Basınç altında doymuş buharla sterilizasyon. Basınç altında doymuş buharla sterilizasyon - otoklavlama. "Buhar Sterilizasyonu"nun ne olduğunu görün. diğer sözlüklerde

Kültür ortamını sterilize etmenin bu yöntemi en güvenilir ve en sık kullanılan yöntemdir. Malzemenin atmosferik basıncın üzerinde bir basınçta doymuş su buharı ile ısıtılması esasına dayanır. Buhar basıncının artmasıyla buharın sıcaklığının da arttığı bilinmektedir (Tablo 4.1).

Yüksek sıcaklık ve buharın birleşik etkisi bu prosesi özellikle etkili kılar. Bu durumda hem bitkisel hücreler hem de mikrobiyal sporlar ölür. Çoğu mikroorganizmanın sporlarının, 121 °C'deki doymuş buhara 5 dakikalık maruz kalmaya bile dayanamadığı tespit edilmiştir. Sadece bazı toprak bakterilerinin sporları 1 atm'de ancak 30 dakika sonra ölür.

Tablo 4.1 Doymuş buhar sıcaklığı farklı baskılar

ati* - aşırı Atmosfer basıncı

Pirinç. 4.1. Otoklav diyagramı:

1 - sterilizasyon odası; 2 - hava çıkışı için valf; 3 - basınç göstergesi; 4- emniyet valfi; 5- su-buhar odası; 6 - otoklavı suyla doldurmak için huni; 7 - su ölçüm tüpü; 8 - buharın sterilizasyon odasına girmesi için delikler; 9 - koruyucu kasa; 10 - otoklav kapağı; 11 - sterilize edilmiş eşyaların yerleştirilmesi için stand

Basınç altında buhar sterilizasyonu, hermetik olarak kapatılmış kalın duvarlı özel cihazlarda - otoklavlarda gerçekleştirilir. Otoklavlar şekil, boyut, çalışma basıncı, tasarım ve diğer göstergelere göre farklılık gösterir. Manuel, yarı otomatik veya otomatik olabilirler, ancak tüm otoklavlar aynı görevi (sterilizasyon) gerçekleştirmek üzere tasarlandığından, tasarımlarının temel prensibi aynıdır.

İncirde. Şekil 4.1, manuel kontrollü dikey bir otoklavın diyagramını göstermektedir. Otoklav, yüksek basınca dayanabilen çift duvarlı metal bir tanktır. Onun iç kısım bir sterilizasyon odasıdır (7). Sterilize edilecek malzeme içerisine yerleştirilir. Sterilizasyon odası, hava çıkışı için bir musluk (2), buhar basıncını belirleyen bir manometre (3) ve basınç gerekli seviyenin üzerine çıktığında buharın tahliye edilmesi ve buharın buharlaşmasını önlemek için bir emniyet valfi (4) ile donatılmıştır. patlamayı önleyen otoklav. Su-buhar odası (5) olarak adlandırılan duvarlar arasındaki boşluk, bir huni (6) vasıtasıyla (tercihen kireç oluşumunu önlemek için damıtılmış) özel bir su ölçüm tüpü üzerinde işaretlenmiş suyla belirli bir seviyeye kadar doldurulur. otoklav (7). Su bu seviyenin üzerine dökülmemelidir, çünkü hızlı kaynama sırasında su tüpe girerek manometreye gidebilir ve okumalarını bozabilir. Su-buhar odasının iç duvarının üst kısmında buharın sterilizasyon odasına girdiği delikler (8) bulunmaktadır. Buhar kazanının üst kısmı koruyucu bir muhafaza (9) ile kaplanmıştır. Kazanı dış etkenlere karşı korur. mekanik hasar ve otoklavın yakınında çalışanlar - yanıklardan. Sıkı bir sızdırmazlık oluşturmak için otoklav, lastik contalı büyük bir kapakla (10) sıkıca kapatılır. Sterilize edilecek malzemeler özel bir standa (11) yerleştirilir.

Otoklavlama işlemi.

Otoklavlarda sterilizasyon işleminin bireysel işlemleri farklı şekiller biraz farklı olabilir. Buna göre onlarla çalışma tekniği biraz farklıdır, ancak Genel prensip farklı otoklavlarda sterilizasyon aynıdır.

Çalışmadan önce otoklavı ve kontrol ekipmanını inceleyin. Herhangi bir arıza varsa (manometrenin ibresinin sıfırdan kayması, su ölçüm borusunda çatlak olması vb.) cihazla çalışamazsınız. Otoklav incelendikten sonra su-buhar odasına su ölçüm tüpünün üst işaretine kadar su dökülür. Sterilize edilecek malzeme, özel ahşap stand üzerinde sterilizasyon odasına yerleştirilir. Buharın aralarından serbestçe geçmesi gerektiğinden nesneler çok sıkı yerleştirilmemelidir, aksi takdirde ısınmazlar. istenilen sıcaklık ve steril olmayabilir. Sterilizasyon odasını yükledikten sonra otoklavın kapağını (kapısını) sıkıca takıp vidalayın. Daha sonra sterilizasyon odasını dış havaya bağlayan musluğu açın ve ısıtmayı açın.

