Pasteurofen. Hochtemperatursterilisation. Physikalische Sterilisationsmethode

Kalzinierung im Feuer. Dies ist eine zuverlässige Sterilisationsmethode, deren Einsatz jedoch aufgrund der Beschädigung der Gegenstände begrenzt ist. Auf diese Weise werden bakteriologische Schleifen sterilisiert.

Trockensterilisation Fieber. Durchgeführt in einem Pasteurofen (Sehne ------

Backofen) bei einer Temperatur von 160-170°C 1 Stunde lang backen. Mit dieser Methode werden Laborgläser, in Papier eingewickelte Pipetten und mit Wattestopfen verschlossene Reagenzgläser sterilisiert. Bei Temperaturen über 170 °C beginnt die Verkohlung von Papier, Watte und Gaze.

Dampfsterilisation unter Druck (Autoklavieren). Die universellste Sterilisationsmethode. Die Durchführung erfolgt in einem Autoklaven – einem Wasser-Dampf-Sterilisator. Das Funktionsprinzip des Autoklaven basiert auf der Abhängigkeit des Siedepunkts von Wasser vom Druck.

Der Autoklav ist ein doppelwandiger Metallkessel mit hermetisch verschlossenem Deckel. Wasser wird in den Boden des Autoklaven gegossen, die zu sterilisierenden Gegenstände in die Arbeitskammer gelegt und der Deckel geschlossen, ohne ihn vorher festzuschrauben. Schalten Sie die Hitze ein und bringen Sie das Wasser zum Kochen. Der entstehende Dampf verdrängt Luft aus der Arbeitskammer, die durch das geöffnete Auslassventil austritt. Wenn die gesamte Luft verdrängt ist und ein kontinuierlicher Dampfstrom aus dem Wasserhahn austritt, wird der Wasserhahn geschlossen und der Deckel verschlossen. Über ein Manometer wird der Dampf auf den gewünschten Druck gebracht. Die Temperatur des Dampfes hängt vom Druck ab: Bei normalem Atmosphärendruck steht die Nadel des Manometers auf 0 atm. - Dampftemperatur 100°C, bei 0,5 atm. - 112°C, bei 1 atm. -121°C, bei 1,5 atm. - 127°C, bei 2 atm. - 134°C. Schalten Sie am Ende der Sterilisation den Autoklav aus, warten Sie, bis der Druck abfällt, lassen Sie nach und nach Dampf ab und öffnen Sie den Deckel. Typischerweise bei einem Druck von 1 atm. innerhalb von 20-40 Minuten werden einfache Nährmedien und Lösungen, die keine Proteine ​​und Kohlenhydrate enthalten, sterilisiert, Dressing, Leinen. Zu sterilisierende Materialien müssen dampfdurchlässig sein. Beim Sterilisieren großer Materialmengen ( chirurgische Materialien) Die Zeit wird auf 2 Stunden erhöht. Bei einem Druck von 2 atm. Desinfizieren Sie pathologisches Material und verbrauchte mikrobielle Kulturen.

Zuckerhaltige Nährmedien können nicht bei 1 atm sterilisiert werden, da sie karamellisieren, daher werden sie einer fraktionierten Sterilisation mit fließendem Dampf oder einer Autoklavierung bei 0,5 atm unterzogen.

Zur Kontrolle des Sterilisationsregimes werden biologische und physikalische Methoden eingesetzt. Die biologische Methode basiert darauf, dass gleichzeitig mit dem zu sterilisierenden Material Sporen von Bacillus stearothermophilus eingebracht werden, die bei 121°C in 15 Minuten absterben. Nach der Sterilisation dürfen auf dem Nährmedium keine Sporen mehr wachsen. Physikalische Methode basiert auf der Verwendung von Stoffen, die einen bestimmten Schmelzpunkt haben, zum Beispiel Schwefel (119°C), Benzoesäure (120°C). Verschlossene Röhrchen, die die mit Trockenfarbstoff (Fuchsin) vermischte Substanz enthalten, werden zusammen mit dem zu sterilisierenden Material in einen Autoklaven gegeben. Bei ausreichender Temperatur im Autoklaven schmilzt die Substanz und nimmt die Farbe des Farbstoffs an.

Fließfähige Sterilisation Die Bedampfung erfolgt in einer Koch-Apparatur oder in einem Autoklaven bei abgeschraubtem Deckel und geöffnetem Auslassventil. Das Wasser in der Apparatur wird auf 100°C erhitzt. Der entstehende Dampf durchdringt das eingebettete Material und sterilisiert es. Eine einzige Behandlung bei 100 °C tötet die Sporen nicht ab. Daher wird eine fraktionierte Sterilisationsmethode verwendet – 3 Tage hintereinander für 30 Minuten, dazwischen einen Tag lang stehen lassen Zimmertemperatur. Durch die Erwärmung auf 100 °C kommt es zu einer thermischen Aktivierung der Sporen, wodurch diese bis zum nächsten Tag in vegetative Formen keimen und beim zweiten und dritten Erhitzen absterben. Dadurch können nur Nährmedien mit strömendem Dampf sterilisiert werden, denn Damit Sporen keimen können, ist die Anwesenheit von Nährstoffen erforderlich.

Es handelt sich um einen doppelwandigen Metallzylinder, der außen mit einem Metallgehäuse abgedeckt ist. Es wird mit einem massiven Deckel mittels mehrerer Schrauben hermetisch verschlossen. Es ist mit einem Manometer mit Sicherheitsventil und einem Dampfventil ausgestattet.

Vor der Sterilisation wird destilliertes Wasser durch einen Trichter mit Wassermessglas bis zur Markierung auf dem Gehäuse in den Autoklaven gegossen. Das zu sterilisierende Material wird in die Sterilisationskammer gefüllt, mit einem Deckel fest verschlossen, aufgeschraubt und die Heizquelle eingeschaltet. In diesem Fall bleibt das Dampfventil geöffnet. Der beim Sieden entstehende Dampf strömt zwischen den Wänden des Autoklaven hindurch und gelangt durch die Löcher in der Innenwand in die Kammer. Beim Erhitzen tritt durch das Dampfventil zunächst Luft und dann Dampf aus dem Autoklaven aus. Die Freisetzung eines kontinuierlichen Trockendampfstroms zeigt die vollständige Verdrängung der Luft aus dem Autoklaven an: Der Hahn wird geschlossen, und von diesem Moment an beginnt der Druck im Autoklaven allmählich anzusteigen, die Nadel am Manometer steigt an. Als Beginn der Sterilisation gilt der Zeitpunkt, an dem die Manometernadel den gewünschten Druck erreicht.

Abb. 3

Der Manometerwert entspricht bestimmte Temperatur Dampf im Autoklaven: 0,50 MPa – 112 °C, 0,1 MPa – 120, 0,15 MPa – 127, 0,2 MPa – 134 °C.

Material in einem Autoklaven wird meist 20–30 Minuten lang bei 0,1 MPa sterilisiert. Schalten Sie am Ende der Sterilisation die Heizquelle aus (die Nadel des Manometers erreicht allmählich Null). Öffnen Sie anschließend das Dampfventil und lassen Sie den restlichen Dampf ab. Anschließend den Deckel vorsichtig abschrauben und öffnen. Nach vollständiger Abkühlung das sterilisierte Material entnehmen.

Mit einem Autoklaven können Geschirr, Instrumente, Kulturmedien (außer Gelatine und Medien mit Kohlenhydraten), Verbände usw. sterilisiert werden. Bei der Arbeit müssen Sie die Sicherheitsregeln beachten. Arbeiten dürfen Personen, die über eine Bescheinigung über die Berechtigung zur Nutzung eines Autoklaven verfügen. Die Funktionsfähigkeit des Autoklaven wird durch die Kesselinspektion überprüft.

Der Koch-Apparat (Abb. 4) ist ein Metallzylinder, der außen mit Material (Linoleum, Asbest) ausgekleidet ist, das die Wärme nicht gut leitet. Wasser wird in den Boden gegossen und das Sterilisationsmaterial wird oben auf den Ständer gelegt. Verschlossen wird das Gerät mit einem konischen Deckel, der Löcher für ein Thermometer und einen Dampfauslass aufweist. Unten befindet sich ein Wasserhahn zum Ablassen des Wassers. Die Sterilisation erfolgt mit strömendem Dampf bei 100 °C für 30-60 Minuten. In diesem Modus sterben vegetative Zellen sporenbildender und nicht sporenbildender Formen von Mikroben ab. Durch die fraktionierte Sterilisation (dreimal) für 30–60 Minuten über drei Tage im Abstand von 18–20 Stunden können Sie Bedingungen für die Keimung von Sporen in vegetative Zellen schaffen und diese entfernen. In den Zeitintervallen zwischen der Sterilisation keimen die Sporen und sterben beim anschließenden Erhitzen ab. Das Koch-Gerät sterilisiert Materialien, die Temperaturen über 100 °C nicht standhalten (Gelatine, Milch, Kohlenhydratmedien usw.).

Proteinmedien und Blutserum, die keine Temperaturen von 100 °C vertragen, werden bei 56–58 °C im Wasserbad fraktioniert sterilisiert.

