heim · Netzwerke · Sterilisation mit Sattdampf unter Druck. Sterilisation mit Sattdampf unter Druck – Autoklavieren. Sehen Sie, was „Dampfsterilisation“ ist. in anderen Wörterbüchern

Sterilisation mit Sattdampf unter Druck. Sterilisation mit Sattdampf unter Druck – Autoklavieren. Sehen Sie, was „Dampfsterilisation“ ist. in anderen Wörterbüchern

Diese Methode zur Sterilisierung von Kulturmedien ist die zuverlässigste und am häufigsten verwendete. Es basiert auf der Erhitzung des Materials mit gesättigtem Wasserdampf bei einem Druck über dem Atmosphärendruck. Es ist bekannt, dass die Temperatur des Dampfes mit steigendem Dampfdruck zunimmt (Tabelle 4.1).

Die kombinierte Wirkung von hoher Temperatur und Dampf macht diesen Prozess besonders effektiv. Dabei sterben sowohl vegetative Zellen als auch mikrobielle Sporen ab. Es wurde festgestellt, dass die Sporen der meisten Mikroorganismen nicht einmal einer 5-minütigen Einwirkung von Sattdampf bei 121 °C standhalten. Lediglich Sporen einiger Bodenbakterien sterben bei 1 atm erst nach 30 Minuten ab.

Tabelle 4.1 Sattdampftemperatur bei unterschiedliche Drücke

ati* – übertrieben Atmosphärendruck

Reis. 4.1. Autoklavendiagramm:

1 - Sterilisationskammer; 2 - Ventil für Luftauslass; 3 - Manometer; 4- Sicherheitsventil; 5- Wasser-Dampf-Kammer; 6 - Trichter zum Befüllen des Autoklaven mit Wasser; 7 - Wassermessrohr; 8 - Löcher für den Dampfeintritt in die Sterilisationskammer; 9 - Schutzhülle; 10 - Autoklavendeckel; 11 - Ständer zum Abstellen sterilisierter Gegenstände

Die Dampfsterilisation unter Druck erfolgt in speziellen hermetisch verschlossenen dickwandigen Geräten – Autoklaven. Autoklaven unterscheiden sich in Form, Größe, Betriebsdruck, Design und anderen Indikatoren. Sie können manuell, halbautomatisch oder automatisch sein, aber da alle Autoklaven für die gleiche Aufgabe – die Sterilisation – konzipiert sind, ist das Grundprinzip ihrer Konstruktion dasselbe.

In Abb. Abbildung 4.1 zeigt ein Diagramm eines vertikalen Autoklaven mit manueller Steuerung. Ein Autoklav ist ein doppelwandiger Metallbehälter, der hohem Druck standhält. Sein Innenteil ist eine Sterilisationskammer (7). Darin wird das zu sterilisierende Material eingelegt. Die Sterilisationskammer ist mit einem Hahn (2) zum Luftauslass, einem Manometer (3) zur Bestimmung des Dampfdrucks und einem Sicherheitsventil (4) zur Dampfabgabe bei Druckanstieg über das erforderliche Niveau und zur Vermeidung von Dampfaustritt ausgestattet dass der Autoklav platzt. Der Raum zwischen den Wänden, Wasser-Dampf-Kammer (5) genannt, wird durch einen Trichter (6) mit Wasser (vorzugsweise destilliert, um Kalkablagerungen zu verhindern) bis zu einem bestimmten Füllstand gefüllt, der auf einem speziellen Wassermessrohr markiert ist den Autoklaven (7). Über diesem Niveau sollte kein Wasser eingefüllt werden, da beim schnellen Sieden Wasser in den Schlauch zum Manometer gelangen und dessen Messwerte verfälschen kann. Im oberen Teil der Innenwand der Wasser-Dampf-Kammer befinden sich Löcher (8), durch die Dampf in die Sterilisationskammer gelangt. Die Oberseite des Dampfkessels ist mit einem Schutzgehäuse (9) abgedeckt. Es schützt den Kessel vor mechanischer Schaden und diejenigen, die in der Nähe des Autoklaven arbeiten - vor Verbrennungen. Um einen dichten Verschluss zu gewährleisten, wird der Autoklav mit einem massiven Deckel (10) mit Gummidichtung dicht verschlossen. Das Sterilisiergut wird auf einem speziellen Ständer (11) platziert.

Autoklavierprozess.

Einzelne Operationen des Sterilisationsprozesses in Autoklaven verschiedene Typen kann etwas anders sein. Dementsprechend unterscheidet sich die Technik, mit ihnen zu arbeiten, jedoch etwas allgemeines Prinzip Die Sterilisation in verschiedenen Autoklaven ist gleich.

