Hava örnekleme mikrobiyolojisinde aspirasyon yöntemi. Hava mikroflorası. havanın sıhhi ve bakteriyolojik incelenmesi. Sıhhi mikrobiyoloji için alet ve cihazlar

Hava, görsel olarak belirlenemeyen özel bir çevresel nesnedir, dolayısıyla örneklemesinin bazı özellikleri vardır. Bakteriyel hava kirliliğinin hijyenik bir değerlendirmesi için, besin ortamıyla ne kadar havanın temas halinde olduğunu bilmek gerekir, çünkü standartlar, 1 m3 (1000 l) hava aşılandığında büyüyen belirli sayıda mikroorganizma kolonisini düzenler.

Mikroorganizmaları yakalama ilkesine bağlı olarak, bakteriyolojik araştırmalar için aşağıdaki hava örnekleme yöntemleri ayırt edilir:

Sedimantasyon;

Filtrasyon;

Bir hava jetinin darbe etkisi prensibine dayanmaktadır. En basiti sedimantasyon yöntemi(çökeltme yöntemi), mikrobiyal aerosolün kendiliğinden çöken kısmını yakalamanıza olanak tanır. Aşılama, odanın çeşitli yerlerine yerleştirilen ve 5-10 dakika açık bırakılan, yoğun besin ortamına sahip Petri kaplarına yapılır, ardından 37 °C'de 48 saat inkübe edilir ve büyüyen kolonilerin sayısı sayılır.

Bu yöntem ekim sırasında ekipman kullanımını gerektirmez ancak dezavantajı düşük bilgi içeriğidir, çünkü yerleşmelerinin kendiliğinden gerçekleşmesi ve yoğunluğunun yöne bağlı olması nedeniyle mikroorganizma sayısı hakkında doğru veri elde etmek imkansızdır. ve hava akış hızı. Ayrıca besin ortamıyla temas halinde olan havanın hacmi de bilinmemektedir. Bu yöntem, bakteriyel aerosolün ince fraksiyonlarını zayıf bir şekilde yakalar, bu nedenle sedimantasyon yönteminin yalnızca günün farklı saatlerinde iç mekan havasının temizliği hakkında karşılaştırmalı veriler elde etmek ve ayrıca sıhhi ve hijyenik önlemlerin etkinliğini değerlendirmek için kullanılması önerilir ( havalandırma, ıslak temizlik, ultraviyole lambalarla ışınlama vb.).

Hava tohumlama filtreleme yöntemi belirli bir hacimdeki havanın sıvı bir besin ortamından geçirilmesinden oluşur. En basiti, havanın (10-12 litre) elektrikli bir aspiratörle steril salinle doldurulmuş bir Drexel şişesinden geçirildiği Dyakonov yöntemidir. Daha sonra şişeden 0,1-1 ml salin alınır ve yoğun besin ortamına sahip bir Petri kabına aşılanır. İnkübasyondan sonra büyüyen koloniler sayılır ve 1 m3 havaya dönüştürülür.

Hava jetinin darbe etkisinin prensibi Krotov'un cihazında bir uygulama buldum. Cihazın silindirik gövdesinin tabanına santrifüj fanlı bir elektrik motoru monte edilmiştir ve üzerine yoğun steril besin ortamına sahip bir Petri kabının yerleştirildiği üst kısma dönen bir disk yerleştirilmiştir. Cihazın gövdesi, içinden fan tarafından emilen havanın girdiği, radyal olarak yerleştirilmiş kama şeklinde bir yuvaya sahip bir kapakla hava geçirmez şekilde kapatılmıştır, hava jeti agara çarpar ve bunun sonucunda mikrobiyal aerosol parçacıkları ona yapışır. Cihaz ağda açıldığında diskin Petri kutusuyla birlikte dönmesi ve kama şeklindeki yuva, agar yüzeyi üzerinde düzgün bir aşılama sağlar.

Cihazdan geçen hava miktarını hesaba katmak için, ön dış yüzeyine hava aspirasyon hızını dakikada 20 ila 40 litre arasında ayarlamanıza olanak tanıyan bir reometre yerleştirilmiştir. Numune alma zamanının (süresinin) ve hava akış hızının bilinmesi, çekilen hava miktarının belirlenmesi. Son aşamada 1 m3 başına bakteriyel hava kirliliği miktarı yeniden hesaplanır.

Öğrencilerin önleyici (hijyenik) önlemleri organize etme ve yürütme, sağlıklı bir yaşam tarzını sürdürme ve teşvik etme, çevresel faktörleri kullanma becerisi, bu durumda becerilerinin geliştirilmesi fiziki ozellikleri sağlık amaçlı hava (havanın kimyasal bileşimi), insan sağlığının çevre, faktörler ve yaşam koşulları, çalışma ile ilişkisinin bilinçli bir anlayışına dayanmaktadır, bu nedenle öğrencilerin koruyucu hekimlik metodolojisine hakim olma, hijyenik olma konusunda bilgi sahibi olmaları gerekir. Habitat faktörlerinin insan sağlığı ve nüfus üzerindeki etkisini değerlendirme konusunda bilgi ve beceriler. Ders: « İç mekan mikro ikliminin sıhhi ve hijyenik değerlendirmesi (havanın kimyasal bileşimi) » Mikroiklimin temel kavramları, belirleyici ve düzenleyici faktörleri ile ilgili konuları ortaya koyar. Hijyenik gereksinimler kimyasal bileşim iç mekan havası. Göstergeler, standartlar.

