Pastör fırını. Mikropları yok etme (sterilizasyon) yöntemleri. Biyolojik sterilizasyon yöntemi

Kuru ısı ile sterilizasyon gerçekleştirilir. kuru fırınlar(Pastör fırını). Kuru ısı laboratuvar cam eşyalarını sterilize eder. Malzemenin eşit şekilde ısıtılması için fırına gevşek bir şekilde yüklenir. Dolap kapağı sıkıca kapatılır, elektrikli ısıtıcı çalıştırılır ve sıcaklık 160-165 0C'ye getirilir ve 1 saat sterilize edilir. Sterilizasyonun sonunda ısıtmayı kapatın, ancak fırın soğuyana kadar kabin kapısını açmayın (aksi takdirde soğuk hava tencerede çatlaklara neden olur). Sterilizasyon modu: 160°С - 60 dk, 180°С - 15 dk, 200°С - 5 dk. Sıvılar, kültür ortamı, kauçuk ve sentetik malzemeler kuru ısı ile sterilize edilmemelidir.

Buhar basınçlı sterilizasyon pansumanlar, cerrahi iç çamaşırlar, cerrahi aletler, besleyici ortamlar, laboratuvar cam malzemeleri, enfekte materyaller, enjeksiyon solüsyonlarına tabi tutulur. Malzeme kaplara (bixes) yerleştirilir. Bixin alt kısmına sterilizasyondan sonra nemi emen kumaş pedler yerleştirilmiştir. Malzemenin sterilitesi 3 gün süreyle muhafaza edilir. Bardak ve test tüplerindeki enfekteli materyal, kapaklı metal kaplarda sterilize edilir.

Basınç altında buhar sterilizasyonu bir otoklavda gerçekleştirilir. Tek bir tedavi ile bakterilerin hem vejetatif hem de spor formları ölür. Besin ortamları, doğal proteinler, sıvılar, kauçuk parçalı cihazlar içeren ortamlar dışında, basınç altında buharla sterilize edilir. Basit ortamlar (MPA, MPB) 120°C'de (1 atm) 20 dakika sterilize edilir. Doğal proteinler ve karbonhidratlar içeren ortamlar bu sıcaklıkta sterilize edilemez çünkü bunlar ısıtıldığında kolayca değişen maddelerdir. Karbonhidratlı ortamlar fraksiyonel olarak 100 0 C'de veya otoklavda 112 0 C'de (5 atm.) 10-15 dakika sterilize edilir. Çeşitli sıvılar, lastik hortumlu cihazlar, tapalar, bakteri mumları ve filtreler 120 0 C'de (1 atm.) 20 dakika sterilize edilir.

Enfekte olan materyal (test tüpleri, kaplar içindekiler) özel metal kovalara veya buharın nüfuz etmesi için delikli tanklara konur ve 126 0 C'de (1,5 atm.) 1 saat sterilize edilir. Aletler ayrıca spor bakterileri ile çalıştıktan sonra sterilize edilir.

2 sterilizasyon modu vardır:

1. Bitkisel formlarla ilgili olarak buharın antibakteriyel etkisi ortaya çıktığında, bir otoklavda veya vidasız bir kapak ve açık bir egzoz valfi olan bir Koch aparatında akan buhar. Vitamin ve karbonhidrat, üre, süt, patates ve jelatin içeren ortamlar bu şekilde sterilize edilir. Tam birikme için, arka arkaya 3 gün boyunca 20-30 dakika fraksiyonel sterilizasyon (100 0 C'de) kullanılır. Tartışmayı da öldürür.
2. Buhar basınçlı sterilizasyon en etkili yöntem ifade. Pansuman, keten 1 atm'de sterilize edilir. 15-20 dk, enfekte materyal 1.5-2 atm'de 20-25 dk.

Fiziksel ve kimyasal faktörler aracılığıyla.

İLE fiziksel faktörler sterilizasyon yüksek sıcaklık içerir, ultraviyole ışınlar, iyonlaştırıcı radyasyon ve bakteri filtreleri aracılığıyla.

