Sterilisasi suhu tinggi. Sterilisasi panas kering oven Pasteur

Melakukan tahap 1 metode bakteriologis untuk mengisolasi aerob:

Kami menyiapkan sediaan tetap dari bahan yang diteliti, pewarnaan menggunakan metode Gram, mikroskop, dan mengidentifikasi mikroorganisme yang terdeteksi berdasarkan sifat morfotiktorial.

Bahan yang diteliti kami taburkan ke dalam setengah cawan dengan media nutrisi padat dengan menggunakan metode “stroke with platform” (bahan tersebut kami aplikasikan pada permukaan media nutrisi padat dalam cawan petri pada area terbatas, kemudian didistribusikan ke dalam cawan petri. menabur dalam garis paralel yang sering)

Mari kita menandatangani cangkir, menunjukkan tanggal penaburan, dan menempatkannya terbalik dalam termostat pada suhu 37° selama 18-24 jam.

Alat sterilisasi uap (autoklaf) - sterilisasi uap di bawah tekanan.

Metode sterilisasi yang paling andal dan universal dalam praktik medis dan mikrobiologi adalah sterilisasi uap di bawah tekanan. Ini diproduksi dalam autoklaf, di mana benda yang akan disterilkan dipanaskan uap jenuh di bawah tekanan di atas atmosfer. Ada hubungan berikut antara pembacaan pengukur tekanan dan suhu uap jenuh

Tekanan nol pertimbangkan tekanan atmosfer normal (760 mm Hg).

Sterilisasi hanya dapat dicapai jika autoklaf berfungsi penuh dan dioperasikan dengan benar oleh personel yang terlatih khusus. Oleh karena itu, pemantauan terus-menerus terhadap cara sterilisasi diperlukan, yang dilakukan secara fisik (termometer maksimum, dll.), biologis (biotest dengan spora spora). uji kultur mikroorganisme) dan cara kimia (uji kimia, indikator tipe IP).

Kontrol rezim sterilisasi autoklaf dilakukan secara kimia pada setiap pemuatan autoklaf Uji kimia - tabung gelas berisi bahan kimia yang memiliki titik leleh tertentu, antipirin, resorsinol - 110±2°, asam benzoat - 120±2°, benzamida - 126+1°, urea, nikotinamida, D (+) -mannosa - 132+2°. Pewarna anilin (magenta, gentsnan violet, dll.) dimasukkan ke dalam pengujian kimia, yang mewarnai zat secara merata saat meleleh. Saat ini, indikator tipe IS (Vinar, Russia) lebih sering digunakan, yaitu selembar kertas dengan lapisan campuran indikator di atasnya dan dimaksudkan untuk pemantauan visual operasional tidak hanya suhu, tetapi juga waktu sterilisasi. (IS-120, IS-132) Rezim sterilisasi dipantau setiap triwulan menggunakan biotest dengan spora kultur uji Bacillus stearotermophilus BKM B-718

oven pasteur- sterilisasi panas kering.

Produk kaca, logam dan karet berbahan dasar karet silikon disterilkan dalam oven Pasteur. Mode sterilisasi: 160°C - 150 menit; 180°C - 60 menit Kontrol mode sterilisasi selama setiap siklus dilakukan menggunakan indikator sterilisasi IS-160, IS-180; triwulanan - menggunakan biotest dengan spora kultur uji Bacillus licheniformis

Sterilisasi Tabel 1.

Disinfeksi Meja 2.

Sterilisasi dengan panas kering atau udara panas dilakukan dalam oven Pasteur (pengeringan oven panas kering). Oven Pasteur adalah kabinet berdinding ganda yang terbuat dari bahan tahan panas - logam dan asbes. Panaskan kabinet menggunakan pembakar gas atau alat pemanas listrik. Lemari berpemanas listrik dilengkapi dengan regulator yang menjamin suhu yang dibutuhkan. Untuk mengontrol suhu, terdapat termometer yang dimasukkan ke dalam lubang di dinding atas lemari.

