Havanın adım adım laboratuvar çalışması nasıl oluşturulur? Havanın sıhhi ve bakteriyolojik muayenesi. Havanın mikrobiyolojik çalışmaları

Sıhhi ve mikrobiyolojik açıdan hava, içermediği için mikroorganizmaların çoğalamadığı bir ortamdır. besinler ve nem ve güneş ışınlarının bakterisit etkisi vardır. Bununla birlikte, pigment oluşturan koklar, bakteri sporları, küfler ve aktinomisetler havada sürekli olarak bulunur. Mikrobiyal hava kirliliği kararsızdır ve birçok faktöre bağlıdır. Böylece patojenik mikroplar, topraktan çıkan tozlarla ve hasta insan ve hayvanların salgılarıyla havaya karışır. Kuru temizleme, hapşırma ve öksürme sırasında iç ortam havası kirlenir. Aynı zamanda, havadaki aerosol damlacıkları, başkalarının aerojenik kontaminasyonu için bir kaynak görevi görür. Damlacık çökelme hızı aerosol çapına bağlıdır.

Bakteriyel aerosoller üç faza ayrılır:

1. Kaba damlacık fazı 0,1 mm'den daha büyük bir aerosol parçacık çapına sahip; bu tür parçacıkların havada kalma süresi birkaç saniyedir, damlacıklar hızla yerleşir.

2. Nükleer fazı bırak 0.1 mm veya daha küçük bir parçacık çapına sahip olan. Parçacıklar havada uzun zaman ve patojenler de dahil olmak üzere çeşitli mikroorganizmaların yayıldığı hava akımlarıyla uzun mesafelere dağılır.

3. Bakteriyel Toz Aşaması 1 ila 0,01 mm arasında farklı çaplarda parçacıklara sahiptir. Bu faz en büyük epizootolojik ve epidemiyolojik önemi derinlere nüfuz ettikçe hava yolları. Bulaşıcı hastalıklar çoğunlukla kapalı alanlarda aerojenik yöntemle bulaşır.

Süspansiyonda patojenik mikroorganizmaların hayatta kalması şunlara bağlıdır: biyolojik özellikler patojenin yanı sıra sıcaklık ve nem. Örneğin, kurumayı iyi tolere eden tüberküloza neden olan şarbon, çevrede uzun süre kalır.

MAFAnM miktarını, yani toplam mikrobiyal sayıyı ve sıhhi-endikatif mikroorganizmaların sayısını belirlemek için havanın mikrobiyolojik bir çalışması yapılır. Havadaki MAFAnM miktarı, MPA'nın yüzeyinde aşılama ile belirlenir; sıhhi göstergeli mikropların sayısı, kanlı agar, yumurta sarısı-tuzlu agar üzerine aşılama ile belirlenir. Küf ve maya sporlarının varlığını belirlemek için wort_agar veya Sabouraud ve Czapek besiyeri kullanılır. birçok yöntem var bakteriyolojik araştırma hava, en erişilebilir olanlar Koch ve Krotov'un yöntemleridir.

Koch sedimantasyon yöntemi(lat. tortu - tortu). Yöntemin özü, mikrobiyal parçacıkların birikmesi ve yerçekimi etkisi altında yoğun bir besin ortamının yüzeyine aerosol damlaları.

Metodoloji. MPA, Saburo besiyeri içeren petri kapları, test odasında (sınıfta, bir süt fabrikasının atölyelerinde, bir et işleme tesisinde, vb.) 5-20 dakika açık bırakılır. Daha sonra kaplar kapatılır ve MPA veya kanlı agar ise +30_C sıcaklıktaki termostata yerleştirilir ve ardından 48 saat kültüre edilir; Sabouraud's besiyeri ise +25_С sıcaklıkta 4–7 gün boyunca yetiştirilir. Daha sonra tüm kapta yetişen kolonilerin hesaplamasını yapın.

Bir Petri kabında üreyen koloniler sayıldıktan sonra, 1 m3 havadaki mikroorganizmaların sayısı, 10 litre havada bulundukları kadar çok sayıda mikrobiyal hücrenin 100 cm2 alana sahip bir besin ortamına sahip tabaklara 5 dakika içinde yerleştiği Omelyansky formülüne göre belirlenir:

X \u003d bir * 100 * 1000 * 5 / b * 10 * T

Nerede X- 1 m3 (1000 l) havadaki mikrop sayısı; A- kaplardaki büyümüş kolonilerin sayısı; B- fincan alanı (80 cm2); 5 - Omelyansky kuralına göre maruz kalma süresi; T- bardağın açık olduğu süre; Omelyansky kuralına göre 10 - 10 litre hava; 1000 - 1 m3 hava; 100 -100 cm2 besin ortamı.

Krotov'un aspirasyon yöntemi Cihaz, ekilen havanın litre sayısını (hacmini) gösteren bir mikromanometre ile donatıldığı için daha doğrudur. Krotov'un aparatı, içinde santrifüj fanlı bir elektrik motorunun bulunduğu silindirik bir cihazdır. Fan döndüğünde, altında Petri kabı bulunan dönen bir platformun bulunduğu cihazın kapağındaki kama şeklindeki dar bir yarıktan test odasından hava emilir, hava akımı besin ortamının nemli yüzeyine çarpar ve havadaki mikroorganizmalar yerleşir. Ekinli kaplar, +30_C sıcaklıkta 24–48 saat termostata yerleştirilir. Koloniler sedimantasyon yönteminde olduğu gibi sayılır. Gelecekte 1 m3 havadaki mikrop sayısı formülle belirlenir.

Nerede X- 1 m3 havadaki mikrop sayısı; A- büyümüş kolonilerin sayısı; 1000 l - 1 m3 hava; B- ekilen hava miktarı.

Havanın mikrobiyolojik parametreleri için gereksinimler Tablo'da sunulmuştur. 19 (ayda bir incelenir).

Her bakteriyolojik laboratuvarın tohumlama ve yeniden tohumlama için bir kutusu vardır, kutudaki hava bakteriyel kontaminasyon açısından haftada en az iki kez kontrol edilmelidir, kutudaki havanın kalitesine özel gereksinimler getirilir. Çalışmayı gerçekleştirmek için MPA ve Sabouraud ortamı içeren petri kapları kutuda 15 dakika açık bırakılmış, ardından MPA ortamı olan kaplar +37_C sıcaklıkta 48 saat, Sabouraud ortamı bulunan kaplar - 96 saat +25...+27_C sıcaklıkta bir termostatta tutulmuştur. Kaplarda 5 küf kolonisine izin verilir.

Aerobiyoloji alanındaki araştırmaların gelişimi, havada olduğunu göstermiştir. kapalı mekanlarçok sayıda saprofitik mikroorganizmanın yanı sıra patojenik bakteri ve virüsler bulunabilir; meningokoklar, patojenik stafilokoklar, difteri patojenleri, tüberküloz, boğmaca, grip virüsleri, çiçek hastalığı, adenovirüsler, vb. Havanın sıhhi ve bakteriyolojik incelemeleri kreşlerde ve anaokullarında, hastanelerde, ameliyathanelerde, eczanelerde, okullarda, sinemalarda rutin olarak yapılmaktadır. Atmosferik hava da incelenir.

Havanın sıhhi-bakteriyolojik muayenesi sırasında aşağıdakiler gerçekleştirilir:

1) havanın toplam bakteriyel kontaminasyonunun belirlenmesi (1 m3'teki toplam bakteri sayısı);

2) saiter-belirleyici mikroorganizmaların saptanması;

3) salgın endikasyonlara göre, virüslerin ve patojenik bakterilerin iç ortam havasından izolasyonu;

4) atmosferik hava çalışmasında ek tanım toprak mikroorganizmaları tarafından hava kirliliğinin bir göstergesi olarak hizmet eden spor oluşturan aerobların ve anaerobların varlığını dikkate alarak mikrofloranın kalitatif bileşimi.

Bakteriyolojik inceleme için hava örnekleme yöntemleri şu şekilde ayrılır:

1) çeşitli cihazlar kullanılarak aktif hava emilmesine dayalı aspirasyon;

2) mikropların mekanik olarak çökelmesi ilkesine dayanan sedimantasyon.

Hava örnekleri oturan veya oturan seviyesinden alınır. ayakta adam, her 20 m 2 alan için bir örnekleme noktası tahsis edilir.

Aspirasyon yöntemleri hem iç mekan hem de atmosferik havanın incelenmesinde kullanılır. Son yıllarda, dakikada 25 ila 50 litre havanın geçişine izin veren Krotov aparatı (Şekil 44) en yaygın şekilde kullanılmaktadır. Krotov aparatında hava, cihazın kapağındaki dar bir yarıktan emilir ve hareketli bir masa üzerinde yavaşça dönen bir Petri kabı içindeki yoğun bir besin ortamının yüzeyine çarpar. Besleyici ortamın yüzeyi, mikroorganizmalarla eşit şekilde tohumlanmıştır.

Başka cihazlar da var: POV-1, havanın pompalar, üfleyiciler, aspiratörler yardımıyla bakteriyel aerosolü yakalayan bir malzemeden emildiği Rechmensky ve Dyakonov bakteri tuzağı. Böyle bir malzeme olarak, steril su, besleyici ortam, steril bir pamuklu çubuk, çözünür malzemelerden köpük veya toz filtreler kullanılır. Emilen havanın hacmi bir gaz saati kullanılarak ölçülür. Örneklemeden sonra, toplam bakteri sayısını belirlemek için 1 ml sıvı bir beef-pepton agar plakasına aşılanır. 37°C'de bir termostatta 24 saatlik inkübasyondan sonra koloni sayısı sayılır ve 1 m3 havaya dönüştürülür. Sıhhi-endikatif mikroorganizmaları ve patojenik mikropları belirlemek için, çeşitli seçmeli ortamlarda mahsuller yapılır.

Sedimantasyon yöntemi en eskisidir (Koch'un sedimantasyon yöntemi). Sadece iç mekan havasının çalışmasında kullanılır. Bunu yapmak için, genel bakteriyel hava kirliliği çalışmasında besin ortamlı Petri kapları, örnekleme alanlarında 5-10 dakika açık bırakılır. Maruz kalmanın sonunda kaplar gömülür ve 24 saat 37°C'deki bir termostata yerleştirilir ve ardından oda sıcaklığı bir gün daha sürer. Hava kirliliğinin derecesi, büyüyen kolonilerin sayısına göre değerlendirilir. Hataya rağmen, bu yöntem hava saflığının karşılaştırmalı değerlendirmeleri için uygundur.

