Αποστείρωση υψηλής θερμοκρασίας. Αποστείρωση εργαστηριακών γυάλινων σκευών Μέθοδος χημικής αποστείρωσης

Η αποστείρωση αντιπροσωπεύεται από φυσικές, χημικές, μηχανικές και βιολογικές μεθόδους και διάφορες μεθόδους. Η σκοπιμότητα χρήσης μιας συγκεκριμένης μεθόδου αποστείρωσης και των μεθόδων της εξαρτάται από τα χαρακτηριστικά του υλικού που πρόκειται να αποστειρωθεί, τις φυσικές και χημικές του ιδιότητες. Η διάρκεια της αποστείρωσης εξαρτάται από το αντικείμενο που αποστειρώνεται, τον παράγοντα αποστείρωσης και τη δόση του, τη θερμοκρασία και την υγρασία του περιβάλλοντος.

Μέθοδος φυσικής αποστείρωσης Οι μέθοδοι φυσικής αποστείρωσης περιλαμβάνουν ξήρανση, καύση και πύρωση, βρασμό, παστερίωση και εκχύλιση, ζεστός αέρας (ξηρή θερμότητα), υπέρηχοι, υπεριώδης και ραδιενεργός ακτινοβολία, ρεύμα υψηλής συχνότητας, ηλιακό φως. Η πιο κοινή μέθοδος αποστείρωσης αντικειμένων που μπορούν να εκτεθούν σε υψηλές θερμοκρασίες είναι η αποστείρωση με φωτιά, ζεστό αέρα και κορεσμένο ατμό υπό πίεση. Η φωτιά χρησιμοποιείται για την καύση μολυσμένων αντικειμένων που δεν αντιπροσωπεύουν καμία αξία (περιττά χαρτιά, παλιές ταπετσαρίες, κουρέλια, σκουπίδια), για την απολύμανση των πτυέλων ασθενών με φυματίωση, των πτωμάτων ανθρώπων και ζώων που πέθαναν από ιδιαίτερα επικίνδυνες λοιμώξεις, καθώς και για κάψτε και φρύξτε διάφορα αντικείμενα. Η καύση και η πύρωση χρησιμοποιούνται ευρέως στη μικροβιολογική πρακτική για την απολύμανση εργαλείων, εργαστηριακών και φαρμακευτικών υαλικών. Η φρύξη σε φλόγα καυστήρα ή το flambéing είναι μια μέθοδος αποστείρωσης κατά την οποία το αντικείμενο αποστειρώνεται πλήρως, καθώς τα φυτικά κύτταρα, οι κύστεις και τα σπόρια μικροοργανισμών πεθαίνουν. Συνήθως, οι θηλιές, οι σπάτουλες, οι πιπέτες, οι τσουλήθρες και οι καλυπτρίδες, τα μικρά εργαλεία και άλλα μολυσμένα αντικείμενα αποστειρώνονται με φρύξη εάν δεν μπορούν να βράσουν. Δεν συνιστάται η αποστείρωση ψαλιδιών και νυστέρι με θέρμανση, καθώς η επιφάνεια κοπής γίνεται θαμπή όταν εκτίθεται στη φωτιά. Μία από τις απλούστερες και πιο κοινές μεθόδους φυσικής αποστείρωσης που χρησιμοποιούνται στην ιατρική πρακτική είναι η αποστείρωση με θερμό αέρα (ξηρή θερμότητα). Η αποστείρωση με ξηρή θερμότητα πραγματοποιείται σε φούρνους ξήρανσης (φούρνοι Pasteur). Ο ξηρός ζεστός αέρας έχει βακτηριοκτόνο, ιοκτόνο, σποριοκτόνο δράση και χρησιμοποιείται κυρίως για την αποστείρωση γυάλινων προϊόντων (εργαστηριακά γυάλινα σκεύη - πιάτα Petri, φιάλες, πιπέτες, δοκιμαστικοί σωλήνες κ.λπ.), καθώς και μεταλλικά προϊόντα που μπορούν να αποστειρωθούν με ατμό υπό πίεση. Επιπλέον, η ξηρή θερμότητα χρησιμοποιείται για την αποστείρωση αντικειμένων από πορσελάνη και ανθεκτικές στη θερμότητα ουσίες (ταλκ, λευκή άργιλος), καθώς και ορυκτά και φυτικά έλαια, λίπη, βαζελίνη, λανολίνη και κερί. Ο πιο αποτελεσματικός τρόπος για αυτή τη μέθοδο αποστείρωσης, που εξασφαλίζει τον θάνατο των φυτικών μορφών και των σπορίων, είναι η θερμοκρασία 160 - 180 βαθμών για 15 λεπτά. Δεν μπορείτε να αποστειρώσετε τρόφιμα, ισοτονικά διαλύματα ή είδη από καουτσούκ και συνθετικά υλικά με ξηρή θερμότητα, καθώς τα υγρά βράζουν και χύνονται και το καουτσούκ και τα συνθετικά υλικά λιώνουν. Η αποστείρωση με κορεσμένο ατμό υπό πίεση είναι η πιο αξιόπιστη και πιο συχνά χρησιμοποιούμενη μέθοδος για την αποστείρωση επιδέσμων, νερού, ορισμένων φαρμάκων, μέσων καλλιέργειας, μαλακού εξοπλισμού, οργάνων, καθώς και για την απολύμανση μολυσμένου υλικού. Στη χειρουργική πρακτική, οι επίδεσμοι, οι ρόμπες των χειρουργών και τα εσώρουχα για τον χειρουργημένο ασθενή απολυμαίνονται με χρήση ατμού σε αυτόκλειστα. Η αποστείρωση με ατμό υπό πίεση πραγματοποιείται σε ειδικές συσκευές - αυτόκλειστα. Το αυτόκαυστο καταστρέφει πλήρως όλους τους μικροοργανισμούς και τα σπόρια. Η μέθοδος αποστείρωσης με πίεση ατμού βασίζεται στη θέρμανση του υλικού με κορεσμένους υδρατμούς υπό πίεση πάνω από την ατμοσφαιρική πίεση. Η συνδυασμένη δράση υψηλής θερμοκρασίας και ατμού καθιστά αυτή τη μέθοδο ιδιαίτερα αποτελεσματική. Σε αυτή την περίπτωση, τόσο τα φυτικά κύτταρα όσο και τα μικροβιακά σπόρια πεθαίνουν. Τα μικροβιακά σπόρια πεθαίνουν μέσα σε 10 λεπτά υπό την επίδραση κορεσμένου υδρατμού και οι φυτικές μορφές πεθαίνουν μέσα σε 1 έως 4 λεπτά. Η υψηλή βακτηριοκτόνος δύναμη του κορεσμένου ατμού οφείλεται στο γεγονός ότι, υπό την επίδραση υδρατμών υπό πίεση, οι πρωτεΐνες του μικροβιακού κυττάρου διογκώνονται και πήζουν, με αποτέλεσμα τα μικροβιακά κύτταρα να πεθαίνουν. Η βακτηριοκτόνος δράση των κορεσμένων υδρατμών ενισχύεται από την υπερβολική πίεση. Η αποστείρωση σε αυτόκλειστο πραγματοποιείται με διαφορετικούς τρόπους. Έτσι, απλά θρεπτικά μέσα (άγαρ κρέας - πεπτόνη και ζωμός κρέατος - πεπτόνης) αποστειρώνονται για 20 λεπτά στους 120 βαθμούς (1 atm.). Αλλά με αυτόν τον τρόπο λειτουργίας είναι αδύνατο να αποστειρωθούν μέσα που περιέχουν πρωτεΐνες, υδατάνθρακες και άλλες ουσίες που αλλάζουν εύκολα με θέρμανση. Τα μέσα με υδατάνθρακες αποστειρώνονται σε αυτόκλειστο σε 0,5 atm. 10 – 15 λεπτά ή κλασματική ροή ατμού. Χρησιμοποιώντας υψηλή θερμοκρασία, μπορείτε να καταστρέψετε τις πιο επίμονες μορφές παθογόνων μικροοργανισμών (συμπεριλαμβανομένων εκείνων που σχηματίζουν σπόρους) όχι μόνο στην επιφάνεια των αντικειμένων που απολυμαίνονται, αλλά και στο βάθος τους. Αυτό είναι το μεγάλο πλεονέκτημα της υψηλής θερμοκρασίας ως αξιόπιστου μέσου αποστείρωσης. Ωστόσο, ορισμένα είδη αλλοιώνονται υπό την επίδραση υψηλών θερμοκρασιών και σε αυτές τις περιπτώσεις είναι απαραίτητο να καταφύγουμε σε άλλες μεθόδους και μέσα απολύμανσης. Η πλήρης αποστείρωση υλικών και αντικειμένων που δεν επιτρέπουν τη χρήση αποστείρωσης σε υψηλή θερμοκρασία επιτυγχάνεται με επαναλαμβανόμενη αποστείρωση με υδρατμούς σε συσκευή Koch σε θερμοκρασία που δεν υπερβαίνει τους 100 βαθμούς. Αυτή η μέθοδος ονομάζεται κλασματική αποστείρωση. Συνοψίζεται στο γεγονός ότι οι υπόλοιπες μη σκοτωμένες μορφές μικροβίων, μετά από μια μέρα σε θερμοστάτη στους 37 βαθμούς, βλασταίνουν σε φυτικά κύτταρα, ο θάνατος των οποίων συμβαίνει κατά την επακόλουθη αποστείρωση αυτού του αντικειμένου με ρέοντα ατμό. Η επεξεργασία με υγρό ατμό πραγματοποιείται τρεις φορές για 30-40 λεπτά. Η θέρμανση του υλικού μία φορά σε θερμοκρασία κάτω των 100 βαθμών είναι γνωστή ως παστερίωση. Η παστερίωση προτάθηκε από τον Παστέρ και προορίζεται κυρίως για την καταστροφή μικροοργανισμών κυρίως μη σπορίων. Η παστερίωση πραγματοποιείται στους 60 - 70 βαθμούς για 15 έως 30 λεπτά, στους 80 βαθμούς για 10 έως 15 λεπτά. Στη μικροβιολογική πρακτική η παστερίωση υλικό σπόρουΣυχνά χρησιμοποιείται για την απομόνωση καθαρών καλλιεργειών μικροοργανισμών που σχηματίζουν σπόρους και για τον προσδιορισμό της ικανότητας των μικροοργανισμών να σχηματίζουν σπόρια. Για υγρά που χάνουν τη γεύση και άλλες πολύτιμες ιδιότητες όταν εκτίθενται σε υψηλές θερμοκρασίες (γάλα, μούρα και χυμοί φρούτων, μπύρα, θρεπτικά υλικά που περιέχουν υδατάνθρακες ή ουρία κ.λπ.), η αποστείρωση με ρέον ατμό πραγματοποιείται στους 50 - 60 βαθμούς για 15 - 33333330 λεπτά ή στους 70 - 80 βαθμούς για 5 - 10 λεπτά. Σε αυτή την περίπτωση, μικρόβια μέσης αντοχής πεθαίνουν, ενώ διατηρούνται πιο ανθεκτικά μικρόβια και σπόρια. Η κλασματική αποστείρωση 5 - 6 φορές στους 60 βαθμούς για 1 ώρα ονομάζεται τυνδαλοποίηση. Πολλά ιατρικά προϊόντα που παρασκευάζονται από πολυμερή υλικά, δεν αντέχουν την αποστείρωση μέθοδος ατμού σύμφωνα με γενικά αποδεκτούς τρόπους. Για πολλά προϊόντα, λόγω των χαρακτηριστικών των υγρών που περιέχουν (συντηρητικά, φάρμακα και άλλα προϊόντα), είναι αδύνατο να αποστειρωθούν χρησιμοποιώντας γενικά αποδεκτές μεθόδους και μεθόδους. Για τέτοια προϊόντα, αναπτύσσονται ατομικά καθεστώτα αποστείρωσης για να διασφαλιστεί η αξιόπιστη αποστείρωση των αντικειμένων. Έτσι, η αποστείρωση του ρότορα για διαχωρισμό του αίματος σε κλάσματα πραγματοποιείται με υδρατμούς σε θερμοκρασία 120 βαθμών για 45 λεπτά. Η στειρότητα των δοχείων συντηρητικού επιτυγχάνεται στους 110 βαθμούς για 60 λεπτά. Το βράσιμο είναι μια μέθοδος αποστείρωσης που χρησιμοποιείται για την αποστείρωση επαναχρησιμοποιήσιμων συρίγγων, χειρουργικών εργαλείων, ελαστικών σωλήνων, γυάλινων και μεταλλικών σκευών. Η αποστείρωση με βρασμό πραγματοποιείται σε αποστειρωτές. Οι μορφές σπορίων σε βραστό νερό πεθαίνουν μετά από 20 - 30 λεπτά. Το βράσιμο για 45 λεπτά χρησιμοποιείται ευρέως για την απολύμανση εκκρίσεων και άλλων μολυσματικών υλικών, λευκών ειδών, πιάτων, παιχνιδιών και ειδών φροντίδας ασθενών. Ζεστό νερό (60 - 100 μοίρες) με απορρυπαντικά χρησιμοποιείται κατά το πλύσιμο και τον καθαρισμό για τη μηχανική απομάκρυνση βρωμιάς και μικροοργανισμών. Τα περισσότερα βλαστικά κύτταρα πεθαίνουν στους 70 βαθμούς μετά από 30 λεπτά. Η αποστείρωση με διήθηση χρησιμοποιείται σε περιπτώσεις όπου τα υποστρώματα δεν αντέχουν τη θέρμανση, ιδιαίτερα για μέσα που περιέχουν πρωτεΐνες, ορούς, ορισμένα αντιβιοτικά, βιταμίνες και πτητικές ουσίες. Αυτή η τεχνική χρησιμοποιείται αρκετά ευρέως για την αποστείρωση ενός υγρού καλλιέργειας, όταν είναι απαραίτητο να απελευθερωθεί από τα μικροβιακά κύτταρα, αλλά να διατηρηθούν αμετάβλητα όλα τα μεταβολικά προϊόντα που περιέχει. Η μέθοδος περιλαμβάνει φιλτράρισμα υγρών μέσω ειδικών φίλτρων που έχουν λεπτά πορώδη χωρίσματα και επομένως διατηρούν τα μικροβιακά κύτταρα. Οι δύο πιο ευρέως χρησιμοποιούμενοι τύποι φίλτρων είναι τα φίλτρα μεμβράνης και τα φίλτρα Seitz. Τα φίλτρα μεμβράνης παρασκευάζονται από κολλίδιο, οξικό, κυτταρίνη και άλλα υλικά. Τα φίλτρα Seitz κατασκευάζονται από μείγμα αμιάντου και κυτταρίνης. Επιπλέον, για την αποστείρωση χρησιμοποιούνται φίλτρα από καολίνη με ανάμειξη χαλαζιακής άμμου, χώματος έγχυσης και άλλων υλικών («κεριά» των Chamberlan, Berkfeld). Τα φίλτρα μεμβράνης και αμιάντου είναι σχεδιασμένα για μία χρήση. Με την υπεριώδη ακτινοβολία, το βακτηριοκτόνο αποτέλεσμα παρέχεται από ακτίνες μήκους 200 - 450 nm, η πηγή των οποίων είναι βακτηριοκτόνοι λαμπτήρες. Με τη βοήθεια βακτηριοκτόνων λαμπτήρων, ο αέρας αποστειρώνεται με υπεριώδεις ακτίνες σε ιατρικά και προληπτικά ιδρύματα, κουτιά μικροβιολογικού εργαστηρίου και επιχειρήσεις Βιομηχανία τροφίμων, σε κουτιά για την παραγωγή εμβολίων και ορών, σε χειρουργεία, αίθουσες χειρισμών, παιδικά ιδρύματα κ.λπ. Οι υπεριώδεις ακτίνες έχουν υψηλή αντιμικροβιακή δράση και μπορούν να προκαλέσουν θάνατο όχι μόνο των βλαστικών κυττάρων, αλλά και των σπορίων τους. Το ηλιακό φως προκαλεί το θάνατο μικροοργανισμών ως αποτέλεσμα της δράσης υπεριώδη ακτινοβολίακαι ξήρανση. Η ξήρανση με ηλιακή ακτινοβολία έχει επιζήμια επίδραση σε πολλούς τύπους μικροοργανισμών, αλλά η επίδρασή της είναι επιφανειακή και επομένως το φως του ήλιου παίζει υποστηρικτικό ρόλο στην πρακτική αποστείρωσης. Πρόσφατα, στη θεραπεία τραυμάτων και εγκαυμάτων, έχουν χρησιμοποιηθεί επικαλύψεις από συνθετικά και φυσικά πολυμερή σε μορφή τζελ. Τα πολυμερή αντισηπτικά φιλμ χρησιμοποιούνται ευρέως για τοπική θεραπεία τραυμάτων και εγκαυμάτων. Περιέχουν αντιμικροβιακούς παράγοντες ευρέος φάσματος όπως καταπόλη, διοξειδίνη, μπλε ιώδιο, καθώς και γλουταραλδεΰδη που περιέχει σορβιτόλη. Για την αποστείρωση αυτών των μεμβρανών, χρησιμοποιείται ιονίζουσα ακτινοβολία σε δόση 20,0 kGy. Κατά τη βιομηχανική παραγωγή πολυμερών αντισηπτικών μεμβρανών και ροφητών, η στειρότητά τους σε αυτό το καθεστώς αποστείρωσης διασφαλίζεται πλήρως. Η ραδιενεργή ακτινοβολία σκοτώνει όλους τους τύπους μικροοργανισμών, τόσο σε βλαστική όσο και σε μορφή σπορίων. Χρησιμοποιείται ευρέως για αποστείρωση σε επιχειρήσεις παραγωγής αποστειρωμένων προϊόντων και αποστειρωμένων ιατρικών συσκευών μιας χρήσης, για την απολύμανση λυμάτων και πρώτων υλών ζωικής προέλευσης.

Μέθοδος μηχανικής αποστείρωσης Οι μέθοδοι μηχανικής αποστείρωσης απομακρύνουν τα μικρόβια από την επιφάνεια των αντικειμένων. Αυτά περιλαμβάνουν το πλύσιμο, το τίναγμα, το σκούπισμα, το υγρό σκούπισμα, τον αερισμό, τον εξαερισμό, το σκούπισμα με ηλεκτρική σκούπα, το πλύσιμο.

Χημική μέθοδοςαποστείρωση Τα πλαστικά χρησιμοποιούνται πλέον όλο και περισσότερο στην ιατρική πρακτική. Χρησιμοποιούνται στην οδοντιατρική, τη γναθοπροσωπική χειρουργική, την τραυματολογία, την ορθοπεδική και τη χειρουργική. Τα περισσότερα πλαστικά δεν μπορούν να αντέξουν τις μεθόδους θερμικής αποστείρωσης του ατμού υπό πίεση και ξηρής θερμότητας (ξηρός θερμαινόμενος αέρας). Τα διαλύματα αλκοόλης, διοκτόνου και τριμερούς διαλύματος που χρησιμοποιούνται για την αποστείρωση τέτοιων αντικειμένων δεν διασφαλίζουν τη στειρότητα των προϊόντων που υποβάλλονται σε επεξεργασία. Επομένως, μέθοδοι αερίου και ακτινοβολίας, καθώς και διαλύματα χημικών ουσιών, χρησιμοποιούνται για την αποστείρωση πλαστικών προϊόντων. Η εισαγωγή στην πρακτική των ιατρικών ιδρυμάτων μεγάλου αριθμού προϊόντων κατασκευασμένων από θερμοευαίσθητα υλικά συμβάλλει στην εισαγωγή της ακτινοβολίας, μεθόδους αερίουαπολύμανση και αποστείρωση με απολυμαντικά διαλύματα. Κατά τη χημική αποστείρωση χρησιμοποιούνται αέρια και παράγοντες από διάφορες χημικές ομάδες (υπεροξείδια, φαινολικά, αλογόνου, αλδεΰδες, αλκάλια και οξέα, επιφανειοδραστικά κ.λπ.). Για καθημερινή χρήση παράγονται απορρυπαντικά, καθαριστικά, λεύκανση και άλλα σκευάσματα που έχουν αντιμικροβιακή δράση λόγω της εισαγωγής διάφορων χημικών ουσιών στη σύνθεσή τους. Αυτά τα παρασκευάσματα χρησιμοποιούνται για τον καθαρισμό και την απολύμανση εξοπλισμού υγιεινής, πιάτων, λευκών ειδών κ.λπ. Ο ατμός φορμαλδεΰδης (ατμομορφή) μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε ιατρικά ιδρύματαγια αποστείρωση μεταλλικά προϊόνταιατρικούς σκοπούς (νυστέρια, βελόνες, τσιμπιδάκια, καθετήρες, σφιγκτήρες, γάντζοι, κόφτες σύρματος κ.λπ.). Πριν από την αποστείρωση με ατμό φορμαλδεΰδης, τα προϊόντα πρέπει να υποβληθούν σε καθαρισμό πριν από την αποστείρωση και να στεγνώσουν καλά. Όταν αποστειρώνεται με οποιονδήποτε τρόπο χημικάοι κανονισμοί για την επεξεργασία ενός συγκεκριμένου αντικειμένου εξαρτώνται από τα χαρακτηριστικά του αντικειμένου που απολυμαίνεται, την αντοχή των μικροβίων και τα χαρακτηριστικά των ιδιοτήτων χημική προετοιμασία, θερμοκρασία περιβάλλοντος, υγρασία και άλλοι παράγοντες. Έτσι, η στειρότητα των μεταλλικών οργάνων επιτυγχάνεται μετά από πέντε ώρες αποθήκευσης σε σφραγισμένο θάλαμο με ατμό σε θερμοκρασία τουλάχιστον 20 βαθμών και σχετική υγρασία 95 - 98%, σε θερμοκρασία 15 βαθμών, πλήρης αποστείρωση αυτών των αντικειμένων επιτυγχάνεται μόνο μετά από 16 ώρες. Η σποριοκτόνος δράση της γλουταραλδεΰδης εξαρτάται από τη θερμοκρασία. Η βέλτιστη δράση του εμφανίζεται σε θερμοκρασία 15 – 25 βαθμών. Καθώς η θερμοκρασία αυξάνεται, η σποριοκτόνος δράση αυτού του φαρμάκου μειώνεται. Η χημική αποστείρωση χρησιμοποιείται σε κάπως περιορισμένο βαθμό. Τις περισσότερες φορές, αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται για την πρόληψη της βακτηριακής μόλυνσης των μέσων καλλιέργειας και των ανοσοβιολογικών παρασκευασμάτων (εμβόλια και οροί). Ουσίες όπως το χλωροφόρμιο, το τολουόλιο και ο αιθέρας προστίθενται συχνότερα στα θρεπτικά μέσα. Εάν είναι απαραίτητο να ελευθερωθεί το μέσο από αυτά τα συντηρητικά, θερμαίνεται σε υδατόλουτρο στους 56 βαθμούς και τα συντηρητικά εξατμίζονται. Για τη διατήρηση εμβολίων ή ορών, χρησιμοποιούνται μερθειολικό οξύ, βορικό οξύ και φορμαλίνη.