Trockenschrank(Pasteurofen) (Abb. 5) ist ein doppelwandiger Metallschrank, der oben mit Asbest bedeckt ist. Die obere Wand hat Löcher für ein Thermometer und Belüftung. Erhitzte Luft steigt von unten zwischen den Wänden auf und gelangt durch die obere Öffnung in den Schrank, wo das zu sterilisierende Material auf den Regalen platziert wird. Die Sterilisation erfolgt mit trockener Hitze bei 150 °C für 2 Stunden, bei 165–170 °C – 45 Minuten, bei 180 °C – 15 Minuten. Glaswaren werden in einem Pasteurofen sterilisiert. Nach der Sterilisation wird der Schrank vom Gerät getrennt Heizquelle angeschlossen und erst nach vollständiger Abkühlung geöffnet.

Bakterienfilter Wird zum Sterilisieren von Flüssigkeiten ohne Erhitzen verwendet. Dazu gehören Chamberlant-, Berkefeld-Kerzen und Seitz-Asbestfilter (Platten).

Filterkerzen (Abb. 6) sind Hohlzylinder aus feinporösen Stoffen: Kaolin mit einer Beimischung Quarzsand(Chamberlant-Kerzen) und Infusorienerde (Berkefeld-Kerzen). Chamberlant-Kerzen haben verschiedene Größen Poren, durch die Mikroben gelangen. Kerzen, die große Bakterien durchlassen, werden mit den Buchstaben L9, L1(bis), L3, mittlere mit L5, L7 und die kleinsten mit L9 bezeichnet. L11 , L13 Berkefeld-Kerzen werden durch Porosität gekennzeichnet W, N, V(Kerzen mit der Marke U haben die größten Poren).

Seitz-Filter sind Asbestplatten in verschiedenen Größen. Bei der Montage des Gerätes zur Sterilisation wird die Platte auf das dazwischen liegende Netz gelegt Metallscheiben(mit einem Loch in der Mitte), die mit Schrauben fest zusammengepresst werden. Der montierte Filter wird durch einen Stopfen in einen Kolben mit seitlichem Auslass (Bunsenkolben) und einem Gummischlauch eingeführt, in Papier eingewickelt und im Autoklaven bei 120 °C für 20–30 Minuten sterilisiert.

Um das Material zu filtern, erzeugen Sie in einem Bunsenkolben ein Vakuum, indem Sie einen Gummischlauch mit einem verdünnten Öl daran anschließen Hand pumpe Komovsky oder eine elektrische Vakuumpumpe.

Abschluss der Arbeiten. Mikroben werden bei optimalen Temperaturbedingungen kultiviert. Zu diesem Zweck verwenden Labore Luft- oder Wasserthermostate.

(Abb. 7) ist Metallschrank mit Doppelwänden, zwischen denen sich eine Wasser- oder Luftschicht befindet. Der äußere Teil des Thermostats ist mit einem Material bedeckt, das die Wärme schlecht leitet (Asbest, Linoleum).

Reis. 4, 5, 6.

Im Inneren des Thermostats befinden sich Regale zum Platzieren des Saatguts gewachsener Mikroorganismen. Eine konstante Temperatur im Thermostat wird mithilfe eines Thermostats aufrechterhalten, der in die obere Abdeckung des Thermostats eingebaut ist. Das Thermostatgerät basiert auf dem Prinzip der linearen Ausdehnung von Stoffen. Thermoregulatoren sind eine Legierung aus zwei beliebigen Metallen mit unterschiedlichen Wärmeausdehnungskoeffizienten (Messing, Zink) oder ein mit Alkohol, einer Mischung aus Alkohol und Äther, Quecksilber oder anderen Stoffen gefülltes Metall-„Kissen“, das bei einer bestimmten Temperatur sein Volumen ändert. Wenn sich der Thermostat über die festgelegte Norm erwärmt, dehnen sich die Metalle aus, die Kontakte öffnen sich und der weitere Wärmefluss wird automatisch verzögert. Nachdem die Temperatur gesunken ist, schaltet es sich ein elektrischer Strom und der Wärmefluss setzt sich fort.

In der Laborpraxis ist es bei der Arbeit mit Mikroorganismen notwendig, ständig Maßnahmen zu ergreifen, um sicherzustellen, dass das bei der Arbeit verwendete Geschirr, Nährmedien und Metallinstrumente keine Mikroben enthalten. Zu diesem Zweck kommen folgende Sterilisationsmethoden zum Einsatz:

Sterilisation mit überhitztem Dampf unter Druck;

Sterilisation mit strömendem Dampf;

Heißluftsterilisation;

Desinfektion.

Die beste Sterilisationsmethode besteht darin, verschiedene Gegenstände mit überhitztem Dampf zu behandeln spezielle Geräte- Autoklaven.

Autoklav- und Heißdampfsterilisation unter Druck

Autoklaven sind Kessel aus Metall (Stahl, Gusseisen oder Kupfer) mit Doppelwänden und einem massiven Deckel, der mit Schrauben und einer Gummidichtung hermetisch verschlossen ist. Je nach Heizsystem gibt es Dampf-, Elektro- und Feuerautoklaven (Abb. 42). Durch die Erzeugung von Hochdruck- und überhitztem Dampf bei einer Temperatur von 115–120 °C in einem Autoklaven können Sie sowohl vegetative Zellen als auch mikrobielle Sporen innerhalb von 20–30 Minuten zerstören.

In einem Autoklaven werden alle Gegenstände sterilisiert, die bei hohen Temperaturen nicht verderben: verschiedene Flüssigkeiten (Wasser, Nährmedien, die keine Kohlenhydratbestandteile enthalten), Glaswaren, Metallinstrumente, Watte, Gaze, Papier usw.

In Fällen, in denen einige Stoffe dem normalen Sterilisationsregime im Autoklaven nicht standhalten (insbesondere zuckerhaltige Nährmedien), werden sie im Autoklaven bei einer Temperatur von 112 °C für 20 Minuten sowie unter milderen Bedingungen sterilisiert.

Bei hohe Drückeüberhitzter Dampf im Autoklaven, die Heiztemperatur erhöht sich entsprechend; Dies führt zu einer Karamellisierung des Zuckers, der einigen Kulturmedien zugesetzt wird, wodurch die Medien für die Bestimmung der physiologischen Eigenschaften von Mikroben ungeeignet werden.

Der Druck im Autoklaven wird mit einem Manometer gemessen, das im Deckel oder Körper des Autoklaven angebracht ist. Bei übermäßigem Druckanstieg wird automatisch ein Sicherheitsventil aktiviert, das sich je nach Ausführung entweder am Deckel oder an der Seitenfläche der Autoklavenwand befindet. Ein aus dem Sicherheitsventil austretender Dampfstrahl weist mit einem Pfiff darauf hin, dass das Heizen beendet werden muss. Wenn das Erhitzen nicht gestoppt wird, kann der Autoklav explodieren.

Manchmal wird in einer speziellen Tasche am Deckel des Autoklaven ein Thermometer angebracht, mit dem die Sterilisationstemperatur gemessen wird. Im Inneren des Autoklaven befindet sich ein Ständer, unter dem Wasser durch ein Rohr mit Trichter außerhalb des Autoklaven gegossen wird. Darüber hinaus sind Autoklaven mit einem Hahn zum Ablassen von Dampf und Luft sowie einem Hahn zum Ausgießen von Wasser ausgestattet.

Für den Umgang mit einem Autoklaven während der Sterilisation gelten folgende Regeln: Das Gerät wird über einen Trichter und ein Rohr mit Wasser gefüllt, dessen Füllstand unterhalb des Ständers liegen sollte. Das zu sterilisierende Gut wird in spezielle Metallflaschen gefüllt und in einen Autoklaven gegeben. Der Deckel des Autoklaven ist aufgeschraubt.

Durch Öffnen des Hahns, damit Dampf und Luft entweichen können, beginnt das Erhitzen. Sobald das Wasser kocht, beginnt der entstehende Dampf, Luft aus dem Autoklaven zu verdrängen. Das Dampfauslassventil wird so lange geöffnet gehalten, bis trockener Dampf in einem kontinuierlichen Strom aus ihm austritt. Dies weist auf eine vollständige Entfernung der Luft aus dem Autoklaven hin. Dann wird der Hahn geschlossen. Dampf, der bei weiterer Erhitzung in immer größeren Mengen anfällt, erhöht den Druck im Autoklaven und gleichzeitig die Temperatur. Beim Arbeiten mit einem Autoklaven können Sie sich an der Tabelle der Zusammenhänge zwischen Dampfdruck und Temperatur (Tabelle 4) orientieren.