Laboratuvar pratiğinde yüksek sıcaklıkta sterilizasyon, alevle kalsinasyon, kuru ısı, kaynatma, buhar veya basınç altında buhar akışı ile sağlanır.

Pirinç. 1. Bunsen beki. Pirinç. 2. Teklu brülör. Pirinç. 3. Brülör alevindeki sıcaklık dağılımı.

Pirinç. 4. Kurutma kabini.

Pirinç. 5. Su banyoları: 1 - sabit su akışı ile; 2 - silindirik; 3 - yuvarlak alt. Pirinç. 6. Sıvı buharlı sterilizatör.

Alev sterilizasyonu, çeşitli ısıya dayanıklı nesneleri işlemek için basit ve güvenilir bir yöntemdir: iğneler, bakteri özeleri, mikrobiyolojik spatulalar, pipetler, slaytlar ve lameller, cımbız vb. Bu amaçla, Bunsen sisteminin (Şekil 1) veya Teklu (Şekil 2) gaz brülörleri yaygın olarak kullanılmaktadır. Bunsen brülörü, hareket ettirerek hava beslemesini ayarlayabileceğiniz hareketli bir klipsle donatılmıştır. Teclu brülöründe, gelen hava miktarı disk hareket ettirilerek (Şek. 2.1), gaz miktarı - vidayla (Şek. 2, 2) düzenlenir. Hava girişinin olmaması veya yetersiz olması durumunda dumanlı bir alev oluşur. Brülöre hava girişi şu ana kadar düzenlenir: Mavi alev. Brülör alevindeki yaklaşık sıcaklık dağılımı şekil 2'de gösterilmiştir. 3.

Kuru ısı ile sterilizasyon bir fırında (Pastör fırını) gerçekleştirilir. Bu yöntem sadece kuru malzemeleri sterilize eder - laboratuvar cam malzemeleri vb. Kurutma kabini (Şekil 4), aralarında çift duvar bulunan küçük bir demir kabindir. ısı yalıtım malzemesi(asbest, cam yünü). Temiz bir şekilde yıkanmış test tüpleri ve küçük şişeler pamuk tıpalarla kapatılır; pipetler, pamuk, gazlı bez kağıda sarılır ve sterilize edilecek nesnelerin cihazın sıcak duvarlarına temas etmemesi ve aralarına ısıtılmış hava serbestçe girmesi için dolap raflarına yerleştirilir. Fırında sterilizasyon t° 160-170°'de 45 dakika - 1 saat sürer.175°'nin üzerindeki sıcaklıklarda kağıt ve pamuk yanar.

Suda kaynatmak mikropların spor olmayan formlarını 1-3 dakikada yok eder. , iğneler, bıçaklar, küçük aletler vb. metal sterilizatörlerde ve hatta normal bir tencerede kaynatılabilir. Suya az miktarda sodyum bikarbonat ilavesi

Aerobların izolasyonu için bakteriyolojik yöntemin 1. aşamasının gerçekleştirilmesi:

incelenen malzemeden sabit bir müstahzar hazırlıyoruz, Gram yöntemine göre lekeliyoruz, mikroskopi yapıyoruz ve tespit edilen mikroorganizmaları morfo-tinktoral özelliklerle tanımlıyoruz.

Test malzemesini yoğun bir besi ortamına sahip yarım tabağa “platform darbesi” yöntemini kullanarak ekiyoruz (malzemeyi sınırlı bir alanda bir Petri kabında yoğun bir besiyerinin yüzeyine uyguluyoruz ve ardından sık paralel darbelerle ekerek dağıtıyoruz)

Ekim tarihini belirten kapları imzalıyoruz ve 18-24 saat boyunca 37 ° sıcaklıkta bir termostatta baş aşağı koyuyoruz.

Buhar sterilizatörü (otoklav) - basınç altında buhar sterilizasyonu.

Tıbbi ve mikrobiyolojik uygulamada en güvenilir ve evrensel sterilizasyon yöntemi basınçlı buhar sterilizasyonudur. Sterilize edilecek nesnelerin ısıtıldığı otoklavda üretilir. doymuş buhar atmosferik basınç altında. Manometre okumaları ile doymuş buharın sıcaklığı arasında aşağıdaki ilişki vardır.

sıfır basınç normal atmosferik basıncı dikkate alın (760 mm Hg. Art.).

