Pastör fırını. Yüksek sıcaklıkta sterilizasyon. Fiziksel sterilizasyon yöntemi

Ateşte kalsinasyon. Bu güvenilir bir sterilizasyon yöntemidir ancak eşyaların bozulması nedeniyle kullanımı sınırlıdır. Bakteriyolojik döngüler bu şekilde sterilize edilir.

Kuru sterilizasyon ateş. Pasteur fırınında gerçekleştirilir (tendon ------

Fırında) 160-170°C sıcaklıkta 1 saat süreyle. Bu yöntem laboratuvar cam malzemelerini, kağıda sarılı pipetleri ve pamuklu tıkaçlarla kapatılmış test tüplerini sterilize etmek için kullanılır. 170°C'nin üzerindeki sıcaklıklarda kağıdın, pamuk yününün ve gazlı bezin yanması başlar.

Basınç altında buhar sterilizasyonu (otoklavlama). En evrensel sterilizasyon yöntemi. Bir otoklavda - su buharlı sterilizatörde gerçekleştirilir. Otoklavın çalışma prensibi suyun kaynama noktasının basınca bağlı olmasına dayanmaktadır.

Otoklav, hava geçirmez şekilde kapatılmış kapağı olan çift duvarlı metal bir kazandır. Otoklavın tabanına su dökülür, sterilize edilecek nesneler çalışma odasına yerleştirilir ve kapak önce sıkıca vidalanmadan kapatılır. Isıyı açın ve suyu kaynatın. Ortaya çıkan buhar, açık çıkış valfinden çıkan çalışma odasındaki havayı uzaklaştırır. Tüm havanın yeri değiştirildiğinde ve musluktan sürekli bir buhar akışı çıktığında, musluk kapatılır ve kapak kapatılır. Buhar, manometre kontrolü altında istenilen basınca getirilir. Buharın sıcaklığı basınca bağlıdır: normal atmosfer basıncında basınç göstergesinin ibresi 0 atm'dedir. - buhar sıcaklığı 100°C, 0,5 atm'de. - 1 atm'de 112°C. -121°C, 1,5 atm'de. - 127°C, 2 atm'de. - 134°C. Sterilizasyon sonunda otoklavı kapatın, basınç düşene kadar bekleyin, buharı yavaş yavaş boşaltın ve kapağı açın. Tipik olarak 1 atm basınçta. 20-40 dakika içerisinde protein ve karbonhidrat içermeyen basit besin ortamları ve solüsyonları sterilize edilir, pansuman, keten. Sterilize edilecek malzemeler buhar geçirgen olmalıdır. Büyük hacimlerdeki malzemeleri sterilize ederken ( cerrahi malzemeler) süre 2 saate çıkarıldı. 2 atm basınçta. patolojik materyali ve kullanılmış mikrobiyal kültürleri dezenfekte edin.

Şeker içeren besin ortamları karamelize oldukları için 1 atm'de sterilize edilemezler, bu nedenle akan buharla fraksiyonel sterilizasyona veya 0,5 atm'de otoklavlamaya tabi tutulurlar.

Sterilizasyon rejimini kontrol etmek için biyolojik ve fiziksel yöntemler kullanılır. Biyolojik yöntem, Bacillus stearothermophilus sporlarının, sterilize edilecek materyalle aynı anda yerleştirilmesi ve bunların 121°C'de 15 dakikada ölmesi esasına dayanmaktadır. Sterilizasyondan sonra besin ortamında sporlar büyümemelidir. Fiziksel yöntem kükürt (119°C), benzoik asit (120°C) gibi belirli bir erime noktasına sahip maddelerin kullanımına dayanmaktadır. Kuru boya (fuksin) ile karıştırılmış maddeyi içeren kapalı tüpler, sterilize edilecek malzemeyle birlikte otoklava yerleştirilir. Otoklavdaki sıcaklık yeterli ise madde eriyecek ve boyanın rengi değişecektir.

Akışkan sterilizasyon Buhar, bir Koch aparatında veya bir otoklavda, kapak sökülerek ve çıkış valfi açıkken gerçekleştirilir. Aparattaki su 100°C'ye ısıtılır. Ortaya çıkan buhar gömülü materyalin içinden geçer ve onu sterilize eder. 100°C'de tek bir uygulama sporları öldürmez. Bu nedenle, fraksiyonel bir sterilizasyon yöntemi kullanılır - 3 gün boyunca 30 dakika boyunca arka arkaya, bir gün boyunca ayrılma arasında oda sıcaklığı. 100°C'de ısıtma, sporların termal aktivasyonuna neden olur, bunun sonucunda sporlar ertesi güne kadar bitkisel formlara çimlenir ve ikinci ve üçüncü ısıtma sırasında ölürler. Sonuç olarak, yalnızca besin ortamları akan buharla sterilize edilebilir, çünkü Sporların çimlenebilmesi için besinlerin varlığı gereklidir.

Dışı metal bir mahfaza ile kaplanmış, çift duvarlı metal bir silindirdir. Birkaç vida kullanılarak büyük bir kapakla hava geçirmez şekilde kapatılmıştır. Emniyet valfi ve buhar valfi olan bir basınç göstergesi ile donatılmıştır.

Sterilizasyondan önce, su ölçüm camlı bir huni vasıtasıyla otoklavın içine kasa üzerinde belirtilen çizgiye kadar damıtılmış su dökülür. Sterilizasyon malzemesi sterilizasyon odasına yüklenir, bir kapakla sıkıca kapatılır, vidalanır ve ısıtma kaynağı açılır. Bu durumda buhar vanası açık bırakılır. Kaynama sırasında oluşan buhar, otoklavın duvarları arasından geçerek iç duvardaki deliklerden hazneye girer. Isıtma sırasında, önce buhar vanası yoluyla otoklavdan hava, ardından buhar çıkar. Sürekli bir kuru buhar akışının serbest bırakılması, havanın otoklavdan tamamen çıktığını gösterir: musluk kapalıdır ve o andan itibaren otoklavdaki basınç yavaş yavaş artmaya başlar, manometre üzerindeki ibre yükselir. Sterilizasyonun başlangıcı, manometre iğnesinin istenen basınca ulaştığı an olarak kabul edilir.

Şek. 3

Basınç göstergesi okuması şuna karşılık gelir: belirli sıcaklık otoklavda buhar: 0,50 MPa - 112 °C, 0,1 MPa - 120, 0,15 MPa - 127, 0,2 MPa - 134 °C.

Otoklavdaki malzeme çoğunlukla 0,1 MPa'da 20-30 dakika süreyle sterilize edilir. Sterilizasyonun sonunda ısıtma kaynağını kapatın (manometrenin iğnesi yavaş yavaş sıfıra ulaşır). Bundan sonra buhar vanasını açın ve kalan buharı boşaltın. Daha sonra kapağı dikkatlice söküp açın. Tamamen soğuduktan sonra sterilize edilmiş malzemeyi çıkarın.

Bulaşıkları, aletleri, kültür ortamlarını (jelatin ve karbonhidrat içeren ortamlar hariç), pansumanları vb. Sterilize etmek için bir otoklav kullanılabilir. Çalışırken güvenlik kurallarına uymalısınız. Otoklav kullanma hakkı belgesine sahip kişilerin çalışmasına izin verilir. Otoklavın servis kolaylığı kazan müfettişliği tarafından kontrol edilir.

Koch aparatı (Şekil 4), ısıyı iyi iletmeyen malzeme (linolyum, asbest) ile dış tarafı kaplanmış metal bir silindirdir. Tabana su dökülür ve sterilizasyon malzemesi standın üstüne yerleştirilir. Cihaz, termometre ve buhar çıkışı için delikleri olan konik bir kapakla kapatılmıştır. Alt kısımda suyun tahliyesi için bir musluk bulunmaktadır. Sterilizasyon, 100°C'de akan buharla 30-60 dakika süreyle gerçekleştirilir. Bu modda, spor oluşturan ve spor oluşturmayan mikropların bitkisel hücreleri ölür. 18-20 saat aralıklarla üç gün boyunca 30-60 dakika boyunca fraksiyonel sterilizasyon (üç kez), sporların bitkisel hücrelere çimlenmesi ve onlardan kurtulması için koşullar yaratmanıza olanak sağlar. Sterilizasyon arasındaki zaman aralıklarında sporlar çimlenir ve sonraki ısıtma sırasında ölür. Koch aparatı, 100 °C'nin üzerindeki sıcaklıklara dayanamayan malzemeleri (jelatin, süt, karbonhidrat ortamı vb.) sterilize eder.

100°C sıcaklığa dayanamayan protein ortamları ve kan serumu, su banyosunda 56-58°C'de fraksiyonel olarak sterilize edilir.