Şu anda, havanın bakteriyolojik muayenesi esas olarak hastanelerde “Hastanelerde ve profilaktik kurumlarda bir dizi sıhhi ve hijyenik önlemin bakteriyolojik kontrolüne ilişkin talimatlar: cerrahi bölümler, servislerde ve yoğun bakım ünitelerinde ve yoğun bakım ünitelerinde” (SSCB Sağlık Bakanlığı'nın 31 Temmuz 1978 tarihli ve 720 sayılı Emrine Ek) göre yapılmaktadır. Toplam bakteriyel kontaminasyonu ve Staph, aureus varlığını belirleyin.

İç havanın toplam bakteriyel kontaminasyonunu belirlemek için, talimatlara göre, her biri 100 litre olan Krotov aparatı kullanılarak iki hava örneği alınır.

Havada stafilokok varlığının araştırılması için, 250 litre hava geçirilerek sarı-tuz agar veya süt-sarısı-tuz agar ile iki plaka üzerinde hava örnekleri alınır.

Havanın sıhhi ve bakteriyolojik muayenesi büyük önem hastanelerin cerrahi bölümlerinde, nozokomiyal enfeksiyon riskinin olduğu doğum hastanelerinde. Bu bölümlerde Staph, aureus tespiti kabul edilemez. Belirli faj tiplerinin Staph, aureus sayısındaki artış, olası bir nozokomiyal enfeksiyonun ortaya çıkmasının korkunç bir habercisi olarak düşünülmelidir.

İç havadaki virüslerin ve patojenik bakterilerin tespiti, sıhhi ve mikrobiyolojik içeriği izlerken hava dezenfeksiyonunun etkinliğini değerlendirirken epidemiyolojik göstergelere göre gerçekleştirilir. hastane tesisleri vesaire.

Mikobakteri tüberkülozunu saptamak için, yakalama ortamı olarak Shkolnikova ortamının kullanıldığı POV-I cihazı kullanılarak örnekleme yapılır. 250-500 litre havayı keşfedin (bkz. Tüberkülozun mikrobiyolojik teşhisi).

Atmosferik havanın temizlik standardı, yeşil bölgedeki bakteriyel kontaminasyonun göstergesi olarak kabul edilir (VDNKh yeşil bölge - 1 m3 başına 350 mikrop). Önemli hava kirliliğine bir örnek, insanların ve araçların bir araya geldiği yerlerdir. Ameliyathanelerin havası, ameliyat başlamadan önce 500'den fazla ve ondan sonra - 1 m3 başına 1000'den fazla mikrop içermemelidir. Staph, aureus 250 litre havada yapılan çalışmada bulunmamalıdır. Ameliyat öncesi ve soyunma odalarında işe başlamadan önce 1 m3'teki mikrop sayısı 750'yi geçmemelidir. hastane koğuşları yazın mikrop sayısı 3500'den az, kışın ise 1 m3'te 5000'den az olmalıdır. Burada havada stafilokok varlığına izin verilir: yazın - 24, kışın - 52 çalışmada 250 litre hava.

60'ların başında, V.F. Krotov, daha sonra Krotov optimallik ilkesi olarak adlandırılan, yeterli bir optimallik koşuluna dayanan, varyasyon problemlerini çözmek için yeni bir yöntem geliştirdi. Ancak bu prensibi tanımadan önce, optimal kontrol probleminin daha genel bir formülasyonunu ele alalım.

Parçalı sürekli kontroller ve parçalı pürüzsüz yörüngeler sınıfındaki optimal kontrol probleminin çözümü her zaman mevcut değildir. Çözümü olan optimal kontrol problemleri sınıfını genişletecek şekilde genelleştirilmesi tavsiye edilir.

Nesne, kısıtlamalar ve sınır koşulları aşağıdaki gibi verilsin:

Burada, her sabit için bir miktar boşluk kümesi vardır. Sonlu sayıda nokta, tüm aralıktaki kısıtlama ve sınır koşulları (10.70) dışında, bu aralıkta tanımlanan ve bu aralıkta denklemi sağlayan parçalı sürekli fonksiyonlar ve parçalı düzgün (sürekli ve parçalı türevlenebilir) fonksiyonların çiftleri kümesiyle gösterin. Kümeye kabul edilebilir denir

kümesi ve elemanları kabul edilebilir çiftlerdir ve kümeye bir fonksiyonel

Fonksiyonelin (10.71) kümedeki en küçük değerine yöneldiği bir kabul edilebilir çiftler dizisi bulmak gerekir.

Böyle bir diziye küçültme dizisi denir. Bir kabul edilebilir çiftler dizisi de kabul edilebilir bir dizi olarak adlandırılacaktır.

Yeni formülasyondaki ana genelleme noktası, optimal kontrol probleminin çözümü olarak belirli bir kabul edilebilir çift yerine küçültme dizisinin alınmasıdır. (10.71) fonksiyoneline bir minimum sağlayan kabul edilebilir bir çiftin olduğu özel durumda, küçültme dizisinin tüm üyeleri bu çifte eşittir: .

Örnek 10.12. Biraz değiştirilmiş bir Bolz 11 örneğini ele alalım]:

Fonksiyonelin en küçük değeri (tam alt sınır) sıfıra eşittir ve dizide elde edilir.

Çok sayıda alet ve cihaz, çevresel nesnelerden (su, hava) alınan numunelerdeki ve ayrıca hastalardan alınan patolojik materyal numunelerindeki mikroorganizmaların konsantrasyonu için tasarlanmıştır.

Bilindiği gibi, çevresel nesneler, eğer patojenik mikroorganizmalar ile kontamine olmuşlarsa, insanlar ve hayvanlar için toplu enfeksiyon kaynağı olabilir. Çevresel nesnelerde patojenik mikroorganizmaların varlığını yargılamak için en güvenilir kriter bunların doğrudan tespitidir. Ancak mikrobiyolojik uygulamada kullanılan yöntemler buna her zaman izin vermemektedir. Patojenik mikroorganizmaların, saprofitlerden çok daha küçük oldukları için çevresel nesnelerde tespit edilmesi zordur. Bu nedenle, besleyici ortam üzerindeki antagonistik etkilerden dolayı, patojenik floranın büyümesi genellikle saprofitlerin büyümesiyle baskılanır. Hava gibi çevresel bir nesnenin incelenmesindeki birincil görev, içinde az miktarda sıvı (besleyici ortam) içinde asılı kalan mikroorganizmaların konsantrasyonudur.

Çevresel nesnelerin bakteriyel kontaminasyonunun önde gelen göstergelerinden biri, mikrobiyal sayının göstergesidir. Bu sıhhi mikrobiyoloji verileri, Petri kaplarında gelişen kolonilerin sayılması ve ardından yeniden hesaplama ile kaydedilir.

Hava örnekleme yöntemlerine önemli sayıda çalışma ayrılmıştır. Önerildi çok sayıda bakteriyel aerosolleri yakalayan çeşitli cihazlar.

Ülkemizde seri üretime giren aeromikroflora çalışması için ilk cihazlardan biri Krotov cihazıydı. Seri üretiminin başlangıcından bu yana (ellili yıllar) nispeten uzun bir süre geçmesine rağmen, cihaz, iç mekan havasının sıhhi ve bakteriyolojik durumunun incelenmesinde önemini kaybetmedi ve bugüne kadar sıhhi ve bakteriyolojik laboratuvarların uygulamalarında yaygın olarak kullanılmaktadır.

Havanın bakteriyolojik analizi için cihaz(Krotov'un cihazı) (Şek. 58), altına yoğun bir besin ortamı içeren bir Petri kabı yerleştirmek için bir masa bulunan, kapakla kapatılmış bir silindirdir. Silindirin içinde, bir fincan ile bir masayı döndüren bir elektrik motoru ve kapaktaki bir yuvadan cihaza hava emen bir pervane vardır. Dakikada emilen hava miktarı şamandıra tipi debimetre ile belirlenir ve bir valf ile düzenlenir. Cihaz 220 V AC şebekeden beslenmektedir.Cihazın kasa içindeki boyutları 229X200X280 mm'dir. Ağırlık - 8 kg.

Pirinç. 58. Havanın bakteriyolojik analizi için cihaz.
1 - rotametre valfi, 2 - rotametre; 3 - kapak kilitleri; 4 - dönen disk; 5 - kapak; 6 - disk; 7 - kama şeklindeki boşluk; 8 - gövde; 9 - taban.

Cihazın çalışmaya hazırlanması, 100 mm çapında ve 20 mm yüksekliğinde standart Petri kaplarının seçimine ve bunların 15 ml'lik bir besin ortamı ile önceden doldurulmasına indirgenmiştir. Besleyici ortamın şişelenmesi ve soğutulması, normal koşullar altında kurutulan kesinlikle yatay bir yüzey üzerinde gerçekleştirilir.

Buna benzer başka bir cihaz hava örnekleyici POV-1(şek.59).

Pirinç. 59. Hava örnekleyici POV-1

Hava örneklemesi, belirli seçmeli ortamların ve özel (hedefli) bakteriyolojik çalışmaların kullanımına izin veren sıvı bir besin ortamında gerçekleştirilir.

POV-1 cihazının teknik özellikleri
Verimlilik………… 20 l/dk
AC gücü….. 127/220 V
Güç tüketimi………….en fazla 18 V A
Alet boyutları……………………..170x255x285 mm
» istifleme……………………..170X270X350 »
Ağırlık (istifleme ile)……………………..en fazla 15 kg

Hava Örnekleme Aspiratörü Model 822"Krasnogvardeets" derneği tarafından üretilen , havada bulunan safsızlıkların analizi için tasarlanmıştır. Cihazın ön panelinde (Şek. 60) şunlar bulunur: cihazı şebekeye bağlamak için bir blok 1, cihazı açıp kapatmak için bir geçiş anahtarı 2, bir sigorta soketi 3, düşük hızlarda hava örneklemesi yaparken elektrik motorunu aşırı yükten koruyan bir boşaltma valfi 4, hava geçiş hızını belirlemek için rotametreler (şamandıralı konik cam tüpler) 5, örnekleme hızını ayarlamak için rotametre valflerinin kolları 6, paneli cihazın kasasına sabitlemek için vidalar 7, lastik boruları filtrelerle 8 bağlamak için bağlantı parçaları ve cihazı 9 topraklamak için bir terminal.

Pirinç. 60. Hava örneklemesi için aspiratör. Metin içinde açıklamalar.

Şek. 61 gösteriliyor Genel form filtre tutuculu aspiratör.

Örnekleme, özel filtrelerden belirli bir hızda hava emilerek gerçekleştirilir. Filtrelerden geçen hava, içinde bulunan safsızlıkları bırakır. Hava geçiş hızı ve geçiş süresi bilinerek, filtreden geçen havanın hacmini belirlemek mümkündür. Filtre üzerindeki kirlilik miktarını belirleyerek, birim hava hacmi başına kirlilik miktarını hesaplayabilirsiniz.

