Pastör fırını. Yüksek sıcaklıkta sterilizasyon. Malzeme ve sterilizasyon modu

Sterilizasyon

Sterilizasyon sterilizasyondur, yani nesnelerin tamamen serbest bırakılması çevre Mikroorganizmalardan ve onların sporlarından.

Sterilizasyon çeşitli şekillerde gerçekleştirilir:

1) fiziksel (yüksek sıcaklığa maruz kalma, UV ışınları, bakteri filtrelerinin kullanımı);

2) kimyasal (çeşitli dezenfektanların, antiseptiklerin kullanımı);

3) biyolojik (antibiyotik kullanımı).

Laboratuvar uygulamalarında genellikle fiziksel sterilizasyon yöntemleri kullanılır.

Bir veya başka bir sterilizasyon yönteminin kullanılması olasılığı ve uygulanabilirliği, sterilize edilecek malzemenin özelliklerine, fiziksel ve kimyasal özelliklerine göre belirlenir.

Fiziksel yöntemler

Brülör alevinde veya alevde kalsinasyon, hem bitkisel hücreler hem de mikrobiyal sporlar öldüğü için nesnenin tamamen sterilize edildiği bir sterilizasyon yöntemidir. Tipik olarak bakteriyolojik döngüler, spatulalar, pipetler, slaytlar ve kapak camları ve küçük aletler kalsine edilir. Makas ve neşterler ısıtılarak sterilize edilmemelidir, çünkü ateşin etkisi altında kesme yüzeyi donuklaşır.

Kuru ısı sterilizasyonu

Kuru ısı veya sıcak hava ile sterilizasyon Pasteur fırınlarında (kurutma) yapılır. kuru ısıtmalı fırınlar). Pasteur fırını, ısıya dayanıklı malzemelerden (metal ve asbest) yapılmış çift duvarlı bir dolaptır. Kabini bununla ısıtın gaz brülörleri veya elektrikli ısıtma cihazları. Elektrikle ısıtılan dolaplar gerekli sıcaklığı sağlamak için regülatörlerle donatılmıştır. Sıcaklığı kontrol etmek için dolabın üst duvarındaki deliğe yerleştirilmiş bir termometre bulunmaktadır.

Sıvılar (besleyici ortam, izotonik sodyum klorür çözeltisi vb.), kauçuk ve sentetik malzemelerden yapılmış ürünler, sıvılar kaynayıp döküldüğü ve kauçuk ve sentetik malzemeler eridiği için kuru ısıyla sterilize edilemez.

Kaynatarak sterilizasyon

Kaynatma, sterilize edilmiş malzemede spor olmaması koşuluyla sterilliği garanti eden bir sterilizasyon yöntemidir. