Пещ на Пастьор. Стерилизация при висока температура. Материал и режим на стерилизация

Стерилизация

Стерилизацията е стерилизация, т.е. пълно освобождаване на предмети заобикаляща средаот микроорганизми и техните спори.

Стерилизацията се извършва по различни начини:

1) физически (излагане на висока температура, UV лъчи, използване на бактериални филтри);

2) химически (използване на различни дезинфектанти, антисептици);

3) биологични (използване на антибиотици).

В лабораторната практика обикновено се използват физични методи за стерилизация.

Възможността и осъществимостта на използването на един или друг метод на стерилизация се определя от характеристиките на материала, който се стерилизира, неговите физични и химични свойства.

Физически методи

Калцинирането в пламъка на горелка или фламбирането е метод на стерилизация, при който обектът е напълно стерилизиран, тъй като както вегетативните клетки, така и микробните спори умират. Обикновено се калцинират бактериологични бримки, шпатули, пипети, предметни стъкла и покривни стъкла и малки инструменти. Ножиците и скалпелите не трябва да се стерилизират чрез нагряване, тъй като под въздействието на огън режещата повърхност става матова.

Стерилизация със суха топлина

Стерилизация със суха топлина или горещ въздух се извършва в пещи на Пастьор (сушене пещи със сухо нагряване). Фурната Pasteur е двустенен шкаф, изработен от топлоустойчиви материали - метал и азбест. Загрейте шкафа с газови горелкиили електрически нагреватели. Шкафовете с електрическо отопление са оборудвани с регулатори за осигуряване на необходимата температура. За контрол на температурата има термометър, поставен в отвора в горната стена на шкафа.

Течности (хранителни среди, изотоничен разтвор на натриев хлорид и др.), Предмети от каучук и синтетични материали не могат да бъдат стерилизирани със суха топлина, тъй като течностите кипят и се изливат, а каучукът и синтетичните материали се стопяват.

Стерилизация чрез варене

Варенето е метод на стерилизация, който гарантира стерилност, при условие че няма спори в стерилизирания материал. Използва се за обработка на инструментални спринцовки, стъкло и метални приборигумени тръби и др. Парна стерилизация под налягане се извършва в автоклав. Този метод на стерилизация се основава на излагане на стерилизираните материали на наситена водна пара при налягане над атмосферното. В резултат на такава стерилизация, както вегетативните, така и споровите форми на микроорганизмите умират с едно третиране. Автоклавът (фиг. 12) представлява масивен котел, покрит отвън с метален корпус, херметически затворен с капак, който е здраво завинтен към котела с шарнирни болтове.

Температурата и продължителността на автоклавиране на хранителните среди се определят от техния състав, посочен в рецептата за приготвяне на хранителната среда. Например, прости среди (месен пептонен агар, месен пептонен бульон) се стерилизират за 20 минути при 120 ° C (1 atm). При тази температура обаче е невъзможно да се стерилизират среди, съдържащи естествени протеини, въглехидрати и други вещества, които лесно се променят чрез нагряване. Средите с въглехидрати се стерилизират фракционно при 100°C или в автоклав при 112°C (0,5 atm) за 10-15 минути. Различни течности, устройства с гумени маркучи, тапи, бактериални свещи и филтри се стерилизират за 20 минути при 120 ° C (1 atm).

Стерилизацията с течаща пара се извършва в апарат на Кох. Този метод се използва в случаите, когато обектът, който се стерилизира, се променя при температура над 100° C. С течаща пара се стерилизират хранителни среди, съдържащи урея, въглехидрати, мляко, картофи, желатин и др.

Апаратът на Кох (бойлер) е метален цилиндър, облицован отвън (за намаляване на топлообмена) с филц или азбест. Цилиндърът е затворен с коничен капак с отвор за излизане на парата. Вътре в цилиндъра има стойка, до нивото на която се налива вода. На стойката се поставя кофа с отвор, в която се поставя материалът за стерилизация. Апаратът на Кох се нагрява с газ или електричество. Времето за стерилизация се отчита от момента на енергично изпускане на пара по краищата на капака и от изхода на парата. Стерилизирайте 30-60 минути. В края на стерилизацията нагряването се спира. Извадете кофата с материал от апарата и я оставете на стайна температурадо следващия ден. Затоплянето се извършва 3 дни подред при температура 100°С за 30-60 минути. Този метод се нарича фракционна стерилизация. При първото нагряване вегетативните форми на микробите умират, докато споровите се запазват. В рамките на един ден спорите успяват да покълнат и да се превърнат във вегетативни форми, които загиват на втория ден от стерилизацията. Тъй като е възможно някои от спорите да не са имали време да покълнат, материалът се съхранява още 24 часа и след това се извършва трета стерилизация. Не се изисква стерилизация с течаща пара в апарат на Кох специален контрол, тъй като стерилността на приготвените хранителни среди е показател за правилната работа на апарата. Можете също така да стерилизирате с течаща пара в автоклав с отвинтен капак и отворен изходен клапан.

Стерилизация чрез ултравиолетово облъчване

Стерилизацията с UV лъчи се извършва с помощта на специални инсталации- бактерицидни лампи. UV лъчите имат висока антимикробна активност и могат да причинят смъртта не само на вегетативни клетки, но и на спори. UV лъчението се използва за стерилизиране на въздуха в болници, операционни зали, детски заведения и др. В микробиологична лаборатория кутията се обработва с UV лъчи преди работа.

Химични методи

Този вид стерилизация се използва ограничено и служи главно за предотвратяване на бактериално замърсяване на хранителна среда и имунобиологични препарати (ваксини и серуми).

Най-често към хранителните среди се добавят вещества като хлороформ, толуен и етер. Ако е необходимо средата да се освободи от тези консерванти, тя се нагрява на водна баня при 56 ° C (консервантите се изпаряват).

За консервиране на ваксини и серуми се използват мертиолат, борна киселина, формалдехид и др.

Биологична стерилизация

Биологичната стерилизация се основава на използването на антибиотици. Този метод се използва за култивиране на вируси.

Б. Подробна технология за производство на суроватка от говеда в кланиците на Лион

Вече е взета кръв от 1000 животни, серумът е бутилиран и раздаден безплатно на почти 20 000 деца.

Така се показва, че промишлено производствое възможна суроватка в кланицата при спазване на асептични правила и санитарни разпоредби.

Предприятието за серотерапия не предоставя допълнителни гаранции - няма право да извършва аутопсия на животното донор.

Технологията, използвана в нашето производство, може да изглежда по-малко асептична от класически метод. Но има голямо предимство в скоростта, тъй като серумът се произвежда изцяло в деня на вземане на кръвта.

Ако сегашните обстоятелства са ни накарали да произвеждаме серума в кланица, то е ясно, че това е временна мярка, тъй като хематогенните и лекарствените серуми могат да се произвеждат само в специализиран институт.

Подбор на животни. В Лион д-р Гиер, главният ветеринарен лекар на кланицата, и д-р Фонтеней, ветеринарният инспектор, сами избират донори измежду добитъка, предназначен да осигури на нашия град месо. Избраното животно се жигосва на дясното рамо, за да се улесни по-нататъшният контрол.