Hava örnekleme aspiratörü Fransız şirketi Baudard tarafından üretilmiştir. Aspiratör, ince gözenekli filtreleri güçlendirmek için bir cihaza sahip sızdırmaz bir cihazdır; bu, aspiratörden belirli bir hava hacmi emildikten sonra kolayca çıkarılabilir ve çalışmanın amacına bağlı olarak ya bakteriyolojik olarak (filtrenin besin ortamında bulunan mikroorganizmalarla inkübasyonu) veya mikroskobik olarak (filtre tarafından tutulan parçacıkların doğasının belirlenmesi, sayıları vb.) incelenebilir.

Kullanılan ince gözenekli filtreler, kağıt veya fiberglas olabilir. Filtrelerin çapı 110 mm'dir.

Santrifüj fanın iki hızı vardır ve 220 V'luk bir şebeke kaynağı ile çalışır; motor gücü - 50 W; aspiratör performansı - kullanılan ince gözenekli filtrenin direncine bağlı olarak 360 ila 1000 l / dak.

Su ve dış ortamın (toprak) diğer nesnelerinin yanı sıra insan ve hayvanların biyolojik sıvılarının (balgam, eksüdalar ve transüdalar) patojenik floranın varlığı için incelenmesinde, hava çalışmasında olduğu gibi, daha sonra bakteriyolojik incelemeye (mikroskopi, aşılama, biyokimyasal ve serolojik reaksiyonların kurulması, vb.) tabi tutulan küçük bir besin ortamı hacminde mikroorganizmaların ön konsantrasyonu gereklidir.

Pirinç. 61. Filtre tutuculu aspiratör.

Bununla birlikte, çevresel nesnelerden mikroorganizmaları konsantre etmeye yönelik yöntemler alanındaki ilerleme azdır ve çoğunlukla kişi kendini temsil eden eski yöntemlerle sınırlamak zorundadır. çeşitli yollar tasarruf:
- yağış mekanik yollarla- filtrasyon, santrifüjleme, su buharlaştırma;
- çeşitli pıhtılaştırıcılar kullanılarak fizikokimyasal yöntemlerle mikropların çökeltilmesi;
- yüzdürme yöntemiyle mikropların konsantrasyonu;
- spesifik aglütinasyon serumları ile mikropların çökeltilmesi;
- Çöktürme yöntemlerinin bir kombinasyonundan oluşan, mikroorganizmaları yoğunlaştırmaya yönelik birleşik yöntemlerin kullanımı, ardından besin ortamına aşılama veya duyarlı bir laboratuvar hayvanının enfeksiyonu.

Mikroorganizmaları yoğunlaştırmak için yeni yöntemler, belirli fiziksel ilkelerin uygulanmasına dayanmaktadır. Böyle bir fiziksel ilke elektroforezdir. Bu yöntemin kullanılması, bir mikrobiyal hücrenin, harici bir etki altında sıvı bir ortamda bulunan elektrotlardan birine hareketini sağlar. elektrik hareket gücü(EMF). Bu ilke, EFM-1 cihazının temelidir (Şekil 62). Cihaz, pozitif veya negatif yüzey yüküne sahip mikrobiyal hücreleri küçük bir hacimde izole edilmiş sıvıda (0,01-0,02 mi) konsantre etmenize izin verir.

Pirinç. 62. Mikobakteri EFM-1'in elektroforezi için cihaz.

Su araştırmalarına ek olarak cihaz, gıda ürünlerinin sulu süspansiyonlarının, çeşitli yıkamaların vb. bakteriyolojik incelemeleri için de kullanılabilir. çeşitli malzemeler hastalardan elde edilen, özellikle beyin omurilik sıvısı, bronşiyal ve mide yıkama sıvıları, her türlü punktatlar, idrar gibi materyallerde Mycobacterium tuberculosis'in saptanması için. Mycobacterium tuberculosis'in salin içindeki süspansiyonundan hazırlanan ve elektroforetik konsantrasyona tabi tutulan yaymalarda, mikrobiyal hücre sayısı, doğal materyalden alınan yaymalara göre 10-15 kat artmaktadır.

Cihaz, 12 ml kapasiteli 20 kırılmaz küvet, elektrotlar, pipetler içeren bir aksesuar seti ile birlikte verilir. Cihaz AC voltajı 220 V± ±%10, 50 Hz ile beslenir. Güç tüketimi - 20 watt'tan fazla değil. Boyutlar - 405X165X205 mm. Bir dizi aksesuarla birlikte cihazın kütlesi - 6 kg.

Cihazın çalışma prensibi. Cihaz kitinden özel küvetlere 10 ml test maddesi dökün. Her küvetin üzerine, içine bir grafit elektrotun yerleştirildiği bir kelepçe tutucu ile bir pipet sabitlenir. İncelenen sıvının bir kısmı pipet kılcal boyunca 4-5 mm yükselir ve elektrota dokunur. Çalışmanın amacına bağlı olarak, uygulanan EMF'nin polaritesi belirlenir. Elektroforezin 1-3 saat içinde yapılması tavsiye edilir.

Akımı kapattıktan sonra, kılcal damardan gelen sıvı lastik bir balonla sıkıştırılarak bir damla serum (1:10 dilüsyonda normal at veya tavşan serumu) haline getirilir, daha önce bir cam lam yüzeyine uygulanır ve sızdırmaz bir Pasteur pipeti ile iyice karıştırılır, ilaç kurutulur, bir bek alevi üzerinde sabitlenir ve Gram, Ziehl - Nielsen'e göre veya başka bir şekilde boyanır.

Teşhis hatası olasılığını ortadan kaldırmak için, tüm manipülasyonlar dikkatlice işlenmiş küvetler, pipetler ve cam lamlar ile gerçekleştirilir. Her çalışmadan sonra grafit elektrotlar değiştirilmelidir.

Boya ve asit çözeltileri bakteriyolojik olarak dikkatlice kontrol edilmelidir.

Kiev fabrikası tarafından büyütülmüş mikrobiyal kolonileri saymanın doğruluğunu artırmak tıbbi malzeme bakteri kolonilerini saymak için bir cihaz üretildi. Elektrikli kalemle koloni saymak için kabın dibine her koloninin bulunduğu yere noktalar uygulanırken elektropen kontakları kapanır ve sayaca gelen elektrik darbesi sayılır.Cihazın görünümü Şekil 63'te gösterilmiştir.

Pirinç. 63. Kolonileri saymak için bir cihaz.

Kapalı bir tabaktaki koloni sayısını saymak için, aynı koloniyi tekrar sayma olasılığını ortadan kaldıran, tabağın arkasına işaretler yapmak için bir kurşun kalem veya tükenmez kalem kullanılır.

Besiyeri "Baktronik" üzerindeki kolonileri saymak için üniversal sayaç açık plakalardaki koloni sayısını saymak için elektronik bir uç ile donatılmıştır. Herhangi bir agar besiyeri ile temas ettiğinde uç, bir elektromanyetik sayma mekanizmasını etkinleştirir ve besiyerinin yüzeyinde bir iz bırakır.

Böyle bir cihaz, diğer sistemleri kullanırken meydana gelen elektrik deşarjlarını ortadan kaldırır.

Seyrek büyüme gösteren plaklardaki koloni sayısını sayarken, gösterge panelindeki butonu ve gerekirse çalışmayı kolaylaştıran bir uzaktan basmalı butonu kullanabilirsiniz.

Millipore özel üretir mikrobiyolojik araştırmalar için bavul. Temelde portatif bir laboratuvar olan bavul (Res. 64), tüm gerekli malzemeler ve suyun bakteriyel kontaminasyonu, havadaki ve topraktaki mikroorganizmaların tespiti, sıcaklık ve bakteri üremesinin kontrolü, ortamdaki maya mantarlarının tespiti, maya tarafından gaz oluşumu, dezenfektanların etkinliğinin belirlenmesi vb. için ekipman.

Pirinç. 64. Mikrobiyolojik araştırmalar için çanta.

Gıda ürünlerinin kalitesini belirlemek, lüminoskop LPK-1. Et türlerini, domuz eti ve domuz yağının erken bozulma oranını, oranını belirlemek için kullanılabilir. oluşturan parçalar kıyma, yenilebilir sıvı ve katı yağlar, bal ve diğer ürünlerin incelenmesi (Şek. 65).

Cihaz, görsel lüminesan analiz prensibini kullanır. Etkisi altında ultraviyole ışınlar gıda ürünleri, özelliklerine ve kalitesine bağlı olarak farklı renklerde parlamaya başlar ve ışık filtreleri, spektrumun ilgili kısımlarını vurgular. Cihazla çalışırken odayı karartmaya gerek yoktur, araştırmacı ultraviyole ışınlarına maruz kalmaktan korunur.

Cihazın çalışma modu aralıklıdır. Çalışma süresi - 1 saat, duraklama - 25 dakika. Ürünü incelemek 1 dakikadan fazla sürmez. Cihazın alternatif akım ağından güç beslemesi - 220 V±10%. Güç tüketimi - en fazla 350 watt. boyutlar- 366X185X240 mm. Ağırlık - 6 kg.

Pirinç. 65. LPK-1 ürünlerinin kalitesini belirleme cihazı.

Ders Arama

Havanın sıhhi ve mikrobiyolojik muayenesi ikiye ayrılabilir: 4 aşamaya ayrılır:

1) örnekleme;

2) numunelerin işlenmesi, taşınması, saklanması, bir mikroorganizma konsantresi elde edilmesi (gerekirse);

3) bakteriyolojik tohumlama, mikroorganizmaların yetiştirilmesi;

4) izole edilmiş kültürün tanımlanması.

Örnek seçimi:

Doğru örnekleme çalışmanın doğruluğunu sağlar. Kapalı alanlarda, her 20 m2 alan için örnekleme noktaları belirlenir - zarfın türüne göre bir hava örneği: odanın köşelerinde 4 nokta (duvarlardan 0,5 m mesafede) ve 5. nokta - merkezde. Hava örnekleri yerden 1,6-1,8 m yükseklikte - yaşam mahallerinde solunum seviyesinde alınır. Numuneler, gün içinde (insanların aktif faaliyet gösterdiği süre boyunca), ıslak temizleme ve odanın havalandırılmasından sonra alınmalıdır. Atmosferik hava, kirlilik kaynaklarının yakınında yerden 0,5-2 m yükseklikte bir yerleşim bölgesinde ve ayrıca hava mikroflorası üzerindeki etkilerini değerlendirmek için yeşil alanlarda (parklar, bahçeler vb.) incelenir.

