Sterilizasyon ve diğer mikrobiyolojik amaçlar. Kuru Isı Sterilizasyonu Kurutma Kabini ve Sıcak Hava Sterilizasyonu

Ateşte tutuşma. Bu, güvenilir bir sterilizasyon yöntemidir, ancak öğelerin bozulması nedeniyle kullanımı sınırlıdır. Bakteriyolojik döngüler bu şekilde sterilize edilir.

kuru sterilizasyon sıcaklık. Pasteur fırınında (kuru ------) gerçekleştirilir.

kuru dolap) 160-170°C sıcaklıkta 1 saat. Bu yöntem laboratuvar cam malzemelerini, kağıda sarılı pipetleri, pamuk tıkaçlarla kapatılmış test tüplerini sterilize eder. 170 ° C'nin üzerindeki sıcaklıklarda kağıt, pamuk yünü ve gazlı bezin karbonlaşması başlar.

Basınç altında buhar sterilizasyonu (otoklavlama). En çok yönlü sterilizasyon yöntemi. Bir otoklavda - bir su buharı sterilizatöründe gerçekleştirilir. Otoklavın çalışma prensibi, suyun kaynama noktasının basınca bağlı olmasına dayanır.

Otoklav, hermetik olarak kapatılmış bir kapağı olan çift duvarlı bir metal kazandır. Otoklavın tabanına su dökülür, sterilize edilmiş ürünler çalışma odasına yerleştirilir, kapak önce hava geçirmez şekilde vidalanmadan kapatılır. Isıyı açın ve suyu kaynatın. Ortaya çıkan buhar, açık çıkış musluğundan çıkan çalışma odasındaki havanın yerini alır. Tüm hava dışarı atıldığında ve musluktan sürekli bir buhar akışı geldiğinde, musluk kapatılır ve kapak hava geçirmez şekilde kapatılır. Buhar manometre kontrolünde istenilen basınca getirilir. Buharın sıcaklığı basınca bağlıdır: normal atmosferik basınçta, manometre ibresi 0 atm'dedir. - buhar sıcaklığı 100°С, 0,5 atm'de. - 112°С, 1 atm'de. -121°С, 1,5 atm'de. - 127°С, 2 atm'de. - 134°C. Sterilizasyonun sonunda otoklavı kapatın, basınç düşene kadar bekleyin, buharı kademeli olarak boşaltın ve kapağı açın. Genellikle 1 atm basınçta. 20-40 dakika boyunca, basit besin ortamlarını ve protein ve karbonhidrat içermeyen çözeltileri sterilize edin, pansuman, iç çamaşırı. Sterilize edilecek malzemeler buhar geçirgen olmalıdır. Malzemeleri büyük hacimlerde sterilize ederken ( cerrahi malzemeler) süre 2 saate çıkarılır. 2 atm basınçta. patolojik materyalin dezenfeksiyonunu ve mikropların atık kültürlerini üretir.

Şeker içeren besi ortamları karamelize olduklarından 1 atm'de sterilize edilemezler, bu nedenle akan buharla fraksiyonel sterilizasyona tabi tutulurlar veya 0,5 atm'de otoklavlanırlar.

Sterilizasyon rejimini kontrol etmek için biyolojik ve fiziksel yöntemler kullanılır. Biyolojik yöntem, Bacillus stearothermophilus sporlarının, 121°C'de 15 dakikada ölen steril malzeme ile aynı anda yerleştirilmesine dayanmaktadır. Sterilizasyondan sonra, sporlar bir besin ortamında büyümemelidir. fiziksel yöntem kükürt (119°C), benzoik asit (120°C) gibi belirli bir erime noktasına sahip maddelerin kullanımına dayalıdır. Kuru bir boya (macenta) ile karıştırılmış maddeyi içeren kapalı tüpler, sterilize edilecek malzeme ile birlikte bir otoklava yerleştirilir. Otoklavdaki sıcaklık yeterli ise madde eriyecek ve boyanın rengine dönecektir.