След клането органите на животните се проверяват внимателно. Известно е, че аутопсията е най-надеждният метод за откриване на туберкулоза.

Последващите операции ще покажат, че серумът на болното животно никога не е бил консумиран.

Вземане на кръв от животни. В помещението за вземане на кръв бикът донор е здраво държан от автоматичен ярем.

Ветеринарният лекар дезинфекцира кожата с йод на нивото на шията на животното и прави разрез в областта на югуларната вена със скалпел. Венозната пункция се извършва с троакар, стерилизиран чрез продължително кипене. След като се появи кръв, автоклавиран гумен маркуч се прикрепя към троакара, за да го свърже директно и асептично с дефибринатора.

Технологията на дефибриниране и методът за стерилизиране на дефибринатора са описани по-долу.

От всяко животно се получават 8-10 литра кръв, която се претегля на кантар, разположен под апарата.

Методи за стерилизация

За улесняване на санитарния контрол всеки дефибринатор има етикет с данните на животното донор.

Трябва да се отбележи, че вземането на кръв се извършва асептично поради затворената верига на всички компоненти: троакар, гумен маркуч и дефибринатор, които са предварително стерилизирани.

Етикет с датата на вземане на кръвта придружава взетата кръв от момента на венозна пункция до превръщането й в серум и съхраняването й в хладилници.

Дефибрация на кръвта. В повечето заведения за серотерапия кръвта, излята в стъклени съдове, отделя серума под натиска на товара. При тези условия кръвта, получена за първи път от говеда, съдържа малко серум (приблизително 10%).

Следователно центърът за серотерапия в Лион използва специална технология, давайки 50% от суроватката, а също и за по-кратко време.

Д-р Мериер успя да разработи този метод отчасти след откритията, които направи в Кралския институт в Ротердам и в Серотерапевтичния институт в Милано.

След като кръвта бъде получена от тези институти, тя се дефибринира в стерилни машини, които приличат на бъркалки.

В рамките на 5 минути кръвта се събира в съд, защитен от въздух. Необходимо е стриктно да се спазва времето за дефибрация: ако е недостатъчно, може да настъпи коагулация, а ако е много, може да настъпи хемолиза (поради разкъсване на червените кръвни клетки). Необходимо е да използвате лабораторен часовник, който ви позволява да отбележите точно 15 минути от дефибринацията.

В горната част на фиг. 4 се вижда, че броят на взетите кръв е достигнал 1000, което е записано на емблемата на Центъра.

Центрофугиране.

Веднага след дефибрацията апаратите се пренасят в лабораторията, намираща се на няколко метра от помещението за вземане на кръв. Съдържанието на всеки дефибринатор се обработва отделно, за да може да се отстрани серумът на животно, което се окаже болно.

Кръвта, която не се съсирва след дефибриниране, преминава през сепаратор Alfa Laval (сепаратор за мляко, който сме адаптирали за производството на суроватка).

Под въздействието на центробежна сила кръвта се разделя на равни части: червената част съдържа червени топки, а прозрачната част съставлява серума (фибринът остава върху остриетата на дефибринатора).

От едно животно се получават 8-10 литра кръв или приблизително 4-5 литра серум, който се налива в бутилка от Pyrex, стерилизирана при 180°C.

Към бутилката се поставя етикет за дефибринатор и се попълва карта под същия номер за осигуряване на санитарен контрол.

Към серума е добавен специален антисептик, проектиран така, че да е достатъчно активен, без да нарушава прозрачността и вкуса на серума. За 1 литър серум добавете също 100 ml разтвор, съдържащ 1:1000 формалдехид и 1:5000 синуксол.

(Между приготовленията центрофугата се дезинфекцира старателно с антисептик.)

По принцип червената фракция на кръвта трябва да се връща на месарите за направата на кървавица, но най-често тя остава неизползвана и от нея може да се приготви сироп по описаната по-долу технология.

Особени случаи на приготвяне на кръвен сироп. Сиропът има две предимства: дава възможност да се използва червената част от кръвта, останала след приема на серума, и има приятен вкус, който децата харесват.

Поради липсата на глицерин е трудно да се приготви сироп за дългосрочно съхранение, но можете да направите много активен продукт с вода и да го давате на деца по 2-3 супени лъжици на ден. Добавете 20% към червената част на кръвта пия водаи съхранявайте сиропа в ледници, докато се извършва санитарен контрол.

След това добавете равна част 100% захарен сироп (захарта се взема от картите на групите, за които е предназначен сиропът).

Към сиропа се добавя екстракт от лимон или портокал за неутрализиране на вкуса на кръвта и се налива в бутилки от 250 ml.

Тиндализация на суроватка.

Веднага след центрофугирането, т.е. по-малко от час след вземането на кръв, серумът се лизира при 56°C за един час.

За да направите това, той се спуска във водна баня с автоматично поддържана температура. Тиндализацията при тази температура (при по-висока температура суроватката коагулира) е необходима за частична стерилизация на суроватката, въпреки че скоростта на нейното приготвяне сама по себе си е гаранция за асептика.

Трябва да се отбележи, че всяка петлитрова бутилка е снабдена с оригиналния етикет на дефибринатора, така че номерацията на серума съответства на номерацията на животните донори.

Файл с контролна карта. Картата ви позволява да проверите по всяко време произхода на животното донор, етапите на приготвяне на суроватката, датата на бутилиране, както и разпространението на суроватката.

Санитарен контрол. Докато съдовете се съхраняват в хладилна камера, ветеринарни инспектори са ангажирани със санитарен контрол на животни донори. След клането им се извършва щателна аутопсия, за да се разкрият и най-малките симптоми на туберкулоза.

Ако се открие заболяване, съответният серум може лесно да бъде изтеглен. Известно е, че кръвта на всяко животно се обработва отделно и серумът се съдържа в отделни, номерирани бутилки.

Център за серотерапия Обществен комитетдетска хигиена в кланиците в Лион

Контролен номер …

Говежда суроватка в литри

Картичка и етикет

Горната карта и етикет предотвратяват объркване.

В Лион санитарните мерки са особено строги, тъй като едни и същи ветеринари подбират животните, взимат кръв и проверяват месото.

Стерилизация на оборудване. Животинският серум е отлична среда за размножаване на микроби и може да бъде само частично стерилизиран. При температури над 56° те коагулират и помътняват, ако се добави силен антисептик. Следователно, по време на всички операции по производство на серум се изисква максимална стерилност; оборудването трябва да бъде дезактивирано преди употреба.

Индивидуалните дефибринатори се стерилизират по следния начин: вечерта преди вземането на кръв те се пълнят с антисептичен разтвор, а няколко часа преди вземането на кръв се изпразват от антисептика с помощта на кран, разположен в долната част на устройството. Центрофугите, използвани за производство на серум, също се третират с антисептик, включително между обработката на съдържанието на всеки дефибринатор.

Цялата стъклария, включително петлитровите съдове за съхранение на суроватка, се стерилизират в електрическа фурна при температура 180°C.

Бутилките от 250 ml за серум също се стерилизират на 180°C. За да се опрости операцията, съдовете са разположени в кутии, които се използват при бутилиране и разпространение на обществеността.

доставка на цветя Воскресенск

Стерилизацията е представена от физични, химични, механични и биологични методи и различни методи.

