाइन्डालाइज़ेशन पोषक मीडिया पर किया जाता है जिसमें सूक्ष्मजीवों की कमी होती है और इसमें ऐसे पदार्थ भी होते हैं जो 60 डिग्री सेल्सियस (प्रोटीन, विटामिन) से ऊपर के तापमान पर आसानी से नष्ट हो जाते हैं और विकृत हो जाते हैं। ये रक्त सीरम, अंडे आदि हैं। टाइन्डलाइज़ेशन के परिणामस्वरूप, सूक्ष्मजीवों का पूर्ण विनाश होता है।