sterilizasyon sıvısı buhar, bir Koch aparatında veya bir otoklavda, kapağın vidası açılmış ve çıkış musluğu açıkken gerçekleştirilir. Aparattaki su 100°C'ye ısıtılır. Ortaya çıkan buhar, serilmiş malzemeden geçer ve onu sterilize eder. 100°C'de tek bir uygulama sporları öldürmez. Bu nedenle, fraksiyonel bir sterilizasyon yöntemi kullanılır - 3 gün üst üste 30 dakika, arada bir gün süreyle oda sıcaklığı. 100°C'de ısıtma, sporların termal aktivasyonuna neden olur ve bunun sonucunda ertesi güne kadar çimlenerek bitkisel formlara dönüşür ve ikinci ve üçüncü ısıtma sırasında ölürler. Sonuç olarak, yalnızca besleyici ortam akan buharla sterilize edilebilir, çünkü Spor çimlenmesi için besinler gereklidir.

Dışında metal kasa bulunan çift cidarlı metal bir silindirdir. Birkaç vidayla büyük bir kapakla hava geçirmez şekilde kapatılmıştır. Emniyet valfli ve buhar valfli bir manometreye sahiptir.

Sterilizasyondan önce distile su, kasa üzerinde belirtilen çizgiye kadar su ölçer camlı bir huniden otoklava dökülür. Sterilizasyon için malzeme sterilizasyon odasına yüklenir, bir kapakla sıkıca kapatılır, vidalanır ve ısıtma kaynağı açılır. Aynı zamanda buhar valfi açık bırakılır. Kaynatma sırasında oluşan buhar, otoklavın duvarları arasından geçerek iç duvardaki deliklerden hazneye girer. Isıtıldığında, otoklavdan önce buhar valfinden hava, ardından buhar çıkar. Sürekli bir kuru buhar akışının çıkışı, havanın otoklavdan tamamen yer değiştirdiğini gösterir: valf kapanır ve o andan itibaren otoklavdaki basınç kademeli olarak artmaya başlar, manometredeki ok yükselir. Sterilizasyonun başlangıcı, manometre iğnesinin istenen basınca ulaştığı an olarak kabul edilir.

Şek. 3

Basınç göstergesi okuması şuna karşılık gelir: belirli sıcaklık otoklavda buhar: 0,50 MPa - 112°C, 0,1 MPa - 120, 0,15 MPa - 127, 0,2 MPa - 134°C.

Otoklavdaki malzeme çoğunlukla 0,1 MPa'da 20-30 dakika sterilize edilir. Sterilizasyonun sonunda ısıtma kaynağı kapatılır (manometre iğnesi kademeli olarak sıfıra ulaşır). Bundan sonra buhar valfi açılır, buharın geri kalanı serbest bırakılır. Ardından kapağı dikkatlice sökün ve açın. Tamamen soğuduktan sonra sterilize edilen malzeme çıkarılır.

Otoklavda tabakları, aletleri, besin ortamlarını (jelatin ve karbonhidratlı ortamlar hariç), pansumanları vb. Sterilize edebilirsiniz. Çalışırken güvenlik kurallarına uymalısınız. Otoklav kullanma hakkı sertifikası olan kişilerin çalışmasına izin verilir. Otoklavın kullanılabilirliği, kazan gözetim muayenesi ile kontrol edilir.

Koch aparatı (Şekil 4), dış tarafı ısıyı iyi iletmeyen bir malzemeyle (linolyum, asbest) kaplanmış metal bir silindirdir. Tabana su dökülür ve sterilizasyon malzemesi standın üstüne yerleştirilir. Cihaz, içinde bir termometre ve buhar çıkışı için deliklerin bulunduğu konik bir kapakla kapatılmıştır. Aşağıda suyu boşaltmak için bir musluk bulunmaktadır. Sterilizasyon sıvı buhar ile 100 °C'de 30-60 dakika gerçekleştirilir. Bu rejim altında, spor oluşturan ve spor oluşturmayan mikrop formlarının vejetatif hücreleri ölür. 18-20 saat arayla üç gün boyunca 30-60 dakika fraksiyonel sterilizasyon (üç kez), vejetatif hücrelerde sporların çimlenmesi için koşullar yaratmanıza ve onlardan kurtulmanıza olanak tanır. Sterilizasyon arasındaki aralıklarda sporlar çimlenir ve sonraki ısıtma sırasında ölür. Koch aparatında 100°C'nin üzerindeki sıcaklıklara dayanamayan malzemeler (jelatin, süt, karbonhidrat medyumu vb.) sterilize edilir.