Възможността за използване на определен метод за стерилизация и неговите методи зависи от характеристиките на материала, който ще се стерилизира, неговите физически и химични свойства.

Продължителността на стерилизацията зависи от обекта, който се стерилизира, стерилизиращия агент и неговата доза, температурата и влажността на околната среда.

Метод на физическа стерилизация

Към пътищата физичен методстерилизацията включва сушене, изгаряне и калциниране, варене, пастьоризация и калайдизиране, горещ въздух(суха топлина), ултразвук, ултравиолетова и радиоактивна радиация, високочестотен ток, слънчева светлина.

Най-разпространеният метод за стерилизиране на предмети, които могат да бъдат изложени на високи температури, е стерилизация с огън, горещ въздух и наситена пара под налягане.

Огънят се използва за изгаряне на заразени предмети, които не представляват никаква стойност (ненужни хартии, стари тапети, парцали, боклук), за дезинфекция на храчки на болни от туберкулоза, трупове на хора и животни, умрели от особено опасни инфекции, както и за изгаряне и калциниране на различни предмети.

Изгарянето и калцинирането се използват широко в микробиологичната практика за дезинфекция на инструменти, лабораторна и фармацевтична стъклария.

Калцинирането в пламъка на горелка или фламбирането е метод на стерилизация, при който обектът се стерилизира напълно, тъй като загиват вегетативни клетки, цисти и спори на микроорганизми.

Обикновено примки, шпатули, пипети, предметни стъкла и покривни стъкла, малки инструменти и други замърсени предмети се стерилизират чрез калциниране, ако не могат да се варят. Не се препоръчва да стерилизирате ножици и скалпели чрез нагряване, тъй като режещата повърхност става матова при излагане на огън.

Един от най-простите и най-често срещаните методи за физическа стерилизация, използвани в медицинската практика, е стерилизацията с горещ въздух (суха топлина). Стерилизацията със суха топлина се извършва в сушилни (пещи на Пастьор). Сухият горещ въздух има бактерицидно, вирусоцидно, спороцидно действие и се използва главно за стерилизация на стъклени продукти (лабораторни съдове - чашиПетриеви колби, пипети, епруветки и др.), както и метални изделия, които могат да бъдат стерилизирани с пара под налягане.

Освен това сухата топлина се използва за стерилизиране на предмети от порцелан и топлоустойчиви вещества (талк, бяла глина), както и минерални и растителни масла, мазнини, вазелин, ланолин, восък. Най-ефективният режим за този метод на стерилизация, който осигурява смъртта на вегетативните форми и спорите, е температура 160 - 180 градуса за 15 минути.

Не можете да стерилизирате хранителни продукти, изотоничен разтвор или предмети от каучук и синтетични материали със суха топлина, тъй като течностите кипят и се изливат, а каучукът и синтетичните материали се топят.

Стерилизация наситена парапод налягане - това е най-надеждният и най-често изпробван метод за стерилизиране на превръзки, вода, някои лекарства, хранителни среди, меко оборудване, инструменти, както и за дезинфекция на отпадъчни замърсени материали.

В хирургическата практика дресинг, хирургическите престилки и бельото на оперирания се дезинфекцират с пара в автоклави. Извършва се парна стерилизация под налягане специални устройства– автоклави.

Автоклавирането унищожава напълно всички микроорганизми и спори. Методът за стерилизация под налягане с пара се основава на нагряване на материала с наситена водна пара под налягане над атмосферното. Комбинираното действие на висока температура и пара прави този метод особено ефективен. В този случай както вегетативните клетки, така и микробните спори умират.

Спорите на микробите умират в рамките на 10 минути под въздействието на наситени водни пари, а вегетативните форми умират в рамките на 1 до 4 минути.

Високата бактерицидна сила на наситената пара се дължи на факта, че под въздействието на водни пари под налягане протеините на микробната клетка набъбват и коагулират, в резултат на което микробните клетки умират.

Бактерицидният ефект на наситените водни пари се засилва от свръхналягане.

Стерилизацията в автоклав се извършва при различни режими.

Така прости хранителни среди (месен пептонен агар и месен пептонен бульон) се стерилизират за 20 минути при 120 градуса (1 atm.). Но с този режим е невъзможно да се стерилизират среди, съдържащи протеини, въглехидрати и други вещества, които лесно се променят чрез нагряване.

Средата с въглехидрати се стерилизира в автоклав при 0,5 atm. 10 – 15 минути или частично течаща пара.

С помощта на висока температура можете да унищожите най-устойчивите форми на патогенни микроорганизми (включително спорообразуващи) не само на повърхността на обектите, които се дезинфекцират, но и в тяхната дълбочина.

Това е голямото предимство на високата температура като надеждно средство за стерилизация. Някои предмети обаче се развалят под въздействието на високи температури и в тези случаи е необходимо да се прибегне до други методи и средства за дезинфекция.

Пълна стерилизация на материали и предмети, които не подлежат на стерилизация висока температура, се постига чрез многократна стерилизация с водна пара в апарат на Кох при температура не по-висока от 100 градуса. Този метод се нарича фракционна стерилизация. Свежда се до факта, че останалите неубити спорови форми на микроби, след един ден в термостат при 37 градуса, покълват във вегетативни клетки, чиято смърт настъпва при последваща стерилизация на този обекттечаща пара.

Третирането с течна пара се извършва три пъти в продължение на 30-40 минути. Загряването на материала еднократно при температура под 100 градуса е известно като пастьоризация. Пастьоризацията е предложена от Пастьор и е предназначена главно за унищожаване на предимно неспорови микроорганизми. Пастьоризацията се извършва при 60 - 70 градуса за 15 до 30 минути, при 80 градуса за 10 до 15 минути.

В микробиологичната практика пастьоризацията семенен материалчесто се използва за изолиране на чисти култури от спорообразуващи микроорганизми и за определяне на способността на микроорганизмите да образуват спори.

За течности, които губят вкус и други ценни качества при излагане на високи температури (мляко, горски плодове и плодови сокове, бира, хранителни среди, съдържащи въглехидрати или урея и др.), Стерилизацията с течаща пара се извършва при 50 - 60 градуса за 15 - 33333330 минути или при 70 - 80 градуса за 5 - 10 минути. В този случай микробите със средна устойчивост умират, докато по-устойчивите микроби и спори се запазват.

Фракционната 5-6-кратна стерилизация при 60 градуса за 1 час се нарича тиндализация.

Много медицински продукти, направени от полимерни материали, не издържат на стерилизация метод на параспоред общоприетите режими. За много продукти, поради характеристиките на течностите, които съдържат (консерванти, лекарства и други продукти), е невъзможно да се стерилизират по общоприети методи и методи. За такива продукти се разработват индивидуални режими на стерилизация, за да се осигури надеждна стерилизация на обектите.

По този начин стерилизацията на ротора за разделяне на кръвта на фракции се извършва с водна пара при температура 120 градуса за 45 минути.

Стерилността на контейнерите с консерванти се постига при 110 градуса за 60 минути.

Кипенето е метод на стерилизация, използван за дестерилизиране на спринцовки за многократна употреба, хирургически инструменти, гумени тръби, стъклени и метални прибори.

