Pasteurofen. Methoden zur Zerstörung (Sterilisation) von Mikroben. Biologische Sterilisationsmethode

Die Sterilisation mit trockener Hitze wird durchgeführt Trockenheizöfen(Pasteurofen). Trockene Hitze wird zum Sterilisieren von Laborglas verwendet. Es wird lose in den Ofen geladen, damit das Material gleichmäßig erhitzt wird. Schließen Sie die Schranktür fest, schalten Sie das elektrische Heizgerät ein, bringen Sie die Temperatur auf 160–165 °C und sterilisieren Sie es 1 Stunde lang. Schalten Sie am Ende der Sterilisation die Heizung aus, aber öffnen Sie die Schranktür erst, wenn der Ofen abgekühlt ist (andernfalls). kalte Luft führt zu Rissen im Geschirr). Sterilisationsmodus: 160 °C – 60 Min., 180 °C – 15 Min., 200 °C – 5 Min. Flüssigkeiten, Nährmedien, Gummi und Kunststoffe können nicht mit trockener Hitze sterilisiert werden.

Druckdampfsterilisation Verbände, chirurgische Wäsche, chirurgische Instrumente, Kulturmedien, Laborglaswaren, infiziertes Material und Injektionslösungen werden behandelt. Das Material wird in Behälter (Kisten) gefüllt. Am Boden des Bix werden Stoffpolster angebracht, um nach der Sterilisation Feuchtigkeit aufzunehmen. Die Sterilität des Materials bleibt 3 Tage lang erhalten. Infiziertes Material in Schalen und Reagenzgläsern wird in Metallbehältern mit Deckel sterilisiert.

Die Dampfsterilisation unter Druck erfolgt im Autoklaven. Mit einer einzigen Behandlung sterben sowohl vegetative als auch sporenförmige Bakterienformen ab. Dampf unter Druck sterilisiert Nährmedien, mit Ausnahme von Medien mit nativen Proteinen, Flüssigkeiten und Geräten mit Gummiteilen. Einfache Medien (MPA, MPB) werden 20 Minuten lang bei 120 °C (1 atm) sterilisiert. Medien, die native Proteine ​​und Kohlenhydrate enthalten, können bei dieser Temperatur nicht sterilisiert werden, da es sich um Substanzen handelt, die sich durch Erhitzen leicht verändern. Medien mit Kohlenhydraten werden fraktioniert bei 100 °C oder im Autoklaven bei 112 °C (5 atm) für 10–15 Minuten sterilisiert. Verschiedene Flüssigkeiten, Geräte mit Gummischläuchen, Stopfen, Bakterienkerzen und Filter werden 20 Minuten lang bei 120 0 C (1 atm) sterilisiert.

Infiziertes Material (in Reagenzgläsern, Bechern) wird in spezielle Metalleimer oder Tanks mit Löchern für das Eindringen von Dampf gegeben und 1 Stunde lang bei 126 °C (1,5 atm) sterilisiert. Instrumente werden auch nach der Arbeit mit Sporenbakterien sterilisiert.

Es gibt 2 Sterilisationsmodi:

1. Strömender Dampf in einem Autoklaven oder in einem Koch-Apparat bei abgeschraubtem Deckel und geöffnetem Auslassventil, wenn sich die antibakterielle Wirkung des Dampfes gegen vegetative Formen zeigt. Auf diese Weise werden Medien mit Vitaminen und Kohlenhydraten, Harnstoff, Milch, Kartoffeln und Gelatine sterilisiert. Zur vollständigen Entsterilisation wird an 3 aufeinanderfolgenden Tagen eine fraktionierte Sterilisation (bei 100 °C) für 20–30 Minuten verwendet. Es tötet auch Sporen ab.
2. Am häufigsten wird die Druckdampfsterilisation durchgeführt effektive Methode Entbehrung. Dressing, Wäsche wird bei 1 atm sterilisiert. 15–20 Minuten, infiziertes Material bei 1,5–2 atm für 20–25 Minuten.

Nutzung physikalischer und chemischer Faktoren.

ZU physische Faktoren Sterilisationen umfassen Hochtemperatur-, ultraviolette Strahlung, ionisierende Strahlung und durch Bakterienfilter.

In der Laborpraxis wird die Sterilisation bei hoher Temperatur durch Kalzinieren in einer Flamme, Erhitzen mit trockener Hitze, Kochen, Behandlung mit fließendem Dampf oder Dampf unter Druck erreicht.

