Hochtemperatursterilisation. Sterilisation von Laborglaswaren Chemische Sterilisationsmethode

Die Sterilisation wird durch physikalische, chemische, mechanische und biologische Methoden sowie verschiedene Methoden repräsentiert. Die Durchführbarkeit der Verwendung einer bestimmten Sterilisationsmethode und ihrer Methoden hängt von den Eigenschaften des zu sterilisierenden Materials sowie seinen physikalischen und chemischen Eigenschaften ab. Die Sterilisationsdauer hängt vom zu sterilisierenden Objekt, dem Sterilisationsmittel und seiner Dosis sowie der Temperatur und Luftfeuchtigkeit der Umgebung ab.

Physikalische Sterilisationsmethode Zu den Methoden der physikalischen Sterilisation gehören Trocknen, Brennen und Kalzinieren, Kochen, Pasteurisieren und Tindisieren. heiße Luft (trockene Hitze), Ultraschall, ultraviolette und radioaktive Strahlung, Hochfrequenzstrom, Sonnenlicht. Die gebräuchlichste Methode zur Sterilisation von Gegenständen, die hohen Temperaturen ausgesetzt sein können, ist die Sterilisation mit Feuer, Heißluft und Sattdampf unter Druck. Feuer wird verwendet, um infizierte Gegenstände zu verbrennen, die keinen Wert darstellen (unnötige Papiere, alte Tapeten, Lumpen, Müll), um den Auswurf von Tuberkulosepatienten, die Leichen von Menschen und Tieren, die an besonders gefährlichen Infektionen gestorben sind, zu desinfizieren verschiedene Gegenstände verbrennen und kalzinieren. Brennen und Kalzinieren werden in der mikrobiologischen Praxis häufig zur Desinfektion von Instrumenten, Labor- und Pharmaglasgeräten eingesetzt. Das Kalzinieren in einer Brennerflamme oder das Flambieren ist eine Sterilisationsmethode, bei der das Objekt vollständig sterilisiert wird, während vegetative Zellen, Zysten und Sporen von Mikroorganismen absterben. Typischerweise werden Ösen, Spatel, Pipetten, Objektträger und Deckgläser, kleine Instrumente und andere kontaminierte Gegenstände durch Kalzinierung sterilisiert, wenn sie nicht gekocht werden können. Es wird nicht empfohlen, Scheren und Skalpelle durch Erhitzen zu sterilisieren, da die Schnittfläche bei Feuereinwirkung stumpf wird. Eine der einfachsten und gebräuchlichsten Methoden der physikalischen Sterilisation in der medizinischen Praxis ist die Heißluftsterilisation (trockene Hitze). Die Trockenhitzesterilisation wird in Trockenöfen (Pasteuröfen) durchgeführt. Trockene Heißluft hat eine bakterizide, viruszide, sporizide Wirkung und wird hauptsächlich zur Sterilisation von Glasprodukten (Laborglaswaren – Petrischalen, Kolben, Pipetten, Reagenzgläser usw.) sowie von Metallprodukten verwendet, die mit Dampf sterilisiert werden können unter Druck. Darüber hinaus werden mit trockener Hitze Gegenstände aus Porzellan und hitzebeständigen Substanzen (Talkum, weißer Ton) sowie mineralische und pflanzliche Öle, Fette, Vaseline, Lanolin und Wachs sterilisiert. Der effektivste Modus für diese Sterilisationsmethode, die den Tod vegetativer Formen und Sporen gewährleistet, ist eine Temperatur von 160 - 180 Grad für 15 Minuten. Sie können Lebensmittel, isotonische Lösungen oder Gegenstände aus Gummi und synthetischen Materialien nicht mit trockener Hitze sterilisieren, da Flüssigkeiten kochen und auslaufen und Gummi und synthetische Materialien schmelzen. Die Sterilisation mit gesättigtem Dampf unter Druck ist die zuverlässigste und am häufigsten verwendete Methode zur Sterilisation von Verbänden, Wasser, einigen Medikamenten, Kulturmedien, weichen Geräten und Instrumenten sowie zur Desinfektion von kontaminiertem Abfallmaterial. In der chirurgischen Praxis werden Verbände, Kittel und Unterwäsche des operierten Patienten in Autoklaven mit Dampf desinfiziert. Die Dampfsterilisation unter Druck wird in speziellen Geräten – Autoklaven – durchgeführt. Durch Autoklavieren werden alle Mikroorganismen und Sporen vollständig zerstört. Die Dampfdrucksterilisationsmethode basiert auf der Erhitzung des Materials mit gesättigtem Wasserdampf unter einem Druck über dem Atmosphärendruck. Die kombinierte Wirkung von hoher Temperatur und Dampf macht diese Methode besonders effektiv. Dabei sterben sowohl vegetative Zellen als auch mikrobielle Sporen ab. Mikrobielle Sporen sterben unter dem Einfluss von gesättigtem Wasserdampf innerhalb von 10 Minuten ab, vegetative Formen sterben innerhalb von 1 bis 4 Minuten ab. Die hohe bakterizide Wirkung von Sattdampf beruht darauf, dass unter dem Einfluss von Wasserdampf unter Druck die Proteine der Mikrobenzelle anschwellen und koagulieren, wodurch die Mikrobenzellen absterben. Die bakterizide Wirkung von gesättigtem Wasserdampf wird durch Überdruck verstärkt. Die Sterilisation im Autoklaven wird in verschiedenen Modi durchgeführt. So werden einfache Nährmedien (Fleisch-Pepton-Agar und Fleisch-Pepton-Brühe) 20 Minuten lang bei 120 Grad (1 atm) sterilisiert. Mit diesem Modus ist es jedoch nicht möglich, Medien zu sterilisieren, die Proteine, Kohlenhydrate und andere Substanzen enthalten, die sich durch Erhitzen leicht verändern. Medien mit Kohlenhydraten werden in einem Autoklaven bei 0,5 atm sterilisiert. 10 – 15 Minuten oder portionsweise strömender Dampf. Durch hohe Temperaturen können Sie die hartnäckigsten Formen pathogener Mikroorganismen (einschließlich sporenbildender) nicht nur auf der Oberfläche der zu desinfizierenden Gegenstände, sondern auch in deren Tiefe zerstören. Hier liegt der große Vorteil der hohen Temperatur als zuverlässiges Sterilisationsmittel. Allerdings verschlechtern sich einige Gegenstände unter dem Einfluss hoher Temperaturen, und in diesen Fällen ist es notwendig, auf andere Methoden und Mittel der Desinfektion zurückzugreifen. Eine vollständige Sterilisation von Materialien und Gegenständen, die keine Hochtemperatursterilisation zulassen, wird durch wiederholte Sterilisation mit Wasserdampf in einem Koch-Gerät bei einer Temperatur von nicht mehr als 100 Grad erreicht. Diese Methode wird fraktionierte Sterilisation genannt. Es läuft darauf hinaus, dass die verbleibenden ungetöteten Sporenformen von Mikroben nach einem Tag in einem Thermostat bei 37 Grad zu vegetativen Zellen keimen, deren Absterben bei der anschließenden Sterilisation dieses Objekts mit fließendem Dampf erfolgt. Die Behandlung mit Flüssigkeitsdampf erfolgt dreimal für 30–40 Minuten. Das einmalige Erhitzen des Materials auf eine Temperatur unter 100 Grad wird als Pasteurisierung bezeichnet. Die Pasteurisierung wurde von Pasteur vorgeschlagen und zielt hauptsächlich darauf ab, überwiegend nicht sporenbildende Mikroorganismen zu zerstören. Die Pasteurisierung erfolgt bei 60 – 70 Grad für 15 bis 30 Minuten, bei 80 Grad für 10 bis 15 Minuten. In der mikrobiologischen Praxis Pasteurisierung Saatgut Wird häufig verwendet, um Reinkulturen sporenbildender Mikroorganismen zu isolieren und die Fähigkeit von Mikroorganismen zur Sporenbildung zu bestimmen. Bei Flüssigkeiten, die bei hohen Temperaturen Geschmack und andere wertvolle Eigenschaften verlieren (Milch, Beeren- und Fruchtsäfte, Bier, kohlenhydrat- oder harnstoffhaltige Nährmedien etc.), erfolgt die Sterilisation mit strömendem Dampf bei 50 - 60 Grad für 15 - 33333330 Minuten oder bei 70 – 80 Grad für 5 – 10 Minuten. In diesem Fall sterben Mikroben mit mittlerer Resistenz ab, während resistentere Mikroben und Sporen erhalten bleiben. Eine fraktionierte 5-6-fache Sterilisation bei 60 Grad für 1 Stunde wird als Tyndalisierung bezeichnet. Viele medizinische Produkte hergestellt aus Polymermaterialien, einer Sterilisation nicht standhalten Dampfmethode nach allgemein anerkannten Modalitäten. Bei vielen Produkten ist eine Sterilisation mit allgemein anerkannten Methoden und Methoden aufgrund der Eigenschaften der darin enthaltenen Flüssigkeiten (Konservierungsstoffe, Medikamente und andere Produkte) nicht möglich. Für solche Produkte werden individuelle Sterilisationsregime entwickelt, um eine zuverlässige Sterilisation der Gegenstände zu gewährleisten. So erfolgt die Sterilisation des Rotors zur Aufteilung des Blutes in Fraktionen mit Wasserdampf bei einer Temperatur von 120 Grad für 45 Minuten. Die Sterilität von Konservierungsbehältern wird bei 110 Grad für 60 Minuten erreicht. Kochen ist eine Sterilisationsmethode, die zum Desterilisieren von wiederverwendbaren Spritzen, chirurgischen Instrumenten, Gummischläuchen, Glas- und Metallutensilien verwendet wird. Die Sterilisation durch Kochen erfolgt in Sterilisatoren. Sporenformen sterben in kochendem Wasser nach 20 - 30 Minuten ab. Das 45-minütige Kochen wird häufig zur Desinfektion von Sekreten und anderen infektiösen Materialien, Wäsche, Geschirr, Spielzeug und Patientenpflegeartikeln verwendet. Beim Waschen und Reinigen wird heißes Wasser (60 – 100 Grad) mit Reinigungsmitteln verwendet, um Schmutz und Mikroorganismen mechanisch zu entfernen. Die meisten vegetativen Zellen sterben bei 70 Grad nach 30 Minuten. Die Filtrationssterilisation wird in Fällen eingesetzt, in denen Substrate einer Erwärmung nicht standhalten, insbesondere bei Medien, die Proteine, Seren, einige Antibiotika, Vitamine und flüchtige Substanzen enthalten. Diese Technik wird häufig zum Sterilisieren einer Kulturflüssigkeit verwendet, wenn es darum geht, sie von mikrobiellen Zellen zu befreien, aber alle darin enthaltenen Stoffwechselprodukte unverändert zu erhalten. Bei dieser Methode werden Flüssigkeiten durch spezielle Filter gefiltert, die über feinporöse Trennwände verfügen und somit mikrobielle Zellen zurückhalten. Die beiden am weitesten verbreiteten Filtertypen sind Membranfilter und Seitz-Filter. Membranfilter werden aus Kollodium, Acetat, Cellulose und anderen Materialien hergestellt. Seitz-Filter bestehen aus einer Mischung aus Asbest und Zellulose. Darüber hinaus werden zur Sterilisation Filter aus Kaolin mit einer Beimischung von Quarzsand, Infusorerde und anderen Materialien („Kerzen“ von Chamberlan, Berkfeld) verwendet. Membran- und Asbestfilter sind für den einmaligen Gebrauch konzipiert. Bei ultravioletter Bestrahlung wird die bakterizide Wirkung durch Strahlen mit einer Länge von 200 - 450 nm erzielt, deren Quelle bakterizide Lampen sind. Mit Hilfe von bakteriziden Lampen wird die Luft in medizinischen und präventiven Einrichtungen, mikrobiologischen Laboratorien und Unternehmen mit ultravioletten Strahlen sterilisiert Nahrungsmittelindustrie, in Kästen zur Herstellung von Impfstoffen und Seren, in Operationssälen, Manipulationsräumen, Kindereinrichtungen usw. Ultraviolette Strahlen haben eine hohe antimikrobielle Aktivität und können nicht nur zum Tod vegetativer Zellen, sondern auch ihrer Sporen führen. Sonnenlicht führt durch die Einwirkung zum Absterben von Mikroorganismen ultraviolette Bestrahlung und Trocknen. Die Trocknung mit Sonnenlicht wirkt sich nachteilig auf viele Arten von Mikroorganismen aus, ihre Wirkung ist jedoch oberflächlich und daher spielt Sonnenlicht eine unterstützende Rolle in der Sterilisationspraxis. Bei der Behandlung von Wunden und Verbrennungen werden neuerdings Beschichtungen aus synthetischen und natürlichen Polymeren in Form von Gelen eingesetzt. Antiseptische Polymerfolien werden häufig zur lokalen Behandlung von Wunden und Verbrennungen eingesetzt. Sie enthalten antimikrobielle Breitbandwirkstoffe wie Katapol, Dioxidin, blaues Jod sowie Sorbit, das Glutaraldehyd enthält. Um diese Filme zu sterilisieren, wird ionisierende Strahlung mit einer Dosis von 20,0 kGy verwendet. Bei der industriellen Herstellung von antiseptischen Polymerfolien und Sorptionsmitteln ist deren Sterilität unter diesem Sterilisationsregime vollständig gewährleistet. Radioaktive Strahlung tötet alle Arten von Mikroorganismen ab, sowohl in vegetativer Form als auch in Sporenform. Es wird häufig zur Sterilisation in Unternehmen verwendet, die sterile Produkte und sterile medizinische Einweggeräte herstellen, zur Desinfektion von Abwasser und Rohstoffen tierischen Ursprungs.

Mechanische Sterilisationsmethode Durch mechanische Sterilisationsverfahren werden Keime von der Oberfläche von Gegenständen entfernt. Dazu gehören Waschen, Ausschütteln, Fegen, Nasswischen, Lüften, Lüften, Staubsaugen, Waschen.