Überprüfen Sie vor der Arbeit den Autoklav und die Kontrollausrüstung. Bei einer Fehlfunktion (Manometernadel hat sich vom Nullpunkt verschoben, Riss im Wassermessrohr etc.) kann mit dem Gerät nicht gearbeitet werden. Nach der Inspektion des Autoklaven wird Wasser bis zur oberen Markierung des Wassermessrohrs in die Wasser-Dampf-Kammer gegossen. Das zu sterilisierende Material wird auf einem speziellen Holzständer in die Sterilisationskammer gelegt. Gegenstände sollten nicht zu eng platziert werden, da der Dampf zwischen ihnen ungehindert zirkulieren muss, sonst erwärmen sie sich nicht gewünschte Temperatur und kann unsteril bleiben. Nach dem Beladen der Sterilisationskammer den Deckel (Tür) des Autoklaven aufsetzen und festschrauben. Öffnen Sie dann den Hahn, der die Sterilisationskammer mit der Außenluft verbindet, und schalten Sie die Heizung ein.

Nach Beginn der Dampfbildung wird die Luft aus der Sterilisationskammer entfernt. Das notwendige Bedingung Sterilisation, da bei gleichem Druck die Temperatur von reinem Dampf höher ist als die Temperatur des Dampf-Luft-Gemisches. Wenn Luft im Autoklaven verbleibt, kann das Material möglicherweise nicht sterilisiert werden. Die einfachste und gebräuchlichste Methode, einen Autoklaven von Luft zu befreien, besteht darin, die Luft durch Dampf zu verdrängen. Dampf und Kondensat werden entweder in einen Behälter mit Wasser oder in ein spezielles Gerät abgeleitet, das an die Kanalisation angeschlossen ist. Im ersten Fall wird ein Gummischlauch auf den Wasserhahn (2) gesteckt, der ins Wasser abgesenkt wird. Als Beginn des Blasens gilt das Auftreten eines stabilen, kontinuierlichen Stroms reinen Dampfes. Während sich noch Luft im Autoklaven befindet, strömt das Luft-Dampf-Gemisch durch das Wasser und erzeugt ein lautes Knackgeräusch. Reiner Dampf tritt mit einem gleichmäßigen Zischgeräusch aus. Es wird 10 Minuten lang weitergegeben. Im Allgemeinen sollte der gesamte Vorgang ab dem Moment, in dem Dampf mit Luft auftritt, nicht länger als 15 bis 20 Minuten dauern, da sonst nur noch wenig Wasser im Autoklaven verbleibt und dieser beschädigt werden kann. Um den Dampf-(Wasser-)Verbrauch zu reduzieren, wird der Wasserhahn nicht vollständig geöffnet. Der Öffnungsgrad des Hahns wird praktisch beim Betrieb des Autoklaven eingestellt. In den modernsten Autoklaven wird die Luft mit einer Vakuumpumpe aus der Sterilisationskammer entfernt.

Wenn die Luft verdrängt ist, schließen Sie das Dampfventil und der Dampfdruck wird auf den dem Sterilisationsmodus entsprechenden Wert eingestellt. Der Autoklaviermodus wird häufig in Überdruckeinheiten ausgedrückt und gibt die Dauer seiner Aufrechterhaltung an, beispielsweise eine Sterilisation bei 1 atm für 20 Minuten. Das Manometer des Autoklaven zeigt genau den Überdruck an, der im Autoklaven über dem Normalwert entsteht. Der Autoklaviermodus wird häufig durch Temperatur und Zeit charakterisiert. Sobald die Nadel des Manometers einen bestimmten Zusatzdruckwert erreicht und damit die Dampftemperatur den entsprechenden Wert erreicht, wird dieser Dampfdruck durch manuelle oder automatische Regelung der Dampfzufuhr für die erforderliche Zeit aufrechterhalten. Bei automatischen Autoklaven wird die Dampfzufuhr über ein elektrisches Kontaktmanometer reguliert.

Schalten Sie am Ende der Sterilisationszeit die Heizung des Autoklaven aus. Der Druck im Autoklaven sinkt allmählich und erreicht den Atmosphärendruck. Erst danach öffnen sie den Hahn, der den Dampf ablässt. Ein vorzeitiges Öffnen des Wasserhahns ist nicht akzeptabel, da überhitzte Medien bei starkem Druckabfall sofort heftig sieden, nass werden und manchmal sogar Wattestäbchen herausdrücken, was die Sterilität des Materials verletzt. Wenn der Dampf austritt, öffnen Sie den Deckel (die Tür) des Autoklaven. Achten Sie dabei darauf, dass Sie durch den Dampf keine Verbrennungen im Gesicht und an den Händen erleiden. Der Dampf wird mit einer Pumpe aus der Sterilisationskammer von Autoklaven entfernt, die mit einer Vakuumpumpe ausgestattet sind. Gleichzeitig wird das sterile Material getrocknet.

Da der Autoklav bei arbeitet hohe Drücke und Temperaturen kann bei unsachgemäßer Handhabung zu Unfällen führen. Die Installation des Autoklaven und die Arbeit damit erfolgen unter genauer und strikter Einhaltung der Regeln, die in der dem Autoklaven beiliegenden Anleitung angegeben sind. Es dürfen nur geschulte Personen mit Sondergenehmigung arbeiten.