Hava örneklemesi sırasında, çoğu durumda, bir besin ortamına ekildiğine dikkat edilmelidir.

sedimantasyon- en eski yöntem, basitliği ve kullanılabilirliği nedeniyle yaygın olarak kullanılır, ancak hatalıdır. Yöntem, R. Koch tarafından önerildi ve yerçekimi etkisi altında ve hava hareketinin etkisi altında (toz parçacıkları ve aerosol damlacıkları ile birlikte) mikroorganizmaların açık Petri kaplarında besin ortamının yüzeyine yerleşme yeteneğinden oluşur. Kaplar, yatay bir yüzey üzerindeki numune alma noktalarına kurulur.

Sıhhi mikrobiyoloji için alet ve cihazlar

Toplam mikrobiyal kontaminasyon belirlenirken, meat-pepton agarlı kaplar, beklenen bakteriyel kontaminasyon derecesine göre 5-10 dakika veya daha uzun süre açık bırakılır. Sıhhi-endikatif mikropları tanımlamak için Garro veya Turzhetsky ortamı (streptokokları saptamak için), süt tuzu veya yumurta sarısı agarı (stafilokokları belirlemek için), wort agar veya Sabouraud ortamı (maya ve mantarları saptamak için) kullanılır. Sıhhi-endikatif mikroorganizmalar belirlenirken kaplar 40-60 dakika açık bırakılır.

Maruz kalmanın sonunda, tüm kaplar kapatılır, izole edilen mikroorganizmanın gelişimi için en uygun sıcaklıkta bir gün boyunca yetiştirme için bir termostata yerleştirilir, ardından (araştırma gerektiriyorsa) pigment oluşturan mikroorganizmalar tarafından pigment oluşumu için 48 saat oda sıcaklığında bırakılır.

Sedimantasyon yönteminin bir dizi dezavantajı vardır: ortamın yüzeyinde yalnızca kabaca dağılmış aerosol fraksiyonları yerleşir; genellikle koloniler tek bir hücreden değil, bir mikrop birikiminden oluşur; hava mikroflorasının sadece bir kısmı kullanılan besin ortamında gelişir. Ek olarak, bu yöntem, atmosferik havanın bakteriyel kontaminasyonunun incelenmesi için tamamen uygun değildir.

Daha gelişmiş yöntemler ise aspirasyon mikroorganizmaların havadan yoğun bir besin ortamının yüzeyine veya bir tutucu sıvıya (et-pepton suyu, tampon çözeltisi, izotonik sodyum klorür çözeltisi, vb.) zorla bırakılmasına dayanır. Uygulamada sağlık hizmeti aspirasyon örneklemesi için Krotov aparatı, Rechmensky bakteriyolojik tuzak, hava örnekleme cihazı (POV-1), aerosol bakteriyolojik numune alıcı (PAB-1), bakteriyel-viral elektroçökeltici (BVEP-1), Kiktenko cihazı, Andersen, Dyakonov, MB cihazları vb. Çok çeşitli aletler, evrensel bir aygıtın yokluğuna ve az ya da çok kusurlu olduklarına tanıklık eder.

Krotov'un cihazı.Şu anda, bu cihaz iç mekan havasının incelenmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır ve laboratuvarlarda mevcuttur.

Krotov'un aparatı

Krotov aparatının çalışma prensibi (Şekil 22), aparatın kapağındaki kama şeklindeki bir yarıktan emilen havanın besin ortamının yüzeyine çarpması, toz ve aerosol partiküllerinin ortama ve onlarla birlikte havadaki mikroorganizmalara yapışması esasına dayanır.

Bakteriyel-viral elektroçökeltici (BVEP-1). Cihaz, aspirasyon-iyonizasyon çalışma prensibine dayanmaktadır. BVEP-1, elektrotların monte edildiği bir çökeltme odasından oluşur: içinden havanın girdiği bir besleme tüpü şeklinde negatif bir oda (ve sırasıyla aerosol partikülleri negatif yüklüdür) ve üzerine bakterilerin yerleştiği pozitif bir oda.

MB cihazı. Bu cihaz sadece toplam mikrobiyal kontaminasyonu belirlemeye değil, aynı zamanda çeşitli boyutlarda aerosol partikülleri içeren hava numuneleri almaya da hizmet eder. MB cihazı "elek" prensibi üzerine inşa edilmiştir ve her birinin üzerine MPA'lı Petri kaplarının yerleştirildiği 6 yatay şeride bölünmüş bir silindirdir. Hava, üst aşamadan başlayarak, deliklerin en büyük olduğu plakaya emilir ve aşama ne kadar düşükse, delik boyutu o kadar küçük olur (sonuncusundan hava aerosolünün yalnızca ince fraksiyonları geçer). Cihaz, 30 l/dk'lık bir hava örnekleme hızında 1 µm'den büyük aerosol partiküllerini yakalamak üzere tasarlanmıştır. Delik sayısının azaltılması, havadaki aerosolün besin ortamı boyunca daha düzgün bir şekilde dağılmasını sağlar. Daha da ince aerosol parçacıklarını yakalamak için ek bir AFA filtre malzemesi eklenebilir.

Listelenen cihazlardan herhangi birini kullanırken, elde edilen sonuçlar yaklaşıktır, ancak sedimantasyon yöntemine kıyasla hava kirliliğinin daha doğru bir değerlendirmesini verir. Havanın hem örneklemesi hem de sıhhi ve mikrobiyolojik çalışmaları GOST tarafından düzenlenmediğinden, bakteriyel hava kirliliğini değerlendirmek için herhangi bir cihaz kullanılabilir. Birçok durumda numune alma, tohumlama aşamasıyla birleştirilir.

İç havadaki mikroorganizmaların sayısını azaltmak için aşağıdaki araçlar kullanılır: a) kimyasal - ozon, nitrojen dioksit, püskürtme laktik asit ile arıtma, b) mekanik - özel filtrelerden geçen hava, c) fiziksel - ultraviyole ışınlama.

©2015-2018 poisk-ru.ru
Tüm hakları yazarlarına aittir. Bu site yazarlık iddiasında bulunmaz, ancak ücretsiz kullanım sağlar.
Telif Hakkı İhlalleri ve Kişisel Veri İhlalleri

Ders. Odadaki havanın mikroflorasının analizi.

işin amacı:

– plaka yöntemiyle mikroorganizmaların kantitatif tayininde beceri ve yeteneklerin kazanılması.

Görevler:

Keşfetmek Sayısal metot kap yöntemi ile hava mikroorganizmalarının belirlenmesi;

- havadan mikrobiyolojik tohumlama gerçekleştirin çeşitli binalar sedimantasyon yöntemi;

- kolonileri Omelyansky kuralına göre saymak.

Yöntemin özü:

— ilk olarak test substratı, yoğun bir besin ortamı ile bir Petri kabına aşılanır. Kültürler termostatlanır ve büyüyen koloniler sayılır. Yöntem, gıda, su ve havadaki mikroorganizmaları belirlemek için yaygın olarak kullanılmaktadır.

Hava mikroflorası

Mikrobiyal hava kirliliği aerobiyoloji yasalarına uyar, değişken ve yerel bir karaktere sahiptir. Yaz aylarında, hava kirliliği kışın olduğundan birkaç kat daha fazladır. Büyük şehirler üzerindeki atmosferik hava, özellikle mikroorganizmalarla güçlü bir şekilde doyurulur. Atmosferik havanın mikroflorası ve yaşam alanlarındaki havanın mikroflorası farklıdır.

Atmosferik hava mikroflorası. Atmosferik havada, kalabalık ortamlarda alınan numunelerin sadece %3,7'sinde stafilokok ve streptokok bulunur. Mikroorganizmalar toprakta yaşayan türlerin hakimiyetindedir. Atmosfer havasında başlıca üç mikroorganizma grubu bulunur.

Pigment oluşturan koklar v güneşli günler tüm floranın %70-80'ini oluşturur (pigment bakterileri güneş ışınlarından korur).

Toprak sporları ve çürütücü mikroorganizmalar. Kuru ve rüzgarlı havalarda içerikleri keskin bir şekilde artar.

Küfler ve mayalar. İçeriği artan nem ile artar.

İç havanın aksine, atmosferik havada sürekli olarak kendini temizleme işlemleri gerçekleşir. Bu süreç yağış, güneşlenme, sıcaklık etkileri ve diğer faktörler nedeniyle oluşur. Buna karşılık, atmosferik hava kendi içinde yerleşim yerlerindeki havayı temizlemede bir faktördür.

Kapalı hava mikroflorası daha düzgün ve nispeten kararlı. Mikroorganizmalar arasında, öksürürken, hapşırırken veya konuşurken havaya giren patojenik türler de dahil olmak üzere insan nazofarenksinin sakinleri hakimdir.

İç havanın bakteriyolojik kontrol yöntemleri

Patojenik türlerin neden olduğu hava kirliliğinin ana kaynağı bakteri taşıyıcılarıdır. Mikrobiyal kontaminasyon seviyesi, esas olarak nüfus yoğunluğuna, insanların hareket aktivitesine, sıhhi durum toz kirliliği, havalandırma, havalandırma sıklığı, temizleme yöntemi, aydınlatma derecesi ve diğer koşullar dahil olmak üzere tesisler. Bu yüzden, düzenli havalandırma ve odaların ıslak temizliği hava kirliliğini 30 kat azaltır (kontrol odalarına kıyasla). İç mekan havasının kendi kendini temizlemesi gerçekleşmez.

Mikroorganizma kolonilerinin belirtileri.

Kolonilerin önemli özellikleri boyutları ve şekilleridir. Koloniler büyük veya küçük olabilir.

Kolonilerin büyüklüğü, kolonilerin büyüklüğü - ayırt etmenizi sağlayan bir işaret Farklı türde, cins ve hatta bakteri türleri. Çoğu durumda, gram-pozitif bakteri kolonileri, gram-negatif bakteri kolonilerinden daha küçüktür.

bakteri kolonileri düz, yükseltilmiş, dışbükey olabilir, basık veya yükseltilmiş bir merkeze sahip olabilir.

Bir diğer önemli özellik ise kolonilerin kenarlarının şekli. okurken koloni şekilleri yüzeyinin yapısını dikkate alın: mat, parlak, pürüzsüz veya pürüzlü. kolonilerin kenarı düz, dalgalı, loblu (derin girintili), tırtıklı, aşınmış, saçaklı vb. olabilirler.

Mikroorganizma sayısının belirlenmesi

Odanın havasında.

Hava, besin içermediğinden ve sabit bir optimum sıcaklıktan dolayı mikroorganizmalar için elverişsiz bir ortamdır.