Panas kering digunakan untuk mensterilkan peralatan gelas laboratorium. Piring yang disiapkan untuk sterilisasi dimasukkan secara longgar ke dalam oven untuk memastikan pemanasan bahan yang disterilkan secara seragam dan andal. Tutup pintu lemari rapat-rapat, nyalakan alat pemanas, atur suhu menjadi 160-165 ° C dan sterilkan pada suhu tersebut selama 1 jam.Setelah sterilisasi selesai, matikan api, tetapi jangan membuka pintu lemari sampai oven sudah dingin; jika tidak udara dingin, masuk ke dalam lemari dapat menyebabkan keretakan pada peralatan masak yang panas.

Sterilisasi dalam oven Pasteur dapat dilakukan dengan cara yang berbeda-beda kondisi suhu dan paparan (waktu sterilisasi) (Tabel 1).

Tabel 1. Cara sterilisasi

Cairan (media nutrisi, larutan natrium klorida isotonik, dll.), barang yang terbuat dari karet dan bahan sintetis tidak dapat disterilkan dengan panas kering, karena cairan mendidih dan keluar, serta karet dan bahan sintetis meleleh.

Untuk mengontrol sterilisasi dalam oven Pasteur, benang sutra dibasahi dalam kultur bakteri pembentuk spora, dikeringkan, ditempatkan dalam cawan Petri steril dan dimasukkan ke dalam oven Pasteur. Sterilisasi dilakukan pada suhu 165°C selama 1 jam (untuk pengendalian sebagian benang didiamkan pada suhu 165°C). suhu kamar). Kemudian benang yang telah disterilkan dan dikontrol diletakkan pada permukaan agar-agar dalam cawan Petri atau dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi kaldu dan diinkubasi dalam termostat pada suhu 37° C selama 2 hari. Pada pengoperasian yang benar Oven pasteur dalam tabung reaksi atau cawan dengan media nutrisi yang ditaruh benang yang sudah disterilkan tidak akan terjadi pertumbuhan, karena spora bakteri akan mati, sedangkan spora bakteri pada benang yang tidak disterilkan (kontrol) akan berkecambah dan akan terlihat pertumbuhan pada media nutrisi. .

Untuk menentukan suhu di dalam oven Pasteur dapat menggunakan sukrosa atau gula pasir yang menjadi karamel pada suhu 165-170°C.

Mempersiapkan peralatan gelas laboratorium untuk sterilisasi dalam oven Pasteur. Sebelum sterilisasi, peralatan gelas laboratorium (cawan petri, pipet ukur dan pasteur, vial, labu, tabung reaksi) harus dicuci bersih, dikeringkan dan dibungkus dengan kertas, jika tidak setelah sterilisasi dapat terkontaminasi lagi dengan bakteri udara.

Cawan petri dibungkus dengan kertas satu atau lebih potongan sekaligus atau ditempatkan dalam wadah logam khusus.

Penyeka kapas dimasukkan ke ujung atas pipet untuk mencegah bahan uji masuk ke mulut. Pipet ukur dibungkus dengan kertas panjang selebar 4-5 cm, volume pipet yang dibungkus ditandai pada kertas tersebut. Dalam kotak pensil, pipet ukur disterilkan tanpa tambahan kertas pembungkus.

Catatan. Jika garis batas pada pipet tidak terlihat jelas, maka pipet dikembalikan sebelum sterilisasi. Oleskan ke pipet cat minyak dan, tanpa membiarkan cat mengering, bubuk barium sulfat digosokkan ke dalamnya dengan kain. Setelah itu, hilangkan sisa cat dengan lap, yang hanya tersisa di takik kelulusan. Pipet yang dirawat dengan cara ini harus dibilas.

Ujung tajam pipet Pasteur disegel dalam api pembakar dan dibungkus kertas, 3-5 lembar sekaligus. Pipet pasteur harus dibungkus dengan hati-hati agar tidak merusak ujung kapiler yang tertutup rapat.

Botol, labu, tabung reaksi ditutup dengan sumbat kapas. Gabus harus masuk ke dalam leher kapal 2/3 panjangnya, tidak terlalu kencang, tetapi juga tidak longgar. Tutup kertas dipasang di atas sumbat pada setiap wadah (kecuali tabung reaksi). Tabung reaksi diikat menjadi satu dalam kelompok yang terdiri dari 5-50 orang dan dibungkus dengan kertas.

Catatan. Pada suhu tinggi, kertas yang membungkus cangkir dan pipet, serta kapas menjadi kuning dan bahkan mungkin hangus, jadi setiap varietas baru kertas yang diterima oleh laboratorium harus diuji pada kondisi suhu yang diterima.

Pertanyaan kontrol

1. Apa yang dimaksud dengan istilah sterilisasi?

2. Bagaimana sterilisasi dilakukan?

3. Apa yang disterilkan dengan cara kalsinasi di atas api?

4. Jelaskan struktur dan cara pengoperasian oven Pasteur.

5. Apa yang disterilkan dalam oven Pasteur?

6. Bagaimana peralatan gelas disiapkan untuk sterilisasi?

7. Mengapa media nutrisi dan benda karet tidak bisa disterilkan dalam oven Pasteur?

Latihan

Siapkan cawan Petri, pipet ukur, pipet Pasteur, tabung reaksi, labu dan vial untuk sterilisasi.

Sterilisasi panas kering dilakukan dalam oven panas kering (oven Pasteur). Panas kering mensterilkan peralatan gelas laboratorium. Itu dimasukkan secara longgar ke dalam oven agar bahan memanas secara merata. Tutup pintu lemari rapat-rapat, nyalakan alat pemanas listrik dan atur suhu menjadi 160-165 0 C dan sterilkan selama 1 jam. Di akhir sterilisasi, matikan api, tetapi jangan membuka pintu lemari sampai oven menjadi dingin (jika tidak, udara dingin akan menyebabkan piring pecah-pecah). Mode sterilisasi: 160°C - 60 menit, 180°C - 15 menit, 200°C - 5 menit. Cairan, media kultur, karet, dan bahan sintetis tidak dapat disterilkan dengan panas kering.

Sterilisasi uap bertekanan dikenakan berpakaian, linen bedah, instrumen bedah, media kultur, peralatan gelas laboratorium, bahan yang terinfeksi, larutan injeksi. Bahan tersebut ditempatkan dalam wadah (kotak). Bantalan kain ditempatkan di bagian bawah bix untuk menyerap kelembapan setelah sterilisasi. Sterilitas bahan dijaga selama 3 hari. Bahan yang terinfeksi dalam piring dan tabung reaksi disterilkan dalam wadah logam dengan penutup.

Sterilisasi uap di bawah tekanan dilakukan dalam autoklaf. Dengan satu kali pengobatan, bakteri baik vegetatif maupun spora akan mati. Uap bertekanan mensterilkan media nutrisi, kecuali media yang mengandung protein asli, cairan, dan perangkat dengan bagian karet. Media sederhana (MPA, MPB) disterilkan selama 20 menit pada suhu 120°C (1 atm). Media yang mengandung protein dan karbohidrat asli tidak dapat disterilkan pada suhu ini, karena merupakan zat yang mudah diubah dengan pemanasan. Media yang mengandung karbohidrat disterilkan secara fraksional pada suhu 100 0 C atau dalam autoklaf pada suhu 112 0 C (5 atm) selama 10-15 menit. Berbagai cairan, peralatan dengan selang karet, sumbat, lilin bakteri dan filter disterilkan pada suhu 120 0 C (1 atm) selama 20 menit.

Bahan yang terinfeksi (dalam tabung reaksi, gelas) ditempatkan dalam ember atau tangki logam khusus yang berlubang untuk penetrasi uap dan disterilkan pada suhu 126 0 C (1,5 atm) selama 1 jam. Instrumen juga disterilkan setelah bekerja dengan bakteri spora.