Nachdem die Nadel des Manometers erreicht ist der erforderliche Indikator Druck (die Temperatur im Autoklaven entspricht der akzeptierten Sterilisationstemperatur), stellen Sie die Heizung des Autoklaven so ein, dass der Druck für die erforderliche Zeit auf dem gleichen Niveau bleibt. Stoppen Sie am Ende der Sterilisation das Erhitzen. Wenn die Temperatur im Autoklaven sinkt und die Manometernadel auf Null fällt (der Druck im Autoklaven entspricht dem Atmosphärendruck), öffnen Sie vorsichtig das Dampfablassventil, lassen Sie den Dampf ab und entfernen Sie das Material, indem Sie den Deckel des Autoklaven öffnen. Es ist nicht möglich, das Dampfablassventil vorzeitig zu öffnen, bevor der Druck im Autoklaven abfällt. Ein starker Druckabfall in der Autoklavenkammer führt zu einem heftigen Sieden von Flüssigkeiten, die auf Temperaturen über 100 °C erhitzt werden, d. h. oberhalb des Siedepunkts bei normalem Atmosphärendruck. Heftig kochende Flüssigkeiten benetzen Wattestäbchen oder drücken sie sogar aus den Gefäßen – die Arbeit ist umsonst. Nährmedien verschlechtern sich, da sich aus der Luft leicht Mikroflora auf feuchten Pfropfen entwickelt, in das Innere eindringt und die Medien infiziert. Darüber hinaus ist das Öffnen eines Autoklaven mit erhöhtem Druck gefährlich für den Arbeiter.

Sobald die Manometernadel jedoch auf Null stehen bleibt, muss der Autoklav sofort geöffnet werden, da sonst Kondenswasser auf die Stopfen fließt und diese ebenfalls nass werden. Um eine Benetzung der Stopfen mit Kondenswasser zu vermeiden, werden diese vor der Sterilisation mit Papier abgedeckt.

In einen Autoklaven gegebene Materialien werden innerhalb von 20 bis 30 Minuten zuverlässig sterilisiert, wenn die Temperatur bei 120 °C gehalten wird, was einem Druck von 2 atm (19,61 * 10000 N/m2) oder einem Manometer von 1 atm über dem Normalwert entspricht. Auch zur Sterilisation von Medien mit strömendem Dampf kann ein Autoklav erfolgreich eingesetzt werden; in diesem Fall ist der Deckel des Autoklaven nicht aufgeschraubt.

Kochkessel und Dampfsterilisation

Der Koch-Kessel ist ein Zylinder aus verzinktem Blech oder Kupfer mit Doppelwänden und einem konischen helmförmigen Deckel (Abb. 43). In der Mitte des Deckels befindet sich ein Loch für ein Thermometer. Die Außenseite des Koch-Kessels ist mit einer Schicht bedeckt wärmeisolierendes Material: Asbest, Linoleum usw.

Im Inneren des Kessels ist eine Trennwand (Ständer) angebracht, die den Innenraum des Kessels in zwei Abschnitte unterteilt: einen oberen und einen unteren. Der untere Teil ist mit Wasser gefüllt, dessen Füllstand durch das Glas des Wasserzählers bestimmt wird: Wasser sollte den oberen Teil des Ständers nicht bedecken. Das zu sterilisierende Gut wird im oberen Teil des Kessels in übereinander gestellte Gittereimer gelegt. Nachdem sie den Kessel mit einem Deckel verschlossen haben, beginnen sie, das Wasser darin zu erhitzen. Als Beginn der Sterilisation gilt der Zeitpunkt, an dem das Thermometer 98-100°C anzeigt. Wenn kein Thermometer vorhanden ist, gilt als Beginn der Sterilisation der Moment, in dem Dampf kräftig aus dem Loch im Kesseldeckel austritt. Somit befinden sich die zu sterilisierenden Gegenstände während des Betriebs des Kessels immer in einem Dampfstrom.

Die Methode der Sterilisation mit fließendem Dampf wird aufgrund ihrer Einfachheit und Verfügbarkeit in der Laborpraxis häufig eingesetzt. Mit strömendem Dampf werden vor allem Nährmedien sterilisiert, deren Eigenschaften sich bei Erhitzung über 100°C verändern: Eiweiß, Kohlenhydrate und Gelatine. Für diese Umgebungen ist die Dampfsterilisationsmethode am besten geeignet.

Der Nachteil der Methode der Sterilisation mit fließendem Dampf ist ihre Dauer, da zur vollständigen Sterilisation des Mediums eine wiederholte Erhitzung im Kessel für eine bestimmte Zeit erforderlich ist – je nach Bedarf zwischen 20 Minuten und 1,5 Stunden (im Durchschnitt 30–45 Minuten). die Flüssigkeitsmenge in Abständen von 24 Stunden. Es wird empfohlen, die gesamte Zeitspanne zwischen dem Erhitzen des Mediums in einem Thermostat bei 25–30 °C zu halten.

Eine einzige Erhitzung in einem Koch-Kessel führt zum Tod nur vegetativer mikrobieller Zellen, Sporen können jedoch überleben. Wenn das sterilisierte Nährmedium unter günstigen Bedingungen (bei Raumtemperatur oder noch besser in einem Thermostat) aufbewahrt wird, keimen einige der verbleibenden Sporen und verwandeln sich am nächsten Tag in vegetative Zellen. Wiederholtes Erhitzen führt zum Absterben dieser neu entwickelten Zellen. Abschließend sorgt ein drittes Erhitzen nach einem Tag Lagerung des Mediums in einem Thermostat für vollständige Sterilität. Diese Methode wird fraktionierte Sterilisation genannt. IN praktische Arbeit Anstelle der Sterilisation mit strömendem Dampf im Koch-Kessel wird häufig die konventionelle Sterilisation in Autoklaven bei 112 °C und einem Gegendruck von 0,5 atm für 15–20 Minuten eingesetzt.

Trockenschrank und Heißluftsterilisation

In der Laborpraxis ist zur Sterilisation mikrobiologischer Glaswaren ein Trockenschrank oder der sogenannte Pasteurofen erforderlich. Das Konstruktionsprinzip des Trockenschranks und des Pasteurofens ist gleich. Es werden nur Öfen hergestellt rechteckige Form, und Trockenschränke können nicht nur eine rechteckige, sondern auch eine zylindrische Form haben (Abb. 44 und 45). Bei diesen Geräten erfolgt die Sterilisation mit Heißluft (trockene Hitze) bei einer Temperatur von 160 °C für 1 Stunde oder bei einer Temperatur von 150 °C für 2 Stunden.

Sowohl Pasteuröfen als auch Trockenöfen sind doppelwandige Hohlraumgeräte mit dicht schließenden Doppeltüren. Außen sind sie zur Wärmedämmung mit einer Asbestschicht überzogen. Zirkuliert zwischen den Wänden heiße Luft, deren Erwärmung entweder durch elektrische Spiralen oder Gasbrenner erfolgt. Im Inneren des Schranks befinden sich mehrere (normalerweise zwei oder drei) löchrige Regale. Oben im Schrank befinden sich zwei Öffnungen: eine für das Thermometer und die andere für die Belüftung. Am praktischsten sind elektrische Trockenschränke.

IN Trockenschränke Das neueste Design bietet vier Heizstufen, die durch einen speziellen Regler an der Seitenwand des Schranks aktiviert werden können. Der gewünschte Heizgrad wird durch Einschalten von eins, zwei, drei oder allen vier erreicht elektrische Spiralen, und die Reihenfolge des Einschaltens der Spiralen kann beliebig sein.

Neben Glaswaren können Sie auch Mull und Watte in Trockenschränken sterilisieren, besser ist jedoch die Verarbeitung im Autoklaven, da sie bei einer Temperatur von 160 °C gelb werden. Gummiprodukte können nicht im Trockenschrank sterilisiert werden, da sie hohen Temperaturen nicht standhalten – sie werden spröde und verderben. Flüssigkeiten sieden bei 150-160 °C und verändern ihre chemische Zusammensetzung.

Um eine spätere Kontamination des Sterilguts durch Mikroben aus der Luft zu vermeiden, wird es vor der Sterilisation in Papier eingewickelt. Petrischalen sind jeweils 2 Stück in Papier eingewickelt, so dass keine Lücken in der Verpackung entstehen. Glasröhrchen und Pipetten werden ebenfalls in Papier eingewickelt, zunächst einzeln und dann in Packungen zu 10–20 Stück. Die Verpackung von Röhrchen und Pipetten muss äußerst sorgfältig erfolgen, um sie vollständig zu schützen äußere Oberfläche aus der Kommunikation mit der Luft. Vor der Sterilisation mit Heißluft werden Kolben, Reagenzgläser und Flaschen mit Baumwollstopfen und Papierkappen verschlossen.

Lassen Sie die Temperatur im Trockenschrank nicht über 170 °C ansteigen, da bei dieser Temperatur die Wattestäbchen braun werden und die Papierhüllen spröde und sogar verkohlt werden. Als Beginn der Sterilisation gilt der Zeitpunkt, an dem das Thermometer 150-160 °C anzeigt. Nach Ablauf der für die Sterilisation erforderlichen Zeit wird das Erhitzen beendet. Um das Geschirr vor Rissen zu schützen, müssen Sie nur trockenes Geschirr sterilisieren und den Schrank nach der Sterilisation erst öffnen, wenn die Temperatur darin auf 50–70 °C sinkt. Kleine Laborgegenstände wie Platinösen, Nadeln, Pinzetten, Scheren usw. können durch einfaches Kalzinieren auf der Flamme eines Gasbrenners (oder einer Alkohollampe) sterilisiert werden.