100°C sıcaklığa tahammül edemeyen protein medyumları ve kan serumu 56-58°C'de su banyosunda fraksiyonel olarak sterilize edilir.

Kurutma kabini (Pastör fırını) (Res. 5), üstü asbest kaplı, çift cidarlı metal bir kabindir. Üst duvarda bir termometre ve havalandırma için açıklıklar bulunur. Isıtılan hava aşağıdan duvarların arasından yükselir ve üstteki açıklıktan kabine girerek sterilize edilmiş malzemenin raflara yerleştirildiği kabine girer. Sterilizasyon kuru ısı ile 150"C'de 2 saat, 165-170°C - 45 dakika, 180°C - 15 dakika gerçekleştirilir. Cam malzemeler Pasteur fırınında sterilize edilir. Sterilizasyondan sonra kabin ısıtma kaynağından ayrılır ve ancak tamamen soğuduktan sonra açılır.

Bakteriyel filtreler sıvıları ısıtmadan sterilize etmek için kullanılır. Bunlar arasında Chamberlain, Berkefeld mumları ve Seitz asbest filtreleri (plakaları) bulunur.

Filtre mumları (Şek. 6), ince gözenekli maddelerden yapılmış içi boş silindirlerdir: katkılı kaolin kuvars kumu(Chamberlant mumları) ve silisli toprak (Berkefeld mumları). Chamberlain mumları var farklı boyutlar Mikropların geçtiği gözenekler. Büyük bakterilerin geçmesine izin veren mumlar L9, L1 (bis), L3, orta - L5, L7, en küçüğü - L9, L11 , L13 Berkefeld mumları gözeneklilik ile belirlenir W, N, V(en büyük gözenekler U markalı mumlar içindir).

Seitz filtreleri, çeşitli boyutlarda asbest levhalardır. Cihaz sterilizasyon için monte edilirken plaka, ızgaranın üzerine yerleştirilir. metal diskler(ortada bir delik ile), vidalarla birbirine sıkıca bastırılır. Monte edilen filtre, bir tıpa aracılığıyla yandan musluklu (Bunsen şişesi) ve lastik bir tüpe yerleştirilir, kağıda sarılır ve otoklavda 120 °C'de 20-30 dakika sterilize edilir.

Malzemeyi filtrelemek için, Bunsen şişesine seyreltici yağ içeren kauçuk bir tüp bağlanarak bir vakum oluşturulur. el pompası Komovskogo veya elektrikli vakum pompası.

İşin tamamlanması. Mikroplar, optimum sıcaklık koşulları altında yetiştirilir. Bunu yapmak için laboratuvarlar hava veya su termostatları kullanır.

(Şek. 7) metal dolap aralarında bir su veya hava tabakası bulunan çift cidarlı. Termostatın dış kısmı, ısıyı kötü ileten bir malzeme (asbest, linolyum) ile kaplanmıştır.

Pirinç. 4, 5, 6.

Termostatın içinde, ekili mikroorganizmaların tohum materyalini yerleştirmek için raflar vardır. Termostatın üst kapağına monte edilmiş bir termostat kullanılarak termostattaki sabit bir sıcaklık korunur. Sıcaklık kontrol cihazı, maddelerin doğrusal genleşmesi ilkesine dayanmaktadır. Sıcaklık regülatörleri, farklı termal genleşme katsayılarına (pirinç, çinko) sahip herhangi iki metalin bir alaşımı veya alkol, alkol ve eter karışımı, cıva veya belirli bir sıcaklıkta hacmini değiştiren diğer maddelerle dolu bir metal "yastık" dır. Termostat ayarlanan normun üzerinde ısıtıldığında metaller genleşir, kontaklar açılır ve daha fazla ısı girişi otomatik olarak geciktirilir. Sıcaklık düştükten sonra açılır elektrik ve ısı akışı devam eder.

