पाश्चर ओवन. सूक्ष्मजीवों पर भौतिक कारकों का प्रभाव। नियंत्रण संख्या …

नसबंदी

स्टरलाइज़ेशन स्टरलाइज़ेशन है, यानी वस्तुओं की पूर्ण रिहाई पर्यावरणसूक्ष्मजीवों और उनके बीजाणुओं से.

नसबंदी विभिन्न तरीकों से की जाती है:

1) शारीरिक (प्रभाव उच्च तापमान, यूवी किरणें, जीवाणु फिल्टर का उपयोग);

2) रासायनिक (विभिन्न कीटाणुनाशक, एंटीसेप्टिक्स का उपयोग);

3) जैविक (एंटीबायोटिक दवाओं का उपयोग)।

प्रयोगशाला अभ्यास में, आमतौर पर नसबंदी के भौतिक तरीकों का उपयोग किया जाता है।

एक या किसी अन्य नसबंदी विधि का उपयोग करने की संभावना और व्यवहार्यता निष्फल की जाने वाली सामग्री की विशेषताओं, उसके भौतिक और रासायनिक गुणों से निर्धारित होती है।

भौतिक तरीके

बर्नर की लौ में कैल्सीनेशन या फ्लेम्बिंग नसबंदी की एक विधि है जिसमें वस्तु पूरी तरह से निष्फल हो जाती है, क्योंकि वनस्पति कोशिकाएं और माइक्रोबियल बीजाणु दोनों मर जाते हैं। आमतौर पर, बैक्टीरियोलॉजिकल लूप, स्पैटुला, पिपेट, स्लाइड और कवर ग्लास और छोटे उपकरणों को कैलक्लाइंड किया जाता है। कैंची और स्केलपेल को गर्म करके निष्फल नहीं किया जाना चाहिए, क्योंकि आग के प्रभाव में काटने की सतह सुस्त हो जाती है।

सूखी गर्मी नसबंदी

सूखी गर्मी या गर्म हवा के साथ नसबंदी पाश्चर ओवन (सुखाने) में की जाती है सूखी-गर्मी वाले ओवन). पाश्चर ओवन एक दोहरी दीवार वाली कैबिनेट है जो गर्मी प्रतिरोधी सामग्री - धातु और एस्बेस्टस से बनी होती है। कैबिनेट को गर्म करें गैस बर्नरया विद्युत ताप उपकरण। विद्युत रूप से गर्म अलमारियाँ नियामकों से सुसज्जित हैं जो सुनिश्चित करती हैं आवश्यक तापमान. तापमान को नियंत्रित करने के लिए कैबिनेट की ऊपरी दीवार के छेद में एक थर्मामीटर डाला जाता है।

तरल पदार्थ (पोषक तत्व मीडिया, आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान, आदि), रबर और सिंथेटिक सामग्री से बनी वस्तुओं को सूखी गर्मी से निष्फल नहीं किया जा सकता है, क्योंकि तरल पदार्थ उबल कर बाहर निकल जाते हैं, और रबर और सिंथेटिक सामग्री पिघल जाती है।

उबालकर बंध्याकरण

उबालना एक रोगाणुनाशन विधि है जो बंध्यता की गारंटी देती है बशर्ते कि निष्फल सामग्री में कोई बीजाणु न हों। उपकरण सीरिंज, ग्लास आदि के प्रसंस्करण के लिए उपयोग किया जाता है धातु के बर्तनरबर ट्यूब, आदि दबाव में भाप नसबंदी एक आटोक्लेव में किया जाता है। यह स्टरलाइज़ेशन विधि स्टरलाइज़ की जा रही सामग्रियों को वायुमंडलीय दबाव से ऊपर संतृप्त जल वाष्प में उजागर करने पर आधारित है। इस तरह की नसबंदी के परिणामस्वरूप, सूक्ष्मजीवों के वानस्पतिक और बीजाणु दोनों रूप एक ही उपचार से मर जाते हैं। एक आटोक्लेव (चित्र 12) एक विशाल बॉयलर है, जो बाहर की तरफ एक धातु के आवरण से ढका होता है, जिसे एक ढक्कन के साथ भली भांति बंद करके सील किया जाता है, जो हिंग वाले बोल्ट के साथ बॉयलर से कसकर जुड़ा होता है।

पोषक तत्व मीडिया के ऑटोक्लेविंग का तापमान और अवधि पोषक माध्यम तैयार करने के लिए नुस्खा में निर्दिष्ट उनकी संरचना द्वारा निर्धारित की जाती है। उदाहरण के लिए, साधारण मीडिया (मीट-पेप्टोन अगर, मीट-पेप्टोन शोरबा) को 120 डिग्री सेल्सियस (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। हालाँकि, इस तापमान पर देशी प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट और अन्य पदार्थों से युक्त मीडिया को स्टरलाइज़ करना असंभव है जो गर्म करने पर आसानी से बदल जाते हैं। कार्बोहाइड्रेट वाले मीडिया को आंशिक रूप से 100 डिग्री सेल्सियस पर या आटोक्लेव में 112 डिग्री सेल्सियस (0.5 एटीएम) पर 10-15 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। विभिन्न तरल पदार्थ, रबर की नली, प्लग, बैक्टीरियल मोमबत्तियाँ और फिल्टर वाले उपकरणों को 120 डिग्री सेल्सियस (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है।

कोच उपकरण में बहती भाप से बंध्याकरण किया जाता है। इस विधि का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां निर्जलित की जाने वाली वस्तु 100 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान पर बदल जाती है। यूरिया, कार्बोहाइड्रेट, दूध, आलू, जिलेटिन इत्यादि युक्त पोषक तत्व मीडिया को बहती भाप से निर्जलित किया जाता है।

कोच उपकरण (बॉयलर) एक धातु सिलेंडर है जो बाहर की तरफ (गर्मी हस्तांतरण को कम करने के लिए) फेल्ट या एस्बेस्टस से ढका होता है। सिलेंडर को शंक्वाकार ढक्कन के साथ बंद किया जाता है जिसमें भाप निकलने के लिए एक छेद होता है। सिलेंडर के अंदर एक स्टैंड होता है, जिसके लेवल तक पानी डाला जाता है। स्टैंड पर एक छेद वाली बाल्टी रखी जाती है जिसमें स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री रखी जाती है। कोच उपकरण को गैस या बिजली का उपयोग करके गर्म किया जाता है। नसबंदी का समय ढक्कन के किनारों पर और भाप आउटलेट से जोरदार भाप निकलने के क्षण से गिना जाता है। 30-60 मिनट के लिए स्टरलाइज़ करें। नसबंदी के अंत में, हीटिंग बंद कर दिया जाता है। उपकरण से सामग्री की बाल्टी निकालें और इसे अगले दिन तक कमरे के तापमान पर छोड़ दें। वार्मिंग को लगातार 3 दिनों तक 100°C के तापमान पर 30-60 मिनट तक किया जाता है। इस विधि को फ्रैक्शनल स्टरलाइज़ेशन कहा जाता है। पहले ताप के दौरान, रोगाणुओं के वानस्पतिक रूप मर जाते हैं, जबकि बीजाणु रूप संरक्षित रहते हैं। एक दिन के भीतर, बीजाणु अंकुरित होकर वानस्पतिक रूपों में बदल जाते हैं, जो नसबंदी के दूसरे दिन मर जाते हैं। चूँकि यह संभव है कि कुछ बीजाणुओं को अंकुरित होने का समय नहीं मिला, सामग्री को अगले 24 घंटों के लिए रखा जाता है, और फिर तीसरी नसबंदी की जाती है। कोच उपकरण में बहती भाप से बंध्याकरण की आवश्यकता नहीं होती है विशेष नियंत्रण, चूंकि तैयार पोषक तत्व मीडिया की बाँझपन डिवाइस के सही संचालन का एक संकेतक है। आप आटोक्लेव में ढक्कन खोलकर और आउटलेट वाल्व खुला रखकर बहती भाप से भी स्टरलाइज़ कर सकते हैं।

पराबैंगनी विकिरण द्वारा बंध्याकरण

यूवी किरणों के साथ नसबंदी विशेष प्रतिष्ठानों - जीवाणुनाशक लैंप का उपयोग करके की जाती है। यूवी किरणों में उच्च रोगाणुरोधी गतिविधि होती है और यह न केवल वनस्पति कोशिकाओं, बल्कि बीजाणुओं की भी मृत्यु का कारण बन सकती है। यूवी विकिरण का उपयोग अस्पतालों, ऑपरेटिंग रूम, बच्चों के संस्थानों आदि में हवा को स्टरलाइज़ करने के लिए किया जाता है। एक सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशाला में, काम से पहले एक बॉक्स को यूवी किरणों से उपचारित किया जाता है।

रासायनिक विधियाँ

इस प्रकार की नसबंदी का उपयोग सीमित सीमा तक किया जाता है, और यह मुख्य रूप से कल्चर मीडिया और इम्युनोबायोलॉजिकल तैयारियों (टीके और सीरम) के जीवाणु संदूषण को रोकने के लिए कार्य करता है।

क्लोरोफॉर्म, टोल्यूनि और ईथर जैसे पदार्थ अक्सर पोषक मीडिया में जोड़े जाते हैं। यदि माध्यम को इन परिरक्षकों से मुक्त करना आवश्यक हो, तो इसे पानी के स्नान में 56°C पर गर्म किया जाता है (परिरक्षक वाष्पित हो जाते हैं)।

टीकों और सीरम को संरक्षित करने के लिए मेरथिओलेट, बोरिक एसिड, फॉर्मेल्डिहाइड आदि का उपयोग किया जाता है।

जैविक बंध्याकरण

जैविक नसबंदी एंटीबायोटिक दवाओं के उपयोग पर आधारित है। इस विधि का उपयोग वायरस की खेती के लिए किया जाता है।

बी. ल्योन के बूचड़खानों में मवेशी मट्ठा के उत्पादन के लिए विस्तृत तकनीक

1,000 जानवरों से रक्त पहले ही निकाला जा चुका है, सीरम को बोतलबंद किया गया है और लगभग 20,000 बच्चों को निःशुल्क वितरित किया गया है।

इस प्रकार यह दर्शाया गया है औद्योगिक उत्पादनसड़न रोकनेवाला नियमों और स्वच्छता नियमों के अनुपालन में बूचड़खाने में मट्ठा संभव है।

सेरोथेरेपी उद्यम अतिरिक्त गारंटी प्रदान नहीं करता है - उसे दाता जानवर का शव परीक्षण करने का अधिकार नहीं है।

हमारे उत्पादन में उपयोग की जाने वाली तकनीक कम सड़न रोकने वाली लग सकती है क्लासिक विधि. लेकिन इसका गति में बड़ा फायदा है, क्योंकि रक्त संग्रह के दिन सीरम पूरी तरह से तैयार हो जाता है।

यदि वर्तमान परिस्थितियों ने हमें बूचड़खाने में सीरम का उत्पादन करने के लिए प्रेरित किया है, तो यह स्पष्ट है कि यह एक अस्थायी उपाय है, क्योंकि हेमटोजेन और औषधीय सीरम का उत्पादन केवल एक विशेष संस्थान में ही किया जा सकता है।

पशु चयन. ल्योन में, बूचड़खाने के मुख्य पशुचिकित्सक डॉ. गुइर और पशुचिकित्सा निरीक्षक डॉ. फोंटेने स्वयं हमारे शहर को मांस उपलब्ध कराने के उद्देश्य से पशुधन में से दानदाताओं का चयन करते हैं। आगे नियंत्रण की सुविधा के लिए चयनित जानवर को दाहिने कंधे पर ब्रांड किया गया है।

वध के बाद जानवरों के अंगों की सावधानीपूर्वक जांच की जाती है। यह ज्ञात है कि तपेदिक का पता लगाने के लिए शव परीक्षण सबसे विश्वसनीय तरीका है।

बाद के ऑपरेशनों से पता चलेगा कि रोगग्रस्त जानवर के सीरम का सेवन कभी नहीं किया गया था।

जानवरों से खून लेना. रक्त संग्रह कक्ष में, दाता बैल को एक स्वचालित योक द्वारा सुरक्षित रूप से पकड़ लिया जाता है।

पशुचिकित्सक जानवर की गर्दन के स्तर पर आयोडीन के साथ त्वचा को कीटाणुरहित करता है और एक स्केलपेल के साथ गले की नस के क्षेत्र में एक चीरा लगाता है। शिरापरक पंचर लंबे समय तक उबालकर निष्फल ट्रोकार के साथ किया जाता है। एक बार जब रक्त दिखाई देता है, तो इसे डिफाइब्रिनेटर से सीधे और एसेप्टिक रूप से जोड़ने के लिए ट्रोकार से एक ऑटोक्लेव रबर नली जुड़ी होती है।