Konut ve endüstriyel tesislerdeki havanın sıhhi değerlendirmesi, toplam mikrobiyal sayıya (TMC) göre yapılır. Endüstriyel tesislerin havasında, TMC, Omelyansky yöntemine göre birim hava hacminde belirlenir - sedimantasyon yöntemi. Yöntem, mikroorganizmaların yerçekimi etkisi altında yerleşip yere düşme yeteneklerine dayanmaktadır.

Omelyansky'nin kuralı:

Bu kurala dayanarak, 1 m3 havadaki mikroorganizma sayısını hesaplamak için bir formül türetmiştir:

X- 1 m2 havadaki mikroorganizma sayısı

A- analiz sırasında Petri kabında büyüyen kolonilerin sayısı

100 - 10 dm3'ten 1 m3'e dönüştürme sayısı

5 – Omelyansky zaman katsayısı

100 – Petri kabı Omelyansky'nin alanı (cm2)

İÇİNDE– Petri kabının analiz için alınan alanı (cm2)

T– bardağın açıldığı süre (dk) (5 dakika).

İlerlemek

1. Büyüyen mikroorganizmalar için yoğun bir besin ortamı hazırlayın - MPA (et-pepton agar): şemaya göre, MPA'yı damıtılmış suda (3,8 g kuru MPA + 100 ml damıtılmış su) çözün, 30 dakika kaynatın, hafifçe soğutun ve steril Petri kaplarına dökün. MPA tabakların dibinde katılaştıktan sonra, yoğun besiyeri 450C'lik etüvde 10 dakika kurutulmalıdır (agar tabağı aşağı çevrilmelidir).

2. Mikroorganizmaları çeşitli odaların havasından aşılayın Eğitim kurumu: Petri kaplarını test odasında ortamla birlikte 5 dakika açın, kapatın ve TMP'yi belirlemek için bir termostata (300C'de) 72 saat yerleştirin, maya ve küf mantarlarını belirlemek için - (250C'de) 5-7 gün. Termostatlama, Petri kaplarını ters çevirerek gerçekleştirilir.

3. Termostatlamadan sonra Petri kaplarında gelişen koloniler Omelyansky kuralına göre 1 m2 hava başına sayılır ve yeniden hesaplanır. Koloniler, bir koloni sayacı kullanılarak sayıldı. Sayarken bardaklar, karanlık bir arka plana karşı baş aşağı yerleştirilir.

Kolonileri sayarken aşağıdaki kurallara uyulur:

- tabakta az sayıda koloni büyüdüyse (100'e kadar), tüm koloniler sayılır;

- Koloniler eşit dağılmışsa ve sayıları yaklaşık 200-300 ise, kupalar bir işaretleyici ile 6 sektöre bölünür ve koloniler karşılıklı iki sektöre sayılır, ortalama hesaplanır ve 6 ile çarpılır.

sonuçlar

Düzenleyici belgelere göre, 1 m3 içeriği 2000 bakteriye kadar olan iç ortam havası temiz kabul edilir.

Gıda üretim atölyelerinin havası, üretimin niteliğine göre 1 m3'te 100-500'den fazla bakteri içermemelidir. Havada gıda işletmeleri gıda bozulmasına neden olan maddelerin - küfler ve mayalar - içeriği normalleştirilir.

Kontrol soruları

1. Hava mikroflorası hangi faktörlere bağlıdır?

2. Mikroorganizmalar tarafından hava kirliliğinin derecesi nasıl belirlenir?

3. Hangi mikroorganizma biçimleri en sık patojeniktir?

Laboratuvar #12

B. Hava örnekleme yöntemleri

1. Yerçekimi yöntemi Havada asılı duran yoğun parçacıkların yerçekimi etkisi altında çökmesine dayanır. Yerçekimi yöntemiyle numune toplamak için bir Durham numune alıcı kullanılır (bkz. Şekil 3.1). Cihaz tutucuya gliserol jel kaplı bir cam lam yerleştirilir ve şu şekilde hazırlanır: 5 g jelatin, 40 ml su, 4 g fenol, 195 g gliserol ile karıştırılarak ısıtılır; ısıtma sırasında jele 2 ml Calberium solüsyonu - 5 ml gliserin, 10 ml %95 enjekte edilir. etil alkol ve 2 damla doymuş sulu bazik fuksin solüsyonu. Cihaz 24 saat havada bırakılır.Hava akımının yerçekimi etkisi altında taşıdığı parçacıklar bir cam slayt üzerine yerleşir. Parçacıkların bileşimi ve sayısı mikroskop altında belirlenir. Sonuçlar 24 saatte cm2 başına çöken partikül sayısı olarak ifade edilir.Bu yöntem basit ve ucuzdur ancak aşağıdaki dezavantajlara sahiptir.

A.Çalışmanın sonuçları rüzgarın yönü ve hızı, havadaki nem ve yağıştan etkilenir.

B. 24 saat içinde az miktarda parçacık yerleşir.

V.Çoğunlukla büyük parçacıklar camın üzerine yerleşir.

2. Hacimsel yöntemler havada asılı kalan parçacıkların hava akış yoluna yerleştirilmiş bir engel üzerinde oyalanması gerçeğine dayanmaktadır.

A. Döner örnekleyici.Özel bir madde ile kaplanan toplama yüzeyi, belirli bir süre boyunca belirli bir hızda döner. Test sonucu 24 saatte 1 cm2'ye çöken partikül sayısı olarak ifade edilir.Bu yöntem rüzgar hızı ve yönünün çalışma sonuçlarına etkisini ortadan kaldırır. Rotorod örnekleyicide (Sampling Technologies Inc., Şekil 3.2), akrilik çubuklar ince tabaka silikon yağlayıcı. Diğer cihazlarda, toplama yüzeyi sürekli değil, periyodik olarak döner, bu da taşmasını önler, dönüşler arasında panjurlarla kapatılır. Amerikan Alerji ve İmmünoloji Akademisi, bu cihazların standart hacimsel numune alıcılar olarak kullanılmasını önermektedir.

B. Aspirasyon örnekleyicileri hava, gözenek çapı bilinen membran filtrelerden geçirilir, böylece belirli bir boyuttaki parçacıklar toplama yüzeyinde biriktirilir. Toplama yüzeyi 2 mm / s hızında hareket eden ve tüm gözlem süresi boyunca havadaki partikül konsantrasyonundaki değişikliği izlemeyi mümkün kılan Burchard spor tuzağı bu prensibe dayanmaktadır (bkz. Şekil 3.3). Enstrümanın bir rüzgar gülü olduğundan, rüzgar yönü test sonuçlarını etkilemez. Daha gelişmiş AccuVol örnekleyici (bkz. Şekil 3.4), çapı 1 µm'den küçük parçacıkları yakalar.

Sonuçların değerlendirilmesi

A. Kullanarak yerçekimi yöntemleri hava örneklerinde sadece kanarya otu poleni gibi büyük parçacıklar (çapı 20 mikrondan fazla) saptanabilir. Bilimsel amaçlar için daha doğru hacimsel yöntemler kullanılır. Mantar ve polen sporlarını tanımlamak için yönergeler mevcuttur. Hava örneklerinin kantitatif mikroskobik incelemesinin sonuçlarından derlenen tablolar, yılın farklı zamanlarında farklı eyaletlerdeki polen ve mantar sporlarının konsantrasyonundaki mevsimsel zirveleri belirlemenizi sağlar (bkz. Ek VI). Atopik hastalığın alevlenmesi ile havadaki alerjenlerin kantitatif mikroskobik inceleme kullanılarak belirlenen ortalama günlük konsantrasyonu arasında net bir ilişki yoktur. Bu, düşük ortalama günlük alerjen konsantrasyonuyla, atopik bir hastalığın alevlenmesinin, konsantrasyonlarında kısa süreli bir artışla tetiklenebileceği gerçeğiyle açıklanmaktadır. Ek olarak, kantitatif mikroskobik inceleme, havadaki alerjenlerin konsantrasyonunu her zaman doğru bir şekilde yargılamaz.

B. Etiketli antikorlar, immünolojik yöntemler kullanılarak alerjenleri ölçmek için kullanılır. İmmünolojik yöntemlerle belirlenen alerjen konsantrasyonu ile atopik bir hastalığın, özellikle eksojen bronşiyal astımın alevlenmesi arasında bir ilişki kurulmuştur. Bununla birlikte, bu tür birkaç çalışma vardır, yalnızca kanarya otunun E antijeni, Alternaria cinsinin böcek ve mantarlarının alerjenleri hakkında veriler yayınlanmıştır. Hayvanların ve böceklerin epidermis parçacıkları gibi mikroskobik olarak tespit edilemeyen havadaki alerjenlerin incelenmesi için immünolojik yöntemler çok doğrudur. Bazı durumlarda, bu çalışmalar alerjinin nedenini belirlemenizi sağlar.

B. Polen alerjenleri. Polen, içeren çok sayıda polen tanesinden oluşur. erkek gametler ve tohumlu bitkilerin eşeyli üremesine hizmet eder. Parlak ve hoş kokulu çiçeklere sahip entomofil (böceklerle tozlanan) bitkilerde polen büyük, yapışkan, genellikle kısa mesafelere yayılır ve havadaki konsantrasyonu düşüktür. Anemofil (rüzgarla tozlanan) bitkilerde çiçekler küçük, göze çarpmayan, kokusuz ve polenler küçük, yapışkan olmayan, pürüzsüz ve düz yüzey. Alerjinin nedeni genellikle anemofil bitkilerin polenleridir, çünkü çiçeklenme döneminde havadaki konsantrasyonu entomofil bitkilerin polen konsantrasyonundan çok daha yüksektir. Çoğu anemofil bitkide polen salınımı sabahın erken saatlerinde gerçekleşir, ancak havadaki konsantrasyonu genellikle öğleden sonra veya akşamın erken saatlerinde maksimuma ulaşır. Bunun nedeni gün içerisinde hava sirkülasyonunun artmasıdır. Kuru havalarda, zayıf bir rüzgarın etkisi altında bile polenler uzun mesafelere yayılabilir. büyük şehirler Havadaki polen konsantrasyonu çok yüksek olabilir. Polen birkaç saat sonra canlılığını kaybetmesine rağmen, alerjenik özelliği uzun süre kalır. Ek VI, Amerika Birleşik Devletleri ve Kanada'nın bir floristik haritasını ve farklı floristik bölgelerde yaygın olan çiçekli bitkilerin bir listesini içerir.

1. Ambrosya. Amerika Birleşik Devletleri'ndeki alerjik rinokonjonktivitin ana nedeni, Compositae ailesinin bir üyesi olan kanarya otu polenidir (Ambrosia spp.). Kuzeydoğu Amerika Birleşik Devletleri'nde ve Mississippi Nehri Havzası'nda kanarya otu özellikle yaygındır çünkü bu bölgelerin verimli, ekili toprakları onun büyümesi için idealdir. Kanarya otunun iki polen antijeni vardır - antijen E (Amb aI) ve antijen K (Amb aII).