Μέθοδος βιολογικής αποστείρωσης Η βιολογική στείρωση βασίζεται στη χρήση αντιβιοτικών. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται ευρέως στην καλλιέργεια ιών.

Αποστείρωση

Η αποστείρωση είναι η αποστείρωση, δηλαδή η πλήρης απελευθέρωση περιβαλλοντικών αντικειμένων από μικροοργανισμούς και τα σπόρια τους.

Η αποστείρωση πραγματοποιείται με διάφορους τρόπους:

1) φυσική (έκθεση σε υψηλή θερμοκρασία, ακτίνες UV, χρήση βακτηριακά φίλτρα);

2) χημικό (χρήση διαφόρων απολυμαντικών, αντισηπτικών).

3) βιολογική (χρήση αντιβιοτικών).

Στην εργαστηριακή πρακτική, συνήθως χρησιμοποιούνται φυσικές μέθοδοι αποστείρωσης.

Η δυνατότητα και η σκοπιμότητα χρήσης μιας ή άλλης μεθόδου αποστείρωσης καθορίζεται από τα χαρακτηριστικά του υλικού που πρόκειται να αποστειρωθεί, τις φυσικές και χημικές του ιδιότητες.

Φυσικές μέθοδοι

Η φρύξη σε φλόγα καυστήρα ή το flambéing είναι μια μέθοδος αποστείρωσης κατά την οποία το αντικείμενο αποστειρώνεται πλήρως, καθώς τόσο τα φυτικά κύτταρα όσο και τα μικροβιακά σπόρια πεθαίνουν. Τυπικά, οι βακτηριολογικοί βρόχοι, οι σπάτουλες, οι πιπέτες, οι διαφάνειες και τα γυαλιά κάλυψης και τα μικρά όργανα φρύνονται. Τα ψαλίδια και τα νυστέρια δεν πρέπει να αποστειρώνονται με θέρμανση, καθώς υπό την επίδραση της φωτιάς η επιφάνεια κοπής γίνεται θαμπή.

Αποστείρωση με ξηρή θερμότητα

Η αποστείρωση με ξηρή θερμότητα ή ζεστό αέρα πραγματοποιείται σε φούρνους Pasteur (ξήρανση φούρνους ξηρής θερμότητας). Ο φούρνος Pasteur είναι ένα ντουλάπι με διπλά τοιχώματα κατασκευασμένο από ανθεκτικά στη θερμότητα υλικά - μέταλλο και αμίαντο. Ζεστάνετε το ντουλάπι με καυστήρες αερίουή ηλεκτρικές συσκευές θέρμανσης. Τα ηλεκτρικά θερμαινόμενα ντουλάπια είναι εξοπλισμένα με ρυθμιστές που εξασφαλίζουν απαιτούμενη θερμοκρασία. Για τον έλεγχο της θερμοκρασίας, υπάρχει ένα θερμόμετρο τοποθετημένο στην οπή στο επάνω τοίχωμα του ντουλαπιού.

Τα υγρά (θρεπτικά μέσα, ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου κ.λπ.), τα είδη από καουτσούκ και συνθετικά υλικά δεν μπορούν να αποστειρωθούν με ξηρή θερμότητα, καθώς τα υγρά βράζουν και χύνονται και το καουτσούκ και τα συνθετικά υλικά λιώνουν.

Αποστείρωση με βράσιμο

Το βράσιμο είναι μια μέθοδος αποστείρωσης που εγγυάται τη στειρότητα υπό την προϋπόθεση ότι δεν υπάρχουν σπόρια στο αποστειρωμένο υλικό. Χρησιμοποιείται για την επεξεργασία συρίγγων, οργάνων, γυάλινων και μεταλλικών σκευών, σωλήνων από καουτσούκ κ.λπ. Η αποστείρωση με ατμό υπό πίεση πραγματοποιείται σε αυτόκλειστο. Αυτή η μέθοδος αποστείρωσης βασίζεται στην έκθεση των υλικών που αποστειρώνονται σε κορεσμένους υδρατμούς σε πίεση πάνω από την ατμοσφαιρική. Ως αποτέλεσμα μιας τέτοιας αποστείρωσης, τόσο οι βλαστικές όσο και οι σποριακές μορφές μικροοργανισμών πεθαίνουν με μία μόνο επεξεργασία. Ένα αυτόκλειστο (Εικ. 12) είναι ένας τεράστιος λέβητας, καλυμμένος εξωτερικά με μεταλλικό περίβλημα, ερμητικά σφραγισμένο με ένα καπάκι, το οποίο βιδώνεται σφιχτά στον λέβητα με αρθρωτούς κοχλίες.

Η θερμοκρασία και η διάρκεια του αποστείρωσης σε αυτόκαυστο των θρεπτικών μέσων καθορίζονται από τη σύνθεσή τους που καθορίζεται στη συνταγή για την παρασκευή του θρεπτικού μέσου. Για παράδειγμα, απλά μέσα (άγαρ κρέατος-πεπτόνης, ζωμός κρέατος-πεπτόνης) αποστειρώνονται για 20 λεπτά στους 120 ° C (1 atm). Ωστόσο, σε αυτή τη θερμοκρασία είναι αδύνατο να αποστειρωθούν μέσα που περιέχουν φυσικές πρωτεΐνες, υδατάνθρακες και άλλες ουσίες που αλλάζουν εύκολα με θέρμανση. Τα μέσα με υδατάνθρακες αποστειρώνονται κλασματικά στους 100°C ή σε αυτόκλειστο στους 112°C (0,5 atm) για 10-15 λεπτά. Διάφορα υγρά, συσκευές με ελαστικούς σωλήνες, βύσματα, βακτηριακά κεριά και φίλτρα αποστειρώνονται για 20 λεπτά στους 120 ° C (1 atm).

Η αποστείρωση με ρέοντα ατμό πραγματοποιείται σε συσκευή Koch. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται σε περιπτώσεις όπου το αντικείμενο που αποστειρώνεται αλλάζει σε θερμοκρασία πάνω από 100° C. Τα θρεπτικά υλικά που περιέχουν ουρία, υδατάνθρακες, γάλα, πατάτες, ζελατίνη κ.λπ. αποστειρώνονται με ρέον ατμό.

Η συσκευή Koch (λέβητας) είναι ένας μεταλλικός κύλινδρος επενδυμένος εξωτερικά (για μείωση της μεταφοράς θερμότητας) με τσόχα ή αμίαντο. Ο κύλινδρος είναι κλειστός με κωνικό καπάκι με οπή για τη διαφυγή του ατμού. Μέσα στον κύλινδρο υπάρχει μια βάση, στο επίπεδο της οποίας χύνεται νερό. Ένας κουβάς με τρύπα τοποθετείται στη βάση στην οποία τοποθετείται το υλικό που πρόκειται να αποστειρωθεί. Η συσκευή Koch θερμαίνεται με φυσικό αέριο ή ηλεκτρική ενέργεια. Ο χρόνος αποστείρωσης υπολογίζεται από τη στιγμή της έντονης απελευθέρωσης ατμού στα άκρα του καπακιού και από την έξοδο ατμού. Αποστειρώστε για 30-60 λεπτά. Στο τέλος της αποστείρωσης, η θέρμανση διακόπτεται. Αφαιρέστε τον κάδο με το υλικό από τη συσκευή και αφήστε το σε θερμοκρασία δωματίου μέχρι την επόμενη μέρα. Η θέρμανση πραγματοποιείται για 3 συνεχόμενες ημέρες σε θερμοκρασία 100°C για 30-60 λεπτά. Αυτή η μέθοδος ονομάζεται κλασματική αποστείρωση. Κατά την πρώτη θέρμανση πεθαίνουν οι φυτικές μορφές μικροβίων, ενώ οι μορφές των σπορίων διατηρούνται. Μέσα σε μια μέρα, τα σπόρια καταφέρνουν να βλαστήσουν και να μετατραπούν σε φυτικές μορφές, οι οποίες πεθαίνουν τη δεύτερη μέρα της στείρωσης. Δεδομένου ότι είναι πιθανό ορισμένα από τα σπόρια να μην είχαν χρόνο να βλαστήσουν, το υλικό διατηρείται για άλλες 24 ώρες και στη συνέχεια πραγματοποιείται μια τρίτη αποστείρωση. Δεν απαιτείται αποστείρωση με ρέοντα ατμό σε συσκευή Koch ειδικό έλεγχο, αφού η στειρότητα του παρασκευασμένου θρεπτικού μέσου αποτελεί ένδειξη της σωστής λειτουργίας της συσκευής. Μπορείτε επίσης να αποστειρώσετε με ρέοντα ατμό σε αυτόκλειστο με το καπάκι ξεβιδωμένο και τη βαλβίδα εξόδου ανοιχτή.

Αποστείρωση με υπεριώδη ακτινοβολία

Η αποστείρωση με ακτίνες UV πραγματοποιείται με τη χρήση ειδικών εγκαταστάσεων - βακτηριοκτόνων λαμπτήρων. Οι ακτίνες UV έχουν υψηλή αντιμικροβιακή δράση και μπορούν να προκαλέσουν θάνατο όχι μόνο βλαστικών κυττάρων, αλλά και σπορίων. Η ακτινοβολία UV χρησιμοποιείται για την αποστείρωση του αέρα σε νοσοκομεία, χειρουργεία, παιδικά ιδρύματα κ.λπ. Σε ένα μικροβιολογικό εργαστήριο, ένα κουτί υποβάλλεται σε επεξεργασία με ακτίνες UV πριν από την εργασία.

Χημικές μέθοδοι

Αυτός ο τύπος αποστείρωσης χρησιμοποιείται σε περιορισμένο βαθμό και χρησιμεύει κυρίως για την πρόληψη της βακτηριακής μόλυνσης των μέσων καλλιέργειας και των ανοσοβιολογικών παρασκευασμάτων (εμβόλια και οροί).

Ουσίες όπως το χλωροφόρμιο, το τολουόλιο και ο αιθέρας προστίθενται συχνότερα στα θρεπτικά μέσα. Εάν είναι απαραίτητο να ελευθερωθεί το μέσο από αυτά τα συντηρητικά, θερμαίνεται σε λουτρό νερού στους 56 ° C (τα συντηρητικά εξατμίζονται).

Για να διατηρήσετε τα εμβόλια και τους ορούς, χρησιμοποιήστε merthiolate. βορικό οξύ, φορμαλίνη κ.λπ.

Βιολογική αποστείρωση

Η βιολογική στείρωση βασίζεται στη χρήση αντιβιοτικών. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια ιών.

Β. Λεπτομερής τεχνολογία για την παραγωγή βοοειδούς ορού γάλακτος στα σφαγεία της Λυών

Έχει ήδη ληφθεί αίμα από 1.000 ζώα, ο ορός έχει εμφιαλωθεί και διανεμηθεί δωρεάν σε σχεδόν 20.000 παιδιά.

Έτσι αποδεικνύεται ότι εργοστασιακή παραγωγήορός γάλακτος στο σφαγείο με συμμόρφωση με ασηπτικούς κανόνες και υγειονομικούς κανονισμούς είναι δυνατή.

Η επιχείρηση οροθεραπείας δεν παρέχει πρόσθετες εγγυήσεις - δεν έχει το δικαίωμα να πραγματοποιήσει αυτοψία στο ζώο-δότη.

Η τεχνολογία που χρησιμοποιείται στην παραγωγή μας μπορεί να φαίνεται λιγότερο αυστηρή από ασηπτική άποψη από την κλασική μέθοδο. Έχει όμως μεγάλο πλεονέκτημα στην ταχύτητα, αφού ο ορός παράγεται πλήρως την ημέρα της αιμοληψίας.

Εάν οι τρέχουσες συνθήκες μας ώθησαν να παράγουμε τον ορό σε σφαγείο, είναι σαφές ότι αυτό είναι ένα προσωρινό μέτρο, καθώς αιματογόνοι και φαρμακευτικοί οροί μπορούν να παραχθούν μόνο σε εξειδικευμένο ινστιτούτο.

Επιλογή ζώων. Στη Λυών, ο Dr. Guier, ο επικεφαλής κτηνίατρος του σφαγείου, και ο Dr. Fontenay, ο κτηνιατρικός επιθεωρητής, επιλέγουν οι ίδιοι δωρητές από τα ζώα που προορίζονται να παρέχουν στην πόλη μας κρέας. Το επιλεγμένο ζώο φέρει το σήμα στον δεξιό ώμο για να διευκολυνθεί ο περαιτέρω έλεγχος.

Μετά τη σφαγή, τα όργανα των ζώων ελέγχονται προσεκτικά. Είναι γνωστό ότι η αυτοψία είναι η πιο αξιόπιστη μέθοδος ανίχνευσης της φυματίωσης.

Οι επόμενες επεμβάσεις θα δείξουν ότι ο ορός του άρρωστου ζώου δεν καταναλώθηκε ποτέ.

Λήψη αίματος από ζώα. Στην αίθουσα αιμοληψίας, ο ταύρος δότη συγκρατείται με ασφάλεια από έναν αυτόματο ζυγό.

Ο κτηνίατρος απολυμαίνει το δέρμα με ιώδιο στο ύψος του λαιμού του ζώου και κάνει μια τομή στην περιοχή της σφαγίτιδας φλέβας με νυστέρι. Η φλεβική παρακέντηση γίνεται με τροκάρ αποστειρωμένο με παρατεταμένο βρασμό. Μόλις εμφανιστεί αίμα, ένας ελαστικός εύκαμπτος σωλήνας σε αυτόκλειστο προσαρτάται στο τροκάρ για να το συνδέσει απευθείας και άσηπτα με τον απινιδωτή.

Η τεχνολογία απινίδωσης και η μέθοδος για την αποστείρωση του απινιδωτή περιγράφονται παρακάτω.

Από κάθε ζώο λαμβάνονται 8-10 λίτρα αίματος, το οποίο ζυγίζεται σε ζυγαριά που βρίσκεται κάτω από τη συσκευή.

Μέθοδοι αποστείρωσης

Για τη διευκόλυνση της λειτουργίας υγειονομικού ελέγχου, κάθε απινιδωτής έχει μια ετικέτα με τα δεδομένα του ζώου-δότη.

Πρέπει να σημειωθεί ότι η αιμοληψία πραγματοποιείται άσηπτα χάρη σε ένα κλειστό κύκλωμα όλων των εξαρτημάτων: τροκάρ, ελαστικός σωλήνας και απινιδωτής, τα οποία είναι προαποστειρωμένα.

Μια ετικέτα με την ημερομηνία συλλογής αίματος συνοδεύει το συλλεχθέν αίμα από τη στιγμή της φλεβικής παρακέντησης έως ότου μετατραπεί σε ορό και φυλάσσεται σε ψυγεία.

Απινίδωση αίματος. Στις περισσότερες εγκαταστάσεις οροθεραπείας, το αίμα που χύνεται σε γυάλινα αγγεία διαχωρίζει τον ορό υπό την πίεση του φορτίου. Υπό αυτές τις συνθήκες, το αίμα που λαμβάνεται αρχικά από βοοειδή περιέχει λίγο ορό (περίπου 10%).

Ως εκ τούτου, το κέντρο οροθεραπείας στη Λυών χρησιμοποιεί ειδική τεχνολογία, δίνοντας το 50% του ορού γάλακτος, και επίσης σε συντομότερο χρόνο.

Ο Δρ Merrier μπόρεσε να αναπτύξει αυτή τη μέθοδο εν μέρει μετά τα ευρήματα που έκανε στο Βασιλικό Ινστιτούτο στο Ρότερνταμ και στο Σεροθεραπευτικό Ινστιτούτο στο Μιλάνο.

Μόλις ληφθεί αίμα από αυτά τα ινστιτούτα, γίνεται απινίδωση σε αποστειρωμένα μηχανήματα που μοιάζουν με τσιμπήματα.

Μέσα σε 5 λεπτά, το αίμα συλλέγεται σε δοχείο προστατευμένο από τον αέρα. Είναι απαραίτητο να τηρείται αυστηρά ο χρόνος απινίδωσης: εάν είναι ανεπαρκής, μπορεί να εμφανιστεί πήξη, και εάν είναι πολύ, μπορεί να συμβεί αιμόλυση (λόγω ρήξης των ερυθρών αιμοσφαιρίων). Είναι απαραίτητο να χρησιμοποιήσετε ένα εργαστηριακό ρολόι που σας επιτρέπει να σημειώσετε ακριβώς 15 λεπτά απινίδωσης.

Στην κορυφή του Σχ. Το 4 δείχνει ότι ο αριθμός των αιμοληψιών έχει φτάσει τις 1000, κάτι που αναγράφεται στο έμβλημα του Κέντρου.

Φυγοκέντρηση.

Αμέσως μετά την απινίδωση, οι συσκευές μεταφέρονται στο εργαστήριο, που βρίσκεται λίγα μέτρα από την αίθουσα αιμοληψίας. Το περιεχόμενο κάθε απινιδωτή επεξεργάζεται ξεχωριστά, ώστε να αφαιρεθεί ο ορός ενός ζώου που αποδεικνύεται ότι είναι άρρωστο.

Το αίμα που δεν πήζει μετά την απινίδωση περνά μέσα από έναν διαχωριστή Alfa Laval (διαχωριστής γάλακτος που έχουμε προσαρμόσει για την παραγωγή ορού γάλακτος).

Υπό την επίδραση της φυγόκεντρης δύναμης, το αίμα χωρίζεται σε ίσα μέρη: το κόκκινο μέρος περιέχει κόκκινες μπάλες και το διαφανές μέρος συνθέτει τον ορό (το ινώδες παραμένει στις λεπίδες του απινιδωτή).

Από ένα ζώο λαμβάνονται 8-10 λίτρα αίματος ή περίπου 4-5 λίτρα ορός, ο οποίος χύνεται σε φιάλη Pyrex, αποστειρωμένη στους 180°C.

Μια ετικέτα απινιδωτή είναι προσαρτημένη στη φιάλη και μια κάρτα συμπληρώνεται με τον ίδιο αριθμό για να διασφαλιστεί ο υγειονομικός έλεγχος.

Στον ορό προστίθεται ειδικό αντισηπτικό, σχεδιασμένο έτσι ώστε να είναι επαρκώς δραστικό χωρίς να διαταράσσει τη διαφάνεια και τη γεύση του ορού. Για 1 λίτρο ορού, προσθέστε επίσης 100 ml διαλύματος που περιέχει 1:1000 φορμαλδεΰδη και 1:5000 syunuxol.

(Μεταξύ των παρασκευασμάτων, η φυγόκεντρος απολυμαίνεται επιμελώς με αντισηπτικό.)

Κατ 'αρχήν, το κόκκινο κλάσμα του αίματος πρέπει να επιστραφεί στα κρεοπωλεία για να φτιάξουν λουκάνικο αίματος, αλλά τις περισσότερες φορές παραμένει αχρησιμοποίητο, επομένως μπορεί να παρασκευαστεί σιρόπι από αυτό χρησιμοποιώντας την τεχνολογία που περιγράφεται παρακάτω.

Ειδικές περιπτώσεις παρασκευής σιροπιού αίματος. Το σιρόπι έχει δύο πλεονεκτήματα: καθιστά δυνατή τη χρήση του κόκκινου μέρους του αίματος που απομένει μετά τη λήψη του ορού και έχει μια ευχάριστη γεύση που αρέσει στα παιδιά.

Λόγω της έλλειψης γλυκερίνης, είναι δύσκολο να παρασκευαστεί σιρόπι μακροχρόνια αποθήκευση, αλλά μπορείτε να φτιάξετε ένα πολύ δραστικό προϊόν σε νερό και να το δίνετε στα παιδιά 2-3 κουταλιές της σούπας την ημέρα. Προσθέστε 20% στο κόκκινο μέρος του αίματος πόσιμο νερόκαι αποθηκεύστε το σιρόπι σε παγετώνες ενώ πραγματοποιείται υγειονομικός έλεγχος.

Στη συνέχεια προσθέστε ίσο μέρος 100% σιρόπι ζάχαρης (ζάχαρη μπορείτε να προμηθευτείτε από τις κάρτες των ομάδων στις οποίες προορίζεται το σιρόπι).

Εκχύλισμα λεμονιού ή πορτοκαλιού προστίθεται στο σιρόπι για να εξουδετερώσει τη γεύση του αίματος και χύνεται σε μπουκάλια των 250 ml.

Τυνδαλοποίηση ορού γάλακτος.

Αμέσως μετά τη φυγοκέντρηση, δηλαδή λιγότερο από μία ώρα μετά τη συλλογή αίματος, ο ορός λύεται στους 56°C για μία ώρα.

Για να γίνει αυτό, χαμηλώνεται σε λουτρό νερού με αυτόματη διατηρούμενη θερμοκρασία. Η τυνδαλοποίηση σε αυτή τη θερμοκρασία (σε υψηλότερη θερμοκρασία πήζει ο ορός γάλακτος) είναι απαραίτητη για τη μερική αποστείρωση του ορού γάλακτος, αν και η ταχύτητα παρασκευής του από μόνη της αποτελεί εγγύηση ασηψίας.

Θα πρέπει να σημειωθεί ότι κάθε φιάλη των πέντε λίτρων παρέχεται με την αρχική ετικέτα του απινιδωτή, επομένως η αρίθμηση του ορού αντιστοιχεί στην αρίθμηση των ζώων-δότων.

Αρχείο κάρτας ελέγχου. Η κάρτα σάς επιτρέπει να ελέγχετε ανά πάσα στιγμή την προέλευση του ζώου δότη, τα στάδια παρασκευής του ορού γάλακτος, την ημερομηνία εμφιάλωσης, καθώς και τη διανομή του ορού γάλακτος.

Υγειονομικός έλεγχος. Ενώ τα δοχεία αποθηκεύονται στον ψυκτικό θάλαμο, οι κτηνίατροι επιθεωρητές ασχολούνται με τον υγειονομικό έλεγχο των ζώων-δότων. Μετά τη σφαγή τους διενεργείται ενδελεχής νεκροτομή για να αποκαλυφθούν τα παραμικρά συμπτώματα φυματίωσης.

Εάν εντοπιστεί ασθένεια, ο αντίστοιχος ορός μπορεί εύκολα να αποσυρθεί. Είναι γνωστό ότι το αίμα κάθε ζώου επεξεργάζεται χωριστά και ο ορός περιέχεται σε ξεχωριστά, αριθμημένα μπουκάλια.

Κέντρο οροθεραπείας Δημόσια Επιτροπήπαιδική υγιεινή στα σφαγεία της Λυών

Αριθμός ελέγχου …

Βοοειδής ορός γάλακτος σε λίτρα

Κάρτα και ετικέτα

Η παραπάνω κάρτα και ετικέτα αποτρέπει οποιαδήποτε σύγχυση.

Στη Λυών τα μέτρα υγιεινής είναι ιδιαίτερα αυστηρά, καθώς οι ίδιοι κτηνίατροι επιλέγουν τα ζώα, αιμοληψούν και ελέγχουν το κρέας.

Αποστείρωση εξοπλισμού. Ο ορός ζώων είναι ένα εξαιρετικό έδαφος αναπαραγωγής για μικρόβια και μπορεί να αποστειρωθεί μόνο μερικώς. Σε θερμοκρασίες άνω των 56° πήζουν και θολώνουν εάν προστεθεί ισχυρό αντισηπτικό. Επομένως, κατά τη διάρκεια όλων των εργασιών παραγωγής ορού, απαιτείται μέγιστη στειρότητα· ο εξοπλισμός πρέπει να απολυμανθεί πριν από τη χρήση.

Οι μεμονωμένοι απινιδωτές αποστειρώνονται με τον εξής τρόπο: το βράδυ πριν από την αιμοληψία γεμίζονται με αντισηπτικό διάλυμα και λίγες ώρες πριν την αιμοληψία αδειάζονται από αντισηπτικό χρησιμοποιώντας βρύση που βρίσκεται στο κάτω μέρος της συσκευής. Οι φυγόκεντροι που χρησιμοποιούνται για την παραγωγή ορού επεξεργάζονται επίσης με ένα αντισηπτικό, μεταξύ των οποίων η επεξεργασία του περιεχομένου κάθε απινιδωτή.

Όλα τα γυάλινα σκεύη, συμπεριλαμβανομένων των δοχείων των πέντε λίτρων για την αποθήκευση ορού γάλακτος, αποστειρώνονται σε ηλεκτρικό φούρνο σε θερμοκρασία 180°C.

Οι φιάλες των 250 ml για ορό αποστειρώνονται επίσης στους 180°C. Για να απλοποιηθεί η λειτουργία, τα πιάτα βρίσκονται σε κουτιά, τα οποία χρησιμοποιούνται κατά την εμφιάλωση και τη διανομή στο κοινό.

παράδοση λουλουδιών στο Voskresensk

Η αποστείρωση αντιπροσωπεύεται από φυσικές, χημικές, μηχανικές και βιολογικές μεθόδους και διάφορες μεθόδους.

Η σκοπιμότητα χρήσης μιας συγκεκριμένης μεθόδου αποστείρωσης και των μεθόδων της εξαρτάται από τα χαρακτηριστικά του υλικού που πρόκειται να αποστειρωθεί, τις φυσικές και χημικές του ιδιότητες.

Η διάρκεια της αποστείρωσης εξαρτάται από το αντικείμενο που αποστειρώνεται, τον παράγοντα αποστείρωσης και τη δόση του, τη θερμοκρασία και την υγρασία του περιβάλλοντος.

Μέθοδος φυσικής αποστείρωσης

Οι μέθοδοι της φυσικής μεθόδου αποστείρωσης περιλαμβάνουν ξήρανση, καύση και πύρωση, βρασμό, παστερίωση και εκπυρήνωση, θερμό αέρα (ξηρή θερμότητα), υπερήχους, υπεριώδη και ραδιενεργή ακτινοβολία, ρεύμα υψηλής συχνότητας, ηλιακό φως.

Η πιο κοινή μέθοδος αποστείρωσης αντικειμένων που μπορούν να εκτεθούν σε υψηλές θερμοκρασίες είναι η αποστείρωση με φωτιά, ζεστό αέρα και κορεσμένο ατμό υπό πίεση.

Η φωτιά χρησιμοποιείται για την καύση μολυσμένων αντικειμένων που δεν αντιπροσωπεύουν καμία αξία (περιττά χαρτιά, παλιές ταπετσαρίες, κουρέλια, σκουπίδια), για την απολύμανση των πτυέλων ασθενών με φυματίωση, των πτωμάτων ανθρώπων και ζώων που πέθαναν από ιδιαίτερα επικίνδυνες λοιμώξεις, καθώς και για κάψτε και φρύξτε διάφορα αντικείμενα.

Η καύση και η πύρωση χρησιμοποιούνται ευρέως στη μικροβιολογική πρακτική για την απολύμανση εργαλείων, εργαστηριακών και φαρμακευτικών υαλικών.

Η φρύξη σε φλόγα καυστήρα ή το flambéing είναι μια μέθοδος αποστείρωσης κατά την οποία το αντικείμενο αποστειρώνεται πλήρως, καθώς τα φυτικά κύτταρα, οι κύστεις και τα σπόρια μικροοργανισμών πεθαίνουν.

Συνήθως, οι θηλιές, οι σπάτουλες, οι πιπέτες, οι τσουλήθρες και οι καλυπτρίδες, τα μικρά εργαλεία και άλλα μολυσμένα αντικείμενα αποστειρώνονται με φρύξη εάν δεν μπορούν να βράσουν. Δεν συνιστάται η αποστείρωση ψαλιδιών και νυστέρι με θέρμανση, καθώς η επιφάνεια κοπής γίνεται θαμπή όταν εκτίθεται στη φωτιά.

Μία από τις απλούστερες και πιο κοινές μεθόδους φυσικής αποστείρωσης που χρησιμοποιούνται στην ιατρική πρακτική είναι η αποστείρωση με θερμό αέρα (ξηρή θερμότητα). Η αποστείρωση με ξηρή θερμότητα πραγματοποιείται σε φούρνους ξήρανσης (φούρνοι Pasteur). Ο ξηρός ζεστός αέρας έχει βακτηριοκτόνο, ιοκτόνο, σποριοκτόνο δράση και χρησιμοποιείται κυρίως για την αποστείρωση γυάλινων προϊόντων (εργαστηριακά γυάλινα σκεύη - πιάτα Petri, φιάλες, πιπέτες, δοκιμαστικοί σωλήνες κ.λπ.), καθώς και μεταλλικά προϊόντα που μπορούν να αποστειρωθούν με ατμό υπό πίεση.

Επιπλέον, η ξηρή θερμότητα χρησιμοποιείται για την αποστείρωση αντικειμένων από πορσελάνη και ανθεκτικές στη θερμότητα ουσίες (ταλκ, λευκή άργιλος), καθώς και ορυκτά και φυτικά έλαια, λίπη, βαζελίνη, λανολίνη και κερί. Ο πιο αποτελεσματικός τρόπος για αυτή τη μέθοδο αποστείρωσης, που εξασφαλίζει τον θάνατο των φυτικών μορφών και των σπορίων, είναι η θερμοκρασία 160 - 180 βαθμών για 15 λεπτά.

Δεν μπορείτε να αποστειρώσετε τρόφιμα, ισοτονικά διαλύματα ή είδη από καουτσούκ και συνθετικά υλικά με ξηρή θερμότητα, καθώς τα υγρά βράζουν και χύνονται και το καουτσούκ και τα συνθετικά υλικά λιώνουν.

Η αποστείρωση με κορεσμένο ατμό υπό πίεση είναι η πιο αξιόπιστη και πιο συχνά χρησιμοποιούμενη μέθοδος για την αποστείρωση επιδέσμων, νερού, ορισμένων φαρμάκων, μέσων καλλιέργειας, μαλακού εξοπλισμού, οργάνων, καθώς και για την απολύμανση μολυσμένου υλικού.

Στη χειρουργική πρακτική, οι επίδεσμοι, οι ρόμπες των χειρουργών και τα εσώρουχα για τον χειρουργημένο ασθενή απολυμαίνονται με χρήση ατμού σε αυτόκλειστα. Η αποστείρωση με ατμό υπό πίεση πραγματοποιείται σε ειδικές συσκευές - αυτόκλειστα.

Το αυτόκαυστο καταστρέφει πλήρως όλους τους μικροοργανισμούς και τα σπόρια. Η μέθοδος αποστείρωσης με πίεση ατμού βασίζεται στη θέρμανση του υλικού με κορεσμένους υδρατμούς υπό πίεση πάνω από την ατμοσφαιρική πίεση. Η συνδυασμένη δράση υψηλής θερμοκρασίας και ατμού καθιστά αυτή τη μέθοδο ιδιαίτερα αποτελεσματική. Σε αυτή την περίπτωση, τόσο τα φυτικά κύτταρα όσο και τα μικροβιακά σπόρια πεθαίνουν.

Τα μικροβιακά σπόρια πεθαίνουν μέσα σε 10 λεπτά υπό την επίδραση κορεσμένου υδρατμού και οι φυτικές μορφές πεθαίνουν μέσα σε 1 έως 4 λεπτά.

Η υψηλή βακτηριοκτόνος δύναμη του κορεσμένου ατμού οφείλεται στο γεγονός ότι, υπό την επίδραση υδρατμών υπό πίεση, οι πρωτεΐνες του μικροβιακού κυττάρου διογκώνονται και πήζουν, με αποτέλεσμα τα μικροβιακά κύτταρα να πεθαίνουν.

Η βακτηριοκτόνος δράση των κορεσμένων υδρατμών ενισχύεται από την υπερβολική πίεση.

Η αποστείρωση σε αυτόκλειστο πραγματοποιείται με διαφορετικούς τρόπους.

Έτσι, απλά θρεπτικά μέσα (άγαρ κρέας - πεπτόνη και ζωμός κρέατος - πεπτόνης) αποστειρώνονται για 20 λεπτά στους 120 βαθμούς (1 atm.). Αλλά με αυτόν τον τρόπο λειτουργίας είναι αδύνατο να αποστειρωθούν μέσα που περιέχουν πρωτεΐνες, υδατάνθρακες και άλλες ουσίες που αλλάζουν εύκολα με θέρμανση.

Τα μέσα με υδατάνθρακες αποστειρώνονται σε αυτόκλειστο σε 0,5 atm. 10 – 15 λεπτά ή κλασματική ροή ατμού.

Χρησιμοποιώντας υψηλή θερμοκρασία, μπορείτε να καταστρέψετε τις πιο επίμονες μορφές παθογόνων μικροοργανισμών (συμπεριλαμβανομένων εκείνων που σχηματίζουν σπόρους) όχι μόνο στην επιφάνεια των αντικειμένων που απολυμαίνονται, αλλά και στο βάθος τους.

Αυτό είναι το μεγάλο πλεονέκτημα της υψηλής θερμοκρασίας ως αξιόπιστου μέσου αποστείρωσης. Ωστόσο, ορισμένα είδη αλλοιώνονται υπό την επίδραση υψηλών θερμοκρασιών και σε αυτές τις περιπτώσεις είναι απαραίτητο να καταφύγουμε σε άλλες μεθόδους και μέσα απολύμανσης.

Η πλήρης αποστείρωση υλικών και αντικειμένων που δεν επιτρέπουν τη χρήση αποστείρωσης σε υψηλή θερμοκρασία επιτυγχάνεται με επαναλαμβανόμενη αποστείρωση με υδρατμούς σε συσκευή Koch σε θερμοκρασία που δεν υπερβαίνει τους 100 βαθμούς. Αυτή η μέθοδος ονομάζεται κλασματική αποστείρωση. Συνοψίζεται στο γεγονός ότι οι υπόλοιπες μη σκοτωμένες μορφές μικροβίων, μετά από μια μέρα σε θερμοστάτη στους 37 βαθμούς, βλασταίνουν σε φυτικά κύτταρα, ο θάνατος των οποίων συμβαίνει κατά την επακόλουθη αποστείρωση αυτού του αντικειμένου με ρέοντα ατμό.

Η επεξεργασία με υγρό ατμό πραγματοποιείται τρεις φορές για 30-40 λεπτά. Η θέρμανση του υλικού μία φορά σε θερμοκρασία κάτω των 100 βαθμών είναι γνωστή ως παστερίωση. Η παστερίωση προτάθηκε από τον Παστέρ και προορίζεται κυρίως για την καταστροφή μικροοργανισμών κυρίως μη σπορίων. Η παστερίωση πραγματοποιείται στους 60 - 70 βαθμούς για 15 έως 30 λεπτά, στους 80 βαθμούς για 10 έως 15 λεπτά.

Στη μικροβιολογική πρακτική, η παστερίωση του υλικού σπόρων χρησιμοποιείται συχνά για την απομόνωση καθαρών καλλιεργειών μικροοργανισμών που σχηματίζουν σπόρους και για τον εντοπισμό της ικανότητας των μικροοργανισμών να σχηματίζουν σπόρια.

Για υγρά που χάνουν τη γεύση και άλλες πολύτιμες ιδιότητες όταν εκτίθενται σε υψηλές θερμοκρασίες (γάλα, μούρα και χυμοί φρούτων, μπύρα, θρεπτικά υλικά που περιέχουν υδατάνθρακες ή ουρία κ.λπ.), η αποστείρωση με ρέον ατμό πραγματοποιείται στους 50 - 60 βαθμούς για 15 - 33333330 λεπτά ή στους 70 - 80 βαθμούς για 5 - 10 λεπτά. Σε αυτή την περίπτωση, μικρόβια μέσης αντοχής πεθαίνουν, ενώ διατηρούνται πιο ανθεκτικά μικρόβια και σπόρια.

Η κλασματική αποστείρωση 5 - 6 φορές στους 60 βαθμούς για 1 ώρα ονομάζεται τυνδαλοποίηση.

Πολλά ιατρικά προϊόντα που κατασκευάζονται από πολυμερή υλικά δεν αντέχουν την αποστείρωση με ατμό σύμφωνα με γενικά αποδεκτά καθεστώτα. Για πολλά προϊόντα, λόγω των χαρακτηριστικών των υγρών που περιέχουν (συντηρητικά, φάρμακα και άλλα προϊόντα), είναι αδύνατο να αποστειρωθούν χρησιμοποιώντας γενικά αποδεκτές μεθόδους και μεθόδους. Για τέτοια προϊόντα, αναπτύσσονται ατομικά καθεστώτα αποστείρωσης για να διασφαλιστεί η αξιόπιστη αποστείρωση των αντικειμένων.

Έτσι, η αποστείρωση του ρότορα για διαχωρισμό του αίματος σε κλάσματα πραγματοποιείται με υδρατμούς σε θερμοκρασία 120 βαθμών για 45 λεπτά.

Η στειρότητα των δοχείων συντηρητικού επιτυγχάνεται στους 110 βαθμούς για 60 λεπτά.

Το βράσιμο είναι μια μέθοδος αποστείρωσης που χρησιμοποιείται για την αποστείρωση επαναχρησιμοποιήσιμων συρίγγων, χειρουργικών εργαλείων, ελαστικών σωλήνων, γυάλινων και μεταλλικών σκευών.

Η αποστείρωση με βρασμό πραγματοποιείται σε αποστειρωτές. Οι μορφές σπορίων σε βραστό νερό πεθαίνουν μετά από 20 - 30 λεπτά. Το βράσιμο για 45 λεπτά χρησιμοποιείται ευρέως για την απολύμανση εκκρίσεων και άλλων μολυσματικών υλικών, λευκών ειδών, πιάτων, παιχνιδιών και ειδών φροντίδας ασθενών.

Ζεστό νερό (60 - 100 μοίρες) με απορρυπαντικά χρησιμοποιείται κατά το πλύσιμο και τον καθαρισμό για τη μηχανική απομάκρυνση βρωμιάς και μικροοργανισμών.

Τα περισσότερα βλαστικά κύτταρα πεθαίνουν στους 70 βαθμούς μετά από 30 λεπτά.

Η αποστείρωση με διήθηση χρησιμοποιείται σε περιπτώσεις όπου τα υποστρώματα δεν αντέχουν τη θέρμανση, ιδιαίτερα για μέσα που περιέχουν πρωτεΐνες, ορούς, ορισμένα αντιβιοτικά, βιταμίνες και πτητικές ουσίες. Αυτή η τεχνική χρησιμοποιείται αρκετά ευρέως για την αποστείρωση ενός υγρού καλλιέργειας, όταν είναι απαραίτητο να απελευθερωθεί από τα μικροβιακά κύτταρα, αλλά να διατηρηθούν αμετάβλητα όλα τα μεταβολικά προϊόντα που περιέχει.

Η μέθοδος περιλαμβάνει φιλτράρισμα υγρών μέσω ειδικών φίλτρων που έχουν λεπτά πορώδη χωρίσματα και επομένως διατηρούν τα μικροβιακά κύτταρα.

Οι δύο πιο ευρέως χρησιμοποιούμενοι τύποι φίλτρων είναι τα φίλτρα μεμβράνης και τα φίλτρα Seitz.

Τα φίλτρα μεμβράνης παρασκευάζονται από κολλίδιο, οξικό, κυτταρίνη και άλλα υλικά.

Τα φίλτρα Seitz κατασκευάζονται από μείγμα αμιάντου και κυτταρίνης.

Επιπλέον, για την αποστείρωση χρησιμοποιούνται φίλτρα από καολίνη με ανάμειξη χαλαζιακής άμμου, χώματος έγχυσης και άλλων υλικών («κεριά» των Chamberlan, Berkfeld).

Τα φίλτρα μεμβράνης και αμιάντου είναι σχεδιασμένα για μία χρήση.

Με την υπεριώδη ακτινοβολία, το βακτηριοκτόνο αποτέλεσμα παρέχεται από ακτίνες μήκους 200 - 450 nm, η πηγή των οποίων είναι βακτηριοκτόνοι λαμπτήρες.

Με τη βοήθεια βακτηριοκτόνων λαμπτήρων, ο αέρας αποστειρώνεται με υπεριώδεις ακτίνες σε ιατρικά και προληπτικά ιδρύματα, κουτιά σε μικροβιολογικά εργαστήρια, σε επιχειρήσεις βιομηχανίας τροφίμων, σε κουτιά για την παραγωγή εμβολίων και ορών, σε χειρουργεία, αίθουσες χειρισμών, παιδικά ιδρύματα κ.λπ. .

Οι υπεριώδεις ακτίνες έχουν υψηλή αντιμικροβιακή δράση και μπορούν να προκαλέσουν το θάνατο όχι μόνο των βλαστικών κυττάρων, αλλά και των σπορίων τους.

Το ηλιακό φως προκαλεί το θάνατο μικροοργανισμών ως αποτέλεσμα της υπεριώδους ακτινοβολίας και της ξήρανσης.

Η ξήρανση με ηλιακή ακτινοβολία έχει επιζήμια επίδραση σε πολλούς τύπους μικροοργανισμών, αλλά η επίδρασή της είναι επιφανειακή και επομένως το φως του ήλιου παίζει υποστηρικτικό ρόλο στην πρακτική αποστείρωσης.

Πρόσφατα, στη θεραπεία τραυμάτων και εγκαυμάτων, έχουν χρησιμοποιηθεί επικαλύψεις από συνθετικά και φυσικά πολυμερή σε μορφή τζελ.

Τα πολυμερή αντισηπτικά φιλμ χρησιμοποιούνται ευρέως για τοπική θεραπεία τραυμάτων και εγκαυμάτων. Περιέχουν αντιμικροβιακούς παράγοντες ευρέος φάσματος όπως καταπόλη, διοξειδίνη, μπλε ιώδιο, καθώς και γλουταραλδεΰδη που περιέχει σορβιτόλη. Για την αποστείρωση αυτών των μεμβρανών, χρησιμοποιείται ιονίζουσα ακτινοβολία σε δόση 20,0 kGy. Κατά τη βιομηχανική παραγωγή πολυμερών αντισηπτικών μεμβρανών και ροφητών, η στειρότητά τους σε αυτό το καθεστώς αποστείρωσης διασφαλίζεται πλήρως.

Η ραδιενεργή ακτινοβολία σκοτώνει όλους τους τύπους μικροοργανισμών, τόσο σε βλαστική όσο και σε μορφή σπορίων. Χρησιμοποιείται ευρέως για αποστείρωση σε επιχειρήσεις παραγωγής αποστειρωμένων προϊόντων και αποστειρωμένων ιατρικών συσκευών μιας χρήσης, για την απολύμανση λυμάτων και πρώτων υλών ζωικής προέλευσης.