Araştırma için hava örneklemesinin iki ana yöntemi vardır: 1) sedimantasyon - mikroorganizmaların mekanik çökelmesine dayanır; 2) aspirasyon - havanın aktif olarak emilmesine dayanır (bu yöntem, bakterilerin yalnızca niteliksel değil aynı zamanda niceliksel içeriğini de belirlemeyi mümkün kılar).

Sedimantasyon yöntemi

Besin ortamı (MPA) içeren Petri kapları, formu aç yatay olarak, yerden farklı seviyelerde. Yöntem, Petri kaplarındaki agarın yüzeyinde bakterilerin mekanik çökelmesine dayanmaktadır. Ortamın bulunduğu kaplar, beklenen hava kirliliğine bağlı olarak 10 ila 20 dakika süreyle açıkta bırakılır. Patojenik florayı tanımlamak için seçici ortamlar kullanılır. Bu durumlarda maruz kalma süresi 2-3 saate kadar uzatılır.Maruziyetten sonra kaplar kapatılır, laboratuvara alınır ve 24 saat boyunca 37 °C sıcaklıktaki bir termostata yerleştirilir.Ertesi gün, büyüyen koloniler incelenir. . Bu yöntem esas olarak kapalı alanlarda kullanılır.

(Aspirasyon yöntemi )

Rechmensky bakteri tuzağı. Kullanmadan önce cihaz steril soda ile doldurulur. Cihazın çalışması, bir aspiratör kullanılarak havanın içinden çekilmesine dayanmaktadır. Bu durumda cihazdaki sıvı püskürtülür. Emme işlemi bittikten sonra içinden hava geçirilen sıvıya Petri kaplarında MPA başına 0,1-0,2 ml aşılanır. Seçici ortam kullanılması gerekiyorsa tohum dozu artırılır (0,3-0,5 ml). Alıcıda elde edilen sıvı, hayvanları enfekte etmek için kullanılabilir (örneğin virüs, riketsiya vb. tanımlamak için yapılan çalışmalarda).

Dyakonov'un cihazı aynı zamanda bakterileri havanın geçtiği bir sıvı içinde hapsetmeye dayanıyor.

PAB-1 cihazı, kısa sürede büyük hacimli havanın bakteriyolojik araştırması için tasarlanmıştır. Hava numuneleri 125-150 l/dak hızla alınır. Cihazın çalışma prensibi, mikroorganizmaların zıt yüklü bir elektrot üzerinde yakalanmasına dayanmaktadır. Bu cihazdaki yüksek hızlı hava örneklemesi ve bunun çeşitli besin ortamlarına aşılanma olasılığı, patojenik ve fırsatçı bakterilerin (örneğin, cerrahi bölümlerdeki Pseudomonas aeruginosa vb.) tespiti için önemlidir.

Krotov'un aparatı. Eylem, Petri kaplarındaki ortama hava jetinin çarpması prensibine dayanmaktadır. Cihaz üç parçadan oluşur: hava örneklemesi için bir ünite, bir rotametre ve besleme mekanizmasının elektrikli bir parçası.

Test edilen hava, 4000-5000 rpm hızında dönen bir santrifüj fan kullanılarak cihazın yuvasına emilir ve ortamla birlikte açık bir Petri kabının yüzeyine çarpar. Havada bulunan mikroorganizmalar besin agarına yerleşir. Mikroorganizmaların tüm yüzeye eşit şekilde dağılması için üzerinde fincan bulunan masa döner. Hava, cihazdan çekilen havanın hızını gösteren bir rotametreye bağlanan bir hava tüpü aracılığıyla cihazdan çıkarılır.

Krotov'un cihazının dezavantajı elektriğe ihtiyaç duyması ve dolayısıyla her koşulda kullanılamaması.

Çalışmanın ilk günü

Seçilen numuneler 18-24 saat süreyle 37°C'deki bir termostata yerleştirilir.

Çalışmanın ikinci günü

Kap termostattan çıkarılır ve koloniler sayılır. Bakteriyel hava kirliliği, 1 m3'teki toplam mikrop sayısıyla ifade edilir.

Hesaplama. Örneğin 10 dakikada 125 litre hava geçti, yüzeyde 100 koloni oluştu.

Staphylococcus aureus'u belirlemek için örnek, yumurta sarısı tuzu agarında toplanır. Aşılanan kaplar 37°C'de bir termostatta 24 saat süreyle inkübe edilir ve oda sıcaklığı Pigmenti tanımlamak için. S. aureus olduğundan şüphelenilen koloniler daha ayrıntılı olarak tanımlanmalıdır (bkz. Bölüm 14).

Çocuk kurumlarında hava salmonella varlığı açısından kontrol edilir. Bunu yapmak için, bizmut-sülfit agar ortamına sahip bir tabağa hava aşılanır.

Havadaki patojen bakteri ve virüslerin tespiti kapalı tesisler epidemiyolojik endikasyonlara göre gerçekleştirilir. Tüberküloz patojenlerini tanımlamak için bir POV cihazı kullanılır; yakalama ortamı olarak Shkolnikova ortamı kullanılır.