Buhar oluşumu başladıktan sonra sterilizasyon odasındaki hava çıkarılır. Bu gerekli kondisyon sterilizasyon, çünkü aynı basınçta saf buharın sıcaklığı, buhar ve hava karışımının sıcaklığından daha yüksektir. Otoklavda hava kalırsa malzeme sterilize edilemeyebilir. Bir otoklavı havadan arındırmanın en basit ve en yaygın yolu, havayı buharla değiştirmektir. Buhar ve yoğuşma suyu ya su dolu bir kaba ya da kanalizasyona bağlı özel bir cihaza boşaltılır. İlk durumda suya indirilen musluğa (2) lastik bir hortum takılır. Üflemenin başlangıcı, sabit ve sürekli bir saf buhar akışının ortaya çıkması olarak kabul edilir. Otoklavda hala hava varken hava ve buhar karışımı suyun içinden geçerek yüksek bir çatlama sesi çıkarır. Saf buhar, düzgün bir tıslama sesiyle çıkar. 10 dakika süreyle geçirilir. Genel olarak, hava ile buharın ortaya çıktığı andan itibaren tüm işlem 15 - 20 dakikadan fazla sürmemelidir, aksi takdirde otoklavda çok az su kalacak ve bozulabilir. Buhar (su) tüketimini azaltmak için musluk tamamen açılmaz. Musluğun açılma derecesi pratikte otoklav çalıştırılırken ayarlanır. En gelişmiş otoklavlarda hava, vakum pompası kullanılarak sterilizasyon odasından çıkarılır.

Havanın yeri değiştirildiğinde buhar vanasını kapatın ve buhar basıncı, sterilizasyon moduna karşılık gelen okumaya göre ayarlanır. Otoklavlama modu genellikle aşırı basınç birimleriyle ifade edilir, bu da bakım süresini gösterir, örneğin 1 atm'de 20 dakika sterilizasyon. Otoklavın basınç göstergesi, otoklavda normalin üzerinde oluşturulan aşırı basıncı tam olarak gösterir. Çoğu zaman otoklavlama modu sıcaklık ve süre ile karakterize edilir. Manometre iğnesi belirli bir ek basınç göstergesine ulaştığında ve dolayısıyla buhar sıcaklığı karşılık gelen değere ulaştığında, buhar beslemesi manuel veya otomatik olarak düzenlenerek bu buhar basıncı seviyesi gereken süre boyunca korunur. Otomatik otoklavlarda buhar beslemesi, elektrikli kontaklı basınç göstergesiyle düzenlenir.

Sterilizasyon süresinin sonunda otoklavın ısıtmasını kapatın. Otoklavdaki basınç giderek düşer ve atmosfer basıncına eşit hale gelir. Ancak bundan sonra buharı serbest bırakan musluğu açarlar. Musluğun erken açılması kabul edilemez, çünkü aşırı ısınmış ortam, basınçta keskin bir düşüşle birlikte hemen şiddetli bir şekilde kaynar, ıslanır ve hatta bazen malzemenin sterilitesini ihlal eden pamuklu tıkaçları dışarı iter. Buhar çıktığında, otoklavın kapağını (kapısını) açın, buharın yüzünüzü ve ellerinizi yakmamasına dikkat edin. Buhar, vakum pompasıyla donatılmış otoklavların sterilizasyon odasından bir pompa kullanılarak uzaklaştırılır. Aynı zamanda steril malzeme kurutulur.

Otoklav çalıştığından beri yüksek basınçlar ve sıcaklıklar nedeniyle yanlış kullanım kazalara neden olabilir. Otoklavın kurulumu ve onunla çalışma, otoklavla birlikte verilen talimatlarda belirtilen kurallara kesin ve sıkı bir şekilde bağlı kalınarak gerçekleştirilir. Yalnızca özel izne sahip eğitimli kişilerin çalışmasına izin verilir.