Reis. 1. Bunsenbrenner. Reis. 2. Teklu-Brenner. Reis. 3. Temperaturverteilung in der Brennerflamme.

Reis. 4. Trockenschrank.

Reis. 5. Wasserbäder: 1 - mit konstantem Wasserfluss; 2 - zylindrisch; 3 - runder Boden. Reis. 6. Fließender Dampfsterilisator.

Die Flammensterilisation ist eine einfache und zuverlässige Methode zur Verarbeitung verschiedener hitzebeständiger Gegenstände: Nadeln, Bakterienschlingen, mikrobiologische Spatel, Pipetten, Objektträger und Deckgläser, Pinzetten usw. Zu diesem Zweck werden Gasbrenner des Bunsensystems (Abb. 1) verwendet. oder Teklu (Abb. 2). Der Bunsenbrenner ist mit einer beweglichen Halterung ausgestattet, durch die Sie den Luftzugang verstellen können. Beim Teklu-Brenner wird die Menge der einströmenden Luft durch Bewegen der Scheibe reguliert (Abb. 2,1), die Gasmenge wird durch eine Schraube reguliert (Abb. 2, 2). Bei fehlender oder unzureichender Luftzufuhr entsteht eine rauchige Flamme. Der Luftzugang zum Brenner wird eingestellt, bis blaue Flamme. Eine ungefähre Temperaturverteilung in der Brennerflamme ist in Abb. dargestellt. 3.

Die Trockenhitzesterilisation wird in einem Trockenofen (Pasteurofen) durchgeführt. Mit dieser Methode werden nur trockene Gegenstände sterilisiert – Laborglas usw. Der Trockenschrank (Abb. 4) ist ein kleiner Eisenschrank mit Doppelwänden, zwischen denen sich ein befindet Wärmedämmmaterial(Asbest, Glaswolle). Sauber gewaschene Reagenzgläser und Flaschen werden mit Baumwollstopfen verschlossen; Pipetten, Watte und Gaze werden in Papier eingewickelt und auf die Regale des Schranks gelegt, damit die zu sterilisierenden Gegenstände die heißen Wände des Geräts nicht berühren und erhitzte Luft ungehindert zwischen ihnen eindringt. Die Sterilisation im Trockenschrank dauert 45 Minuten - 1 Stunde bei einer Temperatur von 160-170°. Bei Temperaturen über 175° verbrennen Papier und Watte.

Das Kochen in Wasser zerstört Nicht-Sporen-Mikroben in 1-3 Minuten. , Nadeln, Messer, kleine Werkzeuge usw. können in Metallsterilisatoren und sogar in einem normalen Topf gekocht werden. Zugabe einer kleinen Menge Natriumbikarbonat (Natriumbikarbonat) zum Wasser

Durchführung der Stufe 1 der bakteriologischen Methode zur Isolierung von Aerobiern:

Aus dem untersuchten Material bereiten wir ein festes Präparat vor, färben es mit der Gram-Methode und der Mikroskopie und identifizieren die nachgewiesenen Mikroorganismen anhand morphotinktorischer Eigenschaften.

Wir säen das zu untersuchende Material auf eine halbe Schale mit einem dichten Nährmedium, indem wir die Methode „Strich mit Plattform“ anwenden (wir tragen das Material in einer begrenzten Fläche auf die Oberfläche des dichten Nährmediums in einer Petrischale auf und verteilen es dann durch Aussaat in häufigen parallelen Streifen)

Unterschreiben wir die Becher mit dem Datum der Aussaat und stellen wir sie kopfüber für 18–24 Stunden in einen Thermostat bei einer Temperatur von 37°.

Dampfsterilisator (Autoklav) – Dampfsterilisation unter Druck.

Die zuverlässigste und universellste Sterilisationsmethode in der medizinischen und mikrobiologischen Praxis ist die Dampfsterilisation unter Druck. Die Herstellung erfolgt in einem Autoklaven, in dem die zu sterilisierenden Gegenstände erhitzt werden gesättigter Dampf unter Druck über dem Atmosphärendruck. Zwischen den Manometerwerten und der Sattdampftemperatur besteht folgender Zusammenhang

Null Druck Berücksichtigen Sie den normalen Atmosphärendruck (760 mm Hg).