Büyük bir grup alet ve cihaz, nesnelerden alınan numunelerdeki mikroorganizmaların yoğunlaştırılması için tasarlanmıştır. dış ortam(su, hava) ve ayrıca hastalardan alınan patolojik materyal örneklerinde.

Bilindiği gibi çevresel nesneler, patojenik mikroorganizmalarla kontamine olmaları halinde, insan ve hayvanlarda kitlesel enfeksiyon kaynağı olabilmektedir. Çevresel nesnelerde patojen mikroorganizmaların varlığını yargılamak için en güvenilir kriter bunların doğrudan tespit edilmesidir. Ancak mikrobiyolojik uygulamada kullanılan yöntemler her zaman bunun yapılmasına izin vermemektedir. Patojenik mikroorganizmaların çevresel nesnelerde tanımlanması zordur, çünkü bunların sayısı saprofitlerden çok daha azdır. Bu nedenle, besin ortamları üzerindeki antagonist etkilerden dolayı patojenik floranın büyümesi genellikle saprofitlerin büyümesiyle baskılanır. Hava gibi çevresel bir nesneyi incelerken birincil görev, içinde asılı kalan mikroorganizmaların az miktarda sıvı (besin ortamı) içindeki konsantrasyonudur.

Çevresel nesnelerin bakteriyel kontaminasyonunun önde gelen göstergelerinden biri mikrobiyal sayı göstergesidir. Bu veri sıhhi mikrobiyoloji Petri kaplarında büyüyen koloniler sayılarak ve ardından yeniden hesaplanarak kaydedilir.

Hava örnekleme yöntemlerine önemli sayıda çalışma ayrılmıştır. Önerildi çok sayıda bakteriyel aerosolleri yakalayan her türlü cihaz.

Ülkemizde seri üretime giren aeromikrofloranın incelenmesine yönelik ilk araçlardan biri Krotov cihazıydı. Seri üretiminin başlangıcından (ellili yıllar) bu yana geçen nispeten uzun süreye rağmen, cihaz, iç mekan havasının sıhhi ve bakteriyolojik durumunun incelenmesinde önemini kaybetmemiştir ve sıhhi ve bakteriyolojik uygulamalarda hala yaygın olarak kullanılmaktadır. laboratuvarlar.

Havanın bakteriyolojik analizi için cihaz(Krotov'un cihazı) (Şekil 58), altında yoğun besin ortamına sahip bir Petri kabı yerleştirmek için bir masanın bulunduğu, kapakla kapatılmış bir silindirdir. Silindirin içinde elektrik motoru, bir fincan ve kapaktaki bir yarıktan cihaza hava emen bir türbin içeren bir masayı döndürüyor. Dakikada emilen hava miktarı, şamandıralı bir akış ölçer tarafından belirlenir ve bir valf kullanılarak düzenlenir. Cihaz şebekeden güç alıyor alternatif akım voltaj 220 V. Cihazın boyutları -229X200X280 mm. Ağırlık - 8 kg.

Pirinç. 58. Havanın bakteriyolojik analizi için cihaz.
1 - rotametre valfi, 2 - rotametre; 3 - kapak kilitleri; 4 - dönen disk; 5 - kapak; 6 - disk; 7 - kama şeklindeki boşluk; 8 - gövde; 9 - taban.

Cihazın çalışmaya hazırlanması, 100 mm çapında ve 20 mm yüksekliğinde standart Petri kaplarının seçilmesi ve bunların önceden 15 ml miktarında besin ortamı ile doldurulmasından ibarettir. Besin ortamının doldurulması ve soğutulması kesinlikle yapılır yatay yüzey normal koşullar altında kurutulur.

Benzer bir cihaz daha hava örnekleyici POV-1(Şekil 59).

Pirinç. 59. Hava örnekleyici POV-1

Hava örnekleri, belirli seçici ortamların kullanılmasını ve özel (hedefe yönelik) bakteriyolojik çalışmaların yapılmasını mümkün kılan sıvı bir besin ortamına alınır.

Teknik özellikler cihaz POV-1
Kapasite............... 20 l/dak
AC gücü..... 127/220 V
Güç tüketimi.......en fazla 18 VA
Cihazın boyutları.................................170x255x285 mm
» döşeme.......................170X270X350 »
Ağırlık (ambalajlı)..................................en fazla 15 kg

Hava Örnekleme Aspiratörü Model 822 Krasnogvardeets derneği tarafından üretilen havadaki yabancı maddelerin analizi için tasarlanmıştır. Cihazın ön panelinde (Şek. 60) şunlar bulunur: cihazı ağa bağlamak için bir blok (1), cihazı açıp kapatmak için bir geçiş anahtarı (2), bir sigorta soketi (3), elektriği koruyan bir boşaltma vanası düşük hızlarda hava örnekleri alırken aşırı yükten koruyan motor 4, hava akış hızını belirlemek için rotametreler (şamandıralı koni cam tüpler) 5, örnekleme hızını ayarlamak için rotametre valf kolları 6, paneli cihaz kasasına sabitlemek için vidalar 7, bağlantı parçaları lastik boruları filtrelere 8 ve cihazı 9 topraklamak için bir terminale bağlamak için.

Pirinç. 60. Hava örneklemesi için aspiratör. Metindeki açıklamalar.

İncirde. 61 gösterildi Genel form filtre tutuculu aspiratör.