Ada 2 mode sterilisasi:

1. Mengalirkan uap dalam autoklaf atau dalam peralatan Koch dengan penutup terbuka dan katup keluar terbuka, ketika efek antibakteri dari uap dimanifestasikan dalam bentuk vegetatif. Beginilah cara mensterilkan media yang mengandung vitamin dan karbohidrat, urea, susu, kentang, dan gelatin. Untuk desterilisasi lengkap digunakan sterilisasi fraksional (pada suhu 100 0 C) selama 20-30 menit selama 3 hari berturut-turut. Ini juga membunuh spora.
2. Sterilisasi uap bertekanan adalah yang paling banyak metode yang efektif perampasan. Bahan ganti dan linen disterilkan pada suhu 1 atm. 15-20 menit, bahan diinfeksi pada 1,5-2 atm selama 20-25 menit.

Sterilisasi diwakili oleh metode fisik, kimia, mekanik dan biologis serta berbagai metode. Kelayakan penggunaan metode sterilisasi tertentu dan cara-caranya tergantung pada karakteristik bahan yang akan disterilkan, fisik dan bahannya. sifat kimia. Lamanya sterilisasi tergantung pada benda yang disterilkan, bahan sterilisasi serta dosisnya, suhu dan kelembabannya lingkungan.

Metode sterilisasi fisik Untuk cara-caranya metode fisik sterilisasi meliputi pengeringan, pembakaran dan kalsinasi, perebusan, pasteurisasi dan tindisasi, udara panas(panas kering), ultrasound, radiasi ultraviolet dan radioaktif, arus frekuensi tinggi, sinar matahari. Metode sterilisasi barang yang paling umum yang dapat terkena suhu tinggi adalah sterilisasi dengan api, udara panas, dan uap jenuh di bawah tekanan. Api digunakan untuk membakar benda-benda terinfeksi yang tidak bernilai apapun (kertas-kertas yang tidak diperlukan, kertas dinding bekas, kain perca, sampah), untuk mendisinfeksi dahak penderita tuberkulosis, jenazah manusia dan hewan yang meninggal khususnya. infeksi berbahaya, serta untuk membakar dan mengapur berbagai benda. Pembakaran dan kalsinasi banyak digunakan dalam praktik mikrobiologi untuk desinfeksi instrumen, laboratorium, dan peralatan gelas farmasi. Kalsinasi dalam nyala api pembakar atau flambéing adalah suatu metode sterilisasi dimana suatu benda disterilkan secara menyeluruh, karena sel-sel vegetatif, kista dan spora mikroorganisme mati. Biasanya, loop, spatula, pipet, kaca objek dan kaca penutup, instrumen kecil dan benda terkontaminasi lainnya disterilkan dengan kalsinasi jika tidak dapat direbus. Tidak disarankan mensterilkan gunting dan pisau bedah dengan cara dipanaskan, karena permukaan pemotongan menjadi kusam jika terkena api. Salah satu metode sterilisasi fisik yang paling sederhana dan umum digunakan dalam praktik medis adalah sterilisasi udara panas (panas kering). Sterilisasi panas kering dilakukan dalam oven pengering (oven Pasteur). Udara panas kering memiliki efek bakterisidal, virusisidal, sporisidal dan digunakan terutama untuk sterilisasi produk kaca (laboratorium piring - cangkir Labu petri, pipet, tabung reaksi, dll), serta produk logam yang dapat disterilkan dengan uap bertekanan. Selain itu, panas kering digunakan untuk mensterilkan barang-barang yang terbuat dari porselen dan bahan tahan panas (bedak, tanah liat putih), serta mineral dan Minyak sayur, lemak, petroleum jelly, lanolin, lilin. Cara paling efektif untuk metode sterilisasi ini, yang menjamin kematian bentuk vegetatif dan spora, adalah suhu 160 - 180 derajat selama 15 menit. Anda tidak dapat mensterilkan bahan makanan, larutan isotonik, atau bahan yang terbuat dari karet dan bahan sintetis dengan panas kering, karena cairan akan mendidih dan keluar, serta karet dan bahan sintetis akan meleleh. Sterilisasi dengan uap jenuh di bawah tekanan adalah metode yang paling dapat diandalkan dan paling sering dicoba untuk mensterilkan pembalut, air, dan lain-lain obat, media nutrisi, peralatan lunak, peralatan, serta untuk desinfeksi bahan limbah yang