Kuru ısı veya sıcak hava ile sterilizasyon Pasteur fırınlarında yapılır (kurutma kuru fırınlar). Pasteur fırını, ısıya dayanıklı malzemelerden (metal ve asbest) yapılmış çift cidarlı bir kabindir. Kabini ısıtın gaz brülörleri veya elektrikli ısıtıcılar. Elektrikli ısıtmalı dolaplar, sağlayan regülatörlerle donatılmıştır. istenen sıcaklık. Sıcaklığı kontrol etmek için kabinin üst duvarındaki deliğe yerleştirilmiş bir termometre vardır.

Kuru ısı, esas olarak laboratuvar cam eşyalarını sterilize eder. Sterilizasyon için hazırlanan tabaklar, sterilize edilecek malzemenin eşit ve güvenilir bir şekilde ısıtılmasını sağlamak için fırına gevşek bir şekilde yüklenir. Dolap kapağı sıkıca kapatılır, ısıtma cihazı açılır, sıcaklık 160-165 °C'ye getirilir ve bu sıcaklıkta 1 saat sterilize edilir.Sterilizasyon sonunda ısıtıcı kapatılır, ancak fırın soğuyana kadar dolap kapağı açılmaz; aksi takdirde soğuk hava dolaba girmek sıcak tabaklarda çatlamalara neden olabilir.

Pasteur fırınında sterilizasyon çeşitli şekillerde gerçekleştirilebilir. sıcaklık rejimi ve maruz kalma (sterilizasyon süresi) (Tablo 1).

Tablo 1. Sterilizasyon modu

Sıvılar (besleyici ortam, izotonik sodyum klorür çözeltisi, vb.), kauçuktan ve sentetik malzemelerden yapılmış ürünler, sıvılar kaynayıp döküldüğü ve kauçuk ve sentetik malzemeler eridiği için kuru ısı ile sterilize edilemez.

Pasteur fırınında sterilizasyonu kontrol etmek için ipek iplikler, spor oluşturan bakteri kültürü içinde nemlendirilir, kurutulur, steril bir Petri kabına konur ve Pasteur fırınına yerleştirilir. 165°C sıcaklıkta 1 saat sterilizasyon yapılır (kontrol için iplerin bir kısmı oda sıcaklığında bırakılır). Daha sonra sterilize edilen ve kontrol iplikleri, bir Petri kabındaki agar yüzeyine yerleştirilir veya et suyu içeren test tüplerine yerleştirilir ve 2 gün boyunca 37°C sıcaklıkta bir termostatta inkübe edilir. -de doğru iş Sterilize edilmiş ipliklerin yerleştirildiği test tüpleri veya besleyici ortamlı kaplardaki pastör fırınları bakteri sporları öleceğinden, sterilize edilmemiş (kontrol) ipliklerdeki bakteri sporları çimlenecek ve besin ortamında büyüme kaydedilecektir.

Pasteur fırınının içindeki sıcaklığı belirlemek için 165-170 ° C sıcaklıkta karamelize edilmiş sükroz veya yenilebilir toz şeker kullanabilirsiniz.

Pasteur fırınında sterilizasyon için laboratuvar cam malzemelerinin hazırlanması. Sterilizasyondan önce laboratuvar cam malzemeleri (Petri kutuları, dereceli ve Pasteur pipetleri, küçük şişeler, şişeler, test tüpleri) iyice yıkanmalı, kurutulmalı ve kağıda sarılmalıdır, aksi takdirde sterilizasyondan sonra tekrar hava bakterileri ile kontamine olabilir.

Petri kutuları, bir veya daha fazla parça kağıda sarılır veya özel metal kutulara yerleştirilir.

Test malzemesinin ağza girmesini önlemek için pipetlerin üst uçlarına pamuklu çubuklar yerleştirilir. Kademeli pipetler 4-5 cm genişliğinde uzun kağıt şeritler halinde sarılır, sarılan pipetin hacmi kağıt üzerine not edilir. Bazı durumlarda, dereceli pipetler ek kağıt sarma olmadan sterilize edilir.

Not. Pipetlerdeki derecelendirme zayıf bir şekilde görünüyorsa, sterilizasyondan önce eski haline getirilir. Pipete uygula yağlı boya ve boyanın kurumasına izin vermeden baryum sülfat tozunu bir bezle ovalayın. Bundan sonra, sadece derecelendirme çentiklerinde kalan fazla boya bir bezle çıkarılır. Bu şekilde işlenen pipetler durulanmalıdır.