Numune alma, havanın özel filtrelerden belirli bir hızda emilmesiyle gerçekleştirilir. Filtrelerden geçen hava, içerdiği yabancı maddeleri geride bırakır. Hava hızını ve geçiş süresini bilerek, filtreden geçen havanın hacmini belirleyebilirsiniz. Filtre üzerindeki yabancı maddelerin miktarını belirleyerek birim hava hacmindeki yabancı madde miktarını hesaplayabilirsiniz.

Hava örnekleme aspiratörü Fransız Baudard şirketi tarafından üretildi. Aspiratör, aspiratörden belirli bir hacimde hava emildikten sonra kolayca çıkarılabilen ve çalışmanın amacına bağlı olarak bakteriyolojik olarak (filtreyi mikroorganizmalarla inkübe ederek) incelenen, ince gözenekli filtreleri güçlendirmek için bir cihaza sahip sızdırmaz bir aparattır. besin ortamında) veya mikroskobik olarak (filtre tarafından tutulan parçacıkların yapısının belirlenmesi, sayıları vb.).

Kullanılan ince gözenekli filtreler kağıt veya fiberglas olabilir. Filtrelerin çapı 110 mm'dir.

Santrifüj fanın iki hızı vardır ve 220 V şebeke voltajından güç sağlamak için tasarlanmıştır; motor gücü - 50 W; aspiratör verimliliği - kullanılan ince gözenekli filtrenin direncine bağlı olarak 360 ila 1000 l/dak.

Su ve diğer çevresel nesnelerin (toprak) yanı sıra insan ve hayvanların biyolojik sıvılarını (balgam, eksüdalar ve transüdalar) patojenik floranın varlığı açısından incelerken, hava çalışmasında olduğu gibi, küçük bir hacimde mikroorganizmaların ön konsantrasyonu Daha sonra bakteriyolojik incelemeye (mikroskopi, kültür, biyokimyasal ve serolojik reaksiyonlar vb.) tabi tutulan bir besin ortamı gereklidir.

Pirinç. 61. Filtre tutuculu aspiratör.

Bununla birlikte, mikroorganizmaların çevresel nesnelerden konsantre edilmesine yönelik yöntemler alanında ilerleme azdır ve çoğu kısım için kendilerini temsil eden eski yöntemlerle sınırlamak zorundalar. çeşitli yollar tasarruf:
- biriktirme mekanik yollarla- filtreleme, santrifüjleme, suyun buharlaştırılması;
- çeşitli pıhtılaştırıcılar kullanılarak fiziksel ve kimyasal yöntemlerle mikropların çökeltilmesi;
- flotasyon yöntemiyle mikropların konsantrasyonu;
- spesifik aglütinasyon serumları ile mikropların çökeltilmesi;
- Mikroorganizmaların konsantre edilmesi için çökeltme yöntemlerinin ardından besin ortamına ekim veya duyarlı bir laboratuvar hayvanının enfeksiyonunun kombinasyonundan oluşan kombine yöntemlerin kullanılması.

Mikroorganizmaların konsantre edilmesine yönelik yeni yöntemler, belirli fiziksel prensiplerin uygulanmasına dayanmaktadır. Böyle bir fiziksel prensip elektroforezdir. Bu yöntemin kullanılması, bir mikrobiyal hücrenin, harici bir etki altında sıvı bir ortamda bulunan elektrotlardan birine hareket etmesini sağlar. elektrik hareket gücü(EMF). Bu prensip EFM-1 cihazının temelini oluşturur (Şekil 62). Cihaz, küçük bir hacimde izole edilmiş sıvı (0,01-0,02 ml) içinde pozitif veya negatif yüzey yüküne sahip mikrobiyal hücreleri konsantre etmenize olanak tanır.

Pirinç. 62. Mikobakteri EFM-1'in elektroforezi için cihaz.

Su çalışmalarına ek olarak cihaz, gıda ürünlerinin sulu süspansiyonları, çeşitli yıkamalar vb. üzerinde bakteriyolojik çalışmalar için de kullanılabilir. Cihaz aynı zamanda gıda ürünlerindeki mikroorganizmaları tespit etmek için de kullanılabilir. çeşitli malzemeler hastalardan elde edilen, özellikle beyin omurilik sıvısı, bronşiyal ve mide lavajları, her türlü punktat ve idrar gibi materyallerde Mycobacterium tuberculosis'in tespiti için kullanılır. Tuzlu su içinde Mycobacterium tuberculosis süspansiyonundan hazırlanan ve elektroforetik konsantrasyona tabi tutulan yaymalarda, mikrobiyal hücre sayısı, doğal materyalden alınan yaymalara kıyasla 10-15 kat artar.

Cihaz, 12 ml kapasiteli 20 adet kırılmaz küvet, elektrotlar ve pipetlerden oluşan bir aksesuar seti ile donatılmıştır. Cihaz, 220 V± %10, 50 Hz'lik bir AC voltajından güç alır. Güç tüketimi - en fazla 20 W. Boyutlar - 405X165X205 mm. Cihazın aksesuar seti ile birlikte ağırlığı 6 kg'dır.