Tüm hava örnekleme yöntemleri sedimantasyon ve aspirasyona ayrılabilir.

Her ikisi de iyi araştırılmıştır. E antijeni, bir polipeptittir. moleküler ağırlık 37.800, antijen K, moleküler ağırlığı 38.000 olan bir polipeptittir. Antijen E, polen ekstraktının protein fraksiyonunun sadece %6'sını oluşturur, ancak antijen K'den 200 kat daha aktiftir.

2. Tahıllar. Tahıllardan polen ayırt etmek zordur morfolojik özellikler bu nedenle hava örneklerinde tespit edildiğinde öncelikle belirli bir bölgede hangi tahılların yaygın olduğu dikkate alınır.

A. Amerika Birleşik Devletleri'nin güney bölgelerinde ve güney kıyısında Pasifik Okyanusu kuzeydoğu ve kuzey Mississippi havzasında yaygın olarak dağıtılır - bluegrass, timothy otu, horozotu ve beyaz bentgrass (bkz. Ek VI).

B. Tahıllar da dahil olmak üzere çimen polenine alerji, yalnızca iklim koşullarına bağlı olan çiçeklenme sırasında gelişir, bu nedenle her bölgenin kendi mevsimsel insidans zirveleri vardır. Bu nedenle, kuzey bölgelerde en yüksek insidans ilkbahar ve yaz aylarında olurken, güney bölgelerde alevlenme sıklığı yıl boyunca neredeyse değişmez. Açık yüksek irtifa deniz seviyesinin üzerinde, örneğin Rocky Dağları'nda ve Amerika Birleşik Devletleri'nin kuzey eyaletlerinde (Wisconsin, Michigan, Maine), polen konsantrasyonu düşüktür.

V. Amerika Birleşik Devletleri'nde çim poleni, neden olduğu alerjik reaksiyonların sıklığı ve şiddeti açısından kanarya otu poleninden sonra ikinci sıradadır. Diğer ülkelerde, havadaki en önemli alerjendir.

G. Bluegrass, timothy, beyaz bentgrass ve kirpi polenleri benzer antijenlere sahiptir ve çapraz alerjik reaksiyonlara neden olur. Domuz böceğinin poleni, antijenik bileşim açısından diğer otların poleninden önemli ölçüde farklıdır ve çapraz reaksiyonlara neden olmaz.

3. Ağaçlar. Alerjilere genellikle anemofil ağaçların polenleri neden olur. Meyve ve süs ağaçları gibi entomofil ağaçlardan gelen polenler nadiren alerjiye neden olur. Yoğun bir dış kabukla kaplı anemofil ağaçların alerjisine ve polenlerine neden olmaz.

A. Farklı ağaçlardan elde edilen polenler belirgin morfolojik özelliklere sahiptir. Ek olarak, ağaçlar süre, yoğunluk ve çiçeklenme mevsimi bakımından farklılık gösterir.

B. Farklı cins ağaçlardan elde edilen polenler çok az sayıda çapraz antijene sahip olduğundan ve aynı floristik alanda genellikle belirli bir cinse ait ağaçlar baskın olduğundan, yalnızca bir cinse ait ağaçlardan gelen polenlere alerjisi vardır.

V. Ağaçların çiçeklenme dönemi genellikle kısa olduğu için polenlerine karşı alerji alevlenmeleri de kısa sürer.

G. Yaprak döken ağaçlar, yaprakların görünümünden önce, sırasında veya kısa bir süre sonra çiçeklenmeye başlar. Ilıman bölgelerde, çiçeklenme mevsimi, ağaçların tamamen yapraklarını döktüğü ilkbaharın sonlarında sona erer. Daha sıcak bölgelerde çiçeklenme mevsimi daha uzundur (bkz. Ek VI).

1. Mantarların yapısı. Morfolojik özelliklerine göre, tüm mantarlar maya ve misel olarak ayrılır. Maya mantarları, eşeysiz olarak - bölünerek veya tomurcuklanarak üreyen ayrı hücrelerden oluşur. Misel mantarları çok hücreli organizmalardır ve dallanan filamentlerden oluşan bir ağdır - sporlar oluşturabilen hifler. Mantar sporları su, rüzgar ve hayvanlar tarafından dağılır. Küf, besin substratının yüzeyinde bulunan üreme organlarıdır. farklı şekiller mantarlar. Küf iç içe geçmiş hif ve sporlardan oluşur ve farklı renk, şekil ve kıvama sahip olabilen amorf bir kütledir. Kalıplar taksonomik değil, küf oluşturan mantarlar için geleneksel bir isimdir.

2. Mantarların sınıflandırılmasıüreme yöntemine dayanmaktadır. Mantarlar, aseksüel (basit hücre bölünmesi) ve cinsel (iki hücrenin bir zigot oluşturmak için füzyonu) olarak üretilen hif ve sporların parçalanmasıyla çoğalırlar. İÇİNDE yaşam döngüsüÇoğu mantar eşeysiz - kusurlu aşama - ve cinsel - mükemmel aşama - üreme aşamalarını değiştirir. Modern sınıflandırmaya göre mantarlar 4 sınıfa ayrılır: Ascomycetes, Basidiomycetes, Zygomycetes ve Oomycetes. Alternaria, Penicillium ve Aspergillus cinsine ait mantarlar daha önce Deuteromycetes sınıfına (yalnızca eşeysiz üreyen kusurlu mantarlar) aitti ve modern sınıflandırmaya göre, Ascomycetes sınıfının Hyphomycetes alt sınıfına dahil edildiler (bkz. Tablo 3.1). En sık alerjiye neden olan bu mantarlardır. Hyphomycetes sınıflandırması yalnızca spor morfolojisine dayandığından ve diğer özellikleri yansıtmadığından, bu alt sınıfa dahil edilen farklı mantarlar, antijenik bileşimde önemli ölçüde farklılık gösterir.

3. Mantarların yaygınlığı. Muazzam çeşitlilik ve farklı iklim koşullarında olağanüstü hayatta kalma yeteneği nedeniyle mantarlar her yerde bulunur. Düşük sıcaklıklarda bile canlı kalırlar. Yeterince nem ve oksijenin olmadığı kurak ve yüksek dağlık bölgelerde bunlardan çok azı var. Evlerde yaşayan mantarlar genellikle yıl boyunca alerjik hastalıklara neden olur. Yaşam alanlarında özellikle eski mobilya döşemelerinde çok fazla mantar bulunur, oda nemlendiriciler hava, duş perdeleri, sıhhi tesisat armatürleri, çöp kutuları, yemek atıkları, nemli bodrumlar.

4. Mantarlarla temas. Mantarların neden olduğu alerjik hastalıklar, örneğin bir ormanı veya çiftliği ziyaret ettikten, saman veya tahıl hasadı yaptıktan, düşen yaprakları topladıktan, ıslak, ılık yaz ve yaprak dökümünden sonra sonbahar gibi havadaki mantar konsantrasyonundaki artışa bağlı olarak periyodik alevlenmelerle ortaya çıkar (bkz. Tablo 3.1). Bazı mesleklerin temsilcileri - tahıl yetiştiricileri, bahçıvanlar, kağıt fabrikası çalışanları - özellikle mantarlarla sık sık temas halindedir. Sözde Yeni Yıl mantar alerjisinin alevlenmesi, ladin ağaçlarında birçoğunun bulunması ve Noel ağacı süslerinden gelen iğnelerin ve tozun keskin kokusunun hastalığı şiddetlendirmesinden kaynaklanmaktadır. Mantarlarla savaşmanın yolları Bölüm 1'de anlatılmıştır. 4, s.III.D.

5. Laboratuvar araştırması. Mantar alerjisini önlemenin en iyi yolu, ortamdaki içeriklerini sürekli izlemek ve mantarlarla mücadele etmektir. Laboratuar çalışmaları: 1) eksojen alerjik alveolit gibi alerjik bir hastalığa neden olan mantarları belirlemek, 2) mantar kontrolünün etkinliğini değerlendirmek, 3) bölgede yaygın olan mantar türlerini belirlemek için gereklidir.

Havadaki mantarların miktarının belirlenmesi, hacimsel yöntemler kullanılarak elde edilen numunelerin ve bu numunelerin aşılanmasından elde edilen kültürlerin mikroskobik incelemesine dayanır. Mantar yetiştirmek için genellikle Sabouraud ortamı ve patates nişastası veya mısır unu içeren agar kullanılır. Mantarların tespiti zaman, özel ekipman ve mesleki beceri gerektirir. Sıcaklık, hava nemi gibi belirli yetiştirme koşullarının dikkate alınması gerekir. atmosfer basıncı klinik önemi olmayan mantarların büyümesini destekler. Özellikle sıklıkla alerjiye neden olan küfler Tablo'da listelenmiştir. 3.1 ve ek VI.

D. Epidermal alerjenler.Çoğu zaman, alerjilere köpeklerin ve kedilerin epidermisinin yanı sıra mobilya, yastık ve kuş tüyü yatakları doldurmak için kullanılan yün (çoğunlukla keçi veya koyun) ve tüy (örneğin ördek) neden olur. İşlenmiş yün ve postların alerjiye neden olma olasılığı daha düşüktür çünkü en şiddetli alerjenler suda çözünür ve işleme sırasında uzaklaştırılır. Birçok epidermal alerjen, hayvanların tükürüğünde ve idrarında da bulunur. Epidermal alerjenler çok aktiftir ve onlarla kısa süreli temas bile güçlü bir alerjik reaksiyona neden olabilir. En aktif epidermal alerjenler, kedilerin epidermal antijenleridir. Kedilerin epidermisinin parçacıkları çok küçüktür (2,5 mikrondan daha az), yavaşça yerleşir ve havada birikir, bu nedenle kedinin yaşadığı odada kısa bir süre kalmak bile şiddetli bir alerjik reaksiyona neden olabilir. Bunlar epidermal alerjenler olduğu için hem uzun tüylü hem de kısa tüylü ve tüy dökmeyen hayvanlar alerjiye neden olur. Ev ve apartmanlarda epidermal alerjenlerin yayılması merkezi sistemlerle kolaylaştırılır. hava ısıtma. Binaların temizlenmesi ve hayvanların yıkanması geçici ve etkisiz anti-alerjik önlemlerdir. Epidermal alerjenler mesleki alerjik hastalıklara neden olabilir. Kiralık apartmanlarda ve bakımsız evlerde yaşayan insanlar, genellikle kemirgenlerin üst derisine ve idrarına karşı alerjik reaksiyonlar geliştirir.