Chemische Methode Sterilisation In der medizinischen Praxis werden mittlerweile zunehmend Kunststoffe eingesetzt. Sie werden in der Zahnheilkunde, Kiefer- und Gesichtschirurgie, Traumatologie, Orthopädie und Chirurgie eingesetzt. Die meisten Kunststoffe können den Hitzesterilisationsmethoden Dampf unter Druck und trockener Hitze (trockene, erhitzte Luft) nicht standhalten. Die zum Sterilisieren solcher Gegenstände verwendeten Lösungen aus Alkohol, Diozid und ternärer Lösung gewährleisten nicht die Sterilität der verarbeiteten Produkte. Daher werden zur Sterilisation von Kunststoffprodukten Gas- und Strahlungsverfahren sowie chemische Lösungen eingesetzt. Die Einführung einer Vielzahl von Produkten aus thermolabilen Materialien in die Praxis medizinischer Einrichtungen trägt zur Einbringung von Strahlung bei, Gasmethoden Desinfektion und Sterilisation mit Desinfektionslösungen. Bei der chemischen Sterilisation werden Gase und Wirkstoffe aus verschiedenen chemischen Gruppen verwendet (Peroxide, Phenole, Halogene, Aldehyde, Laugen und Säuren, Tenside usw.). Für den täglichen Gebrauch werden Wasch-, Reinigungs-, Bleich- und andere Präparate hergestellt, die durch die Einbringung verschiedener Chemikalien in ihre Zusammensetzung eine antimikrobielle Wirkung haben. Diese Präparate werden zur Reinigung und Desinfektion von Sanitäranlagen, Geschirr, Wäsche usw. verwendet. Formaldehyddampf (Steamform) kann verwendet werden medizinische Einrichtungen zur Sterilisation Metallprodukte medizinische Zwecke (Skalpelle, Nadeln, Pinzetten, Sonden, Klemmen, Haken, Drahtschneider usw.). Vor der Sterilisation mit Formaldehyddampf müssen die Produkte einer Vorsterilisationsreinigung unterzogen und gründlich getrocknet werden. Wenn es auf irgendeine Weise sterilisiert wurde chemisch Die Vorschriften für die Verarbeitung eines bestimmten Gegenstands hängen von den Eigenschaften des zu desinfizierenden Gegenstands, der Widerstandsfähigkeit von Mikroben und den Eigenschaften der Eigenschaften ab chemische Zubereitung, Umgebungstemperatur, Luftfeuchtigkeit und andere Faktoren. So wird die Sterilität von Metallinstrumenten nach fünfstündiger Lagerung in einer geschlossenen Kammer mit Dampf bei einer Temperatur von mindestens 20 Grad und einer relativen Luftfeuchtigkeit von 95 - 98 % erreicht; bei einer Temperatur von 15 Grad ist die vollständige Sterilität dieser Gegenstände erreicht wird erst nach 16 Stunden erreicht. Die sporizide Wirkung von Glutaraldehyd hängt von der Temperatur ab. Seine optimale Wirkung tritt bei einer Temperatur von 15 - 25 Grad ein. Mit steigender Temperatur nimmt die sporizide Wirkung dieses Arzneimittels ab. Chemische Sterilisation wird in etwas begrenztem Umfang eingesetzt. Am häufigsten wird diese Methode verwendet, um eine bakterielle Kontamination von Kulturmedien und immunbiologischen Präparaten (Impfstoffe und Seren) zu verhindern. Den Nährmedien werden am häufigsten Substanzen wie Chloroform, Toluol und Ether zugesetzt. Ist es notwendig, das Medium von diesen Konservierungsstoffen zu befreien, wird es im Wasserbad auf 56 Grad erhitzt und die Konservierungsstoffe verdampfen. Zur Konservierung von Impfstoffen oder Seren werden Merthiolat, Borsäure und Formalin verwendet.

Biologische Sterilisationsmethode Die biologische Sterilisation basiert auf dem Einsatz von Antibiotika. Diese Methode wird häufig bei der Kultivierung von Viren eingesetzt.

Sterilisation

Unter Sterilisation versteht man die Sterilisation, also die vollständige Befreiung von Umweltgegenständen von Mikroorganismen und deren Sporen.

Die Sterilisation wird auf verschiedene Arten durchgeführt:

1) physikalisch (Einwirkung von hohen Temperaturen, UV-Strahlen, Gebrauch). Bakterienfilter);

2) chemisch (Verwendung verschiedener Desinfektionsmittel, Antiseptika);

3) biologisch (Einsatz von Antibiotika).

In der Laborpraxis werden üblicherweise physikalische Sterilisationsmethoden eingesetzt.

Die Möglichkeit und Durchführbarkeit der Anwendung dieser oder jener Sterilisationsmethode wird durch die Eigenschaften des zu sterilisierenden Materials sowie seine physikalischen und chemischen Eigenschaften bestimmt.

Physikalische Methoden

Das Kalzinieren in einer Brennerflamme oder das Flambieren ist eine Sterilisationsmethode, bei der das Objekt vollständig sterilisiert wird, da sowohl vegetative Zellen als auch mikrobielle Sporen absterben. Typischerweise werden bakteriologische Impfösen, Spatel, Pipetten, Objektträger und Deckgläser sowie kleine Instrumente kalziniert. Scheren und Skalpelle sollten nicht durch Erhitzen sterilisiert werden, da unter dem Einfluss von Feuer die Schnittfläche stumpf wird.

Sterilisation mit trockener Hitze

Die Sterilisation mit trockener Hitze oder Heißluft erfolgt in Pasteuröfen (Trocknung). Trockenheizöfen). Der Pasteurofen ist ein doppelwandiger Schrank aus hitzebeständigen Materialien – Metall und Asbest. Erhitzen Sie den Schrank mit Gasbrenner oder elektrische Heizgeräte. Elektrisch beheizte Schränke sind mit Reglern ausgestattet, die dafür sorgen gewünschte Temperatur. Um die Temperatur zu kontrollieren, wird ein Thermometer in das Loch in der oberen Wand des Schranks eingesetzt.

Flüssigkeiten (Nährmedien, isotonische Kochsalzlösung etc.), Gegenstände aus Gummi und Kunststoffen können nicht mit trockener Hitze sterilisiert werden, da Flüssigkeiten kochen und auslaufen und Gummi und Kunststoffe schmelzen.

Sterilisation durch Kochen

Kochen ist eine Sterilisationsmethode, die Sterilität gewährleistet, sofern sich im sterilisierten Material keine Sporen befinden. Wird zur Verarbeitung von Spritzen, Instrumenten, Glas- und Metallutensilien, Gummischläuchen usw. verwendet. Die Dampfsterilisation unter Druck erfolgt in einem Autoklaven. Bei dieser Sterilisationsmethode werden die zu sterilisierenden Materialien gesättigtem Wasserdampf bei einem Druck über dem Atmosphärendruck ausgesetzt. Als Ergebnis einer solchen Sterilisation sterben sowohl vegetative als auch sporenförmige Formen von Mikroorganismen mit einer einzigen Behandlung ab. Ein Autoklav (Abb. 12) ist ein massiver Kessel, der außen mit einem Metallgehäuse abgedeckt und mit einem Deckel hermetisch verschlossen ist, der mit Scharnierschrauben fest mit dem Kessel verschraubt ist.

Die Temperatur und Dauer des Autoklavierens von Nährmedien wird durch deren Zusammensetzung bestimmt, die im Rezept zur Herstellung des Nährmediums angegeben ist. Beispielsweise werden einfache Medien (Fleisch-Pepton-Agar, Fleisch-Pepton-Brühe) 20 Minuten lang bei 120 °C (1 atm) sterilisiert. Bei dieser Temperatur ist es jedoch unmöglich, Medien zu sterilisieren, die native Proteine, Kohlenhydrate und andere Substanzen enthalten, die sich durch Erhitzen leicht verändern. Medien mit Kohlenhydraten werden fraktioniert bei 100 °C oder in einem Autoklaven bei 112 °C (0,5 atm) für 10–15 Minuten sterilisiert. Verschiedene Flüssigkeiten, Geräte mit Gummischläuchen, Stopfen, Bakterienkerzen und Filter werden 20 Minuten lang bei 120 °C (1 atm) sterilisiert.

Die Sterilisation mit strömendem Dampf erfolgt in einem Koch-Gerät. Diese Methode wird verwendet, wenn sich das zu sterilisierende Objekt bei einer Temperatur über 100 °C verändert. Nährmedien, die Harnstoff, Kohlenhydrate, Milch, Kartoffeln, Gelatine usw. enthalten, werden mit fließendem Dampf sterilisiert.

Der Koch-Apparat (Kessel) ist ein Metallzylinder, der außen (um die Wärmeübertragung zu reduzieren) mit Filz oder Asbest ausgekleidet ist. Der Zylinder ist mit einem konischen Deckel verschlossen, der über ein Loch zum Entweichen des Dampfes verfügt. Im Inneren des Zylinders befindet sich ein Ständer, bis zu dessen Höhe Wasser gegossen wird. Auf den Ständer wird ein Eimer mit Loch gestellt, in den das zu sterilisierende Material gegeben wird. Der Koch-Apparat wird mit Gas oder Strom beheizt. Die Sterilisationszeit wird ab dem Moment der kräftigen Dampfabgabe an den Deckelrändern und am Dampfaustritt gezählt. 30-60 Minuten lang sterilisieren. Am Ende der Sterilisation wird das Erhitzen gestoppt. Nehmen Sie den Materialeimer aus dem Gerät und lassen Sie ihn bis zum nächsten Tag bei Raumtemperatur stehen. Die Erwärmung erfolgt 3 Tage hintereinander bei einer Temperatur von 100° C für 30-60 Minuten. Diese Methode wird fraktionierte Sterilisation genannt. Beim ersten Erhitzen sterben vegetative Formen von Mikroben ab, während Sporenformen erhalten bleiben. Innerhalb eines Tages gelingt es den Sporen zu keimen und sich in vegetative Formen zu verwandeln, die am zweiten Tag der Sterilisation absterben. Da es möglich ist, dass einige der Sporen keine Zeit zum Keimen hatten, wird das Material weitere 24 Stunden aufbewahrt und anschließend eine dritte Sterilisation durchgeführt. Eine Sterilisation mit fließendem Dampf in einem Koch-Gerät ist nicht erforderlich besondere Kontrolle, da die Sterilität der vorbereiteten Nährmedien ein Indikator für die ordnungsgemäße Funktion des Geräts ist. Sie können die Sterilisation auch mit strömendem Dampf in einem Autoklaven bei abgeschraubtem Deckel und geöffnetem Auslassventil durchführen.

Sterilisation durch ultraviolette Bestrahlung

Die Sterilisation mit UV-Strahlen erfolgt mit speziellen Anlagen – bakteriziden Lampen. UV-Strahlen haben eine hohe antimikrobielle Aktivität und können nicht nur zum Absterben vegetativer Zellen, sondern auch von Sporen führen. UV-Bestrahlung wird zur Luftentkeimung in Krankenhäusern, Operationssälen, Kindereinrichtungen etc. eingesetzt. In einem mikrobiologischen Labor wird vor der Arbeit eine Box mit UV-Strahlen behandelt.

Chemische Methoden

Diese Art der Sterilisation wird in begrenztem Umfang eingesetzt und dient hauptsächlich der Verhinderung einer bakteriellen Kontamination von Kulturmedien und immunbiologischen Präparaten (Impfstoffe und Seren).

Den Nährmedien werden am häufigsten Substanzen wie Chloroform, Toluol und Ether zugesetzt. Ist es erforderlich, das Medium von diesen Konservierungsstoffen zu befreien, wird es im Wasserbad auf 56 °C erhitzt (die Konservierungsstoffe verdampfen).

Um Impfstoffe und Seren zu konservieren, verwenden Sie Merthiolat. Borsäure, Formalin usw.

Biologische Sterilisation

Die biologische Sterilisation basiert auf dem Einsatz von Antibiotika. Diese Methode wird zur Kultivierung von Viren verwendet.

B. Detaillierte Technologie zur Herstellung von Rindermolke in den Schlachthöfen von Lyon

Von 1.000 Tieren wurde bereits Blut abgenommen, das Serum in Flaschen abgefüllt und kostenlos an fast 20.000 Kinder verteilt.

Damit ist es gezeigt industrielle Produktion Eine Molkebereitstellung im Schlachthof unter Einhaltung aseptischer Regeln und Hygienevorschriften ist möglich.

Das Serotherapieunternehmen bietet keine zusätzlichen Garantien – es ist nicht berechtigt, eine Autopsie am Spendertier durchzuführen.

Die in unserer Produktion verwendete Technologie scheint aus aseptischer Sicht weniger streng zu sein als die klassische Methode. Es hat aber einen großen Geschwindigkeitsvorteil, da das Serum bereits am Tag der Blutentnahme vollständig hergestellt ist.

Wenn die aktuellen Umstände uns dazu veranlasst haben, das Serum in einem Schlachthof herzustellen, ist klar, dass dies eine vorübergehende Maßnahme ist, da Hämatogen- und medizinische Seren nur in einem spezialisierten Institut hergestellt werden können.

Tierauswahl. In Lyon wählen Dr. Guier, der Cheftierarzt des Schlachthofs, und Dr. Fontenay, der Veterinärinspektor, selbst Spender aus dem Viehbestand aus, der unsere Stadt mit Fleisch versorgen soll. Das ausgewählte Tier ist auf der rechten Schulter eingebrannt, um die weitere Kontrolle zu erleichtern.

Nach der Schlachtung werden die Organe der Tiere sorgfältig untersucht. Es ist bekannt, dass die Autopsie die zuverlässigste Methode zum Nachweis von Tuberkulose ist.

Nachfolgende Operationen werden zeigen, dass das Serum des erkrankten Tieres nie verbraucht wurde.

Blutentnahme von Tieren. Im Blutentnahmeraum wird der Spenderbulle durch ein automatisches Joch sicher gehalten.

Der Tierarzt desinfiziert die Haut auf Höhe des Halses des Tieres mit Jod und macht mit einem Skalpell einen Einschnitt im Bereich der Halsvene. Die Venenpunktion wird mit einem durch längeres Kochen sterilisierten Trokar durchgeführt. Sobald Blut austritt, wird ein autoklavierter Gummischlauch am Trokar befestigt, um ihn direkt und aseptisch mit dem Defibrinator zu verbinden.

Nachfolgend werden die Defibrinierungstechnologie und die Methode zur Sterilisierung des Defibrinators beschrieben.

Von jedem Tier werden 8-10 Liter Blut gewonnen, das auf einer Waage unter dem Gerät gewogen wird.

Sterilisationsmethoden

Um die hygienische Kontrolle zu erleichtern, ist jeder Defibrinator mit einem Etikett mit den Daten des Spendertiers versehen.

Es ist zu beachten, dass die Blutentnahme dank eines geschlossenen Kreislaufs aller Komponenten: Trokar, Gummischlauch und Defibrinator, die vorsterilisiert sind, aseptisch erfolgt.

Ein Etikett mit dem Datum der Blutentnahme begleitet das entnommene Blut vom Zeitpunkt der Venenpunktion bis zur Umwandlung in Serum und der Lagerung im Kühlschrank.

Blutzerfaserung. In den meisten Serotherapie-Einrichtungen trennt Blut, das in Glasgefäße gegossen wird, das Serum unter dem Druck der Belastung. Unter diesen Bedingungen enthält das zunächst von Rindern gewonnene Blut wenig Serum (ungefähr 10 %).

Daher nutzt das Serotherapiezentrum in Lyon spezielle Technologie, was 50 % der Molke ergibt, und das auch in kürzerer Zeit.

Dr. Merrier konnte diese Methode unter anderem aufgrund der Erkenntnisse entwickeln, die er am Königlichen Institut in Rotterdam und am Serotherapeutischen Institut in Mailand gemacht hatte.

Sobald in diesen Instituten Blut gewonnen wird, wird es in sterilen Maschinen, die Butterfässern ähneln, defibriniert.

Innerhalb von 5 Minuten wird das Blut in einem vor Luft geschützten Gefäß gesammelt. Die Zerfaserungszeit muss unbedingt eingehalten werden: Wenn sie nicht ausreicht, kann es zur Koagulation kommen, und wenn sie zu lang ist, kann es zu Hämolyse kommen (aufgrund des Platzens der roten Blutkörperchen). Es ist notwendig, eine Laboruhr zu verwenden, mit der Sie genau 15 Minuten der Defibrination markieren können.

Oben in Abb. 4 zeigt, dass die Zahl der Blutabnahmen 1000 erreicht hat, was auf dem Emblem des Zentrums vermerkt ist.

Zentrifugation.

Unmittelbar nach der Zerfaserung werden die Geräte in das Labor gebracht, das sich nur wenige Meter vom Blutentnahmeraum entfernt befindet. Der Inhalt jedes Defibrinators wird separat verarbeitet, sodass das Serum eines erkrankten Tieres entnommen werden kann.

Blut, das nach der Defibrinierung nicht gerinnt, wird durch einen Alfa Laval-Separator geleitet (einen Milchseparator, den wir für die Molkeproduktion angepasst haben).

Unter dem Einfluss der Zentrifugalkraft wird das Blut in gleiche Teile geteilt: Der rote Teil enthält rote Kugeln und der transparente Teil bildet das Serum (Fibrin verbleibt auf den Defibrinatorblättern).

Von einem Tier werden 8-10 Liter Blut oder etwa 4-5 Liter Serum gewonnen, das in eine bei 180°C sterilisierte Pyrex-Flasche gegossen wird.