Cihazın çalışma prensibi. Cihazla birlikte verilen özel küvetlere 10 ml test materyali dökülür. Grafit elektrotun yerleştirildiği bir pipet, bir kelepçe tutucu kullanılarak her küvetin üzerine sabitlenir. Test edilen sıvının bir kısmı pipetin kılcal damarı boyunca 4-5 mm yükselir ve elektroda temas eder. Çalışmanın amacına bağlı olarak uygulanan EMF'nin polaritesi belirlenir. Elektroforezin 1-3 saat süreyle yapılması tavsiye edilir.

Akım kapatıldıktan sonra, kılcal damardan gelen sıvı, lastik bir balon kullanılarak bir damla serum (1:10 oranında seyreltilmiş normal at veya tavşan serumu) içine sıkılır, daha önce bir cam slaytın yüzeyine uygulanır ve bir cam slaytla iyice karıştırılır. Kapalı bir Pasteur pipeti ile preparat kurutulur, bir bek alevi üzerinde sabitlenir ve Gram, Ziehl - Nielsen veya başka bir yönteme göre boyanır.

Teşhis hatası olasılığını ortadan kaldırmak için tüm manipülasyonlar dikkatlice işlenmiş küvetler, pipetler ve cam slaytlarla gerçekleştirilir. Grafit elektrotlar her çalışmadan sonra değiştirilmelidir.

Boya ve asit çözeltileri bakteriyolojik olarak dikkatle test edilmelidir.

Kiev tesisinde yetiştirilen mikrobiyal kolonilerin sayımının doğruluğunu artırmak tıbbi malzeme Bakteri kolonilerini saymaya yönelik bir cihaz üretiliyor. Kolonileri elektrikli kalemle saymak için kabın alt kısmında her koloninin bulunduğu yerde noktalar işaretlenir, elektrikli kalemin kontakları kapalıdır ve sayaca gelen elektrik darbesi bir sayım üretir. Dış görünüş Cihaz Şekil 2'de gösterilmektedir. 63.

Pirinç. 63. Koloni sayma cihazı.

Kapalı bir kaptaki koloni sayısını saymak için, kabın arkasını işaretlemek için bir kurşun kalem veya tükenmez kalem kullanılır, bu da aynı koloninin iki kez sayılması olasılığını ortadan kaldırır.

Bactronic besin ortamındaki kolonileri saymak için evrensel sayaç açık plakalardaki kolonilerin sayısını saymak için elektronik bir uçla donatılmıştır. Uç, herhangi bir agar ortamıyla temas ettiğinde elektromanyetik bir sayma mekanizmasını etkinleştirir ve ortamın yüzeyinde bir iz bırakır.

Bu cihaz, diğer sistemleri kullanırken meydana gelen elektrik boşalmalarını ortadan kaldırır.

Seyrek büyüme gösteren plakalardaki koloni sayısını sayarken gösterge panelindeki butonu, gerekiyorsa uzaktan kumandayı kullanabilirsiniz. basmalı düğme anahtarı bu da işi kolaylaştırır.

Millipore şirketi özel bir ürün üretiyor mikrobiyolojik araştırma için çanta. Esasen taşınabilir bir laboratuvar olan bavul (Şekil 64), her şeyi sağlar. gerekli malzemeler suyun bakteriyel kontaminasyonunu araştırmak, hava ve topraktaki mikroorganizmaları tespit etmek, sıcaklığı ve bakteri üremesini izlemek, sudaki maya mantarlarını tanımlamak için ekipman ve ekipman çevre mayadan gaz oluşumu, dezenfektanların etkinliğinin belirlenmesi vb.

Pirinç. 64. Mikrobiyolojik çalışmalar için saklama kutusu.

Gıda ürünlerinin kalitesini belirlemek, lüminoskop LPK-1. Onun yardımıyla et türünü, domuz eti ve domuz yağının erken bozulmasını, oranını belirleyebilirsiniz. bileşenler kıyma, yenilebilir sıvı ve katı yağların, bal ve diğer ürünlerin incelenmesi (Şek. 65).

Cihaz görsel ışıldayan analiz prensibini kullanır. Etkisi altında ultraviyole ışınlar Gıda ÜrünleriÖzelliklerine ve kalitelerine bağlı olarak farklı renklerde parlamaya başlarlar ve ışık filtreleri spektrumun ilgili kısımlarını vurgular. Cihazla çalışırken odayı karartmaya gerek yoktur, araştırmacı ultraviyole ışınlarına maruz kalmaktan korunur.

Cihazın çalışma modu aralıklıdır. Çalışma süresi - 1 saat, duraklama - 25 dakika. Ürün araştırması 1 dakikadan fazla sürmez. Cihaz AC şebekesinden güç alır - 220 V±%10. Güç tüketimi - en fazla 350 W. boyutlar- 366X185X240 mm. Ağırlık - 6 kg.

Pirinç. 65. LPK-1 ürünlerinin kalitesini belirleyen cihaz.

Havanın sıhhi ve mikrobiyolojik muayenesi bölünebilir 4 aşamada:

1) örnekleme;

2) numunelerin işlenmesi, taşınması, depolanması, mikroorganizmaların konsantresinin elde edilmesi (gerekirse);

3) bakteriyolojik tohumlama, mikroorganizmaların yetiştirilmesi;

4) izole edilmiş kültürün tanımlanması.