Стерилизация чрез кипене се извършва в стерилизатори. Споровите форми във вряща вода умират след 20 - 30 минути. Кипенето в продължение на 45 минути се използва широко за дезинфекция на секрети и други инфекциозни материали, бельо, съдове, играчки и предмети за грижа за пациентите.

Топла вода (60 - 100 градуса) с перилни препаратиизползвани за пране и почистване механично отстраняванезамърсители и микроорганизми.

Повечето вегетативни клетки умират при 70 градуса след 30 минути.

Филтруващата стерилизация се използва в случаите, когато субстратите не могат да издържат на нагряване, по-специално за среди, съдържащи протеини, серуми, някои антибиотици, витамини и летливи вещества. Тази техника се използва доста широко за стерилизиране на културална течност, когато е необходимо тя да се освободи от микробни клетки, но да се запазят непроменени всички метаболитни продукти, които съдържа.

Методът включва филтриране на течности през специални филтри, които имат фино порести прегради и следователно задържат микробните клетки.

Двата най-широко използвани типа филтри са мембранните филтри и филтрите на Seitz.

Мембранните филтри се изготвят от колодий, ацетат, целулоза и други материали.

Филтрите Seitz са направени от смес от азбест и целулоза.

Освен това за стерилизация се използват филтри от каолин с добавка. кварцов пясък, от почва за инфузор и от други материали („свещи” на Chamberlan, Berkfeld).

Мембранните и азбестовите филтри са предназначени за еднократна употреба.

При ултравиолетово облъчване бактерицидният ефект се осигурява от лъчи с дължина 200 - 450 nm, чийто източник са бактерицидни лампи.

Стерилизацията се извършва с помощта на бактерицидни лампи ултравиолетови лъчивъздух в лечебни превантивни институции, кутии на микробиологични лаборатории, в предприятия Хранително-вкусовата промишленост, в кутии за производство на ваксини и серуми, в операционни, манипулационни, детски заведения и др.

Ултравиолетовите лъчи имат висока антимикробна активност и могат да причинят смъртта не само на вегетативните клетки, но и на техните спори.

Слънчевата светлина причинява смъртта на микроорганизмите в резултат на действието ултравиолетово облъчванеи сушене.

Сушенето със слънчева светлина има вредно въздействие върху много видове микроорганизми, но ефектът му е повърхностен и следователно слънчевата светлина играе спомагателна роля в практиката на стерилизация.

IN напоследъкпри лечение на рани и изгаряния се използват покрития от синтетични и естествени полимери под формата на гелове.

Полимерните антисептични филми се използват широко за локално лечение на рани и изгаряния. Те съдържат такива широкоспектърни антимикробни агенти като катапол, диоксидин, син йод, както и сорбитол, съдържащ глутаралдехид. За стерилизиране на тези филми се използва йонизиращо лъчениепри доза 20,0 kGy. По време на промишленото производство на полимерни антисептични филми и сорбенти, тяхната стерилност при този режим на стерилизация е напълно осигурена.

Радиоактивното лъчение убива всички видове микроорганизми, както във вегетативна, така и в спорова форма. Използва се широко за стерилизация в предприятия, произвеждащи стерилни продукти и стерилни медицински изделия за еднократна употреба, за дезинфекция Отпадъчни водии суровини от животински произход.

Механичен методстерилизация

Методите за механична стерилизация премахват микробите от повърхността на предметите. Те включват измиване, изтърсване, метене, мокро избърсване, проветряване, проветряване, прахосмукачка, миене.

Метод на химическа стерилизация

Сега пластмасите се използват все повече в медицинската практика.

Използват се в стоматологията, лицево-челюстната хирургия, травматологията, ортопедията и хирургията. Повечето пластмаси не могат да издържат на методите за топлинна стерилизация на пара под налягане и суха топлина (сух нагрят въздух). Разтворите на алкохол, диоксид и троен разтвор, използвани за стерилизиране на такива предмети, не гарантират стерилността на обработваните продукти.

Ето защо за стерилизиране на пластмасови продукти се използват газови и радиационни методи, както и разтвори на химикали.

Въвеждане в практиката на лечебните заведения голямо числопродукти, изработени от термолабилни материали, допринасят за въвеждането на радиация, газови методидезинфекция и стерилизация с дезинфекционни разтвори.

При химическа стерилизацияизползват газове и агенти от различни химични групи (пероксид, фенол, халоген, алдехиди, основи и киселини, повърхностно активни вещества и др.). За ежедневна употреба се произвеждат детергенти, почистващи, избелващи и други препарати, които имат антимикробен ефект поради въвеждането на различни химически вещества.

Тези препарати се използват за почистване и дезинфекция на санитарни помещения техническо оборудване, съдове, бельо и др.

Формалдехидните пари (vaporform) могат да се използват в лечебни заведенияза стерилизация метални изделияза медицински цели (скалпели, игли, пинсети, сонди, скоби, куки, резачки за тел и др.).

Преди стерилизация с формалдехидни пари, продуктите трябва да бъдат подложени на предварително стерилизационно почистване и старателно изсушени.

Когато се стерилизира по какъвто и да е начин химическиправилата за обработка на конкретен обект зависят от характеристиките на обекта, който се дезинфекцира, устойчивостта на микробите и характеристиките на свойствата химическа подготовка, околна температура, влажност и други фактори.

По този начин стерилността на металните инструменти се постига, като се държат в запечатана камера с пара в продължение на пет часа при температура най-малко 20 градуса и относителна влажност 95 - 98%, при температура 15 градуса, пълна стерилност на тези предмети се постига едва след 16 часа.

Спороцидната активност на глутаралдехида зависи от температурата. Оптималното му действие се проявява при температура 15 - 25 градуса. С повишаване на температурата спороцидната активност на това лекарство намалява.

Стерилизация химичен методИзползването е малко ограничено. Най-често този метод се използва за предотвратяване на бактериално замърсяване на хранителна среда и имунобиологични препарати (ваксини и серуми). Най-често към хранителните среди се добавят вещества като хлороформ, толуен и етер. Ако е необходимо средата да се освободи от тези консерванти, тя се загрява на водна баня при 56 градуса и консервантите се изпаряват.

За консервиране на ваксини или серуми се използва мертиолат, борна киселина, формалин.

Биологичен методстерилизация

Биологичната стерилизация се основава на използването на антибиотици.

Този метод се използва широко при култивирането на вируси.

Стерилизацията (от лат. sterilis - стерилен) включва пълното обезвреждане на микробите върху обектите, които се обработват.

Фурна Пастьор - сухотоплинна стерилизация.

Има три основни метода за стерилизация: топлинна, радиационна, химическа.

йод.

Термичната стерилизация се основава на чувствителността на микробите към висока температура.

При 60 °C и наличие на вода настъпва денатурация на протеини, включително ензими, в резултат на което загиват вегетативните форми на микробите. Спорите, съдържащи много малко количество свързана вода и с плътна обвивка, се инактивират при 160-170 °C. За топлинна стерилизация се използват предимно суха топлина и пара под налягане.
Стерилизацията със суха топлина се извършва в пещи със суха топлина или пещи на Пастьор. Фурната на Пастьор е плътно затворен метален шкаф, отопляван с електричество и оборудван с термометър.