Kurutma kabini(Pastör fırını) (Şek. 5), üstü asbestle kaplı metal çift duvarlı bir dolaptır. Üst duvarda termometre ve havalandırma için delikler bulunur. Isıtılan hava aşağıdan duvarlar arasında yükselir ve üst açıklıktan, sterilize edilecek malzemenin raflara yerleştirildiği kabine girer. Sterilizasyon kuru ısı ile 150 °C'de 2 saat, 165-170 °C - 45 dakika, 180 °C - 15 dakika gerçekleştirilir.Cam eşyalar Pasteur fırınında sterilize edilir.Sterilizasyondan sonra kabinin bağlantısı kesilir. ısıtma kaynağı ve ancak tamamen soğuduktan sonra açılır.

Bakteriyel filtreler Sıvıları ısıtmadan sterilize etmek için kullanılır. Bunlar arasında Chamberlant, Berkefeld mumları ve Seitz asbest filtreleri (plakalar) bulunur.

Filtre mumları (Şekil 6) ince gözenekli maddelerden yapılmış içi boş silindirlerdir: katkılı kaolin kuvars kumu(Chamberlant mumları) ve infusorial toprak (Berkefeld mumları). Chamberlant mumları var çeşitli boyutlar mikropların geçtiği gözenekler. Büyük bakterilerin geçmesine izin veren mumlar L9, L1(bis), L3, orta boy olanlar - L5, L7, en küçükler - L9, L11 , L13 Berkefeld mumları gözeneklilik ile belirlenir W, N, V(U markalı mumlar en büyük gözeneklere sahiptir).

Seitz filtreleri çeşitli boyutlarda asbest plakalardır. Cihaz sterilizasyon için monte edilirken plaka aradaki ağın üzerine yerleştirilir. metal diskler(ortasında bir delik bulunan) vidalarla birbirine sıkıca bastırılır. Monte edilen filtre, bir tıpa aracılığıyla, yandan çıkışlı (Bunsen şişesi) ve kauçuk bir tüpe sahip bir şişeye yerleştirilir, kağıda sarılır ve 120 °C'de bir otoklavda 20-30 dakika sterilize edilir.

Malzemeyi filtrelemek için, Bunsen şişesine seyreltilmiş yağ içeren kauçuk bir tüp bağlayarak bir vakum oluşturun. el pompası Komovsky veya elektrikli vakum pompası.

İşin tamamlanması. Mikroplar optimum sıcaklık koşullarında yetiştirilir. Laboratuvarlarda bu amaçla hava veya su termostatları kullanılmaktadır.

(Şekil 7) metal dolap aralarında bir su veya hava tabakası bulunan çift duvarlı. Termostatın dış kısmı ısıyı zayıf ileten bir malzeme (asbest, linolyum) ile kaplanmıştır.

Pirinç. 4, 5, 6.

Termostatın içinde, yetiştirilen mikroorganizmaların tohum materyalini yerleştirmek için raflar bulunmaktadır. Termostatın üst kapağına yerleştirilmiş bir termostat kullanılarak termostattaki sabit sıcaklık korunur. Termostat cihazı maddelerin doğrusal genleşmesi prensibine dayanmaktadır. Termoregülatörler, farklı termal genleşme katsayılarına (pirinç, çinko) sahip herhangi iki metalin veya alkolle doldurulmuş bir metal "yastık", alkol ve eter, cıva veya belirli bir sıcaklıkta hacmini değiştiren diğer maddelerin bir karışımıdır. Termostat belirlenen normun üzerinde ısındığında metaller genleşir, kontaklar açılır ve daha fazla ısı akışı otomatik olarak geciktirilir. Sıcaklık düştükten sonra açılır elektrik ve ısı akışı devam eder.

Laboratuvar uygulamalarında mikroorganizmalarla çalışırken çalışma sırasında kullanılan tabakların, kültür ortamlarının ve metal aletlerin mikrop içermemesini sağlayacak önlemlerin sürekli alınması gerekir. Bu amaçla aşağıdaki sterilizasyon yöntemleri kullanılır:

Basınç altında aşırı ısıtılmış buharla sterilizasyon;

Akan buharla sterilizasyon;

Sıcak hava sterilizasyonu;

Dezenfeksiyon.

Sterilizasyonun en iyi yöntemi, çeşitli nesneleri aşırı ısıtılmış buharla işleme tabi tutmaktır. özel cihazlar- otoklavlar.

Basınç altında otoklav ve aşırı ısıtılmış buhar sterilizasyonu

Otoklavlar, çift cidarlı ve cıvatalarla ve lastik contayla hava geçirmez şekilde kapatılmış büyük bir kapağa sahip metal (çelik, dökme demir veya bakır) kazanlardır. Isıtma sistemine bağlı olarak otoklavlar buharlı, elektrikli ve ateşlidir (Şek. 42). Otoklavda 115-120°C sıcaklıkta yüksek basınçlı ve kızgın buhar üretmek, hem bitkisel hücreleri hem de mikrobiyal sporları 20-30 dakika içinde yok etmenizi sağlar.

Otoklavda, yüksek sıcaklıklarda bozulmayan tüm öğeler sterilize edilir: çeşitli sıvılar (su, karbonhidrat bileşenleri içermeyen besin maddeleri), cam eşyalar, metal aletler, pamuk yünü, gazlı bez, kağıt vb.

Bazı maddelerin otoklavda normal sterilizasyon rejimine dayanamadığı durumlarda (özellikle şeker içeren besin ortamları), otoklavda 112 ° C sıcaklıkta 20 dakika boyunca ve daha hafif koşullar altında sterilize edilir.

Şu tarihte: yüksek basınçlar otoklavda aşırı ısıtılmış buhar, ısıtma sıcaklığı buna göre artar; Bu, bazı kültür ortamlarına eklenen şekerlerin karamelleşmesine neden olarak ortamı mikropların fizyolojik özelliklerinin belirlenmesi için uygunsuz hale getirir.

Otoklavın içindeki basınç, otoklavın kapağına veya gövdesine monte edilen bir basınç göstergesi kullanılarak ölçülür. Basıncın aşırı artması durumunda, tasarıma bağlı olarak kapakta veya otoklav duvarının yan yüzeyinde bulunan bir emniyet valfi otomatik olarak devreye girer. Emniyet valfinden bir düdük ile çıkan buhar jeti, ısıtmanın durdurulması gerektiği konusunda uyarır. Isıtma durdurulmazsa otoklav patlayabilir.

Bazen otoklavın kapağındaki özel bir cebe sterilizasyon sıcaklığının ölçüldüğü bir termometre yerleştirilir. Otoklavın içinde, otoklavın dışında bulunan bir huni ile bir tüpten suyun döküldüğü bir stand bulunmaktadır. Ek olarak otoklavlar, buharı ve havayı serbest bırakmak için bir musluk ve suyu boşaltmak için bir musluk ile donatılmıştır.

Sterilizasyon sırasında otoklavın kullanılmasına ilişkin kurallar aşağıdaki gibidir: Cihaz, seviyesi standın altında olması gereken bir huni ve tüp aracılığıyla suyla doldurulur. Sterilize edilecek malzemeler özel metal şişelere konularak otoklava yüklenir. Otoklavın kapağı vidalanmıştır.

Buhar ve havanın çıkmasını sağlamak için musluğun açılmasıyla ısıtma başlar. Su kaynadığı anda ortaya çıkan buhar, havayı otoklavdan çıkarmaya başlar. Buhar çıkış valfi, sürekli bir akış halinde kuru buhar dışarı akana kadar açık tutulur. Bu, havanın otoklavdan tamamen çıkarıldığını gösterir. Daha sonra musluk kapatılır. Daha fazla ısıtmayla giderek daha fazla miktarda biriken buhar, otoklavdaki basıncı ve aynı zamanda sıcaklığı artırır. Otoklavla çalışırken, buhar basıncı ile sıcaklığı arasındaki ilişkiler tablosuna göre yönlendirilebilirsiniz (Tablo 4).

Manometre iğnesi ulaştıktan sonra gerekli gösterge basıncı (otoklavdaki sıcaklık, kabul edilen sterilizasyon sıcaklığına karşılık gelecektir), otoklavın ısıtmasını, basınç gerekli süre boyunca aynı seviyede kalacak şekilde ayarlayın. Sterilizasyonun sonunda ısıtmayı durdurun. Otoklavdaki sıcaklık düştüğünde ve manometre iğnesi sıfıra düştüğünde (otoklavdaki basınç atmosfer basıncına eşittir), buhar tahliye vanasını dikkatlice açın, buharı serbest bırakın ve otoklavın kapağını açarak malzemeyi çıkarın. Otoklavdaki basınç düşmeden buhar tahliye vanasını zamanından önce açmak mümkün değildir. Otoklav odasındaki basınçta keskin bir düşüş, 100 °C'den daha yüksek sıcaklıklara ısıtılan sıvıların şiddetli kaynamasına neden olacaktır; normal atmosfer basıncında kaynama noktasının üzerindedir. Şiddetle kaynayan sıvılar, pamuklu tıkaçları ıslatacak ve hatta kaplardan dışarı itecektir - iş boşuna yapılacaktır. Havadan gelen mikroflora ıslak tıkaçlarda kolayca gelişip içeriye nüfuz ettiğinden ve ortamı enfekte ettiğinden, besin ortamı bozulacaktır. Ayrıca otoklavın yüksek basınçla açılması işçi açısından tehlikelidir.

Ancak manometre iğnesi sıfırda durduğu anda otoklavın derhal açılması gerekir, aksi halde yoğuşma bujilerin üzerine akmaya başlayacak ve onların da ıslanmasına neden olacaktır. Tıpaların yoğuşma suyuyla ıslanmasını önlemek için sterilizasyondan önce kağıtla kaplanır.

Otoklava yerleştirilen malzemeler, sıcaklığın 2 atm (19,61 * 10000 N/m2) basınca karşılık gelen 120°C'de tutulması veya normalin 1 atm üzerindeki bir basınç göstergesinde tutulması durumunda 20-30 dakika içinde güvenilir bir şekilde sterilize edilecektir. Ortamı akan buharla sterilize etmek için bir otoklav da başarıyla kullanılabilir; bu durumda otoklavın kapağı vidalanmaz.

Koch kazanı ve akan buhar sterilizasyonu

Koch kazanı, galvanizli sac veya bakırdan yapılmış, çift cidarlı ve konik kask şeklinde kapaklı bir silindirdir (Şek. 43). Kapağın ortasında termometre için bir delik bulunmaktadır. Koch kazanının dış kısmı bir tabaka ile kaplıdır ısı yalıtım malzemesi: asbest, linolyum vb.

Kazanın iç alanını üst ve alt olmak üzere iki bölüme ayıran, kazanın içine bir bölme (stand) yerleştirilmiştir. Alt kısım, seviyesi su sayacı camı tarafından belirlenen suyla doldurulur: su, standın üst kısmını kaplamamalıdır. Sterilize edilecek eşyalar kazanın üst bölümünde üst üste konulan kafesli kovalara yerleştirilir. Kazanı kapakla kapatarak içindeki suyu ısıtmaya başlarlar. Sterilizasyonun başlangıcı, termometrenin 98-100°C'yi gösterdiği an olarak kabul edilir. Termometrenin yokluğunda, sterilizasyonun başlangıcı, buharın kazan kapağındaki delikten kuvvetli bir şekilde çıkmaya başladığı an olarak kabul edilir. Böylece, kazan çalışırken sterilize edilecek nesneler daima akan bir buhar akışı içinde olacaktır.

Akan buharla sterilizasyon yöntemi, basitliği ve kullanılabilirliği nedeniyle laboratuvar uygulamalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Akan buhar, esas olarak 100°C'nin üzerine ısıtıldığında özellikleri değişen besin ortamlarını sterilize etmek için kullanılır: protein, karbonhidrat ve jelatin. Bu ortamlar için akan buhar sterilizasyonu yöntemi en uygun olanıdır.

Akan buhar sterilizasyon yönteminin dezavantajı süresidir, çünkü ortamı tamamen sterilize etmek için, kazanda belirli bir süre boyunca tekrar tekrar ısıtma yapılması gerekir - bağlı olarak 20 dakikadan 1,5 saate kadar (ortalama 30-45 dakika). 24 saatlik aralıklarla sıvı hacminin arttırılması Ortamın bir termostatta ısıtılması arasındaki sürenin tamamının 25-30 °C'de tutulması tavsiye edilir.

Koch kazanında tek bir ısıtma, yalnızca bitkisel mikrobiyal hücrelerin ölümüne neden olur, ancak sporlar hayatta kalabilir. Sterilize edilmiş besin ortamı uygun koşullarda (oda sıcaklığında veya daha iyisi bir termostatta) tutulduğunda, kalan sporların bir kısmı ertesi gün filizlenecek ve bitkisel hücrelere dönüşecektir. Tekrarlanan ısıtma, bu yeni gelişen hücrelerin ölümüne neden olacaktır. Son olarak, besiyerinin bir termostatta tutulduğu bir günün ardından üçüncü bir ısıtma, tam bir sterilite sağlayacaktır. Bu yönteme fraksiyonel sterilizasyon denir. İÇİNDE pratik iş Koch kazanında akan buharla sterilizasyon yerine, otoklavlarda geleneksel sterilizasyon sıklıkla 112 °C'de 0,5 atm karşı basınçla 15-20 dakika süreyle kullanılır.

Kurutma kabini ve sıcak hava sterilizasyonu

Laboratuvar uygulamalarında mikrobiyolojik cam eşyaları sterilize etmek için bir kurutma kabinine veya Pasteur fırınına sahip olmak gerekir. Kurutma kabini ve Pasteur fırınının tasarım prensibi aynıdır. Sobalar sadece yapılır dikdörtgen şekil ve kurutma dolapları sadece dikdörtgen değil aynı zamanda silindirik bir şekle de sahip olabilir (Şek. 44 ve 45). Bu cihazlarda sterilizasyon sıcak hava (kuru ısı) ile 160 °C sıcaklıkta 1 saat veya 150 °C sıcaklıkta 2 saat süreyle yapılmaktadır.

Hem Pasteur fırınları hem de kurutma fırınları, çift kapılı ve sıkıca kapanan çift kapılı, içi boş cihazlardır. Dış tarafta ısı yalıtımı için bir asbest tabakası ile kaplanmıştır. Duvarlar arasında dolaşır sıcak havaısıtılması elektrikli spiraller veya gaz brülörleri ile gerçekleştirilir. Dolabın içinde birkaç (genellikle iki veya üç) delikli raf vardır. Kabinin üst kısmında iki açıklık vardır: biri termometre, diğeri havalandırma içindir. Elektrikli kurutma dolapları en kullanışlı olanıdır.

İÇİNDE kurutma dolapları En yeni tasarım, kabinin yan duvarına yerleştirilen özel bir regülatörle etkinleştirilebilen dört ısıtma aşaması sağlar. İstenilen ısıtma derecesi, bir, iki, üç veya dördünün birden açılmasıyla elde edilir. elektrikli spiraller ve spiralleri açma sırası herhangi bir olabilir.

Züccaciyeye ek olarak, gazlı bez ve pamuk yünü kurutma dolaplarında sterilize edebilirsiniz, ancak 160 ° C sıcaklıkta sararmaya başladıkları için bunları otoklavda işlemek yine de daha iyidir. Kauçuk ürünler, yüksek sıcaklıklara dayanamadıkları için kurutma kabininde sterilize edilemezler - kırılgan hale gelirler ve bozulurlar. Sıvılar 150-160 °C'de kaynar ve kimyasal bileşimleri değişir.

Sterilize edilmiş eşyaların daha sonra havadaki mikroplar tarafından kontaminasyonunu önlemek için, bunlar sterilizasyondan önce kağıda sarılır. Petri kapları, ambalajda boşluk kalmayacak şekilde her biri 2 parça olacak şekilde kağıda sarılır. Cam tüpler ve pipetler de önce ayrı ayrı, ardından 10-20 adetlik paketler halinde kağıda sarılır. Tüplerin ve pipetlerin tamamen korunması için sarılması son derece dikkatli olmalıdır. dış yüzey hava ile iletişimden. Sıcak hava ile sterilizasyondan önce şişeler, test tüpleri, şişeler pamuklu tıpalar ve kağıt kapaklarla kapatılır.

Kurutma kabinindeki sıcaklığın 170 °C'nin üzerine çıkmasına izin vermeyin, çünkü bu sıcaklıkta pamuklu çubuklar kahverengiye döner ve kağıt ambalajlar kırılgan ve hatta kömürleşmiş hale gelir. Termometrenin 150-160 °C'yi gösterdiği an sterilizasyonun başlangıcı olarak kabul edilir. Sterilizasyon için gerekli süre geçtikten sonra ısıtma durdurulur. Bulaşıkların çatlamasını önlemek için, yalnızca kuru bulaşıkları sterilize etmeniz ve sterilizasyondan sonra kabini yalnızca içindeki sıcaklık 50-70 ° C'ye düştüğünde açmanız gerekir. Platin halkalar, iğneler, cımbız, makas vb. gibi küçük laboratuvar malzemeleri, bir gaz ocağının (veya alkol lambasının) alevinde kolayca kalsine edilerek sterilize edilebilir.

Dezenfeksiyon

Mikrobiyoloji laboratuvarında dezenfeksiyona çok sık başvurulması gerekir. En sık kullanılan dezenfektanlar şunlardır: %3-5 karbolik asit çözeltisi ve diğer yüksek fenollerin çözeltileri, %50-70 çözelti etil alkol, aynı konsantrasyonda bütil alkol,% 4 formaldehit çözeltisi,% 1-2 kloroform ve toluen çözeltileri,% 0,5 kloramin çözeltisi vb.

Konserve fabrikalarının mikrobiyoloji laboratuvarlarında masa yüzeyleri, tabaklar, zeminler ve mekan duvarları dezenfekte edilmektedir. Masa yüzeylerini dezenfekte etmek için sadece etil alkol solüsyonlarını değil aynı zamanda karbolik asit solüsyonlarını da kullanabilirsiniz.

Dezenfeksiyon kanalizasyon cihazları konserve fabrikalarında ve diğer yerlerde gıda işletmeleri% 5-10'luk bir ağartıcı çözeltisi ile üretilir. Dolaşımın dezenfeksiyonu için cam kaplar konserve fabrikalarında kullanılır klorlu su Litre başına en az 100 mg aktif klor içeren. Böyle bir çözelti hazırlamak için çamaşır suyu alın ve kalın bir kütle elde edilene kadar az miktarda su ile karıştırın. sütlü. Bu karışım suya eklenir, iyice karıştırılır ve bir gün bekletilir. Beyazlatıcı pudra reaksiyona girerek kalsiyum oksit hidrat - Ca(OH)2 - ve aktif klor oluşturur. Ca(OH)2 dibe çöker, çökelti üzerindeki çözelti berraklaştıktan sonra şeffaf ve yeşilimsi bir renk alır. Kabın bu solüsyonda bekletilmesi 10 dakika sürer. Klorlamadan sonra kap akan suda iyice yıkanmalıdır.

Kuru ısı sterilizasyonu şu şekilde gerçekleştirilir: kuru ısıtmalı fırınlar(Pastör fırını). Kuru ısı sterilize eder laboratuvar cam eşyaları. Malzemenin eşit şekilde ısınması için fırına gevşek bir şekilde yüklenir. Dolap kapağını sıkıca kapatın, elektrikli ısıtma cihazını açın ve sıcaklığı 160-165 0 C'ye getirip 1 saat sterilize edin. Sterilizasyon sonunda ısıtmayı kapatın, ancak fırın soğuyana kadar dolap kapısını açmayın (aksi halde soğuk hava bulaşıklarda çatlaklara neden olur). Sterilizasyon modu: 160°C - 60 dakika, 180°C - 15 dakika, 200°C - 5 dakika. Sıvılar, kültür ortamları, kauçuk ve sentetik malzemeler kuru ısıyla sterilize edilemez.

Basınçlı buhar sterilizasyonu pansumanlar, cerrahi çamaşırlar, cerrahi aletler, kültür ortamları, laboratuvar cam malzemeleri, enfekte materyal ve enjeksiyon solüsyonları tabi tutulur. Malzeme kaplara (kutulara) yerleştirilir. Sterilizasyon sonrasında nemi emmesi için bix'in alt kısmına kumaş pedler yerleştirilir. Malzemenin sterilitesi 3 gün boyunca korunur. Kaplardaki ve test tüplerindeki enfekte materyal, kapaklı metal tanklarda sterilize edilir.

Basınç altında buhar sterilizasyonu otoklavda gerçekleştirilir. Tek bir tedaviyle bakterilerin hem bitkisel hem de spor formları ölür. Basınç altındaki buhar, doğal proteinler, sıvılar ve kauçuk parçalı cihazlar içeren ortamlar hariç, besin ortamlarını sterilize eder. Basit ortamlar (MPA, MPB) 120°C'de (1 atm) 20 dakika süreyle sterilize edilir. Doğal proteinler ve karbonhidratlar içeren ortamlar bu sıcaklıkta sterilize edilemez çünkü bunlar ısıtılarak kolayca değiştirilebilen maddelerdir. Karbonhidrat içeren ortamlar fraksiyonel olarak 100 0 C'de veya otoklavda 112 0 C'de (5 atm.) 10-15 dakika süreyle sterilize edilir. Çeşitli sıvılar, kauçuk hortumlu, tıkaçlı, bakteri mumlu ve filtreli cihazlar 120 0 C'de (1 atm.) 20 dakika süreyle sterilize edilir.

Enfekte materyal (test tüpleri, kaplar) özel metal kovalara veya buhar nüfuzuna uygun delikli tanklara konulur ve 126 0 C'de (1,5 atm.) 1 saat sterilize edilir. Aletler spor bakterileri ile çalıştıktan sonra da sterilize edilir.

2 sterilizasyon modu vardır:

1. Buharın antibakteriyel etkisi bitkisel formlara karşı ortaya çıktığında, bir otoklavda veya bir Koch aparatında kapağın vidası açılmış ve çıkış valfi açıkken akan buhar. Vitamin ve karbonhidrat, üre, süt, patates ve jelatin içeren ortamlar bu şekilde sterilize edilir. Tam desterilizasyon için, art arda 3 gün boyunca 20-30 dakika boyunca fraksiyonel sterilizasyon (100 0 C'de) kullanılır. Aynı zamanda sporları da öldürür.
2. Basınçlı buhar sterilizasyonu en yaygın olanıdır. etkili yöntem yoksunluk. Pansuman malzemeleri ve çarşaflar 1 atm'de sterilize edilir. 15-20 dakika, enfekte olmuş materyal 1,5-2 atm'de 20-25 dakika.

Sterilizasyon

Sterilizasyon sterilizasyondur, yani nesnelerin tamamen serbest bırakılması çevre Mikroorganizmalardan ve onların sporlarından.

Sterilizasyon çeşitli şekillerde gerçekleştirilir:

1) fiziksel (yüksek sıcaklığa maruz kalma, UV ışınları, bakteri filtrelerinin kullanımı);

2) kimyasal (çeşitli dezenfektanların, antiseptiklerin kullanımı);

3) biyolojik (antibiyotik kullanımı).

Laboratuvar uygulamalarında genellikle fiziksel sterilizasyon yöntemleri kullanılır.

Bir veya başka bir sterilizasyon yönteminin kullanılması olasılığı ve uygulanabilirliği, sterilize edilecek malzemenin özelliklerine, fiziksel ve kimyasal özelliklerine göre belirlenir.

Fiziksel yöntemler

Brülör alevinde veya alevde kalsinasyon, hem bitkisel hücreler hem de mikrobiyal sporlar öldüğü için nesnenin tamamen sterilize edildiği bir sterilizasyon yöntemidir. Tipik olarak bakteriyolojik döngüler, spatulalar, pipetler, slaytlar ve kapak camları ve küçük aletler kalsine edilir. Makas ve neşterler ısıtılarak sterilize edilmemelidir, çünkü ateşin etkisi altında kesme yüzeyi donuklaşır.

Kuru ısı sterilizasyonu

Kuru ısı veya sıcak hava ile sterilizasyon Pasteur fırınlarında (kurutma fırınları) gerçekleştirilir. Pasteur fırını, ısıya dayanıklı malzemelerden (metal ve asbest) yapılmış çift duvarlı bir dolaptır. Kabini gaz brülörleri veya elektrikli ısıtma cihazları kullanarak ısıtın. Elektrikle ısıtılan dolaplar gerekli sıcaklığı sağlamak için regülatörlerle donatılmıştır. Sıcaklığı kontrol etmek için dolabın üst duvarındaki deliğe yerleştirilmiş bir termometre bulunmaktadır.

Sıvılar (besleyici ortam, izotonik sodyum klorür çözeltisi vb.), kauçuk ve sentetik malzemelerden yapılmış ürünler, sıvılar kaynayıp döküldüğü ve kauçuk ve sentetik malzemeler eridiği için kuru ısıyla sterilize edilemez.

Kaynatarak sterilizasyon

Kaynatma, sterilize edilmiş malzemede spor olmaması koşuluyla sterilliği garanti eden bir sterilizasyon yöntemidir. Şırıngaların, aletlerin, cam ve metal kapların, kauçuk tüplerin vb. işlenmesi için kullanılır. Basınç altında buhar sterilizasyonu bir otoklavda gerçekleştirilir. Bu sterilizasyon yöntemi, sterilize edilen malzemelerin atmosferik basıncın üzerindeki doymuş su buharına maruz bırakılmasına dayanmaktadır. Bu tür bir sterilizasyon sonucunda mikroorganizmaların hem vejetatif hem de spor formları tek bir işlemle ölür. Otoklav (Şekil 12), dışarıdan metal bir mahfaza ile kaplanmış, bir kapakla hava geçirmez şekilde kapatılmış ve kazana menteşeli cıvatalarla sıkıca vidalanmış devasa bir kazandır.

Besleyici ortamın otoklavlanmasının sıcaklığı ve süresi, besin ortamını hazırlama tarifinde belirtilen bileşimlerine göre belirlenir. Örneğin, basit ortamlar (et-pepton agar, et-pepton suyu) 120 ° C'de (1 atm) 20 dakika sterilize edilir. Ancak bu sıcaklıkta, doğal proteinler, karbonhidratlar ve ısıtmayla kolaylıkla değiştirilebilen diğer maddeleri içeren ortamın sterilize edilmesi mümkün değildir. Karbonhidrat içeren ortamlar 100°C'de fraksiyonel olarak veya 112°C'de (0,5 atm) bir otoklavda 10-15 dakika süreyle sterilize edilir. Çeşitli sıvılar, kauçuk hortumlu, tapalı, bakteri mumlu ve filtreli cihazlar 120°C'de (1 atm) 20 dakika süreyle sterilize edilir.

Akan buharla sterilizasyon bir Koch aparatında gerçekleştirilir. Bu yöntem, sterilize edilen nesnenin 100° C'nin üzerindeki sıcaklıkta değiştiği durumlarda kullanılır. Üre, karbonhidrat, süt, patates, jelatin vb. içeren besin ortamları, akan buharla sterilize edilir.

Koch aparatı (kazan), dış tarafı keçe veya asbestle (ısı transferini azaltmak için) kaplanmış metal bir silindirdir. Silindir, buharın çıkması için bir delik bulunan konik bir kapakla kapatılır. Silindirin içinde suyun döküldüğü seviyeye kadar bir stand bulunmaktadır. Sterilize edilecek malzemenin yerleştirildiği standın üzerine delikli bir kova yerleştirilir. Koch aparatı gaz veya elektrik kullanılarak ısıtılır. Sterilizasyon süresi, kapağın kenarlarından ve buhar çıkışından kuvvetli buhar çıktığı andan itibaren sayılır. 30-60 dakika sterilize edin. Sterilizasyon sonunda ısıtma durdurulur. Malzeme kovasını aparattan çıkarın ve ertesi güne kadar oda sıcaklığında bırakın. Isıtma, 30-60 dakika boyunca 100° C sıcaklıkta arka arkaya 3 gün gerçekleştirilir. Bu yönteme fraksiyonel sterilizasyon denir. İlk ısıtma sırasında mikropların bitkisel formları ölür, spor formları ise korunur. Sporlar bir gün içinde çimlenmeyi ve bitkisel formlara dönüşmeyi başarır ve bunlar sterilizasyonun ikinci gününde ölür. Sporlardan bazılarının çimlenmeye vakti olmaması mümkün olduğundan malzeme 24 saat daha bekletilir ve ardından üçüncü bir sterilizasyon gerçekleştirilir. Koch aparatında akan buharla sterilizasyon gerektirmez özel kontrol, göstergeden beri uygun operasyon Cihaz hazırlanan kültür ortamının sterilitesini sağlar. Ayrıca kapak vidasız ve çıkış valfi açıkken otoklavda akan buharla da sterilize edebilirsiniz.

Ultraviyole ışınlamayla sterilizasyon

UV ışınlarıyla sterilizasyon kullanılarak gerçekleştirilir. özel kurulumlar- bakteri yok edici lambalar. UV ışınları yüksek antimikrobiyal aktiviteye sahiptir ve sadece bitkisel hücrelerin değil sporların da ölümüne neden olabilir. UV ışınlaması hastanelerde, ameliyathanelerde, çocuk kurumlarında vb. yerlerde havayı sterilize etmek için kullanılır. Mikrobiyoloji laboratuvarında, çalışmadan önce bir kutu UV ışınlarıyla işlenir.

Kimyasal yöntemler

Bu tip sterilizasyon sınırlı bir ölçüde kullanılır ve esas olarak kültür ortamının ve immünobiyolojik preparatların (aşılar ve serumlar) bakteriyel kontaminasyonunu önlemeye yarar.

Kloroform, toluen ve eter gibi maddeler çoğunlukla besin ortamına eklenir. Ortamın bu koruyucu maddelerden arındırılması gerekiyorsa, 56 ° C'lik bir su banyosunda ısıtılır (koruyucular buharlaşır).

Aşıları ve serumları korumak için mertiolat, borik asit, formaldehit vb.

Biyolojik sterilizasyon

Biyolojik sterilizasyon antibiyotik kullanımına dayanmaktadır. Bu yöntem virüs yetiştirmek için kullanılır.

B. Lyon mezbahalarında sığır peynir altı suyu üretimi için ayrıntılı teknoloji

Halihazırda 1.000 hayvandan kan alındı, serum şişelenerek 20.000'e yakın çocuğa ücretsiz olarak dağıtıldı.

Böylece gösterilmiştir ki endüstriyel üretim Peynir altı suyunun mezbahada aseptik kurallara ve sıhhi düzenlemelere uygun olarak alınması mümkündür.

Seroterapi işletmesi ek garanti sağlamaz - donör hayvanına otopsi yapma hakkı yoktur.

Üretimimizde kullanılan teknoloji, olduğundan daha az aseptik görünebilir. klasik yöntem. Ancak serumun tamamı kanın alındığı gün üretildiği için hız açısından büyük bir avantajı vardır.

Eğer mevcut koşullar bizi serumu mezbahada üretmeye yöneltmişse, bunun geçici bir önlem olduğu açıktır, çünkü hematojen ve tıbbi serumlar ancak uzmanlaşmış bir enstitüde üretilebilir.

Hayvan seçimi. Lyon'da mezbahanın baş veterineri Dr. Guier ve veteriner müfettişi Dr. Fontenay, şehrimize et sağlamak amacıyla bağışçıları hayvanlar arasından kendileri seçiyor. Seçilen hayvan daha fazla kontrolü kolaylaştırmak için sağ omzuna markalanır.

Kesimden sonra hayvanların organları titizlikle kontrol edilir. Tüberkülozun tespitinde en güvenilir yöntemin otopsi olduğu bilinmektedir.

Daha sonraki operasyonlarda hastalıklı hayvanın serumunun hiç tüketilmediği görülecektir.

Hayvanlardan kan alınması. Kan alma odasında donör boğa otomatik bir boyunduruk tarafından güvenli bir şekilde tutulur.

Veteriner hekim, hayvanın boynu seviyesinde cildi iyotla dezenfekte eder ve şah damarı bölgesinde neşterle bir kesi yapar. Venöz ponksiyon, uzun süre kaynatılarak sterilize edilmiş bir trokar ile gerçekleştirilir. Kan göründüğünde, trokarın doğrudan ve aseptik olarak defibrinatöre bağlanması için otoklavlanmış bir lastik hortum trokara bağlanır.

Defibrinatörün sterilizasyonuna yönelik defibrinasyon teknolojisi ve yöntemi aşağıda açıklanmaktadır.

Her hayvandan 8-10 litre kan alınır ve bu kan aparatın altında bulunan terazilerde tartılır.

Sterilizasyon yöntemleri

Sıhhi kontrol işlemini kolaylaştırmak için her defibrinatörde donör hayvanın verilerinin yer aldığı bir etiket bulunur.

Kan örneklemesinin, önceden sterilize edilmiş trokar, lastik hortum ve defibrinatör gibi tüm bileşenlerin kapalı devresi sayesinde aseptik olarak gerçekleştirildiğine dikkat edilmelidir.

Toplanan kan, venöz ponksiyon anından seruma dönüştürülüp buzdolaplarında saklanıncaya kadar kan alma tarihini gösteren bir etiketle birlikte bulunur.

Kan defibrilasyonu. Çoğu seroterapi kuruluşunda cam kaplara dökülen kan, yükün basıncı altında serumu ayırır. Bu koşullar altında ilk olarak sığırlardan elde edilen kan çok az miktarda (yaklaşık %10) serum içerir.

Bu nedenle Lyon'daki seroterapi merkezi kullanıyor özel teknoloji hem peynir altı suyunun %50'sini hem de daha kısa sürede verir.

Dr. Merrier, bu yöntemi kısmen Rotterdam'daki Kraliyet Enstitüsünde ve Milano'daki Seroterapötik Enstitüsünde elde ettiği bulgulardan sonra geliştirmeyi başardı.

Bu enstitülerden kan alındıktan sonra yayık görünümündeki steril makinelerde defibrinasyonu yapılıyor.

5 dakika içerisinde kan havadan korunan bir kapta toplanır. Defibrasyon süresine kesinlikle uymak gerekir: yetersizse pıhtılaşma meydana gelebilir ve çok fazla ise hemoliz meydana gelebilir (kırmızı kan hücrelerinin yırtılması nedeniyle). Defibrinasyonun tam olarak 15 dakikasını işaretlemenize olanak tanıyan bir laboratuvar saati kullanmak gerekir.

Şek. 4, Merkezin ambleminde kayıtlı olan kan alım sayısının 1000'e ulaştığını gösteriyor.

Santrifüjleme.

Defibrasyondan hemen sonra cihazlar kan alma odasından birkaç metre uzakta bulunan laboratuvara nakledilir. Hasta olduğu ortaya çıkan hayvanın serumunun çıkarılabilmesi için her bir defibrinatörün içeriği ayrı ayrı işlenir.

Defibrinasyon sonrası pıhtılaşmayan kan, Alfa Laval separatöründen (peynir altı suyu üretimi için uyarladığımız bir süt separatörü) geçirilir.

Santrifüj kuvvetinin etkisi altında kan eşit parçalara bölünür: kırmızı kısım kırmızı toplar içerir ve şeffaf kısım serumu oluşturur (fibrin, defibrinatör bıçaklarında kalır).

Bir hayvandan 8-10 litre kan veya yaklaşık 4-5 litre serum elde edilir ve 180°C'de sterilize edilmiş Pyrex şişeye dökülür.

Şişenin üzerine defibrinatör etiketi yapıştırılır ve hijyen kontrolünün sağlanması için aynı numara altında kart doldurulur.

Serumun şeffaflığını ve tadını bozmadan yeterince aktif olacak şekilde tasarlanmış özel bir antiseptik seruma eklenir. 1 litre serum için ayrıca 1:1000 formaldehit ve 1:5000 syunuxol içeren 100 ml solüsyon ekleyin.

(Hazırlıkların arasında santrifüj bir antiseptik ile iyice dezenfekte edilir.)

Prensip olarak, kanın kırmızı kısmı, kan sosisi yapmak için kasaplara iade edilmelidir, ancak çoğu zaman kullanılmadan kalır, bu nedenle aşağıda açıklanan teknoloji kullanılarak şurup hazırlanabilir.

Kan şurubu hazırlamanın özel durumları. Şurubun iki avantajı var: Serumu aldıktan sonra kalan kanın kırmızı kısmının kullanılmasını sağlıyor ve çocukların hoşuna giden hoş bir tada sahip.

Gliserin eksikliği nedeniyle şurup hazırlamak zordur. Uzun süreli depolama Ancak suda oldukça aktif bir ürün hazırlayıp çocuklara günde 2-3 yemek kaşığı verebilirsiniz. Kanın kırmızı kısmına %20 ekleyin içme suyu ve sıhhi kontrol yapılırken şurubu buzullarda saklayın.

Sonra Ekle eşit bir kısım%100 şeker şurubu (şurup yapılacak grupların kartlarından şeker elde edilebilir).

Şuruba kanın tadını nötralize etmek için limon veya portakal özütü eklenir ve 250 ml'lik şişelere dökülür.

Peynir altı suyunun Tyndallizasyonu.

Santrifüjlemenin hemen ardından, yani kanın alınmasından bir saatten az bir süre sonra serum, bir saat süreyle 56°C'de parçalanır.

Bunu yapmak için sıcaklığı otomatik olarak muhafaza edilen bir su banyosuna indirilir. Bu sıcaklıkta Tyndalizasyon (peynir altı suyunun daha yüksek bir sıcaklıkta pıhtılaşması) peynir altı suyunun kısmi sterilizasyonu için gereklidir, ancak hazırlanma hızı başlı başına bir asepsi garantisidir.

Her beş litrelik şişenin orijinal defibrinatör etiketiyle donatıldığına, dolayısıyla serum numaralandırmasının donör hayvanların numaralandırmasına karşılık geldiğine dikkat edilmelidir.

Kontrol kartı dosyası. Kart, istediğiniz zaman donör hayvanın kökenini, peynir altı suyu hazırlama aşamalarını, şişeleme tarihini ve peynir altı suyunun dağıtımını kontrol etmenize olanak tanır.

Sıhhi kontrol. Kaplar soğutma odasında saklanırken, veteriner müfettişler donör hayvanların sıhhi kontrolüyle ilgileniyor. Kesimlerinin ardından tüberkülozun en ufak belirtilerini ortaya çıkarmak için kapsamlı bir otopsi yapılır.

Eğer bir hastalık tespit edilirse ilgili serum kolaylıkla geri çekilebilir. Her hayvanın kanının ayrı ayrı işlendiği ve serumun ayrı, numaralı şişelerde muhafaza edildiği bilinmektedir.

Seroterapi merkezi Kamu Komitesi Lyon mezbahalarında çocukluk hijyeni

Kontrol numarası …

Litre cinsinden sığır peynir altı suyu

Kart ve etiket

Yukarıdaki kart ve etiket herhangi bir karışıklığı önler.

Lyon'da, hayvanların seçimi, kan alınması ve etin kontrol edilmesinin aynı veteriner hekimler tarafından yapılması nedeniyle hijyen tedbirleri özellikle katıdır.

Ekipmanın sterilizasyonu. Hayvan serumu mikroplar için mükemmel bir üreme alanıdır ve yalnızca kısmen sterilize edilebilir. 56°'nin üzerindeki sıcaklıklarda güçlü bir antiseptik eklenirse pıhtılaşır ve bulanıklaşır. Bu nedenle tüm serum üretim işlemleri sırasında maksimum sterilite gereklidir; ekipman kullanımdan önce dekontamine edilmelidir.

Bireysel defibrinatörler şu şekilde sterilize edilir: Kan alınmadan önceki gece antiseptik solüsyonla doldurulur ve kan alınmadan birkaç saat önce cihazın alt kısmında bulunan bir musluk kullanılarak antiseptik boşaltılır. Serum üretmek için kullanılan santrifüjler, her defibrinatörün içeriğinin işlenmesi arasında da bir antiseptik ile muamele edilir.

Peynir altı suyunu depolamak için kullanılan beş litrelik kaplar da dahil olmak üzere tüm cam eşyalar, 180°C sıcaklıkta elektrikli bir fırında sterilize edilir.

250 ml'lik serum şişeleri de 180°C'de sterilize edilir. İşlemi kolaylaştırmak için tabaklar, şişeleme ve halka dağıtım sırasında kullanılan kutulara yerleştiriliyor.

Voskresensk'e çiçek teslimatı

Sterilizasyon fiziksel, kimyasal, mekanik ve biyolojik yöntemlerle ve çeşitli yöntemlerle temsil edilir.

Belirli bir sterilizasyon yönteminin ve yöntemlerinin kullanılmasının uygulanabilirliği, sterilize edilecek malzemenin özelliklerine, fiziksel ve kimyasal özelliklerine bağlıdır.

Sterilizasyonun süresi, sterilize edilen nesneye, sterilizasyon maddesine ve dozuna, ortamın sıcaklığına ve nemine bağlıdır.

Fiziksel sterilizasyon yöntemi

Fiziksel sterilizasyon yönteminin yöntemleri arasında kurutma, yakma ve kalsinasyon, kaynatma, pastörizasyon ve tindalizasyon, sıcak hava (kuru ısı), ultrason, ultraviyole ve radyoaktif radyasyon, yüksek frekanslı akım, güneş ışığı bulunur.

Yüksek sıcaklıklara maruz kalabilecek eşyaların sterilize edilmesinde en yaygın yöntem ateş, sıcak hava ve basınç altında doymuş buharla sterilizasyondur.

Ateş, hiçbir değeri temsil etmeyen enfekte nesneleri (gereksiz kağıtlar, eski duvar kağıtları, paçavralar, çöpler) yakmak, tüberküloz hastalarının balgamını, özellikle hastalıktan ölen insan ve hayvanların cesetlerini dezenfekte etmek için kullanılır. tehlikeli enfeksiyonlar yanı sıra çeşitli nesneleri yakmak ve kalsine etmek için.

Yakma ve kalsinasyon, mikrobiyolojik uygulamalarda aletlerin, laboratuvar ve farmasötik cam eşyaların dezenfeksiyonunda yaygın olarak kullanılmaktadır.

Brülör alevinde veya alevde kalsinasyon, bitkisel hücreler, kistler ve mikroorganizma sporları öldükçe nesnenin tamamen sterilize edildiği bir sterilizasyon yöntemidir.

Tipik olarak özeler, spatulalar, pipetler, lamlar ve lameller, küçük aletler ve diğer kontamine öğeler, eğer kaynatılamazlarsa, kalsinasyonla sterilize edilir. Ateşe maruz kaldığında kesme yüzeyi matlaşacağından makas ve neşterlerin ısıtılarak sterilize edilmesi önerilmez.

Tıbbi uygulamada kullanılan en basit ve en yaygın fiziksel sterilizasyon yöntemlerinden biri sıcak hava sterilizasyonudur (kuru ısı). Kuru ısı sterilizasyonu kurutma fırınlarında (Pastör fırınları) gerçekleştirilir. Kuru sıcak havanın bakteri yok edici, virüs yok edici, spor öldürücü etkisi vardır ve esas olarak cam ürünlerin (laboratuar) sterilizasyonu için kullanılır. tabaklar - bardaklar Petri şişeleri, pipetler, test tüpleri vb.) yanı sıra basınç altında buharla sterilize edilebilen metal ürünler.