Desinfektion

Auf die Desinfektion in einem mikrobiologischen Labor muss sehr oft zurückgegriffen werden. Die am häufigsten verwendeten Desinfektionsmittel sind die folgenden: 3-5 %ige Lösung von Karbolsäure und Lösungen anderer höherer Phenole, 50-70 %ige Lösung Ethylalkohol, die gleiche Konzentration an Butylalkohol, 4 % Formaldehydlösung, 1-2 % Lösungen von Chloroform und Toluol, 0,5 % Chloraminlösung usw.

In mikrobiologischen Labors von Konservenfabriken werden Tischoberflächen, Geschirr, Böden und Wände von Räumlichkeiten desinfiziert. Zur Desinfektion von Tischoberflächen können Sie nicht nur Ethylalkohollösungen, sondern auch Karbolsäurelösungen verwenden.

Desinfektion Abwassergeräte in Konservenfabriken und anderen Lebensmittelunternehmen Hergestellt aus einer 5-10%igen Bleichlösung. Zur Desinfektion des Kreislaufs Glasbehälter Wird in Konservenfabriken verwendet Chlorwasser, mit mindestens 100 mg Aktivchlor pro Liter. Um eine solche Lösung herzustellen, nehmen Sie Bleichmittel und mischen Sie es mit einer kleinen Menge Wasser, bis eine dicke Masse entsteht. milchig. Diese Mischung wird zu Wasser gegeben, gründlich gerührt und einen Tag stehen gelassen. Bleichpulver reagiert unter Bildung von Calciumoxidhydrat – Ca(OH)2 – und aktivem Chlor. Ca(OH)2 setzt sich am Boden ab, die Lösung über dem Sediment erweist sich nach der Klärung als transparent und grünlich gefärbt. Das Einweichen des Behälters in dieser Lösung dauert 10 Minuten. Nach dem Chlorieren muss der Behälter gründlich unter fließendem Wasser gewaschen werden.

Die Sterilisation mit trockener Hitze wird durchgeführt Trockenheizöfen(Pasteurofen). Trockene Hitze sterilisiert Laborglaswaren. Es wird lose in den Ofen geladen, damit das Material gleichmäßig erhitzt wird. Schließen Sie die Schranktür fest, schalten Sie das elektrische Heizgerät ein, bringen Sie die Temperatur auf 160–165 °C und sterilisieren Sie es 1 Stunde lang. Schalten Sie am Ende der Sterilisation die Heizung aus, aber öffnen Sie die Schranktür erst, wenn der Ofen abgekühlt ist (andernfalls). kalte Luft führt zu Rissen im Geschirr). Sterilisationsmodus: 160 °C – 60 Min., 180 °C – 15 Min., 200 °C – 5 Min. Flüssigkeiten, Nährmedien, Gummi und Kunststoffe können nicht mit trockener Hitze sterilisiert werden.

Druckdampfsterilisation Verbände, chirurgische Wäsche, chirurgische Instrumente, Kulturmedien, Laborglaswaren, infiziertes Material und Injektionslösungen werden behandelt. Das Material wird in Behälter (Kisten) gefüllt. Am Boden des Bix werden Stoffpolster angebracht, um nach der Sterilisation Feuchtigkeit aufzunehmen. Die Sterilität des Materials bleibt 3 Tage lang erhalten. Infiziertes Material in Schalen und Reagenzgläsern wird in Metallbehältern mit Deckel sterilisiert.

Die Dampfsterilisation unter Druck erfolgt im Autoklaven. Mit einer einzigen Behandlung sterben sowohl vegetative als auch sporenförmige Bakterienformen ab. Dampf unter Druck sterilisiert Nährmedien, mit Ausnahme von Medien mit nativen Proteinen, Flüssigkeiten und Geräten mit Gummiteilen. Einfache Medien (MPA, MPB) werden 20 Minuten lang bei 120 °C (1 atm) sterilisiert. Medien, die native Proteine ​​und Kohlenhydrate enthalten, können bei dieser Temperatur nicht sterilisiert werden, da es sich um Substanzen handelt, die sich durch Erhitzen leicht verändern. Medien mit Kohlenhydraten werden fraktioniert bei 100 °C oder im Autoklaven bei 112 °C (5 atm) für 10–15 Minuten sterilisiert. Verschiedene Flüssigkeiten, Geräte mit Gummischläuchen, Stopfen, Bakterienkerzen und Filter werden 20 Minuten lang bei 120 0 C (1 atm) sterilisiert.

Infiziertes Material (in Reagenzgläsern, Bechern) wird in spezielle Metalleimer oder Tanks mit Löchern für das Eindringen von Dampf gegeben und 1 Stunde lang bei 126 °C (1,5 atm) sterilisiert. Instrumente werden auch nach der Arbeit mit Sporenbakterien sterilisiert.

Es gibt 2 Sterilisationsmodi:

1. Strömender Dampf in einem Autoklaven oder in einem Koch-Apparat bei abgeschraubtem Deckel und geöffnetem Auslassventil, wenn sich die antibakterielle Wirkung des Dampfes gegen vegetative Formen zeigt. Auf diese Weise werden Medien mit Vitaminen und Kohlenhydraten, Harnstoff, Milch, Kartoffeln und Gelatine sterilisiert. Zur vollständigen Entsterilisation wird an 3 aufeinanderfolgenden Tagen eine fraktionierte Sterilisation (bei 100 °C) für 20–30 Minuten verwendet. Es tötet auch Sporen ab.
2. Am häufigsten wird die Druckdampfsterilisation durchgeführt effektive Methode Entbehrung. Verbandsmaterial und Wäsche werden bei 1 atm sterilisiert. 15–20 Minuten, infiziertes Material bei 1,5–2 atm für 20–25 Minuten.

Sterilisation

Unter Sterilisation versteht man die Sterilisation, also die vollständige Freigabe von Gegenständen Umfeld aus Mikroorganismen und deren Sporen.

Die Sterilisation wird auf verschiedene Arten durchgeführt:

1) physikalisch (Einwirkung von hohen Temperaturen, UV-Strahlen, Verwendung von Bakterienfiltern);

2) chemisch (Verwendung verschiedener Desinfektionsmittel, Antiseptika);

3) biologisch (Einsatz von Antibiotika).

In der Laborpraxis werden üblicherweise physikalische Sterilisationsmethoden eingesetzt.

Die Möglichkeit und Durchführbarkeit der Anwendung dieser oder jener Sterilisationsmethode wird durch die Eigenschaften des zu sterilisierenden Materials sowie seine physikalischen und chemischen Eigenschaften bestimmt.

Physikalische Methoden

Das Kalzinieren in einer Brennerflamme oder das Flambieren ist eine Sterilisationsmethode, bei der das Objekt vollständig sterilisiert wird, da sowohl vegetative Zellen als auch mikrobielle Sporen absterben. Typischerweise werden bakteriologische Impfösen, Spatel, Pipetten, Objektträger und Deckgläser sowie kleine Instrumente kalziniert. Scheren und Skalpelle sollten nicht durch Erhitzen sterilisiert werden, da unter dem Einfluss von Feuer die Schnittfläche stumpf wird.

Sterilisation mit trockener Hitze

Die Sterilisation mit trockener Hitze oder Heißluft erfolgt in Pasteuröfen (Trockenöfen). Der Pasteurofen ist ein doppelwandiger Schrank aus hitzebeständigen Materialien – Metall und Asbest. Beheizen Sie den Schrank mit Gasbrennern oder elektrischen Heizgeräten. Elektrisch beheizte Schränke sind mit Reglern ausgestattet, um die erforderliche Temperatur sicherzustellen. Um die Temperatur zu kontrollieren, wird ein Thermometer in das Loch in der oberen Wand des Schranks eingesetzt.

Flüssigkeiten (Nährmedien, isotonische Kochsalzlösung etc.), Gegenstände aus Gummi und Kunststoffen können nicht mit trockener Hitze sterilisiert werden, da Flüssigkeiten kochen und auslaufen und Gummi und Kunststoffe schmelzen.

Sterilisation durch Kochen

Kochen ist eine Sterilisationsmethode, die Sterilität gewährleistet, sofern sich im sterilisierten Material keine Sporen befinden. Wird zur Verarbeitung von Spritzen, Instrumenten, Glas- und Metallutensilien, Gummischläuchen usw. verwendet. Die Dampfsterilisation unter Druck erfolgt in einem Autoklaven. Bei dieser Sterilisationsmethode werden die zu sterilisierenden Materialien gesättigtem Wasserdampf bei einem Druck über dem Atmosphärendruck ausgesetzt. Als Ergebnis einer solchen Sterilisation sterben sowohl vegetative als auch sporenförmige Formen von Mikroorganismen mit einer einzigen Behandlung ab. Ein Autoklav (Abb. 12) ist ein massiver Kessel, der außen mit einem Metallgehäuse abgedeckt und mit einem Deckel hermetisch verschlossen ist, der mit Scharnierschrauben fest mit dem Kessel verschraubt ist.