Pasteur pipetlerinin keskin uçları bir bek alevinde kapatılır ve her biri 3-5 parça olacak şekilde kağıda sarılır. Kılcal damarların kapalı uçlarını kırmamak için Pasteur pipetlerini dikkatlice sarın.

Şişeler, şişeler, test tüpleri pamuklu gazlı bezle kapatılır. Mantar, teknenin boynuna boyunun 2/3'ü kadar oturmalı, çok sıkı olmamalı, ancak çok gevşek olmamalıdır. Her kap için (test tüpleri hariç) mantarların üzerine bir kağıt kapak konur. Test tüpleri 5-50 parça halinde bağlanır ve kağıtla sarılır.

Not. -de yüksek sıcaklıklar Bardakların ve pipetlerin sarıldığı kağıt ve pamuk yünü sararır ve hatta kömürleşebilir, böylece her biri yeni çeşit laboratuvar tarafından alınan kağıt, kabul edilen sıcaklık rejiminde test edilmelidir.

Kontrol soruları

1. Sterilizasyon terimi ile kastedilen nedir?

2. Sterilizasyon yöntemleri nelerdir?

3. Ateşte kızartılarak sterilize edilen nedir?

4. Pastör fırınının cihazını ve çalışma şeklini tanımlayınız.

5. Pasteur fırınında neler sterilize edilir?

6. Cam eşyalar sterilizasyon için nasıl hazırlanır?

7. Kültür ortamını ve kauçuk nesneleri Pasteur fırınında sterilize etmek neden imkansız?

Egzersiz yapmak

Sterilizasyon için Petri kutuları, dereceli pipetler, Pasteur pipetleri, test tüpleri, şişeler ve küçük şişeler hazırlayın.

Sterilizasyon- biriktirme; vejetatif ve spor formlarındaki patojenik ve patojenik olmayan mikroorganizmaların herhangi bir malzemede yok edilmesi.

Sterilizasyon için bulaşıkların hazırlanması. Züccaciye temiz ve steril olmalıdır. Yıkamak için sabun çözeltileri veya kimyasal kullanın deterjanlar. Yeni yemekler% 1-2'lik bir solüsyonda önceden kaynatılır hidroklorik asit, daha sonra camın sızmasını önlemek için. Akan suda yıkanan bulaşıklar distile su ile durulanır ve kurutulur.

bakteriyolojik tüpler. Konik, buzlu şişeler, bir gazlı bezle kaplanmış, sıkıca bükülmüş pamuk yünü rulolarından oluşan pamuklu gazlı bez tıpalarla kapatılır. Dış kapak şeklindeki metal tıpalar da bakteriyolojik test tüpleri için geliştirilmiştir. Pamuk tıkaçların yüksek sıcaklıklarda sterilizasyonunun, pamuk yününden Brucella gibi bazı hassas bakterilerin büyümesini engelleyen maddelerin salınmasına yol açtığı dikkate alınmalıdır.

Pipetleri monte ederken, üst uca bir pamuklu çubuk sokulur. Pasteur pipetlerinin kapalı bir kapileri olmalıdır. Ölçülen her bir pipet, ağzından başlayarak tüm uzunluğu boyunca sarmal şeklinde 4-5 cm genişliğinde uzun bir kağıt şeridi ile sarılır. Pastör pipetleri 10-20 parça halinde kağıda, test tüpleri - 15-20 parça halinde sarılır. Her tür pipet en iyi şekilde sterilizasyondan önce ve sonra özel metal kutularda saklanır. Şişelerin üzerindeki tıpalar ayrıca kağıt kapaklarla kapatılmıştır.

Sterilizasyondan önce toplanmış halde temiz Petri kapları 3-4 parça halinde kağıda sarılır. Sterilizasyondan sonra kağıt, steril cam eşyayı mikroflora kontaminasyonundan korur.