An der Flasche ist ein Defibrinator-Etikett angebracht und unter derselben Nummer ist eine Karte ausgefüllt, um die Hygienekontrolle zu gewährleisten.

Dem Serum wird ein spezielles Antiseptikum zugesetzt, das so konzipiert ist, dass es ausreichend aktiv ist, ohne die Transparenz und den Geschmack des Serums zu beeinträchtigen. Für 1 Liter Serum fügen Sie außerdem 100 ml einer Lösung hinzu, die 1:1000 Formaldehyd und 1:5000 Syunuxol enthält.

(Zwischen den Vorbereitungen wird die Zentrifuge gründlich mit einem Antiseptikum desinfiziert.)

Grundsätzlich sollte der rote Anteil des Blutes den Metzgern zur Herstellung von Blutwurst zurückgegeben werden, meist bleibt er jedoch ungenutzt, so dass daraus mit der unten beschriebenen Technologie Sirup hergestellt werden kann.

Sonderfälle der Blutsirupzubereitung. Der Sirup hat zwei Vorteile: Er ermöglicht die Nutzung des nach der Einnahme des Serums verbleibenden roten Blutanteils und hat einen angenehmen Geschmack, der auch Kindern gefällt.

Aufgrund des Mangels an Glycerin ist die Zubereitung von Sirup schwierig Langzeitlagerung, aber Sie können ein sehr aktives Produkt in Wasser herstellen und es Kindern 2-3 Esslöffel pro Tag geben. 20 % zum roten Teil des Blutes hinzufügen Wasser trinken und den Sirup in Gletschern lagern, während die Hygienekontrolle durchgeführt wird.

Dann füge hinzu ein gleicher Teil 100 % Zuckersirup (Zucker kann den Karten der Gruppen entnommen werden, für die der Sirup bestimmt ist).

Dem Sirup wird Zitronen- oder Orangenextrakt zugesetzt, um den Blutgeschmack zu neutralisieren, und in 250-ml-Flaschen abgefüllt.

Tyndallisierung von Molke.

Unmittelbar nach der Zentrifugation, also weniger als eine Stunde nach der Blutentnahme, wird das Serum eine Stunde lang bei 56 °C lysiert.

Dazu wird es in ein Wasserbad mit automatisch gehaltener Temperatur abgesenkt. Die Tyndallisierung bei dieser Temperatur (bei einer höheren Temperatur gerinnt die Molke) ist für die teilweise Sterilisierung der Molke notwendig, obwohl die Geschwindigkeit ihrer Herstellung an sich eine Garantie für Asepsis ist.

Zu beachten ist, dass jede Fünf-Liter-Flasche mit dem Original-Defibrinator-Etikett versehen ist, somit entspricht die Nummerierung des Serums der Nummerierung der Spendertiere.

Kontrollkartendatei. Mit der Karte können Sie jederzeit die Herkunft des Spendertiers, die Stadien der Molkebereitung, das Abfülldatum sowie die Verteilung der Molke überprüfen.

Hygienekontrolle. Während die Gefäße in der Kühlkammer gelagert werden, sind tierärztliche Inspektoren mit der Hygienekontrolle der Spendertiere beschäftigt. Nach ihrer Schlachtung wird eine gründliche Autopsie durchgeführt, um die geringsten Anzeichen einer Tuberkulose festzustellen.

Wird eine Erkrankung festgestellt, kann das entsprechende Serum problemlos entnommen werden. Es ist bekannt, dass das Blut jedes Tieres separat verarbeitet wird und das Serum in separaten, nummerierten Flaschen enthalten ist.

Serotherapiezentrum Öffentlicher Ausschuss Kinderhygiene in Lyoner Schlachthöfen

Kontroll Nummer …

Rindermolke in Litern

Karte und Etikett

Die obige Karte und das Etikett verhindern jegliche Verwirrung.

In Lyon sind die Hygienemaßnahmen besonders streng, da dieselben Tierärzte die Tiere auswählen, Blut abnehmen und das Fleisch untersuchen.

Sterilisation von Geräten. Tierserum ist ein hervorragender Nährboden für Mikroben und kann nur teilweise sterilisiert werden. Bei Temperaturen über 56° koagulieren sie und werden bei Zugabe eines starken Antiseptikums trüb. Daher ist bei allen Serumproduktionsvorgängen maximale Sterilität erforderlich; die Ausrüstung muss vor der Verwendung dekontaminiert werden.

Einzelne Defibrinatoren werden auf folgende Weise sterilisiert: In der Nacht vor der Blutentnahme werden sie mit einer antiseptischen Lösung gefüllt und einige Stunden vor der Blutentnahme wird das Antiseptikum über einen Hahn im unteren Teil des Geräts entleert. Zentrifugen, die zur Herstellung von Serum verwendet werden, werden ebenfalls mit einem Antiseptikum behandelt, auch zwischen der Verarbeitung des Inhalts jedes Defibrinators.

Alle Glaswaren, einschließlich Fünf-Liter-Behälter zur Lagerung von Molke, werden in einem Elektroofen bei einer Temperatur von 180 °C sterilisiert.

250-ml-Flaschen für Serum werden ebenfalls bei 180 °C sterilisiert. Um den Vorgang zu vereinfachen, befinden sich die Gerichte in Kisten, die beim Abfüllen und Verteilen an die Öffentlichkeit verwendet werden.

Blumenlieferung nach Woskresensk

Die Sterilisation wird durch physikalische, chemische, mechanische und biologische Methoden sowie verschiedene Methoden repräsentiert.

Die Durchführbarkeit der Verwendung einer bestimmten Sterilisationsmethode und ihrer Methoden hängt von den Eigenschaften des zu sterilisierenden Materials sowie seinen physikalischen und chemischen Eigenschaften ab.

Die Sterilisationsdauer hängt vom zu sterilisierenden Objekt, dem Sterilisationsmittel und seiner Dosis sowie der Temperatur und Luftfeuchtigkeit der Umgebung ab.

Physikalische Sterilisationsmethode

Zu den Methoden der physikalischen Sterilisationsmethode gehören Trocknen, Brennen und Kalzinieren, Kochen, Pasteurisieren und Tindisieren, Heißluft (trockene Hitze), Ultraschall, ultraviolette und radioaktive Strahlung, Hochfrequenzstrom, Sonnenlicht.

Die gebräuchlichste Methode zur Sterilisation von Gegenständen, die hohen Temperaturen ausgesetzt sein können, ist die Sterilisation mit Feuer, Heißluft und Sattdampf unter Druck.

Feuer wird verwendet, um infizierte Gegenstände zu verbrennen, die keinen Wert darstellen (unnötige Papiere, alte Tapeten, Lumpen, Müll), um den Auswurf von Tuberkulosepatienten, die Leichen von Menschen und Tieren, die an besonders gefährlichen Infektionen gestorben sind, zu desinfizieren verschiedene Gegenstände verbrennen und kalzinieren.

Brennen und Kalzinieren werden in der mikrobiologischen Praxis häufig zur Desinfektion von Instrumenten, Labor- und Pharmaglasgeräten eingesetzt.

Das Kalzinieren in einer Brennerflamme oder das Flambieren ist eine Sterilisationsmethode, bei der das Objekt vollständig sterilisiert wird, während vegetative Zellen, Zysten und Sporen von Mikroorganismen absterben.

Typischerweise werden Ösen, Spatel, Pipetten, Objektträger und Deckgläser, kleine Instrumente und andere kontaminierte Gegenstände durch Kalzinierung sterilisiert, wenn sie nicht gekocht werden können. Es wird nicht empfohlen, Scheren und Skalpelle durch Erhitzen zu sterilisieren, da die Schnittfläche bei Feuereinwirkung stumpf wird.

Eine der einfachsten und gebräuchlichsten Methoden der physikalischen Sterilisation in der medizinischen Praxis ist die Heißluftsterilisation (trockene Hitze). Die Trockenhitzesterilisation wird in Trockenöfen (Pasteuröfen) durchgeführt. Trockene Heißluft hat eine bakterizide, viruszide, sporizide Wirkung und wird hauptsächlich zur Sterilisation von Glasprodukten (Laborglaswaren – Petrischalen, Kolben, Pipetten, Reagenzgläser usw.) sowie von Metallprodukten verwendet, die mit Dampf sterilisiert werden können unter Druck.

Darüber hinaus werden mit trockener Hitze Gegenstände aus Porzellan und hitzebeständigen Substanzen (Talkum, weißer Ton) sowie mineralische und pflanzliche Öle, Fette, Vaseline, Lanolin und Wachs sterilisiert. Der effektivste Modus für diese Sterilisationsmethode, die den Tod vegetativer Formen und Sporen gewährleistet, ist eine Temperatur von 160 - 180 Grad für 15 Minuten.

Sie können Lebensmittel, isotonische Lösungen oder Gegenstände aus Gummi und synthetischen Materialien nicht mit trockener Hitze sterilisieren, da Flüssigkeiten kochen und auslaufen und Gummi und synthetische Materialien schmelzen.

Die Sterilisation mit gesättigtem Dampf unter Druck ist die zuverlässigste und am häufigsten verwendete Methode zur Sterilisation von Verbänden, Wasser, einigen Medikamenten, Kulturmedien, weichen Geräten und Instrumenten sowie zur Desinfektion von kontaminiertem Abfallmaterial.

In der chirurgischen Praxis werden Verbände, Kittel und Unterwäsche des operierten Patienten in Autoklaven mit Dampf desinfiziert. Die Dampfsterilisation unter Druck wird in speziellen Geräten – Autoklaven – durchgeführt.

Durch Autoklavieren werden alle Mikroorganismen und Sporen vollständig zerstört. Die Dampfdrucksterilisationsmethode basiert auf der Erhitzung des Materials mit gesättigtem Wasserdampf unter einem Druck über dem Atmosphärendruck. Die kombinierte Wirkung von hoher Temperatur und Dampf macht diese Methode besonders effektiv. Dabei sterben sowohl vegetative Zellen als auch mikrobielle Sporen ab.

Mikrobielle Sporen sterben unter dem Einfluss von gesättigtem Wasserdampf innerhalb von 10 Minuten ab, vegetative Formen sterben innerhalb von 1 bis 4 Minuten ab.

Die hohe bakterizide Wirkung von Sattdampf beruht darauf, dass unter dem Einfluss von Wasserdampf unter Druck die Proteine der Mikrobenzelle anschwellen und koagulieren, wodurch die Mikrobenzellen absterben.

Die bakterizide Wirkung von gesättigtem Wasserdampf wird durch Überdruck verstärkt.

Die Sterilisation im Autoklaven wird in verschiedenen Modi durchgeführt.

So werden einfache Nährmedien (Fleisch-Pepton-Agar und Fleisch-Pepton-Brühe) 20 Minuten lang bei 120 Grad (1 atm) sterilisiert. Mit diesem Modus ist es jedoch nicht möglich, Medien zu sterilisieren, die Proteine, Kohlenhydrate und andere Substanzen enthalten, die sich durch Erhitzen leicht verändern.

Medien mit Kohlenhydraten werden in einem Autoklaven bei 0,5 atm sterilisiert. 10 – 15 Minuten oder portionsweise strömender Dampf.

Durch hohe Temperaturen können Sie die hartnäckigsten Formen pathogener Mikroorganismen (einschließlich sporenbildender) nicht nur auf der Oberfläche der zu desinfizierenden Gegenstände, sondern auch in deren Tiefe zerstören.

Hier liegt der große Vorteil der hohen Temperatur als zuverlässiges Sterilisationsmittel. Allerdings verschlechtern sich einige Gegenstände unter dem Einfluss hoher Temperaturen, und in diesen Fällen ist es notwendig, auf andere Methoden und Mittel der Desinfektion zurückzugreifen.

Eine vollständige Sterilisation von Materialien und Gegenständen, die keine Hochtemperatursterilisation zulassen, wird durch wiederholte Sterilisation mit Wasserdampf in einem Koch-Gerät bei einer Temperatur von nicht mehr als 100 Grad erreicht. Diese Methode wird fraktionierte Sterilisation genannt. Es läuft darauf hinaus, dass die verbleibenden ungetöteten Sporenformen von Mikroben nach einem Tag in einem Thermostat bei 37 Grad zu vegetativen Zellen keimen, deren Absterben bei der anschließenden Sterilisation dieses Objekts mit fließendem Dampf erfolgt.

Die Behandlung mit Flüssigkeitsdampf erfolgt dreimal für 30–40 Minuten. Das einmalige Erhitzen des Materials auf eine Temperatur unter 100 Grad wird als Pasteurisierung bezeichnet. Die Pasteurisierung wurde von Pasteur vorgeschlagen und zielt hauptsächlich darauf ab, überwiegend nicht sporenbildende Mikroorganismen zu zerstören. Die Pasteurisierung erfolgt bei 60 – 70 Grad für 15 bis 30 Minuten, bei 80 Grad für 10 bis 15 Minuten.

In der mikrobiologischen Praxis wird die Pasteurisierung von Saatgut häufig eingesetzt, um Reinkulturen sporenbildender Mikroorganismen zu isolieren und die Fähigkeit von Mikroorganismen zur Sporenbildung zu ermitteln.

Bei Flüssigkeiten, die bei hohen Temperaturen Geschmack und andere wertvolle Eigenschaften verlieren (Milch, Beeren- und Fruchtsäfte, Bier, kohlenhydrat- oder harnstoffhaltige Nährmedien etc.), erfolgt die Sterilisation mit strömendem Dampf bei 50 - 60 Grad für 15 - 33333330 Minuten oder bei 70 – 80 Grad für 5 – 10 Minuten. In diesem Fall sterben Mikroben mit mittlerer Resistenz ab, während resistentere Mikroben und Sporen erhalten bleiben.

Eine fraktionierte 5-6-fache Sterilisation bei 60 Grad für 1 Stunde wird als Tyndalisierung bezeichnet.

Viele medizinische Produkte aus Polymermaterialien können einer Dampfsterilisation nach allgemein anerkannten Vorschriften nicht standhalten. Bei vielen Produkten ist eine Sterilisation mit allgemein anerkannten Methoden und Methoden aufgrund der Eigenschaften der darin enthaltenen Flüssigkeiten (Konservierungsstoffe, Medikamente und andere Produkte) nicht möglich. Für solche Produkte werden individuelle Sterilisationsregime entwickelt, um eine zuverlässige Sterilisation der Gegenstände zu gewährleisten.

So erfolgt die Sterilisation des Rotors zur Aufteilung des Blutes in Fraktionen mit Wasserdampf bei einer Temperatur von 120 Grad für 45 Minuten.

Die Sterilität von Konservierungsbehältern wird bei 110 Grad für 60 Minuten erreicht.

Kochen ist eine Sterilisationsmethode, die zum Desterilisieren von wiederverwendbaren Spritzen, chirurgischen Instrumenten, Gummischläuchen, Glas- und Metallutensilien verwendet wird.

Die Sterilisation durch Kochen erfolgt in Sterilisatoren. Sporenformen sterben in kochendem Wasser nach 20 - 30 Minuten ab. Das 45-minütige Kochen wird häufig zur Desinfektion von Sekreten und anderen infektiösen Materialien, Wäsche, Geschirr, Spielzeug und Patientenpflegeartikeln verwendet.

Beim Waschen und Reinigen wird heißes Wasser (60 – 100 Grad) mit Reinigungsmitteln verwendet, um Schmutz und Mikroorganismen mechanisch zu entfernen.

Die meisten vegetativen Zellen sterben bei 70 Grad nach 30 Minuten.

Die Filtrationssterilisation wird in Fällen eingesetzt, in denen Substrate einer Erwärmung nicht standhalten, insbesondere bei Medien, die Proteine, Seren, einige Antibiotika, Vitamine und flüchtige Substanzen enthalten. Diese Technik wird häufig zum Sterilisieren einer Kulturflüssigkeit verwendet, wenn es darum geht, sie von mikrobiellen Zellen zu befreien, aber alle darin enthaltenen Stoffwechselprodukte unverändert zu erhalten.