Otoklavda sıcaklığın kontrol edilmesi gerekiyorsa belirli bir sıcaklıkta eriyen farklı maddeler kullanırlar. Bu maddeler nötr boyalarla önceden karıştırılır ve sterilizasyon başlamadan önce otoklava yerleştirilir. Sıcaklık olarak fenantren (erime noktası 98-100°C), benzaurin (115°C), kükürt (119°C), benzoik asit (121 - 122°C), üre (132°C), glikoz (146) kullanılır °C), tiyoüre (180°C), askorbik asit (187-192°C). Bu maddelerin 100 gramı için 0,01 gram boya (muchsin, metilen mavisi) alın, iyice karıştırın, aynı çap ve et kalınlığına sahip cam tüplere dağıtın, kapatın ve dikey pozisyon Otoklavda sterilize edilecek malzeme arasına serilir. Kap uygun sıcaklığa ulaştığında bu maddeler eriyerek kendilerine eklenen boyanın rengine dönüşürler.

Sterilizasyon için ortamın hazırlanması.

Otoklavlama sırasında buharlaşma sonucu sıvının %3 - 5'i kaybolur, bu nedenle hazırlanan besiyerine hacimden fazla yaklaşık %5 oranında distile su eklenmesi önerilir. Daha sonra sterilizasyondan sonra ortam (çözelti) gerekli konsantrasyona sahip olacaktır.

Medya genellikle test tüpleri, şişeler ve şişelerde sterilize edilir. Tıpaların ıslanmasını önlemek için kaplar, yüksekliklerinin yarısından fazla olmayacak şekilde ortamla doldurulur. Medya içeren kaplar pamuklu tapalarla kapatılır. Çevreyi, çevredeki havadaki mikroorganizmaların neden olduğu kirlenmeden korurlar.

Tıkaçların bu işlevi yerine getirebilecek kadar yoğun olması gerekir, ancak mahsuller ve çevre arasındaki gaz değişimi onlar aracılığıyla gerçekleştiğinden, pamuk yünü liflerinin oldukça düzgün bir dağılımına sahip olmalıdır. Çok yoğun tıkaçlar mahsullere hava sağlanmasını zorlaştırır.

Mantarı hazırlamak için elyaf boyunca alınan düz bir pamuk yünü rulo ile yuvarlanır. Mantara dayanıklılık kazandırmak için avuç içi ile masanın üzerinde duran temiz bardak arasında yuvarlanır. Normal bir test tüpü için tıpanın uzunluğu yaklaşık 4 cm'dir Tıpa, test tüpüne 1,5 - 2,0 cm kadar sığmalıdır (Şekil 4.2). Şeklini korumak için mantarı hafifçe döndürerek boynundan çıkarın. Mantarı temiz bir gazlı bezle sarmak uygundur.

Sterilizasyondan önce tapalar kağıt kapaklarla kapatılabilir. Otoklavda sterilize edilecek kapların tapalarını selofan, folyo veya buharın geçmesine izin vermeyen diğer malzemelerle saramazsınız, çünkü buharın tapadan kabın içine girmesi gerekir, aksi takdirde ortam ısınmayacaktır. Gerekli sıcaklıkta ve sterilize edilmeyecektir. Cam, kauçuk, mantar ve diğer tıpalar kullanıldığında çift kat olarak sarılır. ambalaj kağıdı ve pamuklu tıpa ile kapatılmış bir şişeye bağlanarak sterilize edilir. Kazanın içindeki tıkaçlar, brülör alevinin yakınında steril olarak değiştirilir.

Yara yüzeyi, kan veya enjekte edilebilir ilaçlarla temas eden tıbbi ürünler ve bireysel türlerÇalışma sırasında mukoza ile temas eden ve ona zarar verebilecek ürünler. Bunlar tekstillerden (cerrahi çamaşırlar ve pansumanlar), kauçuktan (eldivenler, tüpler, bujiler, kateterler vb.), metalden ( cerrahi Aletler) ve cam.

Buhar sterilizatörleri tasarım, boyut, çalışma basıncı ve diğer göstergelere göre farklılık gösterir. Kullanılan tıbbi kurumlar buhar sterilizatörleri, 2-2,5 0,2-0,25 MPa'ya (kgf/cm2) kadar aşırı buhar basıncı altında çalışan cihazları ifade eder. Yuvarlak ve dikdörtgen buhar sterilizatörleri daha yaygın olarak kullanılır. Dikey cihazlarda sterilize edilmiş malzemelerin yüklenmesi ve boşaltılması yukarıdan gerçekleştirilir. Tek kapılı yatay sterilizatörlerde yükleme ve boşaltma tek taraftan yapılır. Bu cihazlara tek yönlü veya geçişsiz cihazlar denir. Birbirinin karşısında bulunan iki kapısı olan sterilizatörlere geçişli veya çift taraflı denir. Bu tür cihazlar, sterilizasyon odasını bir duvarla ikiye bölmeyi mümkün kılar: hazırlık (kirli) ve aseptik (temiz).