Sterilizasyondan önce bulaşıklar, hava sirkülasyonu sağlamak için çok sıkı olmayacak şekilde bir kurutma kabinine yerleştirilir ve kağıt ve pamuk yünü daha yüksek bir sıcaklıkta kömürleşeceğinden sıcaklığın 180 ° C'yi geçmediğinden emin olun. Sterilizasyon tamamlandıktan sonra kurutma kabini o zamana kadar açılmaz. İçindeki sıcaklık 70-80°C'ye düşene kadar, çünkü keskin düşüş sıcaklıklar camı kırabilir.

Züccaciye, içindeki besin ortamının en az 1 atm basınç altında otoklavlanarak sterilize edilmesi amaçlanıyorsa, önceden sterilize edilmez. Ortamı sıvı buharla veya bir otoklavda 0,5 atm'den fazla olmayan bir basınç altında sterilize ederken. steril kaplar kullanılmalıdır.

Kuru ısıtılmış hava ile sterilizasyon. Yöntem, temiz cam eşyaları sterilize etmek için kullanılır. Bunu yapmak için, çift cidarlı özel bir fırın olan Pasteur fırınını kullanın. Dışı ısıya dayanıklı malzeme ile kaplanmıştır. Üstte bir termometre var. Isıya dayanıklı cilt ile iç kısım arasında metal kutu altta otomatik bir elektrikli ısıtma elemanı var. Kurutma kabini elektriğe bağlandığında içindeki hava ısınır. Ayarlanan sıcaklığa ulaşıldığında, sterilizasyonun başlama zamanı not edilir. Sterilizasyon modu: 155-160°C sıcaklıkta - maruz kalma 2 saat, 165-170°C'de - 1-1.5 saat, 180°C'de - 1 saat Sterilizasyon süresinden sonra ısıtma durdurulur.

otoklavlama. Bu, basınç altında yüksek sıcaklık ile birleştirilmiş buhar sterilizasyonudur. özel aparat- otoklav. Doymuş buhar daha soğuk bir cisimle karşılaştığında, buhar yoğunlaşarak suya dönüşür ve çok sayıda sıcaklık. Ek olarak, sterilize edilecek malzemenin iç kısımlarına nüfuz etmesine katkıda bulunan buhar hacmi azalır. Bir ön koşul, gerçekten doymuş buharın sağlanmasıdır, böylece soğuk bir nesneyle teması anında yoğuşmaya ve ısınmaya yol açar. Endüstri, dikey ve yatay otoklavlar üretir.

Dikey bir otoklav, hermetik olarak kapatılmış bir kapakla kapatılmış, çift cidarlı, silindirik bir metal kazandır. Duvarlar arasında hunili özel bir musluktan belirli bir seviyeye kadar su dökülür. Kazanın iç duvarı, üst kısımda delikler ve alt kısımda su ısıtıldığında buharın kazandaki havayı değiştirdiği bir musluk ile donatılmıştır. Otoklavın üstüne metal bir koruyucu çerçeve konur ve bununla otoklavın kendisi arasında olmalıdır. boş alan. Otoklav, güç kaynağı açılarak ısıtılır.

Otoklav sterilize edilecek malzeme ile yüklenir, kapak ve içinden suyun döküldüğü valf kapatılır, alt valf geçici olarak açılır. Isıtılan su, otoklavın duvarları arasında kaynar, ortaya çıkan buhar yükselir ve iç duvarın üst açıklıklarından kazana geçerek havayı alttaki açık musluktan dışarı iter. Tüm hava dışarı atıldığında ve buhar eşit bir akışla dışarı çıkmaya başladığında alt musluk kapatılır. Sonuç olarak, otoklav içindeki buhar basıncı yükselir. Sterilizasyonun başlangıcı, basıncın önceden belirlenmiş bir değere (manometreye göre) ulaştığı an olarak kabul edilir. Isıtma, buhar basıncını aynı seviyede tutarak sterilizasyon boyunca düzenlenir. Otoklav içindeki basıncın aşırı artması durumunda, fazla buharın otomatik olarak dışarı çıkmasını sağlayan bir emniyet valfi bulunmaktadır.

Buhar basıncı arttıkça otoklavdaki sıcaklık da buna bağlı olarak artar.