terkontaminasi. Dalam praktik bedah, pembalut, pakaian ahli bedah, dan pakaian dalam untuk pasien yang dioperasi didesinfeksi menggunakan uap dalam autoklaf. Sterilisasi uap di bawah tekanan dilakukan di perangkat khusus– autoklaf. Autoklaf sepenuhnya menghancurkan semua mikroorganisme dan spora. Metode sterilisasi tekanan uap didasarkan pada pemanasan bahan dengan uap air jenuh pada tekanan di atas tekanan atmosfer. Kombinasi suhu tinggi dan uap menjadikan metode ini sangat efektif. Dalam hal ini, sel vegetatif dan spora mikroba mati. Spora mikroba mati dalam waktu 10 menit di bawah pengaruh uap air jenuh, dan bentuk vegetatif mati dalam waktu 1 hingga 4 menit. Kekuatan bakterisida yang tinggi dari uap jenuh disebabkan oleh fakta bahwa, di bawah pengaruh uap air di bawah tekanan, protein sel mikroba membengkak dan menggumpal, akibatnya sel mikroba mati. Efek bakterisida dari uap air jenuh ditingkatkan dengan tekanan berlebih. Sterilisasi dalam autoklaf dilakukan dalam mode yang berbeda. Jadi, media nutrisi sederhana (daging - pepton agar dan daging - kaldu pepton) disterilkan selama 20 menit pada suhu 120 derajat (1 atm). Namun dengan mode ini tidak mungkin mensterilkan media yang mengandung protein, karbohidrat dan zat lain yang mudah diubah oleh pemanasan. Media yang mengandung karbohidrat disterilkan dalam autoklaf pada suhu 0,5 atm. 10 – 15 menit atau uap yang mengalir secara fraksional. Dengan menggunakan suhu tinggi, Anda dapat menghancurkan bentuk mikroorganisme patogen yang paling persisten (termasuk yang membentuk spora) tidak hanya pada permukaan benda yang didesinfeksi, tetapi juga pada kedalamannya. Inilah keuntungan besar dari suhu tinggi sebagai alat sterilisasi yang andal. Namun, beberapa barang menjadi rusak karena pengaruh suhu tinggi dan dalam kasus ini perlu menggunakan metode dan cara desinfeksi lain. Sterilisasi lengkap bahan dan barang yang tidak dapat disterilkan suhu tinggi, dicapai dengan sterilisasi berulang dengan uap air dalam peralatan Koch pada suhu tidak melebihi 100 derajat. Metode ini disebut sterilisasi fraksional. Intinya adalah bahwa bentuk spora mikroba yang tidak terbunuh, setelah seharian dalam termostat pada suhu 37 derajat, berkecambah menjadi sel vegetatif, yang kematiannya terjadi selama sterilisasi berikutnya. dari objek ini uap yang mengalir. Perawatan dengan uap cairan dilakukan tiga kali selama 30-40 menit. Memanaskan bahan satu kali pada suhu di bawah 100 derajat disebut pasteurisasi. Pasteurisasi diusulkan oleh Pasteur dan dimaksudkan terutama untuk menghancurkan sebagian besar mikroorganisme non-spora. Pasteurisasi dilakukan pada suhu 60 - 70 derajat selama 15 hingga 30 menit, pada suhu 80 derajat selama 10 hingga 15 menit. Dalam praktik mikrobiologi, pasteurisasi bahan benih sering digunakan untuk mengisolasi kultur murni mikroorganisme pembentuk spora dan untuk mengetahui kemampuan mikroorganisme membentuk spora. Untuk cairan yang kehilangan rasa dan kualitas berharga lainnya bila terkena suhu tinggi (susu, jus beri dan buah, bir, media nutrisi yang mengandung karbohidrat atau urea, dll.), sterilisasi dengan uap yang mengalir dilakukan pada suhu 50 - 60 derajat selama 15 - 33333330 menit atau pada suhu 70 - 80 derajat selama 5 - 10 menit. Dalam hal ini, mikroba dengan resistensi rata-rata mati, sementara mikroba dan spora yang lebih resisten tetap bertahan. Sterilisasi fraksional 5 - 6 kali lipat pada suhu 60 derajat selama 1 jam disebut tyndalisasi. Banyak produk medis yang terbuat dari bahan polimer, tidak tahan terhadap sterilisasi metode uap menurut mode yang diterima secara umum. Untuk banyak produk, karena karakteristik cairan yang dikandungnya (pengawet, obat-obatan, dan produk lainnya), tidak mungkin untuk mensterilkan menggunakan metode dan