Önceki45678910111213141516171819Sonraki

DAHA FAZLA GÖSTER:

Hava aspiratörleri ve numune alma cihazları

Atmosferik hava örnekleri, kural olarak, aspirasyon yoluyla sınırlı kapasiteye sahip kaplara alınır. Bu yöntem, analitin emici bir çözelti veya geniş bir emici yüzeye sahip katı sorbentler (silika jel, alümojel, aktif karbon, vb.) ile ekstraksiyonuna dayanır. İnce liflerden (selüloz asetat, poliakrilonitril, poliakrilat vb.) yapılan filtre malzemelerinin kullanımı da yaygındır. Tüm analitik çalışmalarda olduğu gibi, uygun numune alma çok önemlidir. En doğru ve dikkatli bir şekilde gerçekleştirilen analizin sonuçları, örnekleme için yanlış hazırlık yapılması ve yanlış uygulanması durumunda tüm anlamlarını kaybeder. Genel olarak, hava örnekleme alanı, yakın çevrede ağaç veya bina duvarı olmayacak şekilde seçilmelidir. Yağmur veya kar yağışı sırasında numune almak da imkansızdır. Örnekleme ayrıca dikkate alınmalıdır toplama durumu ve tanımlanan kirleticinin özellikleri. Çoğu zaman, doğrudan numune alma sürecinde havanın analizinde, belirlenecek hava bileşenlerinin ayrılması ve konsantrasyonu gerçekleştirilir. Belirlenecek hava kirleticinin beklenen seviyesine bağlı olarak, konsantrasyonlu veya konsantrasyonsuz örnekleme yapılabilir. İkinci durumda, cam şırıngalar, gaz pipetleri, plastik torbalar polimer filmler, kauçuk hazneler vb. Mikro safsızlıkların konsantrasyonu için sıradan katı sorbentler ve absorpsiyon çözeltileri kullanılır. Hava, belirli bir süre boyunca belirli bir hızda emici maddelerden veya emici çözeltiden çekilir. Örnek alırken, istatistiksel olarak ortalaması alınmış bir örnek elde etmek gerekir. Özel filtreler veya sıvı emicilerden büyük hacimlerde hava pompalanarak ve ardından emilen kirletici özel solüsyonlarla yıkanarak istatistiksel olarak ortalaması alınmış bir hava örneği elde edilebilir. Bazen soğurucu filtreler küllenebilir veya doğrudan analiz edilebilir (örneğin, nötron aktivasyonu ile). Müteakip desorpsiyon ve kantifikasyon için geleneksel adsorbanlar ile hava kirleticilerin konsantrasyonlarının arttırılması, hazırlık aşaması gaz kromatografik analiz için. Havada bulunan maddelerin düşük konsantrasyonlarını belirlemek için gaz-sıvı kromatografisi kullanıldığında, iki ana zenginleştirme yöntemi kullanılır. Birincisine göre, analiz edilen hava, yoğunlaştırıcıdan, sorbent analite tamamen doygun hale gelecek şekilde geçirilir. Çoğu zaman, bu durumda soğutma kullanılır (sıvı nitrojen, asetonlu kuru buz). Bu yöntem, düşük uçucu maddelerin analizi için en uygundur. İkinci yönteme göre, analiz edilen hava yoğunlaştırıcıdan sorbent ile gaz fazı arasında dengeyi sağlayacak miktarda geçirilir. Bu yöntem esas olarak çalışma alanının havasındaki uçucu maddelerin tayini için uygundur. Analiz edilen maddelerin atmosferik havadaki konsantrasyonu (C, mg / m3), C \u003d m / V formülü ile hesaplanır; burada m, analiz edilen numunede bulunan maddenin kütlesidir, μg; V, incelenen hava örneğinin hacmidir, indirgenmiş normal koşullar(t = 0 °C, p0 = 101080 Pa), l. V = 273 p Vt / , burada p örnekleme sırasındaki atmosfer basıncıdır, Pa; t, örnekleme alanındaki hava sıcaklığıdır, °C; Vt, t, l sıcaklığındaki hava örneğinin hacmidir.

Aspirasyon yönteminin bir takım dezavantajları vardır: birincisi, zahmetlidir ve ikincisi, uzun bir süre (30 dakikaya kadar) aspirasyon gerektirir, bu da havadaki maddelerin konsantrasyonu oldukça hızlı değişirken toksik maddelerin konsantrasyonunun ortalamasına yol açabilir.

7) Atmosferik hava kirliliğini belirleme yöntemleri

Atmosferik havanın çevresel izlenmesi, kirlilik kaynaklarının incelenmesini, kirleticilerin kimyasal ve fotokimyasal dönüşümlerinin incelenmesini, en zehirli maddelerin tanımlanmasını, kirleticilerin atmosferik havadaki hava akımlarıyla yayılmasının incelenmesini, kirletici konsantrasyonlarının belirlenmesini ve hava kirliliğinin etkisi altında ekosistemlerdeki değişikliklerin tahmin edilmesini içerir. Hava içeren kirliliğin analizi oldukça karmaşıktır, çünkü bir yandan karmaşık bir çok bileşenli karışımı analiz etmek ve diğer yandan seçici olarak belirlemek gerekir. zararlı maddeler MPC seviyesinde ve altındaki havadaki konsantrasyonlarında. Ek olarak, tespit uzun olmamalıdır (GOST'a göre numune alma süresi 30 dakikayı geçmemelidir). Numune hazırlama, atmosferdeki kirleticilerin analiz yöntemine bağlıdır. Kirletici maddenin doğasına ve havadaki konsantrasyonuna bağlı olarak gaz ve gaz-sıvı kromatografisi, nötron aktivasyonu, atomik absorpsiyon, polarografik, fotometrik ve spektrofotometrik ve diğer yöntemler kullanılır. Atmosferdeki kirliliğin belirlenmesi aşağıdaki işlemleri içerir: hava örneklemesi ve zararlı maddelerin mikro safsızlıklarının konsantrasyonu; analiz için numune hazırlama; mikro safsızlıkların analizi, analiz sonuçlarının işlenmesi ve çevre durumundaki değişikliklerin tahmini. Atmosferik hava örnekleri, kural olarak, aspirasyon yoluyla sınırlı kapasiteye sahip kaplara alınır. Bu yöntem, analitin emici bir çözelti veya geniş bir emici yüzeye sahip katı sorbentler (silika jel, alümojel, aktif karbon, vb.) ile ekstraksiyonuna dayanır. İnce liflerden (selüloz asetat, poliakrilonitril, poliakrilat vb.) yapılan filtre malzemelerinin kullanımı da yaygındır. Tüm analitik çalışmalarda olduğu gibi, uygun numune alma çok önemlidir. En doğru ve dikkatli bir şekilde gerçekleştirilen analizin sonuçları, örnekleme için yanlış hazırlık yapılması ve yanlış uygulanması durumunda tüm anlamlarını kaybeder. Genel olarak, hava örnekleme alanı, yakın çevrede ağaç veya bina duvarı olmayacak şekilde seçilmelidir. Yağmur veya kar yağışı sırasında numune almak da imkansızdır. Numune alırken, agregasyon durumunun ve belirlenen kirleticinin özelliklerinin de dikkate alınması gerekir. Çoğu zaman, doğrudan numune alma sürecinde havanın analizinde, belirlenecek hava bileşenlerinin ayrılması ve konsantrasyonu gerçekleştirilir. Belirlenecek hava kirleticinin beklenen seviyesine bağlı olarak, konsantrasyonlu veya konsantrasyonsuz örnekleme yapılabilir. İkinci durumda, numune alma kapları olarak cam şırıngalar, gaz pipetleri, polimer filmlerden yapılmış çantalar, kauçuk hazneler vb. Hava, belirli bir süre boyunca belirli bir hızda emici maddelerden veya emici çözeltiden çekilir. Örnek alırken, istatistiksel olarak ortalaması alınmış bir örnek elde etmek gerekir. Özel filtreler veya sıvı emicilerden büyük hacimlerde hava pompalanarak ve ardından emilen kirletici özel solüsyonlarla yıkanarak istatistiksel olarak ortalaması alınmış bir hava örneği elde edilebilir. Bazen soğurucu filtreler küllenebilir veya doğrudan analiz edilebilir (örneğin, nötron aktivasyonu ile). Daha sonraki desorpsiyon ve kantitatif belirleme amacıyla hava kirleticilerin konsantrasyonunun geleneksel adsorbanların yardımıyla arttırılması, gaz kromatografik analizi için bir hazırlık adımıdır. Havada bulunan maddelerin düşük konsantrasyonlarını belirlemek için gaz-sıvı kromatografisi kullanıldığında, iki ana zenginleştirme yöntemi kullanılır. Birincisine göre, analiz edilen hava, yoğunlaştırıcıdan, sorbent analite tamamen doygun hale gelecek şekilde geçirilir. Çoğu zaman, bu durumda soğutma kullanılır (sıvı nitrojen, asetonlu kuru buz). Bu yöntem, düşük uçucu maddelerin analizi için en uygundur. İkinci yönteme göre, analiz edilen hava yoğunlaştırıcıdan sorbent ile gaz fazı arasında dengeyi sağlayacak miktarda geçirilir. Bu yöntem esas olarak çalışma alanının havasındaki uçucu maddelerin tayini için uygundur. Analiz edilen maddelerin atmosferik havadaki konsantrasyonu (C, mg / m3), C \u003d m / V formülü ile hesaplanır; burada m, analiz edilen numunede bulunan maddenin kütlesidir, μg; V, incelenen hava örneğinin normal koşullara indirgenmiş hacmidir (t = 0 °C, p0 = 101080 Pa), l. V = 273 p Vt / , burada p örnekleme sırasındaki atmosfer basıncıdır, Pa; t, örnekleme alanındaki hava sıcaklığıdır, °C; Vt, t, l sıcaklığındaki hava örneğinin hacmidir.

Havanın sıhhi ve bakteriyolojik muayenesi – F. K. Çerkes

İnsan yaşamını etkileyen çevresel faktörlerin başında hava gelmektedir. Havanın mikroflorasını inceleyen bilime aeromikrobiyoloji denir.

Hava, besin içermediği ve sürekli hareket halinde olduğu için mikroorganizmaların gelişmesi için elverişli bir ortam değildir. Bu nedenle, çoğu mikroorganizma havadan hızla kaybolur. Bununla birlikte, bazıları daha dirençlidir, örneğin tüberkül basili, klostridyum sporları, mantarlar ve diğerleri havada uzun süre kalabilir.

Şehirlerin havasında, ormanların ve tarlaların havasından daha fazla mikroorganizma vardır.

Havadaki mikroorganizmaların sayısı yükseklikle azalır. Örneğin, Moskova'nın 500 m yukarısında 1 m3 havada 2-3 bakteri bulunur ve 1000 m yükseklikte - yarısı kadar.