Die Temperatur und Dauer des Autoklavierens von Nährmedien wird durch deren Zusammensetzung bestimmt, die im Rezept zur Herstellung des Nährmediums angegeben ist. Beispielsweise werden einfache Medien (Fleisch-Pepton-Agar, Fleisch-Pepton-Brühe) 20 Minuten lang bei 120 °C (1 atm) sterilisiert. Bei dieser Temperatur ist es jedoch unmöglich, Medien zu sterilisieren, die native Proteine, Kohlenhydrate und andere Substanzen enthalten, die sich durch Erhitzen leicht verändern. Medien mit Kohlenhydraten werden fraktioniert bei 100 °C oder in einem Autoklaven bei 112 °C (0,5 atm) für 10–15 Minuten sterilisiert. Verschiedene Flüssigkeiten, Geräte mit Gummischläuchen, Stopfen, Bakterienkerzen und Filter werden 20 Minuten lang bei 120 °C (1 atm) sterilisiert.

Die Sterilisation mit strömendem Dampf erfolgt in einem Koch-Gerät. Diese Methode wird verwendet, wenn sich das zu sterilisierende Objekt bei einer Temperatur über 100 °C verändert. Nährmedien, die Harnstoff, Kohlenhydrate, Milch, Kartoffeln, Gelatine usw. enthalten, werden mit fließendem Dampf sterilisiert.

Der Koch-Apparat (Kessel) ist ein Metallzylinder, der außen (um die Wärmeübertragung zu reduzieren) mit Filz oder Asbest ausgekleidet ist. Der Zylinder ist mit einem konischen Deckel verschlossen, der über ein Loch zum Entweichen des Dampfes verfügt. Im Inneren des Zylinders befindet sich ein Ständer, bis zu dessen Höhe Wasser gegossen wird. Auf den Ständer wird ein Eimer mit Loch gestellt, in den das zu sterilisierende Material gegeben wird. Der Koch-Apparat wird mit Gas oder Strom beheizt. Die Sterilisationszeit wird ab dem Moment der kräftigen Dampfabgabe an den Deckelrändern und am Dampfaustritt gezählt. 30-60 Minuten lang sterilisieren. Am Ende der Sterilisation wird das Erhitzen gestoppt. Nehmen Sie den Materialeimer aus dem Gerät und lassen Sie ihn bis zum nächsten Tag bei Raumtemperatur stehen. Die Erwärmung erfolgt 3 Tage hintereinander bei einer Temperatur von 100° C für 30-60 Minuten. Diese Methode wird fraktionierte Sterilisation genannt. Beim ersten Erhitzen sterben vegetative Formen von Mikroben ab, während Sporenformen erhalten bleiben. Innerhalb eines Tages gelingt es den Sporen zu keimen und sich in vegetative Formen zu verwandeln, die am zweiten Tag der Sterilisation absterben. Da es möglich ist, dass einige der Sporen keine Zeit zum Keimen hatten, wird das Material weitere 24 Stunden aufbewahrt und anschließend eine dritte Sterilisation durchgeführt. Eine Sterilisation mit fließendem Dampf in einem Koch-Gerät ist nicht erforderlich besondere Kontrolle, da der Indikator ordnungsgemäße Bedienung Das Gerät gewährleistet die Sterilität der vorbereiteten Kulturmedien. Sie können die Sterilisation auch mit strömendem Dampf in einem Autoklaven bei abgeschraubtem Deckel und geöffnetem Auslassventil durchführen.

Sterilisation durch ultraviolette Bestrahlung

Die Sterilisation mit UV-Strahlen erfolgt mit Sonderinstallationen- bakterizide Lampen. UV-Strahlen haben eine hohe antimikrobielle Aktivität und können nicht nur zum Absterben vegetativer Zellen, sondern auch von Sporen führen. UV-Bestrahlung wird zur Luftentkeimung in Krankenhäusern, Operationssälen, Kindereinrichtungen etc. eingesetzt. In einem mikrobiologischen Labor wird vor der Arbeit eine Box mit UV-Strahlen behandelt.

Chemische Methoden

Diese Art der Sterilisation wird in begrenztem Umfang eingesetzt und dient hauptsächlich der Verhinderung einer bakteriellen Kontamination von Kulturmedien und immunbiologischen Präparaten (Impfstoffe und Seren).

Den Nährmedien werden am häufigsten Substanzen wie Chloroform, Toluol und Ether zugesetzt. Ist es erforderlich, das Medium von diesen Konservierungsstoffen zu befreien, wird es im Wasserbad auf 56 °C erhitzt (die Konservierungsstoffe verdampfen).

Zur Konservierung von Impfstoffen und Seren werden Merthiolat, Borsäure, Formaldehyd usw. verwendet.

Biologische Sterilisation

Die biologische Sterilisation basiert auf dem Einsatz von Antibiotika. Diese Methode wird zur Kultivierung von Viren verwendet.

B. Detaillierte Technologie zur Herstellung von Rindermolke in den Schlachthöfen von Lyon

Von 1.000 Tieren wurde bereits Blut abgenommen, das Serum in Flaschen abgefüllt und kostenlos an fast 20.000 Kinder verteilt.

Damit ist es gezeigt industrielle Produktion Eine Molkebereitstellung im Schlachthof unter Einhaltung aseptischer Regeln und Hygienevorschriften ist möglich.

Das Serotherapieunternehmen bietet keine zusätzlichen Garantien – es ist nicht berechtigt, eine Autopsie am Spendertier durchzuführen.

Die in unserer Produktion verwendete Technologie scheint weniger aseptisch zu sein klassische Methode. Es hat aber einen großen Geschwindigkeitsvorteil, da das Serum bereits am Tag der Blutentnahme vollständig hergestellt ist.

Wenn die aktuellen Umstände uns dazu veranlasst haben, das Serum in einem Schlachthof herzustellen, ist klar, dass dies eine vorübergehende Maßnahme ist, da Hämatogen- und medizinische Seren nur in einem spezialisierten Institut hergestellt werden können.

Tierauswahl. In Lyon wählen Dr. Guier, der Cheftierarzt des Schlachthofs, und Dr. Fontenay, der Veterinärinspektor, selbst Spender aus dem Viehbestand aus, der unsere Stadt mit Fleisch versorgen soll. Das ausgewählte Tier ist auf der rechten Schulter eingebrannt, um die weitere Kontrolle zu erleichtern.

Nach der Schlachtung werden die Organe der Tiere sorgfältig untersucht. Es ist bekannt, dass die Autopsie die zuverlässigste Methode zum Nachweis von Tuberkulose ist.

Nachfolgende Operationen werden zeigen, dass das Serum des erkrankten Tieres nie verbraucht wurde.

Blutentnahme von Tieren. Im Blutentnahmeraum wird der Spenderbulle durch ein automatisches Joch sicher gehalten.

Der Tierarzt desinfiziert die Haut auf Höhe des Halses des Tieres mit Jod und macht mit einem Skalpell einen Einschnitt im Bereich der Halsvene. Die Venenpunktion wird mit einem durch längeres Kochen sterilisierten Trokar durchgeführt. Sobald Blut austritt, wird ein autoklavierter Gummischlauch am Trokar befestigt, um ihn direkt und aseptisch mit dem Defibrinator zu verbinden.

Nachfolgend werden die Defibrinierungstechnologie und die Methode zur Sterilisierung des Defibrinators beschrieben.

Von jedem Tier werden 8-10 Liter Blut gewonnen, das auf einer Waage unter dem Gerät gewogen wird.

Sterilisationsmethoden

Um die hygienische Kontrolle zu erleichtern, ist jeder Defibrinator mit einem Etikett mit den Daten des Spendertiers versehen.

Es ist zu beachten, dass die Blutentnahme dank eines geschlossenen Kreislaufs aller Komponenten: Trokar, Gummischlauch und Defibrinator, die vorsterilisiert sind, aseptisch erfolgt.

Ein Etikett mit dem Datum der Blutentnahme begleitet das entnommene Blut vom Zeitpunkt der Venenpunktion bis zur Umwandlung in Serum und der Lagerung im Kühlschrank.

Blutzerfaserung. In den meisten Serotherapie-Einrichtungen trennt Blut, das in Glasgefäße gegossen wird, das Serum unter dem Druck der Belastung. Unter diesen Bedingungen enthält das zunächst von Rindern gewonnene Blut wenig Serum (ungefähr 10 %).

Daher nutzt das Serotherapiezentrum in Lyon spezielle Technologie, was 50 % der Molke ergibt, und das auch in kürzerer Zeit.

Dr. Merrier konnte diese Methode unter anderem aufgrund der Erkenntnisse entwickeln, die er am Königlichen Institut in Rotterdam und am Serotherapeutischen Institut in Mailand gemacht hatte.

Sobald in diesen Instituten Blut gewonnen wird, wird es in sterilen Maschinen, die Butterfässern ähneln, defibriniert.

Innerhalb von 5 Minuten wird das Blut in einem vor Luft geschützten Gefäß gesammelt. Die Zerfaserungszeit muss unbedingt eingehalten werden: Wenn sie nicht ausreicht, kann es zur Koagulation kommen, und wenn sie zu lang ist, kann es zu Hämolyse kommen (aufgrund des Platzens der roten Blutkörperchen). Es ist notwendig, eine Laboruhr zu verwenden, mit der Sie genau 15 Minuten der Defibrination markieren können.

Oben in Abb. 4 zeigt, dass die Zahl der Blutentnahmen 1000 erreicht hat, was auf dem Emblem des Zentrums vermerkt ist.

Zentrifugation.