Örnek seçimi:

Doğru örnekleme çalışmanın doğruluğunu sağlar. Kapalı alanlarda numune alma noktaları zarf gibi her 20 m2 alan için bir hava numunesi alınacak şekilde ayarlanır: odanın köşelerinde 4 nokta (duvarlardan 0,5 m uzaklıkta) ve 5. nokta Merkez. Hava örnekleri, konutlarda nefes alma seviyesinde yerden 1,6-1,8 m yükseklikte alınır. Numuneler gün içinde (aktif insan faaliyeti dönemlerinde), ıslak temizlik ve odanın havalandırılmasından sonra alınmalıdır. atmosferik hava kirlilik kaynaklarının yakınında yerden 0,5-2 m yükseklikte bir yerleşim bölgesinde ve ayrıca yeşil alanlarda (parklar, bahçeler vb.) hava mikroflorası üzerindeki etkilerini değerlendirmek için incelenir.

Hava örnekleri alınırken çoğu durumda bunun bir besin ortamına aşılandığı unutulmamalıdır.

Tüm hava örnekleme yöntemleri sedimantasyon ve aspirasyon olarak ikiye ayrılabilir.

sedimantasyon- en eski yöntem Basitliği ve kullanılabilirliği nedeniyle yaygın olarak kullanılmaktadır ancak kesin değildir. Yöntem, R. Koch tarafından önerilmiştir ve yerçekiminin etkisi altında ve hava hareketinin etkisi altında (toz parçacıkları ve aerosol damlacıkları ile birlikte) mikroorganizmaların açık Petri kaplarındaki besin ortamının yüzeyine yerleşme yeteneğinden oluşur. Kaplar yatay bir yüzey üzerindeki numune alma noktalarına yerleştirilir. Toplam mikrobiyal kontaminasyonu belirlerken, et pepton agarlı plakalar, şüpheli bakteriyel kontaminasyonun derecesine bağlı olarak 5-10 dakika veya daha uzun süre açık bırakılır. Hijyenik gösterge mikropları tanımlamak için Garro veya Turzhetsky besiyerini (streptokokları tespit etmek için), süt tuzu veya yumurta sarısı tuzu agarını (stafilokokları tespit etmek için), wort agar veya Sabouraud besiyerini (mayaları ve mantarları tespit etmek için) kullanın. Hijyen göstergesi mikroorganizmaların belirlenmesinde kaplar 40-60 dakika kadar açık bırakılır.

Maruziyetin sonunda, tüm kaplar kapatılır, izole edilen mikroorganizmanın gelişimi için en uygun sıcaklıkta yetiştirme için bir gün boyunca bir termostata yerleştirilir, daha sonra (araştırma gerektiriyorsa) oluşum için oda sıcaklığında 48 saat bırakılır. Pigment oluşturan mikroorganizmalar tarafından pigmentin yok edilmesi.

Sedimantasyon yönteminin bir takım dezavantajları vardır: aerosolün yalnızca kaba kısımları ortamın yüzeyine yerleşir; koloniler genellikle tek bir hücreden değil, bir mikrop kümesinden oluşur; Kullanılan besin ortamında hava mikroflorasının yalnızca bir kısmı büyür. Ek olarak, bu yöntem atmosferik havanın bakteriyel kirliliğini incelemek için tamamen uygun değildir.

Daha gelişmiş yöntemler ise aspirasyon Mikroorganizmaların havadan yoğun bir besin ortamının yüzeyine veya bir tutucu sıvıya (et-pepton suyu, tampon çözeltisi, izotonik sodyum klorür çözeltisi vb.) zorla birikmesine dayanır. Uygulamada sıhhi hizmet Aspirasyon örnekleri alırken, bir Krotov cihazı, bir Rechmensky bakteri tuzağı, bir hava örnekleme cihazı (POV-1), bir aerosol bakteriyolojik örnekleyici (PAB-1), bir bakteriyel-viral elektro-çöktürücü (BVEP-1), bir Kiktenko cihazı, Andersen , Dyakonov, MB cihazları kullanılır. vb. Atmosferi incelemek için, Seitz aparatı kullanılarak havanın emildiği 4 numaralı membran filtreleri de kullanılabilir. Aletlerin çok çeşitli olması, evrensel bir aygıtın bulunmadığını ve bunların az ya da çok kusurlu olduğunu gösterir.

Krotov'un cihazı.Şu anda, bu cihaz iç mekan havasının incelenmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır ve laboratuvarlarda mevcuttur.

Krotov'un aparatı

Krotov aparatının çalışma prensibi (Şekil 22), aparatın kapağındaki kama şeklindeki bir yarıktan emilen havanın, toz ve aerosol parçacıkları yapışırken besin ortamının yüzeyine çarpması gerçeğine dayanmaktadır. ortama ve onlarla birlikte havadaki mikroorganizmalara.

Bakteriyel-viral elektro çökeltici (BVEP-1). Cihaz, aspirasyon-iyonizasyon çalışma prensibine dayanmaktadır. BVEP-1, içine elektrotların monte edildiği bir çökeltme odasından oluşur: içinden havanın girdiği (ve aerosol parçacıkları buna göre negatif olarak yüklenir) bir öncü tüp şeklindeki negatif ve üzerine bakterilerin yerleştiği pozitif bir oda.