Дезинфекцията на материала в него става при 160-170 °C за 60-120 минути. Недостатъкът на този метод е, че само някои стерилизируеми предмети, като например лабораторно стъкло, могат да издържат на толкова високи температури.
Най-универсалният метод за стерилизация е обработката с пара под налягане в автоклави, в които се стерилизират превръзки, бельо, много инструменти, хранителни среди, разтвори, инфекциозен материал и др.

Автоклавът е метален цилиндър със здрави стени, херметически затворен, състоящ се от водно-парна и стерилизираща камера. Устройството е оборудвано с манометър, термометър и други контролни устройства. В автоклава се създава повишено налягане, което води до повишаване на точката на кипене на водата. Така при 0,5 atm точката на кипене е 80 °C, при 1 atm - 100 °C, при 2 atm - 121 °C и при 3 atm - 136 °C.

Поради факта, че в допълнение към високата температура, парата действа върху микроорганизмите, спорите умират вече при 120 ° C. Най-често срещаният режим на работа на автоклава е 2 atm, 121 °C, 15-20 минути. Времето за стерилизация намалява с увеличаване атмосферно налягане, и следователно точката на кипене. Микроорганизмите умират за няколко секунди, но материалът се обработва по-дълго време, тъй като, първо, температурата вътре в материала, който се стерилизира, трябва да е висока и, второ, има така нареченото безопасно поле, предназначено за евентуално отклонение от зададените параметри при работа в автоклав.

Етикети: тяло, растеж, стерилизация, ензим

Термостат– устройство за поддържане на постоянна температура – ​​използва се за отглеждане на култури от микроорганизми. Това е шкаф (Фигура 1), в който се поддържа дълго време определена температура. Оптимална температураза размножаване на много микроорганизми 37 ºС. Предлагат се термостати за сух въздух и вода.

Сушилен шкаф (фурна Пастьор)използва се за стерилизация със суха топлина на съдове, оборудване и сухи материали, като нишесте, креда (Фигура 2). Материалът за стерилизация се увива предварително в хартия и се поставя в шкаф, така че да не се допира до стените. Стерилизацията се извършва при температура 160 ºС за два часа. Повишаването на температурата над 180 ºС не се препоръчва: памучните тапи и хартията започват да се развалят (стават кафяви, стават крехки). Стерилизираният материал се отстранява, след като шкафът е изключен и охладен, за предпочитане когато температурата в шкафа е равна на стайната.

Апарат за преброяване на колонии(Фигура 3) - полуавтоматичен брояч, оборудван с електрическа писалка с пружинно устройство, предназначен за преброяване на бактериални колонии в петриеви панички. Чаша
Петри с бактериални колонии се поставя с главата надолу върху сканиращо стъкло. Лекият натиск на електрическата писалка върху областта на дъното на петриевото блюдо, съответстваща на позицията на колонията, оставя следа върху стъклото. В този случай държачът се издига, веригата се затваря и показанията на измервателния уред се увеличават с единица. Броят на бактериалните колонии се преброява чрез изчисляване на разликата в показанията на импулсния брояч преди началото на броенето и след края му.

Автоклав(Фигура 4) е дебелостенен апарат, предназначен за стерилизиране на съдове и хранителна среда с пара под налягане. Това е запечатан котел с двойни метални стени и капак. Пространството между стените (камерата за водна пара) се запълва с вода. Интериор(стерилизационна камера) е оборудвана с манометър, предпазни клапани и кран за източване на вода и пара. За да се създаде плътно уплътнение, автоклавът е плътно затворен с капак с гумено уплътнение. Използва се за стерилизиране на хранителна среда под налягане от 0,5 до 1,0 MPa за 20...30 минути.

1 – тяло; 2 – термометър; 1 – капак; 2 – тяло;

3 – врата; 4 – потенциометър; 3 – скоростна кутия; 4 – блок за управление;

5 – превключвател; 6 – лампа; 5 – маркировка; 6 – термометър

7 – вентилационни отвори

Фигура 1 - Термостат Фигура 2 - Сушилен шкаф

1 – маса за петриево блюдо; 2 – писалка с пружинно устройство;

3 – брояч индикатор; 4 – превключвател за включване на импулсния брояч; 5 – превключвател за включване на лампата за осветление на измервателния уред

Фигура 3 - Устройство за преброяване на колонии от микроорганизми

Стерилизация със суха топлина или горещ въздух се извършва в пещи на Пастьор (сушилни). Фурната Pasteur е двустенен шкаф, изработен от топлоустойчиви материали - метал и азбест. Загрейте шкафа с помощта на газови горелки или електрически нагреватели. Шкафовете с електрическо отопление са оборудвани с регулатори за осигуряване на необходимата температура. За контрол на температурата има термометър, поставен в отвора в горната стена на шкафа.

Сухата топлина се използва за стерилизиране на лабораторни стъклени съдове. Съдовете, подготвени за стерилизация, се зареждат свободно във фурната, за да се осигури равномерно и надеждно нагряване на материала, който се стерилизира. Затворете плътно вратата на шкафа, включете нагревателя, доведете температурата до 160-165 ° C и стерилизирайте при тази температура за 1 час.В края на стерилизацията изключете отоплението, но не отваряйте вратата на шкафа, докато не фурната е изстинала; В противен случай студеният въздух, навлизащ в шкафа, може да причини пукнатини в горещите съдове за готвене.

Стерилизацията във фурната на Пастьор може да се извърши при различни температурни условияи експозиция (време на стерилизация) (Таблица 1).

Таблица 1. Режим на стерилизация

Течности (хранителни среди, изотоничен разтвор на натриев хлорид и др.), Предмети от каучук и синтетични материали не могат да бъдат стерилизирани със суха топлина, тъй като течностите кипят и се изливат, а каучукът и синтетичните материали се стопяват.

За да се контролира стерилизацията в пещ на Пастьор, копринените нишки се навлажняват в култура от спорообразуващи бактерии, изсушават се, поставят се в стерилна паничка на Петри и се поставят в пещ на Пастьор. Стерилизацията се извършва при температура 165°С за 1 час (за контрол част от конците се оставят на стайна температура). След това стерилизираните и контролните нишки се поставят върху повърхността на агара в петриево блюдо или се поставят в епруветки с бульон и се инкубират в термостат при 37°С в продължение на 2 дни. При правилна работа на пещта на Пастьор няма да има растеж в епруветки или блюда с хранителни среди, в които са поставени стерилизирани нишки, тъй като бактериалните спори ще умрат, докато бактериалните спори върху нишки, които не са стерилизирани (контрола), ще покълнат върху хранителни вещества медийният растеж ще бъде отбелязан.

За да определите температурата във фурната на Пастьор, можете да използвате захароза или гранулирана захар, която се карамелизира при температура 165-170 ° C.

Подготовка на лабораторна стъклария за стерилизация в пещ на Пастьор. Лабораторна стъклария(Петриеви панички, градуирани и пастьорови пипети, бутилки, колби, епруветки) преди стерилизация трябва да бъдат старателно измити, подсушени и опаковани в хартия, в противен случай след стерилизация може отново да се заразят с въздушни бактерии.

Петриевите блюда се опаковат в хартия едно или повече парчета наведнъж или се поставят в специални метални кутии.