Unmittelbar nach der Zerfaserung werden die Geräte in das Labor gebracht, das sich nur wenige Meter vom Blutentnahmeraum entfernt befindet. Der Inhalt jedes Defibrinators wird separat verarbeitet, sodass das Serum eines erkrankten Tieres entnommen werden kann.

Blut, das nach der Defibrinierung nicht gerinnt, wird durch einen Alfa Laval-Separator geleitet (einen Milchseparator, den wir für die Molkeproduktion angepasst haben).

Unter dem Einfluss der Zentrifugalkraft wird das Blut in gleiche Teile geteilt: Der rote Teil enthält rote Kugeln und der transparente Teil bildet das Serum (Fibrin verbleibt auf den Defibrinatorblättern).

Von einem Tier werden 8-10 Liter Blut oder etwa 4-5 Liter Serum gewonnen, das in eine bei 180°C sterilisierte Pyrex-Flasche gegossen wird.

An der Flasche ist ein Defibrinator-Etikett angebracht und unter derselben Nummer ist eine Karte ausgefüllt, um die Hygienekontrolle zu gewährleisten.

Dem Serum wird ein spezielles Antiseptikum zugesetzt, das so konzipiert ist, dass es ausreichend aktiv ist, ohne die Transparenz und den Geschmack des Serums zu beeinträchtigen. Für 1 Liter Serum fügen Sie außerdem 100 ml einer Lösung hinzu, die 1:1000 Formaldehyd und 1:5000 Syunuxol enthält.

(Zwischen den Vorbereitungen wird die Zentrifuge gründlich mit einem Antiseptikum desinfiziert.)

Grundsätzlich sollte der rote Anteil des Blutes den Metzgern zur Herstellung von Blutwurst zurückgegeben werden, meist bleibt er jedoch ungenutzt, so dass daraus mit der unten beschriebenen Technologie Sirup hergestellt werden kann.

Sonderfälle der Blutsirupzubereitung. Der Sirup hat zwei Vorteile: Er ermöglicht die Nutzung des nach der Einnahme des Serums verbleibenden roten Blutanteils und hat einen angenehmen Geschmack, der auch Kindern gefällt.

Aufgrund des Mangels an Glycerin ist die Zubereitung von Sirup schwierig Langzeitlagerung, aber Sie können ein sehr aktives Produkt in Wasser herstellen und es Kindern 2-3 Esslöffel pro Tag geben. 20 % zum roten Teil des Blutes hinzufügen Wasser trinken und den Sirup in Gletschern lagern, während die Hygienekontrolle durchgeführt wird.

Dann füge hinzu ein gleicher Teil 100 % Zuckersirup (Zucker kann den Karten der Gruppen entnommen werden, für die der Sirup bestimmt ist).

Dem Sirup wird Zitronen- oder Orangenextrakt zugesetzt, um den Blutgeschmack zu neutralisieren, und in 250-ml-Flaschen abgefüllt.

Tyndallisierung von Molke.

Unmittelbar nach der Zentrifugation, also weniger als eine Stunde nach der Blutentnahme, wird das Serum eine Stunde lang bei 56 °C lysiert.

Dazu wird es in ein Wasserbad mit automatisch gehaltener Temperatur abgesenkt. Die Tyndallisierung bei dieser Temperatur (bei einer höheren Temperatur gerinnt die Molke) ist für die teilweise Sterilisierung der Molke notwendig, obwohl die Geschwindigkeit ihrer Herstellung an sich eine Garantie für Asepsis ist.

Zu beachten ist, dass jede Fünf-Liter-Flasche mit dem Original-Defibrinator-Etikett versehen ist, somit entspricht die Nummerierung des Serums der Nummerierung der Spendertiere.

Kontrollkartendatei. Mit der Karte können Sie jederzeit die Herkunft des Spendertiers, die Stadien der Molkebereitung, das Abfülldatum sowie die Verteilung der Molke überprüfen.

Hygienekontrolle. Während die Gefäße in der Kühlkammer gelagert werden, sind tierärztliche Inspektoren mit der Hygienekontrolle der Spendertiere beschäftigt. Nach ihrer Schlachtung wird eine gründliche Autopsie durchgeführt, um die geringsten Anzeichen einer Tuberkulose festzustellen.

Wird eine Erkrankung festgestellt, kann das entsprechende Serum problemlos entnommen werden. Es ist bekannt, dass das Blut jedes Tieres separat verarbeitet wird und das Serum in separaten, nummerierten Flaschen enthalten ist.

Serotherapiezentrum Öffentlicher Ausschuss Kinderhygiene in Lyoner Schlachthöfen

Kontroll Nummer …

Rindermolke in Litern

Karte und Etikett

Die obige Karte und das Etikett verhindern jegliche Verwirrung.

In Lyon sind die Hygienemaßnahmen besonders streng, da dieselben Tierärzte die Tiere auswählen, Blut abnehmen und das Fleisch untersuchen.

Sterilisation von Geräten. Tierserum ist ein hervorragender Nährboden für Mikroben und kann nur teilweise sterilisiert werden. Bei Temperaturen über 56° koagulieren sie und werden bei Zugabe eines starken Antiseptikums trüb. Daher ist bei allen Serumproduktionsvorgängen maximale Sterilität erforderlich; die Ausrüstung muss vor der Verwendung dekontaminiert werden.

Einzelne Defibrinatoren werden auf folgende Weise sterilisiert: In der Nacht vor der Blutentnahme werden sie mit einer antiseptischen Lösung gefüllt und einige Stunden vor der Blutentnahme wird das Antiseptikum über einen Hahn im unteren Teil des Geräts entleert. Zentrifugen, die zur Herstellung von Serum verwendet werden, werden ebenfalls mit einem Antiseptikum behandelt, auch zwischen der Verarbeitung des Inhalts jedes Defibrinators.

Alle Glaswaren, einschließlich Fünf-Liter-Behälter zur Lagerung von Molke, werden in einem Elektroofen bei einer Temperatur von 180 °C sterilisiert.

250-ml-Flaschen für Serum werden ebenfalls bei 180 °C sterilisiert. Um den Vorgang zu vereinfachen, befinden sich die Gerichte in Kisten, die beim Abfüllen und Verteilen an die Öffentlichkeit verwendet werden.

Blumenlieferung nach Woskresensk

Die Sterilisation wird durch physikalische, chemische, mechanische und biologische Methoden sowie verschiedene Methoden repräsentiert.

Die Durchführbarkeit der Verwendung einer bestimmten Sterilisationsmethode und ihrer Methoden hängt von den Eigenschaften des zu sterilisierenden Materials sowie seinen physikalischen und chemischen Eigenschaften ab.

Die Sterilisationsdauer hängt vom zu sterilisierenden Objekt, dem Sterilisationsmittel und seiner Dosis sowie der Temperatur und Luftfeuchtigkeit der Umgebung ab.

Physikalische Sterilisationsmethode

Zu den Methoden der physikalischen Sterilisationsmethode gehören Trocknen, Brennen und Kalzinieren, Kochen, Pasteurisieren und Tindisieren, Heißluft (trockene Hitze), Ultraschall, ultraviolette und radioaktive Strahlung, Hochfrequenzstrom, Sonnenlicht.

Die gebräuchlichste Methode zur Sterilisation von Gegenständen, die hohen Temperaturen ausgesetzt sein können, ist die Sterilisation mit Feuer, Heißluft und Sattdampf unter Druck.

Feuer wird verwendet, um infizierte Gegenstände zu verbrennen, die keinen Wert darstellen (unnötige Papiere, alte Tapeten, Lumpen, Müll), um den Auswurf von Tuberkulosepatienten, insbesondere die Leichen von Menschen und Tieren, die daran gestorben sind, zu desinfizieren gefährliche Infektionen sowie zum Brennen und Kalzinieren verschiedener Gegenstände.

Brennen und Kalzinieren werden in der mikrobiologischen Praxis häufig zur Desinfektion von Instrumenten, Labor- und Pharmaglasgeräten eingesetzt.

Das Kalzinieren in einer Brennerflamme oder das Flambieren ist eine Sterilisationsmethode, bei der das Objekt vollständig sterilisiert wird, während vegetative Zellen, Zysten und Sporen von Mikroorganismen absterben.

Typischerweise werden Ösen, Spatel, Pipetten, Objektträger und Deckgläser, kleine Instrumente und andere kontaminierte Gegenstände durch Kalzinierung sterilisiert, wenn sie nicht gekocht werden können. Es wird nicht empfohlen, Scheren und Skalpelle durch Erhitzen zu sterilisieren, da die Schnittfläche bei Feuereinwirkung stumpf wird.

Eine der einfachsten und gebräuchlichsten Methoden der physikalischen Sterilisation in der medizinischen Praxis ist die Heißluftsterilisation (trockene Hitze). Die Trockenhitzesterilisation wird in Trockenöfen (Pasteuröfen) durchgeführt. Trockene Heißluft hat eine bakterizide, viruszide, sporizide Wirkung und wird hauptsächlich zur Sterilisation von Glasprodukten (Labor) verwendet Geschirr - Tassen Petriflaschen, Pipetten, Reagenzgläser usw.) sowie Metallprodukte, die mit Dampf unter Druck sterilisiert werden können.