Binalardaki mikroorganizmaların sayısı genellikle açık yerlerin havasındakinden daha fazladır.

GOST, hava araştırması yapmak için yöntemleri standartlaştırmaz. Daha erken büyük ilgi hemolitik streptokokların, insan nazofarenksinde bulunan mikroflora tarafından iç mekan hava kirliliğinin göstergeleri olarak tanımlanmasına verildi. Şu anda, havadaki patojenik ve fırsatçı mikroorganizmaların doğrudan tespitine daha fazla önem verilmektedir.

Havanın sıhhi ve bakteriyolojik muayenesi planlı bir şekilde yapılır: hastanelerde, ameliyathanelerde, çocuk bakımevlerinde vb.

Sıhhi-bakteriyolojik bir çalışmada şunları belirleyin:

1. 1 m3 havadaki toplam bakteri sayısı.

2. 1 m3 havada patojenik ve şartlı olarak patojenik mikroorganizmaların varlığı.

Havadaki mikroorganizmaların tespiti, kullanılarak gerçekleştirilir. özel cihazlar ve özel ortamlar (teşhis ve ayırıcı teşhis).

Hava örnekleme yöntemleri

Araştırma için iki ana hava örnekleme yöntemi vardır: 1) sedimantasyon - mikroorganizmaların mekanik olarak yerleşmesine dayalıdır; 2) aspirasyon - aktif hava emişine dayalıdır (bu yöntem, bakterilerin yalnızca kalitatif değil, aynı zamanda kantitatif içeriğini de belirlemeyi mümkün kılar).

Hava örneklemesi

sedimantasyon yöntemi

Besleyici ortam (MPA) içeren petri kapları, formu aç yatay olarak, zeminden farklı seviyelerde. Yöntem, Petri kaplarındaki agar yüzeyinde bakterilerin mekanik olarak çökelmesine dayanır. Orta plakalar, beklenen hava kirliliğine bağlı olarak 10 ila 20 dakika maruz bırakılır. Seçmeli ortamlar, patojenik florayı tanımlamak için kullanılır. Bu durumlarda maruz kalma 2-3 saate uzatılır Maruziyetten sonra kaplar kapatılır, laboratuvara teslim edilir ve 24 saat 37 °C'lik bir termostatta bekletilir.Ertesi gün üreyen koloniler incelenir. Bu yöntem esas olarak iç mekanlarda kullanılır.

Bakteriyorap Rechmensky. Kullanmadan önce cihaz steril soda ile doldurulur. Cihazın çalışması, bir aspiratör yardımıyla içinden hava çekilmesi esasına dayanmaktadır. Bu durumda cihaz içerisindeki sıvı püskürtülür. Emme sona erdikten sonra içinden hava geçirilen sıvı, Petri kutularına MPA başına 0.1-0.2 ml olacak şekilde aşılanır. Gerekirse, seçmeli ortam kullanın, inokulum dozunu artırın (0,3-0,5 ml). Alıcıda elde edilen sıvı hayvanlara bulaştırmak için kullanılabilir (örneğin virüs, riketsiya vb. tespit etmek için yapılan çalışmalarda).

Dyakonov'un cihazı ayrıca bakterileri içinden havanın geçtiği bir sıvıya hapsetmeye dayanıyor.

PAB-1 cihazı, kısa bir süre içinde büyük hacimli havanın bakteriyolojik incelemesi için tasarlanmıştır. 125-150 l/dk hızında hava örnekleri alınır. Cihazın çalışma prensibi, zıt yüklü bir elektrot üzerinde mikroorganizmaların yakalanmasına dayanmaktadır. Bu cihazdaki yüksek hava örnekleme hızı ve çeşitli besin ortamlarına tohumlama olasılığı, patojenik ve fırsatçı bakterilerin (örneğin, cerrahi bölümlerde Pseudomonas aeruginosa, vb.) saptanması için önemlidir.

Krotov'un aygıtı. Eylem, Petri kaplarındaki ortam üzerinde hava jeti etkisi ilkesine dayanmaktadır. Cihaz üç parçadan oluşur: hava örnekleme ünitesi, rotametre ve besleme mekanizmasının elektrikli parçası.

İncelenen hava 4000-5000 rpm hızla dönen santrifüj fan yardımıyla cihazın yuvasına emilir ve ortamla birlikte açık Petri kabının yüzeyine çarpar. Havadaki mikroorganizmalar besleyici agarda biriktirilir. Mikroorganizmaları tüm yüzeye eşit olarak dağıtmak için, üzerinde bardak bulunan masa döner. Hava, cihazdan çekilen havanın hızını gösteren bir rotametreye bağlı bir hava tüpü aracılığıyla cihazdan çıkarılır.

Krotov'un cihazının dezavantajı, elektriğe ihtiyaç duyması, bu nedenle her koşulda kullanılamaması.

Araştırmanın ilk günü

Seçilen numuneler, 18-24 saat boyunca 37°C'de bir termostata yerleştirilir.

Araştırmanın ikinci günü

Kap termostattan çıkarılır ve koloniler sayılır. Bakteriyel hava kirliliği, 1 m3'ünde bulunan toplam mikrop sayısı ile ifade edilir.

Hesaplama. Örneğin 10 dakikada 125 litre hava geçirilmiş, yüzeyde 100 koloni üremiştir.

Staphylococcus aureus'u belirlemek için yumurta sarısı tuzlu agarda örnekleme yapılır. Mahsul içeren kaplar, pigmenti tespit etmek için 24 saat boyunca 37°C'de bir termostatta inkübe edilir ve 24 saat boyunca oda sıcaklığında tutulur. S. aureus olduğundan şüphelenilen koloniler daha fazla tanımlamaya tabidir (bkz. Bölüm 14).

Çocuk kurumlarında hava, salmonella varlığı açısından kontrol edilir. Bunu yapmak için hava, bizmut-sülfit agar besiyeri içeren bir bardağa aşılanır.

İç havadaki patojenik bakteri ve virüslerin tespiti epidemiyolojik endikasyonlara göre yapılır. Tüberküloz patojenlerini tanımlamak için bir POV cihazı kullanılır, yakalama ortamı olarak Shkolnikova ortamı kullanılır.

Kontrol soruları

1. Hava, mikroorganizmaların gelişmesi için uygun bir ortam mı?

2. Hava mikroflorası ile ilgili planlı bir çalışma hangi kurumlarda yapılır?

3. Cihaza Krotov'un aparatını söyleyin.

Görev

10 dakikada 250 litre hava geçirildi. 150 koloni büyüdü. 1 m2 havadaki koloni sayısını hesaplayınız.

Egzersiz yapmak

MPA ortamı ile 4 Petri kabı alın, açın ve yerden farklı seviyelerde yerleştirin. 20 dakika sonra bardakları kapatın ve termostata yerleştirin. Ertesi gün, büyüyen kolonilerin sayısını sayın, hava kirliliğinin derecesini belirleyin.

İnsan yaşamını etkileyen çevresel faktörlerin başında hava gelmektedir. Havanın mikroflorasını inceleyen bilime aeromikrobiyoloji denir.

Şehirlerin havasında, ormanların ve tarlaların havasından daha fazla mikroorganizma vardır.

Havadaki mikroorganizmaların sayısı yükseklikle azalır. Örneğin Moskova'nın 500 m yukarısında 1 m3 havada 2-3 bakteri bulunur ve 1000 m yükseklikte - yarısı kadar.

Binalardaki mikroorganizmaların sayısı genellikle açık yerlerin havasındakinden daha fazladır.

GOST, hava araştırması yapmak için yöntemleri standartlaştırmaz. Daha önce, hemolitik streptokokların, insan nazofarenksinde bulunan mikroflora tarafından iç mekan hava kirliliğinin bir göstergesi olarak tanımlanmasına çok dikkat edildi. Şu anda, havadaki patojenik ve fırsatçı mikroorganizmaların doğrudan tespitine daha fazla önem verilmektedir.

Havanın sıhhi ve bakteriyolojik muayenesi planlı bir şekilde yapılır: hastanelerde, ameliyathanelerde, çocuk bakımevlerinde vb.

Sıhhi-bakteriyolojik bir çalışmada şunları belirleyin:

1. 1 m3 havadaki toplam bakteri sayısı.

2. 1 m3 havada patojenik ve şartlı olarak patojenik mikroorganizmaların varlığı.

Havadaki mikroorganizmaların tespiti, özel cihazlar ve özel ortamlar (teşhis ve ayırıcı teşhis) yardımıyla gerçekleştirilir.

Hava örnekleme yöntemleri

sedimantasyon yöntemi

Besleyici ortam (MPA) içeren petri kapları, zeminden farklı seviyelerde yatay olarak açık bir şekilde kurulur. Yöntem, Petri kaplarındaki agar yüzeyinde bakterilerin mekanik olarak çökelmesine dayanır. Orta plakalar, beklenen hava kirliliğine bağlı olarak 10 ila 20 dakika maruz bırakılır. Seçmeli ortamlar, patojenik florayı tanımlamak için kullanılır. Bu durumlarda maruz kalma 2-3 saate uzatılır Maruziyetten sonra kaplar kapatılır, laboratuvara teslim edilir ve 24 saat 37 °C'lik bir termostatta bekletilir.Ertesi gün üreyen koloniler incelenir. Bu yöntem esas olarak iç mekanlarda kullanılır.

(Aspirasyon yöntemi )

Dyakonov'un cihazı ayrıca bakterileri içinden havanın geçtiği bir sıvıya hapsetmeye dayanıyor.

Krotov'un cihazının dezavantajı, elektriğe ihtiyaç duyması, bu nedenle her koşulda kullanılamaması.

Araştırmanın ilk günü

Seçilen numuneler, 18-24 saat boyunca 37°C'de bir termostata yerleştirilir.

Araştırmanın ikinci günü

Kap termostattan çıkarılır ve koloniler sayılır. Bakteriyel hava kirliliği, 1 m3'ünde bulunan toplam mikrop sayısı ile ifade edilir.

Hesaplama. Örneğin 10 dakikada 125 litre hava geçirilmiş, yüzeyde 100 koloni üremiştir.

Çocuk kurumlarında hava, salmonella varlığı açısından kontrol edilir. Bunu yapmak için hava, bizmut-sülfit agar besiyeri içeren bir bardağa aşılanır.

Kontrol soruları

1. Hava, mikroorganizmaların gelişmesi için uygun bir ortam mı?

2. Hava mikroflorası ile ilgili planlı bir çalışma hangi kurumlarda yapılır?

3. Cihaza Krotov'un aparatını söyleyin.

Görev

10 dakikada 250 litre hava geçirildi. 150 koloni büyüdü. 1 m2 havadaki koloni sayısını hesaplayınız.