MB cihazı. Bu cihaz sadece genel mikrobiyal kontaminasyonu belirlemeye değil, aynı zamanda çeşitli boyutlarda aerosol parçacıkları içeren hava örnekleri almaya da yarar. MB cihazı “elek” prensibi üzerine inşa edilmiştir ve her biri üzerine MPA'lı Petri kaplarının yerleştirildiği 6 yatay şeride bölünmüş bir silindirdir. Hava, deliklerin en büyük olduğu plakadaki üst aşamadan başlayarak emilir ve aşama ne kadar düşük olursa delikler o kadar küçük olur (ikincisinden yalnızca hava aerosolünün ince fraksiyonları geçer). Cihaz, boyutu 1 mikrondan büyük olan aerosol parçacıklarını, 30 l/dakika hava örnekleme hızında yakalayacak şekilde tasarlanmıştır. Delik sayısının azaltılması, besin ortamı boyunca havadan aerosolün daha düzgün bir şekilde dağılmasını sağlar. Daha da küçük aerosol parçacıklarını yakalamak için AFA filtre malzemesinden yapılmış ilave bir filtre ekleyebilirsiniz.

Listelenen cihazlardan herhangi birini kullanırken elde edilen sonuçlar yaklaşıktır, ancak sedimantasyon yöntemiyle karşılaştırıldığında hava kirliliğinin daha doğru bir şekilde değerlendirilmesini sağlarlar. Havanın hem numune alınması hem de sıhhi-mikrobiyolojik çalışmaları GOST tarafından düzenlenmediğinden, bakteriyel hava kirliliğini değerlendirmek için herhangi bir cihaz kullanılabilir. Çoğu durumda örnekleme aşılama aşamasıyla birleştirilir.

Kapalı alanların havasındaki mikroorganizma sayısını azaltmak için aşağıdaki yöntemler kullanılır: a) kimyasal - ozon, nitrojen dioksit ile işlem, laktik asit püskürtme, b) mekanik - havanın özel filtrelerden geçirilmesi, c) fiziksel - ultraviyole ışınlama.

Sayfa 87 / 91

Hava mikroflorasının niceliksel ve özellikle niteliksel bileşimi sıhhi gösterge hava kirliliği derecesi.
Havanın saflık derecesini değerlendirmek için A.I. Shafir aşağıdaki kriterleri önerdi. Havalandırılmayan yerleşim alanlarında yaz saati 1 m3 havadaki toplam mikroorganizma sayısı 1500'den az, viridans ve hemolitik streptokok sayısı 16'dan az ise hava temiz, 2500'den fazla mikroorganizma ve 36'dan fazla streptokok içeriyorsa kirli kabul edilebilir. Kış aylarında doğal olarak odalardaki mikroorganizmaların sayısı önemli ölçüde artmaktadır. Buna göre. A. I. Shafir, temiz hava toplam mikrop sayısı 4500'den az ve streptokoklar 1 m3 başına 36'dan az olacaktır; kirli olanlar için - toplam mikrop sayısı 7000'den fazla ve streptokoklar 124'ten fazla olacaktır.
Hava saflığının derecesini belirlemek için aşağıdaki mikrobiyolojik araştırma yöntemleri kullanılır.

1. Hava jetinin darbe etkisi prensibine dayanan bir yöntem.
2. Sedimantasyon yöntemi.

Herhangi mikrobiyolojik yöntem Hava araştırması, hem belirli bir hava hacmindeki toplam mikroorganizma sayısını hem de bunların niteliksel bileşimini dikkate alır. Ayrı olarak aerobik ve anaerobik mikroflora dikkate alınır.
Havadaki aerobik saprofitleri tanımlamak için et-pepton agar üzerinde aşılama yapılır ve streptokok ve stafilokok varlığının test edilmesi sırasında hava özel ortamlara (şeker agar, kan agar) aşılanır. Stafilokok ve streptokokları izole etmek ve saymak için,% 3 defibrine koyun kanı,% 0,25 glikoz ve yılan otu 1: 50.000-1: 500.000 ilavesiyle et-pepton agar da kullanılır.
Anaerobik mikropların varlığını test etmek için hava, bir demir sülfit ortamına (Wilson-Blair ortamı) aşılanır. Bu ortam şu şekilde hazırlanmıştır. Eritilmiş ve daha sonra 80° alkali et-pepton agara soğutulmuş 100 ml'ye %1 steril glukoz, 10 ml %20 sodyum sülfat ve 1 ml %8 ferrik klorür çözeltisi eklenir. Steril damıtılmış su içinde bir ferrik klorür çözeltisi hazırlanır. Bir sodyum sülfat çözeltisi, akan buharla 1 saat süreyle sterilize edilir.
Şok jeti prensibine göre havayı incelemek için bir yöntem. Şok jet yöntemiyle havayı incelemek için bir dizi cihaz önerilmektedir. Sovyet bilim adamı Yu A. Krotov tarafından tasarlanan cihazın diğerlerine göre bir avantajı var (Şekil 124, 125).
Krotov'un aparatı tek bir kutuya monte edilmiştir ve üç parçadan oluşur: 1) hava örneklemesi için bir ünite; 2) mikromanometre; 3) ahşap bir kutuya (elektrikli parça) yerleştirilmiş bir besleme mekanizması.