Darüber hinaus wird trockene Hitze zum Sterilisieren von Gegenständen aus Porzellan und hitzebeständigen Substanzen (Talkum, weißer Ton) sowie mineralischen und mineralischen Substanzen verwendet Pflanzenöle, Fette, Vaseline, Lanolin, Wachs. Der effektivste Modus für diese Sterilisationsmethode, die den Tod vegetativer Formen und Sporen gewährleistet, ist eine Temperatur von 160 - 180 Grad für 15 Minuten.

Sie können Lebensmittel, isotonische Lösungen oder Gegenstände aus Gummi und synthetischen Materialien nicht mit trockener Hitze sterilisieren, da Flüssigkeiten kochen und auslaufen und Gummi und synthetische Materialien schmelzen.

Sterilisation gesättigter Dampf unter Druck – dies ist die zuverlässigste und am häufigsten erprobte Methode zum Sterilisieren von Verbänden, Wasser usw Medikamente, Nährmedien, Softgeräte, Werkzeuge sowie zur Desinfektion von kontaminiertem Abfallmaterial.

In der chirurgischen Praxis werden Verbände, Kittel und Unterwäsche des operierten Patienten in Autoklaven mit Dampf desinfiziert. Die Dampfsterilisation unter Druck wird in speziellen Geräten – Autoklaven – durchgeführt.

Durch Autoklavieren werden alle Mikroorganismen und Sporen vollständig zerstört. Die Dampfdrucksterilisationsmethode basiert auf der Erhitzung des Materials mit gesättigtem Wasserdampf unter einem Druck über dem Atmosphärendruck. Die kombinierte Wirkung von hoher Temperatur und Dampf macht diese Methode besonders effektiv. Dabei sterben sowohl vegetative Zellen als auch mikrobielle Sporen ab.

Mikrobielle Sporen sterben unter dem Einfluss von gesättigtem Wasserdampf innerhalb von 10 Minuten ab, vegetative Formen sterben innerhalb von 1 bis 4 Minuten ab.

Die hohe bakterizide Wirkung von Sattdampf beruht darauf, dass unter dem Einfluss von Wasserdampf unter Druck die Proteine ​​der Mikrobenzelle anschwellen und koagulieren, wodurch die Mikrobenzellen absterben.

Die bakterizide Wirkung von gesättigtem Wasserdampf wird durch Überdruck verstärkt.

Die Sterilisation im Autoklaven wird in verschiedenen Modi durchgeführt.

So werden einfache Nährmedien (Fleisch-Pepton-Agar und Fleisch-Pepton-Brühe) 20 Minuten lang bei 120 Grad (1 atm) sterilisiert. Mit diesem Modus ist es jedoch nicht möglich, Medien zu sterilisieren, die Proteine, Kohlenhydrate und andere Substanzen enthalten, die sich durch Erhitzen leicht verändern.

Medien mit Kohlenhydraten werden in einem Autoklaven bei 0,5 atm sterilisiert. 10 – 15 Minuten oder portionsweise strömender Dampf.

Durch hohe Temperaturen können Sie die hartnäckigsten Formen pathogener Mikroorganismen (einschließlich sporenbildender) nicht nur auf der Oberfläche der zu desinfizierenden Gegenstände, sondern auch in deren Tiefe zerstören.

Hier liegt der große Vorteil der hohen Temperatur als zuverlässiges Sterilisationsmittel. Allerdings verschlechtern sich einige Gegenstände unter dem Einfluss hoher Temperaturen, und in diesen Fällen ist es notwendig, auf andere Methoden und Mittel der Desinfektion zurückzugreifen.

Vollständige Sterilisation von Materialien und Gegenständen, die nicht sterilisiert werden können hohe Temperatur, wird durch wiederholte Sterilisation mit Wasserdampf in einem Koch-Gerät bei einer Temperatur von nicht mehr als 100 Grad erreicht. Diese Methode wird fraktionierte Sterilisation genannt. Es läuft darauf hinaus, dass die verbleibenden ungetöteten Sporenformen von Mikroben nach einem Tag in einem Thermostat bei 37 Grad zu vegetativen Zellen keimen, deren Absterben bei der anschließenden Sterilisation dieses Objekts mit fließendem Dampf erfolgt.

Die Behandlung mit Flüssigkeitsdampf erfolgt dreimal für 30–40 Minuten. Das einmalige Erhitzen des Materials auf eine Temperatur unter 100 Grad wird als Pasteurisierung bezeichnet. Die Pasteurisierung wurde von Pasteur vorgeschlagen und zielt hauptsächlich darauf ab, überwiegend nicht sporenbildende Mikroorganismen zu zerstören. Die Pasteurisierung erfolgt bei 60 – 70 Grad für 15 bis 30 Minuten, bei 80 Grad für 10 bis 15 Minuten.

In der mikrobiologischen Praxis Pasteurisierung Saatgut Wird häufig verwendet, um Reinkulturen sporenbildender Mikroorganismen zu isolieren und die Fähigkeit von Mikroorganismen zur Sporenbildung zu bestimmen.

Bei Flüssigkeiten, die bei hohen Temperaturen Geschmack und andere wertvolle Eigenschaften verlieren (Milch, Beeren- und Fruchtsäfte, Bier, kohlenhydrat- oder harnstoffhaltige Nährmedien etc.), erfolgt die Sterilisation mit strömendem Dampf bei 50 - 60 Grad für 15 - 33333330 Minuten oder bei 70 – 80 Grad für 5 – 10 Minuten. In diesem Fall sterben Mikroben mit mittlerer Resistenz ab, während resistentere Mikroben und Sporen erhalten bleiben.

Eine fraktionierte 5- bis 6-fache Sterilisation bei 60 Grad für 1 Stunde wird als Tyndalisierung bezeichnet.

Viele medizinische Produkte hergestellt aus Polymermaterialien, einer Sterilisation nicht standhalten Dampfmethode nach allgemein anerkannten Modalitäten. Bei vielen Produkten ist eine Sterilisation mit allgemein anerkannten Methoden und Methoden aufgrund der Eigenschaften der darin enthaltenen Flüssigkeiten (Konservierungsstoffe, Medikamente und andere Produkte) nicht möglich. Für solche Produkte werden individuelle Sterilisationsregime entwickelt, um eine zuverlässige Sterilisation der Gegenstände zu gewährleisten.

So erfolgt die Sterilisation des Rotors zur Aufteilung des Blutes in Fraktionen mit Wasserdampf bei einer Temperatur von 120 Grad für 45 Minuten.

Die Sterilität von Konservierungsbehältern wird bei 110 Grad für 60 Minuten erreicht.

Kochen ist eine Sterilisationsmethode, die zum Desterilisieren von wiederverwendbaren Spritzen, chirurgischen Instrumenten, Gummischläuchen, Glas- und Metallutensilien verwendet wird.

Die Sterilisation durch Kochen erfolgt in Sterilisatoren. Sporenformen sterben in kochendem Wasser nach 20 - 30 Minuten ab. Das 45-minütige Kochen wird häufig zur Desinfektion von Sekreten und anderen infektiösen Materialien, Wäsche, Geschirr, Spielzeug und Patientenpflegeartikeln verwendet.

Heißes Wasser (60 - 100 Grad) mit Reinigungsmittel zum Waschen und Reinigen verwendet mechanische Entfernung Schadstoffe und Mikroorganismen.

Die meisten vegetativen Zellen sterben bei 70 Grad nach 30 Minuten.

Die Filtrationssterilisation wird in Fällen eingesetzt, in denen Substrate einer Erwärmung nicht standhalten, insbesondere bei Medien, die Proteine, Seren, einige Antibiotika, Vitamine und flüchtige Substanzen enthalten. Diese Technik wird häufig zum Sterilisieren einer Kulturflüssigkeit verwendet, wenn es darum geht, sie von mikrobiellen Zellen zu befreien, aber alle darin enthaltenen Stoffwechselprodukte unverändert zu erhalten.

Bei dieser Methode werden Flüssigkeiten durch spezielle Filter gefiltert, die über feinporöse Trennwände verfügen und somit mikrobielle Zellen zurückhalten.

Die beiden am weitesten verbreiteten Filtertypen sind Membranfilter und Seitz-Filter.

Membranfilter werden aus Kollodium, Acetat, Cellulose und anderen Materialien hergestellt.

Seitz-Filter bestehen aus einer Mischung aus Asbest und Zellulose.

Darüber hinaus werden zur Sterilisation Filter aus Kaolin mit einer Beimischung von Quarzsand, Infusorerde und anderen Materialien („Kerzen“ von Chamberlan, Berkfeld) verwendet.

Membran- und Asbestfilter sind für den einmaligen Gebrauch konzipiert.

Bei ultravioletter Bestrahlung wird die bakterizide Wirkung durch Strahlen mit einer Länge von 200 - 450 nm erzielt, deren Quelle bakterizide Lampen sind.

Die Sterilisation erfolgt mit bakteriziden Lampen ultraviolette Strahlung Luft in Arzneimitteln präventive Institutionen, Kästen mikrobiologischer Labore, in Unternehmen Nahrungsmittelindustrie, in Boxen zur Herstellung von Impfstoffen und Seren, in Operationssälen, Manipulationsräumen, Kindereinrichtungen usw.