Die Sterilisation wird nur erreicht, wenn der Autoklav voll funktionsfähig ist und ordnungsgemäß von speziell geschultem Personal bedient wird. Daher ist eine ständige Überwachung des Sterilisationsregimes erforderlich, die physikalisch (Maximalthermometer usw.), biologisch (Biotest mit Sporen von) durchgeführt wird Testkulturen von Mikroorganismen) und chemische (chemische Tests, Typindikatoren IP) Methoden

Es wird eine Kontrolle des Sterilisationsregimes von Autoklaven durchgeführt chemisch bei jeder Beladung des Autoklaven Chemischer Test - Glasröhrchen mit chemisch, mit einem bestimmten Schmelzpunkt, Antipyrin, Resorcin - 110±2°, Benzoesäure - 120±2°, Benzamid - 126+1°, Harnstoff, Nicotinamid, D (+)-Mannose - 132+2°. In die chemischen Tests wird ein Anilinfarbstoff (Magenta, Gentsnanviolett usw.) eingebracht, der die Substanz beim Schmelzen gleichmäßig färbt. Derzeit werden häufiger Indikatoren vom Typ IS (Vinar, Russland) verwendet, bei denen es sich um einen Papierstreifen mit einer darauf aufgetragenen Schicht einer Indikatormischung handelt und die zur operativen visuellen Überwachung nicht nur der Temperatur, sondern auch der Sterilisationszeit dienen (IS-120, IS-132) Das Sterilisationsregime wird vierteljährlich mit einem Biotest mit Sporen der Testkultur Bacillus stearotermophilus BKM B-718 überwacht

Pasteurofen- Trockenhitzesterilisation.

Glas-, Metall- und Gummiprodukte auf Basis von Silikonkautschuk werden in einem Pasteurofen sterilisiert. Sterilisationsmodus: 160°C – 150 Min.; 180°C – 60 Min. Die Kontrolle des Sterilisationsmodus während jedes Zyklus erfolgt mit den Sterilisationsindikatoren IS-160, IS-180; vierteljährlich - Verwendung eines Biotests mit Sporen der Bacillus licheniformis-Testkultur

Sterilisation Tabelle 1.

Desinfektion Tabelle 2.

In der Laborpraxis ist es bei der Arbeit mit Mikroorganismen notwendig, ständig Maßnahmen zu ergreifen, um sicherzustellen, dass das bei der Arbeit verwendete Geschirr, Nährmedien und Metallinstrumente keine Mikroben enthalten. Zu diesem Zweck kommen folgende Sterilisationsmethoden zum Einsatz:

Sterilisation überhitzter Dampf unter Druck;

Sterilisation mit strömendem Dampf;

Heißluftsterilisation;

Desinfektion.

Die beste Sterilisation erfolgt durch die Behandlung verschiedener Gegenstände mit Heißdampf in speziellen Geräten – Autoklaven.

Autoklav- und Heißdampfsterilisation unter Druck

Autoklaven sind Kessel aus Metall (Stahl, Gusseisen oder Kupfer) mit Doppelwänden und einem massiven Deckel, der mit Schrauben und einer Gummidichtung hermetisch verschlossen ist. Je nach Heizsystem gibt es Dampf-, Elektro- und Feuerautoklaven (Abb. 42). Durch die Erzeugung von Hochdruck- und überhitztem Dampf bei einer Temperatur von 115–120 °C in einem Autoklaven können Sie sowohl vegetative Zellen als auch mikrobielle Sporen innerhalb von 20–30 Minuten zerstören.

In einem Autoklaven werden alle Gegenstände sterilisiert, die bei hohen Temperaturen nicht verderben: verschiedene Flüssigkeiten (Wasser, Nährmedien, die keine Kohlenhydratbestandteile enthalten), Glaswaren, Metallinstrumente, Watte, Gaze, Papier usw.

In Fällen, in denen einige Stoffe dem normalen Sterilisationsregime im Autoklaven nicht standhalten (insbesondere zuckerhaltige Nährmedien), werden sie im Autoklaven bei einer Temperatur von 112 °C für 20 Minuten sowie unter milderen Bedingungen sterilisiert.

Bei hohe Drückeüberhitzter Dampf im Autoklaven, die Heiztemperatur erhöht sich entsprechend; Dies führt zu einer Karamellisierung des Zuckers, der einigen Kulturmedien zugesetzt wird, wodurch die Medien für die Bestimmung der physiologischen Eigenschaften von Mikroben ungeeignet werden.