Cihaz hem 127 V hem de 220 V'a bağlanabiliyor ve özel bir anahtar ve reostat kullanılarak cihazdan geçen hava akımının hızı ayarlanabiliyor. Krotov aparatını kullanarak 1 dakika içinde 25 ila 50 litre havayı geçirebilirsiniz. Krotov aparatının etki mekanizması aşağıdaki gibidir. Test edilen hava, 4000-5000 rpm hızında dönen bir santrifüj fan kullanılarak, cihaz kapağındaki boşluktan enerjik bir şekilde emilir ve besin agarıyla doldurulmuş ve küçük bir pervane diski üzerine monte edilmiş açık bir Heidenreich kabının yüzeyine çarpar. Havada bulunan mikroorganizmalar Heidenreich plakasının besin agarına yerleşir.

Pirinç. 124. Krotov'un cihazı mikrobiyolojik araştırma hava (genel görünüm).

Şekil: 125. Krotov'un havanın mikrobiyolojik araştırması için cihazı (diyagram).
1 - silindirik gövde; 2 - vücudun tabanı; 3 - elektrik motoru; 4 - santrifüj fanı; 5 - sekiz kanatlı pervane; 6 - disk; 7 - yaylar; 8 - Heidenreich kupası; 9 - kapaklar; 10 - kapak kilitleri; 11 - pleksiglas disk; 12 - kama şeklindeki boşluk; 13 - bölünmüş halka; 14 - diyaframla bağlantı; 15 - çıkış borusu.

Mikroorganizmaların bardağın tüm yüzeyine eşit dağılımını sağlamak için, bardağın bulunduğu tabla çok hızlı dönmemelidir (60 rpm). Hava, cihazdan hava geçiş hızını gösteren bir mikromanometreye bağlı bir hava tüpü aracılığıyla cihazdan çıkarılır. Bardak 10 dakika süreyle açıkta bırakılır, ardından motor durdurulur. Cihazın kapağını çıkarın. Hava aşılı bir bardak çıkarın ve bir kapakla kapatın. Sonra bunu yapıyorlar. Aerobik florayı belirlerken, aşılamalı bir Heidenreich kabı 24 saat boyunca 37° sıcaklıktaki bir termostata yerleştirilir ve ardından 24 saat boyunca oda sıcaklığında bırakılır ve agar yüzeyinde büyüyen tüm koloniler sayılır. Daha sonra kap 24 saat daha oda sıcaklığında bırakılır, ardından (ekim anından itibaren 72 saat sonra) farklılaştırılmış bir sayım yapılır, yani pigment formları, spor taşıyan formlar ve küfler ayrı ayrı dikkate alınır.
Anaerobik mikroorganizmaların sayısını belirlemek için, Krotov cihazından çıkarılan aşılama plakası, mikropların büyümesi için anaerobik koşullar oluşturmak üzere ek olarak 10-15 ml et-pepton agar ile doldurulur ve 37 ° C sıcaklıkta bir termostata yerleştirilir. ° 24 saat süreyle.
Ekimden önce kabın doldurulduğu sülfit agarda, anaerobik mikroplar kararmış koloniler şeklinde büyüyecek ve bunların sayısına göre anaerobik mikroplar tarafından hava kirliliğinin derecesi değerlendirilebilecektir.
Bakteriyel hava kirliliği 1 m3'teki toplam mikrop sayısıyla ifade edilir.
Örnek. Krotov'un aparatından 10 dakikada 125 litre hava geçirildi ve besiyerinin yüzeyinde 100 koloni gelişti.
1 m3 havadaki mikrop sayısı
Hava araştırmasının sedimantasyon yöntemi (fincan yöntemi). Sedimantasyon yöntemi en çok basit yöntem hava mikroflorasını incelemek için, her ne kadar büyük bir doğruluğa sahip olmasa da.
Aynı maruz kalma süresi boyunca aynı çaptaki kaplar kullanılırsa, bu yöntem bakteriyel hava kirliliğine ilişkin karşılaştırmalı veriler elde etmek için kullanılabilir. Bu yöntemin tekniği aşağıdaki gibidir. Dondurulmuş agarlı Heidenreich-Petri kapları açık olarak yerleştirilir. farklı yükseklikler kapalı alanda farklı terimler(15 dakikadan itibaren
1,5 saate kadar). Daha sonra kaplar kapatılarak termostata yerleştirilir. Mahsullerin inkübasyonu yukarıda açıklanan yönteme göre gerçekleştirilir.
1 m3 başına mikrop sayısını yeniden hesaplamak için, 10 dakikalık maruz kalma sırasında, 10 litre havadaki kadar mikropun 100 cm2'lik yoğun bir besin ortamının yüzeyine yerleştiğine inanan V.L. Omelyansky'nin formülünü kullanın. . 1 m3 havadaki toplam mikroorganizma sayısını hesaplayabileceğiniz ilgili bir hesaplama tablosu derledi. Bu tablo, aşılamanın gerçekleştirildiği kabın çapına ve alanına bağlı olarak, ortaya çıkan koloni sayısının çarpılması gereken sabit faktörleri verir. Omelyansky'ye göre mikrop sayısını hesaplamak için sabit çarpanların bir diyagramını sunuyoruz (Tablo 34).
Tablo 34
1 m3 havadaki mikrop sayısının hesaplanması (Omelyansky'ye göre)

Örnek. 63 cm2'lik bir tabakta 25 koloni gelişti. Bu durumda 1 m3 havadaki mikrop sayısı 25X80=2000 olur.