Ultraviolette Strahlen haben eine hohe antimikrobielle Aktivität und können nicht nur zum Tod vegetativer Zellen, sondern auch ihrer Sporen führen.

Sonnenlicht führt durch die Einwirkung zum Absterben von Mikroorganismen ultraviolette Bestrahlung und Trocknen.

Die Trocknung mit Sonnenlicht wirkt sich nachteilig auf viele Arten von Mikroorganismen aus, ihre Wirkung ist jedoch oberflächlich und daher spielt Sonnenlicht eine unterstützende Rolle in der Sterilisationspraxis.

IN In letzter Zeit Bei der Behandlung von Wunden und Verbrennungen werden Beschichtungen aus synthetischen und natürlichen Polymeren in Form von Gelen eingesetzt.

Antiseptische Polymerfolien werden häufig zur lokalen Behandlung von Wunden und Verbrennungen eingesetzt. Sie enthalten antimikrobielle Breitbandwirkstoffe wie Katapol, Dioxidin, blaues Jod sowie Sorbit, das Glutaraldehyd enthält. Zur Sterilisation dieser Filme wird es verwendet ionisierende Strahlung bei einer Dosis von 20,0 kGy. Bei der industriellen Herstellung von antiseptischen Polymerfolien und Sorptionsmitteln ist deren Sterilität unter diesem Sterilisationsregime vollständig gewährleistet.

Radioaktive Strahlung tötet alle Arten von Mikroorganismen ab, sowohl in vegetativer Form als auch in Sporenform. Es wird häufig zur Sterilisation in Unternehmen, die sterile Produkte und sterile medizinische Einweggeräte herstellen, zur Desinfektion eingesetzt Abwasser und Rohstoffe tierischen Ursprungs.

Mechanische Sterilisationsmethode

Durch mechanische Sterilisationsverfahren werden Keime von der Oberfläche von Gegenständen entfernt. Dazu gehören Waschen, Ausschütteln, Fegen, Nasswischen, Lüften, Lüften, Staubsaugen, Waschen.

Chemische Sterilisationsmethode

In der medizinischen Praxis werden mittlerweile zunehmend Kunststoffe eingesetzt.

Sie werden in der Zahnheilkunde, Kiefer- und Gesichtschirurgie, Traumatologie, Orthopädie und Chirurgie eingesetzt. Die meisten Kunststoffe können den Hitzesterilisationsmethoden Dampf unter Druck und trockener Hitze (trockene, erhitzte Luft) nicht standhalten. Die zum Sterilisieren solcher Gegenstände verwendeten Lösungen aus Alkohol, Diozid und ternärer Lösung gewährleisten nicht die Sterilität der verarbeiteten Produkte.

Daher werden zur Sterilisation von Kunststoffprodukten Gas- und Strahlungsverfahren sowie chemische Lösungen eingesetzt.

Die Einführung einer Vielzahl von Produkten aus thermolabilen Materialien in die Praxis medizinischer Einrichtungen trägt zur Einbringung von Strahlung bei, Gasmethoden Desinfektion und Sterilisation mit Desinfektionslösungen.

Bei chemische Sterilisation Verwenden Sie Gase und Wirkstoffe aus verschiedenen chemischen Gruppen (Peroxid, Phenol, Halogen, Aldehyde, Laugen und Säuren, Tenside usw.). Für den täglichen Gebrauch werden Wasch-, Reinigungs-, Bleich- und andere Präparate hergestellt, die durch die Einbringung verschiedener Chemikalien in ihre Zusammensetzung eine antimikrobielle Wirkung haben.

Diese Präparate werden zur Reinigung und Desinfektion von Sanitäranlagen eingesetzt Technisches Equipment, Geschirr, Wäsche usw.

Formaldehyddampf (Vaporform) kann verwendet werden medizinische Einrichtungen zur Sterilisation Metallprodukte medizinische Zwecke (Skalpelle, Nadeln, Pinzetten, Sonden, Klemmen, Haken, Drahtschneider usw.).

Vor der Sterilisation mit Formaldehyddampf müssen die Produkte einer Vorsterilisationsreinigung unterzogen und gründlich getrocknet werden.

Wenn es auf irgendeine Weise sterilisiert wurde chemisch Die Vorschriften für die Verarbeitung eines bestimmten Gegenstands hängen von den Eigenschaften des zu desinfizierenden Gegenstands, der Widerstandsfähigkeit von Mikroben und den Eigenschaften der Eigenschaften ab chemische Zubereitung, Umgebungstemperatur, Luftfeuchtigkeit und andere Faktoren.

So wird die Sterilität von Metallinstrumenten nach fünfstündiger Lagerung in einer geschlossenen Kammer mit Dampf bei einer Temperatur von mindestens 20 Grad und einer relativen Luftfeuchtigkeit von 95 - 98 % erreicht; bei einer Temperatur von 15 Grad ist die vollständige Sterilität dieser Gegenstände erreicht wird erst nach 16 Stunden erreicht.

Die sporizide Wirkung von Glutaraldehyd hängt von der Temperatur ab. Seine optimale Wirkung tritt bei einer Temperatur von 15 - 25 Grad ein. Mit steigender Temperatur nimmt die sporizide Wirkung dieses Arzneimittels ab.

Sterilisation chemische Methode Die Nutzung ist etwas eingeschränkt. Am häufigsten wird diese Methode verwendet, um eine bakterielle Kontamination von Kulturmedien und immunbiologischen Präparaten (Impfstoffe und Seren) zu verhindern. Den Nährmedien werden am häufigsten Substanzen wie Chloroform, Toluol und Ether zugesetzt. Ist es notwendig, das Medium von diesen Konservierungsstoffen zu befreien, wird es im Wasserbad auf 56 Grad erhitzt und die Konservierungsstoffe verdampfen.

Zur Konservierung von Impfstoffen oder Seren wird Merthiolat verwendet, Borsäure, Formalin.

Biologische Sterilisationsmethode

Die biologische Sterilisation basiert auf dem Einsatz von Antibiotika.

Diese Methode wird häufig bei der Kultivierung von Viren eingesetzt.

Bei der Sterilisation (von lateinisch sterilis – steril) handelt es sich um die vollständige Inaktivierung von Mikroben auf zu verarbeitenden Gegenständen.

Pasteurofen – Sterilisation mit trockener Hitze.

Es gibt drei Hauptmethoden der Sterilisation: Hitze, Strahlung, chemisch.

Jod.

Die Hitzesterilisation basiert auf der Empfindlichkeit von Mikroben gegenüber hohen Temperaturen.

Bei 60 °C und in Gegenwart von Wasser kommt es zur Denaturierung von Proteinen, darunter auch von Enzymen, wodurch die vegetativen Formen der Mikroben absterben. Sporen, die nur sehr wenig gebundenes Wasser enthalten und eine dichte Schale haben, werden bei 160–170 °C inaktiviert. Bei der Hitzesterilisation kommen vor allem trockene Hitze und Dampf unter Druck zum Einsatz.
Die Trockenhitzesterilisation wird in Trockenhitzeöfen oder Pasteuröfen durchgeführt. Der Pasteurofen ist ein dicht verschlossener Metallschrank, der elektrisch beheizt und mit einem Thermometer ausgestattet ist.

Die Desinfektion des darin enthaltenen Materials erfolgt bei 160–170 °C für 60–120 Minuten. Der Nachteil dieser Methode besteht darin, dass nur einige sterilisierbare Gegenstände, wie beispielsweise Laborglas, solch hohen Temperaturen standhalten können.
Die universellste Sterilisationsmethode ist die Dampfbehandlung unter Druck in Autoklaven, in der Verbände, Wäsche, viele Instrumente, Kulturmedien, Lösungen, infektiöses Material usw. sterilisiert werden.

Ein Autoklav ist ein Metallzylinder mit starken Wänden, der hermetisch verschlossen ist und aus einer Wasser-Dampf- und Sterilisationskammer besteht. Das Gerät ist mit einem Manometer, einem Thermometer und anderen Überwachungsgeräten ausgestattet. Im Autoklaven entsteht ein erhöhter Druck, der zu einer Erhöhung des Siedepunktes von Wasser führt. Bei 0,5 atm liegt der Siedepunkt also bei 80 °C, bei 1 atm bei 100 °C, bei 2 atm bei 121 °C und bei 3 atm bei 136 °C.

Da neben der hohen Temperatur auch Dampf auf Mikroorganismen einwirkt, sterben Sporen bereits bei 120 °C ab. Der gebräuchlichste Betriebsmodus für Autoklaven ist 2 atm, 121 °C, 15–20 Minuten. Die Sterilisationszeit nimmt mit zunehmender Zeit ab Luftdruck und damit der Siedepunkt. Mikroorganismen sterben in wenigen Sekunden ab, die Verarbeitung des Materials dauert jedoch länger, da erstens die Temperatur im Inneren des zu sterilisierenden Materials hoch sein muss und zweitens ein sogenanntes Sicherheitsfeld vorhanden ist, das für mögliche Abweichungen ausgelegt ist die angegebenen Parameter beim Autoklavenbetrieb.

Schlagworte: Körper, Wachstum, Sterilisation, Enzym