В горните краища на пипетите се поставят памучни тампони, за да се предотврати навлизането на тестовия материал в устата. Градуираните пипети се увиват в дълги ивици хартия с ширина 4-5 см. Обемът на увитата пипета се отбелязва върху хартията. В моливниците градуираните пипети се стерилизират без допълнително опаковане в хартия.

Забележка. Ако градуирането на пипетите е слабо видимо, то се възстановява преди стерилизация. Нанесете върху пипета маслена бояи, без да се оставя боята да изсъхне, в нея се втрива прах от бариев сулфат с кърпа. След това отстранете с парцал излишната боя, която остава само в прорезите. Обработените по този начин пипети трябва да се изплакнат.

Острите краища на пастьоровите пипети се затварят в пламъка на горелка и се увиват в хартия, по 3-5 парчета наведнъж. Пипетите на Пастьор трябва да се опаковат внимателно, за да не се счупят запечатаните краища на капилярите.

Флакони, колби, епруветки се затварят с памучно-марлени запушалки. Корковата тапа трябва да влезе в гърлото на съда на 2/3 от дължината му, не много стегнато, но и не хлабаво. Върху запушалките на всеки съд (с изключение на епруветките) се поставя хартиена капачка. Епруветките се завързват една в друга в групи от 5-50 и се увиват с хартия.

Забележка. При високи температури хартията, в която са опаковани чашките и пипетите, и памучната вата пожълтяват и дори могат да се овъглят, така че всеки нов сортхартията, получена от лабораторията, трябва да бъде тествана при приетите температурни условия.

Контролни въпроси

1. Какво се разбира под термина стерилизация?

2. Как се извършва стерилизацията?

3. Какво се стерилизира чрез калциниране на огън?

4. Опишете устройството и режима на работа на пещта на Пастьор.

5. Какво се стерилизира във фурната на Пастьор?

6. Как се подготвят стъклените съдове за стерилизация?

7. Защо хранителните среди и гумените предмети не могат да бъдат стерилизирани в пещ на Пастьор?

Упражнение

Подгответе петриеви панички, градуирани пипети, пипети на Пастьор, епруветки, колби и флакони за стерилизация.

Стерилизацията е представена от физични, химични, механични и биологични методи и различни методи. Възможността за използване на определен метод на стерилизация и неговите методи зависи от характеристиките на материала, който ще се стерилизира, неговите физични и химични свойства. Продължителността на стерилизацията зависи от обекта, който се стерилизира, стерилизиращия агент и неговата доза, температурата и влажността на околната среда.