Tıbbi portatif buhar sterilizatörleri, boyut, hacim ve dolayısıyla performans bakımından farklılık gösteren çeşitli tiplerde mevcuttur; biri diğerinin içine yerleştirilmiş, dikey olarak monte edilmiş üç çelik silindirden oluşurlar. Alt dışbükey tabana sahip iç silindir, içine sterilize edilecek öğelerin yüklendiği bir sterilizasyon odasıdır. Ortadaki silindire, içine suyun döküldüğü ve ısıtıldığında buhara dönüşen su-buhar odası denir. Su-buhar odası, menteşeler üzerinde dönen bir dökme demir kapakla kapatılmıştır. Su-buhar ve sterilizasyon odaları, sterilizasyon odasının yanlarında yapılan girintiler sayesinde birbirleriyle iletişim halindedir.

Dış silindir - mahfaza - su-buhar odasını ısı kaybından korur. Buhar sterilizatörleri bir basınç göstergesi ve bir emniyet valfi ile donatılmıştır. Su-buhar odasına su dökmek için bir huni bulunmaktadır. Su-buhar odasının tabanının altında bir su ısıtma kaynağı bulunmaktadır. Kaynayan sudan çıkan buhar cihaza girer. Üst kısmı sterilizasyon odası. Isıtma başlamadan önce çıkış borusundaki musluk açık kalır ve borudan hava ve buhar çıkar. Daha sonra çıkış tüpü bir musluk ile kapatılır, basınç artar ve sterilizatördeki eşyalar buharla ısıtılır.

Elektrikle ısıtılan dikey buhar sterilizatörleri, bir sterilizasyon odası, bir su-buhar odası ve koruyucu bir kasadan oluşur. Sterilizasyon odası, üzerinde kapatma vanası bulunan bir tüp aracılığıyla su-buhar odası ile iletişim kurar. Bu valf kullanılarak sterilizasyon odasının su-buhar odasından bağlantısı kesilebilir. Elektrikli ısıtıcılar su-buhar odasına yerleştirilmiştir. Su-buhar odasındaki basınç otomatik olarak korunur. Cihaz, sterilizatörde bir vakumun oluşturulduğu bir su jeti enjektörüne sahiptir; basınç atmosferik basınçtan daha az olur. Su-buhar odasındaki buhar basıncını otomatik olarak korumak için, üç yollu valfli bir sifon tüpü kullanılarak bir kontak basınç göstergesine bağlanır. Su-buhar odasını sterilizasyon odasına bağlayan borunun üzerine yaylı emniyet valfi takılmıştır.

Basıncın atmosferik basınçtan daha fazla veya daha az olabileceği sterilizasyon odası, içindeki basıncı ve vakumu gösteren bir basınç ve vakum ölçere bağlanır. Su-buhar odasındaki su seviyesi, bir su gösterge kolonu kullanılarak belirlenir. Kolonun üst kısmında su doldurmak için bir huni bulunmaktadır. Bölme, mahfazanın ötesine uzanan bir çıkış borusuna sahiptir. Borunun üzerinde bir kapatma vanası bulunmaktadır. Güç yönetimi ayrı bir panelde bulunur.

Yatay buhar sterilizatörleri aynı temel unsurlardan oluşur; buhar kazanından ve sterilizasyon kısmından. Çeşitli kapasitelerde buhar sterilizatörlerinin dolap ve diğer tasarımları bulunmaktadır. Günümüzdeki en basit tasarımların yanı sıra artık karmaşık buhar sterilizatörleri de mevcut. otomatik cihazlar Kullanıldıkları çeşitli alet ve aparatlarla donatılmış çeşitli sistemler havayı çıkarmak ve aynı anda sterilizasyon odasını ısıtmak için, sterilize edilmiş eşyaların otomatik olarak yüklenmesi ve boşaltılması için mekanizmalar, özel kontrol ve kayıt ekipmanı. Sterilizatörlerin faydalı hacmi 4, 10, 12, 30, 50, 75, 100, 280, 400, 560, 760 dm3 ve daha fazladır.

Sterilize edilen eşyalar sterilizasyon odasına sterilizasyon kutularına (kutulara) veya çift kat pamuklu kumaşa (patiska, keten vb.) veya A ve B sınıfı bitkisel parşömenlere veya su geçirmez ve neme dayanıklı torba kağıdına yerleştirilir, plastik film yüksek mukavemetli veya polivinil klorür plastikten. Sterilizasyon kutuları var farklı boyutlar ve şekiller (yuvarlak veya kare) ve yalnızca bunların sterilizasyonu için tasarlanmamıştır pansumanlar, çamaşırlar ve aletler, aynı zamanda sterilize edilmiş ürünlerin daha sonra saklanması için de kullanılır. Sterilizasyon kutuları filtreli ve filtresiz olarak mevcuttur. İkincisini kullanırken, sterilize edilmiş ürünleri içlerine yerleştirmeden önce kutunun içi bir kat pamuklu kumaşla kaplanır.