डिफाइब्रिनेटिंग तकनीक और डिफाइब्रिनेटर को स्टरलाइज़ करने की विधि नीचे वर्णित है।

प्रत्येक जानवर से 8-10 लीटर रक्त प्राप्त होता है, जिसे उपकरण के नीचे स्थित तराजू पर तौला जाता है।

बंध्याकरण के तरीके

स्वच्छता नियंत्रण ऑपरेशन को सुविधाजनक बनाने के लिए, प्रत्येक डिफाइब्रिनेटर पर दाता जानवर के डेटा के साथ एक लेबल होता है।

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि रक्त का नमूना सभी के बंद सर्किट के कारण सड़न रोकनेवाला तरीके से किया जाता है अवयव: ट्रोकार, रबर की नली और डिफाइब्रिनेटर, जो पूर्व-निष्फल होते हैं।

रक्त संग्रह की तारीख वाला एक लेबल एकत्रित रक्त के साथ शिरापरक पंचर के क्षण से लेकर सीरम में परिवर्तित होने और रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत होने तक होता है।

रक्त विच्छेदन. अधिकांश सेरोथेरेपी प्रतिष्ठानों में, कांच के बर्तनों में डाला गया रक्त भार के दबाव में सीरम को अलग कर देता है। इन परिस्थितियों में, सबसे पहले मवेशियों से प्राप्त रक्त में थोड़ा सीरम (लगभग 10%) होता है।

इसलिए, ल्योन में सेरोथेरेपी केंद्र उपयोग करता है विशेष तकनीक, 50% मट्ठा देना, और वह भी कम समय में।

रॉटरडैम में रॉयल इंस्टीट्यूट और मिलान में सेरोथेराप्यूटिक इंस्टीट्यूट में किए गए निष्कर्षों के बाद डॉ. मेरियर आंशिक रूप से इस पद्धति को विकसित करने में सक्षम हुए।

एक बार जब इन संस्थानों से रक्त प्राप्त हो जाता है, तो इसे मथने जैसी बाँझ मशीनों में डीफाइब्रिन किया जाता है।

5 मिनट के भीतर रक्त को हवा से सुरक्षित बर्तन में एकत्र कर लिया जाता है। डिफिब्रेशन समय का सख्ती से पालन करना आवश्यक है: यदि यह अपर्याप्त है, तो जमावट हो सकती है, और यदि यह बहुत अधिक है, तो हेमोलिसिस हो सकता है (लाल रक्त कोशिकाओं के टूटने के कारण)। एक प्रयोगशाला घड़ी का उपयोग करना आवश्यक है जो आपको डिफाइब्रिनेशन के ठीक 15 मिनट को चिह्नित करने की अनुमति देती है।

चित्र के शीर्ष पर. 4 से पता चलता है कि रक्त लेने वालों की संख्या 1000 तक पहुंच गई है, जो केंद्र के प्रतीक पर दर्ज है।

केन्द्रापसारण.

डिफिब्रिबेशन के तुरंत बाद, उपकरणों को प्रयोगशाला में स्थानांतरित कर दिया जाता है, जो रक्त संग्रह कक्ष से कुछ मीटर की दूरी पर स्थित है। प्रत्येक डिफाइब्रिनेटर की सामग्री को अलग से संसाधित किया जाता है ताकि बीमार पड़ने वाले जानवर का सीरम हटाया जा सके।

डिफिब्रिनेशन के बाद जो रक्त नहीं जमता, उसे अल्फ़ा लवल सेपरेटर (एक दूध विभाजक जिसे हमने मट्ठा के उत्पादन के लिए अनुकूलित किया है) के माध्यम से पारित किया जाता है।

केन्द्रापसारक बल के प्रभाव में, रक्त को समान भागों में विभाजित किया जाता है: लाल भाग में लाल गेंदें होती हैं, और पारदर्शी भाग सीरम बनाता है (फाइब्रिन डिफाइब्रिनेटर ब्लेड पर रहता है)।

एक जानवर से 8-10 लीटर रक्त या लगभग 4-5 लीटर सीरम प्राप्त होता है, जिसे 180°C पर निष्फल करके पाइरेक्स बोतल में डाला जाता है।

बोतल से एक डिफाइब्रिनेटर लेबल जुड़ा होता है, और सैनिटरी नियंत्रण सुनिश्चित करने के लिए उसी नंबर के तहत एक कार्ड भरा जाता है।

सीरम में एक विशेष एंटीसेप्टिक मिलाया जाता है, जिसे इस तरह डिज़ाइन किया गया है कि यह सीरम की पारदर्शिता और स्वाद को परेशान किए बिना पर्याप्त रूप से सक्रिय रहे। 1 लीटर सीरम के लिए, 1:1000 फॉर्मेल्डिहाइड और 1:5000 सियुनक्सोल युक्त 100 मिलीलीटर घोल भी मिलाएं।

(तैयारियों के बीच, सेंट्रीफ्यूज को एक एंटीसेप्टिक के साथ पूरी तरह से कीटाणुरहित किया जाता है।)

सिद्धांत रूप में, रक्त का लाल अंश रक्त सॉसेज बनाने के लिए कसाईयों को लौटाया जाना चाहिए, लेकिन अक्सर यह अप्रयुक्त रहता है, इसलिए नीचे वर्णित तकनीक का उपयोग करके इससे सिरप तैयार किया जा सकता है।

रक्त सिरप तैयार करने के विशेष मामले. सिरप के दो फायदे हैं: यह सीरम प्राप्त करने के बाद बचे हुए रक्त के लाल भाग का उपयोग करना संभव बनाता है, और इसका सुखद स्वाद होता है जो बच्चों को पसंद आता है।

ग्लिसरीन की कमी के कारण, लंबे समय तक भंडारण के लिए सिरप तैयार करना मुश्किल है, लेकिन आप पानी का उपयोग करके एक बहुत ही सक्रिय उत्पाद बना सकते हैं और इसे बच्चों को प्रति दिन 2-3 बड़े चम्मच दे सकते हैं। रक्त के लाल भाग में 20% जोड़ें पेय जलऔर स्वच्छता नियंत्रण के दौरान सिरप को ग्लेशियरों में संग्रहित करें।

फिर जोड़िए एक समान भाग 100% चीनी सिरप (चीनी उन समूहों के कार्ड से प्राप्त की जा सकती है जिनके लिए सिरप का इरादा है)।

खून के स्वाद को बेअसर करने के लिए सिरप में नींबू या संतरे का अर्क मिलाया जाता है और 250 मिलीलीटर की बोतलों में डाला जाता है।

मट्ठा का टिंडलाइजेशन.

सेंट्रीफ्यूजेशन के तुरंत बाद, यानी रक्त संग्रह के एक घंटे से भी कम समय के बाद, सीरम को एक घंटे के लिए 56°C पर लाइज़ किया जाता है।

ऐसा करने के लिए, इसे स्वचालित रूप से बनाए रखे गए तापमान के साथ पानी के स्नान में उतारा जाता है। इस तापमान पर टाइन्डालाइज़ेशन (उच्च तापमान पर मट्ठा जम जाता है) मट्ठा के आंशिक बंध्याकरण के लिए आवश्यक है, हालांकि इसकी तैयारी की गति अपने आप में सड़न रोकने की गारंटी है।

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि प्रत्येक पांच लीटर की बोतल मूल डिफाइब्रिनेटर लेबल के साथ प्रदान की जाती है, इस प्रकार सीरम की संख्या दाता जानवरों की संख्या से मेल खाती है।

नियंत्रण कार्ड फ़ाइल. कार्ड आपको किसी भी समय दाता जानवर की उत्पत्ति, मट्ठा तैयार करने के चरण, बोतलबंद करने की तारीख, साथ ही मट्ठा के वितरण की जांच करने की अनुमति देता है।

स्वच्छता नियंत्रण. जबकि बर्तन रखे हुए हैं प्रशीतन कक्ष, पशुचिकित्सक निरीक्षक दाता पशुओं के स्वच्छता नियंत्रण में लगे हुए हैं। उनके वध के बाद, तपेदिक के मामूली लक्षण प्रकट करने के लिए पूरी तरह से शव परीक्षण किया जाता है।

यदि किसी बीमारी का पता चलता है, तो संबंधित सीरम को आसानी से वापस लिया जा सकता है। यह ज्ञात है कि प्रत्येक जानवर के रक्त को अलग से संसाधित किया जाता है और सीरम को अलग-अलग, क्रमांकित बोतलों में रखा जाता है।

सेरोथेरेपी केंद्र सार्वजनिक समितिल्योन बूचड़खानों में बचपन की स्वच्छता

नियंत्रण संख्या …

गोजातीय मट्ठा लीटर में

कार्ड और लेबल

उपरोक्त कार्ड और लेबल किसी भी भ्रम को रोकता है।

ल्योन में, स्वच्छता उपाय विशेष रूप से सख्त हैं, क्योंकि वही पशुचिकित्सक जानवरों का चयन करते हैं, खून निकालते हैं और मांस की जांच करते हैं।

उपकरणों का बंध्याकरण. पशु सीरम रोगाणुओं के लिए एक उत्कृष्ट प्रजनन भूमि है और इसे केवल आंशिक रूप से निष्फल किया जा सकता है। 56° से ऊपर के तापमान पर वे जम जाते हैं और एक मजबूत एंटीसेप्टिक मिलाने पर बादल बन जाते हैं। इसलिए, सभी सीरम उत्पादन कार्यों के दौरान, अधिकतम बाँझपन की आवश्यकता होती है; उपयोग से पहले उपकरण को कीटाणुरहित किया जाना चाहिए।

व्यक्तिगत डिफिब्रिनेटर्स को निम्नलिखित तरीके से निष्फल किया जाता है: रक्त संग्रह से एक रात पहले, उन्हें एक एंटीसेप्टिक समाधान से भर दिया जाता है, और रक्त संग्रह से कुछ घंटे पहले, उन्हें डिवाइस के निचले हिस्से में स्थित एक नल का उपयोग करके एंटीसेप्टिक से खाली कर दिया जाता है। सीरम का उत्पादन करने के लिए उपयोग किए जाने वाले सेंट्रीफ्यूज को एक एंटीसेप्टिक के साथ भी इलाज किया जाता है, जिसमें प्रत्येक डिफाइब्रिनेटर की सामग्री को संसाधित करना भी शामिल है।

मट्ठा भंडारण के लिए पांच लीटर के बर्तन सहित सभी कांच के बर्तनों को 180 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एक इलेक्ट्रिक ओवन में निष्फल किया जाता है।

सीरम के लिए 250 मिलीलीटर की बोतलों को भी 180°C पर रोगाणुरहित किया जाता है। ऑपरेशन को सरल बनाने के लिए, व्यंजन बक्सों में रखे जाते हैं, जिनका उपयोग बोतलबंद करने और जनता में वितरण के दौरान किया जाता है।

वोस्करेन्स्क को फूलों की डिलीवरी

बंध्याकरण को भौतिक, रासायनिक, यांत्रिक और जैविक तरीकों और विभिन्न विधियों द्वारा दर्शाया जाता है।

किसी विशेष स्टरलाइज़ेशन विधि और उसके तरीकों का उपयोग करने की व्यवहार्यता स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री की विशेषताओं, उसकी भौतिक और पर निर्भर करती है। रासायनिक गुण.

स्टरलाइज़ेशन की अवधि स्टरलाइज़ की जा रही वस्तु, स्टरलाइज़िंग एजेंट और उसकी खुराक, वातावरण के तापमान और आर्द्रता पर निर्भर करती है।

शारीरिक बंध्याकरण विधि

तरीकों के लिए भौतिक विधिबंध्याकरण में सुखाना, जलाना और कैल्सीनेशन, उबालना, पास्चुरीकरण और टिंडाइजेशन शामिल है। गरम हवा(शुष्क ताप), अल्ट्रासाउंड, पराबैंगनी और रेडियोधर्मी विकिरण, उच्च आवृत्ति धारा, सूर्य का प्रकाश।

उच्च तापमान के संपर्क में आने वाली वस्तुओं को स्टरलाइज़ करने का सबसे आम तरीका आग, गर्म हवा और दबाव में संतृप्त भाप से स्टरलाइज़ करना है।

आग का उपयोग उन संक्रमित वस्तुओं को जलाने के लिए किया जाता है जिनका कोई मूल्य नहीं है (अनावश्यक कागजात, पुराने वॉलपेपर, लत्ता, कचरा), तपेदिक के रोगियों के थूक को कीटाणुरहित करने के लिए, विशेष रूप से खतरनाक संक्रमण से मरने वाले लोगों और जानवरों की लाशों को कीटाणुरहित करने के लिए, साथ ही साथ विभिन्न वस्तुओं को जलाना और शांत करना।

उपकरणों, प्रयोगशाला और फार्मास्युटिकल कांच के बर्तनों के कीटाणुशोधन के लिए सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में जलने और कैल्सीनेशन का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

बर्नर की लौ में कैल्सीनेशन या फ्लेम्बिंग नसबंदी की एक विधि है जिसमें वस्तु पूरी तरह से निष्फल हो जाती है, क्योंकि वनस्पति कोशिकाएं, सिस्ट और सूक्ष्मजीवों के बीजाणु मर जाते हैं।

आमतौर पर, लूप, स्पैटुला, पिपेट, स्लाइड और कवरस्लिप, छोटे उपकरण और अन्य दूषित वस्तुओं को कैल्सीनेशन द्वारा निष्फल कर दिया जाता है यदि उन्हें उबाला नहीं जा सकता है। कैंची और स्केलपेल को गर्म करके कीटाणुरहित करने की अनुशंसा नहीं की जाती है, क्योंकि आग के संपर्क में आने पर काटने की सतह सुस्त हो जाती है।

चिकित्सा पद्धति में उपयोग की जाने वाली शारीरिक नसबंदी की सबसे सरल और सबसे आम विधियों में से एक गर्म हवा नसबंदी (शुष्क गर्मी) है। सूखी गर्मी नसबंदी में किया जाता है सुखाने वाली अलमारियाँ(पाश्चर ओवन)। शुष्क गर्म हवा में जीवाणुनाशक, विषाणुनाशक, बीजाणुनाशक प्रभाव होता है और इसका उपयोग मुख्य रूप से कांच उत्पादों (प्रयोगशाला) के बंध्याकरण के लिए किया जाता है व्यंजन - कपपेट्री फ्लास्क, पिपेट, टेस्ट ट्यूब, आदि), साथ ही धातु उत्पाद जिन्हें दबाव में भाप से निष्फल किया जा सकता है।

इसके अलावा, सूखी गर्मी का उपयोग चीनी मिट्टी के बरतन और गर्मी प्रतिरोधी पदार्थों (तालक, सफेद मिट्टी), साथ ही खनिज और से बनी वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। वनस्पति तेल, वसा, पेट्रोलियम जेली, लैनोलिन, मोम। इस नसबंदी विधि के लिए सबसे प्रभावी तरीका, जो वनस्पति रूपों और बीजाणुओं की मृत्यु सुनिश्चित करता है, 15 मिनट के लिए 160 - 180 डिग्री का तापमान है।

आप खाद्य पदार्थों, आइसोटोनिक घोल, या रबर और सिंथेटिक सामग्री से बनी वस्तुओं को सूखी गर्मी से कीटाणुरहित नहीं कर सकते, क्योंकि तरल पदार्थ उबल जाते हैं और बाहर निकल जाते हैं, और रबर और सिंथेटिक सामग्री पिघल जाती है।

नसबंदी संतृप्त भापदबाव में - यह ड्रेसिंग, पानी, कुछ को स्टरलाइज़ करने का सबसे विश्वसनीय और सबसे अधिक आजमाया हुआ तरीका है दवाइयाँ, पोषक तत्व मीडिया, नरम उपकरण, उपकरण, साथ ही अपशिष्ट दूषित सामग्री के कीटाणुशोधन के लिए।

शल्य चिकित्सा अभ्यास में ड्रेसिंग, सर्जन के गाउन और जिस व्यक्ति का ऑपरेशन किया जा रहा है उसके अंडरवियर को आटोक्लेव में भाप का उपयोग करके कीटाणुरहित किया जाता है। दबाव में भाप निर्जलीकरण किया जाता है विशेष उपकरण– आटोक्लेव.

आटोक्लेविंग सभी सूक्ष्मजीवों और बीजाणुओं को पूरी तरह से नष्ट कर देता है। भाप दबाव नसबंदी विधि वायुमंडलीय दबाव के ऊपर दबाव में संतृप्त जल वाष्प के साथ सामग्री को गर्म करने पर आधारित है। उच्च तापमान और भाप की संयुक्त क्रिया इस विधि को विशेष रूप से प्रभावी बनाती है। इस मामले में, वनस्पति कोशिकाएं और माइक्रोबियल बीजाणु दोनों मर जाते हैं।

संतृप्त जल वाष्प के प्रभाव में माइक्रोबियल बीजाणु 10 मिनट के भीतर मर जाते हैं, और वनस्पति रूप 1 से 4 मिनट के भीतर मर जाते हैं।

संतृप्त भाप की उच्च जीवाणुनाशक शक्ति इस तथ्य के कारण है कि, दबाव में जल वाष्प के प्रभाव में, माइक्रोबियल कोशिका के प्रोटीन सूज जाते हैं और जम जाते हैं, जिसके परिणामस्वरूप माइक्रोबियल कोशिकाएं मर जाती हैं।

संतृप्त जलवाष्प का जीवाणुनाशक प्रभाव अतिरिक्त दबाव से बढ़ जाता है।

आटोक्लेव में स्टरलाइज़ेशन विभिन्न तरीकों से किया जाता है।

इस प्रकार, सरल पोषक माध्यम (मांस - पेप्टोन अगर और मांस - पेप्टोन शोरबा) को 120 डिग्री (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। लेकिन इस मोड के साथ प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट और अन्य पदार्थों वाले मीडिया को स्टरलाइज़ करना असंभव है जो आसानी से गर्म करने पर बदल जाते हैं।

कार्बोहाइड्रेट युक्त मीडिया को 0.5 एटीएम पर आटोक्लेव में निष्फल किया जाता है। 10 - 15 मिनट या आंशिक रूप से बहने वाली भाप।

उच्च तापमान का उपयोग करके, आप न केवल कीटाणुरहित वस्तुओं की सतह पर, बल्कि उनकी गहराई में भी रोगजनक सूक्ष्मजीवों (बीजाणु बनाने वाले सहित) के सबसे लगातार रूपों को नष्ट कर सकते हैं।

बंध्याकरण के विश्वसनीय साधन के रूप में उच्च तापमान का यह बहुत बड़ा लाभ है। हालाँकि, कुछ वस्तुएँ उच्च तापमान के प्रभाव में खराब हो जाती हैं और इन मामलों में कीटाणुशोधन के अन्य तरीकों और साधनों का सहारा लेना आवश्यक है।

उन सामग्रियों और वस्तुओं की पूर्ण नसबंदी जो उच्च तापमान नसबंदी के उपयोग की अनुमति नहीं देती है, 100 डिग्री से अधिक नहीं के तापमान पर कोच उपकरण में जल वाष्प के साथ बार-बार नसबंदी द्वारा प्राप्त की जाती है। इस विधि को फ्रैक्शनल स्टरलाइज़ेशन कहा जाता है। यह इस तथ्य पर उबलता है कि रोगाणुओं के शेष अकुशल बीजाणु रूप, थर्मोस्टेट में 37 डिग्री पर एक दिन के बाद, वनस्पति कोशिकाओं में अंकुरित होते हैं, जिनकी मृत्यु बाद के नसबंदी के दौरान होती है इस वस्तु काबहती भाप.

तरल भाप से उपचार 30-40 मिनट तक तीन बार किया जाता है। किसी सामग्री को 100 डिग्री से कम तापमान पर एक बार गर्म करना पास्चुरीकरण कहलाता है। पाश्चरीकरण पाश्चर द्वारा प्रस्तावित किया गया था और इसका उद्देश्य मुख्य रूप से ज्यादातर गैर-बीजाणु सूक्ष्मजीवों को नष्ट करना है। पाश्चुरीकरण 60-70 डिग्री पर 15 से 30 मिनट के लिए, 80 डिग्री पर 10 से 15 मिनट के लिए किया जाता है।

सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में, पास्चुरीकरण बीज सामग्रीअक्सर बीजाणु बनाने वाले सूक्ष्मजीवों की शुद्ध संस्कृतियों को अलग करने और बीजाणु बनाने के लिए सूक्ष्मजीवों की क्षमता निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है।

उन तरल पदार्थों के लिए जो उच्च तापमान (दूध, बेरी और फलों के रस, बीयर, कार्बोहाइड्रेट या यूरिया युक्त पोषक माध्यम, आदि) के संपर्क में आने पर स्वाद और अन्य मूल्यवान गुण खो देते हैं, बहती भाप के साथ नसबंदी 15 के लिए 50 - 60 डिग्री पर की जाती है - 33333330 मिनट या 5-10 मिनट के लिए 70-80 डिग्री पर। इस मामले में, औसत प्रतिरोध वाले रोगाणु मर जाते हैं, जबकि अधिक प्रतिरोधी रोगाणु और बीजाणु संरक्षित रहते हैं।

1 घंटे के लिए 60 डिग्री पर फ्रैक्शनल 5-6 गुना स्टरलाइज़ेशन को टाइन्डलाइज़ेशन कहा जाता है।

अनेक चिकित्सा उत्पाद बनाए जाते हैं पॉलिमर सामग्री, नसबंदी का सामना न करें भाप विधिआम तौर पर स्वीकृत तरीकों के अनुसार। कई उत्पादों के लिए, उनमें मौजूद तरल पदार्थों (परिरक्षकों, दवाओं और अन्य उत्पादों) की विशेषताओं के कारण, आम तौर पर स्वीकृत तरीकों और विधियों का उपयोग करके स्टरलाइज़ करना असंभव है। ऐसे उत्पादों के लिए, वस्तुओं की विश्वसनीय नसबंदी सुनिश्चित करने के लिए व्यक्तिगत नसबंदी व्यवस्था विकसित की जाती है।

इस प्रकार, रक्त को अंशों में अलग करने के लिए रोटर की नसबंदी 45 मिनट के लिए 120 डिग्री के तापमान पर जल वाष्प के साथ की जाती है।

परिरक्षक कंटेनरों की बाँझपन 60 मिनट के लिए 110 डिग्री पर प्राप्त किया जाता है।

उबालना एक नसबंदी विधि है जिसका उपयोग पुन: प्रयोज्य सीरिंज, सर्जिकल उपकरणों, रबर ट्यूब, कांच और धातु के बर्तनों को नष्ट करने के लिए किया जाता है।

स्टरलाइज़र में उबालकर स्टरलाइज़ेशन किया जाता है। उबलते पानी में बीजाणु 20-30 मिनट के बाद मर जाते हैं। 45 मिनट तक उबालने का उपयोग व्यापक रूप से स्राव और अन्य संक्रामक सामग्री, लिनन, व्यंजन, खिलौने और रोगी देखभाल वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है।

गर्म पानी (60 - 100 डिग्री) के साथ डिटर्जेंटधोने और सफाई के लिए उपयोग किया जाता है यांत्रिक निष्कासनप्रदूषक और सूक्ष्मजीव।

अधिकांश वनस्पति कोशिकाएं 30 मिनट के बाद 70 डिग्री पर मर जाती हैं।

निस्पंदन स्टरलाइज़ेशन का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां सब्सट्रेट्स हीटिंग का सामना नहीं कर सकते हैं, विशेष रूप से प्रोटीन, सीरम, कुछ एंटीबायोटिक्स, विटामिन और वाष्पशील पदार्थों वाले मीडिया के लिए। किसी कल्चर तरल को स्टरलाइज़ करने के लिए इस तकनीक का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, जब इसे माइक्रोबियल कोशिकाओं से मुक्त करना आवश्यक होता है, लेकिन इसमें मौजूद सभी चयापचय उत्पादों को अपरिवर्तित बनाए रखना आवश्यक होता है।

इस विधि में विशेष फिल्टर के माध्यम से तरल पदार्थ को फ़िल्टर करना शामिल है जिसमें बारीक छिद्रपूर्ण विभाजन होते हैं और इसलिए माइक्रोबियल कोशिकाएं बरकरार रहती हैं।

फिल्टर के दो सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले प्रकार झिल्ली फिल्टर और सेइट्ज फिल्टर हैं।

झिल्ली फिल्टर कोलोडियन, एसीटेट, सेलूलोज़ और अन्य सामग्रियों से तैयार किए जाते हैं।

सेट्ज़ फिल्टर एस्बेस्टस और सेल्युलोज के मिश्रण से बनाए जाते हैं।

इसके अलावा, मिश्रण के साथ काओलिन से बने फिल्टर का उपयोग नसबंदी के लिए किया जाता है। रेत क्वार्ट्ज, इन्फ्यूसर मिट्टी से और अन्य सामग्रियों से (चेम्बरलान, बर्कफेल्ड द्वारा "मोमबत्तियाँ")।

मेम्ब्रेन और एस्बेस्टस फिल्टर एक बार उपयोग के लिए डिज़ाइन किए गए हैं।

पराबैंगनी विकिरण के साथ, जीवाणुनाशक प्रभाव 200 - 450 एनएम की लंबाई वाली किरणों द्वारा प्रदान किया जाता है, जिसका स्रोत जीवाणुनाशक लैंप है।

जीवाणुनाशक लैंप का उपयोग करके नसबंदी की जाती है पराबैंगनी किरणऔषधीय में वायु निवारक संस्थाएँ, उद्यमों में सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशालाओं के बक्से खाद्य उद्योग, टीके और सीरम के उत्पादन के लिए बक्सों में, ऑपरेटिंग रूम, हेरफेर रूम, बच्चों के संस्थानों आदि में।

पराबैंगनी किरणों में उच्च रोगाणुरोधी गतिविधि होती है और यह न केवल वनस्पति कोशिकाओं, बल्कि उनके बीजाणुओं की भी मृत्यु का कारण बन सकती है।

क्रिया के परिणामस्वरूप सूर्य का प्रकाश सूक्ष्मजीवों की मृत्यु का कारण बनता है पराबैंगनी विकिरणऔर सूखना.

धूप में सुखाने से कई प्रकार के सूक्ष्मजीवों पर हानिकारक प्रभाव पड़ता है, लेकिन इसका प्रभाव सतही होता है और इसलिए सूर्य की रोशनी नसबंदी अभ्यास में सहायक भूमिका निभाती है।

में हाल ही मेंघावों और जलने के उपचार में सिंथेटिक और प्राकृतिक पॉलिमर से बनी कोटिंग का उपयोग जैल के रूप में किया जाता है।

घावों और जलने के स्थानीय उपचार के लिए पॉलिमर एंटीसेप्टिक फिल्मों का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। इनमें कैटापोल, डाइऑक्साइडिन, ब्लू आयोडीन, साथ ही ग्लूटाराल्डिहाइड युक्त सोर्बिटोल जैसे व्यापक स्पेक्ट्रम रोगाणुरोधी एजेंट होते हैं। इन फिल्मों को स्टरलाइज़ करने के लिए इसका उपयोग किया जाता है आयनित विकिरण 20.0 kGy की खुराक पर। पॉलिमर एंटीसेप्टिक फिल्मों और सॉर्बेंट्स के औद्योगिक उत्पादन के दौरान, इस नसबंदी व्यवस्था के तहत उनकी बाँझपन पूरी तरह से सुनिश्चित की जाती है।

रेडियोधर्मी विकिरण वनस्पति और बीजाणु दोनों रूपों में सभी प्रकार के सूक्ष्मजीवों को मारता है। कीटाणुशोधन के लिए बाँझ उत्पादों और बाँझ डिस्पोजेबल चिकित्सा उपकरणों का उत्पादन करने वाले उद्यमों में नसबंदी के लिए इसका व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है अपशिष्टऔर पशु मूल के कच्चे माल।

यांत्रिक विधिनसबंदी

यांत्रिक नसबंदी विधियाँ वस्तुओं की सतह से कीटाणुओं को हटा देती हैं। इनमें धुलाई, झाड़ना, झाड़ना, गीला पोंछना, हवा देना, वेंटिलेशन, वैक्यूमिंग, धुलाई शामिल है।

रासायनिक बंध्याकरण विधि

चिकित्सा पद्धति में प्लास्टिक का अब तेजी से उपयोग हो रहा है।

इनका उपयोग दंत चिकित्सा, मैक्सिलोफेशियल सर्जरी, ट्रॉमेटोलॉजी, आर्थोपेडिक्स और सर्जरी में किया जाता है। अधिकांश प्लास्टिक दबाव और शुष्क गर्मी (शुष्क गर्म हवा) के तहत भाप की गर्मी नसबंदी विधियों का सामना नहीं कर सकते हैं। ऐसी वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए उपयोग किए जाने वाले अल्कोहल, डायोसाइड और टर्नरी समाधान के समाधान संसाधित किए जा रहे उत्पादों की बाँझपन सुनिश्चित नहीं करते हैं।

इसलिए, प्लास्टिक उत्पादों को कीटाणुरहित करने के लिए गैस और विकिरण विधियों के साथ-साथ रसायनों के समाधान का उपयोग किया जाता है।

चिकित्सा संस्थानों के अभ्यास में परिचय बड़ी संख्या मेंथर्मोलैबाइल सामग्रियों से बने उत्पाद विकिरण की शुरूआत में योगदान करते हैं, गैस विधियाँकीटाणुनाशक समाधानों के साथ कीटाणुशोधन और नसबंदी।

पर रासायनिक बंध्याकरणविभिन्न रासायनिक समूहों (पेरोक्साइड, फेनोलिक, हैलोजन युक्त, एल्डिहाइड, क्षार और एसिड, सर्फेक्टेंट, आदि) से गैसों और एजेंटों का उपयोग करें। रोजमर्रा के उपयोग के लिए, डिटर्जेंट, सफाई, ब्लीचिंग और अन्य तैयारी का उत्पादन किया जाता है जिसमें विभिन्न पदार्थों की शुरूआत के कारण रोगाणुरोधी प्रभाव होता है। रासायनिक पदार्थ.

इन तैयारियों का उपयोग सैनिटरी की सफाई और कीटाणुशोधन के लिए किया जाता है तकनीकी उपकरण, व्यंजन, लिनेन, आदि।

फॉर्मेल्डिहाइड वाष्प (वाष्परूप) का उपयोग किया जा सकता है चिकित्सा संस्थाननसबंदी के लिए धातु उत्पादचिकित्सा प्रयोजन (स्केलपेल, सुई, चिमटी, जांच, क्लैंप, हुक, तार कटर, आदि)।

फॉर्मेल्डिहाइड वाष्प के साथ नसबंदी से पहले, उत्पादों को पूर्व-नसबंदी सफाई से गुजरना चाहिए और अच्छी तरह से सूखना चाहिए।

जब किसी भी प्रकार से निष्फल कर दिया जाए रासायनिककिसी विशेष वस्तु के प्रसंस्करण के नियम कीटाणुरहित की जाने वाली वस्तु की विशेषताओं, रोगाणुओं के प्रतिरोध और गुणों की विशेषताओं पर निर्भर करते हैं। रासायनिक तैयारी, परिवेश का तापमान, आर्द्रता और अन्य कारक।

इस प्रकार, धातु उपकरणों की बाँझपन उन्हें कम से कम 20 डिग्री के तापमान पर पांच घंटे तक भाप के साथ एक सीलबंद कक्ष में रखकर प्राप्त की जाती है। सापेक्षिक आर्द्रता 95 - 98%, 15 डिग्री के तापमान पर, इन वस्तुओं की पूर्ण बाँझपन 16 घंटों के बाद ही प्राप्त होती है।

ग्लूटाराल्डिहाइड की स्पोरिसाइडल गतिविधि तापमान पर निर्भर करती है। इसकी सर्वोत्तम क्रिया 15 - 25 डिग्री के तापमान पर होती है। जैसे-जैसे तापमान बढ़ता है, इस दवा की स्पोरिसाइडल गतिविधि कम हो जाती है।

नसबंदी रासायनिक विधिउपयोग कुछ हद तक सीमित है. अक्सर, इस पद्धति का उपयोग कल्चर मीडिया और इम्युनोबायोलॉजिकल तैयारी (टीके और सीरम) के जीवाणु संदूषण को रोकने के लिए किया जाता है। क्लोरोफॉर्म, टोल्यूनि और ईथर जैसे पदार्थ अक्सर पोषक मीडिया में जोड़े जाते हैं। यदि माध्यम को इन परिरक्षकों से मुक्त करना आवश्यक हो, तो इसे पानी के स्नान में 56 डिग्री पर गर्म किया जाता है और परिरक्षक वाष्पित हो जाते हैं।

टीकों या सीरम के संरक्षण के लिए मेरथिओलेट का उपयोग किया जाता है, बोरिक एसिड, फॉर्मेलिन।

जैविक विधिनसबंदी

जैविक नसबंदी एंटीबायोटिक दवाओं के उपयोग पर आधारित है।

वायरस की खेती में इस विधि का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

बंध्याकरण (लैटिन स्टेरिलिस से - बाँझ) में संसाधित वस्तुओं पर रोगाणुओं की पूर्ण निष्क्रियता शामिल है।

पाश्चर ओवन - सूखी गर्मी नसबंदी।

नसबंदी की तीन मुख्य विधियाँ हैं: ताप, विकिरण, रसायन।

आयोडीन.

हीट स्टरलाइज़ेशन उच्च तापमान के प्रति रोगाणुओं की संवेदनशीलता पर आधारित है।

60 डिग्री सेल्सियस और पानी की उपस्थिति पर, एंजाइमों सहित प्रोटीन का विकृतीकरण होता है, जिसके परिणामस्वरूप रोगाणुओं के वानस्पतिक रूप मर जाते हैं। बहुत युक्त विवाद एक बड़ी संख्या कीबंधे हुए अवस्था में और घने गोले वाले पानी को 160-170 डिग्री सेल्सियस पर निष्क्रिय कर दिया जाता है। ऊष्मा स्टरलाइज़ेशन के लिए मुख्य रूप से सूखी ऊष्मा और दबाव वाली भाप का उपयोग किया जाता है।
ड्राई हीट स्टरलाइज़ेशन ड्राई हीट ओवन या पाश्चर ओवन में किया जाता है। पाश्चर ओवन एक कसकर बंद धातु कैबिनेट है, जिसे बिजली से गर्म किया जाता है और थर्मामीटर से सुसज्जित किया जाता है।

इसमें मौजूद सामग्री का कीटाणुशोधन 160-170 डिग्री सेल्सियस पर 60-120 मिनट तक होता है। इस पद्धति का नुकसान यह है कि केवल कुछ रोगाणुहीन वस्तुएं, जैसे प्रयोगशाला कांच, ही इतने उच्च तापमान का सामना कर सकती हैं।
नसबंदी की सबसे सार्वभौमिक विधि आटोक्लेव में दबाव के तहत भाप उपचार है, जिसमें ड्रेसिंग, लिनन, कई उपकरण, संस्कृति मीडिया, समाधान, संक्रामक सामग्री आदि को निष्फल किया जाता है।

आटोक्लेव मजबूत दीवारों वाला एक धातु सिलेंडर है, जो भली भांति बंद करके सील किया गया है, जिसमें एक जल-भाप और स्टरलाइज़िंग कक्ष होता है। यह उपकरण एक दबाव नापने का यंत्र, थर्मामीटर और अन्य निगरानी उपकरणों से सुसज्जित है। आटोक्लेव में दबाव बढ़ जाता है, जिससे पानी का क्वथनांक बढ़ जाता है। तो, 0.5 एटीएम पर क्वथनांक 80 डिग्री सेल्सियस, 1 एटीएम पर - 100 डिग्री सेल्सियस, 2 एटीएम पर - 121 डिग्री सेल्सियस और 3 एटीएम पर - 136 डिग्री सेल्सियस है।

इस तथ्य के कारण कि, उच्च तापमान के अलावा, भाप सूक्ष्मजीवों पर कार्य करती है, बीजाणु 120 डिग्री सेल्सियस पर पहले ही मर जाते हैं। सबसे आम आटोक्लेव ऑपरेटिंग मोड 2 एटीएम, 121 डिग्री सेल्सियस, 15-20 मिनट है। नसबंदी का समय बढ़ने के साथ घटता जाता है वायु - दाब, और इसलिए क्वथनांक। सूक्ष्मजीव कुछ सेकंड में मर जाते हैं, लेकिन सामग्री को लंबे समय तक संसाधित किया जाता है, क्योंकि, सबसे पहले, निष्फल की जाने वाली सामग्री के अंदर तापमान अधिक होना चाहिए, और दूसरी बात, एक तथाकथित सुरक्षा क्षेत्र होता है, जिसे संभावित विचलन के लिए डिज़ाइन किया गया है आटोक्लेव ऑपरेशन करते समय निर्दिष्ट पैरामीटर।

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पाश्चर ओवन (सुखाने वाले ओवन) में सूखी गर्मी या गर्म हवा के साथ नसबंदी की जाती है। पाश्चर ओवन एक दोहरी दीवार वाली कैबिनेट है जो गर्मी प्रतिरोधी सामग्री - धातु और एस्बेस्टस से बनी होती है। गैस बर्नर या इलेक्ट्रिक हीटिंग उपकरणों का उपयोग करके कैबिनेट को गर्म करें। आवश्यक तापमान सुनिश्चित करने के लिए विद्युत रूप से गर्म अलमारियाँ नियामकों से सुसज्जित हैं। तापमान को नियंत्रित करने के लिए कैबिनेट की ऊपरी दीवार के छेद में एक थर्मामीटर डाला जाता है।

सूखी गर्मी का उपयोग प्रयोगशाला के कांच के बर्तनों को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। स्टरलाइज़ेशन के लिए तैयार किए गए बर्तनों को स्टरलाइज़ की जा रही सामग्री की एक समान और विश्वसनीय हीटिंग सुनिश्चित करने के लिए ओवन में लोड किया जाता है। कैबिनेट के दरवाज़े को कसकर बंद करें, हीटिंग डिवाइस चालू करें, तापमान को 160-165 डिग्री सेल्सियस पर लाएं और 1 घंटे के लिए इस तापमान पर स्टरलाइज़ करें। स्टरलाइज़ेशन के अंत में, हीटिंग बंद कर दें, लेकिन कैबिनेट का दरवाज़ा तब तक न खोलें जब तक ओवन ठंडा हो गया है; अन्यथा ठंडी हवा, कैबिनेट में प्रवेश करने से गर्म कुकवेयर में दरारें पड़ सकती हैं।

पाश्चर ओवन में स्टरलाइज़ेशन अलग-अलग तापमान और एक्सपोज़र (नसबंदी समय) पर किया जा सकता है (तालिका 1)।

तालिका 1. बंध्याकरण मोड

तरल पदार्थ (पोषक तत्व मीडिया, आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान, आदि), रबर और सिंथेटिक सामग्री से बनी वस्तुओं को सूखी गर्मी से निष्फल नहीं किया जा सकता है, क्योंकि तरल पदार्थ उबल कर बाहर निकल जाते हैं, और रबर और सिंथेटिक सामग्री पिघल जाती है।

पाश्चर ओवन में नसबंदी को नियंत्रित करने के लिए, रेशम के धागों को बीजाणु बनाने वाले बैक्टीरिया के कल्चर में गीला किया जाता है, सुखाया जाता है, एक बाँझ पेट्री डिश में रखा जाता है और पाश्चर ओवन में रखा जाता है। 1 घंटे के लिए 165 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर स्टरलाइज़ेशन किया जाता है (नियंत्रण के लिए, कुछ धागों को कमरे के तापमान पर छोड़ दिया जाता है)। फिर निष्फल और नियंत्रण धागों को पेट्री डिश में अगर की सतह पर रखा जाता है या शोरबा के साथ टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है और 2 दिनों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोस्टेट में रखा जाता है। पर उचित संचालनपोषक मीडिया के साथ टेस्ट ट्यूब या डिश में पाश्चर ओवन जहां निष्फल धागे रखे गए थे, वहां कोई वृद्धि नहीं होगी, क्योंकि जीवाणु बीजाणु मर जाएंगे, जबकि धागे पर जीवाणु बीजाणु जो निष्फल नहीं थे (नियंत्रण) अंकुरित होंगे और विकास पोषक मीडिया पर नोट किया जाएगा .

पाश्चर ओवन के अंदर का तापमान निर्धारित करने के लिए, आप सुक्रोज या दानेदार चीनी का उपयोग कर सकते हैं, जो 165-170 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर कारमेलाइज़ होता है।

पाश्चर ओवन में नसबंदी के लिए प्रयोगशाला कांच के बर्तन तैयार करना. नसबंदी से पहले, प्रयोगशाला के कांच के बर्तन (पेट्री डिश, स्नातक और पाश्चर पिपेट, शीशियां, फ्लास्क, टेस्ट ट्यूब) को अच्छी तरह से धोया जाना चाहिए, सुखाया जाना चाहिए और कागज में लपेटा जाना चाहिए, अन्यथा नसबंदी के बाद वे फिर से वायु बैक्टीरिया से दूषित हो सकते हैं।

पेट्री डिश को एक समय में एक या अधिक टुकड़ों में कागज में लपेटा जाता है या विशेष धातु के बक्सों में रखा जाता है।

परीक्षण सामग्री को मुंह में प्रवेश करने से रोकने के लिए पिपेट के ऊपरी सिरों में रुई के फाहे डाले जाते हैं। स्नातक पिपेट को 4-5 सेमी चौड़ी कागज की लंबी पट्टियों में लपेटा जाता है। लपेटे गए पिपेट का आयतन कागज पर अंकित होता है। पेंसिल केस में, स्नातक किए गए पिपेट को कागज में अतिरिक्त लपेटे बिना निष्फल किया जाता है।

टिप्पणी. यदि पिपेट पर ग्रेजुएशन खराब दिखाई देता है, तो इसे नसबंदी से पहले बहाल कर दिया जाता है। पिपेट पर ऑयल पेंट लगाया जाता है और, पेंट को सूखने दिए बिना, कपड़े का उपयोग करके बेरियम सल्फेट पाउडर को इसमें रगड़ा जाता है। इसके बाद कपड़े से अतिरिक्त पेंट हटा दें, जो केवल ग्रेजुएशन नॉच में ही रह जाता है। इस तरह से उपचारित पिपेट को धोना चाहिए।

पाश्चर पिपेट के नुकीले सिरों को बर्नर की लौ में सील कर दिया जाता है और एक बार में 3-5 टुकड़ों में कागज में लपेट दिया जाता है। पाश्चर पिपेट को सावधानी से लपेटा जाना चाहिए ताकि केशिकाओं के सीलबंद सिरे टूट न जाएं।

शीशियाँ, फ्लास्क, टेस्ट ट्यूब कपास-धुंध स्टॉपर्स के साथ बंद हैं। कॉर्क को बर्तन की गर्दन में उसकी लंबाई का 2/3 भाग फिट होना चाहिए, बहुत तंग नहीं, लेकिन ढीला भी नहीं। प्रत्येक बर्तन (टेस्ट ट्यूब को छोड़कर) पर स्टॉपर्स के ऊपर एक पेपर कैप लगाई जाती है। टेस्ट ट्यूबों को 5-50 के समूह में एक साथ बांधा जाता है और कागज से लपेटा जाता है।

टिप्पणी. उच्च तापमान पर, कागज जिसमें कप और पिपेट लपेटे जाते हैं, और रूई पीली हो जाती है और जल भी सकती है, इसलिए हर नई किस्मप्रयोगशाला द्वारा प्राप्त कागज का परीक्षण स्वीकृत तापमान स्थितियों पर किया जाना चाहिए।

प्रश्नों पर नियंत्रण रखें

1. नसबंदी शब्द का क्या अर्थ है?

2. नसबंदी कैसे की जाती है?

3. आग पर कैल्सीनेशन द्वारा क्या निष्फल किया जाता है?

4. पाश्चर ओवन की संरचना और संचालन मोड का वर्णन करें।

5. पाश्चर ओवन में क्या निष्फल किया जाता है?

6. नसबंदी के लिए कांच के बर्तन कैसे तैयार किए जाते हैं?

7. पाश्चर ओवन में पोषक तत्व मीडिया और रबर की वस्तुओं को निष्फल क्यों नहीं किया जा सकता है?

व्यायाम

स्टरलाइज़ेशन के लिए पेट्री डिश, ग्रेजुएटेड पिपेट, पाश्चर पिपेट, टेस्ट ट्यूब, फ्लास्क और शीशियाँ तैयार करें।

नसबंदी- बांझपन; किसी भी सामग्री में वनस्पति और बीजाणु रूपों में रोगजनक और गैर-रोगजनक सूक्ष्मजीवों का विनाश।

नसबंदी के लिए व्यंजन तैयार करना। प्रयोगशाला के कांच के बर्तनों को साफ-सुथरा धोना और कीटाणुरहित करना चाहिए। धोने के लिए साबुन के घोल या रासायनिक डिटर्जेंट का उपयोग करें। नए व्यंजन 1-2% घोल में पहले से उबाले जाते हैं हाइड्रोक्लोरिक एसिड का, कांच के बाद के लीचिंग से बचने के लिए। बहते पानी में धोए गए बर्तनों को आसुत जल से धोया जाता है और सुखाया जाता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल ट्यूब. शंक्वाकार, मैट फ्लास्क कपास-धुंध स्टॉपर्स के साथ बंद होते हैं, जिसमें धुंध की एक परत से ढके कपास ऊन के कसकर मुड़े हुए रोल होते हैं। बैक्टीरियोलॉजिकल टेस्ट ट्यूब के लिए बाहरी कैप के रूप में धातु स्टॉपर्स भी विकसित किए गए हैं। यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि उच्च तापमान पर कॉटन प्लग को स्टरलाइज़ करने से कॉटन वूल से ऐसे पदार्थ निकलते हैं जो ब्रूसेला जैसे कुछ संवेदनशील बैक्टीरिया के विकास को रोकते हैं।

पिपेट स्थापित करते समय, ऊपरी सिरे में एक कपास झाड़ू डालें। पाश्चर पिपेट में एक सीलबंद केशिका होनी चाहिए। प्रत्येक मापने वाले पिपेट को टोंटी से शुरू करके, उसकी पूरी लंबाई के साथ पेचदार तरीके से, 4-5 सेमी चौड़ी कागज की एक लंबी पट्टी में लपेटा जाता है। पाश्चर पिपेट को कागज में लपेटा जाता है, प्रत्येक 10-20 टुकड़े, टेस्ट ट्यूब - 15-20 टुकड़े प्रत्येक। नसबंदी से पहले और बाद में सभी प्रकार के पिपेट को विशेष धातु के डिब्बों में संग्रहित करना बेहतर होता है। फ्लास्क पर लगे स्टॉपर्स अतिरिक्त रूप से पेपर कैप से ढके होते हैं।

स्टरलाइज़ेशन से पहले, साफ, एकत्रित पेट्री डिश को 3 से 4 टुकड़ों में कागज में लपेटा जाता है। नसबंदी के बाद, कागज रोगाणुहीन कांच के बर्तनों को माइक्रोफ्लोरा द्वारा संदूषण से बचाता है।

स्टरलाइज़ेशन से पहले, हवा के संचार को सुनिश्चित करने के लिए बर्तनों को सुखाने वाले कैबिनेट में बहुत कसकर नहीं रखा जाता है, और इस बात का ध्यान रखा जाता है कि तापमान 180 डिग्री सेल्सियस से अधिक न हो, क्योंकि उच्च तापमान पर कागज और रूई जल जाएगी। स्टरलाइज़ेशन पूरा होने के बाद, तब तक सुखाने वाली कैबिनेट नहीं खोली जाती है। जब तक इसमें तापमान 70-80?C तक न गिर जाए, क्योंकि तेज़ गिरावटतापमान के कारण कांच टूट सकता है।

यदि बर्तनों का उद्देश्य कम से कम 1 एटीएम के दबाव में आटोक्लेविंग द्वारा उनमें पोषक तत्व मीडिया को स्टरलाइज़ करना है, तो वे पूर्व-स्टेरलाइज़ नहीं हैं। मीडिया को बहती भाप से या आटोक्लेव में 0.5 एटीएम से अधिक के दबाव में स्टरलाइज़ करते समय। बाँझ कंटेनरों का उपयोग किया जाना चाहिए।

शुष्क गर्म हवा से बंध्याकरण। इस विधि का उपयोग साफ कांच के बर्तनों को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। इस प्रयोजन के लिए, एक पाश्चर ओवन का उपयोग किया जाता है - दोहरी दीवारों वाला एक विशेष सुखाने वाला कैबिनेट। बाहर गर्मी-रोधी सामग्री से सुसज्जित है। सबसे ऊपर एक थर्मामीटर है. तापरोधी अस्तर और भीतरी भाग के बीच धातु शरीरनीचे एक स्वचालित विद्युत ताप तत्व रखा गया है। जब सुखाने वाली कैबिनेट चालू होती है, तो उसके अंदर की हवा गर्म हो जाती है। एक बार निर्धारित तापमान पर पहुंचने के बाद, नसबंदी का प्रारंभ समय नोट किया जाता है। नसबंदी मोड: 155-160 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर - 2 घंटे के लिए एक्सपोज़र, 165-170 डिग्री सेल्सियस पर - 1-1.5 घंटे, 180 डिग्री सेल्सियस पर - 1 घंटा। नसबंदी समय के बाद, हीटिंग बंद कर दिया जाता है।

आटोक्लेविंग। यह एक विशेष उपकरण - एक आटोक्लेव में उच्च तापमान के साथ संयुक्त दबाव में भाप नसबंदी है। जब संतृप्त भाप किसी ठंडी वस्तु का सामना करती है, तो भाप पानी में संघनित हो जाती है, जिससे बड़ी मात्रा में गर्मी निकलती है। इसके अलावा, भाप की मात्रा कम हो जाती है, जिससे निष्फल की जा रही सामग्री के आंतरिक भागों में इसके प्रवेश की सुविधा होती है। एक शर्त वास्तव में संतृप्त भाप की आपूर्ति है, ताकि किसी ठंडी वस्तु के साथ इसके संपर्क से तत्काल संघनन और ताप हो सके। उद्योग ऊर्ध्वाधर और क्षैतिज आटोक्लेव का उत्पादन करता है।

ऊर्ध्वाधर आटोक्लेव एक दोहरी दीवार वाली बेलनाकार धातु की कड़ाही है, जिसे ढक्कन से सील किया जाता है। एक फ़नल वाले विशेष नल के माध्यम से दीवारों के बीच एक निश्चित स्तर तक पानी डाला जाता है। बॉयलर की आंतरिक दीवार ऊपरी हिस्से में छेद और निचले हिस्से में एक नल से सुसज्जित है, जिसके माध्यम से पानी गर्म होने पर भाप बॉयलर से हवा को विस्थापित करती है। एक धातु सुरक्षात्मक फ्रेम आटोक्लेव के शीर्ष पर रखा गया है, और इसके और आटोक्लेव के बीच ही होना चाहिए मुक्त स्थान. आटोक्लेव को विद्युत नेटवर्क से जोड़कर गर्म किया जाता है।

आटोक्लेव में स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री भरी हुई है, ढक्कन और नल जिसके माध्यम से पानी डाला गया था, बंद कर दिया गया है, और नीचे का नल अस्थायी रूप से खुला छोड़ दिया गया है। आटोक्लेव की दीवारों के बीच गर्म पानी उबलता है, जिसके परिणामस्वरूप भाप ऊपर उठती है और भीतरी दीवार के ऊपरी छिद्रों से होकर बॉयलर में गुजरती है, निचले खुले नल के माध्यम से हवा को बाहर धकेलती है। जब सारी हवा विस्थापित हो जाती है और भाप एक समान धारा में बाहर आने लगती है, तो निचला वाल्व बंद हो जाता है। परिणामस्वरूप, आटोक्लेव के अंदर भाप का दबाव बढ़ जाता है। नसबंदी की शुरुआत उस क्षण को माना जाता है जब दबाव किसी दिए गए मान (दबाव गेज के अनुसार) तक पहुंच जाता है। नसबंदी के दौरान गर्मी को समायोजित किया जाता है, जिससे भाप का दबाव समान स्तर पर बना रहता है। यदि आटोक्लेव के अंदर दबाव अत्यधिक बढ़ जाता है, तो एक सुरक्षा वाल्व होता है जिसके माध्यम से अतिरिक्त भाप स्वचालित रूप से निकल जाती है।

जैसे-जैसे भाप का दबाव बढ़ता है, आटोक्लेव में तापमान तदनुसार बढ़ता जाता है।

दबाव नापने का यंत्र परिवेशी वायुमंडलीय दबाव (760 मिमी एचजी) को ध्यान में रखे बिना भाप के दबाव को दर्शाता है। नसबंदी का समय समाप्त होने के बाद, आटोक्लेव बंद कर दिया जाता है। ठंडा होने के बाद, जब दबाव नापने का यंत्र की रीडिंग शून्य हो, तो भाप छोड़ने के लिए वाल्व खोलें।

क्षैतिज आटोक्लेव डिज़ाइन में ऊर्ध्वाधर आटोक्लेव से भिन्न होता है, लेकिन इसका संचालन सिद्धांत समान होता है।

वायरोलॉजिकल नसबंदी पैथोलॉजिकल जानवर

रोग संबंधी सामग्री को प्रयोगशाला में भेजते समय भरे जाने वाले प्रपत्रों के नमूने

यह एक दोहरी दीवार वाला धातु सिलेंडर है जो बाहर से धातु के आवरण से ढका होता है। इसे कई स्क्रू का उपयोग करके एक विशाल ढक्कन के साथ भली भांति बंद करके सील किया गया है। यह एक सुरक्षा वाल्व और एक भाप वाल्व के साथ एक दबाव नापने का यंत्र से सुसज्जित है।

नसबंदी से पहले, आसुत जल को आवरण पर इंगित रेखा तक पानी मापने वाले गिलास के साथ एक फ़नल के माध्यम से आटोक्लेव में डाला जाता है। स्टरलाइज़ेशन के लिए सामग्री को स्टरलाइज़िंग कक्ष में लोड किया जाता है, ढक्कन के साथ कसकर बंद किया जाता है, स्क्रू किया जाता है और हीटिंग स्रोत चालू किया जाता है। इस स्थिति में, भाप वाल्व खुला छोड़ दिया जाता है। उबलने के दौरान उत्पन्न भाप आटोक्लेव की दीवारों के बीच से गुजरती है और आंतरिक दीवार में छेद के माध्यम से कक्ष में प्रवेश करती है। गर्म करते समय, हवा पहले भाप वाल्व के माध्यम से आटोक्लेव से बाहर आती है, और फिर भाप। शुष्क भाप की एक सतत धारा का निकलना आटोक्लेव से हवा के पूर्ण विस्थापन को इंगित करता है: नल बंद है, और उसी क्षण से आटोक्लेव में दबाव धीरे-धीरे बढ़ना शुरू हो जाता है, दबाव नापने का यंत्र पर सुई ऊपर उठ जाती है। नसबंदी की शुरुआत उस क्षण से मानी जाती है जब दबाव नापने का यंत्र सुई वांछित दबाव तक पहुंच जाती है।

चित्र 3

दबाव नापने का यंत्र की रीडिंग मेल खाती है निश्चित तापमानआटोक्लेव में भाप: 0.50 एमपीए - 112 डिग्री सेल्सियस, 0.1 एमपीए - 120, 0.15 एमपीए - 127, 0.2 एमपीए - 134 डिग्री सेल्सियस।

आटोक्लेव में सामग्री को अक्सर 0.1 एमपीए पर 20-30 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। नसबंदी के अंत में, हीटिंग स्रोत को बंद कर दें (दबाव नापने का यंत्र सुई धीरे-धीरे शून्य तक पहुंच जाती है)। इसके बाद स्टीम वाल्व खोलें और बची हुई भाप को बाहर निकाल दें। फिर सावधानी से ढक्कन खोलें और खोलें। पूरी तरह ठंडा होने के बाद निष्फल सामग्री को हटा दें।

आटोक्लेव का उपयोग व्यंजन, उपकरण, संस्कृति मीडिया (जिलेटिन और कार्बोहाइड्रेट वाले मीडिया को छोड़कर), ड्रेसिंग आदि को कीटाणुरहित करने के लिए किया जा सकता है। काम करते समय, आपको सुरक्षा नियमों का पालन करना चाहिए। जिन व्यक्तियों के पास आटोक्लेव का उपयोग करने के अधिकार का प्रमाण पत्र है, उन्हें काम करने की अनुमति है। आटोक्लेव की सेवाक्षमता की जाँच बॉयलर निरीक्षणालय द्वारा की जाती है।

कोच उपकरण (चित्र 4) एक धातु सिलेंडर है जो बाहर की तरफ ऐसी सामग्री (लिनोलियम, एस्बेस्टस) से ढका होता है जो अच्छी तरह से गर्मी का संचालन नहीं करता है। तली में पानी डाला जाता है और स्टरलाइज़ सामग्री को स्टैंड के ऊपर रखा जाता है। उपकरण एक शंक्वाकार ढक्कन के साथ बंद है, जिसमें थर्मामीटर और भाप आउटलेट के लिए छेद हैं। नीचे पानी निकालने के लिए एक नल है। 30-60 मिनट के लिए 100 डिग्री सेल्सियस पर बहती भाप के साथ नसबंदी की जाती है। इस मोड में, बीजाणु बनाने वाले और गैर-बीजाणु बनाने वाले सूक्ष्मजीवों की वनस्पति कोशिकाएं मर जाती हैं। 18-20 घंटों के अंतराल के साथ तीन दिनों में 30-60 मिनट के लिए आंशिक नसबंदी (तीन बार) आपको वनस्पति कोशिकाओं में बीजाणुओं के अंकुरण के लिए स्थितियां बनाने और उनसे छुटकारा पाने की अनुमति देती है। नसबंदी के बीच के समय अंतराल में, बीजाणु अंकुरित होते हैं और बाद में गर्म करने के दौरान मर जाते हैं। कोच उपकरण उन सामग्रियों को कीटाणुरहित करता है जो 100 डिग्री सेल्सियस (जिलेटिन, दूध, कार्बोहाइड्रेट मीडिया, आदि) से ऊपर तापमान का सामना नहीं कर सकते हैं।

प्रोटीन मीडिया और रक्त सीरम जो 100 डिग्री सेल्सियस के तापमान को सहन नहीं कर सकते हैं उन्हें पानी के स्नान में 56-58 डिग्री सेल्सियस पर आंशिक रूप से निष्फल किया जाता है।

सुखाने वाली कैबिनेट(पाश्चर ओवन) (चित्र 5) एक धातु की दोहरी दीवार वाली कैबिनेट है जो शीर्ष पर एस्बेस्टस से ढकी होती है। ऊपरी दीवार में थर्मामीटर और वेंटिलेशन के लिए छेद हैं। गर्म हवा दीवारों के बीच से नीचे की ओर उठती है और ऊपरी उद्घाटन के माध्यम से कैबिनेट में प्रवेश करती है, जहां निष्फल की जाने वाली सामग्री को अलमारियों पर रखा जाता है। 150 डिग्री सेल्सियस पर 2 घंटे के लिए, 165-170 डिग्री सेल्सियस पर - 45 मिनट के लिए, 180 डिग्री सेल्सियस पर - 15 मिनट के लिए सूखी गर्मी के साथ नसबंदी की जाती है। कांच के बर्तनों को पाश्चर ओवन में निष्फल किया जाता है। नसबंदी के बाद, कैबिनेट को अलग कर दिया जाता है हीटिंग स्रोत और पूर्ण शीतलन के बाद ही खोला जाता है।

बैक्टीरियल फिल्टरबिना गरम किए तरल पदार्थों को जीवाणुरहित करने के लिए उपयोग किया जाता है। इनमें चेम्बरलेंट, बर्कफेल्ड मोमबत्तियाँ और सेट्ज़ एस्बेस्टस फिल्टर (प्लेट्स) शामिल हैं।

फ़िल्टर मोमबत्तियाँ (चित्र 6) बारीक छिद्रपूर्ण पदार्थों से बने खोखले सिलेंडर हैं: क्वार्ट्ज रेत (चेम्बरलान मोमबत्तियाँ) और इन्फ्यूसर पृथ्वी (बर्कफेल्ड मोमबत्तियाँ) के मिश्रण के साथ काओलिन। चेम्बरलेंट मोमबत्तियाँ हैं कई आकारवे छिद्र जिनसे होकर रोगाणु गुजरते हैं। मोमबत्तियाँ जो बड़े बैक्टीरिया को गुजरने की अनुमति देती हैं उन्हें L9, L1(bis), L3, मध्यम वाले - L5, L7, सबसे छोटे वाले - L9, अक्षरों द्वारा निर्दिष्ट किया जाता है। एल11 , एल13 बर्कफेल्ड मोमबत्तियाँ सरंध्रता द्वारा निर्दिष्ट की जाती हैं डब्ल्यू, एन, वी(यू ब्रांड वाली मोमबत्तियों में सबसे बड़े छिद्र होते हैं)।

सेट्ज़ फ़िल्टर विभिन्न आकारों की एस्बेस्टस प्लेटें हैं। स्टरलाइज़ेशन के लिए उपकरण लगाते समय प्लेट को बीच में जाली पर रखा जाता है धातु डिस्क(बीच में एक छेद के साथ), जिन्हें स्क्रू के साथ कसकर दबाया जाता है। माउंटेड फिल्टर को एक स्टॉपर के माध्यम से एक साइड आउटलेट (बन्सेन फ्लास्क) और एक रबर ट्यूब के साथ फ्लास्क में डाला जाता है, कागज में लपेटा जाता है और 20-30 मिनट के लिए 120 डिग्री सेल्सियस पर एक आटोक्लेव में निष्फल किया जाता है।

सामग्री को फ़िल्टर करने के लिए, बुन्सेन फ्लास्क में एक रबर ट्यूब को एक दुर्लभ तेल के साथ जोड़कर उसमें एक वैक्यूम बनाएं हैंड पंपकोमोव्स्की या एक इलेक्ट्रिक वैक्यूम पंप।

काम पूरा करना. सूक्ष्मजीवों की खेती इष्टतम स्तर पर की जाती है तापमान की स्थिति. इस प्रयोजन के लिए, प्रयोगशालाएँ वायु या जल थर्मोस्टेट का उपयोग करती हैं।

(चित्र 7) है धातु कैबिनेटदोहरी दीवारों वाला, जिसके बीच पानी या हवा की एक परत होती है। थर्मोस्टेट का बाहरी भाग एक ऐसी सामग्री से ढका होता है जो गर्मी का खराब संचालन करता है (एस्बेस्टस, लिनोलियम)।

चावल। 4, 5, 6.