Bei dieser Methode werden Flüssigkeiten durch spezielle Filter gefiltert, die über feinporöse Trennwände verfügen und somit mikrobielle Zellen zurückhalten.

Die beiden am weitesten verbreiteten Filtertypen sind Membranfilter und Seitz-Filter.

Membranfilter werden aus Kollodium, Acetat, Cellulose und anderen Materialien hergestellt.

Seitz-Filter bestehen aus einer Mischung aus Asbest und Zellulose.

Darüber hinaus werden zur Sterilisation Filter aus Kaolin mit einer Beimischung von Quarzsand, Infusorerde und anderen Materialien („Kerzen“ von Chamberlan, Berkfeld) verwendet.

Membran- und Asbestfilter sind für den einmaligen Gebrauch konzipiert.

Bei ultravioletter Bestrahlung wird die bakterizide Wirkung durch Strahlen mit einer Länge von 200 - 450 nm erzielt, deren Quelle bakterizide Lampen sind.

Mit Hilfe von bakteriziden Lampen wird Luft in medizinischen und präventiven Einrichtungen, Boxen in mikrobiologischen Labors, in Betrieben der Lebensmittelindustrie, in Boxen zur Herstellung von Impfstoffen und Seren, in Operationssälen, Manipulationsräumen, Kindereinrichtungen usw. mit ultravioletten Strahlen sterilisiert .

Ultraviolette Strahlen haben eine hohe antimikrobielle Aktivität und können nicht nur zum Tod vegetativer Zellen, sondern auch ihrer Sporen führen.

Sonnenlicht führt zum Absterben von Mikroorganismen durch ultraviolette Strahlung und Austrocknung.

Die Trocknung mit Sonnenlicht wirkt sich nachteilig auf viele Arten von Mikroorganismen aus, ihre Wirkung ist jedoch oberflächlich und daher spielt Sonnenlicht eine unterstützende Rolle in der Sterilisationspraxis.

Bei der Behandlung von Wunden und Verbrennungen werden neuerdings Beschichtungen aus synthetischen und natürlichen Polymeren in Form von Gelen eingesetzt.

Antiseptische Polymerfolien werden häufig zur lokalen Behandlung von Wunden und Verbrennungen eingesetzt. Sie enthalten antimikrobielle Breitbandwirkstoffe wie Katapol, Dioxidin, blaues Jod sowie Sorbit, das Glutaraldehyd enthält. Um diese Filme zu sterilisieren, wird ionisierende Strahlung mit einer Dosis von 20,0 kGy verwendet. Bei der industriellen Herstellung von antiseptischen Polymerfolien und Sorptionsmitteln ist deren Sterilität unter diesem Sterilisationsregime vollständig gewährleistet.

Radioaktive Strahlung tötet alle Arten von Mikroorganismen ab, sowohl in vegetativer Form als auch in Sporenform. Es wird häufig zur Sterilisation in Unternehmen verwendet, die sterile Produkte und sterile medizinische Einweggeräte herstellen, zur Desinfektion von Abwasser und Rohstoffen tierischen Ursprungs.

Mechanische Sterilisationsmethode

Durch mechanische Sterilisationsverfahren werden Keime von der Oberfläche von Gegenständen entfernt. Dazu gehören Waschen, Ausschütteln, Fegen, Nasswischen, Lüften, Lüften, Staubsaugen, Waschen.

Chemische Sterilisationsmethode

In der medizinischen Praxis werden mittlerweile zunehmend Kunststoffe eingesetzt.

Sie werden in der Zahnheilkunde, Kiefer- und Gesichtschirurgie, Traumatologie, Orthopädie und Chirurgie eingesetzt. Die meisten Kunststoffe können den Hitzesterilisationsmethoden Dampf unter Druck und trockener Hitze (trockene, erhitzte Luft) nicht standhalten. Die zum Sterilisieren solcher Gegenstände verwendeten Lösungen aus Alkohol, Diozid und ternärer Lösung gewährleisten nicht die Sterilität der verarbeiteten Produkte.

Daher werden zur Sterilisation von Kunststoffprodukten Gas- und Strahlungsverfahren sowie chemische Lösungen eingesetzt.

Die Einführung einer Vielzahl von Produkten aus thermolabilen Materialien in die Praxis medizinischer Einrichtungen trägt zur Einführung von Strahlungs- und Gasmethoden zur Desinfektion und Sterilisation mit Desinfektionslösungen bei.

Bei der chemischen Sterilisation werden Gase und Wirkstoffe aus verschiedenen chemischen Gruppen verwendet (Peroxide, Phenole, Halogene, Aldehyde, Laugen und Säuren, Tenside usw.). Für den täglichen Gebrauch werden Wasch-, Reinigungs-, Bleich- und andere Präparate hergestellt, die durch die Einbringung verschiedener Chemikalien in ihre Zusammensetzung eine antimikrobielle Wirkung haben.

Diese Präparate werden zur Reinigung und Desinfektion von Sanitäranlagen, Geschirr, Wäsche usw. verwendet.

Formaldehyddampf (Steamform) kann in medizinischen Einrichtungen zum Sterilisieren von medizinischen Metallprodukten (Skalpelle, Nadeln, Pinzetten, Sonden, Klemmen, Haken, Drahtschneider usw.) verwendet werden.

Vor der Sterilisation mit Formaldehyddampf müssen die Produkte einer Vorsterilisationsreinigung unterzogen und gründlich getrocknet werden.

Bei der Sterilisation mit einer chemischen Methode hängt das Verfahren zur Verarbeitung eines bestimmten Gegenstands von den Eigenschaften des zu desinfizierenden Gegenstands, der Widerstandsfähigkeit von Mikroben, den Eigenschaften der Chemikalien, der Umgebungstemperatur, der Luftfeuchtigkeit und anderen Faktoren ab.

So wird die Sterilität von Metallinstrumenten nach fünfstündiger Lagerung in einer geschlossenen Kammer mit Dampf bei einer Temperatur von mindestens 20 Grad und einer relativen Luftfeuchtigkeit von 95 - 98 % erreicht; bei einer Temperatur von 15 Grad ist die vollständige Sterilität dieser Gegenstände erreicht wird erst nach 16 Stunden erreicht.

Die sporizide Wirkung von Glutaraldehyd hängt von der Temperatur ab. Seine optimale Wirkung tritt bei einer Temperatur von 15 - 25 Grad ein. Mit steigender Temperatur nimmt die sporizide Wirkung dieses Arzneimittels ab.

Chemische Sterilisation wird in etwas begrenztem Umfang eingesetzt. Am häufigsten wird diese Methode verwendet, um eine bakterielle Kontamination von Kulturmedien und immunbiologischen Präparaten (Impfstoffe und Seren) zu verhindern. Den Nährmedien werden am häufigsten Substanzen wie Chloroform, Toluol und Ether zugesetzt. Ist es notwendig, das Medium von diesen Konservierungsstoffen zu befreien, wird es im Wasserbad auf 56 Grad erhitzt und die Konservierungsstoffe verdampfen.

Zur Konservierung von Impfstoffen oder Seren werden Merthiolat, Borsäure und Formalin verwendet.

Biologische Sterilisationsmethode

Die biologische Sterilisation basiert auf dem Einsatz von Antibiotika.

Diese Methode wird häufig bei der Kultivierung von Viren eingesetzt.

Bei der Sterilisation (von lateinisch sterilis – steril) handelt es sich um die vollständige Inaktivierung von Mikroben auf zu verarbeitenden Gegenständen.

Pasteurofen – Sterilisation mit trockener Hitze.

Es gibt drei Hauptmethoden der Sterilisation: Hitze, Strahlung, chemisch.

Jod.

Die Hitzesterilisation basiert auf der Empfindlichkeit von Mikroben gegenüber hohen Temperaturen.

Bei 60 °C und in Gegenwart von Wasser kommt es zur Denaturierung von Proteinen, darunter auch von Enzymen, wodurch die vegetativen Formen der Mikroben absterben. Sporen, die nur sehr wenig gebundenes Wasser enthalten und eine dichte Schale haben, werden bei 160–170 °C inaktiviert. Bei der Hitzesterilisation kommen vor allem trockene Hitze und Dampf unter Druck zum Einsatz.
Die Trockenhitzesterilisation wird in Trockenhitzeöfen oder Pasteuröfen durchgeführt. Der Pasteurofen ist ein dicht verschlossener Metallschrank, der elektrisch beheizt und mit einem Thermometer ausgestattet ist.

Die Desinfektion des darin enthaltenen Materials erfolgt bei 160–170 °C für 60–120 Minuten. Der Nachteil dieser Methode besteht darin, dass nur einige sterilisierbare Gegenstände, wie beispielsweise Laborglas, solch hohen Temperaturen standhalten können.
Die universellste Sterilisationsmethode ist die Dampfbehandlung unter Druck in Autoklaven, in der Verbände, Wäsche, viele Instrumente, Kulturmedien, Lösungen, infektiöses Material usw. sterilisiert werden.

Ein Autoklav ist ein Metallzylinder mit starken Wänden, der hermetisch verschlossen ist und aus einer Wasser-Dampf- und Sterilisationskammer besteht. Das Gerät ist mit einem Manometer, einem Thermometer und anderen Überwachungsgeräten ausgestattet. Im Autoklaven entsteht ein erhöhter Druck, der zu einer Erhöhung des Siedepunktes von Wasser führt. Bei 0,5 atm liegt der Siedepunkt also bei 80 °C, bei 1 atm bei 100 °C, bei 2 atm bei 121 °C und bei 3 atm bei 136 °C.

Da neben der hohen Temperatur auch Dampf auf Mikroorganismen einwirkt, sterben Sporen bereits bei 120 °C ab. Der gebräuchlichste Betriebsmodus für Autoklaven ist 2 atm, 121 °C, 15–20 Minuten. Die Sterilisationszeit nimmt mit zunehmender Zeit ab Luftdruck und damit der Siedepunkt. Mikroorganismen sterben in wenigen Sekunden ab, die Verarbeitung des Materials dauert jedoch länger, da erstens die Temperatur im Inneren des zu sterilisierenden Materials hoch sein muss und zweitens ein sogenanntes Sicherheitsfeld vorhanden ist, das für mögliche Abweichungen ausgelegt ist die angegebenen Parameter beim Autoklavenbetrieb.

Schlagworte: Körper, Wachstum, Sterilisation, Enzym

Das Leben von Mikroorganismen hängt stark von den Umweltbedingungen ab. Alle Umweltfaktoren, die Mikroorganismen beeinflussen, lassen sich in drei Gruppen einteilen: physikalische, chemische und biologische, deren positive oder schädliche Wirkung sowohl von der Natur des Faktors selbst als auch von den Eigenschaften des Mikroorganismus abhängt.

Physische Faktoren

Von den physikalischen Faktoren haben Temperatur, Trocknung, Strahlungsenergie und Ultraschall den größten Einfluss auf die Entwicklung von Mikroorganismen.

Temperatur. Die Lebensaktivität jedes Mikroorganismus ist durch bestimmte Temperaturgrenzen begrenzt. Diese Temperaturabhängigkeit wird normalerweise durch drei Hauptpunkte ausgedrückt: Minimum – die Temperatur, unterhalb derer die Vermehrung mikrobieller Zellen aufhört; optimal - beste Temperatur für das Wachstum und die Entwicklung von Mikroorganismen; Maximum - die Temperatur, oberhalb derer die lebenswichtige Aktivität der Zellen schwächer wird oder aufhört. Die optimale Temperatur entspricht in der Regel den Temperaturbedingungen des natürlichen Lebensraums.

Alle Mikroorganismen werden in Bezug auf die Temperatur in Psychrophile, Mesophile und Thermophile unterteilt.

Psychrophile (von griechisch psychros – Kälte, phileo – Liebe) oder kälteliebende Mikroorganismen wachsen relativ schnell niedrige Temperaturen: minimale Temperatur - 0° C, optimal - 10-20° C, maximal - 30° C. Zu dieser Gruppe gehören Mikroorganismen, die in leben nördliche Meere und Ozeane, Boden, Abwasser. Dazu gehören auch Leucht- und Eisenbakterien sowie Mikroben, die bei Kälte (unter 0° C) zum Verderben von Lebensmitteln führen.

Mesophile (von griech. mesos – Mitte) sind die umfangreichste Gruppe, zu der die meisten Saprophyten und alle pathogenen Mikroorganismen gehören. Die optimale Temperatur für sie liegt bei 28–37 °C, das Minimum bei 10 °C und das Maximum bei 45 °C.

Thermophile (von griech. termos – Hitze, Hitze) oder wärmeliebende Mikroorganismen entwickeln sich bei Temperaturen über 55 °C, das Temperaturminimum liegt für sie bei 30 °C, das Optimum bei 50-60 °C und das Maximum bei 70 -75 °C. Sie kommen in heißen Mineralquellen, der Oberflächenschicht des Bodens, selbsterhitzenden Substraten (Mist, Heu, Getreide) und im Darm von Menschen und Tieren vor. Unter Thermophilen gibt es viele Sporenformen.

Hohe und niedrige Temperaturen haben unterschiedliche Auswirkungen auf Mikroorganismen. Manche reagieren empfindlicher auf hohe Temperaturen. Darüber hinaus kommt es umso schneller zum Absterben mikrobieller Zellen, je höher die Temperatur über dem Maximum liegt, was auf die Denaturierung (Koagulation) von Zellproteinen zurückzuführen ist.

Vegetative Formen mesophiler Bakterien sterben bei einer Temperatur von 60 °C innerhalb von 30–60 Minuten und bei 80–100 °C nach 1–2 Minuten ab. Bakteriensporen sind viel resistenter gegen hohe Temperaturen. Beispielsweise können Sporen von Milzbrandbakterien dem Kochen 10 bis 20 Minuten und Sporen von Clostridium-Botulismus 6 Stunden lang standhalten. Alle Mikroorganismen, einschließlich der Sporen, sterben eine Stunde lang bei einer Temperatur von 165 bis 170 ° C ab (in trockener Hitze). Ofen) oder wenn es 30 Minuten lang Dampf unter einem Druck von 1 atm (in einem Autoklaven) ausgesetzt wird.

Die Wirkung hoher Temperaturen auf Mikroorganismen ist die Grundlage der Sterilisation – der vollständigen Befreiung verschiedener Gegenstände von Mikroorganismen und ihren Sporen (siehe unten).

Viele Mikroorganismen sind äußerst resistent gegen niedrige Temperaturen. Salmonella typhus und Vibrio cholerae überleben lange Zeit im Eis. Einige Mikroorganismen bleiben bei Temperaturen flüssiger Luft (-190 °C) lebensfähig und Bakteriensporen können Temperaturen bis zu -250 °C standhalten.

Nur einzelne Arten pathogene Bakterien reagieren empfindlich auf niedrige Temperaturen (z. B. Bordetella pertussis und parapertussis, Neisseria meningococcus usw.). Diese Eigenschaften von Mikroorganismen werden in der Labordiagnostik und beim Transport des Untersuchungsmaterials berücksichtigt – es wird vor Kühlung geschützt ins Labor geliefert.

Durch die Einwirkung niedriger Temperaturen werden Fäulnis- und Gärungsprozesse gestoppt, was häufig zur Konservierung von Lebensmitteln in Kühlschränken, Kellern und Gletschern eingesetzt wird. Bei Temperaturen unter 0° C verfallen Mikroben in einen Ruhezustand – Stoffwechselvorgänge verlangsamen sich und die Fortpflanzung kommt zum Stillstand. Wenn es jedoch angemessen ist Temperaturbedingungen und Nährmedium werden die lebenswichtigen Funktionen mikrobieller Zellen wiederhergestellt. Diese Eigenschaft von Mikroorganismen wird in der Laborpraxis genutzt, um mikrobielle Kulturen bei niedrigen Temperaturen zu konservieren. Auch schnelle Wechsel von hohen und niedrigen Temperaturen (Gefrieren und Auftauen) wirken sich nachteilig auf Mikroorganismen aus – dies führt zum Bruch der Zellmembranen.