Her buhar sterilizatöründe çalışan bir basınç göstergesi ve emniyet valfi bulunmalıdır. Manometre skalasında kırmızı bir çizgi bulunmalı veya bunun yerine sterilizatörde izin verilen çalışma basıncına karşılık gelen bölmeye kırmızı boyalı metal bir plaka takılmalıdır.

Sterilizasyonun etkinliği, sterilizatörün doğru çalışma moduna ve paketleme yoğunluğuna bağlıdır. Sterilize edilecek malzeme miktarı ilgili kılavuzlarda belirtilen standartları aşmamalıdır.

Buhar sterilizasyon işlemi birkaç aşamadan oluşur. İlk olarak, su-buhar odası suyla doldurulur, daha sonra sterilizasyon odasına eşyalar yerleştirilir, kapak sıkıca kapatılır, bir ısıtma kaynağı (veya hazır buhar) etkinleştirilir ve çoğu zaman odadan hava çıkarılır. buharla değiştiriliyor. Bundan sonra buhar basıncı belirtilen değere (talimatlara göre) ayarlanır. Bu an, sterilizasyona maruz kalmanın (maruz kalmanın) başlangıcı olarak kabul edilir. 0,11 mPa (1,1 kgf/cm2) buhar basıncında (atmosferin üzerinde) ve 120 ± 2 °C sıcaklıkta, maruz kalma 45 dakika olmalı ve 0,2 mPa (2 kgf/cm2) basınçta ve sıcaklık 132 ±2°С - 20 dk. Maruz kalma süresi dolduktan sonra sterilizasyonun tamamlandığı kabul edilir. Buharın serbest bırakılmasıyla aparattaki basınç azaltılır. Sterilizasyon döngüsü tamamlandıktan sonra buhar sterilizatörü açılır, sterilizasyon kutuları çıkarılır ve üzeri steril örtüyle kaplı bir masanın üzerine yerleştirilir. Kutulardaki yan açıklıklar sterilizasyondan hemen sonra kapatılır. İkinci sayfa sıcak kutuları kaplamak için kullanılır. Sterilize edilmiş malzemenin tamamen soğuyana kadar dağıtılması yasaktır.

Sterilize edilmiş malzemenin filtreli steril kutularda raf ömrü filtreler olmadan 20 gündür - 3 güne kadar. Diğer ambalaj türlerinde (parşömen, patiska) da 3 güne kadar.

Buhar sterilizatörlerinin çalışmasının izlenmesi. Çalışan tüm buhar sterilizatörleri periyodik olarak teknik ve bakteriyolojik kontrole tabi tutulmalıdır. Kontrolü gerçekleştirirken, sterilizatör üzerinde çalışan personelin tasarımı hakkındaki bilgisini, buhar sterilizatörünün çalışma günlüğündeki girişin doğruluğunu ve ayrıca sıhhi durum Sterilizasyon aparatının bulunduğu odalar. Otoklavlarda çalışırken teknik kontrol Çalışma ve Güvenlik Kurallarına uygun olarak yapılır.

Sıcaklık rejimi, sterilizasyon süresinin başında veya sonunda sterilize edilen malzemedeki sıcaklığın ölçülmesiyle kontrol edilir. İlk durumda, maruziyetin başlamasından 7 dakika sonra iş durdurulur, ikincisinde - sterilizasyonun bitiminden hemen sonra. Haznenin alt kısmında bulunan malzemelerin ilave ısınmasını önlemek için buhar, üç yollu bir vana veya emniyet vanası aracılığıyla dışarı verilir. Sıcaklığı ölçmek için, sterilize edilen eşyaların içindeki sterilizasyon kutularına yerleştirilen maksimum termometreler kullanılır. Her kutuya 2-3 termometre yerleştirin (boyutuna bağlı olarak). Termometreli kutular yerleştirilir çeşitli yerler sterilizasyon odası. Termometre okumalarındaki sapmalara, sterilizasyonun gerçekleştirildiği sıcaklığa kıyasla ±2°C kadar izin verilir.

Toprak örnekleri, buhar sterilizatörlerinde sterilizasyonun bakteriyolojik kontrolü için biyotest olarak kullanılır - Bahçe toprağı 120°C sıcaklıkta buhara 3-5 dakika dayanabilen saprofit sporları içerir. Parşömen veya filtre kağıdına sarılmış numaralandırılmış toprak örnekleri, maksimum termometrelerle birlikte sterilize edilmiş malzeme içindeki sterilizasyon kutularına yerleştirilir. Her kutuya en az üç numune konulur, sterilizasyon odasının üst ve alt kısımlarına kutuların dışına iki numune yerleştirilir. Kontrol sırasındaki sterilizasyon rejimi, toprak örneklerinin yerini, maksimum termometreleri ve bunların okumalarını ve ayrıca bakteriyolojik çalışmaların sonuçlarını kaydeden bir protokole kaydedilir.

Sterilizasyonun tamamlanmasının ardından toprak numuneleri aynı gün bakteriyoloji laboratuvarına gönderilir. Termometreler ve toprak numuneleri içeren, sterilize edilmiş malzeme içeren kutular yeniden sterilize edilmelidir. En az bir örnekte spor kültürü üremesi durumunda bakteriyolojik kontrol tekrarlanır. Yeniden kontrol sırasında steril olmayan numuneler varsa, düşük performansının nedenleri belirlenip ortadan kaldırılıncaya kadar bu buhar sterilizatörünü kullanmayı bırakın.

Merkezi sterilizasyon bölümlerindeki buhar sterilizatörlerinin çalışması yılda en az iki kez izlenir; Sterilizasyon bölümleri yoksa tıbbi kurumlarda ve çocuk kurumlarında yılda en az bir kez. Çalışan sterilizatörlerin toplam sayısının %30'unu seçici olarak kontrol edin. Kurumların bir veya iki cihazı varsa her iki sterilizatör de kontrole tabidir.

Ayrıca buhar sterilizatörlerinin bulunduğu kurumun kendisi de sterilizasyon kutusuna kimyasal bir gösterge - sterilizatördeki buharın sıcaklığına yakın bir erime noktasına (120-121 ° C) sahip olan benzoik asit yerleştirerek bunları günlük olarak kontrol eder. . Fuchsin (boya) içeren benzoik asit, 30-40 mm uzunluğunda, 4-5 mm çapında, uçları pamuklu bir tapa ile kapatılmış veya kapatılmış cam tüplere 0,3-0,5 g miktarında dökülür. Bileşen oranı: 100 g benzoik asit başına - 10 g fuksin.
aynısını oku

Kuru ısı sterilizasyonu

Alevlenme veya kalsinasyon

Sterilizasyon yöntemleri

Sterilizasyon, veya kısırlık (lat. kısırlık- steril), besin ortamlarında, tabaklarda vb. mikroorganizma hücrelerinin tamamen yok edilmesidir.

Çeşitli sterilizasyon yöntemleri bilinmektedir. Isı sterilizasyonu en sık kullanılır.

Platin halkalar, iğneler, spatulalar, küçük metal nesneler(makas, neşter, cımbız) yanı sıra cam çubuklar, slaytlar, lamel vb.

Bulaşıkların ve nişasta ve tebeşir gibi kuru malzemelerin işlenmesinde kullanılır. Bu durumda, sterilize edilen nesne 170 °C'de 2 saat süreyle tutulur (silindiği andan itibaren sayılır). gerekli sıcaklık) Pasteur fırınında (Şek. 8, A) veya elektrikli kurutma dolapları. Sıcaklığın 170 °C'nin üzerine çıkarılması tavsiye edilmez: pamuk tıkaçlar ve kağıtlar bozulmaya başlar (kahverengiye döner, kırılgan hale gelir).

Sterilizasyondan önce cam eşyalar pamuklu tapalarla kapatılır ve kağıda sarılır. Bardaklar, test tüpleri, pipetler, pamuk yünü, gazlı bez kağıda sarılır veya sterilizasyondan sonra steril cam eşyaların saklanabileceği özel kutulara ve kalem kutularına yerleştirilir.

Sterilizasyon sonunda kabin ancak sıcaklık oda sıcaklığına düştükten sonra açılır, aksi takdirde cam patlayabilir.

Akan buhar (100 °C), kuru ısıdan dolayı bozulan nesneleri ve daha fazlasına dayanamayan bazı besin ortamlarını işlemek için kullanılır. Yüksek sıcaklık(karbonhidratlı ortamlar, anne sütü, süt). Sterilizasyon bir Koch kazanında gerçekleştirilir (Şekil 8, B) Her gün 3 gün boyunca 30 dakika. Bu sterilizasyona denir kesirli .

Koch kazanı - termometre için bir delik bulunan koni biçimli bir kapakla gevşek bir şekilde kapanan, çift tabanlı uzun bir metal silindir. Silindirin dışı asbest veya linolyum ile kaplıdır. Kazanın tabanına su dökülür, üzerine sterilize edilecek eşyaların yerleştirildiği buhar geçişi için delikli bir stand takılır. Sterilizasyon süresi, kapak altından yoğun buharın çıktığı ve sıcaklığın 100 °C'ye çıktığı andan itibaren sayılır.

100°C sıcaklıkta 30 dakika süreyle tek bir ısıtmayla bitkisel hücreler ölür ancak birçok mikroorganizmanın sporları canlı kalır. . Böyle bir ısıtmanın ardından ortam, 24 saat boyunca 28-30 °C'deki bir termostata yerleştirilir. İlk ısıtma sırasında korunan sporlar, bu süre zarfında bitkisel formlara filizlenmeyi başarır ve bu formlar, sonraki ısıtma sırasında ölür. Daha sonra bu işlem 2 kez daha tekrarlanır.

Akan buhar sterilizasyonu

Kaynamak

Nemli ısı sterilizasyonu

Kuru ısı sterilizasyonu

Sterilizasyon (tanımı, yöntemleri, sterilizasyonun kalite kontrolü).

Sterilizasyon- herhangi bir öğenin, bakteriler ve bunların sporları, mantarları, viryonları dahil olmak üzere her türlü mikroorganizmanın yanı sıra yüzeylerde, ekipmanlarda vb. bulunan prion proteininden tamamen arındırılması. Gıda Ürünleri ve ilaçlar. Termal, kimyasal, radyasyon, filtrasyon yöntemleriyle gerçekleştirilir.

Bu sterilizasyon yöntemini kullanırken, sterilize edilecek nesne bir fırında 180 °C sıcaklıkta 20-40 dakika veya 200 °C sıcaklıkta 10-20 dakika ısıtılır. Kuru ısı camı veya porselen tabaklar, yağlar, vazelin, gliserin, ısıya dayanıklı tozlar (kaolin, talk, kalsiyum sülfat, çinko oksit vb.). Sulu solüsyonlar kurutma dolaplarında sterilize edilemez. cam kaplarçünkü su yüksek sıcaklıkta buhara dönüşür ve cam zarar görebilir.

Bu sterilizasyon yöntemini kullanırken yüksek sıcaklık ve nemin etkileri birleştirilir. Kuru ısı esas olarak mikroorganizmaların pirogenetik tahribatına neden oluyorsa, ıslak ısı suyun katılımını gerektiren protein pıhtılaşmasına neden olur. Pratikte ıslak buharla sterilizasyon 50-150°C sıcaklıkta gerçekleştirilir ve aşağıdaki şekillerde gerçekleştirilir.

Bu yöntem kauçuk nesneleri, cerrahi (tek kullanımlık olmayan) aletleri ve cam eşyaları sterilize etmek için kullanılabilir. Enjeksiyon çözeltilerini sterilize etmek için kaynatma kullanılması tavsiye edilmez, çünkü buhar sterilizasyonundan önemli ölçüde daha az etkilidir ve çoğu zaman ilacın terapötik etkisinde bir azalmaya yol açar.

Basıncı 760 mmHg olan doymuş su buharına (havasız) akışkan denir. Sanat. ve sıcaklık 100 °C. Akan buharla sterilizasyon, çözeltinin hacmine bağlı olarak buhar sterilizatöründe veya otoklavda 15-60 dakika süreyle gerçekleştirilir. Bu, eczanelerde enjeksiyon solüsyonlarını sterilize etmenin en yaygın yöntemidir.

Gerçekleştirilen çeşitli tasarımlar otoklavlar. Otoklav, kalın duvarlı bir sterilizasyon odası ve bir mahfazadan oluşan, hava geçirmez şekilde kapatılmış bir kaptır. Otoklavda aşırı basınçta buharın kaçmasını sağlayan bir emniyet valfi ve bir basınç göstergesi bulunur. Her otoklavın kullanım ve bakım talimatları bulunmalıdır.

Sterilize edilecek nesne buhar odasının içine yerleştirilir. Buhar odası ısıtılır. İlk olarak, otoklav, buhar güçlü bir sürekli akış halinde akana ve otoklavdaki havayı değiştirene kadar musluk açıkken ısıtılır, bu da su buharının termal iletkenliğini önemli ölçüde azaltır (su buharı% 5 hava içerdiğinde, 50 oranında azalır). %). Musluk kapatıldıktan sonra otoklav ısıtılırken basıncın izlenmesi gerekir, artışına paralel olarak buharın sıcaklığı da artar. Sıcaklık ve buhar basıncı arasındaki ilişki şu şekilde ifade edilir: 1 atm - 100 °C; 1,5 atmosfer - 112,7 °C; 2 atmosfer - 119,6 °C; 3 atm - 132,9 °C; 5 atm - 151,1 °C.

Otoklavlama en güvenilir sterilizasyon yöntemidir. Tipik olarak otoklavda sterilizasyon, çözeltinin hacmine bağlı olarak 120°C'de 5-30 dakika süreyle gerçekleştirilir. Bu, mikroorganizmanın türüne bakılmaksızın oldukça eksiksiz bir sterilizasyonu garanti eder. Bu sayede tabaklar, filtreler, aletler, yüksek sıcaklığa dayanıklı tıbbi maddelerin sulu çözeltileri ve pansumanlar sterilize edilir.

Genel kurallar. Buhar (nemli ısı) sterilizasyonu, basınç altında doymuş buharlı bir otoklavda, genellikle 121 ° C sıcaklıkta 15-20 dakika süreyle gerçekleştirilir. Buhar basıncı arttığında sıcaklığı da artar (Tablo 6).

Tablo 6

Farklı basınçlarda doymuş buharın sıcaklığı

* Şu anda basınç genellikle paskal cinsinden ifade edilmektedir, 1 atm (fiziksel atmosfer) = 1,01325 10 5 Pa - 10 2 kPa.

Kontrol sıcaklık rejimi otoklavda belirli bir erime noktasına sahip maddelerin kullanılması mümkündür. Boya (benzonaftol, erime noktası) ilavesiyle test tüplerinde otoklava yerleştirilirler. (t^) 110 °C, benzoik asit, / pl 120 °C).

Kültür ortamının sterilizasyonuna özellikle dikkat edilmelidir. Bu durumda en yaygın olan otoklavlama modu ve etkili yöntem, ortamın özelliklerini değiştirmemelidir (Tablo 7).

Tablo 7

Otoklavlama yoluyla çeşitli ortamlar için sterilizasyon modu

Kural olarak, basınç altında atm'nin; 0,5; 1.0; 1.5; 2.0 elde edildi belirli sıcaklık, °C; Sırasıyla 115, 120, 127, 133. Basınç 2 atm'ye çıkarıldığında şiddetli tıkanıklık sıcaklığa dayanıklı mikroorganizma formlarına sahip malzeme. Sterilizasyon süresi, sterilize edilen nesnenin bileşimine ve bakteriyel kontaminasyon derecesine bağlıdır ve 30 dakika ila 1 - 1,5 saat arasında değişir.

Sterilizasyonun etkinliği, sporlarla kontamine olduğu bilinen ekim materyalinin besin ortamına ekilmesiyle kontrol edilir. Malzeme, sterilize edilen nesnelerle birlikte bir otoklavda tutulur.

Çoğu otoklav yerçekimseldir: buhar, hava ve buhar yoğunluklarındaki farkın etkisi altında yukarıdan aşağıya doğru hareket eder. Çok önemli uygun hazırlık Sterilize edilecek numuneler ve buna göre otoklavın yüklenmesi.

En kullanışlı olanı, zaman sensörleri ve otomatik sıcaklık kontrol cihazlarıyla donatılmış otomatik otoklavlardır. Laboratuvar otoklavlarının termometre terazilerinde çalışma modu sensörleri bulunmalıdır. Numune paketleri, buharın nüfuz etmesini engellemeyecek şekilde birbirine göre serbestçe konumlandırılmalıdır.

Sıvı hacmine ve yükteki kap sayısına bağlı olarak sterilizasyon süresi değişir (Tablo 8). Küçük hacimler için daha küçüktür. Böylece sterilizasyon döngülerinin süresini kapların boyutuna ve sayısına göre seçmek mümkündür.

Tablo 8

Otoklavda 121 °C sıcaklığa ulaşmak için gereken süreye sıvı hacminin ve kap sayısının etkisi

Sterilizasyon döngüsünün sonunda, sterilize edilmiş besin ortamının soğuma süresine sıkı sıkıya bağlı kalarak basıncı yavaşça azaltmak gerekir. Otoklavı açmadan önce basınca ulaştığından emin olun. çevre basınç göstergesinde gösterilir. Otoklavın kapağını zamanından önce (basınç düşmeden önce) açarsanız, hava girebilir, çözeltinin kirlenmesi, kapların veya şişelerin içindeki sıvının kaynaması ve tıkaçların dışarı itilmesi mümkündür. Şişeleri ve şişeleri sterilize ederken, havalandırmayı sağlamak ve camın kırılmasını önlemek için kapaklar gevşek bir şekilde kapatılmalıdır.

Karbonhidrat içeren besin ortamları, düşük basınçta (0,5 atm) ve 110-112 ° C sıcaklıkta bir otoklavda 10-15 - 20 dakika süreyle sterilize edilir ve istenen basınca ulaşıldığı andan itibaren geçen süre sayılır.

Medya, kabın yüksekliğinin yarısından daha yükseğe dökülmemelidir (Tablo 9), pamuk yünü tapalar oldukça yoğun olmalı, gazlı bezle sarılmalı, ancak selofan olmamalıdır. Şişenin boynu mantarın üzerine gazete veya parşömenle kapatılır ve iple sabitlenir.

Tablo 9

Doluluk seviyesi çeşitli türler sıvı içeren şişeler