Wenn es notwendig ist, die Temperatur im Autoklaven zu kontrollieren, werden verschiedene Substanzen verwendet, die bei einer bestimmten Temperatur schmelzen. Diese Substanzen werden mit neutralen Farbstoffen vorgemischt und vor Beginn der Sterilisation in einen Autoklaven gegeben. Als Temperatur werden Phenanthren (Schmelzpunkt 98-100°C), Benzaurin (115°C), Schwefel (119°C), Benzoesäure (121 - 122°C), Harnstoff (132°C), Glucose (146) verwendet Indikatoren. °C), Thioharnstoff (180°C), Ascorbinsäure (187-192°C). Für 100 g dieser Stoffe nimmt man 0,01 g Farbstoff (Muchsin, Methylenblau), vermischt gründlich, streut in Glasröhrchen mit gleichem Durchmesser und gleicher Wandstärke, verschließt und vertikale Position zwischen dem zu sterilisierenden Material in einem Autoklaven ausgelegt. Sobald das Gefäß die entsprechende Temperatur erreicht, schmelzen diese Substanzen und nehmen die Farbe des ihnen zugesetzten Farbstoffs an.

Vorbereitung von Medien für die Sterilisation.

Beim Autoklavieren gehen 3–5 % der Flüssigkeit durch Verdunstung verloren, daher wird empfohlen, dem vorbereiteten Medium etwa 5 % destilliertes Wasser im Überschuss zuzusetzen. Nach der Sterilisation hat das Medium (die Lösung) dann die erforderliche Konzentration.

Medien werden normalerweise in Reagenzgläsern, Kolben und Flaschen sterilisiert. Um eine Benetzung der Stopfen zu verhindern, werden die Behälter maximal bis zur Hälfte ihrer Höhe mit dem Medium gefüllt. Gefäße mit Medien werden mit Wattestopfen verschlossen. Sie schützen die Umwelt vor einer Kontamination durch Mikroorganismen in der Umgebungsluft.

Die Pfropfen müssen dicht genug sein, um diese Funktion zu erfüllen, aber mit einer ziemlich gleichmäßigen Verteilung der Wattefasern, da über sie der Gasaustausch zwischen den Pflanzen und der Umgebung stattfindet. Zu dichte Pfropfen erschweren die Luftversorgung der Pflanzen.

Zur Herstellung des Korkens wird ein flaches Stück Watte, entlang der Faser geführt, mit einer Rolle gerollt. Um dem Kork Festigkeit zu verleihen, wird er zwischen der Handfläche und sauberem Glas, das auf dem Tisch liegt, gerollt. Die Länge des Stopfens für ein normales Reagenzglas beträgt ca. 4 cm. Der Stopfen sollte 1,5 - 2,0 cm in das Reagenzglas hineinpassen (Abb. 4.2). Um die Form beizubehalten, entfernen Sie den Korken durch leichtes Drehen vom Hals. Es ist praktisch, den Korken in ein sauberes Mulltuch zu wickeln.

Vor der Sterilisation können die Stopfen mit Papierkappen abgedeckt werden. Sie können die Stopfen von Gefäßen, die in einem Autoklaven sterilisiert werden, nicht mit Zellophan, Folie oder anderen Materialien umwickeln, die keinen Dampf durchlassen, da Dampf durch den Stopfen in das Gefäß eindringen muss, da sich die Medien sonst nicht auf die erforderliche Temperatur erhitzen erforderliche Temperatur und wird nicht sterilisiert. Bei der Verwendung von Glas-, Gummi-, Kork- und anderen Stopfen werden diese doppelt umwickelt Geschenkpapier und sterilisiert, indem man es an eine mit einem Wattestopfen verschlossene Flasche bindet. Die Stopfen im Gefäß werden steril in der Nähe der Brennerflamme gewechselt.


Dampfsterilisation - Dampfsterilisationsmethode
Dampfsterilisation- Unter Druck steht gesättigter Wasserdampf wirksame Mittel Zerstörung aller Arten von Mikroorganismen. Die Dampfsterilisation erfolgt in Dampfsterilisatoren, früher Autoklaven genannt. Die Dampfsterilisation wird in verschiedenen Abteilungen von Krankenhäusern und Kliniken, mikrobiologischen Labors sowie in einigen Pharma- und anderen Unternehmen eingesetzt.

Medizinische Produkte, die mit der Wundoberfläche, Blut oder injizierbaren Medikamenten in Kontakt kommen und einzelne Arten Produkte, die während des Betriebs mit der Schleimhaut in Kontakt kommen und diese schädigen können. Dabei handelt es sich um Produkte aus Textilien (OP-Wäsche und Verbände), Gummi (Handschuhe, Schläuche, Bougies, Katheter etc.), Metall ( chirurgische Instrumente) und Glas.

Dampfsterilisatoren unterscheiden sich in Design, Größe, Betriebsdruck und anderen Indikatoren. Benutzt in medizinische Einrichtungen Dampfsterilisatoren beziehen sich auf Geräte, die unter einem Dampfüberdruck von bis zu 2–2,5 0,2–0,25 MPa (kgf/cm2) betrieben werden. Üblicherweise werden runde und rechteckige Dampfsterilisatoren verwendet. Bei vertikalen Geräten erfolgt das Be- und Entladen des sterilisierten Materials von oben. Bei horizontalen Sterilisatoren mit einer Tür erfolgt die Be- und Entladung von einer Seite. Diese Geräte werden Einweg- oder No-Pass-Geräte genannt. Sterilisatoren mit zwei gegenüberliegenden Türen werden als Durchgangs- oder doppelseitige Sterilisatoren bezeichnet. Solche Geräte ermöglichen es, den Sterilisationsraum durch eine Wand in zwei Hälften zu unterteilen: vorbereitend (schmutzig) und aseptisch (sauber).