Μέθοδος μηχανικής αποστείρωσης

Οι μέθοδοι μηχανικής αποστείρωσης απομακρύνουν τα μικρόβια από την επιφάνεια των αντικειμένων. Αυτά περιλαμβάνουν το πλύσιμο, το τίναγμα, το σκούπισμα, το υγρό σκούπισμα, τον αερισμό, τον εξαερισμό, το σκούπισμα με ηλεκτρική σκούπα, το πλύσιμο.

Μέθοδος χημικής αποστείρωσης

Τα πλαστικά χρησιμοποιούνται πλέον όλο και περισσότερο στην ιατρική πρακτική.

Χρησιμοποιούνται στην οδοντιατρική, τη γναθοπροσωπική χειρουργική, την τραυματολογία, την ορθοπεδική και τη χειρουργική. Τα περισσότερα πλαστικά δεν μπορούν να αντέξουν τις μεθόδους θερμικής αποστείρωσης του ατμού υπό πίεση και ξηρής θερμότητας (ξηρός θερμαινόμενος αέρας). Τα διαλύματα αλκοόλης, διοκτόνου και τριμερούς διαλύματος που χρησιμοποιούνται για την αποστείρωση τέτοιων αντικειμένων δεν διασφαλίζουν τη στειρότητα των προϊόντων που υποβάλλονται σε επεξεργασία.

Επομένως, μέθοδοι αερίου και ακτινοβολίας, καθώς και διαλύματα χημικών ουσιών, χρησιμοποιούνται για την αποστείρωση πλαστικών προϊόντων.

Η εισαγωγή μεγάλου αριθμού προϊόντων από θερμοευαίσθητα υλικά στην πρακτική των ιατρικών ιδρυμάτων συμβάλλει στην εισαγωγή μεθόδων απολύμανσης και αποστείρωσης με ακτινοβολία και αέρια με απολυμαντικά διαλύματα.

Κατά τη χημική αποστείρωση χρησιμοποιούνται αέρια και παράγοντες από διάφορες χημικές ομάδες (υπεροξείδια, φαινολικά, αλογόνου, αλδεΰδες, αλκάλια και οξέα, επιφανειοδραστικά κ.λπ.). Για καθημερινή χρήση παράγονται απορρυπαντικά, καθαριστικά, λεύκανση και άλλα σκευάσματα που έχουν αντιμικροβιακή δράση λόγω της εισαγωγής διάφορων χημικών ουσιών στη σύνθεσή τους.

Αυτά τα παρασκευάσματα χρησιμοποιούνται για τον καθαρισμό και την απολύμανση ειδών υγιεινής, πιάτων, λευκών ειδών κ.λπ.

Ο ατμός φορμαλδεΰδης (ατμομορφή) μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε ιατρικά ιδρύματα για την αποστείρωση μεταλλικών ιατρικών προϊόντων (νυστέρια, βελόνες, τσιμπιδάκια, ανιχνευτές, σφιγκτήρες, γάντζοι, κόφτες σύρματος κ.λπ.).

Πριν από την αποστείρωση με ατμό φορμαλδεΰδης, τα προϊόντα πρέπει να υποβληθούν σε καθαρισμό πριν από την αποστείρωση και να στεγνώσουν καλά.

Κατά την αποστείρωση με οποιαδήποτε χημική μέθοδο, η διαδικασία επεξεργασίας ενός συγκεκριμένου αντικειμένου εξαρτάται από τα χαρακτηριστικά του αντικειμένου που απολυμαίνεται, την αντίσταση των μικροβίων, τα χαρακτηριστικά των ιδιοτήτων του χημικού, τη θερμοκρασία περιβάλλοντος, την υγρασία και άλλους παράγοντες.

Έτσι, η στειρότητα των μεταλλικών οργάνων επιτυγχάνεται μετά από πέντε ώρες αποθήκευσης σε σφραγισμένο θάλαμο με ατμό σε θερμοκρασία τουλάχιστον 20 βαθμών και σχετική υγρασία 95 - 98%, σε θερμοκρασία 15 βαθμών, πλήρης αποστείρωση αυτών των αντικειμένων επιτυγχάνεται μόνο μετά από 16 ώρες.

Η σποριοκτόνος δράση της γλουταραλδεΰδης εξαρτάται από τη θερμοκρασία. Η βέλτιστη δράση του εμφανίζεται σε θερμοκρασία 15 – 25 βαθμών. Καθώς η θερμοκρασία αυξάνεται, η σποριοκτόνος δράση αυτού του φαρμάκου μειώνεται.

Η χημική αποστείρωση χρησιμοποιείται σε κάπως περιορισμένο βαθμό. Τις περισσότερες φορές, αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται για την πρόληψη της βακτηριακής μόλυνσης των μέσων καλλιέργειας και των ανοσοβιολογικών παρασκευασμάτων (εμβόλια και οροί). Ουσίες όπως το χλωροφόρμιο, το τολουόλιο και ο αιθέρας προστίθενται συχνότερα στα θρεπτικά μέσα. Εάν είναι απαραίτητο να ελευθερωθεί το μέσο από αυτά τα συντηρητικά, θερμαίνεται σε υδατόλουτρο στους 56 βαθμούς και τα συντηρητικά εξατμίζονται.

Για τη διατήρηση εμβολίων ή ορών, χρησιμοποιούνται μερθειολικό οξύ, βορικό οξύ και φορμαλίνη.

Μέθοδος βιολογικής αποστείρωσης

Η βιολογική στείρωση βασίζεται στη χρήση αντιβιοτικών.

Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται ευρέως στην καλλιέργεια ιών.

Η αποστείρωση (από το λατινικό sterilis - sterile) περιλαμβάνει την πλήρη αδρανοποίηση μικροβίων σε αντικείμενα που υποβάλλονται σε επεξεργασία.

Φούρνος Pasteur - αποστείρωση ξηρής θερμότητας.

Υπάρχουν τρεις βασικές μέθοδοι αποστείρωσης: θερμότητα, ακτινοβολία, χημική.

Ιώδιο.

Η θερμική αποστείρωση βασίζεται στην ευαισθησία των μικροβίων σε υψηλή θερμοκρασία.

Στους 60 °C και παρουσία νερού, συμβαίνει μετουσίωση των πρωτεϊνών, συμπεριλαμβανομένων των ενζύμων, με αποτέλεσμα να πεθαίνουν οι φυτικές μορφές μικροβίων. Τα σπόρια που περιέχουν πολύ μικρή ποσότητα δεσμευμένου νερού και έχουν πυκνά κελύφη αδρανοποιούνται στους 160-170 °C. Για τη θερμική αποστείρωση χρησιμοποιούνται κυρίως ξηρή θερμότητα και ατμός υπό πίεση.
Η αποστείρωση με ξηρή θερμότητα πραγματοποιείται σε φούρνους ξηρής θερμότητας ή σε φούρνους Pasteur. Ο φούρνος Pasteur είναι ένα ερμητικά κλειστό μεταλλικό ντουλάπι, θερμαινόμενο με ηλεκτρισμό και εξοπλισμένο με θερμόμετρο.

Η απολύμανση του υλικού σε αυτό γίνεται στους 160-170 °C για 60-120 λεπτά. Το μειονέκτημα αυτής της μεθόδου είναι ότι μόνο ορισμένα αντικείμενα που μπορούν να αποστειρωθούν, όπως το εργαστηριακό γυαλί, αντέχουν σε τόσο υψηλές θερμοκρασίες.
Η πιο καθολική μέθοδος αποστείρωσης είναι η επεξεργασία με ατμό υπό πίεση σε αυτόκλειστα, στα οποία αποστειρώνονται επιδέσμους, λευκά είδη, πολλά εργαλεία, μέσα καλλιέργειας, διαλύματα, μολυσματικό υλικό κ.λπ.

Το αυτόκλειστο είναι ένας μεταλλικός κύλινδρος με ισχυρά τοιχώματα, ερμητικά σφραγισμένος, που αποτελείται από θάλαμο νερού-ατμού και αποστείρωσης. Η συσκευή είναι εξοπλισμένη με μανόμετρο, θερμόμετρο και άλλες συσκευές παρακολούθησης. Στο αυτόκλειστο δημιουργείται αυξημένη πίεση, η οποία οδηγεί σε αύξηση του σημείου βρασμού του νερού. Έτσι, στις 0,5 atm το σημείο βρασμού είναι 80 °C, στη 1 atm - 100 °C, στις 2 atm - 121 °C και στις 3 atm - 136 °C.

Λόγω του γεγονότος ότι, εκτός από την υψηλή θερμοκρασία, ο ατμός δρα στους μικροοργανισμούς, τα σπόρια πεθαίνουν ήδη στους 120 ° C. Ο πιο συνηθισμένος τρόπος λειτουργίας αυτόκλειστου είναι 2 atm, 121 °C, 15-20 λεπτά. Ο χρόνος αποστείρωσης μειώνεται όσο αυξάνεται ατμοσφαιρική πίεση, και επομένως το σημείο βρασμού. Οι μικροοργανισμοί πεθαίνουν σε λίγα δευτερόλεπτα, αλλά το υλικό υποβάλλεται σε επεξεργασία για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα, καθώς, πρώτον, η θερμοκρασία πρέπει να είναι υψηλή μέσα στο υλικό που αποστειρώνεται και, δεύτερον, υπάρχει ένα λεγόμενο πεδίο ασφαλείας, σχεδιασμένο για πιθανή απόκλιση από τις καθορισμένες παραμέτρους κατά τη λειτουργία αυτόκλειστου.

Ετικέτες: σώμα, ανάπτυξη, στείρωση, ένζυμο

Η ζωή των μικροοργανισμών εξαρτάται στενά από τις περιβαλλοντικές συνθήκες. Όλοι οι περιβαλλοντικοί παράγοντες που επηρεάζουν τους μικροοργανισμούς μπορούν να χωριστούν σε τρεις ομάδες: φυσικούς, χημικούς και βιολογικούς, η ευεργετική ή επιβλαβής επίδραση των οποίων εξαρτάται τόσο από τη φύση του ίδιου του παράγοντα όσο και από τις ιδιότητες του μικροοργανισμού.

Φυσικοί παράγοντες

Από τους φυσικούς παράγοντες, η θερμοκρασία, η ξήρανση, η ενέργεια ακτινοβολίας και ο υπέρηχος έχουν τη μεγαλύτερη επίδραση στην ανάπτυξη των μικροοργανισμών.

Θερμοκρασία. Η ζωτική δραστηριότητα κάθε μικροοργανισμού περιορίζεται από ορισμένα όρια θερμοκρασίας. Αυτή η εξάρτηση από τη θερμοκρασία συνήθως εκφράζεται από τρία κύρια σημεία: ελάχιστη - η θερμοκρασία κάτω από την οποία σταματά η αναπαραγωγή των μικροβιακών κυττάρων. βέλτιστο - καλύτερη θερμοκρασίαγια την ανάπτυξη και ανάπτυξη μικροοργανισμών· μέγιστη - η θερμοκρασία πάνω από την οποία εξασθενεί ή σταματά η ζωτική δραστηριότητα των κυττάρων. Η βέλτιστη θερμοκρασία αντιστοιχεί συνήθως στις θερμοκρασιακές συνθήκες του φυσικού οικοτόπου.

Όλοι οι μικροοργανισμοί σε σχέση με τη θερμοκρασία χωρίζονται σε ψυχόφιλους, μεσόφιλους και θερμόφιλους.

Τα ψυχρόφιλα (από τα ελληνικά ψυχρός - κρύο, φιλέω - αγάπη) ή μικροοργανισμοί που αγαπούν το κρύο, αναπτύσσονται σε σχετικά χαμηλές θερμοκρασίες: ελάχιστη θερμοκρασία - 0° C, βέλτιστη - 10-20° C, μέγιστη - 30° C. Αυτή η ομάδα περιλαμβάνει μικροοργανισμούς που ζουν σε βόρειες θάλασσεςκαι ωκεανοί, έδαφος, λύματα. Αυτό περιλαμβάνει επίσης φωτεινά βακτήρια και βακτήρια σιδήρου, καθώς και μικρόβια που προκαλούν αλλοίωση των τροφίμων στο κρύο (κάτω από 0°C).

Τα μεσόφιλα (από το ελληνικό μέσος - μέση) είναι η πιο εκτεταμένη ομάδα, συμπεριλαμβανομένων των περισσότερων σαπρόφυτων και όλων των παθογόνων μικροοργανισμών. Η βέλτιστη θερμοκρασία για αυτούς είναι 28-37 ° C, η ελάχιστη είναι 10 ° C, η μέγιστη είναι 45 ° C.

Τα θερμόφιλα (από το ελληνικό termos - θερμότητα, θερμότητα) ή μικροοργανισμοί που αγαπούν τη θερμότητα, αναπτύσσονται σε θερμοκρασίες πάνω από 55 ° C, η ελάχιστη θερμοκρασία για αυτούς είναι 30 ° C, η βέλτιστη είναι 50-60 ° C και η μέγιστη είναι 70 -75 ° C. Βρήκαν σε θερμές μεταλλικές πηγές, το επιφανειακό στρώμα του εδάφους, αυτοθερμαινόμενα υποστρώματα (κοπριά, σανός, σιτηρά) και τα έντερα των ανθρώπων και των ζώων. Μεταξύ των θερμόφιλων υπάρχουν πολλές μορφές σπορίων.

Οι υψηλές και οι χαμηλές θερμοκρασίες έχουν διαφορετικές επιπτώσεις στους μικροοργανισμούς. Μερικά είναι πιο ευαίσθητα στις υψηλές θερμοκρασίες. Επιπλέον, όσο υψηλότερη είναι η θερμοκρασία πέρα ​​από τη μέγιστη, τόσο πιο γρήγορος επέρχεται ο θάνατος των μικροβιακών κυττάρων, ο οποίος οφείλεται στη μετουσίωση (πήξη) των πρωτεϊνών των κυττάρων.

Οι φυτικές μορφές μεσόφιλων βακτηρίων πεθαίνουν σε θερμοκρασία 60 ° C για 30-60 λεπτά και στους 80-100 ° C - μετά από 1-2 λεπτά. Τα βακτηριακά σπόρια είναι πολύ πιο ανθεκτικά στις υψηλές θερμοκρασίες. Για παράδειγμα, τα σπόρια των βακίλλων του άνθρακα αντέχουν το βρασμό για 10-20 λεπτά και τα σπόρια της αλλαντίασης του κλωστριδίου - 6 ώρες. Όλοι οι μικροοργανισμοί, συμπεριλαμβανομένων των σπορίων, πεθαίνουν σε θερμοκρασία 165-170 ° C για μια ώρα (σε ξηρή θερμότητα φούρνο) ή όταν εκτίθεται σε ατμό υπό πίεση 1 atm (σε αυτόκλειστο) για 30 λεπτά.

Η επίδραση των υψηλών θερμοκρασιών στους μικροοργανισμούς είναι η βάση της αποστείρωσης - η πλήρης απελευθέρωση διαφόρων αντικειμένων από τους μικροοργανισμούς και τα σπόρια τους (βλ. παρακάτω).

Πολλοί μικροοργανισμοί είναι εξαιρετικά ανθεκτικοί στις χαμηλές θερμοκρασίες. Ο τύφος Salmonella και το Vibrio cholerae επιβιώνουν για μεγάλο χρονικό διάστημα στον πάγο. Ορισμένοι μικροοργανισμοί παραμένουν βιώσιμοι σε θερμοκρασίες υγρού αέρα (-190°C) και τα βακτηριακά σπόρια μπορούν να αντέξουν σε θερμοκρασίες έως -250°C.

Μόνο μεμονωμένα είδηΤα παθογόνα βακτήρια είναι ευαίσθητα σε χαμηλές θερμοκρασίες (για παράδειγμα, Bordetella pertussis και parapertussis, Neisseria meningococcus κ.λπ.). Αυτές οι ιδιότητες των μικροοργανισμών λαμβάνονται υπόψη στην εργαστηριακή διάγνωση και κατά τη μεταφορά του υλικού δοκιμής - παραδίδεται στο εργαστήριο προστατευμένο από ψύξη.

Η δράση των χαμηλών θερμοκρασιών σταματά τις διεργασίες σήψης και ζύμωσης, οι οποίες χρησιμοποιούνται ευρέως για τη συντήρηση τροφίμων σε ψυκτικές μονάδες, κελάρια και παγετώνες. Σε θερμοκρασίες κάτω από τους 0°C, τα μικρόβια πέφτουν σε κατάσταση αναστολής εμψύχωσης - οι μεταβολικές διεργασίες επιβραδύνονται και η αναπαραγωγή σταματά. Ωστόσο, εάν υπάρχουν κατάλληλα συνθήκες θερμοκρασίαςκαι θρεπτικό μέσο, ​​αποκαθίστανται οι ζωτικές λειτουργίες των μικροβιακών κυττάρων. Αυτή η ιδιότητα των μικροοργανισμών χρησιμοποιείται στην εργαστηριακή πρακτική για τη διατήρηση μικροβιακών καλλιεργειών σε χαμηλές θερμοκρασίες. Οι γρήγορες αλλαγές σε υψηλές και χαμηλές θερμοκρασίες (πάγωμα και απόψυξη) έχουν επίσης επιζήμια επίδραση στους μικροοργανισμούς - αυτό οδηγεί σε ρήξη των κυτταρικών μεμβρανών.

Ξήρανση. Το νερό είναι απαραίτητο για τη φυσιολογική λειτουργία των μικροοργανισμών. Η ξήρανση οδηγεί σε αφυδάτωση του κυτταροπλάσματος, διαταραχή της ακεραιότητας της κυτταροπλασματικής μεμβράνης, με αποτέλεσμα να διαταράσσεται η θρέψη των μικροβιακών κυττάρων και να επέρχεται ο θάνατός τους.

Ο χρόνος θανάτου διαφορετικών τύπων μικροοργανισμών υπό την επίδραση της ξήρανσης διαφέρει σημαντικά. Για παράδειγμα, τα παθογόνα Neisseria (μηνιγγιτιδόκοκκοι, γονόκοκκοι), Leptospira, Treponema pallidum και άλλα πεθαίνουν όταν στεγνώσουν μετά από λίγα λεπτά. Το Vibrio cholerae μπορεί να αντέξει το στέγνωμα για 2 ημέρες, η Salmonella typhoid - 70 ημέρες και το Mycobacterium tuberculosis - 90 ημέρες. Όμως τα αποξηραμένα πτύελα των ασθενών με φυματίωση, στα οποία τα παθογόνα προστατεύονται από ένα ξηρό πρωτεϊνικό κάλυμμα, παραμένει μολυσματικό για 10 μήνες.

Τα σπόρια είναι ιδιαίτερα ανθεκτικά στην ξήρανση, καθώς και σε άλλες περιβαλλοντικές επιδράσεις. Τα σπόρια των βακίλλων του άνθρακα διατηρούν την ικανότητα να βλασταίνουν για 10 χρόνια και τα σπόρια μυκήτων μούχλας έως και 20 χρόνια.

Η δυσμενής επίδραση της ξήρανσης στους μικροοργανισμούς έχει χρησιμοποιηθεί από καιρό για τη συντήρηση λαχανικών, φρούτων, κρέατος, ψαριών και φαρμακευτικά βότανα. Ταυτόχρονα, όταν εκτίθενται σε συνθήκες υψηλής υγρασίας, τέτοια προϊόντα φθείρονται γρήγορα λόγω της αποκατάστασης της μικροβιακής δραστηριότητας.

Η μέθοδος λυοφιλοποίησης χρησιμοποιείται ευρέως για την αποθήκευση καλλιεργειών μικροοργανισμών, εμβολίων και άλλων βιολογικών παρασκευασμάτων. Η ουσία της μεθόδου είναι ότι οι μικροοργανισμοί ή τα παρασκευάσματα πρώτα καταψύχονται και στη συνέχεια ξηραίνονται υπό συνθήκες κενού. Σε αυτή την περίπτωση, τα μικροβιακά κύτταρα εισέρχονται σε μια κατάσταση αναστολής κίνησης και διατηρούν τις βιολογικές τους ιδιότητες για αρκετούς μήνες ή χρόνια.

Ακτινοβόλος ενέργεια. Στη φύση, οι μικροοργανισμοί εκτίθενται συνεχώς στην ηλιακή ακτινοβολία. Το άμεσο ηλιακό φως προκαλεί το θάνατο πολλών μικροοργανισμών μέσα σε λίγες ώρες, με εξαίρεση τα φωτοσυνθετικά βακτήρια (πράσινα και μωβ βακτήρια θείου). Οι βλαβερές συνέπειες του ηλιακού φωτός οφείλονται στη δραστηριότητα υπεριώδεις ακτίνες(Ακτίνες UV). Απενεργοποιούν τα ένζυμα των κυττάρων και καταστρέφουν το DNA. Τα παθογόνα βακτήρια είναι πιο ευαίσθητα στη δράση των ακτίνων UV από τα σαπρόφυτα. Επομένως, είναι προτιμότερο να αποθηκεύονται οι μικροβιακές καλλιέργειες στο εργαστήριο στο σκοτάδι. Από αυτή την άποψη, η εμπειρία του Buchner είναι αποδεικτική.

Σε ένα πιάτο Petri με λεπτό στρώμαΤο άγαρ παράγεται με άφθονο εμβολιασμό οποιασδήποτε βακτηριακής καλλιέργειας. Γράμματα κομμένα από μαύρο χαρτί είναι κολλημένα στην εξωτερική επιφάνεια του κυπέλλου με σπόρους, σχηματίζοντας, για παράδειγμα, τη λέξη «τύφος». Το κύπελλο, με το κάτω μέρος του στραμμένο προς τα πάνω, ακτινοβολείται από το άμεσο ηλιακό φως για 1 ώρα. Στη συνέχεια αφαιρούνται τα χαρτιά και το κύπελλο τοποθετείται σε θερμοστάτη στους 37° C για μια ημέρα. Η ανάπτυξη βακτηρίων παρατηρείται μόνο σε εκείνα τα σημεία του άγαρ που προστατεύονταν από τις ακτίνες UV με αυτοκόλλητα γράμματα. Το υπόλοιπο άγαρ παραμένει διαφανές, δηλαδή δεν υπάρχει ανάπτυξη μικροοργανισμών (Εικ. 11).

Η σημασία του ηλιακού φωτός ως φυσικού παράγοντα για τη βελτίωση της υγείας του εξωτερικού περιβάλλοντος είναι μεγάλη. Απελευθερώνει τον αέρα, το νερό των φυσικών δεξαμενών και τα ανώτερα στρώματα του εδάφους από παθογόνα βακτήρια.

Η βακτηριοκτόνος (βακτηριοκαταστροφική) δράση των ακτίνων UV χρησιμοποιείται για την αποστείρωση του αέρα σε κλειστούς χώρους (χειρουργεία, καμαρίνια, κουτιά κ.λπ.), καθώς και για το νερό και το γάλα. Η πηγή αυτών των ακτίνων είναι οι λαμπτήρες υπεριώδους ακτινοβολίας και οι βακτηριοκτόνοι λαμπτήρες.

Άλλοι τύποι ενέργειας ακτινοβολίας - οι ακτίνες Χ, οι ακτίνες α-, β-, γ έχουν επιζήμια επίδραση στους μικροοργανισμούς μόνο σε μεγάλες δόσεις, της τάξης των 440-280 J/kg. Ο θάνατος των μικροβίων προκαλείται από την καταστροφή των πυρηνικών δομών και του κυτταρικού DNA. Χαμηλές δόσεις ακτινοβολίας διεγείρουν την ανάπτυξη μικροβιακών κυττάρων. Οι μικροοργανισμοί είναι πολύ πιο ανθεκτικοί στη ραδιενεργή ακτινοβολία από τους ανώτερους οργανισμούς. Τα θειονικά βακτήρια είναι γνωστό ότι ζουν σε κοιτάσματα μεταλλεύματα ουρανίου. Βακτήρια βρέθηκαν στο νερό από πυρηνικούς αντιδραστήρες σε συγκέντρωση ιοντίζουσας ακτινοβολίας 20-30 kJ/kg.

Η βακτηριοκτόνος δράση της ιονίζουσας ακτινοβολίας χρησιμοποιείται για τη συντήρηση ορισμένων προϊόντων διατροφής, την αποστείρωση βιολογικών παρασκευασμάτων (ορούς, εμβόλια κ.λπ.), ενώ οι ιδιότητες του αποστειρωμένου υλικού δεν αλλάζουν.

Τα τελευταία χρόνια αποστειρώνονται με τη μέθοδο της ακτινοβολίας προϊόντα μιας χρήσης όπως σιφώνια πολυστυρενίου, τρυβλία Petri, φρεάτια ορολογικών αντιδράσεων, σύριγγες, καθώς και υλικό ραμμάτων - catgut κ.λπ.

Υπέρηχοςπροκαλεί σημαντική βλάβη στα μικροβιακά κύτταρα. Υπό την επίδραση του υπερήχου, τα αέρια που βρίσκονται στο υγρό περιβάλλον του κυτταροπλάσματος ενεργοποιούνται και δημιουργείται υψηλή πίεση μέσα στο κύτταρο (έως 10.000 atm). Αυτό οδηγεί σε ρήξη της κυτταρικής μεμβράνης και κυτταρικό θάνατο. Ο υπέρηχος χρησιμοποιείται για την αποστείρωση τροφίμων (γάλα, χυμοί φρούτων) και πόσιμο νερό.

Υψηλή πίεση. Τα βακτήρια και ιδιαίτερα τα σπόρια τους είναι ανθεκτικά στη μηχανική πίεση. Στη φύση, βρίσκονται βακτήρια που ζουν σε θάλασσες και ωκεανούς σε βάθος 1000-10000 m υπό πίεση από 100 έως 900 atm. Ορισμένοι τύποι βακτηρίων μπορούν να αντέξουν πιέσεις έως και 3000-5000 atm και τα βακτηριακά σπόρια - ακόμη και 20.000 atm.

Χημικοί παράγοντες

Η επίδραση των χημικών ουσιών στους μικροοργανισμούς ποικίλλει ανάλογα με τη φύση της χημικής ένωσης, τη συγκέντρωσή της και τη διάρκεια της έκθεσης σε μικροβιακά κύτταρα. Ανάλογα με τη συγκέντρωση, μια χημική ουσία μπορεί να είναι πηγή διατροφής ή να έχει ανασταλτική επίδραση στη ζωτική δραστηριότητα των μικροοργανισμών. Για παράδειγμα, ένα διάλυμα γλυκόζης 0,5-2% διεγείρει την ανάπτυξη μικροβίων και διαλύματα γλυκόζης 20-40% αναστέλλουν τον πολλαπλασιασμό των μικροβιακών κυττάρων.

Πολλές χημικές ενώσεις που έχουν επιζήμια επίδραση στους μικροοργανισμούς χρησιμοποιούνται στην ιατρική πρακτική ως απολυμαντικά και αντισηπτικά.

Οι χημικές ουσίες που χρησιμοποιούνται για την απολύμανση ονομάζονται απολυμαντικά. Η απολύμανση αναφέρεται σε μέτρα που στοχεύουν στην καταστροφή παθογόνων μικροοργανισμών σε διάφορα περιβαλλοντικά αντικείμενα. Τα απολυμαντικά περιλαμβάνουν ενώσεις αλογονιδίων, φαινόλες και τα παράγωγά τους, άλατα βαρέων μετάλλων, ορισμένα οξέα, αλκάλια, αλκοόλες κ.λπ. Προκαλούν τον θάνατο των μικροβιακών κυττάρων, δρώντας σε βέλτιστες συγκεντρώσεις για ορισμένο χρόνο. Πολλά απολυμαντικά έχουν επιβλαβή επίδραση στους ιστούς του μακροοργανισμού.

Ονομάζονται αντισηπτικά ΧΗΜΙΚΕΣ ΟΥΣΙΕΣ, που μπορεί να προκαλέσει το θάνατο μικροοργανισμών ή να εμποδίσει την ανάπτυξη και την αναπαραγωγή τους. Χρησιμοποιούνται για θεραπευτικούς σκοπούς (χημειοθεραπεία), καθώς και για την απολύμανση τραυμάτων, δέρματος και ανθρώπινων βλεννογόνων. Αντισηπτικές ιδιότητες έχουν υπεροξείδιο του υδρογόνου, διαλύματα αλκοόλης ιωδίου, μπριγιάν πράσινη, διαλύματα υπερμαγγανικού καλίου κλπ. Ορισμένες αντισηπτικές ουσίες (οξικό, θειώδες, βενζοϊκό οξύ κ.λπ.) σε δόσεις που είναι αβλαβείς για τον άνθρωπο χρησιμοποιούνται για τη συντήρηση των τροφίμων.

Σύμφωνα με τον μηχανισμό δράσης, οι χημικές ουσίες με αντιμικροβιακή δράση μπορούν να χωριστούν σε διάφορες ομάδες.

1. Τα επιφανειοδραστικά (λιπαρά οξέα, σαπούνια και άλλα απορρυπαντικά) προκαλούν μείωση της επιφανειακής τάσης, η οποία οδηγεί σε διαταραχή της λειτουργίας του κυτταρικού τοιχώματος και της κυτταροπλασματικής μεμβράνης των μικροοργανισμών.

2. Η φαινόλη, η κρεσόλη και τα παράγωγά τους προκαλούν πήξη των μικροβιακών πρωτεϊνών. Χρησιμοποιούνται για την απολύμανση μολυσματικού υλικού στη μικροβιολογική πρακτική και στα νοσοκομεία μολυσματικών ασθενειών.

3. Οι οξειδωτικοί παράγοντες, που αλληλεπιδρούν με μικροβιακές πρωτεΐνες, διαταράσσουν τη δραστηριότητα των ενζύμων και προκαλούν μετουσίωση της πρωτεΐνης. Ενεργοί οξειδωτικοί παράγοντες είναι το χλώριο και το όζον, που χρησιμοποιούνται για την απολύμανση του πόσιμου νερού. Τα παράγωγα χλωρίου (χλωρίνη, χλωραμίνη) χρησιμοποιούνται ευρέως για σκοπούς απολύμανσης. Το υπεροξείδιο του υδρογόνου, το υπερμαγγανικό κάλιο, το ιώδιο κ.λπ. έχουν οξειδωτικές ιδιότητες.

4. Η φορμαλδεΰδη χρησιμοποιείται σε μορφή διαλύματος 40% (φορμαλίνη) για απολύμανση. Σκοτώνει φυτικές και σποριακές μορφές μικροοργανισμών. Η φορμαλίνη μπλοκάρει τις αμινομάδες των πρωτεϊνών των μικροβιακών κυττάρων και προκαλεί τη μετουσίωση τους.

5. Τα άλατα των βαρέων μετάλλων (υδράργυρος, μόλυβδος, ψευδάργυρος, χρυσός κ.λπ.) πήζουν τις πρωτεΐνες του μικροβιακού κυττάρου, προκαλώντας έτσι τον θάνατό τους. Ένας αριθμός μετάλλων (άργυρος, χρυσός, υδράργυρος κ.λπ.) έχει βακτηριοκτόνο δράση στους μικροοργανισμούς σε αμελητέες συγκεντρώσεις. Αυτή η ιδιότητα ονομάζεται ολιγοδυναμική δράση (από το λατινικό oligos - μικρό, dinamys - δύναμη). Έχει αποδειχτεί ότι το νερό στα ασημένια δοχεία δεν σαπίζει λόγω της βακτηριοκτόνου δράσης των ιόντων αργύρου. Για την πρόληψη της βλενόρροιας * νεογνά για πολύ καιρόχρησιμοποιήθηκε διάλυμα νιτρικού αργύρου 1%. Κολλοειδή διαλύματα ΟΡΓΑΝΙΚΕΣ ΕΝΩΣΕΙΣΤο ασήμι (protargol, collargol) χρησιμοποιείται επίσης με τη μορφή τοπικών αντισηπτικών.

* (Η Blennorea είναι μια φλεγμονή του επιπεφυκότα του ματιού που προκαλείται από γονόκοκκους.)

Τα παρασκευάσματα υδραργύρου έχουν ισχυρή αντιμικροβιακή δράση. Από την αρχαιότητα, ο διχλωριούχος υδράργυρος ή χλωριούχος υδράργυρος (σε αραίωση 1:1000), έχει χρησιμοποιηθεί για απολύμανση. Ωστόσο, έχει τοξική επίδρασηστον ιστό του μακροοργανισμού και η χρήση του είναι περιορισμένη.

6. Οι βαφές (πράσινο διαμάντι, ριβανόλη κ.λπ.) έχουν την ιδιότητα να αναστέλλουν την ανάπτυξη βακτηρίων. Διαλύματα από έναν αριθμό χρωστικών χρησιμοποιούνται ως αντισηπτικά και προστίθενται επίσης σε ορισμένα θρεπτικά μέσα για την αναστολή της ανάπτυξης της μικροχλωρίδας που τη συνοδεύει.

Η καταστροφική επίδραση ορισμένων φυσικών και χημικών παραγόντων στους μικροοργανισμούς αποτελεί τη βάση ασηπτικών και αντισηπτικών μεθόδων, που χρησιμοποιούνται ευρέως στην ιατρική και υγειονομική πρακτική.

Η άσηψη είναι ένα σύστημα προληπτικών μέτρων που αποτρέπουν τη μικροβιακή μόλυνση ενός αντικειμένου (τραύματα, χειρουργικό πεδίο, καλλιέργειες μικροοργανισμών κ.λπ.) με βάση φυσικές μεθόδους.

Τα αντισηπτικά είναι ένα σύνολο μέτρων που στοχεύουν στην καταστροφή μικροοργανισμών σε μια πληγή, σε ολόκληρο το σώμα ή σε αντικείμενα του περιβάλλοντος, χρησιμοποιώντας διάφορα απολυμαντικά χημικά.

Βιολογικοί παράγοντες

Στους φυσικούς οικοτόπους, οι μικροοργανισμοί δεν υπάρχουν μεμονωμένα, αλλά βρίσκονται σε πολύπλοκες σχέσεις, οι οποίες καταλήγουν κυρίως σε συμβίωση, μεταβίωση και ανταγωνισμό.

Η συμβίωση είναι η συμβίωση οργανισμών διαφορετικών ειδών, που τους αποφέρει αμοιβαίο όφελος. Ταυτόχρονα, μαζί αναπτύσσονται καλύτερα από το καθένα ξεχωριστά.

Υπάρχουν συμβιωτικές σχέσεις μεταξύ βακτηρίων όζων και ψυχανθών, μεταξύ νηματοειδών μυκήτων και γαλαζοπράσινων φυκών (λειχήνες): Η συμβίωση βακτηρίων γαλακτικού οξέος και αλκοολικής μαγιάς χρησιμοποιείται για την παρασκευή ορισμένων προϊόντων γαλακτικού οξέος (κεφίρ, κούμισ).

Η μεταβίωση είναι ένας τύπος σχέσης κατά την οποία τα μεταβολικά προϊόντα ενός τύπου μικροοργανισμού δημιουργούν τις απαραίτητες συνθήκες για την ανάπτυξη άλλων. Για παράδειγμα, οι σήπτοντες μικροοργανισμοί που διασπούν πρωτεϊνικές ουσίες συμβάλλουν στη συσσώρευση ενώσεων αμμωνίου στο περιβάλλον και δημιουργούν ευνοϊκές συνθήκες για την ανάπτυξη και την ανάπτυξη νιτροποιητικών βακτηρίων. Και η ανάπτυξη αναερόβιων σε καλά αεριζόμενο έδαφος θα ήταν αδύνατη χωρίς αερόβια που απορροφούν ελεύθερο οξυγόνο.

Οι μεταβιοτικές σχέσεις είναι ευρέως διαδεδομένες μεταξύ των μικροοργανισμών του εδάφους και αποτελούν τη βάση του κύκλου των ουσιών στη φύση.

Ο ανταγωνισμός είναι μια μορφή σχέσης κατά την οποία ένας μικροοργανισμός αναστέλλει την ανάπτυξη ενός άλλου ή μπορεί να προκαλέσει τον πλήρη θάνατό του. Ανταγωνιστικές σχέσεις έχουν αναπτυχθεί μεταξύ των μικροοργανισμών στον αγώνα για ύπαρξη. Παντού όπου ζουν, υπάρχει ένας συνεχής αγώνας μεταξύ τους για πηγές τροφής, οξυγόνο αέρα και βιότοπο. Έτσι, τα περισσότερα παθογόνα βακτήρια, έχοντας εισχωρήσει στο εξωτερικό περιβάλλον (έδαφος, νερό) με τις εκκρίσεις των ασθενών, δεν μπορούν να αντέξουν τον μακροχρόνιο ανταγωνισμό με πολυάριθμα σαπρόφυτα και πεθαίνουν σχετικά γρήγορα.

Ο ανταγωνισμός μπορεί να προκληθεί από την άμεση επίδραση των μικροοργανισμών μεταξύ τους ή από τη δράση των μεταβολικών προϊόντων τους. Για παράδειγμα, τα πρωτόζωα καταβροχθίζουν τα βακτήρια και οι φάγοι τα λύουν. Τα έντερα των νεογνών αποικίζονται από βακτήρια γαλακτικού οξέος Bifidobacterium bifidum. Με την απελευθέρωση γαλακτικού οξέος, καταστέλλουν την ανάπτυξη σήψης βακτηρίων και έτσι προστατεύουν τον ακόμη εύθραυστο οργανισμό των βρεφών από εντερικές διαταραχές. Ορισμένοι μικροοργανισμοί στη διαδικασία της ζωής παράγουν διάφορες ουσίες που έχουν επιζήμια επίδραση στα βακτήρια και άλλα μικρόβια. Αυτές οι ουσίες περιλαμβάνουν αντιβιοτικά (βλ. «Αντιβιοτικά»).

Ερωτήσεις ελέγχου

1. Τι φυσικούς παράγοντεςεπηρεάζουν τη δραστηριότητα της ζωής των μικροοργανισμών;

2. Ποιες ουσίες ταξινομούνται ως απολυμαντικά και σε τι διαφέρουν ως προς τον μηχανισμό δράσης τους στους μικροοργανισμούς;

3. Να αναφέρετε ποιες σχέσεις υπάρχουν μεταξύ των μικροοργανισμών;

Αποστείρωση

Η αποστείρωση είναι η αποστείρωση, δηλαδή η πλήρης απελευθέρωση περιβαλλοντικών αντικειμένων από μικροοργανισμούς και τα σπόρια τους.

Η αποστείρωση πραγματοποιείται με διάφορους τρόπους:

1) φυσική (έκθεση σε υψηλή θερμοκρασία, ακτίνες UV, χρήση βακτηριακών φίλτρων).

2) χημικό (χρήση διαφόρων απολυμαντικών, αντισηπτικών).

3) βιολογική (χρήση αντιβιοτικών).

Στην εργαστηριακή πρακτική, συνήθως χρησιμοποιούνται φυσικές μέθοδοι αποστείρωσης.

Η δυνατότητα και η σκοπιμότητα χρήσης μιας ή άλλης μεθόδου αποστείρωσης καθορίζεται από τα χαρακτηριστικά του υλικού που πρόκειται να αποστειρωθεί, τις φυσικές και χημικές του ιδιότητες.

Φυσικές μέθοδοι

Η φρύξη σε φλόγα καυστήρα ή το flambéing είναι μια μέθοδος αποστείρωσης κατά την οποία το αντικείμενο αποστειρώνεται πλήρως, καθώς τόσο τα φυτικά κύτταρα όσο και τα μικροβιακά σπόρια πεθαίνουν. Τυπικά, οι βακτηριολογικοί βρόχοι, οι σπάτουλες, οι πιπέτες, οι διαφάνειες και τα γυαλιά κάλυψης και τα μικρά όργανα φρύνονται. Τα ψαλίδια και τα νυστέρια δεν πρέπει να αποστειρώνονται με θέρμανση, καθώς υπό την επίδραση της φωτιάς η επιφάνεια κοπής γίνεται θαμπή.

Αποστείρωση με ξηρή θερμότητα

Η αποστείρωση με ξηρή θερμότητα ή ζεστό αέρα πραγματοποιείται σε φούρνους Pasteur (φούρνοι στεγνώματος). Ο φούρνος Pasteur είναι ένα ντουλάπι με διπλά τοιχώματα κατασκευασμένο από ανθεκτικά στη θερμότητα υλικά - μέταλλο και αμίαντο. Θερμάνετε το ντουλάπι χρησιμοποιώντας καυστήρες αερίου ή ηλεκτρικές συσκευές θέρμανσης. Τα ηλεκτρικά θερμαινόμενα ντουλάπια είναι εξοπλισμένα με ρυθμιστές για την εξασφάλιση της απαιτούμενης θερμοκρασίας. Για τον έλεγχο της θερμοκρασίας, υπάρχει ένα θερμόμετρο τοποθετημένο στην οπή στο επάνω τοίχωμα του ντουλαπιού.

Η ξηρή θερμότητα χρησιμοποιείται για την αποστείρωση εργαστηριακών γυαλικών. Τα πιάτα που προετοιμάζονται για αποστείρωση φορτώνονται χαλαρά στο φούρνο για να διασφαλιστεί η ομοιόμορφη και αξιόπιστη θέρμανση του υλικού που αποστειρώνεται. Κλείστε καλά την πόρτα του ντουλαπιού, ενεργοποιήστε τη συσκευή θέρμανσης, φέρτε τη θερμοκρασία στους 160-165 ° C και αποστειρώστε σε αυτή τη θερμοκρασία για 1 ώρα. Στο τέλος της αποστείρωσης, απενεργοποιήστε τη θέρμανση, αλλά μην ανοίξετε την πόρτα του ντουλαπιού μέχρι Ο φούρνος έχει κρυώσει. σε διαφορετική περίπτωση κρύος αέρας, η είσοδος στο ντουλάπι μπορεί να προκαλέσει ρωγμές στα ζεστά μαγειρικά σκεύη.

Η αποστείρωση σε φούρνο Pasteur μπορεί να πραγματοποιηθεί σε διαφορετικά σημεία συνθήκες θερμοκρασίαςκαι έκθεση (χρόνος αποστείρωσης) (Πίνακας 1).

Τα υγρά (θρεπτικά μέσα, ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου κ.λπ.), τα είδη από καουτσούκ και συνθετικά υλικά δεν μπορούν να αποστειρωθούν με ξηρή θερμότητα, καθώς τα υγρά βράζουν και χύνονται και το καουτσούκ και τα συνθετικά υλικά λιώνουν.

Για τον έλεγχο της αποστείρωσης σε φούρνο Pasteur, τα μεταξωτά νήματα υγραίνονται σε καλλιέργεια βακτηρίων που σχηματίζουν σπόρους, ξηραίνονται, τοποθετούνται σε αποστειρωμένο τρυβλίο Petri και τοποθετούνται σε φούρνο Pasteur. Η αποστείρωση πραγματοποιείται σε θερμοκρασία 165° C για 1 ώρα (για έλεγχο, μερικά από τα νήματα αφήνονται σε θερμοκρασία δωματίου). Στη συνέχεια τα αποστειρωμένα νήματα και τα νήματα ελέγχου τοποθετούνται στην επιφάνεια του άγαρ σε τρυβλίο Petri ή τοποθετούνται σε δοκιμαστικούς σωλήνες με ζωμό και επωάζονται σε θερμοστάτη στους 37°C για 2 ημέρες. Με τη σωστή λειτουργία του φούρνου Pasteur, δεν θα αναπτυχθεί σε δοκιμαστικούς σωλήνες ή πιάτα με θρεπτικά μέσα στα οποία τοποθετήθηκαν αποστειρωμένα νήματα, καθώς τα βακτηριακά σπόρια θα πεθάνουν, ενώ τα βακτηριακά σπόρια σε κλωστές που δεν ήταν αποστειρωμένα (έλεγχος) θα φυτρώσουν σε θρεπτικό συστατικό θα σημειωθεί ανάπτυξη των μέσων ενημέρωσης.

Για να προσδιορίσετε τη θερμοκρασία στο εσωτερικό του φούρνου Pasteur, μπορείτε να χρησιμοποιήσετε σακχαρόζη ή κρυσταλλική ζάχαρη, η οποία καραμελώνει σε θερμοκρασία 165-170 ° C.

Προετοιμασία εργαστηριακών υαλικών για αποστείρωση σε φούρνο Pasteur. Πριν από την αποστείρωση, τα εργαστηριακά γυάλινα σκεύη (τρυβλία Petri, διαβαθμισμένες πιπέτες και Παστέρ, φιαλίδια, φιάλες, δοκιμαστικοί σωλήνες) πρέπει να πλυθούν καλά, να στεγνώσουν και να τυλιχτούν σε χαρτί, διαφορετικά μετά την αποστείρωση μπορεί να μολυνθούν ξανά με βακτήρια αέρα.

Τα πιάτα Petri τυλίγονται σε χαρτί ένα ή περισσότερα κομμάτια κάθε φορά ή τοποθετούνται σε ειδικές μεταλλικές θήκες.

Βαμβακερά μάκτρα εισάγονται στα πάνω άκρα των πιπετών για να αποτραπεί η είσοδος του υλικού δοκιμής στο στόμα. Οι βαθμολογημένες πιπέτες τυλίγονται σε μακριές λωρίδες χαρτιού πλάτους 4-5 εκ. Ο όγκος της τυλιγμένης πιπέτας σημειώνεται στο χαρτί. Στις μολυβοθήκες, οι βαθμονομημένες πιπέτες αποστειρώνονται χωρίς επιπλέον τύλιγμα σε χαρτί.

Σημείωση. Εάν η διαβάθμιση στις πιπέτες είναι ελάχιστα ορατή, αποκαθίσταται πριν από την αποστείρωση. Εφαρμόζεται λαδομπογιά στην πιπέτα και, χωρίς να αφήνεται το χρώμα να στεγνώσει, τρίβεται σε αυτό σκόνη θειικού βαρίου χρησιμοποιώντας ένα πανί. Μετά από αυτό, αφαιρέστε την περίσσεια χρώματος με ένα πανί, το οποίο παραμένει μόνο στις εγκοπές βαθμολόγησης. Οι πιπέτες που έχουν υποστεί επεξεργασία με αυτόν τον τρόπο πρέπει να ξεπλένονται.

Οι αιχμηρές άκρες των πιπετών Παστέρ σφραγίζονται σε φλόγα καυστήρα και τυλίγονται σε χαρτί, 3-5 τεμάχια τη φορά. Οι πιπέτες Pasteur πρέπει να τυλίγονται προσεκτικά ώστε να μην σπάσουν τα σφραγισμένα άκρα των τριχοειδών αγγείων.

Φιαλίδια, φιάλες, δοκιμαστικοί σωλήνες κλείνονται με πώματα από βαμβακερή γάζα. Ο φελλός πρέπει να μπαίνει στο λαιμό του σκάφους κατά τα 2/3 του μήκους του, όχι πολύ σφιχτό, αλλά ούτε χαλαρό. Ένα χάρτινο πώμα τοποθετείται πάνω από τα πώματα σε κάθε δοχείο (εκτός από τους δοκιμαστικούς σωλήνες). Οι δοκιμαστικοί σωλήνες δένονται μεταξύ τους σε ομάδες των 5-50 και τυλίγονται με χαρτί.

Σημείωση. Σε υψηλές θερμοκρασίες, το χαρτί στο οποίο είναι τυλιγμένα κύπελλα και πιπέτες και το βαμβάκι κιτρινίζουν και μπορεί ακόμη και να απανθρακωθούν, έτσι κάθε νέα ποικιλίατο χαρτί που παραλαμβάνεται από το εργαστήριο θα πρέπει να ελέγχεται στις αποδεκτές συνθήκες θερμοκρασίας.

Ερωτήσεις ελέγχου

1. Τι σημαίνει ο όρος στείρωση;

2. Πώς γίνεται η αποστείρωση;

3. Τι αποστειρώνεται με φρύξη στη φωτιά;

4. Περιγράψτε τη δομή και τον τρόπο λειτουργίας του φούρνου Pasteur.

5. Τι αποστειρώνεται σε φούρνο Παστέρ;

6. Πώς προετοιμάζονται τα γυάλινα σκεύη για αποστείρωση;

7. Γιατί δεν μπορούν να αποστειρωθούν θρεπτικά υλικά και αντικείμενα από καουτσούκ σε φούρνο Pasteur;

Ασκηση

Προετοιμάστε τρυβλία Petri, βαθμονομημένες πιπέτες, πιπέτες Παστέρ, δοκιμαστικούς σωλήνες, φιάλες και φιαλίδια για αποστείρωση.

Αποστείρωση με βράσιμο

Το βράσιμο είναι μια μέθοδος αποστείρωσης που εγγυάται τη στειρότητα υπό την προϋπόθεση ότι δεν υπάρχουν σπόρια στο αποστειρωμένο υλικό. Χρησιμοποιείται για την επεξεργασία συρίγγων, οργάνων, γυάλινων και μεταλλικών σκευών, σωλήνων από καουτσούκ κ.λπ.

Η αποστείρωση με βρασμό πραγματοποιείται συνήθως σε αποστειρωτή - μεταλλικό κουτί ορθογώνιο σχήμαμε καπάκι που εφαρμόζει σφιχτά. Το υλικό που πρόκειται να αποστειρωθεί τοποθετείται στο πλέγμα που είναι διαθέσιμο στον αποστειρωτή και γεμίζεται με νερό. Για να αυξήσετε το σημείο βρασμού και να εξαλείψετε τη σκληρότητα του νερού, προσθέστε 1-2% διττανθρακικό νάτριο (καλύτερα να χρησιμοποιήσετε απεσταγμένο νερό). Ο αποστειρωτής κλείνεται με καπάκι και θερμαίνεται Αρχή της αποστείρωσης θεωρείται η στιγμή βρασμού του νερού, ο χρόνος βρασμού είναι 15-30 λεπτά. Στο τέλος της αποστείρωσης, το πλέγμα με τα όργανα αφαιρείται από τις πλαϊνές λαβές με ειδικά άγκιστρα και τα εργαλεία σε αυτό λαμβάνονται με αποστειρωμένα τσιμπιδάκια ή λαβίδες, τα οποία βράζονται μαζί με τα υπόλοιπα όργανα.

Η αποστείρωση με ατμό πραγματοποιείται με δύο τρόπους: 1) με ατμό υπό πίεση. 2) ρέοντας ατμός.

Αποστείρωση με ατμό υπό πίεσηπαράγεται σε αυτόκλειστο. Αυτή η μέθοδος αποστείρωσης βασίζεται στην έκθεση των υλικών που αποστειρώνονται σε κορεσμένους υδρατμούς σε πίεση πάνω από την ατμοσφαιρική. Ως αποτέλεσμα μιας τέτοιας αποστείρωσης, τόσο οι βλαστικές όσο και οι σποριακές μορφές μικροοργανισμών πεθαίνουν με μία μόνο επεξεργασία.

Ένα αυτόκλειστο (Εικ. 12) είναι ένας τεράστιος λέβητας, καλυμμένος εξωτερικά με μεταλλικό περίβλημα, ερμητικά σφραγισμένο με ένα καπάκι, το οποίο βιδώνεται σφιχτά στον λέβητα με αρθρωτούς κοχλίες. Μια άλλη, μικρότερης διαμέτρου, που ονομάζεται θάλαμος αποστείρωσης, εισάγεται στον εξωτερικό λέβητα. Τα αντικείμενα που πρόκειται να αποστειρωθούν τοποθετούνται σε αυτόν τον θάλαμο. Ανάμεσα στους δύο λέβητες υπάρχει ελεύθερος χώρος, που ονομάζεται θάλαμος υδρατμών. Το νερό χύνεται σε αυτόν τον θάλαμο μέσω μιας χοάνης στερεωμένης στο εξωτερικό σε ένα ορισμένο επίπεδο που σημειώνεται σε έναν ειδικό σωλήνα μέτρησης νερού. Όταν το νερό βράζεται σε θάλαμο νερού-ατμού, παράγεται ατμός. Ο θάλαμος αποστείρωσης είναι εξοπλισμένος με μια στρόφιγγα εξόδου με μια βαλβίδα ασφαλείας για να επιτρέπει στον ατμό να διαφεύγει όταν η πίεση αυξάνεται πάνω από το απαιτούμενο επίπεδο. Ένα μανόμετρο χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της πίεσης που δημιουργείται στο θάλαμο αποστείρωσης.

Ρύζι. 12. Διάγραμμα αυτόκλειστου. M - μανόμετρο; PC - βαλβίδα ασφαλείας. Β - χοάνη για νερό. K 2 - βρύση για απελευθέρωση νερού. K 3 - βαλβίδα απελευθέρωσης ατμού

Η κανονική ατμοσφαιρική πίεση (760 mm Hg) λαμβάνεται ως μηδέν. Υπάρχει μια ορισμένη σχέση μεταξύ των ενδείξεων του μανόμετρου και της θερμοκρασίας (Πίνακας 2).

Επί του παρόντος, υπάρχουν αυτόκλειστα με αυτόματο έλεγχο του τρόπου λειτουργίας. Εκτός από το συνηθισμένο μανόμετρο, είναι εξοπλισμένα ηλεκτρικό μανόμετρο επαφής, το οποίο εμποδίζει την αύξηση της πίεσης πάνω από μια δεδομένη τιμή και έτσι εξασφαλίζει σταθερή επιθυμητή θερμοκρασίασε αυτόκλειστο.

Ο ατμός υπό πίεση αποστειρώνει διάφορα θρεπτικά μέσα (εκτός από αυτά που περιέχουν φυσικές πρωτεΐνες), υγρά (ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου, νερό κ.λπ.). συσκευές, ειδικά αυτές με ελαστικά μέρη.

Η θερμοκρασία και η διάρκεια του αποστείρωσης σε αυτόκαυστο των θρεπτικών μέσων καθορίζονται από τη σύνθεσή τους που καθορίζεται στη συνταγή για την παρασκευή του θρεπτικού μέσου. Για παράδειγμα, απλά μέσα (άγαρ κρέατος-πεπτόνης, ζωμός κρέατος-πεπτόνης) αποστειρώνονται για 20 λεπτά στους 120 ° C (1 atm). Ωστόσο, σε αυτή τη θερμοκρασία είναι αδύνατο να αποστειρωθούν μέσα που περιέχουν φυσικές πρωτεΐνες, υδατάνθρακες και άλλες ουσίες που αλλάζουν εύκολα με θέρμανση. Τα μέσα με υδατάνθρακες αποστειρώνονται κλασματικά στους 100°C ή σε αυτόκλειστο στους 112°C (0,5 atm) για 10-15 λεπτά. Διάφορα υγρά, συσκευές με ελαστικούς σωλήνες, βύσματα, βακτηριακά κεριά και φίλτρα αποστειρώνονται για 20 λεπτά στους 120 ° C (1 atm).

Προσοχή! Το μολυσμένο υλικό εξουδετερώνεται επίσης σε αυτόκλειστα. Φλιτζάνια και δοκιμαστικοί σωλήνες που περιέχουν καλλιέργειες μικροοργανισμών τοποθετούνται σε ειδικούς μεταλλικούς κάδους ή δεξαμενές με τρύπες στο καπάκι για διείσδυση ατμού και αποστειρώνονται σε αυτόκλειστο στους 126 ° C (1,5 atm) για 1 ώρα. Τα όργανα αποστειρώνονται με τον ίδιο τρόπο μετά την εργασία με βακτήρια, σχηματίζοντας διαφωνίες.

Μόνο ειδικά εκπαιδευμένα άτομα επιτρέπεται να εργάζονται με το αυτόκλειστο, τα οποία πρέπει να ακολουθούν αυστηρά και με ακρίβεια τους κανόνες που καθορίζονται στις οδηγίες που παρέχονται με τη συσκευή.

Τεχνική αυτόκλειστου. 1. Πριν από την εργασία, ελέγξτε τη δυνατότητα συντήρησης όλων των εξαρτημάτων και τη λείανση των κρουνών.

2. Το νερό (απεσταγμένο ή βρασμένο για να αποφευχθεί ο σχηματισμός αλάτων) χύνεται μέσω μιας χοάνης τοποθετημένης έξω από το λέβητα μέχρι το επάνω σημάδι του ποτηριού του μετρητή νερού. Η βρύση κάτω από τη χοάνη είναι κλειστή.

3. Το προς αποστείρωση υλικό τοποθετείται στο θάλαμο αποστείρωσης πάνω σε ειδικό πλέγμα. Τα αντικείμενα δεν πρέπει να φορτώνονται πολύ σφιχτά, καθώς ο ατμός πρέπει να περνά ελεύθερα ανάμεσά τους, διαφορετικά δεν θα ζεσταθούν στην απαιτούμενη θερμοκρασία και μπορεί να παραμείνουν αποστειρωμένα.

4. Η ελαστική φλάντζα στο καπάκι τρίβεται με κιμωλία για καλύτερη στεγανοποίηση.

5. Το καπάκι είναι κλειστό και βιδωμένο στο σώμα του αυτόκλειστου και τα μπουλόνια βιδώνονται σε ζευγάρια σταυρωτά.

6. Ανοίξτε τη βαλβίδα εξόδου που συνδέει το θάλαμο αποστείρωσης με τον εξωτερικό αέρα μέχρι τέρμα και αρχίστε να θερμαίνετε το αυτόκλειστο. Το αυτόκλειστο συνήθως θερμαίνεται με αέριο ή ηλεκτρική ενέργεια.

Όταν το αυτόκλειστο θερμαίνεται, το νερό βράζει, ο ατμός που προκύπτει ανεβαίνει ανάμεσα στα τοιχώματα των λεβήτων και μέσω ειδικών οπών στο τοίχωμα του εσωτερικού λέβητα (βλ. Εικ. 12), εισέρχεται στον θάλαμο αποστείρωσης και εξέρχεται από την ανοιχτή βαλβίδα εξόδου. Πρώτον, ο ατμός διαφεύγει μαζί με τον αέρα στο αυτόκλειστο. Είναι απαραίτητο όλος ο αέρας να βγαίνει έξω από το αυτόκλειστο, διαφορετικά η ένδειξη του μανόμετρου δεν θα αντιστοιχεί στη θερμοκρασία στο αυτόκλειστο.

Η εμφάνιση ενός συνεχούς ισχυρού ρεύματος ατμού υποδηλώνει πλήρη απομάκρυνση του αέρα από το αυτόκλειστο. Μετά από αυτό, η βαλβίδα εξόδου κλείνει και η πίεση μέσα στο αυτόκλειστο αρχίζει σταδιακά να αυξάνεται.

7. Ως έναρξη της αποστείρωσης θεωρείται η στιγμή που οι ενδείξεις του μανόμετρου φτάνουν την καθορισμένη τιμή. Η θέρμανση ρυθμίζεται έτσι ώστε η πίεση στο αυτόκλειστο να μην αλλάζει σε μια συγκεκριμένη χρονική περίοδο.

8. Μετά τη λήξη του χρόνου αποστείρωσης, η θέρμανση του αυτόκλειστου διακόπτεται και ο ατμός απελευθερώνεται μέσω της βαλβίδας εξόδου. Όταν η βελόνα του μανόμετρου πέσει στο μηδέν, ανοίξτε το καπάκι. Για να αποφύγετε εγκαύματα από τον ατμό που παραμένει στο αυτόκλειστο, το καπάκι θα πρέπει να ανοίξει προς το μέρος σας.

Το επίπεδο θερμοκρασίας στο αυτόκλειστο, δηλαδή η ορθότητα των ενδείξεων του μανόμετρου, μπορεί να ελεγχθεί. Για να το κάνετε αυτό, χρησιμοποιήστε διάφορες ουσίες που έχουν ορισμένο σημείο τήξης: αντιπυρίνη (113 ° C), ρεσορκινόλη και θείο (119 ° C), βενζοϊκό οξύ (120 ° C). Μία από αυτές τις ουσίες αναμειγνύεται με αμελητέα ποσότητα χρωστικής ουσίας (muchsin ή μπλε του μεθυλενίου) και χύνεται σε ένα γυάλινο σωλήνα, ο οποίος σφραγίζεται και τοποθετείται σε κάθετη θέση μεταξύ του υλικού που πρόκειται να αποστειρωθεί. Εάν η θερμοκρασία είναι επαρκής, η ουσία θα λιώσει και θα πάρει το χρώμα της αντίστοιχης βαφής.

Για να ελεγχθεί η αποτελεσματικότητα της αποστείρωσης, ένας δοκιμαστικός σωλήνας με γνωστή καλλιέργεια σπορίων τοποθετείται στο αυτόκλειστο. Μετά την αποστείρωση σε αυτόκλειστο, ο σωλήνας μεταφέρεται σε θερμοστάτη για 24-48 ώρες, σημειώνεται η απουσία ή η παρουσία ανάπτυξης. Η έλλειψη ανάπτυξης υποδηλώνει σωστή λειτουργία της συσκευής.

Αποστείρωση με ρέοντα ατμόπου παράγεται στη συσκευή Koch. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται σε περιπτώσεις όπου το αντικείμενο που αποστειρώνεται αλλάζει σε θερμοκρασία πάνω από 100° C. Τα θρεπτικά υλικά που περιέχουν ουρία, υδατάνθρακες, γάλα, πατάτες, ζελατίνη κ.λπ. αποστειρώνονται με ρέον ατμό.

Η συσκευή Koch (λέβητας) είναι ένας μεταλλικός κύλινδρος επενδυμένος εξωτερικά (για μείωση της μεταφοράς θερμότητας) με τσόχα ή αμίαντο. Ο κύλινδρος είναι κλειστός με κωνικό καπάκι με οπή για τη διαφυγή του ατμού. Μέσα στον κύλινδρο υπάρχει μια βάση, στο επίπεδο της οποίας χύνεται νερό. Ένας κουβάς με τρύπα τοποθετείται στη βάση στην οποία τοποθετείται το υλικό που πρόκειται να αποστειρωθεί. Η συσκευή Koch θερμαίνεται με φυσικό αέριο ή ηλεκτρική ενέργεια. Ο χρόνος αποστείρωσης υπολογίζεται από τη στιγμή της έντονης απελευθέρωσης ατμού στα άκρα του καπακιού και από την έξοδο ατμού. Αποστειρώστε για 30-60 λεπτά. Στο τέλος της αποστείρωσης, η θέρμανση διακόπτεται. Αφαιρέστε τον κάδο με το υλικό από τη συσκευή και αφήστε το σε θερμοκρασία δωματίου μέχρι την επόμενη μέρα. Η θέρμανση πραγματοποιείται για 3 συνεχόμενες ημέρες σε θερμοκρασία 100°C για 30-60 λεπτά. Αυτή η μέθοδος ονομάζεται κλασματική αποστείρωση. Κατά την πρώτη θέρμανση πεθαίνουν οι φυτικές μορφές μικροβίων, ενώ οι μορφές των σπορίων διατηρούνται. Μέσα σε μια μέρα, τα σπόρια καταφέρνουν να βλαστήσουν και να μετατραπούν σε φυτικές μορφές, οι οποίες πεθαίνουν τη δεύτερη μέρα της στείρωσης. Δεδομένου ότι είναι πιθανό ορισμένα από τα σπόρια να μην είχαν χρόνο να βλαστήσουν, το υλικό διατηρείται για άλλες 24 ώρες και στη συνέχεια πραγματοποιείται μια τρίτη αποστείρωση. Η αποστείρωση με ρέοντα ατμό σε μια συσκευή Koch δεν απαιτεί ειδικό έλεγχο, καθώς η στειρότητα των παρασκευασμένων μέσων καλλιέργειας αποτελεί ένδειξη της σωστής λειτουργίας της συσκευής. Μπορείτε επίσης να αποστειρώσετε με ρέοντα ατμό σε αυτόκλειστο με το καπάκι ξεβιδωμένο και τη βαλβίδα εξόδου ανοιχτή.

Ερωτήσεις ελέγχου

1. Ποια θρεπτικά μέσα αποστειρώνονται με ατμό;

2. Τι είναι ο αποστειρωτής και πώς λειτουργεί;

3. Γιατί πρέπει να χρησιμοποιείται απεσταγμένο νερό κατά την αποστείρωση με βρασμό;

4. Περιγράψτε τη δομή και τον τρόπο λειτουργίας του αυτόκλειστου.

5. Τι αποστειρώνεται σε αυτόκλειστο;

6. Τι χρησιμεύει ως έλεγχος για τη σωστή αποστείρωση κατά το αυτόκαυστο;

7. Τι είναι η αποστείρωση με ρέοντα ατμό;

8. Περιγράψτε τη δομή της συσκευής Koch.

9. Ποιος είναι ο σκοπός της κλασματικής αποστείρωσης;

Ασκηση

Συμπληρώστε τη φόρμα.

Η κλασματική αποστείρωση μπορεί επίσης να πραγματοποιηθεί σε πηκτικό Koch.

Το πηκτικό του Koch χρησιμοποιείται για την πήξη του ορού γάλακτος και των μέσων καλλιέργειας αυγών και ταυτόχρονα με τη συμπίεση του μέσου, αποστειρώνεται.

Το πηκτικό του Κοχείναι ένα επίπεδο μεταλλικό κουτί με διπλά τοιχώματα, επικαλυμμένο εξωτερικά με θερμομονωτικό υλικό. Το νερό χύνεται στο χώρο μεταξύ των τοίχων μέσω μιας ειδικής οπής που βρίσκεται στο πάνω μέρος του εξωτερικού τοίχου. Η τρύπα κλείνει με ένα πώμα στο οποίο εισάγεται ένα θερμόμετρο. Η συσκευή κλείνει με δύο καπάκια: γυαλί και μέταλλο. Μέσα από το γυάλινο καπάκι μπορείτε να παρατηρήσετε τη διαδικασία πήξης. Οι δοκιμαστικοί σωλήνες με μέσα τοποθετούνται στο κάτω μέρος του πηκτικού σε κεκλιμένη θέση.

Ο θρομβωτής θερμαίνεται με αέριο ή ηλεκτρική ενέργεια. Τα μέσα αποστειρώνονται μία φορά σε θερμοκρασία 90°C για 1 ώρα ή κλασματικά - 3 ημέρες στη σειρά στους 80°C για 1 ώρα.

Τυνδαλοποίηση* - κλασματική αποστείρωση σε χαμηλές θερμοκρασίες - χρησιμοποιείται για ουσίες που καταστρέφονται και μετουσιώνονται εύκολα σε θερμοκρασία 60 ° C (για παράδειγμα, πρωτεϊνικά υγρά). Το προς αποστείρωση υλικό θερμαίνεται σε υδατόλουτρο ή μέσα ειδικές συσκευέςμε θερμοστάτες σε θερμοκρασία 56-58° C για μια ώρα για 5 συνεχόμενες ημέρες.

* (Η μέθοδος αποστείρωσης πήρε το όνομά της από τον Tyndall, ο οποίος την πρότεινε.)

Παστερίωση- αποστείρωση στους 65-70 ° C για 1 ώρα, που προτείνεται από τον Παστέρ για την καταστροφή μη σποριακών μορφών μικροβίων. Το γάλα, το κρασί, η μπύρα, οι χυμοί φρούτων και άλλα προϊόντα παστεριώνονται. Το γάλα παστεριώνεται για την απομάκρυνση του γαλακτικού οξέος και των παθογόνων βακτηρίων (βρουκέλλα, μυκοβακτηρίδιο της φυματίωσης, σιγκέλα, σαλμονέλα, σταφυλόκοκκος κ.λπ.). Κατά την παστερίωση της μπύρας, των χυμών φρούτων και του κρασιού, μικροοργανισμοί που προκαλούν διαφορετικά είδηζύμωση. Τα παστεριωμένα τρόφιμα διατηρούνται καλύτερα στο ψυγείο.

Ερωτήσεις ελέγχου

1. Ποιος είναι ο σκοπός και η δομή του πηκτικού Koch;

2. Ποιες είναι οι μέθοδοι αποστείρωσης σε μηχανή πήξης;

3. Τι είναι η τυνδαλοποίηση;

4. Τι είναι η παστερίωση;

Αποστείρωση με υπεριώδη ακτινοβολία

Η αποστείρωση με ακτίνες UV πραγματοποιείται με τη χρήση ειδικών εγκαταστάσεων - βακτηριοκτόνων λαμπτήρων. Οι ακτίνες UV έχουν υψηλή αντιμικροβιακή δράση και μπορούν να προκαλέσουν θάνατο όχι μόνο βλαστικών κυττάρων, αλλά και σπορίων. Η ακτινοβολία UV χρησιμοποιείται για την αποστείρωση του αέρα σε νοσοκομεία, χειρουργεία, παιδικά ιδρύματα κ.λπ. Σε ένα μικροβιολογικό εργαστήριο, ένα κουτί υποβάλλεται σε επεξεργασία με ακτίνες UV πριν από την εργασία.

Ερωτήσεις ελέγχου

1. Τι ιδιότητες έχουν οι υπεριώδεις ακτίνες;

2. Σε ποιες περιπτώσεις χρησιμοποιείται αποστείρωση με υπεριώδη ακτινοβολία;

Μηχανική αποστείρωση με χρήση βακτηριακών φίλτρων

Η αποστείρωση με διήθηση χρησιμοποιείται σε περιπτώσεις όπου τα αντικείμενα που αποστειρώνονται αλλάζουν όταν θερμαίνονται. Η διήθηση πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας βακτηριακά φίλτρα κατασκευασμένα από διάφορα λεπτά πορώδη υλικά. Οι πόροι των φίλτρων πρέπει να είναι αρκετά μικροί (μέχρι 1 micron) ώστε να διασφαλίζεται η μηχανική κατακράτηση βακτηρίων, επομένως ορισμένοι συγγραφείς αναφέρονται στη διήθηση ως μηχανικές μεθόδουςαποστείρωση.

Η μέθοδος διήθησης χρησιμοποιείται για την αποστείρωση θρεπτικών μέσων που περιέχουν πρωτεΐνη, ορό και ορισμένα αντιβιοτικά, καθώς και για τον διαχωρισμό των βακτηρίων από τους ιούς, τους φάγους και τις εξωτοξίνες.

Στη μικροβιολογική πρακτική χρησιμοποιούνται φίλτρα αμιάντου Seitz, φίλτρα μεμβράνης και φίλτρα Chamberlant και Berkefeld (κεριά).

Τα φίλτρα Seitz είναι δίσκοι κατασκευασμένοι από μείγμα αμιάντου και κυτταρίνης. Το πάχος τους είναι 3-5 mm, διάμετρος 35-140 mm. Η εγχώρια βιομηχανία παράγει φίλτρα δύο εμπορικών σημάτων: "F" (φιλτράρισμα) - συγκρατούν αιωρούμενα σωματίδια αλλά επιτρέπουν στα βακτήρια να περάσουν. "SF" (αποστείρωση) - με μικρότερους πόρους, που συγκρατούν τα βακτήρια, αλλά επιτρέπουν στους ιούς να περάσουν. Οι τσαλακωμένες πλάκες αμιάντου, καθώς και οι πλάκες με σπασίματα και ρωγμές, είναι ακατάλληλες για εργασία.

Τα φίλτρα μεμβράνης κατασκευάζονται από νιτροκυτταρίνη. Είναι δίσκοι άσπροΠάχος 0,1 mm και διάμετρος 35 mm. Ανάλογα με το μέγεθος των πόρων, χαρακτηρίζονται Νο. 1, 2, 3, 4 και 5 (Πίνακας 3).

Το φίλτρο Νο. 1 είναι το πλέον κατάλληλο για αποστείρωση. Εκτός από αυτά που αναφέρονται, παράγουν επίσης ένα λεγόμενο προ-φίλτρο, σχεδιασμένο να απελευθερώνει το φιλτραρισμένο υγρό από μεγάλα σωματίδια που περιέχονται σε αυτό.

Τα φίλτρα Chamberlant και Berkefeld (κεριά) είναι κοίλοι κύλινδροι, κλειστοί στο ένα άκρο. Τα κεριά Chamberlant κατασκευάζονται από καολίνη αναμεμειγμένο με άμμο και χαλαζία. Είναι τυποποιημένα με βάση το μέγεθος των πόρων και ονομάζονται L 1, L 2, L 3 ... L 13. Τα φίλτρα Berkefeld (κεριά) παρασκευάζονται από χώμα έγχυσης· ανάλογα με το μέγεθος των πόρων τους χαρακτηρίζονται V, N, W, που αντιστοιχεί σε διάμετρο πόρων 3-4, 4-7, 8-12 microns.

Η εργασία με βακτηριακά φίλτρα πραγματοποιείται ως εξής. Το φίλτρο πρέπει να στερεωθεί σε ειδική θήκη, η οποία εισάγεται στον δέκτη φίλτρου. Ο δέκτης είναι συνήθως μια φιάλη Bunsen. Οι βάσεις, στις περισσότερες περιπτώσεις από ανοξείδωτο χάλυβα, αποτελούνται από δύο μέρη: το επάνω, σε σχήμα κυλίνδρου χωρίς πάτο, και το κάτω, ένα τμήμα στήριξης που καταλήγει σε σωλήνα. Τοποθετούνται φίλτρα Seitz με την τραχιά επιφάνεια στραμμένη προς τα επάνω μεταλλικό πλέγμακαι σφίγγεται καλά με βίδες μεταξύ του πάνω και του κάτω μέρους της θήκης. Το τοποθετημένο φίλτρο στερεώνεται σε ένα ελαστικό πώμα που εισάγεται στο λαιμό μιας φιάλης Bunsen. Μια μπατονέτα εισάγεται στον σωλήνα εξόδου της φιάλης, η οποία συνδέεται με την αντλία κενού. Η προετοιμασμένη εγκατάσταση τυλίγεται σε χαρτί και αποστειρώνεται σε αυτόκλειστο υπό πίεση 1 atm για 20-30 λεπτά. Ολόκληρη η συναρμολογημένη συσκευή ονομάζεται επίσης φίλτρο Seitz (Εικ. 13).

Αμέσως πριν από τη διήθηση, το άκρο εξόδου της φιάλης Bunsen συνδέεται με έναν ελαστικό σωλήνα σε μια αντλία λαδιού ή εκτόξευσης νερού. Οι ενώσεις των διαφόρων τμημάτων γεμίζονται με παραφίνη για να δημιουργηθεί μια σφιχτή σφράγιση. Το φιλτραρισμένο υγρό χύνεται στον κύλινδρο της συσκευής και η αντλία ενεργοποιείται, δημιουργώντας ένα κενό στον δέκτη. Ως αποτέλεσμα της διαφοράς πίεσης που προκύπτει, το φιλτραρισμένο υγρό περνά μέσα από τους πόρους του φίλτρου στον δέκτη και τα μικρόβια παραμένουν στην επιφάνεια του φίλτρου.

Πριν από τη χρήση, τα φίλτρα μεμβράνης αποστειρώνονται με βρασμό σε απεσταγμένο νερό. Για να αποφευχθεί η κατσαροποίηση των φίλτρων, τοποθετούνται πρώτα σε απεσταγμένο νερό, θερμαίνονται σε θερμοκρασία 50-60 ° C και βράζονται σε χαμηλή φωτιά για 30 λεπτά, αλλάζοντας το νερό 2-3 φορές. Η βάση και ο δέκτης του φίλτρου αποστειρώνονται εκ των προτέρων και η συσκευή τοποθετείται υπό άσηπτες συνθήκες. Για να αποφύγετε το σκίσιμο του φίλτρου μεμβράνης στο μεταλλικό πλέγμα, τοποθετήστε κούπες με αποστειρωμένο διηθητικό χαρτί κάτω από αυτό. Στη συνέχεια, χρησιμοποιώντας αποστειρωμένα τσιμπιδάκια με λείες άκρες, αφαιρέστε το φίλτρο μεμβράνης από τον αποστειρωτή και τοποθετήστε το στο πλέγμα στήριξης με τη γυαλιστερή επιφάνεια προς τα κάτω.

Κεριά (Chamberlant) που αποστειρώνονται σε αυτόκλειστο συνδέονται μέσω ενός ελαστικού σωλήνα σε έναν δέκτη και κατεβαίνουν σε ένα δοχείο (συνήθως κύλινδρο) με ένα φιλτραρισμένο υγρό. Το φιλτράρισμα πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας αντλία κενού. Ένα αποστειρωμένο διήθημα εισέρχεται στον δέκτη και τα βακτήρια συγκρατούνται από τους πόρους του κεριού.

Τα φίλτρα μεμβράνης και αμιάντου είναι σχεδιασμένα για μία χρήση. Μετά τη χρήση, τα κεριά βράζονται νερό βρύσης, στη συνέχεια φρύχθηκε σε φούρνο σιγαστήρα.

Πριν από την επόμενη χρήση, τα κεριά ελέγχονται για ακεραιότητα. Το κερί κατεβαίνει σε ένα δοχείο με νερό και περνάει αέρας. Εάν εμφανιστούν φυσαλίδες αέρα στην επιφάνεια του κεριού, σημαίνει ότι έχουν δημιουργηθεί ρωγμές στο κερί και δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί.

Ερωτήσεις ελέγχου

1. Ποια είναι η μέθοδος αποστείρωσης φίλτρου; Τι αποστειρώνεται με αυτή τη μέθοδο;

2. Ποια βακτηριακά φίλτρα γνωρίζετε; Πώς τοποθετείται η συσκευή φιλτραρίσματος, ποιες προϋποθέσεις πρέπει να τηρούνται;

Χημικές μέθοδοι

Αυτός ο τύπος αποστείρωσης χρησιμοποιείται σε περιορισμένο βαθμό και χρησιμεύει κυρίως για την πρόληψη της βακτηριακής μόλυνσης των μέσων καλλιέργειας και των ανοσοβιολογικών παρασκευασμάτων (εμβόλια και οροί).

Ουσίες όπως το χλωροφόρμιο, το τολουόλιο και ο αιθέρας προστίθενται συχνότερα στα θρεπτικά μέσα. Εάν είναι απαραίτητο να ελευθερωθεί το μέσο από αυτά τα συντηρητικά, θερμαίνεται σε λουτρό νερού στους 56 ° C (τα συντηρητικά εξατμίζονται).

Για τη διατήρηση των εμβολίων και των ορών χρησιμοποιούνται μερθειολικό οξύ, βορικό οξύ, φορμαλδεΰδη κ.λπ.

Βιολογική αποστείρωση

Η βιολογική στείρωση βασίζεται στη χρήση αντιβιοτικών. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια ιών.

Ερωτήσεις ελέγχου

1. Τι είναι χημική αποστείρωσηκαι πότε χρησιμοποιείται;

2. Τι είναι η βιολογική στείρωση;

Οι κύριες μέθοδοι αποστείρωσης παρουσιάζονται στον πίνακα. 4.

1 (Η αποστείρωση είναι ατελής: τα σπόρια παραμένουν στο αποστειρωμένο υλικό.)

2 (Η αποστείρωση είναι ατελής: οι ιοί παραμένουν στο αποστειρωμένο υλικό.)

Απολύμανση

Στη μικροβιολογική πρακτική χρησιμοποιούνται διάφορα απολυμαντικά: διαλύματα φαινόλης 3-5%, διαλύματα Lysol 5-10%, διαλύματα χλωραμίνης 1-5%, διαλύματα υπεροξειδίου του υδρογόνου 3-6%, διαλύματα φορμαλδεΰδης 1-5%, διαλύματα χλωριούχου υδραργύρου σε αραίωση 1: 1000 (0,1%), 70° αλκοόλ κ.λπ.

Το χρησιμοποιημένο παθολογικό υλικό (πύον, κόπρανα, ούρα, πτύελα, αίμα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό) απολυμαίνεται πριν αποστραγγιστεί στην αποχέτευση. Η απολύμανση πραγματοποιείται με ξηρή χλωρίνη ή διάλυμα χλωραμίνης 3-5%.

Πιπέτες (βαθμονομημένη και Παστέρ), γυάλινες σπάτουλες, διαφάνειες και καλυπτρίδες μολυσμένες με παθολογικό υλικό ή καλλιέργειες μικροοργανισμών βυθίζονται σε γυάλινα βάζα με διάλυμα φαινόλης ή υπεροξειδίου του υδρογόνου 3% για μια ημέρα.

Αφού τελειώσει η εργασία με μολυσματικό υλικό, ο τεχνικός εργαστηρίου πρέπει να το επεξεργαστεί με απολυμαντικό διάλυμα. ΧΩΡΟΣ ΕΡΓΑΣΙΑΣκαι τα χέρια. Η επιφάνεια του τραπεζιού εργασίας σκουπίζεται με ένα κομμάτι βαμβάκι βρεγμένο με διάλυμα φαινόλης 3%. Τα χέρια απολυμαίνονται με διάλυμα χλωραμίνης 1%. Για να το κάνετε αυτό, βρέξτε ένα βαμβάκι ή μια γάζα με απολυμαντικό διάλυμα και σκουπίστε το αριστερό χέρι, μετά το δεξί και μετά πλύνετε τα χέρια σας με ζεστό νερό και σαπούνι.

Η επιλογή ενός απολυμαντικού, η συγκέντρωσή του και η διάρκεια της έκθεσης (έκθεση) εξαρτώνται από τις βιολογικές ιδιότητες του μικροβίου και από το περιβάλλον στο οποίο το απολυμαντικό θα έρθει σε επαφή με παθογόνους μικροοργανισμούς. Για παράδειγμα, το χλωριούχο υδράργυρο, η φαινόλη και οι αλκοόλες είναι ακατάλληλα για την απολύμανση πρωτεϊνικών υποστρωμάτων (πύον, αίμα, πτύελα), καθώς υπό την επήρεια τους λαμβάνει χώρα πήξη πρωτεϊνών και η πηγμένη πρωτεΐνη προστατεύει τους μικροοργανισμούς από τις επιδράσεις των απολυμαντικών.

Κατά την απολύμανση υλικού μολυσμένου με μορφές σπορίων μικροοργανισμών, χρησιμοποιείται διάλυμα χλωραμίνης 5%, διαλύματα ενεργοποιημένης χλωραμίνης 1-2,5%, διαλύματα φορμαλίνης 5-10% και άλλες ουσίες.

Η απολύμανση, η οποία πραγματοποιείται όλη την ημέρα κατά τη διάρκεια της εργασίας, ονομάζεται τρέχουσα και στο τέλος της εργασίας - τελική.

Απολυμαντικά και οδηγίες για την παρασκευή διαλυμάτων εργασίας από αυτά. Το χλωρίδιο του ασβέστη είναι μια λευκή, σβώλους σκόνη με μια έντονη οσμή χλωρίου, δεν διαλύεται πλήρως στο νερό. Η βακτηριοκτόνος δράση εξαρτάται από την περιεκτικότητα σε ενεργό χλώριο, η ποσότητα του οποίου κυμαίνεται από 28 έως 36%. Χλώριο που περιέχει λιγότερο από 25% ενεργό χλώριο είναι ακατάλληλο για απολύμανση.

Εάν αποθηκευτεί ακατάλληλα, η χλωρίνη αποσυντίθεται και χάνει μέρος του ενεργού χλωρίου της. Η αποσύνθεση ευνοείται από τη θερμότητα, την υγρασία, το ηλιακό φως, γι' αυτό αποθηκεύστε λευκαντικόπρέπει να φυλάσσεται σε ξηρό, σκοτεινό μέρος, σε καλά κλεισμένο δοχείο.

Η ξηρή χλωρίνη χρησιμοποιείται για την απολύμανση των εκκρίσεων ανθρώπων και ζώων (με αναλογία 200 g ανά 1 λίτρο περιττωμάτων και 10 g ανά 1 λίτρο ούρων).

Παρασκευή του αρχικού 10% διαυγασμένου διαλύματος λευκαντικού. Πάρτε 1 κιλό ξηρή χλωρίνη, τοποθετήστε το σε έναν εμαγιέ κουβά και τρίψτε το. Στη συνέχεια, ρίξτε κρύο νερό σε όγκο 10 λίτρων, ανακατέψτε καλά, καλύψτε με ένα καπάκι και αφήστε για μια μέρα σε δροσερό μέρος. Μετά από αυτό, το προκύπτον διαυγές διάλυμα 10% στραγγίζεται προσεκτικά και φιλτράρεται μέσω πολλών στρωμάτων γάζας ή φιλτράρεται μέσω ενός χοντρού υφάσματος. Φυλάσσετε σε σκούρα γυάλινα μπουκάλια, κλεισμένα με ξύλινο πώμα, σε δροσερό μέρος για όχι περισσότερο από 10 ημέρες. Τα διαλύματα εργασίας της απαιτούμενης συγκέντρωσης παρασκευάζονται από το αρχικό διάλυμα αμέσως πριν από τη χρήση. Η ποσότητα του βασικού διαλύματος που απαιτείται για την παρασκευή 0,2-10% διαυγασμένων διαλυμάτων λευκαντικού δίνεται στον πίνακα. 5.

Η συγκέντρωση των διαυγασμένων διαλυμάτων λευκαντικού από 0,2 έως 10% επιλέγεται ανάλογα με τη φύση του αντικειμένου που απολυμαίνεται και την αντίσταση του παθογόνου.

Η χλωραμίνη είναι μια κρυσταλλική ουσία λευκού ή κιτρινωπού χρώματος, που περιέχει 24-28% ενεργό χλώριο. Διαλύεται καλά σε νερό σε θερμοκρασία δωματίου, επομένως τα διαλύματα παρασκευάζονται αμέσως πριν την απολύμανση. Χρησιμοποιήστε διαλύματα χλωραμίνης 0,2-10%. Η σχέση μεταξύ της εκατοστιαίας συγκέντρωσης του διαλύματος και της ποσότητας χλωραμίνης σε γραμμάρια ανά 1 και 10 λίτρα δίνεται στον πίνακα. 6.

Διαλύστε τη χλωραμίνη σε γυαλί ή εμαγιέ πιάτα. Κατά την αποθήκευση διαλυμάτων χλωραμίνης σε σκούρα γυάλινα δοχεία με αλεσμένο πώμα, η δράση τους παραμένει έως και 15 ημέρες.

Ενεργοποιημένη χλωραμίνη. Οι απολυμαντικές ιδιότητες της χλωραμίνης ενισχύονται με την προσθήκη ενός ενεργοποιητή σε αυτήν σε αναλογία 1:1 ή 1:2. Οι ενώσεις αμμωνίου χρησιμοποιούνται ως ενεργοποιητής - χλωριούχο αμμώνιο, θειικό, νιτρικό αμμώνιο. Η ενεργοποιημένη χλωραμίνη χρησιμοποιείται σε συγκεντρώσεις 0,5, 1 και 2,5%. Παρασκευάζονται αμέσως πριν τη χρήση. Η χλωραμίνη και το άλας αμμωνίου ζυγίζονται χωριστά. Αρχικά, η χλωραμίνη διαλύεται σε νερό και στη συνέχεια προστίθεται ένας ενεργοποιητής.