metode yang berlaku umum. Untuk produk tersebut, sistem sterilisasi individual dikembangkan untuk memastikan sterilisasi objek yang andal. Oleh karena itu, sterilisasi rotor untuk memisahkan darah menjadi fraksi-fraksi dilakukan dengan uap air pada suhu 120 derajat selama 45 menit. Sterilitas wadah pengawet dicapai pada suhu 110 derajat selama 60 menit. Merebus adalah metode sterilisasi yang digunakan untuk mendesterilisasi jarum suntik yang dapat digunakan kembali, peralatan bedah, tabung karet, peralatan kaca dan logam. Sterilisasi dengan cara direbus dilakukan dalam alat sterilisasi. Bentuk spora dalam air mendidih akan mati setelah 20 - 30 menit. Merebus selama 45 menit banyak digunakan untuk mendisinfeksi sekret dan bahan infeksius lainnya, linen, piring, mainan, dan barang perawatan pasien. Air panas (60 - 100 derajat) dengan deterjen digunakan untuk mencuci dan membersihkan penghapusan mekanis kontaminan dan mikroorganisme. Kebanyakan sel vegetatif mati pada suhu 70 derajat setelah 30 menit. Sterilisasi filtrasi digunakan dalam kasus di mana substrat tidak tahan terhadap pemanasan, khususnya untuk media yang mengandung protein, serum, beberapa antibiotik, vitamin, dan zat yang mudah menguap. Teknik ini cukup banyak digunakan untuk mensterilkan cairan kultur, bila diperlukan untuk membebaskannya dari sel mikroba, namun untuk menjaga semua produk metabolisme yang dikandungnya tidak berubah. Metode ini melibatkan penyaringan cairan melalui filter khusus yang memiliki partisi berpori halus sehingga dapat mempertahankan sel mikroba. Dua jenis filter yang paling banyak digunakan adalah filter membran dan filter Seitz. Filter membran dibuat dari collodion, asetat, selulosa dan bahan lainnya. Filter Seitz terbuat dari campuran asbes dan selulosa. Selain itu, filter yang terbuat dari kaolin dengan campuran digunakan untuk sterilisasi. pasir kuarsa, dari tanah infusor dan dari bahan lain (“lilin” oleh Chamberlan, Berkfeld). Filter membran dan asbes dirancang untuk penggunaan satu kali. Dengan penyinaran ultraviolet, efek bakterisida diberikan oleh sinar dengan panjang 200 - 450 nm, yang sumbernya adalah lampu bakterisida. Menggunakan lampu bakterisida, udara disterilkan dengan sinar ultraviolet untuk tujuan terapeutik. lembaga pencegahan, kotak laboratorium mikrobiologi, di perusahaan Industri makanan, di kotak produksi vaksin dan serum, di ruang operasi, ruang manipulasi, fasilitas penitipan anak, dll. Sinar ultraviolet memiliki aktivitas antimikroba yang tinggi dan tidak hanya dapat menyebabkan kematian sel vegetatif, tetapi juga sporanya. Sinar matahari menyebabkan matinya mikroorganisme akibat tindakannya iradiasi ultraviolet dan pengeringan. Pengeringan dengan sinar matahari mempunyai efek merugikan pada banyak jenis mikroorganisme, namun pengaruhnya hanya dangkal dan oleh karena itu sinar matahari memainkan peran pendukung dalam praktik sterilisasi. DI DALAM Akhir-akhir ini dalam pengobatan luka dan luka bakar, digunakan pelapis yang terbuat dari polimer sintetik dan alami dalam bentuk gel. Film antiseptik polimer banyak digunakan untuk pengobatan luka dan luka bakar lokal. Mereka mengandung agen antimikroba spektrum luas seperti katapol, dioksidan, yodium biru, serta sorbitol yang mengandung glutaraldehid. Untuk mensterilkan film tersebut digunakan radiasi pengion dengan dosis 20,0 kGy. Selama produksi industri film dan sorben antiseptik polimer, sterilitasnya di bawah sistem sterilisasi ini dijamin sepenuhnya. Radiasi radioaktif membunuh semua jenis mikroorganisme, baik dalam bentuk vegetatif maupun spora. Ini banyak digunakan untuk sterilisasi di perusahaan yang memproduksi produk steril dan peralatan medis sekali pakai yang steril, untuk desinfeksi Air limbah dan bahan baku asal hewan.