Der Druck im Autoklaven wird mit einem Manometer gemessen, das im Deckel oder Körper des Autoklaven angebracht ist. Bei übermäßigem Druckanstieg wird automatisch ein Sicherheitsventil aktiviert, das sich je nach Ausführung entweder am Deckel oder an der Seitenfläche der Autoklavenwand befindet. Ein aus dem Sicherheitsventil austretender Dampfstrahl weist mit einem Pfiff darauf hin, dass das Heizen beendet werden muss. Wenn das Erhitzen nicht gestoppt wird, kann der Autoklav explodieren.

Manchmal wird in einer speziellen Tasche am Deckel des Autoklaven ein Thermometer angebracht, mit dem die Sterilisationstemperatur gemessen wird. Im Inneren des Autoklaven befindet sich ein Ständer, unter dem Wasser durch ein Rohr mit Trichter außerhalb des Autoklaven gegossen wird. Darüber hinaus sind Autoklaven mit einem Hahn zum Ablassen von Dampf und Luft sowie einem Hahn zum Ausgießen von Wasser ausgestattet.

Für den Umgang mit einem Autoklaven während der Sterilisation gelten folgende Regeln: Das Gerät wird über einen Trichter und ein Rohr mit Wasser gefüllt, dessen Füllstand unterhalb des Ständers liegen sollte. Das zu sterilisierende Gut wird in spezielle Metallflaschen gefüllt und in einen Autoklaven gegeben. Der Deckel des Autoklaven ist aufgeschraubt.

Durch Öffnen des Hahns, damit Dampf und Luft entweichen können, beginnt das Erhitzen. Sobald das Wasser kocht, beginnt der entstehende Dampf, Luft aus dem Autoklaven zu verdrängen. Das Dampfauslassventil wird so lange geöffnet gehalten, bis trockener Dampf in einem kontinuierlichen Strom aus ihm austritt. Dies weist auf eine vollständige Entfernung der Luft aus dem Autoklaven hin. Dann wird der Hahn geschlossen. Dampf, der bei weiterer Erhitzung in immer größeren Mengen anfällt, erhöht den Druck im Autoklaven und gleichzeitig die Temperatur. Beim Arbeiten mit einem Autoklaven können Sie sich an der Tabelle der Zusammenhänge zwischen Dampfdruck und Temperatur (Tabelle 4) orientieren.

Nachdem die Nadel des Manometers erreicht ist der erforderliche Indikator Druck (die Temperatur im Autoklaven entspricht der akzeptierten Sterilisationstemperatur), stellen Sie die Heizung des Autoklaven so ein, dass der Druck für die erforderliche Zeit auf dem gleichen Niveau bleibt. Stoppen Sie am Ende der Sterilisation das Erhitzen. Wenn die Temperatur im Autoklaven sinkt und die Manometernadel auf Null fällt (der Druck im Autoklaven entspricht dem Atmosphärendruck), öffnen Sie vorsichtig das Dampfablassventil, lassen Sie den Dampf ab und entfernen Sie das Material, indem Sie den Deckel des Autoklaven öffnen. Es ist nicht möglich, das Dampfablassventil vorzeitig zu öffnen, bevor der Druck im Autoklaven abfällt. Ein starker Druckabfall in der Autoklavenkammer führt zu einem heftigen Sieden von Flüssigkeiten, die auf Temperaturen über 100 °C erhitzt werden, d. h. oberhalb des Siedepunkts bei normalem Atmosphärendruck. Heftig kochende Flüssigkeiten benetzen Wattestäbchen oder drücken sie sogar aus den Gefäßen – die Arbeit ist umsonst. Nährmedien verschlechtern sich, da sich aus der Luft leicht Mikroflora auf feuchten Pfropfen entwickelt, in das Innere eindringt und die Medien infiziert. Darüber hinaus ist das Öffnen eines Autoklaven mit erhöhtem Druck gefährlich für den Arbeiter.

Sobald die Manometernadel jedoch auf Null stehen bleibt, muss der Autoklav sofort geöffnet werden, da sonst Kondenswasser auf die Stopfen fließt und diese ebenfalls nass werden. Um eine Benetzung der Stopfen mit Kondenswasser zu vermeiden, werden diese vor der Sterilisation mit Papier abgedeckt.