Sterilizasyon, yalnızca otoklav tamamen çalışır durumda olduğunda ve özel olarak eğitilmiş personel tarafından uygun şekilde çalıştırıldığında sağlanır.Bu nedenle, fiziksel (maksimum termometre vb.), biyolojik (mikroorganizmaların test kültürlerinin sporları ile biyotest) ve kimyasal (kimyasal testler, IP gibi göstergeler) yöntemlerle gerçekleştirilen sterilizasyon rejiminin sürekli izlenmesi gereklidir.

Otoklavların sterilizasyon modunun kontrolü yapılır kimyasal yollarla otoklav her yüklendiğinde Kimyasal test - ile cam tüp kimyasal belirli bir erime noktasına sahip, antipirin, resorsinol - 110±2°, benzoik asit - 120±2°, benzamid - 126+1°, üre, nikotinamid, D (+)-mannoz - 132+2°. Kimyasal testlerin bileşimine, eritildiğinde maddeyi eşit şekilde renklendiren bir anilin boyası (macenta, centilmen menekşesi vb.) eklenir. Şu anda, IS tipi göstergeler (Vinar, Rusya) daha sık kullanılmaktadır ve üzerine bir gösterge karışımı tabakası uygulanmış ve yalnızca sıcaklığın değil, aynı zamanda sterilizasyon süresinin (IS-120, IS-132) operasyonel görsel kontrolü günü için amaçlanan bir kağıt şeridini temsil etmektedir.

pastör fırını- kuru ısı sterilizasyonu.

Pasteur fırınında silikon kauçuğa dayalı cam, metal ve kauçuktan mamul ürünler sterilize edilir. Sterilizasyon modu: 160°С - 150 dk; 180°C - 60 dakika Her döngüde sterilizasyon modunun kontrolü IS-160, IS-180 sterilizasyon göstergeleri kullanılarak gerçekleştirilir; üç ayda bir - Bacillus licheniformis test kültürünün sporları ile bir biyotest kullanılarak

Sterilizasyon Tablo 1.

dezenfeksiyon Tablo 2.

Laboratuvar pratiğinde mikroorganizmalarla çalışırken, çalışma sırasında kullanılan tabakların, besin ortamlarının ve metal aletlerin mikrop içermemesi için sürekli önlem almak gerekir. Bu amaçla aşağıdaki sterilizasyon yöntemleri kullanılmaktadır:

Sterilizasyon kızgın buhar baskı altında;

Buhar sterilizasyonu;

sıcak hava sterilizasyonu;

dezenfeksiyon.

En iyi sterilizasyon yöntemi, çeşitli nesnelerin özel cihazlarda - otoklavlarda aşırı ısıtılmış buharla işlenmesidir.

Basınç altında aşırı ısıtılmış buharla otoklav ve sterilizasyon

Otoklavlar, çift cidarlı ve masif kapaklı metal (çelik, dökme demir veya bakır) kazanlardır, cıvatalar ve lastik conta ile hermetik olarak kapatılmıştır. Isıtma sistemine bağlı olarak otoklavlar buharlı, elektrikli ve ateşlidir (Şek. 42). 115-120°C sıcaklıkta yüksek basınçlı ve aşırı ısıtılmış buharın otoklavda elde edilmesi, hem bitkisel hücreleri hem de mikrobiyal sporları 20-30 dakika içinde yok etmenizi sağlar.

Otoklavda, yüksek sıcaklıklarda bozulmayan tüm öğeler sterilize edilir: çeşitli sıvılar (su, karbonhidrat bileşenleri içermeyen besleyici ortamlar), cam eşyalar, metal aletler, pamuk yünü, gazlı bez, kağıt vb.

Bazı maddelerin bir otoklavda (özellikle şeker içeren besleyici ortamlar) normal sterilizasyon moduna dayanmadığı durumlarda, bir otoklavda 112 ° C sıcaklıkta 20 dakika ve ayrıca daha yumuşak modlarda sterilize edilirler.

-de yüksek basınçlar otoklavda aşırı ısıtılmış buhar, ısıtma sıcaklığı buna göre artar; bu, bazı kültür ortamlarına eklenen şekerlerin karamelleşmesine neden olarak ortamı mikropların fizyolojik özelliklerinin belirlenmesi için uygun hale getirmez.

Otoklav içindeki basıncın ölçümü, otoklavın kapağına veya gövdesine monte edilmiş bir manometre kullanılarak yapılır. Basınçta aşırı bir artış olduğunda, tasarıma bağlı olarak kapakta veya otoklav duvarının yan yüzeyinde bulunan bir emniyet valfi otomatik olarak etkinleştirilir. Emniyet valfinden ıslık çalarak çıkan bir buhar jeti, ısıtmanın durdurulması gerektiği konusunda uyarır. Isıtma durdurulmazsa otoklav patlayabilir.

Otoklavın kapağındaki sterilizasyon sıcaklığının ölçüldüğü özel bir cebe bazen bir termometre yerleştirilir. Otoklavın içinde, otoklavın dışında bulunan bir huni ile bir borudan suyun döküldüğü bir stand vardır. Ek olarak, otoklavlar buhar ve havayı serbest bırakmak için bir musluk ve su dökmek için bir musluk ile donatılmıştır.

Otoklavın sterilizasyon sırasında kullanılmasına ilişkin kurallar aşağıdaki gibidir: aparat, seviyesi standın altında olması gereken bir huni ve tüp aracılığıyla suyla doldurulur. Sterilize edilecek ürünler özel metal şişelere konularak otoklava yüklenir. Otoklavın kapağı vidalanmıştır.

Buhar ve havanın tahliyesi için vananın açılması, ısıtma başlar. Su kaynadığı anda ortaya çıkan buhar, otoklavdaki havanın yerini almaya başlar. Buhar çıkış valfi, içinden sürekli bir akım halinde kuru buhar çıkana kadar açık tutulur. Bu, otoklavdaki havanın tamamen boşaltıldığını gösterir. Ardından musluk kapatılır. Daha fazla ısıtma ile giderek daha fazla miktarda biriken buhar, otoklavdaki basıncı ve aynı zamanda sıcaklığı arttırır. Bir otoklavla çalışırken, buhar basıncı ile sıcaklığı arasındaki ilişki tablosu size rehberlik edebilir (Tablo 4).

Gösterge işaretçisi ulaştıktan sonra istenen gösterge basınç (bu durumda otoklavdaki sıcaklık, kabul edilen sterilizasyon sıcaklığına karşılık gelecektir), otoklavın ısıtmasını, basıncın gerekli süre boyunca aynı seviyede tutulacağı şekilde ayarlayın. Sterilizasyonun sonunda ısıtmayı durdurun. Otoklavdaki sıcaklık düştüğünde ve manometre iğnesi sıfıra düştüğünde (otoklavdaki basınç atmosfer basıncına eşit olur), buhar çıkış valfini dikkatlice açın, buharı boşaltın ve otoklav kapağını açarak malzemeyi çıkarın. Otoklavdaki basınç düşmeden önce buhar vanasını zamanından önce açmak mümkün değildir. Otoklav odasındaki basınçta keskin bir düşüş, 100 °C'den daha yüksek sıcaklıklara ısıtılan sıvıların hızla kaynamasına neden olur, yani; normal atmosfer basıncında kaynama noktasının üzerinde. Hızla kaynayan sıvılar, pamuklu tapaları kaplardan nemlendirecek ve hatta itecektir - iş boşuna yapılacaktır. Havadan giren mikroflora ıslak tıkaçlar üzerinde kolayca gelişip besiyerine nüfuz edip enfekte olacağından kültür besiyeri bozulacaktır. Ayrıca otoklavın artan basınçla açılması işçi için tehlikelidir.

Ancak manometre iğnesi sıfırda durur durmaz otoklav hemen açılmalıdır, aksi takdirde yoğuşma suyu tapaların üzerine akmaya başlayacak ve ayrıca ıslanmalarına neden olacaktır. Tıpaların yoğuşma suyu ile ıslanmaması için sterilizasyon öncesi kağıt ile kapatılır.

Otoklava konulan malzemeler 2 atm (19.61*10.000 N/m2) veya normalin 1 atm üzerinde bir basınca karşılık gelen sıcaklık 120°C'de tutulursa 20-30 dakikada güvenli bir şekilde sterilize edilmiş olacaktır. Otoklav, ortamın sıvı buharla sterilizasyonu için de başarıyla kullanılabilir; bu durumda otoklav kapağı vidalanmaz.

Koch Kazanı ve Sıvı Buhar Sterilizasyonu

Koch kazanı, çift cidarlı ve kask şeklinde konik başlıklı galvanizli sac veya bakırdan yapılmış bir silindirdir (Şek. 43). Kapağın ortasında termometre için bir delik vardır. Dışarıda, Koch kazanı bir tabaka ile kaplanmıştır. ısı yalıtım malzemesi: asbest, muşamba, vb.

Kazanın içine, kazanın iç alanını üst ve alt olmak üzere iki bölüme ayıran bir bölme (taban) yerleştirilmiştir. Alt kısım, seviyesi gösterge camında ayarlanan suyla doldurulur: su, tabanın üstünü kaplamamalıdır. Sterilize edilmiş nesneler, kazanın üst kısmına üst üste yerleştirilmiş kafes kovalara yerleştirilir. Kazanı bir kapakla kapatarak içindeki suyu ısıtmaya başlarlar. Sterilizasyonun başlangıcı, termometrenin 98-100°C'yi gösterdiği an olarak kabul edilir. Bir termometrenin yokluğunda, sterilizasyonun başlangıcı, buharın kazan kapağındaki delikten kuvvetli bir şekilde çıkmaya başladığı an olarak kabul edilir. Böylece kazanın çalışması sırasında sterilize edilecek nesneler her zaman bir sıvı buhar akışı içinde olacaktır.

Akan buharla sterilizasyon yöntemi, basitliği ve bulunabilirliği nedeniyle laboratuvar pratiğinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Akan buhar, esas olarak 100 ° C'nin üzerinde ısıtıldığında özelliklerini değiştiren besleyici ortamları sterilize eder: protein, karbonhidrat ve jelatin. Bu ortamlar için akan buharla sterilizasyon yöntemi en kabul edilebilir olanıdır.

Akışkan buharlı sterilizasyon yönteminin dezavantajı süresidir, çünkü ortamın tam sterilizasyonu için, 24 saatlik aralıklarla sıvının hacmine bağlı olarak, kazanda belirli bir süre - 20 dakika ila 1,5 saat (ortalama 30-45 dakika) arasında tekrar ısıtma yapılması gerekir.

Koch kazanındaki tek bir ısıtma, yalnızca vejetatif mikrobiyal hücrelerin ölümüne neden olur, ancak sporlar korunabilir. Sterilize edilmiş besin ortamını muhafaza ederken uygun koşullar(de oda sıcaklığı ve hatta bir termostatta daha da iyisi), kalan sporların bir kısmı filizlenecek ve ertesi güne kadar bitkisel hücrelere dönüşecektir. Yeniden ısıtma, bu yeni gelişen hücrelerin ölümüne neden olacaktır. Son olarak, besiyerinin bir termostatta tutulduğu bir günün ardından üçüncü ısıtma tam sterilliği sağlayacaktır. Bu yönteme fraksiyonel sterilizasyon denir. İÇİNDE pratik iş bir Koch kazanında akan buharla sterilizasyon yerine, 112 ° C'de 15-20 dakika boyunca 0,5 atm karşı basınçla otoklavlarda geleneksel sterilizasyon sıklıkla kullanılır.

Kurutma kabini ve sıcak hava sterilizasyonu

Laboratuvar pratiğinde mikrobiyolojik cam eşyaların sterilizasyonu için fırın veya Pasteur fırını diye tabir edilen fırına sahip olmak gerekir. Cihaz prensibi kurutma kabini ve Pasteur fırını aynıdır. Fırınlar sadece yapılır dikdörtgen şekil ve kurutma dolapları sadece dikdörtgen değil, aynı zamanda silindirik bir şekle de sahip olabilir (Şek. 44 ve 45). Bu cihazlarda 160°C sıcaklıkta 1 saat veya 150°C sıcaklıkta 2 saat sıcak hava (kuru ısı) ile sterilizasyon yapılmaktadır.

Hem Pasteur fırınları hem de fırınlar içi boş, çift cidarlı, çift ve sıkıca kapanan kapaklı aparatlardır. Dışarıda, ısı yalıtımı için bir asbest tabakası ile kaplanmıştır. duvarlar arasında dolaşır sıcak havaısıtması elektrikli spiraller veya gaz brülörleri ile gerçekleştirilir. Kabinin içinde birkaç (genellikle iki veya üç) delikli raf vardır. Kabinin üst kısmında iki açıklık vardır: biri termometre için, diğeri havalandırma içindir. En uygun elektrikli kurutma dolapları.

Son tasarım kurutma kabinleri, kabin yan duvarına yerleştirilmiş özel bir regülatör ile açılabilen dört ısıtma kademesine sahiptir. İstenilen ısıtma derecesi, bir, iki, üç veya dördünün birden açılmasıyla elde edilir. elektrik spiralleri ve spirallerin dahil edilme sırası herhangi biri olabilir.

Kurutma dolaplarında, cam eşyalara ek olarak, gazlı bez, pamuk yünü sterilize etmek mümkündür, ancak 160 ° C sıcaklıkta sarardıkları için otoklavda işlenmesi daha iyidir. Kauçuk ürünleri, yüksek sıcaklıklara dayanamadıkları için bir kurutma kabininde sterilize etmek imkansızdır - kırılgan hale gelir ve bozulurlar. Sıvılar 150-160 °C'de kaynayarak kimyasal bileşimlerini değiştirirler.

Sterilize edilmiş ürünlerin havadaki mikroplarla müteakip kontaminasyonunu önlemek için sterilizasyondan önce kağıda sarılırlar. Petri kapları, ambalajda boşluk kalmayacak şekilde 2 parça halinde kağıda sarılır. Cam tüpler ve pipetler de önce ayrı ayrı, sonra 10-20 adetlik paketler halinde kağıda sarılır. Tüplerin ve pipetlerin sarılması son derece dikkatli olmalı ve onları tamamen korumalıdır. dış yüzey hava ile iletişimden. Şişeler, test tüpleri, şişeler sıcak hava ile sterilizasyondan önce pamuklu tıpalar ve kağıt kapaklarla kapatılır.

Fırında 170 °C'nin üzerindeki sıcaklıklara izin verilmemelidir, çünkü bu sıcaklıkta pamuk tıkaçlar kahverengiye döner ve kağıt ambalajlar kırılgan ve hatta yanmış hale gelir. Sterilizasyonun başlangıcı, termometrenin 150-160 ° C'yi gösterdiği an olarak kabul edilir. Sterilizasyon için gereken sürenin sonunda ısıtma durdurulur. Tabakların çatlamasını önlemek için sadece kuru tabakları sterilize edin ve sterilizasyondan sonra kabini sadece içindeki sıcaklık 50-70 ° C'ye düştüğünde açın. Platin halkalar, iğneler, cımbızlar, makaslar vb. gibi küçük laboratuvar malzemeleri basit alevle tavlama ile sterilize edilebilir gaz brülörü(veya alkol lambaları).

dezenfeksiyon

Bir mikrobiyoloji laboratuvarında dezenfeksiyona çok sık başvurulmalıdır. En yaygın dezenfektanlar şunlardır: %3-5 karbolik asit solüsyonu ve diğer yüksek fenol solüsyonları, %50-70 solüsyon etil alkol, aynı konsantrasyonda bütil alkol, %4 formalin çözeltisi, %1-2 kloroform ve toluen çözeltileri, %0,5 kloramin çözeltisi vb.

Konserve fabrikalarının mikrobiyoloji laboratuvarlarında masa yüzeyleri, tabaklar, yerler ve duvarlar dezenfekte edilmektedir. Masaların yüzeyini dezenfekte etmek için sadece etil alkol solüsyonlarını değil, karbolik asit solüsyonlarını da kullanabilirsiniz.

dezenfeksiyon kanalizasyon cihazları konserve fabrikalarında ve diğer gıda işletmeleri%5-10 çamaşır suyu çözeltisi ile üretilir. Sirkülasyonun dezenfeksiyonu için cam kaplar konserve fabrikalarında kullanılır klorlu su 1 litrede en az 100 mg aktif klor içeren. Böyle bir çözelti hazırlamak için ağartıcı alınır, kalın bir kütle elde edilene kadar az miktarda su ile karıştırılır. sütlü. Bu karışım suya eklenir, iyice karıştırılır ve bir gün bekletilir. Beyazlatıcı pudra kalsiyum oksit hidrat - Ca (OH) 2 - ve aktif klor oluşumu ile reaksiyona girer. Ca (OH) 2 dibe çöker, arıtmadan sonra çökeltinin üzerindeki çözelti şeffaf, yeşilimsi bir renge dönüşür. Kabı bu solüsyona batırmak 10 dakika sürer. Klorlamadan sonra, kap akan suda iyice yıkanmalıdır.

Sterilizasyon- biriktirme; vejetatif ve spor formlarındaki patojenik ve patojenik olmayan mikroorganizmaların herhangi bir malzemede yok edilmesi.

Sterilizasyon için bulaşıkların hazırlanması. Züccaciye temiz ve steril olmalıdır. Yıkamak için sabun çözeltileri veya kimyasal kullanın deterjanlar. Yeni yemekler% 1-2'lik bir solüsyonda önceden kaynatılır hidroklorik asit, daha sonra camın sızmasını önlemek için. Akan suda yıkanan bulaşıklar distile su ile durulanır ve kurutulur.

bakteriyolojik tüpler. Konik, buzlu şişeler, bir gazlı bezle kaplanmış, sıkıca bükülmüş pamuk yünü rulolarından oluşan pamuklu gazlı bez tıpalarla kapatılır. Dış kapak şeklindeki metal tıpalar da bakteriyolojik test tüpleri için geliştirilmiştir. Pamuk tıkaçların yüksek sıcaklıklarda sterilizasyonunun, pamuk yününden Brucella gibi bazı hassas bakterilerin büyümesini engelleyen maddelerin salınmasına yol açtığı dikkate alınmalıdır.

Pipetleri monte ederken, üst uca bir pamuklu çubuk sokulur. Pasteur pipetlerinin kapalı bir kapileri olmalıdır. Ölçülen her bir pipet, ağzından başlayarak tüm uzunluğu boyunca sarmal şeklinde 4-5 cm genişliğinde uzun bir kağıt şeridi ile sarılır. Pastör pipetleri 10-20 parça halinde kağıda, test tüpleri - 15-20 parça halinde sarılır. Her tür pipet en iyi şekilde sterilizasyondan önce ve sonra özel metal kutularda saklanır. Şişelerin üzerindeki tıpalar ayrıca kağıt kapaklarla kapatılmıştır.

Sterilizasyondan önce toplanmış halde temiz Petri kapları 3-4 parça halinde kağıda sarılır. Sterilizasyondan sonra kağıt, steril cam eşyayı mikroflora kontaminasyonundan korur.

Sterilizasyondan önce bulaşıklar, hava sirkülasyonu sağlamak için çok sıkı olmayacak şekilde bir kurutma kabinine yerleştirilir ve kağıt ve pamuk yünü daha yüksek bir sıcaklıkta kömürleşeceğinden sıcaklığın 180 ° C'yi geçmediğinden emin olun. Sterilizasyon tamamlandıktan sonra kurutma kabini o zamana kadar açılmaz. İçindeki sıcaklık 70-80°C'ye düşene kadar, çünkü keskin düşüş sıcaklıklar camı kırabilir.

Züccaciye, içindeki besin ortamının en az 1 atm basınç altında otoklavlanarak sterilize edilmesi amaçlanıyorsa, önceden sterilize edilmez. Ortamı sıvı buharla veya bir otoklavda 0,5 atm'den fazla olmayan bir basınç altında sterilize ederken. steril kaplar kullanılmalıdır.

Kuru ısıtılmış hava ile sterilizasyon. Yöntem, temiz cam eşyaları sterilize etmek için kullanılır. Bunu yapmak için, çift cidarlı özel bir fırın olan Pasteur fırınını kullanın. Dışı ısıya dayanıklı malzeme ile kaplanmıştır. Üstte bir termometre var. Isıya dayanıklı cilt ile iç kısım arasında metal kutu altta otomatik bir elektrikli ısıtma elemanı var. Kurutma kabini elektriğe bağlandığında içindeki hava ısınır. Ayarlanan sıcaklığa ulaşıldığında, sterilizasyonun başlama zamanı not edilir. Sterilizasyon modu: 155-160°C sıcaklıkta - maruz kalma 2 saat, 165-170°C'de - 1-1.5 saat, 180°C'de - 1 saat Sterilizasyon süresinden sonra ısıtma durdurulur.

otoklavlama. Bu, buhar basınçlı sterilizasyon ile birleştirilmiş Yüksek sıcaklık V özel aparat- otoklav. Doymuş buhar daha soğuk bir cisimle karşılaştığında, buhar yoğunlaşarak suya dönüşür ve çok sayıda sıcaklık. Ek olarak, sterilize edilecek malzemenin iç kısımlarına nüfuz etmesine katkıda bulunan buhar hacmi azalır. Bir ön koşul, gerçekten doymuş buharın sağlanmasıdır, böylece soğuk bir nesneyle teması anında yoğuşmaya ve ısınmaya yol açar. Endüstri, dikey ve yatay otoklavlar üretir.

Dikey bir otoklav, hermetik olarak kapatılmış bir kapakla kapatılmış, çift cidarlı, silindirik bir metal kazandır. Duvarlar arasında hunili özel bir musluktan belirli bir seviyeye kadar su dökülür. Kazanın iç duvarı, üst kısımda delikler ve alt kısımda su ısıtıldığında buharın kazandaki havayı değiştirdiği bir musluk ile donatılmıştır. Otoklavın üstüne metal bir koruyucu çerçeve konur ve bununla otoklavın kendisi arasında olmalıdır. boş alan. Otoklav, güç kaynağı açılarak ısıtılır.

Otoklav sterilize edilecek malzeme ile yüklenir, kapak ve içinden suyun döküldüğü valf kapatılır, alt valf geçici olarak açılır. Isıtılan su, otoklavın duvarları arasında kaynar, ortaya çıkan buhar yükselir ve iç duvarın üst açıklıklarından kazana geçerek havayı alttaki açık musluktan dışarı iter. Tüm hava dışarı atıldığında ve buhar eşit bir akışla dışarı çıkmaya başladığında alt musluk kapatılır. Sonuç olarak, otoklav içindeki buhar basıncı yükselir. Sterilizasyonun başlangıcı, basıncın önceden belirlenmiş bir değere (manometreye göre) ulaştığı an olarak kabul edilir. Isıtma, buhar basıncını aynı seviyede tutarak sterilizasyon boyunca düzenlenir. Otoklav içindeki basıncın aşırı artması durumunda, fazla buharın otomatik olarak dışarı çıkmasını sağlayan bir emniyet valfi bulunmaktadır.

Buhar basıncı arttıkça otoklavdaki sıcaklık da buna bağlı olarak artar.

Manometre, ortam sıcaklığını dikkate almadan buhar basıncını gösterir. atmosferik basınç(760 mm Hg). Sterilizasyon süresi dolduktan sonra otoklav kapatılır. Manometrenin sıfır okumasında soğuduktan sonra, buharı serbest bırakmak için valfi açın.

Yatay bir otoklav, tasarım açısından dikey bir otoklavdan farklıdır, ancak çalışma prensibi aynıdır.

virolojik kısırlaştırma patolojik hayvan

Laboratuvara patolojik materyal gönderilirken doldurulacak örnek formlar