Метод на физическа стерилизация Методите на физическия метод на стерилизация включват сушене, изгаряне и калциниране, кипене, пастьоризация и тиндализация, горещ въздух (суха топлина), ултразвук, ултравиолетово и радиоактивно лъчение, високочестотен ток, слънчева светлина. Най-разпространеният метод за стерилизиране на предмети, които могат да бъдат изложени на високи температури, е стерилизация с огън, горещ въздух и наситена пара под налягане. Огън се използва за изгаряне на заразени предмети, които не представляват никаква стойност (ненужни хартии, стари тапети, парцали, боклук), за дезинфекция на храчки на болни от туберкулоза, трупове на хора и животни, умрели от особено опасни инфекции, както и за горят и калцинират различни предмети. Изгарянето и калцинирането се използват широко в микробиологичната практика за дезинфекция на инструменти, лабораторна и фармацевтична стъклария. Калцинирането в пламъка на горелка или фламбирането е метод на стерилизация, при който обектът се стерилизира напълно, тъй като загиват вегетативни клетки, цисти и спори на микроорганизми. Обикновено примки, шпатули, пипети, предметни стъкла и покривни стъкла, малки инструменти и други замърсени предмети се стерилизират чрез калциниране, ако не могат да се варят. Не се препоръчва да стерилизирате ножици и скалпели чрез нагряване, тъй като режещата повърхност става матова при излагане на огън. Един от най-простите и най-често срещаните методи за физическа стерилизация, използвани в медицинската практика, е стерилизацията с горещ въздух (суха топлина). Стерилизацията със суха топлина се извършва в сушилни (пещи на Пастьор). Сухият горещ въздух има бактерицидно, вирусоцидно, спороцидно действие и се използва предимно за стерилизация на стъклени изделия (лабораторна стъклария – петриеви панички, колби, пипети, епруветки и др.), както и на метални изделия, които могат да се стерилизират с пара. под напрежение. Освен това сухата топлина се използва за стерилизиране на изделия от порцелан и топлоустойчиви вещества (талк, бяла глина), както и минерални и растителни масла, мазнини, вазелин, ланолин и восък. Най-ефективният режим за този метод на стерилизация, който осигурява смъртта на вегетативните форми и спорите, е температура 160 - 180 градуса за 15 минути. Не можете да стерилизирате хранителни продукти, изотоничен разтвор или предмети от каучук и синтетични материали със суха топлина, тъй като течностите кипят и се изливат, а каучукът и синтетичните материали се топят. Стерилизацията с наситена пара под налягане е най-надеждният и най-често използван метод за стерилизиране на превързочни материали, вода, някои лекарства, хранителни среди, меко оборудване, инструменти, както и за дезинфекция на замърсен отпадъчен материал. В хирургическата практика превръзките, хирургическите халати и бельото на оперирания пациент се дезинфекцират с помощта на пара в автоклави. Парна стерилизация под налягане се извършва в специални устройства - автоклави. Автоклавирането унищожава напълно всички микроорганизми и спори. Методът за стерилизация под налягане с пара се основава на нагряване на материала с наситена водна пара под налягане над атмосферното. Комбинираното действие на висока температура и пара прави този метод особено ефективен. В този случай както вегетативните клетки, така и микробните спори умират. Спорите на микробите умират в рамките на 10 минути под въздействието на наситени водни пари, а вегетативните форми умират в рамките на 1 до 4 минути. Високата бактерицидна сила на наситената пара се дължи на факта, че под въздействието на водни пари под налягане протеините на микробната клетка набъбват и коагулират, в резултат на което микробните клетки умират. Бактерицидният ефект на наситените водни пари се засилва от свръхналягане. Стерилизацията в автоклав се извършва при различни режими. Така прости хранителни среди (месен пептонен агар и месен пептонен бульон) се стерилизират за 20 минути при 120 градуса (1 atm.). Но с този режим е невъзможно да се стерилизират среди, съдържащи протеини, въглехидрати и други вещества, които лесно се променят чрез нагряване. Средата с въглехидрати се стерилизира в автоклав при 0,5 atm. 10 – 15 минути или частично течаща пара. С помощта на висока температура можете да унищожите най-устойчивите форми на патогенни микроорганизми (включително спорообразуващи) не само на повърхността на обектите, които се дезинфекцират, но и в тяхната дълбочина. Това е голямото предимство на високата температура като надеждно средство за стерилизация. Някои предмети обаче се развалят под въздействието на високи температури и в тези случаи е необходимо да се прибегне до други методи и средства за дезинфекция. Пълна стерилизация на материали и предмети, които не позволяват използването на високотемпературна стерилизация, се постига чрез многократна стерилизация с водна пара в апарат на Кох при температура не по-висока от 100 градуса. Този метод се нарича фракционна стерилизация. Свежда се до факта, че останалите неубити спорови форми на микроби, след един ден в термостат при 37 градуса, покълват във вегетативни клетки, чиято смърт настъпва при последващата стерилизация на този обект с течаща пара. Третирането с течна пара се извършва три пъти в продължение на 30-40 минути. Загряването на материала еднократно при температура под 100 градуса е известно като пастьоризация. Пастьоризацията е предложена от Пастьор и е предназначена главно за унищожаване на предимно неспорови микроорганизми. Пастьоризацията се извършва при 60 - 70 градуса за 15 до 30 минути, при 80 градуса за 10 до 15 минути. В микробиологичната практика пастьоризацията на посевен материал често се използва за изолиране на чисти култури от спорообразуващи микроорганизми и за идентифициране на способността на микроорганизмите да образуват спори. За течности, които губят вкус и други ценни качества при излагане на високи температури (мляко, горски плодове и плодови сокове, бира, хранителни среди, съдържащи въглехидрати или урея и др.), Стерилизацията с течаща пара се извършва при 50 - 60 градуса за 15 - 33333330 минути или при 70 - 80 градуса за 5 - 10 минути. В този случай микробите със средна устойчивост умират, докато по-устойчивите микроби и спори се запазват. Фракционната 5-6-кратна стерилизация при 60 градуса за 1 час се нарича тиндализация. Много медицински продукти, изработени от полимерни материали, не могат да издържат на стерилизация с пара съгласно общоприетите режими. За много продукти, поради характеристиките на течностите, които съдържат (консерванти, лекарства и други продукти), е невъзможно да се стерилизират по общоприети методи и методи. За такива продукти се разработват индивидуални режими на стерилизация, за да се осигури надеждна стерилизация на обектите. По този начин стерилизацията на ротора за разделяне на кръвта на фракции се извършва с водна пара при температура 120 градуса за 45 минути. Стерилността на контейнерите с консерванти се постига при 110 градуса за 60 минути. Кипенето е метод на стерилизация, използван за дестерилизиране на спринцовки за многократна употреба, хирургически инструменти, гумени тръби, стъклени и метални прибори. Стерилизация чрез кипене се извършва в стерилизатори. Споровите форми във вряща вода умират след 20 - 30 минути. Кипенето в продължение на 45 минути се използва широко за дезинфекция на секрети и други инфекциозни материали, бельо, съдове, играчки и предмети за грижа за пациентите. При пране и почистване се използва гореща вода (60 - 100 градуса) с препарати за механично отстраняване на замърсявания и микроорганизми. Повечето вегетативни клетки умират при 70 градуса след 30 минути. Филтруващата стерилизация се използва в случаите, когато субстратите не могат да издържат на нагряване, по-специално за среди, съдържащи протеини, серуми, някои антибиотици, витамини и летливи вещества. Тази техника се използва доста широко за стерилизиране на културална течност, когато е необходимо тя да се освободи от микробни клетки, но да се запазят непроменени всички метаболитни продукти, които съдържа. Методът включва филтриране на течности през специални филтри, които имат фино порести прегради и следователно задържат микробните клетки. Двата най-широко използвани типа филтри са мембранните филтри и филтрите на Seitz. Мембранните филтри се изготвят от колодий, ацетат, целулоза и други материали. Филтрите Seitz са направени от смес от азбест и целулоза. Освен това за стерилизация се използват филтри от каолин с добавка на кварцов пясък, инфузорна пръст и други материали („свещи“ на Chamberlan, Berkfeld). Мембранните и азбестовите филтри са предназначени за еднократна употреба. При ултравиолетово облъчване бактерицидният ефект се осигурява от лъчи с дължина 200 - 450 nm, чийто източник са бактерицидни лампи. С помощта на бактерицидни лампи въздухът се стерилизира с ултравиолетови лъчи в лечебни и профилактични институции, кутии на микробиологични лаборатории, предприятия на хранително-вкусовата промишленост, в кутии за производство на ваксини и серуми, в операционни, манипулационни зали, детски заведения и др. Ултравиолетовите лъчи имат висока антимикробна активност и могат да причинят смъртта не само на вегетативните клетки, но и на техните спори. Слънчевата светлина причинява смъртта на микроорганизмите в резултат на ултравиолетово облъчване и изсушаване. Сушенето със слънчева светлина има вредно въздействие върху много видове микроорганизми, но ефектът му е повърхностен и следователно слънчевата светлина играе спомагателна роля в практиката на стерилизация. Напоследък при лечението на рани и изгаряния се използват покрития от синтетични и естествени полимери под формата на гелове. Полимерните антисептични филми се използват широко за локално лечение на рани и изгаряния. Те съдържат такива широкоспектърни антимикробни агенти като катапол, диоксидин, син йод, както и сорбитол, съдържащ глутаралдехид. За стерилизиране на тези филми се използва йонизиращо лъчение в доза от 20,0 kGy. По време на промишленото производство на полимерни антисептични филми и сорбенти, тяхната стерилност при този режим на стерилизация е напълно осигурена. Радиоактивното лъчение убива всички видове микроорганизми, както във вегетативна, така и в спорова форма. Използва се широко за стерилизация в предприятия, произвеждащи стерилни продукти и стерилни медицински изделия за еднократна употреба, за дезинфекция на отпадни води и суровини от животински произход.

Метод на механична стерилизация Методите за механична стерилизация премахват микробите от повърхността на предметите. Те включват измиване, изтърсване, метене, мокро избърсване, проветряване, проветряване, прахосмукачка, миене.

Метод на химическа стерилизация Сега пластмасите се използват все повече в медицинската практика. Използват се в стоматологията, лицево-челюстната хирургия, травматологията, ортопедията и хирургията. Повечето пластмаси не могат да издържат на методите за топлинна стерилизация на пара под налягане и суха топлина (сух нагрят въздух). Разтворите на алкохол, диоксид и троен разтвор, използвани за стерилизиране на такива предмети, не гарантират стерилността на обработваните продукти. Ето защо за стерилизиране на пластмасови продукти се използват газови и радиационни методи, както и разтвори на химикали. Въвеждането на голям брой продукти, изработени от термолабилни материали в практиката на лечебните заведения, допринася за въвеждането на радиационни и газови методи за дезинфекция и стерилизация с дезинфекционни разтвори. По време на химическата стерилизация се използват газове и агенти от различни химични групи (пероксидни, фенолни, халогеносъдържащи, алдехиди, основи и киселини, повърхностно активни вещества и др.). За ежедневна употреба се произвеждат перилни, почистващи, избелващи и други препарати, които имат антимикробен ефект поради въвеждането на различни химикали в състава им. Тези препарати се използват за почистване и дезинфекция на санитарно оборудване, съдове, спално бельо и др. Формалдехидната пара (парообразна форма) може да се използва в лечебни заведения за стерилизиране на метални медицински изделия (скалпели, игли, пинсети, сонди, скоби, кукички, резачки за тел, и т.н.). Преди стерилизация с формалдехидни пари, продуктите трябва да бъдат подложени на предварително стерилизационно почистване и старателно изсушени. При стерилизация по който и да е химичен метод процедурата за обработка на конкретен обект зависи от характеристиките на обекта, който се дезинфекцира, устойчивостта на микробите, характеристиките на свойствата на химикала, температурата на околната среда, влажността и други фактори. По този начин стерилността на металните инструменти се постига след пет часа съхранение в запечатана камера с пара при температура най-малко 20 градуса и относителна влажност 95 - 98%; при температура 15 градуса пълна стерилност на тези предмети се постига само след 16 часа. Спороцидната активност на глутаралдехида зависи от температурата. Оптималното му действие се проявява при температура 15 - 25 градуса. С повишаване на температурата спороцидната активност на това лекарство намалява. Химическата стерилизация се използва в известна ограничена степен. Най-често този метод се използва за предотвратяване на бактериално замърсяване на хранителна среда и имунобиологични препарати (ваксини и серуми). Най-често към хранителните среди се добавят вещества като хлороформ, толуен и етер. Ако е необходимо средата да се освободи от тези консерванти, тя се загрява на водна баня при 56 градуса и консервантите се изпаряват. За запазване на ваксини или серуми се използват мертиолат, борна киселина и формалин.