In einen Autoklaven gegebene Materialien werden innerhalb von 20 bis 30 Minuten zuverlässig sterilisiert, wenn die Temperatur bei 120 °C gehalten wird, was einem Druck von 2 atm (19,61 * 10000 N/m2) oder einem Manometer von 1 atm über dem Normalwert entspricht. Auch zur Sterilisation von Medien mit strömendem Dampf kann ein Autoklav erfolgreich eingesetzt werden; in diesem Fall ist der Deckel des Autoklaven nicht aufgeschraubt.

Kochkessel und Dampfsterilisation

Der Koch-Kessel ist ein Zylinder aus verzinktem Blech oder Kupfer mit Doppelwänden und einem konischen helmförmigen Deckel (Abb. 43). In der Mitte des Deckels befindet sich ein Loch für ein Thermometer. Die Außenseite des Koch-Kessels ist mit einer Schicht bedeckt wärmeisolierendes Material: Asbest, Linoleum usw.

Im Inneren des Kessels ist eine Trennwand (Ständer) angebracht, die den Innenraum des Kessels in zwei Abschnitte unterteilt: einen oberen und einen unteren. Der untere Teil ist mit Wasser gefüllt, dessen Füllstand durch das Glas des Wasserzählers bestimmt wird: Wasser sollte den oberen Teil des Ständers nicht bedecken. Das zu sterilisierende Gut wird im oberen Teil des Kessels in übereinander gestellte Gittereimer gelegt. Nachdem sie den Kessel mit einem Deckel verschlossen haben, beginnen sie, das Wasser darin zu erhitzen. Als Beginn der Sterilisation gilt der Zeitpunkt, an dem das Thermometer 98-100°C anzeigt. Wenn kein Thermometer vorhanden ist, gilt als Beginn der Sterilisation der Moment, in dem Dampf kräftig aus dem Loch im Kesseldeckel austritt. Somit befinden sich die zu sterilisierenden Gegenstände während des Betriebs des Kessels immer in einem Dampfstrom.

Die Methode der Sterilisation mit fließendem Dampf wird aufgrund ihrer Einfachheit und Verfügbarkeit in der Laborpraxis häufig eingesetzt. Mit strömendem Dampf werden vor allem Nährmedien sterilisiert, deren Eigenschaften sich bei Erhitzung über 100°C verändern: Eiweiß, Kohlenhydrate und Gelatine. Für diese Umgebungen ist die Dampfsterilisationsmethode am besten geeignet.

Der Nachteil der Methode der Sterilisation mit fließendem Dampf ist ihre Dauer, da zur vollständigen Sterilisation des Mediums eine wiederholte Erhitzung im Kessel für eine bestimmte Zeit erforderlich ist – je nach Bedarf zwischen 20 Minuten und 1,5 Stunden (im Durchschnitt 30–45 Minuten). die Flüssigkeitsmenge in Abständen von 24 Stunden. Es wird empfohlen, die gesamte Zeitspanne zwischen dem Erhitzen des Mediums in einem Thermostat bei 25–30 °C zu halten.

Eine einzige Erhitzung in einem Koch-Kessel führt zum Tod nur vegetativer mikrobieller Zellen, Sporen können jedoch überleben. Bei der Aufbewahrung des sterilisierten Nährmediums Bevorzugte Umstände(bei Zimmertemperatur(oder noch besser in einem Thermostat) keimen einige der verbleibenden Sporen und verwandeln sich am nächsten Tag in vegetative Zellen. Wiederholtes Erhitzen führt zum Absterben dieser neu entwickelten Zellen. Abschließend sorgt ein drittes Erhitzen nach einem Tag Lagerung des Mediums in einem Thermostat für vollständige Sterilität. Diese Methode wird fraktionierte Sterilisation genannt. IN praktische Arbeit Anstelle der Sterilisation mit strömendem Dampf im Koch-Kessel wird häufig die konventionelle Sterilisation in Autoklaven bei 112 °C und einem Gegendruck von 0,5 atm für 15–20 Minuten eingesetzt.