Trocknen. Wasser ist für das normale Funktionieren von Mikroorganismen notwendig. Das Trocknen führt zu einer Dehydrierung des Zytoplasmas und einer Störung der Integrität der Zytoplasmamembran, wodurch die Ernährung mikrobieller Zellen gestört wird und es zu deren Tod kommt.

Der Zeitpunkt des Absterbens verschiedener Arten von Mikroorganismen unter dem Einfluss von Trocknung unterscheidet sich erheblich. Beispielsweise sterben pathogene Neisseria (Meningokokken, Gonokokken), Leptospira, Treponema pallidum und andere beim Trocknen nach wenigen Minuten ab. Vibrio cholerae hält dem Trocknen 2 Tage stand, Salmonella typhoid – 70 Tage und Mycobacterium tuberculosis – 90 Tage. Doch der getrocknete Auswurf von Tuberkulosepatienten, bei dem die Erreger durch eine trockene Eiweißhülle geschützt sind, bleibt 10 Monate lang infektiös.

Sporen sind besonders resistent gegen Austrocknung, aber auch gegen andere Umwelteinflüsse. Sporen von Milzbrandbakterien behalten ihre Keimfähigkeit 10 Jahre lang, Sporen von Schimmelpilzen bis zu 20 Jahre.

Die ungünstige Wirkung der Trocknung auf Mikroorganismen wird seit langem zur Konservierung von Gemüse, Obst, Fleisch, Fisch usw. genutzt Heilkräuter. Gleichzeitig verderben solche Produkte bei hoher Luftfeuchtigkeit aufgrund der Wiederherstellung der mikrobiellen Aktivität schnell.

Die Gefriertrocknungsmethode wird häufig zur Lagerung von Kulturen von Mikroorganismen, Impfstoffen und anderen biologischen Präparaten eingesetzt. Der Kern der Methode besteht darin, dass Mikroorganismen oder Präparate zunächst eingefroren und dann unter Vakuumbedingungen getrocknet werden. In diesem Fall geraten mikrobielle Zellen in einen Zustand der Schwebe und behalten ihre biologischen Eigenschaften für mehrere Monate oder Jahre.

Strahlungsenergie. In der Natur sind Mikroorganismen ständig der Sonnenstrahlung ausgesetzt. Direkte Sonneneinstrahlung führt zum Absterben vieler Mikroorganismen innerhalb weniger Stunden, mit Ausnahme von photosynthetischen Bakterien (grüne und violette Schwefelbakterien). Die schädlichen Auswirkungen des Sonnenlichts sind auf die Aktivität zurückzuführen ultraviolette Strahlung(UV-Strahlen). Sie inaktivieren Zellenzyme und schädigen die DNA. Pathogene Bakterien reagieren empfindlicher auf die Einwirkung von UV-Strahlen als Saprophyten. Daher ist es besser, mikrobielle Kulturen im Labor im Dunkeln aufzubewahren. In dieser Hinsicht ist Buchners Erfahrung bezeichnend.

In einer Petrischale mit dünne Schicht Agar wird durch reichliche Beimpfung einer beliebigen Bakterienkultur hergestellt. Auf die Außenfläche des Samenbechers werden aus schwarzem Papier ausgeschnittene Buchstaben geklebt, die beispielsweise das Wort „Typhus“ ergeben. Der Becher wird mit dem Boden nach oben 1 Stunde lang direktem Sonnenlicht ausgesetzt. Anschließend werden die Papiere entfernt und der Becher einen Tag lang in einen Thermostaten bei 37° C gestellt. Bakterienwachstum wird nur an diesen Stellen beobachtet Agar, die durch Aufkleberbuchstaben vor UV-Strahlen geschützt waren. Der Rest des Agars bleibt transparent, d. h. es findet kein Wachstum von Mikroorganismen statt (Abb. 11).

Die Bedeutung des Sonnenlichts als natürlicher Faktor für die Verbesserung der Gesundheit der äußeren Umgebung ist groß. Es befreit die Luft, das Wasser natürlicher Reservoirs und die oberen Bodenschichten von pathogenen Bakterien.

Die bakterizide (bakterienzerstörende) Wirkung von UV-Strahlen wird zur Sterilisation der Luft in geschlossenen Räumen (Operationssäle, Umkleidekabinen, Boxen etc.) sowie von Wasser und Milch genutzt. Die Quelle dieser Strahlen sind UV-Strahlungslampen und bakterizide Lampen.

Andere Arten von Strahlungsenergie – Röntgenstrahlen, α-, β-, γ-Strahlen – haben nur in hohen Dosen, in der Größenordnung von 440–280 J/kg, eine schädliche Wirkung auf Mikroorganismen. Der Tod von Mikroben wird durch die Zerstörung von Kernstrukturen und zellulärer DNA verursacht. Niedrige Strahlungsdosen stimulieren das Wachstum mikrobieller Zellen. Mikroorganismen sind gegenüber radioaktiver Strahlung wesentlich resistenter als höhere Organismen. Es ist bekannt, dass thionische Bakterien in Ablagerungen leben Uranerze. Im Wasser von Kernreaktoren wurden Bakterien bei einer Konzentration ionisierender Strahlung von 20–30 kJ/kg gefunden.

Die bakterizide Wirkung ionisierender Strahlung wird zur Konservierung bestimmter Lebensmittel und zur Sterilisation biologischer Präparate (Seren, Impfstoffe usw.) genutzt, wobei sich die Eigenschaften des sterilisierten Materials nicht ändern.

In den letzten Jahren wurden Einwegprodukte wie Styroporpipetten, Petrischalen, Vertiefungen für serologische Reaktionen, Spritzen sowie Nahtmaterial – Katgut usw. – mit der Strahlenmethode sterilisiert.

Ultraschall verursacht erhebliche Schäden an mikrobiellen Zellen. Unter dem Einfluss von Ultraschall werden Gase, die sich in der flüssigen Umgebung des Zytoplasmas befinden, aktiviert und es entsteht ein hoher Druck im Inneren der Zelle (bis zu 10.000 atm). Dies führt zum Bruch der Zellmembran und zum Zelltod. Ultraschall wird zur Sterilisation von Lebensmitteln (Milch, Fruchtsäfte) und Trinkwasser eingesetzt.

Hoher Drück. Bakterien und insbesondere ihre Sporen sind resistent gegen mechanischen Druck. In der Natur kommen Bakterien vor, die in Meeren und Ozeanen in einer Tiefe von 1000-10000 m unter einem Druck von 100 bis 900 atm leben. Einige Arten von Bakterien können Drücken von bis zu 3000–5000 atm und Bakteriensporen sogar 20.000 atm standhalten.

Chemische Faktoren

Die Wirkung von Chemikalien auf Mikroorganismen hängt von der Art der chemischen Verbindung, ihrer Konzentration und der Dauer der Exposition gegenüber mikrobiellen Zellen ab. Abhängig von der Konzentration kann ein chemischer Stoff eine Nahrungsquelle sein oder eine hemmende Wirkung auf die lebenswichtige Aktivität von Mikroorganismen haben. Beispielsweise stimuliert eine 0,5–2 %ige Glucoselösung das Wachstum von Mikroben, und 20–40 %ige Glucoselösungen hemmen die Proliferation mikrobieller Zellen.

Viele chemische Verbindungen, die sich schädlich auf Mikroorganismen auswirken, werden in der medizinischen Praxis als Desinfektionsmittel und Antiseptika eingesetzt.

Zur Desinfektion verwendete Chemikalien werden Desinfektionsmittel genannt. Unter Desinfektion versteht man Maßnahmen zur Zerstörung pathogener Mikroorganismen in verschiedenen Umweltobjekten. Zu den Desinfektionsmitteln zählen Halogenidverbindungen, Phenole und deren Derivate, Salze von Schwermetallen, einige Säuren, Laugen, Alkohole usw. Sie verursachen den Tod mikrobieller Zellen und wirken in optimalen Konzentrationen für eine bestimmte Zeit. Viele Desinfektionsmittel wirken sich schädlich auf das Gewebe des Makroorganismus aus.

Sie werden Antiseptika genannt Chemikalien, die zum Absterben von Mikroorganismen führen oder deren Wachstum und Vermehrung hemmen können. Sie werden zu therapeutischen Zwecken (Chemotherapie) sowie zur Desinfektion von Wunden, Haut und menschlichen Schleimhäuten eingesetzt. Wasserstoffperoxid, alkoholische Lösungen von Jod, Brillantgrün, Lösungen von Kaliumpermanganat usw. haben antiseptische Eigenschaften. Einige antiseptische Substanzen (Essigsäure, Schwefelsäure, Benzoesäure usw.) werden in für den Menschen ungefährlichen Dosen zur Lebensmittelkonservierung verwendet.

Je nach Wirkungsmechanismus lassen sich chemische Substanzen mit antimikrobieller Wirkung in mehrere Gruppen einteilen.

1. Tenside (Fettsäuren, Seifen und andere Reinigungsmittel) bewirken eine Verringerung der Oberflächenspannung, was zu einer Funktionsstörung der Zellwand und der Zytoplasmamembran von Mikroorganismen führt.

2. Phenol, Kresol und ihre Derivate bewirken die Koagulation mikrobieller Proteine. Sie werden zur Desinfektion von infektiösem Material in mikrobiologischen Praxen und Krankenhäusern für Infektionskrankheiten eingesetzt.

3. Oxidationsmittel, die mit mikrobiellen Proteinen interagieren, stören die Aktivität von Enzymen und verursachen eine Proteindenaturierung. Aktive Oxidationsmittel sind Chlor und Ozon, die zur Desinfektion von Trinkwasser eingesetzt werden. Zu Desinfektionszwecken werden häufig Chlorderivate (Bleichmittel, Chloramin) eingesetzt. Wasserstoffperoxid, Kaliumpermanganat, Jod usw. haben oxidierende Eigenschaften.

4. Formaldehyd wird in Form einer 40 %igen Lösung (Formalin) zur Desinfektion eingesetzt. Es tötet vegetative und sporenförmige Mikroorganismen ab. Formalin blockiert die Aminogruppen mikrobieller Zellproteine und bewirkt deren Denaturierung.

5. Salze von Schwermetallen (Quecksilber, Blei, Zink, Gold usw.) koagulieren die Proteine der mikrobiellen Zelle und führen dadurch zu deren Tod. Eine Reihe von Metallen (Silber, Gold, Quecksilber usw.) wirken in vernachlässigbaren Konzentrationen bakterizid auf Mikroorganismen. Diese Eigenschaft wird als oligodynamische Wirkung bezeichnet (von lateinisch oligos – klein, dinamys – Stärke). Es ist erwiesen, dass Wasser in Silbergefäßen aufgrund der bakteriziden Wirkung von Silberionen nicht verrottet. Zur Vorbeugung von Blenorrhoe* bei Neugeborenen lange Zeit Es wurde eine 1%ige Silbernitratlösung verwendet. Kolloidale Lösungen organische Verbindungen Silber (Protargol, Collargol) wird auch als lokales Antiseptikum eingesetzt.

* (Blennorea ist eine durch Gonokokken verursachte Entzündung der Bindehaut des Auges.)

Quecksilberpräparate haben eine starke antimikrobielle Wirkung. Seit der Antike wird Quecksilberbichlorid oder Quecksilberchlorid (in einer Verdünnung von 1:1000) zur Desinfektion verwendet. Allerdings hat sie toxische Wirkung auf das Gewebe des Makroorganismus und seine Verwendung ist begrenzt.

6. Farbstoffe (Diamantgrün, Rivanol etc.) haben die Eigenschaft, das Wachstum von Bakterien zu hemmen. Lösungen einer Reihe von Farbstoffen werden als Antiseptika verwendet und einigen Nährmedien auch zugesetzt, um das Wachstum der begleitenden Mikroflora zu hemmen.

Die zerstörerische Wirkung einer Reihe physikalischer und chemischer Faktoren auf Mikroorganismen bildet die Grundlage aseptischer und antiseptischer Methoden, die in der medizinischen und sanitären Praxis weit verbreitet sind.

Asepsis ist ein System vorbeugender Maßnahmen, die eine mikrobielle Kontamination eines Objekts (Wunden, Chirurgischer Bereich, Kulturen von Mikroorganismen usw.) basierend auf physikalischen Methoden.

Antiseptika sind eine Reihe von Maßnahmen, die darauf abzielen, Mikroorganismen in einer Wunde, am ganzen Körper oder an Umweltgegenständen mithilfe verschiedener desinfizierender Chemikalien zu zerstören.

Biologische Faktoren

In natürlichen Lebensräumen existieren Mikroorganismen nicht isoliert, sondern stehen in komplexen Beziehungen, die hauptsächlich auf Symbiose, Metabiose und Antagonismus zurückzuführen sind.

Unter Symbiose versteht man das Zusammenleben von Organismen verschiedener Arten, das ihnen gegenseitigen Nutzen bringt. Gleichzeitig entwickeln sie sich gemeinsam besser als jeder einzeln.

Symbiotische Beziehungen bestehen zwischen Knöllchenbakterien und Hülsenfrüchten, zwischen Fadenpilzen und Blaualgen (Flechten): Die Symbiose von Milchsäurebakterien und alkoholischer Hefe wird zur Herstellung einiger Milchsäureprodukte (Kefir, Koumiss) genutzt.

Metabiose ist eine Art Beziehung, bei der die Stoffwechselprodukte einer Art von Mikroorganismen die notwendigen Voraussetzungen für die Entwicklung anderer schaffen. Beispielsweise tragen fäulniserregende Mikroorganismen, die Eiweißstoffe abbauen, zur Anreicherung von Ammoniumverbindungen in der Umwelt bei und schaffen günstige Bedingungen für das Wachstum und die Entwicklung nitrifizierender Bakterien. Und die Entwicklung von Anaerobiern in gut belüfteten Böden wäre ohne Aerobier, die freien Sauerstoff absorbieren, unmöglich.

Metabiotische Beziehungen sind unter Bodenmikroorganismen weit verbreitet und liegen dem Stoffkreislauf in der Natur zugrunde.

Antagonismus ist eine Beziehungsform, bei der ein Mikroorganismus die Entwicklung eines anderen Mikroorganismus hemmt oder dessen vollständigen Tod verursachen kann. Unter den Mikroorganismen haben sich im Kampf ums Dasein antagonistische Beziehungen entwickelt. Überall, wo sie leben, gibt es einen ständigen Kampf zwischen ihnen um Nahrungsquellen, Luftsauerstoff und Lebensraum. Daher können die meisten pathogenen Bakterien, die mit den Sekreten der Patienten in die äußere Umgebung (Boden, Wasser) gelangt sind, der langfristigen Konkurrenz mit zahlreichen Saprophyten nicht standhalten und sterben relativ schnell ab.

Antagonismus kann durch den direkten Einfluss von Mikroorganismen aufeinander oder durch die Wirkung ihrer Stoffwechselprodukte verursacht werden. Beispielsweise fressen Protozoen Bakterien und Phagen lysieren sie. Der Darm von Neugeborenen wird vom Milchsäurebakterium Bifidobacterium bifidum besiedelt. Durch die Freisetzung von Milchsäure unterdrücken sie das Wachstum von Fäulnisbakterien und schützen so den noch fragilen Organismus von Säuglingen vor Darmerkrankungen. Einige Mikroorganismen produzieren im Lebensprozess verschiedene Substanzen, die sich schädlich auf Bakterien und andere Mikroben auswirken. Zu diesen Stoffen zählen Antibiotika (siehe „Antibiotika“).