Metode mekanis sterilisasi Metode sterilisasi mekanis menghilangkan kuman dari permukaan benda. Ini termasuk mencuci, mengguncang, menyapu, menyeka basah, mengudara, ventilasi, menyedot debu, mencuci.

Metode sterilisasi kimia Plastik kini semakin banyak digunakan dalam praktik medis. Mereka digunakan dalam kedokteran gigi, bedah maksilofasial, traumatologi, ortopedi, dan bedah. Kebanyakan plastik tidak tahan terhadap metode sterilisasi panas uap di bawah tekanan dan panas kering (udara panas kering). Larutan alkohol, diosida, dan larutan terner yang digunakan untuk mensterilkan benda-benda tersebut tidak menjamin sterilitas produk yang diproses. Oleh karena itu, metode gas dan radiasi, serta larutan bahan kimia, digunakan untuk mensterilkan produk plastik. Pengantar praktik institusi medis jumlah besar produk yang terbuat dari bahan termolabil berkontribusi terhadap masuknya radiasi, metode gas desinfeksi dan sterilisasi dengan larutan desinfektan. Pada sterilisasi kimia gunakan gas dan bahan dari berbagai kelompok kimia (peroksida, fenolik, mengandung halogen, aldehida, basa dan asam, surfaktan, dll.). Untuk penggunaan sehari-hari, diproduksi deterjen, pembersih, pemutih dan sediaan lainnya yang memiliki efek antimikroba karena diperkenalkannya berbagai macam bahan. zat kimia. Persiapan ini digunakan untuk pembersihan dan desinfeksi sanitasi peralatan teknis, piring, linen, dll. Uap formaldehida (bentuk uap) dapat digunakan institusi medis untuk sterilisasi produk logam keperluan medis (pisau bedah, jarum, pinset, probe, klem, kait, pemotong kawat, dll.). Sebelum disterilkan dengan uap formaldehida, produk harus dibersihkan terlebih dahulu dan dikeringkan secara menyeluruh. Pada saat mensterilkan dengan cara kimia apapun, aturan pengolahan suatu benda tertentu bergantung pada karakteristik benda yang didesinfeksi, ketahanan mikroba, dan karakteristik benda tersebut. persiapan kimia, suhu lingkungan, kelembaban dan faktor lainnya. Dengan demikian, sterilitas instrumen logam dicapai dengan menyimpannya dalam ruang tertutup dengan uap selama lima jam pada suhu minimal 20 derajat dan kelembaban relatif 95 - 98%, pada suhu 15 derajat, sterilitas lengkap dari benda-benda ini hanya tercapai setelah 16 jam. Aktivitas sporisidal glutaraldehid bergantung pada suhu. Tindakan optimalnya terjadi pada suhu 15 – 25 derajat. Ketika suhu naik, aktivitas sporisidal obat ini menurun. Sterilisasi metode kimia Penggunaannya agak terbatas. Paling sering, metode ini digunakan untuk mencegah kontaminasi bakteri pada media kultur dan sediaan imunobiologis (vaksin dan serum). Zat seperti kloroform, toluena, dan eter paling sering ditambahkan ke media nutrisi. Jika media perlu dibebaskan dari bahan pengawet ini, media dipanaskan dalam penangas air pada suhu 56 derajat dan bahan pengawet tersebut diuapkan. Untuk pengawetan vaksin atau serum, digunakan merthiolate, asam borat, formalin.