Trockenschrank und Heißluftsterilisation

In der Laborpraxis ist zur Sterilisation mikrobiologischer Glaswaren ein Trockenschrank oder der sogenannte Pasteurofen erforderlich. Geräteprinzip Trockenschrank und der Pasteurofen sind gleich. Es werden nur Öfen hergestellt rechteckige Form, und Trockenschränke können nicht nur eine rechteckige, sondern auch eine zylindrische Form haben (Abb. 44 und 45). Bei diesen Geräten erfolgt die Sterilisation mit Heißluft (trockene Hitze) bei einer Temperatur von 160 °C für 1 Stunde oder bei einer Temperatur von 150 °C für 2 Stunden.

Sowohl Pasteuröfen als auch Trockenöfen sind doppelwandige Hohlraumgeräte mit dicht schließenden Doppeltüren. Außen sind sie zur Wärmedämmung mit einer Asbestschicht überzogen. Zirkuliert zwischen den Wänden heiße Luft, deren Erwärmung entweder durch elektrische Spiralen oder Gasbrenner erfolgt. Im Inneren des Schranks befinden sich mehrere (normalerweise zwei oder drei) löchrige Regale. Oben im Schrank befinden sich zwei Öffnungen: eine für das Thermometer und die andere für die Belüftung. Am praktischsten sind elektrische Trockenschränke.

Die neuesten Design-Trockenschränke verfügen über vier Heizstufen, die durch einen speziellen Regler an der Seitenwand des Schranks aktiviert werden können. Der gewünschte Heizgrad wird durch Einschalten von eins, zwei, drei oder allen vier erreicht elektrische Spiralen, und die Reihenfolge des Einschaltens der Spiralen kann beliebig sein.

Neben Glaswaren können Sie auch Mull und Watte in Trockenschränken sterilisieren, besser ist jedoch die Verarbeitung im Autoklaven, da sie bei einer Temperatur von 160 °C gelb werden. Gummiprodukte können nicht im Trockenschrank sterilisiert werden, da sie hohen Temperaturen nicht standhalten – sie werden spröde und verderben. Flüssigkeiten sieden bei 150-160 °C und verändern ihre chemische Zusammensetzung.

Um eine spätere Kontamination des Sterilguts durch Mikroben aus der Luft zu vermeiden, wird es vor der Sterilisation in Papier eingewickelt. Petrischalen sind jeweils 2 Stück in Papier eingewickelt, so dass keine Lücken in der Verpackung entstehen. Glasröhrchen und Pipetten werden ebenfalls in Papier eingewickelt, zunächst einzeln und dann in Packungen zu 10–20 Stück. Die Verpackung von Röhrchen und Pipetten muss äußerst sorgfältig erfolgen, um sie vollständig zu schützen äußere Oberfläche aus der Kommunikation mit der Luft. Vor der Sterilisation mit Heißluft werden Kolben, Reagenzgläser und Flaschen mit Baumwollstopfen und Papierkappen verschlossen.

Lassen Sie die Temperatur im Trockenschrank nicht über 170 °C ansteigen, da bei dieser Temperatur die Wattestäbchen braun werden und die Papierhüllen spröde und sogar verkohlt werden. Als Beginn der Sterilisation gilt der Zeitpunkt, an dem das Thermometer 150-160 °C anzeigt. Nach Ablauf der für die Sterilisation erforderlichen Zeit wird das Erhitzen beendet. Um das Geschirr vor Rissen zu schützen, müssen Sie nur trockenes Geschirr sterilisieren und den Schrank nach der Sterilisation erst öffnen, wenn die Temperatur darin auf 50–70 °C sinkt. Kleine Laborgegenstände wie Platinösen, Nadeln, Pinzetten, Scheren usw. können durch einfaches Erhitzen in einer Flamme sterilisiert werden Gasbrenner(oder Alkohollampen).

Desinfektion

Auf die Desinfektion in einem mikrobiologischen Labor muss sehr häufig zurückgegriffen werden. Die am häufigsten verwendeten Desinfektionsmittel sind die folgenden: 3-5 %ige Lösung von Karbolsäure und Lösungen anderer höherer Phenole, 50-70 %ige Lösung Ethylalkohol, die gleiche Konzentration an Butylalkohol, 4 % Formaldehydlösung, 1-2 % Lösungen von Chloroform und Toluol, 0,5 % Chloraminlösung usw.

In mikrobiologischen Labors von Konservenfabriken werden Tischoberflächen, Geschirr, Böden und Wände von Räumlichkeiten desinfiziert. Zur Desinfektion von Tischoberflächen können Sie nicht nur Ethylalkohollösungen, sondern auch Karbolsäurelösungen verwenden.