Kontrollfragen

1 Was physische Faktoren Einfluss auf die Lebensaktivität von Mikroorganismen?

2. Welche Stoffe werden als Desinfektionsmittel eingestuft und wie unterscheiden sie sich in ihrem Wirkmechanismus auf Mikroorganismen?

3. Listen Sie auf, welche Beziehungen zwischen Mikroorganismen bestehen.

Sterilisation

Unter Sterilisation versteht man die Sterilisation, also die vollständige Befreiung von Umweltgegenständen von Mikroorganismen und deren Sporen.

Die Sterilisation wird auf verschiedene Arten durchgeführt:

1) physikalisch (Einwirkung von hohen Temperaturen, UV-Strahlen, Verwendung von Bakterienfiltern);

2) chemisch (Verwendung verschiedener Desinfektionsmittel, Antiseptika);

3) biologisch (Einsatz von Antibiotika).

In der Laborpraxis werden üblicherweise physikalische Sterilisationsmethoden eingesetzt.

Physikalische Methoden

Sterilisation mit trockener Hitze

Die Sterilisation mit trockener Hitze oder Heißluft erfolgt in Pasteuröfen (Trockenöfen). Der Pasteurofen ist ein doppelwandiger Schrank aus hitzebeständigen Materialien – Metall und Asbest. Beheizen Sie den Schrank mit Gasbrennern oder elektrischen Heizgeräten. Elektrisch beheizte Schränke sind mit Reglern ausgestattet, um die erforderliche Temperatur sicherzustellen. Um die Temperatur zu kontrollieren, wird ein Thermometer in das Loch in der oberen Wand des Schranks eingesetzt.

Trockene Hitze wird zum Sterilisieren von Laborglas verwendet. Das zur Sterilisation vorbereitete Geschirr wird lose in den Ofen geladen, um eine gleichmäßige und zuverlässige Erwärmung des Sterilisationsgutes zu gewährleisten. Schließen Sie die Schranktür fest, schalten Sie das Heizgerät ein, bringen Sie die Temperatur auf 160-165 °C und sterilisieren Sie 1 Stunde lang bei dieser Temperatur. Schalten Sie am Ende der Sterilisation die Heizung aus, aber öffnen Sie die Schranktür erst, wenn die Sterilisation abgeschlossen ist Ofen ist abgekühlt; sonst kalte Luft Wenn Sie den Schrank betreten, kann es zu Rissen im heißen Kochgeschirr kommen.

Die Sterilisation im Pasteurofen kann auf verschiedene Arten durchgeführt werden Temperaturbedingungen und Exposition (Sterilisationszeit) (Tabelle 1).

Um die Sterilisation in einem Pasteurofen zu kontrollieren, werden Seidenfäden in einer Kultur sporenbildender Bakterien angefeuchtet, getrocknet, in eine sterile Petrischale gegeben und in einen Pasteurofen gegeben. Die Sterilisation erfolgt bei einer Temperatur von 165° C für 1 Stunde (zur Kontrolle werden einige Fäden bei Raumtemperatur belassen). Anschließend werden die sterilisierten Fäden und die Kontrollfäden auf die Oberfläche des Agars in einer Petrischale oder in Reagenzgläser mit Brühe gelegt und in einem Thermostat bei 37 °C für 2 Tage inkubiert. Bei ordnungsgemäßem Betrieb des Pasteurofens kommt es in Reagenzgläsern oder Schalen mit Nährmedien, in die sterilisierte Fäden eingelegt wurden, zu keinem Wachstum, da Bakteriensporen absterben, während Bakteriensporen auf nicht sterilisierten Fäden (Kontrolle) auf Nährboden keimen Medienwachstum wird zu verzeichnen sein.

Um die Temperatur im Pasteurofen zu bestimmen, können Sie Saccharose oder Kristallzucker verwenden, der bei einer Temperatur von 165-170 °C karamellisiert.

Vorbereiten von Laborglaswaren für die Sterilisation in einem Pasteurofen. Vor der Sterilisation müssen Laborglasgeräte (Petrischalen, Mess- und Pasteurpipetten, Fläschchen, Kolben, Reagenzgläser) gründlich gewaschen, getrocknet und in Papier eingewickelt werden, da sie sonst nach der Sterilisation erneut mit Luftbakterien kontaminiert werden können.

Petrischalen werden einzeln oder in mehreren Stücken in Papier eingewickelt oder in spezielle Metallbehälter gelegt.

In die oberen Enden der Pipetten werden Wattestäbchen eingeführt, um zu verhindern, dass das Testmaterial in den Mund gelangt. Messpipetten werden in lange Papierstreifen von 4–5 cm Breite eingewickelt und das Volumen der eingewickelten Pipette auf dem Papier markiert. In Federmäppchen werden Messpipetten ohne zusätzliche Papierverpackung sterilisiert.

Notiz. Wenn die Skala auf den Pipetten schlecht sichtbar ist, wird sie vor der Sterilisation wiederhergestellt. Auf die Pipette wird Ölfarbe aufgetragen und, ohne die Farbe trocknen zu lassen, mit einem Tuch Bariumsulfatpulver eingerieben. Entfernen Sie anschließend mit einem Lappen überschüssige Farbe, die nur in den Graduierungskerben zurückbleibt. Auf diese Weise behandelte Pipetten sollten gespült werden.

Die scharfen Enden von Pasteurpipetten werden in einer Brennerflamme versiegelt und jeweils 3-5 Stück in Papier eingewickelt. Pasteurpipetten müssen sorgfältig verpackt werden, damit die versiegelten Enden der Kapillaren nicht abbrechen.

Fläschchen, Kolben und Reagenzgläser werden mit Baumwollgaze-Stopfen verschlossen. Der Korken sollte zu 2/3 seiner Länge in den Hals des Gefäßes passen, nicht zu fest, aber auch nicht locker. Über die Stopfen jedes Gefäßes (außer Reagenzgläser) wird eine Papierkappe gestülpt. Reagenzgläser werden in Gruppen von 5–50 zusammengebunden und mit Papier umwickelt.

Notiz. Bei hohen Temperaturen verfärben sich das Papier, in das Becher und Pipetten eingewickelt sind, sowie Watte gelb und können sogar verkohlen, so jeder neue Sorte Das im Labor eingegangene Papier sollte bei den zulässigen Temperaturbedingungen getestet werden.

Kontrollfragen

1. Was versteht man unter dem Begriff Sterilisation?

2. Wie erfolgt die Sterilisation?

3. Was wird durch Kalzinierung über Feuer sterilisiert?

4. Beschreiben Sie den Aufbau und die Funktionsweise des Pasteurofens.

5. Was wird in einem Pasteurofen sterilisiert?

6. Wie werden Glaswaren für die Sterilisation vorbereitet?

7. Warum können Nährmedien und Gummigegenstände nicht im Pasteurofen sterilisiert werden?

Übung

Bereiten Sie Petrischalen, Messpipetten, Pasteurpipetten, Reagenzgläser, Kolben und Fläschchen für die Sterilisation vor.

Sterilisation durch Kochen

Kochen ist eine Sterilisationsmethode, die Sterilität gewährleistet, sofern sich im sterilisierten Material keine Sporen befinden. Zur Bearbeitung von Spritzen, Instrumenten, Glas- und Metallutensilien, Gummischläuchen usw.

Die Sterilisation durch Kochen erfolgt üblicherweise in einem Sterilisator – einer Metallbox rechteckige Form mit dicht schließendem Deckel. Das zu sterilisierende Material wird auf das im Sterilisator vorhandene Netz gelegt und mit Wasser gefüllt. Um den Siedepunkt zu erhöhen und die Wasserhärte zu beseitigen, fügen Sie 1-2 % Natriumbicarbonat hinzu (besser destilliertes Wasser verwenden). Der Sterilisator wird mit einem Deckel verschlossen und erhitzt. Als Beginn der Sterilisation gilt der Moment des Kochens des Wassers, die Kochzeit beträgt 15-30 Minuten. Am Ende der Sterilisation wird das Netz mit den Instrumenten an den seitlichen Griffen mit speziellen Haken entfernt und die darin befindlichen Instrumente mit einer sterilen Pinzette oder Pinzette entnommen, die zusammen mit den übrigen Instrumenten gekocht wird.

Die Dampfsterilisation wird auf zwei Arten durchgeführt: 1) Dampf unter Druck; 2) fließender Dampf.

Druckdampfsterilisation im Autoklaven hergestellt. Bei dieser Sterilisationsmethode werden die zu sterilisierenden Materialien gesättigtem Wasserdampf bei einem Druck über dem Atmosphärendruck ausgesetzt. Als Ergebnis einer solchen Sterilisation sterben sowohl vegetative als auch sporenförmige Formen von Mikroorganismen mit einer einzigen Behandlung ab.

Ein Autoklav (Abb. 12) ist ein massiver Kessel, der außen mit einem Metallgehäuse abgedeckt und mit einem Deckel hermetisch verschlossen ist, der mit Scharnierschrauben fest mit dem Kessel verschraubt ist. In den Außenkessel wird ein weiterer, kleinerer Durchmesser eingesetzt, der als Sterilisationskammer bezeichnet wird. In dieser Kammer werden die zu sterilisierenden Gegenstände platziert. Zwischen beiden Kesseln gibt es Freiraum, Wasserdampfkammer genannt. In diese Kammer wird durch einen außen angebrachten Trichter Wasser bis zu einem bestimmten, auf einem speziellen Wassermessrohr markierten Füllstand eingefüllt. Beim Kochen von Wasser in einer Wasser-Dampf-Kammer entsteht Dampf. Die Sterilisationskammer ist mit einem Auslasshahn mit Sicherheitsventil ausgestattet, damit der Dampf entweichen kann, wenn der Druck über das erforderliche Niveau ansteigt. Mithilfe eines Manometers wird der in der Sterilisationskammer erzeugte Druck ermittelt.

Reis. 12. Autoklavendiagramm. M - Manometer; PC - Sicherheitsventil; B – Trichter für Wasser; K 2 - Wasserhahn zur Wasserabgabe; K 3 - Ventil zur Dampfabgabe

Der normale Atmosphärendruck (760 mm Hg) wird als Null angenommen. Es besteht ein gewisser Zusammenhang zwischen den Manometerwerten und der Temperatur (Tabelle 2).

Derzeit gibt es Autoklaven mit automatischer Steuerung des Betriebsmodus. Zusätzlich zum üblichen Manometer sind sie ausgestattet elektrisches Kontaktmanometer, der verhindert, dass der Druck über einen bestimmten Wert ansteigt, und dadurch einen konstanten Druck gewährleistet gewünschte Temperatur in einem Autoklaven.

Dampf unter Druck sterilisiert verschiedene Nährmedien (außer solchen, die native Proteine enthalten), Flüssigkeiten (isotonische Natriumchloridlösung, Wasser usw.); Geräte, insbesondere solche mit Gummiteilen.

Aufmerksamkeit! In Autoklaven wird auch infiziertes Material neutralisiert. Becher und Reagenzgläser mit Kulturen von Mikroorganismen werden in spezielle Metalleimer oder Tanks mit Löchern im Deckel für das Eindringen von Dampf gestellt und 1 Stunde lang in einem Autoklaven bei 126 ° C (1,5 atm) sterilisiert. Instrumente werden nach der Arbeit auf die gleiche Weise sterilisiert mit Bakterien, die Streitigkeiten bilden.

Mit dem Autoklav dürfen nur speziell geschulte Personen arbeiten, die sich strikt und genau an die Regeln halten müssen, die in der dem Gerät beiliegenden Anleitung aufgeführt sind.

Autoklaviertechnik. 1. Überprüfen Sie vor der Arbeit die Funktionsfähigkeit aller Teile und den Schliff der Gewindebohrer.

2. Wasser (destilliert oder abgekocht, um Kalkbildung zu vermeiden) wird durch einen außerhalb des Kessels angebrachten Trichter bis zur oberen Markierung des Wasserzählerglases gegossen. Der Hahn unter dem Trichter ist geschlossen.

3. Das zu sterilisierende Material wird auf einem speziellen Netz in die Sterilisationskammer gelegt. Die Gegenstände sollten nicht zu dicht beladen werden, da der Dampf zwischen ihnen ungehindert zirkulieren muss, andernfalls erwärmen sie sich nicht auf die erforderliche Temperatur und bleiben möglicherweise unsteril.

4. Die Gummidichtung am Deckel wird zur besseren Abdichtung mit Kreide eingerieben.

5. Der Deckel wird geschlossen und mit dem Autoklavkörper verschraubt, wobei die Bolzen paarweise über Kreuz verschraubt werden.

6. Öffnen Sie das Auslassventil, das die Sterilisationskammer mit der Außenluft verbindet, vollständig und beginnen Sie mit dem Erhitzen des Autoklaven. Die Beheizung des Autoklaven erfolgt üblicherweise mit Gas oder Strom.

Beim Erhitzen des Autoklaven kocht das Wasser, der entstehende Dampf steigt zwischen den Kesselwänden und durch spezielle Löcher in der Wand des Innenkessels (siehe Abb. 12) in die Sterilisationskammer und tritt durch das geöffnete Auslassventil aus. Zunächst entweicht der Dampf zusammen mit der Luft im Autoklaven. Es ist notwendig, dass die gesamte Luft aus dem Autoklaven verdrängt wird, andernfalls stimmt der Manometerwert nicht mit der Temperatur im Autoklaven überein.

Das Auftreten eines kontinuierlichen starken Dampfstroms weist auf die vollständige Entfernung der Luft aus dem Autoklaven hin; Danach wird das Auslassventil geschlossen und der Druck im Autoklaven beginnt allmählich anzusteigen.

7. Als Beginn der Sterilisation gilt der Zeitpunkt, an dem die Manometerwerte den angegebenen Wert erreichen. Die Heizung wird so eingestellt, dass sich der Druck im Autoklaven über einen bestimmten Zeitraum nicht ändert.

8. Nach Ablauf der Sterilisationszeit wird die Aufheizung des Autoklaven gestoppt und der Dampf über das Auslassventil abgelassen. Wenn die Nadel des Manometers auf Null fällt, öffnen Sie den Deckel. Um Verbrennungen durch im Autoklaven verbliebenen Dampf zu vermeiden, sollte der Deckel zu Ihnen hin geöffnet werden.

Das Temperaturniveau im Autoklaven, also die Richtigkeit der Manometeranzeigen, kann überprüft werden. Hierzu werden verschiedene Substanzen verwendet, die einen bestimmten Schmelzpunkt haben: Antipyrin (113° C), Resorcin und Schwefel (119° C), Benzoesäure (120° C). Eine dieser Substanzen wird mit einer vernachlässigbaren Menge Farbstoff (Muchsin oder Methylenblau) vermischt und in ein Glasröhrchen gegossen, das verschlossen und vertikal zwischen das zu sterilisierende Material gestellt wird. Bei ausreichender Temperatur schmilzt die Substanz und nimmt die Farbe des entsprechenden Farbstoffs an.

Um die Wirksamkeit der Sterilisation zu überprüfen, wird ein Reagenzglas mit einer bekannten Sporenkultur in den Autoklaven gegeben. Nach dem Autoklavieren wird das Röhrchen für 24–48 Stunden in einen Thermostaten überführt und das Fehlen oder Vorhandensein von Wachstum festgestellt. Mangelndes Wachstum weist auf einen ordnungsgemäßen Betrieb des Geräts hin.

Sterilisation mit strömendem Dampf hergestellt im Koch-Apparat. Diese Methode wird verwendet, wenn sich das zu sterilisierende Objekt bei einer Temperatur über 100 °C verändert. Nährmedien, die Harnstoff, Kohlenhydrate, Milch, Kartoffeln, Gelatine usw. enthalten, werden mit fließendem Dampf sterilisiert.