Manometre, ortam sıcaklığını dikkate almadan buhar basıncını gösterir. atmosferik basınç(760 mm Hg). Sterilizasyon süresi dolduktan sonra otoklav kapatılır. Manometrenin sıfır okumasında soğuduktan sonra, buharı serbest bırakmak için valfi açın.

Yatay bir otoklav, tasarım açısından dikey bir otoklavdan farklıdır, ancak çalışma prensibi aynıdır.

virolojik kısırlaştırma patolojik hayvan

Laboratuvara patolojik materyal gönderilirken doldurulacak örnek formlar

1. flambe(lat. flamma'dan - alev ve fr. flamb é - yanık) - küçük metal veya cam nesneleri alevde yakarak sterilizasyon. Bakteriyolojik özeler, metal cımbızlar, cam spatulalar ve tüpler, cam slaytlar vb.Bu şekilde sterilize edilir Alev sıcaklığı yaklaşık 1000ºС'dir. Kalsine edildiğinde tüm mikroorganizmalar (bitkisel ve spor formları) yanar. Hızlı ve güvenilir bir sterilizasyon yöntemidir.

2. Kaynamak. en çok biridir basit yollar sterilizasyon. Bir sterilizatörde gerçekleştirilir - metal dikdörtgen kutu sterilize edilecek eşyaları yerleştirmek için altta kapaklı ve fileli. İçine su dökülür ve kaynama noktasına kadar ısıtılır (ısıtma elektrikle veya ateşte). Kaynama, yaklaşık 100 ºС sıcaklıkta 15-30 dakikadan 2 saate kadar sürebilir. Küçük metal veya cam nesneleri sterilize edin - şırıngalar, iğneler, cam tüpler vb. Aynı zamanda, mikroorganizmaların vejetatif formları ve bazı sporlar ölür. Ayrıca sterilize edilmiş malzemeyi kaynar su ile haşlamayı da uygularlar.

3. Kuru ısı sterilizasyonu. Pasteur fırınında veya fırınında sıcak hava ile üretilir. Pasteur fırını, ısı yalıtımı için dış tarafı asbest astarlı çift cidarlı bir kabindir. Kabinin içinde düzenlenmiş metal raflar sterilize edilmiş malzemenin yerleştirildiği delikler ile. Elektrikli ısıtma. Sterilizasyon, bu sıcaklıklara ulaşıldığı andan itibaren 1-2 saat boyunca 160-180 ºС sıcaklıkta gerçekleştirilir (bir termometre ile kontrol edilir). Kuru ısı, esas olarak cam eşyaları - Petri kapları, pipetler, spatulalar (kağıda sarılmış) ve ayrıca test tüpleri, şişeler sterilize eder. Bu teknik güvenilirdir - mikroorganizmaların spor olmayan ve spor formları ölür. Kağıda sarılı ve sterilize edilmiş malzeme saklanabilir.

4. Buharlı Sterilizasyon. sıcak tutuldu nemli hava Koch aparatında. Koch aparatı (kazan), ayaklar üzerinde olabilen ve muşamba ile kaplanabilen metal bir silindirdir. Aparatın içine delikli metal bir dairenin yerleştirildiği çıkıntıya ulaşmayacak kadar su dökülür ve üzerine sterilize edilecek malzeme yerleştirilir. Aparat, ortasında buharın çıkması için bir delik bulunan konik bir kapakla sıkıca kapatılır ve ateşte ısıtılır. Su kaynadığında, yaklaşık 100 ºС sıcaklıktaki sıcak su buharı, kapağın açıklığından güçlü bir akışla “akacaktır”. Bu andan itibaren sterilizasyonun başlama zamanı not edilir. Akan buhar ile sterilizasyon, sterilize edilecek malzemenin hacmine bağlı olarak 45 dakika ile 1,5 saat arasında sürer. 100 ºº'nin üzerinde ısıtılamayan besin ortamlarını sterilize edin, örneğin NMF (100 ºº'nin üzerindeki sıcaklıklarda sıvılaşır ve katılaşmaz). Bu sterilizasyon yöntemi tamamen güvenilir değildir - sporlar kalırken yalnızca vejetatif mikroorganizma formları tamamen ölür. Koch aparatında ortamın tam sterilizasyonunu sağlamak için fraksiyonel sterilizasyon kullanılır.