Metode biologis sterilisasi Sterilisasi biologis didasarkan pada penggunaan antibiotik. Metode ini banyak digunakan dalam budidaya virus.

Menggunakan faktor fisik dan kimia.

KE faktor fisik Metode sterilisasi meliputi suhu tinggi, sinar ultraviolet, radiasi pengion, dan melalui filter bakteri.

Dalam praktek laboratorium, sterilisasi dengan suhu tinggi dilakukan dengan kalsinasi dalam nyala api, pemanasan dengan panas kering, perebusan, perlakuan dengan uap mengalir atau uap bertekanan.

Beras. 1. Pembakar bunsen. Beras. 2. Pembakar teklu. Beras. 3. Distribusi suhu pada nyala api burner.

Beras. 4. Lemari pengering.

Beras. 5. Pemandian air: 1 - dengan aliran air yang konstan; 2 - silinder; 3 - bagian bawah bulat. Beras. 6. Alat sterilisasi uap mengalir.

Sterilisasi api adalah metode sederhana dan andal untuk memproses berbagai benda tahan panas: jarum, simpul bakteri, spatula mikrobiologi, pipet, kaca objek dan penutup, pinset, dll. pembakar gas Bunsen (Gbr. 1) atau sistem Teklu (Gbr. 2). Pembakar Bunsen dilengkapi dengan dudukan yang dapat digerakkan, dengan menggerakkannya Anda dapat mengatur akses udara. Pada burner Teklu, jumlah udara yang masuk diatur dengan menggerakkan piringan (Gbr. 2,1), jumlah gas diatur dengan sekrup (Gbr. 2, 2). Jika akses udara tidak ada atau tidak mencukupi, nyala api berasap akan terbentuk. Akses udara ke burner diatur hingga api biru. Perkiraan distribusi suhu dalam nyala api pembakar ditunjukkan pada Gambar. 3.

Sterilisasi panas kering dilakukan di lemari pengering(oven pasteur). Metode ini digunakan untuk mensterilkan benda kering saja - peralatan gelas laboratorium, dll. Lemari pengering (Gbr. 4) adalah lemari besi kecil berdinding ganda, di antaranya terdapat bahan isolasi termal(asbes, wol kaca). Tabung reaksi dan botol yang dicuci bersih ditutup dengan sumbat kapas; pipet, kapas, kain kasa dibungkus kertas dan diletakkan di rak lemari agar benda yang akan disterilkan tidak menyentuh dinding panas alat dan udara panas dapat menembus dengan bebas di antara benda-benda tersebut. Sterilisasi dalam lemari pengering berlangsung 45 menit - 1 jam pada suhu 160-170°. Pada suhu di atas 175°, kertas dan kapas terbakar.

Merebus dalam air menghancurkan mikroba non-spora dalam 1-3 menit. , jarum, pisau, peralatan kecil, dll. dapat direbus dalam alat sterilisasi logam dan bahkan dalam panci biasa. Menambahkan sedikit natrium bikarbonat (natrium bikarbonat) ke dalam air