Der Koch-Apparat (Kessel) ist ein Metallzylinder, der außen (um die Wärmeübertragung zu reduzieren) mit Filz oder Asbest ausgekleidet ist. Der Zylinder ist mit einem konischen Deckel verschlossen, der über ein Loch zum Entweichen des Dampfes verfügt. Im Inneren des Zylinders befindet sich ein Ständer, bis zu dessen Höhe Wasser gegossen wird. Auf den Ständer wird ein Eimer mit Loch gestellt, in den das zu sterilisierende Material gegeben wird. Der Koch-Apparat wird mit Gas oder Strom beheizt. Die Sterilisationszeit wird ab dem Moment der kräftigen Dampfabgabe an den Deckelrändern und am Dampfaustritt gezählt. 30-60 Minuten lang sterilisieren. Am Ende der Sterilisation wird das Erhitzen gestoppt. Nehmen Sie den Materialeimer aus dem Gerät und lassen Sie ihn bis zum nächsten Tag bei Raumtemperatur stehen. Die Erwärmung erfolgt 3 Tage hintereinander bei einer Temperatur von 100° C für 30-60 Minuten. Diese Methode wird fraktionierte Sterilisation genannt. Beim ersten Erhitzen sterben vegetative Formen von Mikroben ab, während Sporenformen erhalten bleiben. Innerhalb eines Tages gelingt es den Sporen zu keimen und sich in vegetative Formen zu verwandeln, die am zweiten Tag der Sterilisation absterben. Da es möglich ist, dass einige der Sporen keine Zeit zum Keimen hatten, wird das Material weitere 24 Stunden aufbewahrt und anschließend eine dritte Sterilisation durchgeführt. Die Sterilisation mit fließendem Dampf in einem Koch-Gerät erfordert keine besondere Kontrolle, da die Sterilität der vorbereiteten Kulturmedien ein Indikator für die ordnungsgemäße Funktion des Geräts ist. Sie können die Sterilisation auch mit strömendem Dampf in einem Autoklaven bei abgeschraubtem Deckel und geöffnetem Auslassventil durchführen.

Kontrollfragen

1. Welche Nährmedien werden dampfsterilisiert?

2. Was ist ein Sterilisator und wie funktioniert er?

3. Warum sollte beim Sterilisieren durch Kochen destilliertes Wasser verwendet werden?

4. Beschreiben Sie den Aufbau und die Funktionsweise des Autoklaven.

5. Was wird im Autoklaven sterilisiert?

6. Was dient als Kontrolle für die ordnungsgemäße Sterilisation beim Autoklavieren?

7. Was ist Heißdampfsterilisation?

8. Beschreiben Sie den Aufbau des Koch-Apparats.

9. Was ist der Zweck der fraktionierten Sterilisation?

Übung

Fülle das Formular aus.

Die fraktionierte Sterilisation kann auch in einem Koch-Gerinnungsmittel durchgeführt werden.

Kochs Gerinnungsmittel wird zum Koagulieren von Molke- und Eierkulturmedien verwendet und gleichzeitig mit der Verdichtung des Mediums wird es sterilisiert.

Kochs Gerinnungsmittel ist ein flacher Metallkasten mit Doppelwänden, der außen mit wärmeisolierendem Material beschichtet ist. Durch ein spezielles Loch im oberen Teil der Außenwand wird Wasser in den Raum zwischen den Wänden gegossen. Das Loch wird mit einem Stopfen verschlossen, in den ein Thermometer eingesetzt wird. Das Gerät wird mit zwei Deckeln verschlossen: Glas und Metall. Durch den Glasdeckel können Sie den Gerinnungsprozess beobachten. Reagenzgläser mit Medien werden schräg auf den Boden des Koagulators gestellt.

Der Koagulator wird mit Gas oder Strom beheizt. Die Medien werden einmal bei einer Temperatur von 90 °C für 1 Stunde oder teilweise sterilisiert – 3 Tage hintereinander bei 80 °C für 1 Stunde.

Tyndallisierung* – fraktionierte Sterilisation bei niedrigen Temperaturen – wird für Stoffe verwendet, die bei einer Temperatur von 60 °C leicht zerstört und denaturiert werden (z. B. Proteinflüssigkeiten). Das zu sterilisierende Material wird im Wasserbad oder im Wasserbad erhitzt spezielle Geräte mit Thermostaten bei einer Temperatur von 56-58° C für eine Stunde an 5 Tagen hintereinander.

* (Die Sterilisationsmethode ist nach Tyndall benannt, der sie vorgeschlagen hat.)

Pasteurisierung- Sterilisation bei 65-70 °C für 1 Stunde, vorgeschlagen von Pasteur, um Nicht-Sporen-Formen von Mikroben zu zerstören. Milch, Wein, Bier, Fruchtsäfte und andere Produkte werden pasteurisiert. Milch wird pasteurisiert, um Milchsäure und pathogene Bakterien (Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Shigella, Salmonellen, Staphylokokken usw.) zu entfernen. Beim Pasteurisieren von Bier, Fruchtsäften und Wein entstehen Mikroorganismen, die entstehen Verschiedene Arten Fermentation. Pasteurisierte Lebensmittel werden am besten gekühlt aufbewahrt.

Kontrollfragen

1. Was ist der Zweck und Aufbau des Koch-Koagulators?

2. Welche Sterilisationsmethoden gibt es in einer Gerinnungsmaschine?

3. Was ist Tyndalisierung?

4. Was ist Pasteurisierung?

Sterilisation durch ultraviolette Bestrahlung

Kontrollfragen

1. Welche Eigenschaften haben ultraviolette Strahlen?

2. In welchen Fällen wird eine Sterilisation mit ultravioletter Strahlung eingesetzt?

Mechanische Sterilisation mittels Bakterienfilter

Die Filtrationssterilisation wird dann eingesetzt, wenn sich die zu sterilisierenden Gegenstände durch Erhitzen verändern. Die Filtration erfolgt über Bakterienfilter aus verschiedenen feinporösen Materialien. Die Poren von Filtern müssen klein genug sein (bis zu 1 Mikrometer), um die mechanische Rückhaltung von Bakterien zu gewährleisten. Daher bezeichnen einige Autoren die Filterung als mechanische Methoden Sterilisation.

Die Filtrationsmethode wird zur Sterilisation von proteinhaltigen Nährmedien, Serum und einigen Antibiotika sowie zur Trennung von Bakterien von Viren, Phagen und Exotoxinen eingesetzt.

In der mikrobiologischen Praxis kommen Seitz-Asbestfilter, Membranfilter sowie Chamberlant- und Berkefeld-Filter (Kerzen) zum Einsatz.

Seitz-Filter sind Scheiben aus einer Mischung aus Asbest und Zellulose. Ihre Dicke beträgt 3–5 mm, der Durchmesser 35–140 mm. Die heimische Industrie produziert Filter zweier Marken: „F“ (Filterung) – hält suspendierte Partikel zurück, lässt aber Bakterien durch; „SF“ (sterilisierend) – mit kleineren Poren, die Bakterien zurückhalten, aber Viren durchlassen. Zerknitterte Asbestplatten sowie Platten mit Brüchen und Rissen sind für die Arbeit ungeeignet.

Membranfilter werden aus Nitrozellulose hergestellt. Es sind Scheiben Weiß 0,1 mm dick und 35 mm Durchmesser. Abhängig von der Porengröße werden sie mit Nr. 1, 2, 3, 4 und 5 bezeichnet (Tabelle 3).

Für die Sterilisation eignet sich am besten Filter Nr. 1. Zusätzlich zu den aufgeführten stellen sie auch einen sogenannten Vorfilter her, der die gefilterte Flüssigkeit von darin enthaltenen großen Partikeln befreien soll.

Chamberlant- und Berkefeld-Filter (Kerzen) sind Hohlzylinder, die an einem Ende geschlossen sind. Chamberlant-Kerzen werden aus Kaolin, gemischt mit Sand und Quarz, hergestellt. Sie sind nach Porengröße standardisiert und mit L 1, L 2, L 3 ... L 13 bezeichnet. Berkefeld-Filter (Kerzen) werden aus Infusorerde hergestellt; entsprechend der Größe ihrer Poren werden sie mit V, N, W bezeichnet, was einem Porendurchmesser von 3-4, 4-7, 8-12 Mikrometer entspricht.

Die Arbeit mit Bakterienfiltern wird wie folgt durchgeführt. Der Filter muss in einer speziellen Halterung befestigt werden, die in die Filteraufnahme eingesetzt wird. Der Auffangbehälter ist üblicherweise ein Bunsenkolben. Die meist aus Edelstahl gefertigten Halter bestehen aus zwei Teilen: dem oberen, der die Form eines Zylinders ohne Boden hat, und dem unteren, einem tragenden Teil, der in einem Rohr endet. Seitz-Filter werden mit der rauen Oberfläche nach oben aufgelegt Metallgewebe und mit Schrauben zwischen Ober- und Unterseite des Halters sicher festgeklemmt. Der montierte Filter wird in einem Gummistopfen befestigt, der in den Hals eines Bunsenkolbens eingesetzt wird. Ein Wattestäbchen wird in den Auslassschlauch der Flasche eingeführt, der an die Vakuumpumpe angeschlossen ist. Die vorbereitete Anlage wird in Papier eingewickelt und in einem Autoklaven unter einem Druck von 1 atm 20–30 Minuten lang sterilisiert. Das gesamte zusammengebaute Gerät wird auch Seitz-Filter genannt (Abb. 13).

Unmittelbar vor der Filtration wird das Auslassende des Bunsenkolbens über einen Gummischlauch mit einer Öl- oder Wasserstrahlpumpe verbunden. Die Verbindungsstellen der verschiedenen Teile werden mit Paraffin gefüllt, um eine dichte Abdichtung zu gewährleisten. Die gefilterte Flüssigkeit wird in den Zylinder des Geräts gegossen und die Pumpe eingeschaltet, wodurch im Behälter ein Vakuum entsteht. Durch die entstehende Druckdifferenz gelangt die gefilterte Flüssigkeit durch die Poren des Filters in den Auffangbehälter und die Mikroben verbleiben auf der Oberfläche des Filters.

Membranfilter werden vor der Verwendung durch Kochen in destilliertem Wasser sterilisiert. Um ein Einrollen der Filter zu verhindern, werden sie zunächst in destilliertes Wasser gelegt, auf eine Temperatur von 50–60 °C erhitzt und 30 Minuten bei schwacher Hitze gekocht, wobei das Wasser 2–3 Mal gewechselt wird. Der Filterhalter und die Aufnahme werden vorab sterilisiert und das Gerät unter aseptischen Bedingungen montiert. Um ein Zerreißen des Membranfilters am Metallgitter zu vermeiden, stellen Sie Becher mit sterilem Filterpapier darunter. Nehmen Sie dann mit einer sterilen Pinzette mit glatten Spitzen den Membranfilter aus dem Sterilisator und legen Sie ihn mit der glänzenden Oberfläche nach unten auf das Stützgitter.

In einem Autoklaven sterilisierte Kerzen (Chamberlant) werden über einen Gummischlauch mit einem Empfänger verbunden und in ein Gefäß (normalerweise einen Zylinder) mit einer gefilterten Flüssigkeit abgesenkt. Die Filtration erfolgt mit einer Vakuumpumpe. Ein steriles Filtrat gelangt in den Auffangbehälter und Bakterien werden von den Poren der Kerze zurückgehalten.

Membran- und Asbestfilter sind für den einmaligen Gebrauch konzipiert. Nach Gebrauch werden die Kerzen eingekocht Leitungswasser, dann im Muffelofen kalziniert.

Vor der weiteren Verwendung werden Kerzen auf Unversehrtheit überprüft. Die Kerze wird in ein Gefäß mit Wasser gesenkt und mit Luft durchströmt. Wenn sich Luftblasen auf der Oberfläche der Kerze bilden, bedeutet das, dass sich Risse in der Kerze gebildet haben und diese unbrauchbar ist.

Kontrollfragen

1. Was ist die Filtersterilisationsmethode? Was wird mit dieser Methode sterilisiert?

2. Welche Bakterienfilter kennen Sie? Wie wird das Filtergerät installiert, welche Bedingungen müssen beachtet werden?

Chemische Methoden

Zur Konservierung von Impfstoffen und Seren werden Merthiolat, Borsäure, Formaldehyd usw. verwendet.

Biologische Sterilisation

Die biologische Sterilisation basiert auf dem Einsatz von Antibiotika. Diese Methode wird zur Kultivierung von Viren verwendet.

Kontrollfragen

1. Was ist chemische Sterilisation und wann wird es verwendet?

2. Was ist biologische Sterilisation?

Die wichtigsten Sterilisationsmethoden sind in der Tabelle aufgeführt. 4.

1 (Die Sterilisation ist unvollständig: Sporen verbleiben im sterilisierten Material.)

2 (Die Sterilisation ist unvollständig: Viren verbleiben im sterilisierten Material.)

Desinfektion

In der mikrobiologischen Praxis werden verschiedene Desinfektionsmittel verwendet: 3-5 %ige Phenollösungen, 5-10 %ige Lysollösungen, 1-5 %ige Chloraminlösungen, 3-6 %ige Wasserstoffperoxidlösungen, 1-5 %ige Formaldehydlösungen, Quecksilberchloridlösungen in Verdünnung 1: 1000 (0,1%), 70° Alkohol usw.

Verbrauchtes pathologisches Material (Eiter, Kot, Urin, Auswurf, Blut, Liquor) wird desinfiziert, bevor es in die Kanalisation abgeleitet wird. Die Desinfektion erfolgt mit Trockenbleiche oder 3-5 %iger Chloraminlösung.

Pipetten (graduiert und Pasteur), Glasspatel, Objektträger und Deckgläschen, die mit pathologischem Material oder Kulturen von Mikroorganismen kontaminiert sind, werden einen Tag lang in Glasgefäße mit einer 3%igen Phenol- oder Wasserstoffperoxidlösung getaucht.

Nach Abschluss der Arbeiten mit infektiösem Material muss der Laborant dieses mit einer Desinfektionslösung behandeln. Arbeitsplatz und Hände. Die Oberfläche des Arbeitstisches wird mit einem mit einer 3%igen Phenollösung befeuchteten Wattebausch abgewischt. Die Hände werden mit einer 1%igen Chloraminlösung desinfiziert. Befeuchten Sie dazu einen Wattebausch oder eine Gaze mit einer Desinfektionslösung und wischen Sie die linke, dann die rechte Hand ab und waschen Sie anschließend Ihre Hände mit warmem Wasser und Seife.

Die Wahl eines Desinfektionsmittels, seine Konzentration und Einwirkungsdauer (Exposition) hängen von den biologischen Eigenschaften der Mikrobe und von der Umgebung ab, in der das Desinfektionsmittel mit pathogenen Mikroorganismen in Kontakt kommt. Beispielsweise sind Quecksilberchlorid, Phenol und Alkohole zur Desinfektion von Proteinsubstraten (Eiter, Blut, Sputum) ungeeignet, da unter ihrem Einfluss eine Proteinkoagulation stattfindet und das geronnene Protein Mikroorganismen vor der Wirkung von Desinfektionsmitteln schützt.

Bei der Desinfektion von mit Sporenformen von Mikroorganismen infiziertem Material werden eine 5 %ige Chloraminlösung, 1–2,5 %ige Lösungen von aktiviertem Chloramin, 5–10 %ige Formalinlösungen und andere Substanzen verwendet.

Die Desinfektion, die den ganzen Tag über während der Arbeit durchgeführt wird, wird als aktuelle und am Ende der Arbeit als endgültige Desinfektion bezeichnet.