5. Basınç altında buhar sterilizasyonu (otoklavlama). Otoklavda doymuş buharla gerçekleştirilir. otoklav vardır farklı tasarım. Dikey otoklav, kazana cıvatalarla sıkıca vidalanmış, ağır menteşeli bir kapağı olan, dış tarafı metal bir mahfaza ile çevrili, çift cidarlı devasa bir kazandır. Kazanın alt kısmında, iç kazan ile mahfaza arasındaki boş alana suyun döküldüğü bir huni ve bir musluk vardır. Sterilize edilecek malzeme kazanın dibine konur, kapak sıkıca vidalanır ve elektrikli ısıtma açılır. Su kaynadığında, buhar dahili kazana geçer. Otoklavdaki basınç yükselir, aynı zamanda sıcaklık yükselir. Manometre, kazandaki basıncın ayarlanan değere ulaştığını gösterdiğinde, sterilizasyonun başlama saatini not edin. Basınç, bir emniyet valfi vasıtasıyla belirli bir seviyede tutulur.

Tipik olarak, laboratuvar uygulamasında, basınçlı sterilizasyon 1.5-2 atm'de ve yaklaşık 115-120 ºº sıcaklıkta gerçekleştirilir.

20-30 dk. Sterilizasyon süresi dolduktan sonra ısıtma durdurulur, buhar valfi açılır ve buhar dışarı verilir. Basınçlı besleyici ortam MPB, MPA, su ile cam eşyalar, pansumanlar altında buharla sterilize edin, cerrahi Aletler vb. Otoklavlama, en dirençli sporlar dahil olmak üzere her türlü mikroorganizmayı öldüren hızlı ve güvenilir bir sterilizasyon yöntemidir.

6. pastörizasyon. Bu kısmi sterilizasyon yöntemi, adını onu öneren Fransız bilim adamı L. Pasteur'den almıştır. Yöntem, steril bir kaba dökülen sıvının bir su banyosunda 60-90 ºº sıcaklıkta ısıtılmasından oluşur.

10-30 dk. Özelliklerini değiştiren sıvı ortamlar için kullanılır. fizikokimyasal özellikler yüksek sıcaklıklarda. Süt, krema, şarap, bira, meyve suları vb pastörize edilir.Aynı zamanda vitaminler ve tat nitelikleriürünler. Pastörize ürünler Uzun süreli depolama söz konusu değildir, çünkü bu sterilizasyon yöntemiyle mikroorganizmaların yalnızca bitkisel formları ölür ve sporlar kalır. Laboratuvar pratiğinde bu yöntem esas olarak spor oluşturan türleri spor oluşturmayan türlerden ayırmak için kullanılır.

7. fraksiyonel sterilizasyon. Sterilize edilen malzemenin birkaç aşamada işlenmesi esasına dayanır. Fraksiyonel, Koch aparatında akan buharla kaynatma veya sterilizasyon olabilir. Tipik olarak sterilizasyon, belirtilen yöntemlerden biri kullanılarak günde 30 dakika süreyle 3 gün süreyle gerçekleştirilir ve arada ortamlar oda sıcaklığında bırakılır. Bu, sporların vejetatif formlara büyümesini ve sonraki tedaviler sırasında yok edilmesini sağlamak için yapılır, bu da bu tekniklerin güvenilirliğini artırır.

8. Tyndalizasyon. Bu bir tür fraksiyonel sterilizasyondur (fraksiyonel pastörizasyon). Tekniğe, onu öneren İngiliz bilim adamı D. Tyndall'ın adı verilmiştir. Su banyosunda 56-58 ºС sıcaklıkta 1 saat 24 saat sonra 5-7 tekrar ile yapılır.Isıtma aralarında malzeme oda sıcaklığında bekletilir. Mikroorganizmalar bakımından fakir olan ve ayrıca 60 ºС'nin üzerindeki sıcaklıklarda (proteinler, vitaminler) kolayca yok edilen ve denatüre olan maddeler içeren besleyici ortamlar tyndalizasyona tabi tutulur. Bunlar kan serumu, yumurta vb. Tyndalizasyon sonucunda mikroorganizmaların tamamen yok edilmesi sağlanır.