Desinfektion Abwassergeräte in Konservenfabriken und anderen Lebensmittelunternehmen Hergestellt aus einer 5-10%igen Bleichlösung. Zur Desinfektion des Kreislaufs Glasbehälter Wird in Konservenfabriken verwendet Chlorwasser, mit mindestens 100 mg Aktivchlor pro Liter. Um eine solche Lösung herzustellen, nehmen Sie Bleichmittel und mischen Sie es mit einer kleinen Menge Wasser, bis eine dicke Masse entsteht. milchig. Diese Mischung wird zu Wasser gegeben, gründlich gerührt und einen Tag stehen gelassen. Bleichpulver reagiert unter Bildung von Calciumoxidhydrat – Ca(OH)2 – und aktivem Chlor. Ca(OH)2 setzt sich am Boden ab, die Lösung über dem Sediment erweist sich nach der Klärung als transparent und grünlich gefärbt. Das Einweichen des Behälters in diese Lösung dauert 10 Minuten. Nach dem Chlorieren muss der Behälter gründlich unter fließendem Wasser gewaschen werden.

Sterilisation- Unfruchtbarkeit; Zerstörung pathogener und nicht pathogener Mikroorganismen in vegetativer Form und Sporenform in jedem Material.

Vorbereiten des Geschirrs für die Sterilisation. Glaswaren müssen sauber gewaschen und sterilisiert werden. Verwenden Sie zum Waschen Seife oder chemische Lösungen Waschmittel. Neue Gerichte werden in einer 1-2%igen Lösung vorgekocht Salzsäure, um ein späteres Auslaugen des Glases zu vermeiden. Unter fließendem Wasser gewaschenes Geschirr wird mit destilliertem Wasser gespült und getrocknet.

Bakteriologische Röhrchen. Konische, matte Flaschen werden mit Baumwollgaze-Stopfen verschlossen, die aus eng gedrehten Watterollen bestehen und mit einer Gazeschicht bedeckt sind. Auch für bakteriologische Reagenzgläser wurden Metallstopfen in Form von Außenkappen entwickelt. Es ist zu berücksichtigen, dass beim Sterilisieren von Wattestäbchen bei hohen Temperaturen Substanzen aus der Watte freigesetzt werden, die das Wachstum einiger empfindlicher Bakterien, wie z. B. Brucella, hemmen.

Führen Sie beim Einsetzen von Pipetten ein Wattestäbchen in das obere Ende ein. Pasteurpipetten müssen über eine versiegelte Kapillare verfügen. Jede Messpipette ist vom Ausguss ausgehend über die gesamte Länge spiralförmig in einen 4-5 cm breiten langen Papierstreifen eingewickelt. Pasteurpipetten sind in Papier eingewickelt, jeweils 10–20 Stück, Reagenzgläser – jeweils 15–20 Stück. Es ist besser, alle Arten von Pipetten vor und nach der Sterilisation in speziellen Metallbehältern aufzubewahren. Die Stopfen der Kolben sind zusätzlich mit Papierkappen abgedeckt.

Vor der Sterilisation werden saubere, zusammengebaute Petrischalen in Papier eingewickelt, jeweils 3 bis 4 Stück. Nach der Sterilisation schützt das Papier sterile Glaswaren vor Kontamination durch Mikroflora.

Vor der Sterilisation wird das Geschirr nicht zu dicht in den Trockenschrank gestellt, um eine Luftzirkulation zu gewährleisten, und es wird darauf geachtet, dass die Temperatur 180 °C nicht überschreitet, da bei höherer Temperatur Papier und Watte verkohlen. Nach Abschluss der Sterilisation wird der Trockenschrank erst dann geöffnet. Bis die Temperatur darin auf 70-80 °C sinkt, weil scharfer Abfall Temperaturen können zum Glasbruch führen.

Wenn die Schalen für die Sterilisation der darin enthaltenen Nährmedien durch Autoklavieren unter einem Druck von mindestens 1 atm vorgesehen sind, werden sie nicht vorsterilisiert. Beim Sterilisieren von Medien mit fließendem Dampf oder im Autoklaven unter einem Druck von nicht mehr als 0,5 atm. Es müssen sterile Behälter verwendet werden.