Medizinische tragbare Dampfsterilisatoren sind in verschiedenen Ausführungen erhältlich, die sich in Größe, Volumen und damit Leistung unterscheiden; sie bestehen aus drei vertikal montierten, ineinander gesteckten Stahlzylindern. Der Innenzylinder mit einem unteren konvexen Boden ist eine Sterilisationskammer, in die zu sterilisierende Gegenstände geladen werden. Der mittlere Zylinder wird Wasser-Dampf-Kammer genannt, in den Wasser gegossen wird, das sich beim Erhitzen in Dampf verwandelt. Die Wasser-Dampf-Kammer ist mit einem gusseisernen Deckel verschlossen, der sich an Scharnieren dreht. Die Wasser-Dampf- und Sterilisationskammer kommunizieren miteinander über Aussparungen an den Seiten der Sterilisationskammer.

Der äußere Zylinder – das Gehäuse – schützt die Wasser-Dampf-Kammer vor Wärmeverlust. Dampfsterilisatoren sind mit einem Manometer und einem Sicherheitsventil ausgestattet. Es gibt einen Trichter zum Einfüllen von Wasser in die Wasser-Dampf-Kammer. Unter dem Boden der Wasser-Dampf-Kammer befindet sich eine Wasserheizquelle. Der aus kochendem Wasser entstehende Dampf gelangt in den Oberer Teil Sterilisationskammer. Bevor mit dem Erhitzen begonnen wird, bleibt der Hahn am Auslaufrohr geöffnet und Luft und Dampf entweichen durch das Rohr. Anschließend wird der Auslassschlauch mit einem Hahn verschlossen, der Druck erhöht und das Sterilisiergut mit Dampf erhitzt.

Elektrisch beheizte vertikale Dampfsterilisatoren bestehen aus einer Sterilisationskammer, einer Wasser-Dampf-Kammer und einem Schutzgehäuse. Die Sterilisationskammer ist über ein Rohr mit einem Absperrventil mit der Wasser-Dampf-Kammer verbunden. Mit diesem Ventil kann die Sterilisationskammer von der Wasser-Dampf-Kammer getrennt werden. In die Wasser-Dampf-Kammer sind elektrische Heizgeräte eingebaut. Der Druck in der Wasser-Dampf-Kammer wird automatisch aufrechterhalten. Das Gerät verfügt über einen Wasserstrahlinjektor, mit dessen Hilfe im Sterilisator ein Vakuum erzeugt wird, d.h. Der Druck wird geringer als der atmosphärische Druck. Um den Dampfdruck in der Wasser-Dampf-Kammer automatisch aufrechtzuerhalten, wird diese über ein Siphonrohr mit Dreiwegeventil an ein Kontaktmanometer angeschlossen. Am Rohr, das die Wasser-Dampf-Kammer mit der Sterilisationskammer verbindet, ist ein Federsicherheitsventil installiert.

Die Sterilisationskammer, in der der Druck höher oder niedriger als der Atmosphärendruck sein kann, ist an ein Druck- und Vakuummessgerät angeschlossen, das sowohl den darin herrschenden Druck als auch das Vakuum anzeigt. Der Wasserstand in der Wasser-Dampf-Kammer wird mithilfe einer Wasserindikatorsäule ermittelt. Am Kopf der Säule befindet sich ein Trichter zum Befüllen mit Wasser. Die Kammer verfügt über ein Auslassrohr, das über das Gehäuse hinausragt. Am Schlauch befindet sich ein Absperrventil. Die Energieverwaltung befindet sich auf einem separaten Panel.

Horizontale Dampfsterilisatoren bestehen aus den gleichen Grundelementen, d. h. aus dem Dampfkessel und dem Sterilisationsteil. Es gibt Schrank- und andere Designs von Dampfsterilisatoren mit verschiedenen Kapazitäten. Neben den derzeit einfachsten Konstruktionen gibt es mittlerweile auch komplexe Dampfsterilisatoren automatische Geräte, ausgestattet mit verschiedenen Instrumenten und Apparaten, in denen sie verwendet werden verschiedene Systeme zum Entfernen von Luft und gleichzeitigem Aufwärmen der Sterilisationskammer, Mechanismen zum automatischen Be- und Entladen von Sterilgut, spezielle Kontroll- und Aufzeichnungsgeräte. Das Nutzvolumen der Sterilisatoren beträgt 4, 10, 12, 30, 50, 75, 100, 280, 400, 560, 760 dm 3 und mehr.