Το πλεονέκτημα των διαλυμάτων ενεργοποιημένης χλωραμίνης έναντι των συμβατικών είναι ότι η προσθήκη ενός ενεργοποιητή επιταχύνει την απελευθέρωση ενεργού χλωρίου. Ως εκ τούτου, το φάρμακο έχει επιζήμια επίδραση όχι μόνο στις φυτικές μορφές μικροοργανισμών, αλλά και στα σπόρια τους. Η ενεργοποιημένη χλωραμίνη χρησιμοποιείται σε χαμηλότερες συγκεντρώσεις και με λιγότερη έκθεση.

Η φαινόλη (καρβολικό οξύ) είναι ένας άχρωμος κρύσταλλος σε σχήμα βελόνας με έντονη, χαρακτηριστική οσμή. Όταν εκτίθενται στο φως, τον αέρα και την υγρασία, οι κρύσταλλοι αποκτούν ένα κατακόκκινο χρώμα. Αποθηκεύω στο κλειστές τράπεζεςκατασκευασμένο από σκούρο γυαλί και σε μέρος προστατευμένο από το φως.

Η φαινόλη είναι διαλυτή στο νερό, την αλκοόλη, τον αιθέρα και τα λιπαρά έλαια. Διαθέτοντας μεγάλη υγροσκοπικότητα, απορροφά την υγρασία από το περιβάλλον και γίνεται υγρό. Το υγρό καρβολικό οξύ περιέχει 90% κρυσταλλική φαινόλη και 10% νερό.

Χρησιμοποιήστε 3-5% υδατικά διαλύματα καρβολικού οξέος που παρασκευάζονται από κρυσταλλική φαινόλη και υγρό καρβολικό οξύ σύμφωνα με το σχήμα που δίνεται στον πίνακα. 7. Η δράση της φαινόλης αυξάνεται όταν διαλυθεί σε ζεστό νερό (40-50° C).

Προσοχή! Η κρυσταλλική φαινόλη ή το υγρό καρβολικό οξύ, εάν εισέλθει στο δέρμα, μπορεί να προκαλέσει ερεθισμό και σε υψηλές συγκεντρώσεις - σοβαρά εγκαύματα. Επομένως, ο χειρισμός του καρβολικού οξέος πρέπει να γίνεται με μεγάλη προσοχή. Κατά την προετοιμασία των διαλυμάτων, θα πρέπει να φοράτε λαστιχένια γάντια ή ως έσχατη λύσηΛιπάνετε τα χέρια σας με βαζελίνη.

Εάν το καρβολικό οξύ πέσει στο δέρμα σας, ξεπλύνετε το αμέσως με ζεστό νερό και σαπούνι ή αιθυλική αλκοόλη 40°.

Σημείωση. Για την παρασκευή απολυμαντικών διαλυμάτων φαινόλης, είναι πιο βολικό και ασφαλέστερο να χρησιμοποιείτε υγρό καρβολικό οξύ.

Ερωτήσεις ελέγχου

1. Ποια απολυμαντικά χρησιμοποιούνται στη μικροβιολογική πρακτική;

2. Περιγράψτε εμφάνισηκαι τις βασικές ιδιότητες της χλωρίνης, της χλωραμίνης, της φαινόλης.

3. Ποια διαλύματα απολυμαντικών χρησιμοποιούνται για την απολύμανση υλικού μολυσμένου με μορφές σπορίων μικροοργανισμών;

Ασκηση

Προετοιμάστε 2 λίτρα διαλύματος εργασίας 5% διαυγασμένης χλωρίνης. 500 ml διαλύματος χλωραμίνης 3%, 300 ml διαλύματος ενεργοποιημένης χλωραμίνης 1%.

Προσοχή! Πριν ξεκινήσετε την προετοιμασία λύσεων, κάντε υπολογισμούς.

Αποστείρωση- στειρότητα καταστροφή παθογόνων και μη παθογόνων μικροοργανισμών σε φυτικές και σποριακές μορφές σε οποιοδήποτε υλικό.

Προετοιμασία πιάτων για αποστείρωση. Τα εργαστηριακά γυάλινα σκεύη πρέπει να πλένονται καθαρά και να αποστειρώνονται. Για πλύσιμο, χρησιμοποιήστε σαπούνι ή χημικά διαλύματα απορρυπαντικά. Τα νέα πιάτα προβράζονται σε διάλυμα υδροχλωρικού οξέος 1-2% για να αποφευχθεί η επακόλουθη έκπλυση του ποτηριού. Τα πιάτα που πλένονται σε τρεχούμενο νερό ξεπλένονται με απεσταγμένο νερό και στεγνώνουν.

Βακτηριολογικοί σωλήνες. Οι κωνικές, ματ φιάλες κλείνονται με πώματα από βαμβακερή γάζα, που αποτελούνται από σφιχτά στριμμένα ρολά από βαμβάκι, καλυμμένα με ένα στρώμα γάζας. Μεταλλικά πώματα με τη μορφή εξωτερικών πωμάτων έχουν επίσης αναπτυχθεί για βακτηριολογικούς δοκιμαστικούς σωλήνες. Θα πρέπει να ληφθεί υπόψη ότι η αποστείρωση βαμβακερών βυσμάτων σε υψηλές θερμοκρασίες οδηγεί στην απελευθέρωση ουσιών από το βαμβάκι που αναστέλλουν την ανάπτυξη ορισμένων ευαίσθητων βακτηρίων, όπως η βρουκέλλα.

Όταν τοποθετείτε πιπέτες, τοποθετήστε μια μπατονέτα στο επάνω άκρο. Οι πιπέτες Παστέρ πρέπει να έχουν σφραγισμένο τριχοειδές. Κάθε πιπέτα μέτρησης τυλίγεται σε μια μακριά λωρίδα χαρτιού πλάτους 4-5 cm, ξεκινώντας από το στόμιο, ελικοειδώς σε όλο το μήκος της. Οι πιπέτες Παστέρ τυλίγονται σε χαρτί, 10-20 τεμάχια το καθένα, δοκιμαστικοί σωλήνες - 15-20 τεμάχια το καθένα. Είναι προτιμότερο να αποθηκεύετε όλα τα είδη πιπέτων πριν και μετά την αποστείρωση σε ειδικές μεταλλικές θήκες. Τα πώματα στις φιάλες καλύπτονται επιπλέον με χάρτινα πώματα.

Πριν από την αποστείρωση, τα καθαρά, συναρμολογημένα πιάτα Petri τυλίγονται σε χαρτί, 3 έως 4 τεμάχια το καθένα. Μετά την αποστείρωση, το χαρτί προστατεύει τα αποστειρωμένα γυάλινα σκεύη από μόλυνση από μικροχλωρίδα.

Πριν από την αποστείρωση, τα πιάτα τοποθετούνται στο στεγνωτήριο όχι πολύ σφιχτά για να διασφαλιστεί η κυκλοφορία του αέρα και προσέχουμε η θερμοκρασία να μην ξεπερνά τους 180°C, αφού σε υψηλότερη θερμοκρασία το χαρτί και το βαμβάκι θα απανθρακωθούν. Μετά την ολοκλήρωση της αποστείρωσης, το ντουλάπι στεγνώματος δεν ανοίγει μέχρι τότε. Μέχρι να πέσει η θερμοκρασία σε αυτό στους 70-80?C, γιατί απότομη πτώσηοι θερμοκρασίες μπορεί να προκαλέσουν σπάσιμο του γυαλιού.

Εάν τα πιάτα προορίζονται για αποστείρωση θρεπτικών μέσων σε αυτά με αποστείρωση σε αυτόκλειστο υπό πίεση τουλάχιστον 1 atm, τότε δεν είναι προ-αποστειρωμένα. Κατά την αποστείρωση μέσων με ρέοντα ατμό ή σε αυτόκλειστο υπό πίεση όχι μεγαλύτερη από 0,5 atm. Πρέπει να χρησιμοποιούνται αποστειρωμένα δοχεία.

Αποστείρωση με ξηρό θερμαινόμενο αέρα. Η μέθοδος χρησιμοποιείται για την αποστείρωση καθαρών γυάλινων σκευών. Για το σκοπό αυτό, χρησιμοποιείται ένας φούρνος Pasteur - ένα ειδικό ντουλάπι στεγνώματος με διπλά τοιχώματα. Εξωτερικά είναι επενδεδυμένο με ανθεκτικό στη θερμότητα υλικό. Στην κορυφή υπάρχει ένα θερμόμετρο. Ένα αυτόματο ηλεκτρικό στοιχείο θέρμανσης τοποθετείται στο κάτω μέρος μεταξύ του θερμοανθεκτικού περιβλήματος και του εσωτερικού μεταλλικού περιβλήματος. Όταν το ντουλάπι στεγνώματος είναι ενεργοποιημένο, ο αέρας στο εσωτερικό του θερμαίνεται. Μόλις επιτευχθεί η καθορισμένη θερμοκρασία, σημειώνεται ο χρόνος έναρξης της αποστείρωσης. Λειτουργία αποστείρωσης: σε θερμοκρασία 155-160° C - έκθεση για 2 ώρες, στους 165-170° C - 1-1,5 ώρες, στους 180° C - 1 ώρα Μετά το χρόνο αποστείρωσης, η θέρμανση διακόπτεται.

Αυτόκαυστο. Πρόκειται για αποστείρωση με ατμό υπό πίεση σε συνδυασμό με υψηλή θερμοκρασία ειδική συσκευή- αυτόκλειστο. Όταν ο κορεσμένος ατμός συναντά ένα πιο ψυχρό αντικείμενο, ο ατμός συμπυκνώνεται σε νερό, απελευθερώνοντας μεγάλη ποσότητα θερμότητας. Επιπλέον, μειώνεται ο όγκος του ατμού, γεγονός που διευκολύνει τη διείσδυσή του στα εσωτερικά μέρη του υλικού που αποστειρώνεται. Απαραίτητη προϋπόθεση είναι η παροχή πραγματικά κορεσμένου ατμού, ώστε η επαφή του με κρύο αντικείμενο να οδηγεί σε άμεση συμπύκνωση και θέρμανση. Η βιομηχανία παράγει αυτόκλειστα κάθετα και οριζόντια.

Ένα κατακόρυφο αυτόκλειστο είναι ένα κυλινδρικό μεταλλικό καζάνι με διπλά τοιχώματα, σφραγισμένο με καπάκι. Το νερό χύνεται μεταξύ των τοίχων μέσω ειδικής βρύσης με χοάνη σε ένα ορισμένο επίπεδο. Το εσωτερικό τοίχωμα του λέβητα είναι εξοπλισμένο με οπές στο επάνω μέρος και μια βρύση στο κάτω μέρος, μέσω των οποίων, όταν θερμαίνεται το νερό, ο ατμός εκτοπίζει τον αέρα από το λέβητα. Ένα μεταλλικό προστατευτικό πλαίσιο τοποθετείται στην κορυφή του αυτόκλειστου και πρέπει να υπάρχει ελεύθερος χώρος μεταξύ αυτού και του ίδιου του αυτόκλειστου. Το αυτόκλειστο θερμαίνεται με σύνδεση στο ηλεκτρικό δίκτυο.

Το αυτόκλειστο φορτώνεται με το υλικό που πρόκειται να αποστειρωθεί, το καπάκι και η βρύση μέσω της οποίας χύθηκε νερό κλείνουν και η κάτω βρύση αφήνεται προσωρινά ανοιχτή. Το θερμαινόμενο νερό μεταξύ των τοιχωμάτων του αυτόκλειστου βράζει, ο ατμός που προκύπτει ανεβαίνει και περνά μέσα από τις επάνω οπές του εσωτερικού τοιχώματος στον λέβητα, σπρώχνοντας τον αέρα μέσω της κάτω ανοιχτής βρύσης. Όταν όλος ο αέρας μετατοπιστεί και ο ατμός αρχίσει να βγαίνει σε ομοιόμορφο ρεύμα, η κάτω βαλβίδα είναι κλειστή. Ως αποτέλεσμα, η πίεση ατμού μέσα στο αυτόκλειστο αυξάνεται. Ως έναρξη της αποστείρωσης θεωρείται η στιγμή που η πίεση φτάνει σε μια δεδομένη τιμή (σύμφωνα με το μανόμετρο). Η θερμότητα ρυθμίζεται καθ' όλη τη διάρκεια της αποστείρωσης, διατηρώντας την πίεση του ατμού στο ίδιο επίπεδο. Εάν η πίεση στο εσωτερικό του αυτόκλειστου αυξηθεί υπερβολικά, υπάρχει μια βαλβίδα ασφαλείας μέσω της οποίας διαφεύγει αυτόματα ο περίσσιος ατμός.

Καθώς η πίεση του ατμού αυξάνεται, η θερμοκρασία στο αυτόκλειστο αυξάνεται ανάλογα.

Το μανόμετρο δείχνει την πίεση του ατμού χωρίς να λαμβάνεται υπόψη η ατμοσφαιρική πίεση του περιβάλλοντος (760 mm Hg). Μετά τη λήξη του χρόνου αποστείρωσης, το αυτόκλειστο απενεργοποιείται. Μετά την ψύξη, όταν η ένδειξη του μανόμετρου είναι μηδέν, ανοίξτε τη βαλβίδα για να απελευθερώσετε ατμό.

Ένα οριζόντιο αυτόκλειστο διαφέρει από ένα κάθετο αυτόκλειστο στο σχεδιασμό, αλλά η αρχή λειτουργίας του είναι η ίδια.

ιολογική στείρωση παθολογικό ζώο

Δείγματα εντύπων που πρέπει να συμπληρώνονται κατά την αποστολή παθολογικού υλικού στο εργαστήριο

Η αποστείρωση με ξηρή θερμότητα ή ζεστό αέρα πραγματοποιείται σε φούρνους Pasteur (φούρνοι στεγνώματος). Ο φούρνος Pasteur είναι ένα ντουλάπι με διπλά τοιχώματα κατασκευασμένο από ανθεκτικά στη θερμότητα υλικά - μέταλλο και αμίαντο. Θερμάνετε το ντουλάπι χρησιμοποιώντας καυστήρες αερίου ή ηλεκτρικές συσκευές θέρμανσης. Τα ηλεκτρικά θερμαινόμενα ντουλάπια είναι εξοπλισμένα με ρυθμιστές για την εξασφάλιση της απαιτούμενης θερμοκρασίας. Για τον έλεγχο της θερμοκρασίας, υπάρχει ένα θερμόμετρο τοποθετημένο στην οπή στο επάνω τοίχωμα του ντουλαπιού.

Η ξηρή θερμότητα χρησιμοποιείται για την αποστείρωση εργαστηριακών γυαλικών. Τα πιάτα που προετοιμάζονται για αποστείρωση φορτώνονται χαλαρά στο φούρνο για να διασφαλιστεί η ομοιόμορφη και αξιόπιστη θέρμανση του υλικού που αποστειρώνεται. Κλείστε καλά την πόρτα του ντουλαπιού, ενεργοποιήστε τη συσκευή θέρμανσης, φέρτε τη θερμοκρασία στους 160-165 ° C και αποστειρώστε σε αυτή τη θερμοκρασία για 1 ώρα. Στο τέλος της αποστείρωσης, απενεργοποιήστε τη θέρμανση, αλλά μην ανοίξετε την πόρτα του ντουλαπιού μέχρι Ο φούρνος έχει κρυώσει. Διαφορετικά, ο κρύος αέρας που εισέρχεται στο ντουλάπι μπορεί να προκαλέσει ρωγμές στα ζεστά μαγειρικά σκεύη.

Η αποστείρωση σε φούρνο Pasteur μπορεί να πραγματοποιηθεί σε διαφορετικές θερμοκρασίες και εκθέσεις (χρόνος αποστείρωσης) (Πίνακας 1).

Πίνακας 1. Λειτουργία αποστείρωσης

Τα υγρά (θρεπτικά μέσα, ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου κ.λπ.), τα είδη από καουτσούκ και συνθετικά υλικά δεν μπορούν να αποστειρωθούν με ξηρή θερμότητα, καθώς τα υγρά βράζουν και χύνονται και το καουτσούκ και τα συνθετικά υλικά λιώνουν.

Για τον έλεγχο της αποστείρωσης σε φούρνο Pasteur, τα μεταξωτά νήματα υγραίνονται σε καλλιέργεια βακτηρίων που σχηματίζουν σπόρους, ξηραίνονται, τοποθετούνται σε αποστειρωμένο τρυβλίο Petri και τοποθετούνται σε φούρνο Pasteur. Η αποστείρωση πραγματοποιείται σε θερμοκρασία 165° C για 1 ώρα (για έλεγχο, μερικά από τα νήματα αφήνονται σε θερμοκρασία δωματίου). Στη συνέχεια τα αποστειρωμένα νήματα και τα νήματα ελέγχου τοποθετούνται στην επιφάνεια του άγαρ σε τρυβλίο Petri ή τοποθετούνται σε δοκιμαστικούς σωλήνες με ζωμό και επωάζονται σε θερμοστάτη στους 37°C για 2 ημέρες. Με τη σωστή λειτουργία του φούρνου Pasteur, δεν θα αναπτυχθεί σε δοκιμαστικούς σωλήνες ή πιάτα με θρεπτικά μέσα στα οποία τοποθετήθηκαν αποστειρωμένα νήματα, καθώς τα βακτηριακά σπόρια θα πεθάνουν, ενώ τα βακτηριακά σπόρια σε κλωστές που δεν ήταν αποστειρωμένα (έλεγχος) θα φυτρώσουν σε θρεπτικό συστατικό θα σημειωθεί ανάπτυξη των μέσων ενημέρωσης.

Για να προσδιορίσετε τη θερμοκρασία στο εσωτερικό του φούρνου Pasteur, μπορείτε να χρησιμοποιήσετε σακχαρόζη ή κρυσταλλική ζάχαρη, η οποία καραμελώνει σε θερμοκρασία 165-170 ° C.

Προετοιμασία εργαστηριακών υαλικών για αποστείρωση σε φούρνο Pasteur. Πριν από την αποστείρωση, τα εργαστηριακά γυάλινα σκεύη (τρυβλία Petri, διαβαθμισμένες πιπέτες και Παστέρ, φιαλίδια, φιάλες, δοκιμαστικοί σωλήνες) πρέπει να πλυθούν καλά, να στεγνώσουν και να τυλιχτούν σε χαρτί, διαφορετικά μετά την αποστείρωση μπορεί να μολυνθούν ξανά με βακτήρια αέρα.

Τα πιάτα Petri τυλίγονται σε χαρτί ένα ή περισσότερα κομμάτια κάθε φορά ή τοποθετούνται σε ειδικές μεταλλικές θήκες.

Βαμβακερά μάκτρα εισάγονται στα πάνω άκρα των πιπετών για να αποτραπεί η είσοδος του υλικού δοκιμής στο στόμα. Οι βαθμολογημένες πιπέτες τυλίγονται σε μακριές λωρίδες χαρτιού πλάτους 4-5 εκ. Ο όγκος της τυλιγμένης πιπέτας σημειώνεται στο χαρτί. Στις μολυβοθήκες, οι βαθμονομημένες πιπέτες αποστειρώνονται χωρίς επιπλέον τύλιγμα σε χαρτί.

Σημείωση. Εάν η διαβάθμιση στις πιπέτες είναι ελάχιστα ορατή, αποκαθίσταται πριν από την αποστείρωση. Εφαρμόζεται λαδομπογιά στην πιπέτα και, χωρίς να αφήνεται το χρώμα να στεγνώσει, τρίβεται σε αυτό σκόνη θειικού βαρίου χρησιμοποιώντας ένα πανί. Μετά από αυτό, αφαιρέστε την περίσσεια χρώματος με ένα πανί, το οποίο παραμένει μόνο στις εγκοπές βαθμολόγησης. Οι πιπέτες που έχουν υποστεί επεξεργασία με αυτόν τον τρόπο πρέπει να ξεπλένονται.

Οι αιχμηρές άκρες των πιπετών Παστέρ σφραγίζονται σε φλόγα καυστήρα και τυλίγονται σε χαρτί, 3-5 τεμάχια τη φορά. Οι πιπέτες Pasteur πρέπει να τυλίγονται προσεκτικά ώστε να μην σπάσουν τα σφραγισμένα άκρα των τριχοειδών αγγείων.

Φιαλίδια, φιάλες, δοκιμαστικοί σωλήνες κλείνονται με πώματα από βαμβακερή γάζα. Ο φελλός πρέπει να μπαίνει στο λαιμό του σκάφους κατά τα 2/3 του μήκους του, όχι πολύ σφιχτό, αλλά ούτε χαλαρό. Ένα χάρτινο πώμα τοποθετείται πάνω από τα πώματα σε κάθε δοχείο (εκτός από τους δοκιμαστικούς σωλήνες). Οι δοκιμαστικοί σωλήνες δένονται μεταξύ τους σε ομάδες των 5-50 και τυλίγονται με χαρτί.

Σημείωση. Σε υψηλές θερμοκρασίες, το χαρτί στο οποίο είναι τυλιγμένα τα κύπελλα και οι πιπέτες και το βαμβάκι κιτρινίζουν και μπορεί ακόμη και να απανθρακωθούν, επομένως κάθε νέος τύπος χαρτιού που λαμβάνεται από το εργαστήριο θα πρέπει να ελέγχεται στις αποδεκτές συνθήκες θερμοκρασίας.

Ερωτήσεις ελέγχου

1. Τι σημαίνει ο όρος στείρωση;

2. Πώς γίνεται η αποστείρωση;

3. Τι αποστειρώνεται με φρύξη στη φωτιά;

4. Περιγράψτε τη δομή και τον τρόπο λειτουργίας του φούρνου Pasteur.

5. Τι αποστειρώνεται σε φούρνο Παστέρ;

6. Πώς προετοιμάζονται τα γυάλινα σκεύη για αποστείρωση;

7. Γιατί δεν μπορούν να αποστειρωθούν θρεπτικά υλικά και αντικείμενα από καουτσούκ σε φούρνο Pasteur;

Ασκηση

Προετοιμάστε τρυβλία Petri, βαθμονομημένες πιπέτες, πιπέτες Παστέρ, δοκιμαστικούς σωλήνες, φιάλες και φιαλίδια για αποστείρωση.