Метод на биологична стерилизация Биологичната стерилизация се основава на използването на антибиотици. Този метод се използва широко при култивирането на вируси.

1. Фламбиране(от лат. flamma - пламък и фр. flamb é - изгаряне) - стерилизация чрез калциниране на малки метални или стъклени предмети в пламък. По този начин се стерилизират бактериологични бримки, метални пинсети, стъклени шпатули и тръбички, предметни стъкла и др.Температурата на пламъка е около 1000ºC. При калциниране всички микроорганизми (вегетативни и спорови форми) изгарят. Това е бърз и надежден метод за стерилизация.

2. кипене. Е един от най прости начинистерилизация. Извършва се в стерилизатор - метален правоъгълна кутияс капак и мрежа на дъното за поставяне на стерилизирани предмети. Налейте вода и я загрейте до кипене (на електричество или на огън). Варенето може да продължи от 15-30 минути до 2 часа при температура около 100 ºС. Стерилизирайте малки метални или стъклени предмети - спринцовки, игли, стъклени тръби и др. В този случай загиват вегетативни форми на микроорганизми и някои спори. Практикува се и попарване на стерилизирания материал с вряща вода.

3. Стерилизация със суха топлина.Произвежда се с горещ въздух в пещ на Пастьор или сушилен шкаф. Фурната на Пастьор е шкаф с двойни стени, облицован с азбест отвън за топлоизолация. Вътре в шкафа има метални рафтовес отвори, върху които се поставя материалът за стерилизация. Електрическо отопление. Стерилизацията се извършва при температура 160-180 ºС за 1-2 часа от момента на достигане на тези температури (контролира се с термометър). Сухата топлина се използва за стерилизиране предимно на стъклени съдове - петриеви панички, пипети, шпатули (увити в хартия), както и епруветки и колби. Тази техника е надеждна - неспоровите и споровите форми на микроорганизмите умират. Опакован в хартия и стерилизиран, материалът може да се съхранява.

4. Стерилизация с течаща пара. Провежда се горещо влажен въздухв апарата на Кох. Апаратът на Кох (котел) е метален цилиндър, който може да бъде на крака и покрит с линолеум. В апарата се налива толкова вода, че да не стига до перваза, върху който се поставя метален кръг с дупки и върху него материалът за стерилизация. Апаратът се затваря плътно с коничен капак с отвор в средата за излизане на парата и се нагрява на огън. Когато водата заври, гореща водна пара с температура около 100 ºС ще „потече” със силна струя от отвора на капака. От този момент се отбелязва началният час на стерилизацията. Стерилизацията с течаща пара продължава от 45 минути до 1,5 часа в зависимост от обема на материала, който се стерилизира. Стерилизирайте хранителни среди, които не могат да се нагряват над 100 ºС, например MPG (при температури над 100 ºС се втечняват и не се втвърдяват). Този метод на стерилизация не е напълно надежден - само вегетативните форми на микроорганизмите умират напълно, но спорите се запазват. За постигане на пълна стерилизация на средата в апарата на Кох се използва фракционна стерилизация.

5. Парна стерилизация под налягане (автоклавиране).Извършва се с наситена водна пара в автоклав. Има автоклав различни дизайни. Вертикалният автоклав е масивен двустенен котел, обграден отвън с метален корпус, с тежък шарнирен капак, който е здраво завинтен към котела. В долната част на котела има фуния и кран, през който се налива вода свободно пространствомежду вътрешния котел и корпуса. Материалът за стерилизация се поставя на дъното на котела, капакът се завинтва добре и се включва електрическото отопление. Когато водата заври, парата преминава във вътрешния котел. Налягането в автоклава се повишава и в същото време температурата се повишава. Когато манометърът покаже, че налягането в котела е достигнало зададената стойност, отбележете началния час на стерилизацията. Налягането се поддържа на определено ниво с помощта на предпазен клапан.

Обикновено в лабораторната практика стерилизацията под налягане се извършва при 1,5-2 atm и температура около 115-120 ºС за

20-30 мин. След изтичане на времето за стерилизация нагряването се спира, парният клапан се отваря и парата се изпуска. Стерилизирайте с пара под налягане хранителни среди MPB, MPA, стъклени съдове с вода, превързочен материал, хирургически инструментиАвтоклавирането е бърз и надежден метод за стерилизация, който убива всички форми на микроорганизми, дори и най-устойчивите спори.

6. Пастьоризация.Този метод на частична стерилизация е кръстен на френския учен Л. Пастьор, който го предлага. Методът е, че течността, излята в стерилен съд, се нагрява на водна баня при температура 60-90 ºС за

10-30 мин. Подходящ за течни среди, които променят своите физикохимични характеристикипри високи температури. Пастьоризират се мляко, сметана, вино, бира, сокове и др.. В същото време витамините и вкусови качествапродукти. Пастьоризирани продукти дългосрочно съхранениене подлежат, тъй като при този метод на стерилизация умират само вегетативни форми на микроорганизми и остават спори. В лабораторната практика този метод се използва главно за разделяне на спорообразуващите видове от неспорообразуващите.

7. Фракционна стерилизация. Основава се на обработване на материала за стерилизация на няколко етапа. Фракционното може да бъде варене или стерилизация с течаща пара в апарат на Кох. Обикновено стерилизацията се извършва в продължение на 3 дни по 30 минути дневно, като се използва един от посочените методи, като в почивките средата се оставя на стайна температура. Това се прави, за да се провокира растежа на спорите във вегетативни форми и тяхното унищожаване при последващи обработки, което повишава надеждността на тези техники.

8. Тиндализация.Това е вид фракционна стерилизация (фракционна пастьоризация). Техниката е кръстена на английския учен Д. Тиндал, който я предлага. Провежда се на водна баня при температура 56-58 ºС за 1 час, повтаря се 5-7 пъти след 24 ч. В интервалите между нагряванията материалът се поддържа при стайна температура. Тиндализацията се извършва върху хранителни среди, които са бедни на микроорганизми и също така съдържат вещества, които лесно се разрушават и денатурират при температури над 60 ºC (протеини, витамини). Това са кръвен серум, яйца и др. В резултат на тиндализацията се постига пълно унищожаване на микроорганизмите.