Die sterilisierten Gegenstände werden in Sterilisationsboxen (Boxen) oder in einer doppelten Lage aus Baumwollgewebe (Kaliko, Leinen usw.) oder in pflanzlichem Pergament der Klassen A und B oder in undurchlässigem und feuchtigkeitsbeständigem Tütenpapier in die Sterilisationskammer gelegt. Kunststofffolie hochfest oder aus Polyvinylchlorid-Kunststoff. Es gibt Sterilisationsboxen verschiedene Größen und Formen (rund oder eckig) und sind nicht nur zur Sterilisation darin bestimmt Dressings, Wäsche und Instrumente, aber auch zur anschließenden Lagerung sterilisierter Produkte. Sterilisationsboxen sind mit und ohne Filter erhältlich. Bei Verwendung letzterer wird die Innenseite der Box vor dem Einlegen der sterilisierten Produkte mit einer Schicht Baumwollstoff ausgekleidet.

Jeder Dampfsterilisator muss über ein funktionierendes Manometer und ein Sicherheitsventil verfügen. Auf der Skala des Manometers sollte ein roter Strich zu sehen sein oder stattdessen eine rot lackierte Metallplatte angebracht werden, die an der Teilung angebracht wird, die dem zulässigen Betriebsdruck im Sterilisator entspricht.

Die Wirksamkeit der Sterilisation hängt von der richtigen Betriebsart des Sterilisators und der Packungsdichte ab. Die Menge des zu sterilisierenden Materials sollte die in den entsprechenden Richtlinien festgelegten Standards nicht überschreiten.

Der Dampfsterilisationsprozess besteht aus mehreren Schritten. Zuerst wird die Wasser-Dampf-Kammer mit Wasser gefüllt, dann werden Gegenstände in die Sterilisationskammer gelegt, der Deckel wird fest verschlossen, eine Heizquelle (oder Fertigdampf) wird aktiviert und meistens wird Luft aus der Kammer entfernt durch Dampf ersetzen. Anschließend wird der Dampfdruck auf den vorgegebenen Wert (gemäß Anleitung) eingestellt. Dieser Moment gilt als Beginn der Sterilisationsexposition (Exposition). Bei einem Dampfdruck (über Atmosphärendruck) von 0,11 mPa (1,1 kgf/cm 2) und einer Temperatur von 120 ± 2 °C sollte die Einwirkungszeit 45 Minuten betragen, und bei einem Druck von 0,2 mPa (2 kgf/cm 2) und a Temperatur 132 ±2°C – 20 Min. Nach Ablauf der Exposition gilt die Sterilisation als abgeschlossen. Der Druck in der Apparatur wird durch Dampfablassen reduziert. Nach Abschluss des Sterilisationszyklus wird der Dampfsterilisator geöffnet, die Sterilisationsboxen entnommen und auf einen mit einer Sterilfolie abgedeckten Tisch gestellt. Die seitlichen Öffnungen der Boxen werden nach der Sterilisation sofort verschlossen. Die zweite Folie dient zur Abdeckung der Hotboxen. Es ist verboten, sterilisiertes Material auszugeben, bis es vollständig abgekühlt ist.

Die Haltbarkeit von sterilisiertem Material in sterilisierten Boxen mit Filter beträgt 20 Tage, ohne Filter bis zu 3 Tage. In anderen Verpackungsarten (Pergament, Kattun) auch bis zu 3 Tage.

Überwachung des Betriebs von Dampfsterilisatoren. Alle in Betrieb befindlichen Dampfsterilisatoren müssen regelmäßig einer technischen und bakteriologischen Kontrolle unterzogen werden. Bei der Kontrolle prüfen sie die Kenntnisse des am Sterilisator arbeitenden Personals über dessen Konstruktion, die Richtigkeit der Eintragung in das Betriebsprotokoll des Dampfsterilisators sowie Hygienezustand Räume, in denen sich das Sterilisationsgerät befindet. Bei Arbeiten an Autoklaven erfolgt die technische Kontrolle gemäß den Betriebs- und Sicherheitsvorschriften.

Die Überprüfung des Temperaturregimes erfolgt durch Messung der Temperatur im zu sterilisierenden Material zu Beginn oder am Ende der Sterilisationszeit. Im ersten Fall wird die Arbeit 7 Minuten nach Beginn der Exposition gestoppt, im zweiten Fall unmittelbar nach Ende der Sterilisation. Um eine zusätzliche Erwärmung der im unteren Teil der Kammer befindlichen Materialien zu verhindern, wird Dampf über ein Dreiwegeventil oder ein Sicherheitsventil abgelassen. Zur Temperaturmessung werden Maximumthermometer verwendet, die in Sterilisationsboxen im Sterilgut platziert werden. Legen Sie 2-3 Thermometer in jede Schachtel (je nach Größe). Kisten mit Thermometern werden hineingelegt verschiedene Orte Sterilisationskammer. Abweichungen der Thermometerwerte von ±2 °C im Vergleich zur Temperatur, bei der die Sterilisation durchgeführt wurde, sind zulässig.