थर्मोस्टेट के अंदर विकसित सूक्ष्मजीवों की बीज सामग्री रखने के लिए अलमारियाँ हैं। थर्मोस्टेट में एक स्थिर तापमान थर्मोस्टेट का उपयोग करके बनाए रखा जाता है, जिसे थर्मोस्टेट के शीर्ष आवरण में बनाया जाता है। थर्मोस्टेट उपकरण पदार्थों के रैखिक विस्तार के सिद्धांत पर आधारित है। थर्मोरेगुलेटर थर्मल विस्तार (पीतल, जस्ता) के विभिन्न गुणांक वाले किन्हीं दो धातुओं का एक मिश्र धातु है या अल्कोहल से भरा एक धातु "कुशन", अल्कोहल और ईथर, पारा या अन्य पदार्थों का मिश्रण है जो एक निश्चित तापमान पर अपनी मात्रा बदलते हैं। जब थर्मोस्टेट स्थापित मानदंड से ऊपर गर्म होता है, तो धातुएं फैलती हैं, संपर्क खुल जाते हैं और आगे गर्मी का प्रवाह स्वचालित रूप से विलंबित हो जाता है। तापमान गिरने के बाद यह चालू हो जाता है बिजलीऔर गर्मी का प्रवाह फिर से शुरू हो जाता है।

बंध्याकरण को भौतिक, रासायनिक, यांत्रिक और जैविक तरीकों और विभिन्न विधियों द्वारा दर्शाया जाता है। किसी विशेष स्टरलाइज़ेशन विधि और उसके तरीकों का उपयोग करने की व्यवहार्यता स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री की विशेषताओं, उसके भौतिक और रासायनिक गुणों पर निर्भर करती है। स्टरलाइज़ेशन की अवधि स्टरलाइज़ की जा रही वस्तु, स्टरलाइज़िंग एजेंट और उसकी खुराक, वातावरण के तापमान और आर्द्रता पर निर्भर करती है।

शारीरिक बंध्याकरण विधि नसबंदी की भौतिक विधि के तरीकों में सुखाना, जलाना और कैल्सीनेशन, उबालना, पास्चुरीकरण और टिंडलाइजेशन, गर्म हवा (शुष्क गर्मी), अल्ट्रासाउंड, पराबैंगनी और रेडियोधर्मी विकिरण, उच्च आवृत्ति धारा, सूरज की रोशनी शामिल हैं। उच्च तापमान के संपर्क में आने वाली वस्तुओं को स्टरलाइज़ करने का सबसे आम तरीका आग, गर्म हवा और दबाव में संतृप्त भाप से स्टरलाइज़ करना है। आग का उपयोग उन संक्रमित वस्तुओं को जलाने के लिए किया जाता है जिनका कोई मूल्य नहीं है (अनावश्यक कागजात, पुराने वॉलपेपर, लत्ता, कचरा), तपेदिक के रोगियों के थूक को कीटाणुरहित करने के लिए, विशेष रूप से खतरनाक संक्रमण से मरने वाले लोगों और जानवरों की लाशों को कीटाणुरहित करने के लिए, साथ ही साथ विभिन्न वस्तुओं को जलाना और शांत करना। उपकरणों, प्रयोगशाला और फार्मास्युटिकल कांच के बर्तनों के कीटाणुशोधन के लिए सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में जलने और कैल्सीनेशन का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। बर्नर की लौ में कैल्सीनेशन या फ्लेम्बिंग नसबंदी की एक विधि है जिसमें वस्तु पूरी तरह से निष्फल हो जाती है, क्योंकि वनस्पति कोशिकाएं, सिस्ट और सूक्ष्मजीवों के बीजाणु मर जाते हैं। आमतौर पर, लूप, स्पैटुला, पिपेट, स्लाइड और कवरस्लिप, छोटे उपकरण और अन्य दूषित वस्तुओं को कैल्सीनेशन द्वारा निष्फल कर दिया जाता है यदि उन्हें उबाला नहीं जा सकता है। कैंची और स्केलपेल को गर्म करके कीटाणुरहित करने की अनुशंसा नहीं की जाती है, क्योंकि आग के संपर्क में आने पर काटने की सतह सुस्त हो जाती है। चिकित्सा पद्धति में उपयोग की जाने वाली शारीरिक नसबंदी की सबसे सरल और सबसे आम विधियों में से एक गर्म हवा नसबंदी (शुष्क गर्मी) है। सूखी गर्मी नसबंदी सुखाने वाले ओवन (पाश्चर ओवन) में की जाती है। शुष्क गर्म हवा में जीवाणुनाशक, विषाणुनाशक, बीजाणुनाशक प्रभाव होता है और इसका उपयोग मुख्य रूप से कांच के उत्पादों (प्रयोगशाला कांच के बर्तन - पेट्री डिश, फ्लास्क, पिपेट, टेस्ट ट्यूब, आदि) के नसबंदी के लिए किया जाता है, साथ ही धातु उत्पादों को भाप से कीटाणुरहित किया जा सकता है। दबाव में। इसके अलावा, सूखी गर्मी का उपयोग चीनी मिट्टी के बरतन और गर्मी प्रतिरोधी पदार्थों (तालक, सफेद मिट्टी), साथ ही खनिज और वनस्पति तेल, वसा, पेट्रोलियम जेली, लैनोलिन और मोम से बनी वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। इस नसबंदी विधि के लिए सबसे प्रभावी तरीका, जो वनस्पति रूपों और बीजाणुओं की मृत्यु सुनिश्चित करता है, 15 मिनट के लिए 160 - 180 डिग्री का तापमान है। आप खाद्य पदार्थों, आइसोटोनिक घोल, या रबर और सिंथेटिक सामग्री से बनी वस्तुओं को सूखी गर्मी से कीटाणुरहित नहीं कर सकते, क्योंकि तरल पदार्थ उबल जाते हैं और बाहर निकल जाते हैं, और रबर और सिंथेटिक सामग्री पिघल जाती है। ड्रेसिंग, पानी, कुछ दवाओं, कल्चर मीडिया, सॉफ्ट उपकरण, यंत्रों को स्टरलाइज़ करने के साथ-साथ अपशिष्ट दूषित सामग्री को कीटाणुरहित करने के लिए दबाव में संतृप्त भाप के साथ स्टरलाइज़ेशन सबसे विश्वसनीय और सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला तरीका है। सर्जिकल अभ्यास में, ऑपरेशन किए गए रोगी के लिए ड्रेसिंग, सर्जन के गाउन और अंडरवियर को आटोक्लेव में भाप का उपयोग करके कीटाणुरहित किया जाता है। दबाव में भाप की नसबंदी विशेष उपकरणों - आटोक्लेव में की जाती है। आटोक्लेविंग सभी सूक्ष्मजीवों और बीजाणुओं को पूरी तरह से नष्ट कर देता है। भाप दबाव नसबंदी विधि वायुमंडलीय दबाव के ऊपर दबाव में संतृप्त जल वाष्प के साथ सामग्री को गर्म करने पर आधारित है। उच्च तापमान और भाप की संयुक्त क्रिया इस विधि को विशेष रूप से प्रभावी बनाती है। इस मामले में, वनस्पति कोशिकाएं और माइक्रोबियल बीजाणु दोनों मर जाते हैं। संतृप्त जल वाष्प के प्रभाव में माइक्रोबियल बीजाणु 10 मिनट के भीतर मर जाते हैं, और वनस्पति रूप 1 से 4 मिनट के भीतर मर जाते हैं। संतृप्त भाप की उच्च जीवाणुनाशक शक्ति इस तथ्य के कारण है कि, दबाव में जल वाष्प के प्रभाव में, माइक्रोबियल कोशिका के प्रोटीन सूज जाते हैं और जम जाते हैं, जिसके परिणामस्वरूप माइक्रोबियल कोशिकाएं मर जाती हैं। संतृप्त जलवाष्प का जीवाणुनाशक प्रभाव अतिरिक्त दबाव से बढ़ जाता है। आटोक्लेव में स्टरलाइज़ेशन विभिन्न तरीकों से किया जाता है। इस प्रकार, सरल पोषक माध्यम (मांस - पेप्टोन अगर और मांस - पेप्टोन शोरबा) को 120 डिग्री (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। लेकिन इस मोड के साथ प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट और अन्य पदार्थों वाले मीडिया को स्टरलाइज़ करना असंभव है जो आसानी से गर्म करने पर बदल जाते हैं। कार्बोहाइड्रेट युक्त मीडिया को 0.5 एटीएम पर आटोक्लेव में निष्फल किया जाता है। 10 - 15 मिनट या आंशिक रूप से बहने वाली भाप। उच्च तापमान का उपयोग करके, आप न केवल कीटाणुरहित वस्तुओं की सतह पर, बल्कि उनकी गहराई में भी रोगजनक सूक्ष्मजीवों (बीजाणु बनाने वाले सहित) के सबसे लगातार रूपों को नष्ट कर सकते हैं। बंध्याकरण के विश्वसनीय साधन के रूप में उच्च तापमान का यह बहुत बड़ा लाभ है। हालाँकि, कुछ वस्तुएँ उच्च तापमान के प्रभाव में खराब हो जाती हैं और इन मामलों में कीटाणुशोधन के अन्य तरीकों और साधनों का सहारा लेना आवश्यक है। उन सामग्रियों और वस्तुओं की पूर्ण नसबंदी जो उच्च तापमान नसबंदी के उपयोग की अनुमति नहीं देती है, 100 डिग्री से अधिक नहीं के तापमान पर कोच उपकरण में जल वाष्प के साथ बार-बार नसबंदी द्वारा प्राप्त की जाती है। इस विधि को फ्रैक्शनल स्टरलाइज़ेशन कहा जाता है। यह इस तथ्य पर उबलता है कि रोगाणुओं के शेष अकुशल बीजाणु रूप, 37 डिग्री पर थर्मोस्टेट में एक दिन के बाद, वनस्पति कोशिकाओं में अंकुरित होते हैं, जिनकी मृत्यु बहती भाप के साथ इस वस्तु के बाद के नसबंदी के दौरान होती है। तरल भाप से उपचार 30-40 मिनट तक तीन बार किया जाता है। किसी सामग्री को 100 डिग्री से कम तापमान पर एक बार गर्म करना पास्चुरीकरण कहलाता है। पाश्चरीकरण पाश्चर द्वारा प्रस्तावित किया गया था और इसका उद्देश्य मुख्य रूप से ज्यादातर गैर-बीजाणु सूक्ष्मजीवों को नष्ट करना है। पाश्चुरीकरण 60-70 डिग्री पर 15 से 30 मिनट के लिए, 80 डिग्री पर 10 से 15 मिनट के लिए किया जाता है। सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में, बीजाणु बनाने वाले सूक्ष्मजीवों की शुद्ध संस्कृतियों को अलग करने और बीजाणु बनाने के लिए सूक्ष्मजीवों की क्षमता की पहचान करने के लिए बीज सामग्री के पास्चुरीकरण का उपयोग अक्सर किया जाता है। उन तरल पदार्थों के लिए जो उच्च तापमान (दूध, बेरी और फलों के रस, बीयर, कार्बोहाइड्रेट या यूरिया युक्त पोषक माध्यम, आदि) के संपर्क में आने पर स्वाद और अन्य मूल्यवान गुण खो देते हैं, बहती भाप के साथ नसबंदी 15 के लिए 50 - 60 डिग्री पर की जाती है - 33333330 मिनट या 5-10 मिनट के लिए 70-80 डिग्री पर। इस मामले में, औसत प्रतिरोध वाले रोगाणु मर जाते हैं, जबकि अधिक प्रतिरोधी रोगाणु और बीजाणु संरक्षित रहते हैं। 1 घंटे के लिए 60 डिग्री पर फ्रैक्शनल 5-6 गुना स्टरलाइज़ेशन को टाइन्डलाइज़ेशन कहा जाता है। पॉलिमर सामग्री से बने कई चिकित्सा उत्पाद आम तौर पर स्वीकृत नियमों के अनुसार भाप नसबंदी का सामना नहीं कर सकते हैं। कई उत्पादों के लिए, उनमें मौजूद तरल पदार्थों (परिरक्षकों, दवाओं और अन्य उत्पादों) की विशेषताओं के कारण, आम तौर पर स्वीकृत तरीकों और विधियों का उपयोग करके स्टरलाइज़ करना असंभव है। ऐसे उत्पादों के लिए, वस्तुओं की विश्वसनीय नसबंदी सुनिश्चित करने के लिए व्यक्तिगत नसबंदी व्यवस्था विकसित की जाती है। इस प्रकार, रक्त को अंशों में अलग करने के लिए रोटर की नसबंदी 45 मिनट के लिए 120 डिग्री के तापमान पर जल वाष्प के साथ की जाती है। परिरक्षक कंटेनरों की बाँझपन 60 मिनट के लिए 110 डिग्री पर प्राप्त किया जाता है। उबालना एक नसबंदी विधि है जिसका उपयोग पुन: प्रयोज्य सीरिंज, सर्जिकल उपकरणों, रबर ट्यूब, कांच और धातु के बर्तनों को नष्ट करने के लिए किया जाता है। स्टरलाइज़र में उबालकर स्टरलाइज़ेशन किया जाता है। उबलते पानी में बीजाणु 20-30 मिनट के बाद मर जाते हैं। 45 मिनट तक उबालने का उपयोग व्यापक रूप से स्राव और अन्य संक्रामक सामग्री, लिनन, व्यंजन, खिलौने और रोगी देखभाल वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। गंदगी और सूक्ष्मजीवों को यांत्रिक रूप से हटाने के लिए धोने और सफाई करते समय डिटर्जेंट के साथ गर्म पानी (60 - 100 डिग्री) का उपयोग किया जाता है। अधिकांश वनस्पति कोशिकाएं 30 मिनट के बाद 70 डिग्री पर मर जाती हैं। निस्पंदन स्टरलाइज़ेशन का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां सब्सट्रेट्स हीटिंग का सामना नहीं कर सकते हैं, विशेष रूप से प्रोटीन, सीरम, कुछ एंटीबायोटिक्स, विटामिन और वाष्पशील पदार्थों वाले मीडिया के लिए। किसी कल्चर तरल को स्टरलाइज़ करने के लिए इस तकनीक का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, जब इसे माइक्रोबियल कोशिकाओं से मुक्त करना आवश्यक होता है, लेकिन इसमें मौजूद सभी चयापचय उत्पादों को अपरिवर्तित बनाए रखना आवश्यक होता है। इस विधि में विशेष फिल्टर के माध्यम से तरल पदार्थ को फ़िल्टर करना शामिल है जिसमें बारीक छिद्रपूर्ण विभाजन होते हैं और इसलिए माइक्रोबियल कोशिकाएं बरकरार रहती हैं। फिल्टर के दो सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले प्रकार झिल्ली फिल्टर और सेइट्ज फिल्टर हैं। झिल्ली फिल्टर कोलोडियन, एसीटेट, सेलूलोज़ और अन्य सामग्रियों से तैयार किए जाते हैं। सेट्ज़ फिल्टर एस्बेस्टस और सेल्युलोज के मिश्रण से बनाए जाते हैं। इसके अलावा, क्वार्ट्ज रेत, इन्फ्यूसर पृथ्वी और अन्य सामग्रियों (चेम्बरलान, बर्कफेल्ड द्वारा "मोमबत्तियाँ") के मिश्रण के साथ काओलिन से बने फिल्टर का उपयोग नसबंदी के लिए किया जाता है। मेम्ब्रेन और एस्बेस्टस फिल्टर एक बार उपयोग के लिए डिज़ाइन किए गए हैं। पराबैंगनी विकिरण के साथ, जीवाणुनाशक प्रभाव 200 - 450 एनएम की लंबाई वाली किरणों द्वारा प्रदान किया जाता है, जिसका स्रोत जीवाणुनाशक लैंप है। जीवाणुनाशक लैंप की मदद से, चिकित्सा और निवारक संस्थानों, सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशालाओं के बक्सों, खाद्य उद्योग उद्यमों, टीकों और सीरम के उत्पादन के बक्सों में, ऑपरेटिंग कमरे, हेरफेर कक्ष, बच्चों के संस्थानों आदि में हवा को पराबैंगनी किरणों से निष्फल किया जाता है। पराबैंगनी किरणों में उच्च रोगाणुरोधी गतिविधि होती है और यह न केवल वनस्पति कोशिकाओं, बल्कि उनके बीजाणुओं की भी मृत्यु का कारण बन सकती है। सूरज की रोशनी पराबैंगनी विकिरण और सूखने के परिणामस्वरूप सूक्ष्मजीवों की मृत्यु का कारण बनती है। धूप में सुखाने से कई प्रकार के सूक्ष्मजीवों पर हानिकारक प्रभाव पड़ता है, लेकिन इसका प्रभाव सतही होता है और इसलिए सूर्य की रोशनी नसबंदी अभ्यास में सहायक भूमिका निभाती है। हाल ही में, घावों और जलने के उपचार में सिंथेटिक और प्राकृतिक पॉलिमर से बने कोटिंग्स का उपयोग जैल के रूप में किया जाने लगा है। घावों और जलने के स्थानीय उपचार के लिए पॉलिमर एंटीसेप्टिक फिल्मों का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। इनमें कैटापोल, डाइऑक्साइडिन, ब्लू आयोडीन, साथ ही ग्लूटाराल्डिहाइड युक्त सोर्बिटोल जैसे व्यापक स्पेक्ट्रम रोगाणुरोधी एजेंट होते हैं। इन फिल्मों को स्टरलाइज़ करने के लिए 20.0 kGy की खुराक पर आयनीकृत विकिरण का उपयोग किया जाता है। पॉलिमर एंटीसेप्टिक फिल्मों और सॉर्बेंट्स के औद्योगिक उत्पादन के दौरान, इस नसबंदी व्यवस्था के तहत उनकी बाँझपन पूरी तरह से सुनिश्चित की जाती है। रेडियोधर्मी विकिरण वनस्पति और बीजाणु दोनों रूपों में सभी प्रकार के सूक्ष्मजीवों को मारता है। इसका उपयोग व्यापक रूप से बाँझ उत्पादों और बाँझ डिस्पोजेबल चिकित्सा उपकरणों का उत्पादन करने वाले उद्यमों में, अपशिष्ट जल और पशु मूल के कच्चे माल के कीटाणुशोधन के लिए किया जाता है।