Ek olarak, kuru ısı, porselen ve ısıya dayanıklı maddelerden (talk, beyaz kil) ve minerallerden yapılmış eşyaları sterilize etmek için kullanılır. sebze yağları, yağlar, vazelin, lanolin, balmumu. Bitkisel formların ve sporların ölümünü sağlayan bu sterilizasyon yöntemi için en etkili mod, 160 - 180 derece sıcaklıkta 15 dakika süreyle uygulanan sıcaklıktır.

Sıvılar kaynayıp döküldüğü ve kauçuk ve sentetik malzemeler eridiği için gıda maddelerini, izotonik solüsyonu veya kauçuk ve sentetik malzemelerden yapılmış eşyaları kuru ısıyla sterilize edemezsiniz.

Sterilizasyon doymuş buhar basınç altında - bu, pansumanları, suyu ve bazılarını sterilize etmenin en güvenilir ve en sık denenen yöntemidir. ilaçlar, besin ortamı, yumuşak ekipman, aletlerin yanı sıra atıkla kirlenmiş malzemenin dezenfeksiyonu için.

Cerrahi uygulamada ameliyat edilen hastanın pansumanları, cerrah önlükleri ve iç çamaşırları otoklavlarda buhar kullanılarak dezenfekte edilmektedir. Basınç altında buhar sterilizasyonu özel cihazlarda - otoklavlarda gerçekleştirilir.

Otoklavlama tüm mikroorganizmaları ve sporları tamamen yok eder. Buhar basınçlı sterilizasyon yöntemi, malzemenin atmosferik basıncın üzerindeki basınç altında doymuş su buharı ile ısıtılmasına dayanmaktadır. Yüksek sıcaklık ve buharın birleşik etkisi bu yöntemi özellikle etkili kılar. Bu durumda hem bitkisel hücreler hem de mikrobiyal sporlar ölür.

Mikrobiyal sporlar doymuş su buharının etkisi altında 10 dakika içinde ölür ve bitkisel formlar 1 ila 4 dakika içinde ölür.

Doymuş buharın yüksek bakteri öldürücü gücü, basınç altındaki su buharının etkisi altında mikrobiyal hücre proteinlerinin şişmesi ve pıhtılaşması ve bunun sonucunda mikrobiyal hücrelerin ölmesidir.

Doymuş su buharının bakteri yok edici etkisi aşırı basınçla artar.

Otoklavda sterilizasyon farklı modlarda gerçekleştirilir.

Böylece basit besin ortamları (et - pepton agar ve et - pepton suyu) 120 derecede (1 atm.) 20 dakika sterilize edilir. Ancak bu modda proteinler, karbonhidratlar ve ısıtılarak kolayca değiştirilebilen diğer maddeleri içeren ortamları sterilize etmek mümkün değildir.

Karbonhidrat içeren ortamlar otoklavda 0,5 atm'de sterilize edilir. 10 – 15 dakika veya kademeli olarak akan buhar.

Yüksek sıcaklık kullanarak, yalnızca dezenfekte edilen nesnelerin yüzeyinde değil, aynı zamanda derinliklerinde de patojenik mikroorganizmaların en kalıcı formlarını (spor oluşturanlar dahil) yok edebilirsiniz.

Bu, güvenilir bir sterilizasyon aracı olarak yüksek sıcaklığın büyük avantajıdır. Ancak bazı eşyalar yüksek sıcaklığın etkisi altında bozulur ve bu durumlarda başka dezenfeksiyon yöntem ve yöntemlerine başvurmak gerekir.

Sterilize edilemeyen malzeme ve eşyaların tamamen sterilizasyonu Yüksek sıcaklık 100 dereceyi aşmayan bir sıcaklıkta bir Koch aparatında su buharı ile tekrarlanan sterilizasyon ile elde edilir. Bu yönteme fraksiyonel sterilizasyon denir. Geriye kalan öldürülmemiş mikrop spor formlarının, 37 derecelik bir termostatta bir gün sonra, bitkisel hücrelere filizlendiği ve bunların ölümü, bu nesnenin akan buharla daha sonra sterilizasyonu sırasında meydana geldiği gerçeğine indirgeniyor.

Sıvı buharla muamele 30-40 dakika boyunca üç kez gerçekleştirilir. Malzemenin 100 derecenin altındaki sıcaklıkta bir kez ısıtılmasına pastörizasyon denir. Pastörizasyon Pasteur tarafından önerilmiştir ve esas olarak spor olmayan mikroorganizmaların yok edilmesi amaçlanmaktadır. Pastörizasyon 60 - 70 derecede 15 - 30 dakika, 80 derecede 10 - 15 dakika gerçekleştirilir.

Mikrobiyolojik uygulamalarda pastörizasyon tohum malzemesi sıklıkla spor oluşturan mikroorganizmaların saf kültürlerini izole etmek ve mikroorganizmaların spor oluşturma yeteneklerini belirlemek için kullanılır.

Yüksek sıcaklıklara maruz kaldığında tadı ve diğer değerli niteliklerini kaybeden sıvılar için (süt, meyve ve meyve suları, bira, karbonhidrat veya üre içeren besin ortamları vb.), akan buharla sterilizasyon 15 - 50 - 60 derecede gerçekleştirilir. 33333330 dakika veya 70 - 80 derecede 5 - 10 dakika. Bu durumda ortalama dirençli mikroplar ölür, daha dirençli mikroplar ve sporlar korunur.

60 derecede 1 saat süreyle fraksiyonel 5-6 kat sterilizasyona tyndalizasyon denir.

Pek çok tıbbi ürün polimer malzemeler, sterilizasyona dayanmaz buhar yöntemi genel kabul görmüş modlara göre. Pek çok ürünün, içerdikleri sıvıların (koruyucular, ilaçlar ve diğer ürünler) özelliklerinden dolayı, genel kabul görmüş yöntem ve yöntemler kullanılarak sterilize edilmesi mümkün değildir. Bu tür ürünler için, nesnelerin güvenilir bir şekilde sterilizasyonunu sağlamak amacıyla bireysel sterilizasyon rejimleri geliştirilmiştir.

Böylece kanı fraksiyonlara ayırmak için rotorun sterilizasyonu 120 derece sıcaklıkta 45 dakika su buharı ile gerçekleştirilir.

Koruyucu kapların sterilitesi 110 derecede 60 dakika süreyle sağlanır.

Kaynatma, yeniden kullanılabilen şırıngaların, cerrahi aletlerin, kauçuk tüplerin, cam ve metal mutfak eşyalarının sterilizasyonu için kullanılan bir sterilizasyon yöntemidir.

Sterilizatörlerde kaynatılarak sterilizasyon yapılır. Kaynayan suda oluşan sporlar 20-30 dakika sonra ölür. 45 dakika kaynatma, salgıları ve diğer bulaşıcı malzemeleri, çamaşırları, tabakları, oyuncakları ve hasta bakım malzemelerini dezenfekte etmek için yaygın olarak kullanılır.

Sıcak su (60 - 100 derece) ile deterjanlar yıkamak ve temizlemek için kullanılır mekanik kaldırma kirleticiler ve mikroorganizmalar.

Bitkisel hücrelerin çoğu 70 derecede 30 dakika sonra ölür.

Filtrasyon sterilizasyonu, substratların ısınmaya dayanamadığı durumlarda, özellikle proteinler, serumlar, bazı antibiyotikler, vitaminler ve uçucu maddeler içeren ortamlar için kullanılır. Bu teknik, bir kültür sıvısının mikrobiyal hücrelerden arındırılması ancak içerdiği tüm metabolik ürünlerin değişmeden korunması gerektiğinde sterilize edilmesi için oldukça yaygın olarak kullanılır.

Yöntem, sıvıların ince gözenekli bölmelere sahip olan ve dolayısıyla mikrobiyal hücreleri tutan özel filtrelerden filtrelenmesini içerir.

En yaygın kullanılan iki filtre türü membran filtreler ve Seitz filtreleridir.

Membran filtreler kolodyum, asetat, selüloz ve diğer malzemelerden hazırlanır.

Seitz filtreleri asbest ve selüloz karışımından yapılır.

Ek olarak, sterilizasyon için kuvars kumu, infüzör toprağı ve diğer malzemelerin (Chamberlan, Berkfeld'in "mumları") karışımıyla kaolinden yapılmış filtreler kullanılır.

Membran ve asbest filtreleri tek kullanımlık olarak tasarlanmıştır.

Ultraviyole ışınlama ile bakteri yok edici etki, kaynağı bakteri yok edici lambalar olan 200 - 450 nm uzunluğunda ışınlar tarafından sağlanır.

Sterilizasyon bakteri yok edici lambalar kullanılarak gerçekleştirilir. ultraviyole ışınlarşifalı hava önleyici kurumlar, mikrobiyoloji laboratuvarlarının kutuları, işletmelerde Gıda endüstrisi aşı ve serum üretimine yönelik kutularda, ameliyathanelerde, manipülasyon odalarında, çocuk kurumlarında vb.