Bodenproben dienen als Biotests zur bakteriologischen Kontrolle der Sterilisation in Dampfsterilisatoren - Gartenerde, enthält Saprophytensporen, die einer Einwirkung von Dampf bei einer Temperatur von 120 °C für 3–5 Minuten standhalten. Nummerierte Bodenproben, in Pergament oder Filterpapier eingewickelt, werden zusammen mit Maximalthermometern in Sterilisationsboxen aus sterilisiertem Material gegeben. In jede Box werden mindestens drei Proben gegeben, zwei Proben werden außerhalb der Boxen im oberen und unteren Teil der Sterilisationskammer platziert. Das Sterilisationsregime während der Kontrolle wird in einem Protokoll festgehalten, in dem der Standort von Bodenproben, Maximalthermometern und deren Messwerte sowie die Ergebnisse bakteriologischer Untersuchungen festgehalten werden.

Nach Abschluss der Sterilisation werden die Bodenproben noch am selben Tag an das bakteriologische Labor geschickt. Kartons mit sterilisiertem Material, die Thermometer und Bodenproben enthielten, müssen erneut sterilisiert werden. Kommt es in mindestens einer Probe zum Wachstum einer Sporenkultur, wird die bakteriologische Kontrolle wiederholt. Wenn bei der erneuten Kontrolle nicht sterile Proben vorhanden sind, verwenden Sie diesen Dampfsterilisator nicht mehr, bis die Gründe für seine schlechte Leistung identifiziert und beseitigt sind.

Der Betrieb von Dampfsterilisatoren in zentralen Sterilisationsabteilungen wird mindestens zweimal jährlich überwacht; in medizinischen Einrichtungen, wenn diese nicht über Sterilisationsabteilungen verfügen, sowie in Kindereinrichtungen mindestens einmal im Jahr. Kontrollieren Sie selektiv 30 % der Gesamtzahl der in Betrieb befindlichen Sterilisatoren. Verfügen Einrichtungen über ein oder zwei Geräte, unterliegen beide Sterilisatoren der Kontrolle.

Darüber hinaus überprüft die Einrichtung selbst, in der sich die Dampfsterilisatoren befinden, diese täglich, indem sie einen chemischen Indikator in die Sterilisationsbox einbringt – Benzoesäure, deren Schmelzpunkt nahe der Temperatur des Dampfes im Sterilisator (120–121 °C) liegt. . Benzoesäure mit Fuchsin (Farbstoff) wird in einer Menge von 0,3–0,5 g in Glasröhrchen von 30–40 mm Länge und 4–5 mm Durchmesser gegossen, deren Enden mit einem Wattestopfen verschlossen oder verschlossen werden. Komponentenverhältnis: pro 100 g Benzoesäure - 10 g Fuchsin.
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Sterilisation mit trockener Hitze

Flambieren oder Kalzinieren

Sterilisationsmethoden

Sterilisation, oder Unfruchtbarkeit (von lat. sterilis- steril) ist die vollständige Zerstörung von Mikroorganismenzellen in Nährmedien, Schalen usw.

Es sind mehrere Sterilisationsverfahren bekannt. Am häufigsten wird die Hitzesterilisation eingesetzt.

Platinschlaufen, Nadeln, Spatel, klein Metallgegenstände(Scheren, Lanzetten, Pinzetten) sowie Glasstäbe, Objektträger, Deckgläser usw.

Es wird zur Verarbeitung von Geschirr und trockenen Materialien wie Stärke und Kreide verwendet. In diesem Fall wird das zu sterilisierende Objekt 2 Stunden lang bei 170 °C gehalten (gerechnet ab dem Moment, in dem es sterilisiert wird). gewünschte Temperatur) im Pasteurofen (Abb. 8, A) oder elektrisch Trockenschränke. Es wird nicht empfohlen, die Temperatur über 170 °C zu erhöhen: Wattestäbchen und Papier beginnen zu zerfallen (werden braun, werden brüchig).

Vor der Sterilisation werden Glaswaren mit Wattestopfen verschlossen und in Papier eingewickelt. Becher, Reagenzgläser, Pipetten, Watte, Mull werden in Papier eingewickelt oder in spezielle Etuis und Federmäppchen gelegt, in denen sterile Glaswaren nach der Sterilisation aufbewahrt werden können.

Am Ende der Sterilisation wird der Schrank erst geöffnet, wenn die Temperatur auf Raumtemperatur abgesunken ist, da sonst das Glas platzen kann.

Strömender Dampf (100 °C) wird zur Behandlung von Gegenständen verwendet, die durch trockene Hitze verderben, sowie von einigen Nährmedien, die nicht mehr aushalten hohe Temperatur(Medien mit Kohlenhydraten, Muttermilch, Milch). Die Sterilisation erfolgt in einem Koch-Kessel (Abb. 8, B) 30 Minuten für 3 Tage täglich. Diese Sterilisation nennt man gebrochen .

Koch-Kessel - ein hoher Metallzylinder mit doppeltem Boden, locker schließend mit einem kegelförmigen Deckel mit einem Loch für ein Thermometer. Die Außenseite des Zylinders ist mit Asbest oder Linoleum verkleidet. Wasser wird in den Boden des Kessels gegossen, ein Ständer mit Löchern für den Dampfdurchtritt ist installiert, auf den das zu sterilisierende Gut gestellt wird. Die Sterilisationsdauer wird ab dem Zeitpunkt gezählt, an dem unter dem Deckel starker Dampf austritt und die Temperatur auf 100 °C ansteigt.