Desinfektionsmittel und Anleitung zur Herstellung von Gebrauchslösungen daraus. Kalkchlorid ist ein weißes, klumpiges Pulver mit einem stechenden Chlorgeruch; es löst sich nicht vollständig in Wasser auf. Die bakterizide Wirkung hängt vom Gehalt an Aktivchlor ab, dessen Menge zwischen 28 und 36 % liegt. Chlor mit weniger als 25 % Aktivchlor ist zur Desinfektion ungeeignet.

Bei unsachgemäßer Lagerung zersetzt sich Bleichmittel und verliert einen Teil seines aktiven Chlors. Die Zersetzung wird durch Hitze, Feuchtigkeit und Sonnenlicht gefördert, daher lagern bleichen sollte an einem trockenen, dunklen Ort in einem dicht verschlossenen Behälter aufbewahrt werden.

Trockenbleiche wird zur Desinfektion von menschlichen und tierischen Sekreten verwendet (in einer Menge von 200 g pro 1 Liter Kot und 10 g pro 1 Liter Urin).

Herstellung der ursprünglichen 10 %igen geklärten Bleichlösung. Nehmen Sie 1 kg Trockenbleiche, geben Sie es in einen Emailleeimer und mahlen Sie es. Dann kaltes Wasser auf ein Volumen von 10 Litern aufgießen, gut vermischen, mit einem Deckel abdecken und einen Tag an einem kühlen Ort stehen lassen. Danach wird die resultierende 10 %ige geklärte Lösung vorsichtig abgelassen und durch mehrere Lagen Gaze oder durch ein dickes Tuch filtriert. In dunklen Glasflaschen, verschlossen mit einem Holzstopfen, an einem kühlen Ort nicht länger als 10 Tage aufbewahren. Aus der Stammlösung werden unmittelbar vor der Verwendung Arbeitslösungen der erforderlichen Konzentration hergestellt. Die Menge an basischer Lösung, die zur Herstellung von 0,2–10 %igen geklärten Bleichlösungen benötigt wird, ist in der Tabelle angegeben. 5.

Die Konzentration der geklärten Bleichlösungen von 0,2 bis 10 % wird je nach Art des zu desinfizierenden Objekts und Resistenz des Erregers gewählt.

Chloramin ist eine kristalline Substanz von weißer oder gelblicher Farbe, die 24–28 % aktives Chlor enthält. Es löst sich bei Raumtemperatur gut in Wasser auf, daher werden die Lösungen unmittelbar vor der Desinfektion zubereitet. Verwenden Sie 0,2-10 %ige Chloraminlösungen. Der Zusammenhang zwischen der prozentualen Konzentration der Lösung und der Chloraminmenge in Gramm pro 1 und 10 Liter ist in der Tabelle angegeben. 6.

Chloramin in Glas auflösen oder emailliertes Geschirr. Bei Lagerung von Chloraminlösungen in dunklen Glasbehältern mit Schliffstopfen bleibt ihre Wirkung bis zu 15 Tage bestehen.

Aktiviertes Chloramin. Die desinfizierenden Eigenschaften von Chloramin werden durch die Zugabe eines Aktivators im Verhältnis 1:1 oder 1:2 verstärkt. Als Aktivator werden Ammoniumverbindungen verwendet - Ammoniumchlorid, Sulfat, Ammoniumnitrat. Aktiviertes Chloramin wird in Konzentrationen von 0,5, 1 und 2,5 % verwendet. Sie werden unmittelbar vor der Verwendung zubereitet. Chloramin und Ammoniumsalz werden getrennt gewogen. Zunächst wird Chloramin in Wasser gelöst und dann ein Aktivator hinzugefügt.

Der Vorteil aktivierter Chloraminlösungen gegenüber herkömmlichen Lösungen besteht darin, dass durch die Zugabe eines Aktivators die Freisetzung von Aktivchlor beschleunigt wird. Daher wirkt sich das Medikament nicht nur nachteilig auf vegetative Formen von Mikroorganismen, sondern auch auf deren Sporen aus. Aktiviertes Chloramin wird in geringeren Konzentrationen und mit geringerer Belastung eingesetzt.

Phenol (Karbolsäure) ist ein farbloser, nadelförmiger Kristall mit einem stechenden, charakteristischen Geruch. Unter Einwirkung von Licht, Luft und Feuchtigkeit nehmen die Kristalle eine purpurrote Farbe an. Gespeichert in geschlossene Banken aus dunklem Glas und an einem lichtgeschützten Ort aufbewahren.

Phenol ist in Wasser, Alkohol, Ether und fetten Ölen löslich. Es besitzt eine große Hygroskopizität, nimmt Feuchtigkeit aus der Umgebung auf und wird flüssig. Flüssige Karbolsäure enthält 90 % kristallines Phenol und 10 % Wasser.

Verwenden Sie 3-5 %ige wässrige Lösungen von Karbolsäure, hergestellt aus kristallinem Phenol und flüssiger Karbolsäure, gemäß dem in der Tabelle angegebenen Schema. 7. Die Aktivität von Phenol erhöht sich, wenn es in heißem Wasser (40–50 °C) gelöst wird.

Aufmerksamkeit! Kristallines Phenol oder flüssige Karbolsäure können bei Kontakt mit der Haut Reizungen und in hohen Konzentrationen schwere Verbrennungen verursachen. Daher muss mit Karbolsäure sehr vorsichtig umgegangen werden. Bei der Zubereitung von Lösungen sollten Sie Gummihandschuhe tragen bzw als letztes Schmieren Sie Ihre Hände mit Vaseline.

Wenn Karbolsäure auf Ihre Haut gelangt, waschen Sie sie sofort mit warmem Wasser und Seife oder 40° Ethylalkohol ab.

Notiz. Zur Herstellung von Desinfektionslösungen aus Phenol ist es bequemer und sicherer, flüssige Karbolsäure zu verwenden.

Kontrollfragen

1. Welche Desinfektionsmittel werden in der mikrobiologischen Praxis eingesetzt?

2. Beschreiben Aussehen und die grundlegenden Eigenschaften von Bleichmittel, Chloramin, Phenol.

3. Welche Desinfektionsmittellösungen werden zur Desinfektion von mit Sporenformen von Mikroorganismen infiziertem Material verwendet?

Übung

Bereiten Sie 2 Liter 5 %ige Arbeitslösung aus geklärtem Bleichmittel vor; 500 ml 3 %ige Chloraminlösung, 300 ml 1 %ige aktivierte Chloraminlösung.

Aufmerksamkeit! Bevor Sie mit der Lösungsvorbereitung beginnen, führen Sie Berechnungen durch.

Sterilisation- Unfruchtbarkeit; Zerstörung pathogener und nicht pathogener Mikroorganismen in vegetativer Form und Sporenform in jedem Material.

Vorbereiten des Geschirrs für die Sterilisation. Laborglaswaren müssen sauber gewaschen und sterilisiert werden. Verwenden Sie zum Waschen Seife oder chemische Lösungen Waschmittel. Neue Gerichte werden in einer 1-2%igen Salzsäurelösung vorgekocht, um ein späteres Auslaugen des Glases zu vermeiden. Unter fließendem Wasser gewaschenes Geschirr wird mit destilliertem Wasser gespült und getrocknet.

Bakteriologische Röhrchen. Konische, matte Flaschen werden mit Baumwollgaze-Stopfen verschlossen, die aus eng gedrehten Watterollen bestehen und mit einer Gazeschicht bedeckt sind. Auch für bakteriologische Reagenzgläser wurden Metallstopfen in Form von Außenkappen entwickelt. Es ist zu berücksichtigen, dass beim Sterilisieren von Wattestäbchen bei hohen Temperaturen Substanzen aus der Watte freigesetzt werden, die das Wachstum einiger empfindlicher Bakterien, wie z. B. Brucella, hemmen.

Führen Sie beim Einsetzen von Pipetten ein Wattestäbchen in das obere Ende ein. Pasteurpipetten müssen über eine versiegelte Kapillare verfügen. Jede Messpipette ist vom Ausguss ausgehend über die gesamte Länge spiralförmig in einen 4-5 cm breiten langen Papierstreifen eingewickelt. Pasteurpipetten sind in Papier eingewickelt, jeweils 10–20 Stück, Reagenzgläser – jeweils 15–20 Stück. Es ist besser, alle Arten von Pipetten vor und nach der Sterilisation in speziellen Metallbehältern aufzubewahren. Die Stopfen der Kolben sind zusätzlich mit Papierkappen abgedeckt.

Vor der Sterilisation werden saubere, zusammengebaute Petrischalen in Papier eingewickelt, jeweils 3 bis 4 Stück. Nach der Sterilisation schützt das Papier sterile Glaswaren vor Kontamination durch Mikroflora.

Vor der Sterilisation wird das Geschirr nicht zu dicht in den Trockenschrank gestellt, um eine Luftzirkulation zu gewährleisten, und es wird darauf geachtet, dass die Temperatur 180 °C nicht überschreitet, da bei höherer Temperatur Papier und Watte verkohlen. Nach Abschluss der Sterilisation wird der Trockenschrank erst dann geöffnet. Bis die Temperatur darin auf 70-80 °C sinkt, weil scharfer Abfall Temperaturen können zum Glasbruch führen.

Wenn die Schalen für die Sterilisation der darin enthaltenen Nährmedien durch Autoklavieren unter einem Druck von mindestens 1 atm vorgesehen sind, werden sie nicht vorsterilisiert. Beim Sterilisieren von Medien mit fließendem Dampf oder im Autoklaven unter einem Druck von nicht mehr als 0,5 atm. Es müssen sterile Behälter verwendet werden.

Sterilisation mit trockener, erhitzter Luft. Die Methode wird zum Sterilisieren sauberer Glaswaren verwendet. Zu diesem Zweck wird ein Pasteurofen verwendet – ein spezieller Trockenschrank mit Doppelwänden. Die Außenseite ist mit hitzebeständigem Material ausgekleidet. Oben befindet sich ein Thermometer. Unten zwischen dem hitzebeständigen Gehäuse und dem inneren Metallgehäuse ist ein automatisches elektrisches Heizelement platziert. Wenn der Trockenschrank eingeschaltet ist, erwärmt sich die Luft im Inneren. Sobald die eingestellte Temperatur erreicht ist, wird der Startzeitpunkt der Sterilisation notiert. Sterilisationsmodus: bei einer Temperatur von 155–160 °C – Exposition für 2 Stunden, bei 165–170 °C – 1–1,5 Stunden, bei 180 °C – 1 Stunde. Nach der Sterilisationszeit wird das Erhitzen gestoppt.

Autoklavieren. Dabei handelt es sich um eine Dampfsterilisation unter Druck kombiniert mit hoher Temperatur Spezialgerät- Autoklav. Wenn gesättigter Dampf auf einen kühleren Gegenstand trifft, kondensiert der Dampf zu Wasser und setzt dabei eine große Wärmemenge frei. Darüber hinaus wird die Dampfmenge reduziert, was das Eindringen in die inneren Teile des zu sterilisierenden Materials erleichtert. Voraussetzung ist die Zufuhr von wirklich gesättigtem Dampf, sodass es bei Kontakt mit einem kalten Gegenstand zu einer sofortigen Kondensation und Erwärmung kommt. Die Industrie produziert vertikale und horizontale Autoklaven.

Ein vertikaler Autoklav ist ein doppelwandiger zylindrischer Metallkessel, der mit einem Deckel verschlossen ist. Durch einen speziellen Hahn mit Trichter wird Wasser bis zu einem bestimmten Füllstand zwischen die Wände gegossen. Die Innenwand des Kessels ist im oberen Teil mit Löchern und im unteren Teil mit einem Hahn ausgestattet, durch den beim Erhitzen des Wassers Dampf die Luft aus dem Kessel verdrängt. Auf dem Autoklaven wird ein Metallschutzrahmen angebracht, zwischen dem und dem Autoklaven selbst muss ein Freiraum vorhanden sein. Durch den Anschluss an das Stromnetz wird der Autoklav beheizt.

Der Autoklav wird mit dem zu sterilisierenden Material beladen, der Deckel und der Hahn, durch den Wasser gegossen wurde, werden geschlossen und der untere Hahn vorübergehend geöffnet gelassen. Das erhitzte Wasser zwischen den Wänden des Autoklaven kocht, der entstehende Dampf steigt auf und gelangt durch die oberen Löcher der Innenwand in den Kessel, wobei er die Luft durch den unteren offenen Hahn verdrängt. Wenn die gesamte Luft verdrängt ist und der Dampf in einem gleichmäßigen Strahl austritt, wird das untere Ventil geschlossen. Dadurch erhöht sich der Dampfdruck im Autoklaven. Als Beginn der Sterilisation gilt der Zeitpunkt, an dem der Druck einen bestimmten Wert (laut Manometer) erreicht. Die Hitze wird während der Sterilisation angepasst und der Dampfdruck auf dem gleichen Niveau gehalten. Sollte der Druck im Autoklaven zu stark ansteigen, gibt es ein Sicherheitsventil, durch das der überschüssige Dampf automatisch entweicht.

Mit zunehmendem Dampfdruck erhöht sich entsprechend die Temperatur im Autoklaven.

Das Manometer zeigt den Dampfdruck ohne Berücksichtigung des umgebenden Atmosphärendrucks (760 mm Hg) an. Nach Ablauf der Sterilisationszeit wird der Autoklav abgeschaltet. Wenn der Manometerwert nach dem Abkühlen Null ist, öffnen Sie das Ventil, um Dampf abzulassen.

Ein horizontaler Autoklav unterscheidet sich im Design von einem vertikalen Autoklav, sein Funktionsprinzip ist jedoch dasselbe.

virologische Sterilisation pathologisches Tier

Muster von Formularen, die beim Einsenden von pathologischem Material an das Labor auszufüllen sind

Trockene Hitze wird zum Sterilisieren von Laborglas verwendet. Das zur Sterilisation vorbereitete Geschirr wird lose in den Ofen geladen, um eine gleichmäßige und zuverlässige Erwärmung des Sterilisationsgutes zu gewährleisten. Schließen Sie die Schranktür fest, schalten Sie das Heizgerät ein, bringen Sie die Temperatur auf 160-165 °C und sterilisieren Sie 1 Stunde lang bei dieser Temperatur. Schalten Sie am Ende der Sterilisation die Heizung aus, aber öffnen Sie die Schranktür erst, wenn die Sterilisation abgeschlossen ist Ofen ist abgekühlt; Andernfalls kann die in den Schrank eindringende Kaltluft zu Rissen im heißen Kochgeschirr führen.

Die Sterilisation im Pasteurofen kann bei unterschiedlichen Temperaturen und Expositionen (Sterilisationszeit) durchgeführt werden (Tabelle 1).

Tabelle 1. Sterilisationsmodus

Um die Temperatur im Pasteurofen zu bestimmen, können Sie Saccharose oder Kristallzucker verwenden, der bei einer Temperatur von 165-170 °C karamellisiert.

Petrischalen werden einzeln oder in mehreren Stücken in Papier eingewickelt oder in spezielle Metallbehälter gelegt.

Notiz. Bei hohen Temperaturen verfärben sich das Papier, in das Becher und Pipetten eingewickelt sind, sowie die Watte gelb und können sogar verkohlen. Daher sollte jede neue Papiersorte, die das Labor erhält, bei den zulässigen Temperaturbedingungen getestet werden.

Kontrollfragen

1. Was versteht man unter dem Begriff Sterilisation?

2. Wie erfolgt die Sterilisation?

3. Was wird durch Kalzinierung über Feuer sterilisiert?

4. Beschreiben Sie den Aufbau und die Funktionsweise des Pasteurofens.

5. Was wird in einem Pasteurofen sterilisiert?

6. Wie werden Glaswaren für die Sterilisation vorbereitet?

7. Warum können Nährmedien und Gummigegenstände nicht im Pasteurofen sterilisiert werden?

Übung

Bereiten Sie Petrischalen, Messpipetten, Pasteurpipetten, Reagenzgläser, Kolben und Fläschchen für die Sterilisation vor.