यांत्रिक बंध्याकरण विधि यांत्रिक नसबंदी विधियाँ वस्तुओं की सतह से कीटाणुओं को हटा देती हैं। इनमें धुलाई, झाड़ना, झाड़ना, गीला पोंछना, हवा देना, वेंटिलेशन, वैक्यूमिंग, धुलाई शामिल है।

रासायनिक बंध्याकरण विधि चिकित्सा पद्धति में प्लास्टिक का अब तेजी से उपयोग हो रहा है। इनका उपयोग दंत चिकित्सा, मैक्सिलोफेशियल सर्जरी, ट्रॉमेटोलॉजी, आर्थोपेडिक्स और सर्जरी में किया जाता है। अधिकांश प्लास्टिक दबाव और शुष्क गर्मी (शुष्क गर्म हवा) के तहत भाप की गर्मी नसबंदी विधियों का सामना नहीं कर सकते हैं। ऐसी वस्तुओं को कीटाणुरहित करने के लिए उपयोग किए जाने वाले अल्कोहल, डायोसाइड और टर्नरी समाधान के समाधान संसाधित किए जा रहे उत्पादों की बाँझपन सुनिश्चित नहीं करते हैं। इसलिए, प्लास्टिक उत्पादों को कीटाणुरहित करने के लिए गैस और विकिरण विधियों के साथ-साथ रसायनों के समाधान का उपयोग किया जाता है। चिकित्सा संस्थानों के अभ्यास में बड़ी संख्या में थर्मोलैबाइल सामग्रियों से बने उत्पादों की शुरूआत कीटाणुशोधन समाधानों के साथ कीटाणुशोधन और नसबंदी के विकिरण और गैस तरीकों की शुरूआत में योगदान देती है। रासायनिक नसबंदी के दौरान, विभिन्न रासायनिक समूहों (पेरोक्साइड, फेनोलिक, हैलोजन युक्त, एल्डिहाइड, क्षार और एसिड, सर्फेक्टेंट, आदि) से गैसों और एजेंटों का उपयोग किया जाता है। रोजमर्रा के उपयोग के लिए, डिटर्जेंट, सफाई, ब्लीचिंग और अन्य तैयारी का उत्पादन किया जाता है जिनकी संरचना में विभिन्न रसायनों की शुरूआत के कारण रोगाणुरोधी प्रभाव होता है। इन तैयारियों का उपयोग सैनिटरी उपकरण, बर्तन, लिनन आदि की सफाई और कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है। फॉर्मेल्डिहाइड स्टीम (वाष्प रूप) का उपयोग चिकित्सा संस्थानों में धातु चिकित्सा उत्पादों (स्केलपेल, सुई, चिमटी, जांच, क्लैंप, हुक, वायर कटर) को स्टरलाइज़ करने के लिए किया जा सकता है। वगैरह। ।)। फॉर्मेल्डिहाइड वाष्प के साथ नसबंदी से पहले, उत्पादों को पूर्व-नसबंदी सफाई से गुजरना चाहिए और अच्छी तरह से सूखना चाहिए। किसी भी रासायनिक विधि द्वारा स्टरलाइज़ करते समय, किसी विशेष वस्तु के प्रसंस्करण की प्रक्रिया कीटाणुरहित की जाने वाली वस्तु की विशेषताओं, रोगाणुओं के प्रतिरोध, रसायन के गुणों की विशेषताओं, परिवेश के तापमान, आर्द्रता और अन्य कारकों पर निर्भर करती है। इस प्रकार, धातु उपकरणों की बाँझपन कम से कम 20 डिग्री के तापमान और 95-98% की सापेक्ष आर्द्रता पर भाप के साथ एक सीलबंद कक्ष में भंडारण के पांच घंटे के बाद हासिल की जाती है; 15 डिग्री के तापमान पर, इन वस्तुओं की पूर्ण बाँझपन 16 घंटे बाद ही प्राप्त हो जाता है। ग्लूटाराल्डिहाइड की स्पोरिसाइडल गतिविधि तापमान पर निर्भर करती है। इसकी सर्वोत्तम क्रिया 15 - 25 डिग्री के तापमान पर होती है। जैसे-जैसे तापमान बढ़ता है, इस दवा की स्पोरिसाइडल गतिविधि कम हो जाती है। रासायनिक बंध्याकरण का उपयोग कुछ हद तक सीमित सीमा तक किया जाता है। अक्सर, इस पद्धति का उपयोग कल्चर मीडिया और इम्युनोबायोलॉजिकल तैयारी (टीके और सीरम) के जीवाणु संदूषण को रोकने के लिए किया जाता है। क्लोरोफॉर्म, टोल्यूनि और ईथर जैसे पदार्थ अक्सर पोषक मीडिया में जोड़े जाते हैं। यदि माध्यम को इन परिरक्षकों से मुक्त करना आवश्यक हो, तो इसे पानी के स्नान में 56 डिग्री पर गर्म किया जाता है और परिरक्षक वाष्पित हो जाते हैं। टीकों या सीरम को संरक्षित करने के लिए मेरथिओलेट, बोरिक एसिड और फॉर्मेलिन का उपयोग किया जाता है।

जैविक बंध्याकरण विधि जैविक नसबंदी एंटीबायोटिक दवाओं के उपयोग पर आधारित है। वायरस की खेती में इस विधि का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।