Ultraviyole ışınları yüksek antimikrobiyal aktiviteye sahiptir ve sadece bitkisel hücrelerin değil, aynı zamanda sporlarının da ölümüne neden olabilir.

Güneş ışığının etkisi sonucu mikroorganizmaların ölümüne neden olur ultraviyole ışınlama ve kurutma.

Güneş ışığı ile kurutmanın birçok mikroorganizma türü üzerinde zararlı etkisi vardır ancak etkisi yüzeyseldir ve bu nedenle güneş ışığı sterilizasyon uygulamasında destekleyici rol oynar.

İÇİNDE Son zamanlarda yara ve yanıkların tedavisinde sentetik ve doğal polimerlerden jel formunda yapılan kaplamalar kullanılmaktadır.

Polimer antiseptik filmler yara ve yanıkların lokal tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Katapol, dioksidin, mavi iyot gibi geniş spektrumlu antimikrobiyal ajanların yanı sıra glutaraldehit içeren sorbitol içerirler. Bu filmleri sterilize etmek için kullanılır iyonlaştırıcı radyasyon 20.0 kGy dozunda. Polimer antiseptik filmlerin ve sorbentlerin endüstriyel üretimi sırasında, bu sterilizasyon rejimi altında sterillikleri tamamen sağlanır.

Radyoaktif radyasyon hem bitkisel hem de spor formdaki her türlü mikroorganizmayı öldürür. Steril ürünler ve steril tek kullanımlık tıbbi cihazlar üreten işletmelerde sterilizasyon, dezenfeksiyon amacıyla yaygın olarak kullanılmaktadır. Atıksu ve hayvansal kökenli hammaddeler.

Mekanik sterilizasyon yöntemi

Mekanik sterilizasyon yöntemleri mikropları nesnelerin yüzeyinden uzaklaştırır. Bunlar; yıkama, silkeleme, süpürme, ıslak silme, havalandırma, havalandırma, elektrik süpürgesiyle süpürme, yıkamadır.

Kimyasal sterilizasyon yöntemi

Plastikler artık tıbbi uygulamalarda giderek daha fazla kullanılıyor.

Diş hekimliğinde, çene-yüz cerrahisinde, travmatolojide, ortopedide ve cerrahide kullanılırlar. Çoğu plastik, basınç altında buhar ve kuru ısı (kuru ısıtılmış hava) ile yapılan ısı sterilizasyon yöntemlerine dayanamaz. Bu tür nesneleri sterilize etmek için kullanılan alkol, dioksit ve üçlü çözeltiden oluşan çözeltiler, işlenen ürünlerin sterilliğini garanti etmez.

Bu nedenle plastik ürünleri sterilize etmek için gaz ve radyasyon yöntemlerinin yanı sıra kimyasal çözeltiler kullanılmaktadır.

Termolabil malzemelerden yapılmış çok sayıda ürünün tıbbi kurumların uygulamasına girmesi radyasyonun girişine katkıda bulunur, gaz yöntemleri dezenfektan solüsyonları ile dezenfeksiyon ve sterilizasyon.

Şu tarihte: kimyasal sterilizasyonçeşitli kimyasal gruplardan (peroksit, fenolik, halojen içeren, aldehitler, alkaliler ve asitler, yüzey aktif maddeler vb.) gazlar ve ajanlar kullanır. Günlük kullanım için, bileşimlerine çeşitli kimyasalların eklenmesi nedeniyle antimikrobiyal etkiye sahip deterjanlar, temizlik, ağartma ve diğer müstahzarlar üretilmektedir.

Bu preparatlar sıhhi tesisatların temizlenmesi ve dezenfeksiyonu için kullanılır. teknik ekipman, tabaklar, çarşaflar vb.

Formaldehit buharı (buhar formu) kullanılabilir tıbbi kurumlar sterilizasyon için metal ürünleri tıbbi amaçlar için (neşter, iğneler, cımbız, sondalar, kelepçeler, kancalar, tel kesiciler vb.).

Formaldehit buharı ile sterilizasyondan önce ürünler, ön sterilizasyon temizliğine tabi tutulmalı ve iyice kurutulmalıdır.

Herhangi bir şekilde sterilize edildiğinde kimyasal olarak Belirli bir nesnenin işlenmesine ilişkin düzenlemeler, dezenfekte edilen nesnenin özelliklerine, mikropların direncine ve özelliklerinin özelliklerine bağlıdır. kimyasal hazırlık, ortam sıcaklığı, nem ve diğer faktörler.

Böylece, metal aletlerin sterilitesi, en az 20 derecelik bir sıcaklıkta ve% 95-98 bağıl nemde buharla kapalı bir odada beş saatlik depolamadan sonra elde edilir; 15 derecelik bir sıcaklıkta, bu nesnelerin tamamen sterilliği ancak 16 saat sonra elde edilir.

Glutaraldehitin sporisidal aktivitesi sıcaklığa bağlıdır. Optimum etkisi 15 - 25 derecelik bir sıcaklıkta gerçekleşir. Sıcaklık arttıkça bu ilacın sporisidal aktivitesi azalır.

Sterilizasyon kimyasal yöntem Kullanımı biraz sınırlıdır. Çoğu zaman bu yöntem, kültür ortamının ve immünobiyolojik preparatların (aşılar ve serumlar) bakteriyel kontaminasyonunu önlemek için kullanılır. Kloroform, toluen ve eter gibi maddeler çoğunlukla besin ortamına eklenir. Ortamın bu koruyucu maddelerden arındırılması gerekiyorsa 56 derecelik su banyosunda ısıtılır ve koruyucu maddeler buharlaştırılır.

Aşıların veya serumların korunması için mertiolat kullanılır, borik asit, formalin.

Biyolojik sterilizasyon yöntemi

Biyolojik sterilizasyon antibiyotik kullanımına dayanmaktadır.

Bu yöntem virüslerin yetiştirilmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır.

Sterilizasyon (Latince sterilis'ten - steril), işlenen nesneler üzerindeki mikropların tamamen etkisiz hale getirilmesini içerir.

Pasteur fırını - kuru ısı sterilizasyonu.

Üç ana sterilizasyon yöntemi vardır: ısı, radyasyon, kimyasal.

İyot.

Isı sterilizasyonu mikropların yüksek sıcaklığa duyarlılığına dayanır.

60 °C'de ve suyun varlığında, enzimler de dahil olmak üzere proteinlerin denatürasyonu meydana gelir ve bunun sonucunda mikropların bitkisel formları ölür. Çok az miktarda bağlı su içeren ve yoğun kabuklu sporlar 160-170 °C'de inaktive edilir. Isı sterilizasyonu için esas olarak kuru ısı ve basınç altında buhar kullanılır.
Kuru ısıyla sterilizasyon, kuru ısı fırınlarında veya Pasteur fırınlarında gerçekleştirilir. Pasteur fırını, elektrikle ısıtılan ve bir termometre ile donatılmış, sıkıca kapatılmış metal bir dolaptır.

İçerisindeki malzemenin dezenfeksiyonu 160-170 °C'de 60-120 dakika süreyle gerçekleşir. Bu yöntemin dezavantajı, yalnızca laboratuvar camı gibi bazı sterilize edilebilir nesnelerin bu kadar yüksek sıcaklıklara dayanabilmesidir.
Sterilizasyonun en evrensel yöntemi, pansumanların, çamaşırların, birçok aletin, kültür ortamının, solüsyonların, bulaşıcı materyalin vb. sterilize edildiği otoklavlarda basınç altında buhar tedavisidir.

Otoklav, su buharı ve sterilizasyon odasından oluşan, hava geçirmez şekilde kapatılmış, güçlü duvarlara sahip metal bir silindirdir. Cihaz bir manometre, termometre ve diğer izleme cihazlarıyla donatılmıştır. Otoklavda artan basınç yaratılır ve bu da suyun kaynama noktasının artmasına neden olur. Yani 0,5 atm'de kaynama noktası 80 °C, 1 atm'de - 100 °C, 2 atm'de - 121 °C ve 3 atm'de - 136 °C'dir.

Yüksek sıcaklığa ek olarak buharın mikroorganizmalara etki etmesi nedeniyle sporlar zaten 120 ° C'de ölür. En yaygın otoklav çalışma modu 2 atm, 121 °C, 15-20 dakikadır. Sterilizasyon süresi arttıkça azalır atmosferik basınç ve dolayısıyla kaynama noktası. Mikroorganizmalar birkaç saniye içinde ölür, ancak malzeme daha uzun süre işlenir, çünkü ilk olarak sterilize edilen malzemenin içindeki sıcaklığın yüksek olması gerekir ve ikinci olarak, sıcaklıktan olası sapma için tasarlanmış sözde bir güvenlik alanı vardır. Otoklav işlemi sırasında belirtilen parametreler.

Etiketler: vücut, büyüme, sterilizasyon, enzim