Sterilisation mit trockener, erhitzter Luft. Die Methode wird zum Sterilisieren sauberer Glaswaren verwendet. Zu diesem Zweck wird ein Pasteurofen verwendet – ein spezieller Trockenschrank mit Doppelwänden. Die Außenseite ist mit hitzebeständigem Material ausgekleidet. Oben befindet sich ein Thermometer. Zwischen dem hitzebeständigen Futter und der Innenseite Metallkörper Unten ist ein automatisches elektrisches Heizelement angebracht. Wenn der Trockenschrank eingeschaltet ist, erwärmt sich die Luft im Inneren. Sobald die eingestellte Temperatur erreicht ist, wird der Startzeitpunkt der Sterilisation notiert. Sterilisationsmodus: bei einer Temperatur von 155–160 °C – Exposition für 2 Stunden, bei 165–170 °C – 1–1,5 Stunden, bei 180 °C – 1 Stunde. Nach der Sterilisationszeit wird das Erhitzen gestoppt.

Autoklavieren. Dabei handelt es sich um Dampfdrucksterilisation in Kombination mit hohe Temperatur V Spezialgerät- Autoklav. Wenn gesättigter Dampf auf einen kühleren Gegenstand trifft, kondensiert der Dampf zu Wasser, was zur Freisetzung von Wasser führt große Menge Hitze. Darüber hinaus wird die Dampfmenge reduziert, was das Eindringen in die inneren Teile des zu sterilisierenden Materials erleichtert. Voraussetzung ist die Zufuhr von wirklich gesättigtem Dampf, sodass es bei Kontakt mit einem kalten Gegenstand zu einer sofortigen Kondensation und Erwärmung kommt. Die Industrie produziert vertikale und horizontale Autoklaven.

Ein vertikaler Autoklav ist ein doppelwandiger zylindrischer Metallkessel, der mit einem Deckel verschlossen ist. Durch einen speziellen Hahn mit Trichter wird Wasser bis zu einem bestimmten Füllstand zwischen die Wände gegossen. Die Innenwand des Kessels ist im oberen Teil mit Löchern und im unteren Teil mit einem Hahn ausgestattet, durch den beim Erhitzen des Wassers der Dampf die Luft aus dem Kessel verdrängt. Auf dem Autoklaven wird ein Metallschutzrahmen angebracht, und zwischen diesem und dem Autoklaven selbst sollte sich ein Schutzrahmen befinden Freiraum. Durch den Anschluss an das Stromnetz wird der Autoklav beheizt.

Der Autoklav wird mit dem zu sterilisierenden Material beladen, der Deckel und der Hahn, durch den Wasser gegossen wurde, werden geschlossen und der untere Hahn vorübergehend geöffnet gelassen. Das erhitzte Wasser zwischen den Wänden des Autoklaven kocht, der entstehende Dampf steigt auf und gelangt durch die oberen Löcher der Innenwand in den Kessel, wobei er die Luft durch den unteren offenen Hahn verdrängt. Wenn die gesamte Luft verdrängt ist und der Dampf in einem gleichmäßigen Strahl austritt, wird das untere Ventil geschlossen. Dadurch erhöht sich der Dampfdruck im Autoklaven. Als Beginn der Sterilisation gilt der Zeitpunkt, an dem der Druck einen bestimmten Wert (laut Manometer) erreicht. Die Hitze wird während der Sterilisation angepasst und der Dampfdruck auf dem gleichen Niveau gehalten. Sollte der Druck im Autoklaven zu stark ansteigen, gibt es ein Sicherheitsventil, durch das der überschüssige Dampf automatisch entweicht.

Mit steigendem Dampfdruck erhöht sich entsprechend die Temperatur im Autoklaven.

Das Manometer zeigt den Dampfdruck ohne Berücksichtigung der Umgebung an Luftdruck(760 mmHg). Nach Ablauf der Sterilisationszeit wird der Autoklav abgeschaltet. Wenn der Manometerwert nach dem Abkühlen Null ist, öffnen Sie das Ventil, um Dampf abzulassen.

Ein horizontaler Autoklav unterscheidet sich im Design von einem vertikalen Autoklav, sein Funktionsprinzip ist jedoch dasselbe.

virologische Sterilisation pathologisches Tier

Muster von Formularen, die beim Einsenden von pathologischem Material an das Labor auszufüllen sind