Bei einmaligem Erhitzen auf eine Temperatur von 100 °C für 30 Minuten sterben vegetative Zellen ab, die Sporen vieler Mikroorganismen bleiben jedoch lebensfähig . Nach dieser Erhitzung wird das Medium 24 Stunden lang in einen Thermostat bei 28–30 °C gestellt. Sporen, die beim ersten Erhitzen konserviert wurden, keimen in dieser Zeit zu vegetativen Formen, die beim anschließenden Erhitzen absterben. Dann wird dieser Vorgang noch zweimal wiederholt.

Sterilisation mit fließendem Dampf

Sieden

Sterilisation mit feuchter Hitze

Sterilisation mit trockener Hitze

Sterilisation (Definition, Methoden, Qualitätskontrolle der Sterilisation).

Sterilisation- vollständige Befreiung jedes Gegenstands von allen Arten von Mikroorganismen, einschließlich Bakterien und deren Sporen, Pilzen, Virionen sowie von Prionproteinen, die sich auf Oberflächen, Geräten usw. befinden. Lebensmittel und Medikamente. Es wird durch thermische, chemische, Strahlungs- und Filtermethoden durchgeführt.

Bei dieser Sterilisationsmethode wird das zu sterilisierende Objekt in einem Ofen bei einer Temperatur von 180 °C für 20–40 Minuten oder bei 200 °C für 10–20 Minuten erhitzt. Trockene Hitze sterilisiert Glas oder Porzellangeschirr, Fette, Vaseline, Glycerin, hitzebeständige Pulver (Kaolin, Talk, Calciumsulfat, Zinkoxid usw.). Wässrige Lösungen können nicht in Trockenschränken sterilisiert werden. Glasbehälter, da sich Wasser bei hohen Temperaturen in Dampf verwandelt und das Glas beschädigt werden kann.

Bei dieser Sterilisationsmethode werden die Auswirkungen von hoher Temperatur und Luftfeuchtigkeit kombiniert. Wenn trockene Hitze hauptsächlich zur pyrogenetischen Zerstörung von Mikroorganismen führt, führt feuchte Hitze zu einer Proteinkoagulation, die die Beteiligung von Wasser erfordert. In der Praxis wird die Sterilisation mit Nassdampf bei einer Temperatur von 50-150 °C durchgeführt und auf folgende Weise durchgeführt.

Mit dieser Methode können Gummigegenstände, chirurgische (Einweg-)Instrumente und Glaswaren sterilisiert werden. Es wird nicht empfohlen, Injektionslösungen durch Kochen zu sterilisieren, da dies deutlich weniger wirksam ist als die Dampfsterilisation und häufig zu einer Verringerung der therapeutischen Wirkung des Arzneimittels führt.

Als Flüssigkeit wird gesättigter Wasserdampf (ohne Luft) mit einem Druck von 760 mmHg bezeichnet. Kunst. und Temperatur 100 °C. Die Sterilisation mit fließendem Dampf erfolgt in einem Dampfsterilisator oder Autoklaven für 15-60 Minuten, je nach Lösungsvolumen. Dies ist die gebräuchlichste Methode zur Sterilisierung von Injektionslösungen in Apotheken.

Ausgeführt in verschiedene Designs Autoklaven. Ein Autoklav ist ein hermetisch verschlossener Behälter, der aus einer dickwandigen Sterilisationskammer und einem Gehäuse besteht. Der Autoklav verfügt über ein Sicherheitsventil, das bei Überdruck das Entweichen von Dampf ermöglicht, und ein Manometer. Für jeden Autoklaven muss eine Gebrauchs- und Pflegeanleitung vorhanden sein.

Der zu sterilisierende Gegenstand wird in die Dampfkammer gelegt. Die Dampfkammer ist beheizt. Zunächst wird der Autoklav bei geöffnetem Hahn erhitzt, bis der Dampf in einem starken, kontinuierlichen Strom strömt und die Luft im Autoklav verdrängt, wodurch die Wärmeleitfähigkeit des Wasserdampfs deutlich abnimmt (wenn der Wasserdampf 5 % Luft enthält, sinkt sie um 50). %). Beim Aufheizen des Autoklaven nach dem Schließen des Hahns ist es notwendig, den Druck zu überwachen, parallel zu seinem Anstieg steigt die Temperatur des Dampfes. Der Zusammenhang zwischen Temperatur und Dampfdruck wird wie folgt ausgedrückt: 1 atm – 100 °C; 1,5 atm – 112,7 °C; 2 atm - 119,6 °C; 3 atm – 132,9 °C; 5 atm – 151,1 °C.



Autoklavieren ist die zuverlässigste Sterilisationsmethode. Typischerweise erfolgt die Sterilisation im Autoklaven bei 120 °C für 5–30 Minuten, je nach Volumen der Lösung. Dies garantiert eine weitgehend vollständige Sterilisation, unabhängig von der Art des Mikroorganismus. Auf diese Weise werden Geschirr, Filter, Instrumente, wässrige Lösungen hochtemperaturbeständiger Arzneimittel und Verbände sterilisiert.

Allgemeine Regeln. Die Dampfsterilisation (feuchte Hitze) wird in einem Autoklaven mit gesättigtem Dampf unter Druck durchgeführt, normalerweise für 15–20 Minuten bei einer Temperatur von 121 °C. Wenn der Dampfdruck steigt, steigt seine Temperatur (Tabelle 6).

Tabelle 6

Temperatur von Sattdampf bei unterschiedlichen Drücken

* Derzeit wird der Druck normalerweise in Pascal ausgedrückt, 1 atm (physikalische Atmosphäre) = 1,01325 · 10 5 Pa - 10 2 kPa.

Kontrolle Temperaturregime In einem Autoklaven können Substanzen verwendet werden, die einen bestimmten Schmelzpunkt haben. Sie werden in Reagenzgläsern unter Zusatz von Farbe (Benzonaphthol, Schmelzpunkt) in einen Autoklaven gegeben (t^) 110 °C, Benzoesäure, / pl 120 °C).

Besonderes Augenmerk sollte auf die Sterilisation von Kulturmedien gelegt werden. Autoklaviermodus, der in diesem Fall am häufigsten vorkommt effektive Methode, sollte die Eigenschaften der Umgebung nicht verändern (Tabelle 7).

Tabelle 7

Sterilisationsmodus für verschiedene Medien durch Autoklavieren

Als Regel gilt allgemein, dass bei Druck atm; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 wird erreicht bestimmte Temperatur, °C; 115, 120, 127 bzw. 133. Der Druck wird auf 2 atm erhöht schwere Blockade Material mit temperaturbeständigen Formen von Mikroorganismen. Die Sterilisationsdauer hängt von der Zusammensetzung des zu sterilisierenden Objekts und dem Grad seiner bakteriellen Kontamination ab und liegt zwischen 30 Minuten und 1 - 1,5 Stunden.

Die Wirksamkeit der Sterilisation wird überprüft, indem nachweislich mit Sporen kontaminiertes Material auf Nährböden ausgesät wird. Das Material wird zusammen mit den zu sterilisierenden Gegenständen in einem Autoklaven aufbewahrt.

Die meisten Autoklaven arbeiten gravitativ: Der Dampf bewegt sich in ihnen unter dem Einfluss der unterschiedlichen Dichte von Luft und Dampf von oben nach unten. Sehr wichtig richtige Vorbereitung Proben zu sterilisieren und den Autoklaven entsprechend zu beladen.

Am praktischsten sind automatische Autoklaven, die mit Zeitsensoren und automatischen Temperaturreglern ausgestattet sind. Laborautoklaven müssen über Betriebsartsensoren auf der Thermometerskala verfügen. Probenpakete sollten frei zueinander positioniert werden, um das Eindringen von Dampf nicht zu behindern.

Abhängig von der Flüssigkeitsmenge und der Anzahl der Behälter in der Ladung ändert sich die Dauer der Sterilisation (Tabelle 8). Bei kleinen Volumina ist es kleiner. Somit ist es möglich, die Dauer der Sterilisationszyklen entsprechend der Größe und Anzahl der Behälter zu wählen.

Tabelle 8

Einfluss des Flüssigkeitsvolumens und der Anzahl der Behälter auf die Zeit, die erforderlich ist, um in einem Autoklaven eine Temperatur von 121 °C zu erreichen

Am Ende des Sterilisationszyklus ist es notwendig, den Druck langsam zu reduzieren und dabei die Abkühldauer des sterilisierten Nährmediums genau einzuhalten. Stellen Sie vor dem Öffnen des Autoklaven sicher, dass dieser Druck erreicht hat. Umfeld wird auf dem Manometer angezeigt. Wenn Sie den Deckel des Autoklaven vorzeitig öffnen (bevor der Druck abfällt), kann es zu einem Lufteintritt, einer Verunreinigung der Lösung, einem Sieden der Flüssigkeit in den Gefäßen oder Kolben und einem Herausdrücken der Stopfen kommen. Beim Sterilisieren von Kolben und Flaschen sollten die Verschlüsse locker verschlossen werden, um eine Belüftung zu ermöglichen und Glasbruch zu verhindern.

Nährmedien, die Kohlenhydrate enthalten, werden in einem Autoklaven bei reduziertem Druck (0,5 atm) und einer Temperatur von 110–112 °C für 10–15–20 Minuten sterilisiert, wobei die Zeit ab dem Erreichen des gewünschten Drucks gezählt wird.

Das Medium wird nicht höher als bis zur halben Höhe des Gefäßes gegossen (Tabelle 9), die Wattepfropfen sollten ziemlich dicht sein und in Gaze, aber nicht in Zellophan eingewickelt sein. Der Flaschenhals wird mit Zeitungspapier oder Pergament über dem Korken abgedeckt und mit einem Faden befestigt.

Tabelle 9

Füllgrad verschiedene Arten Flaschen mit Flüssigkeiten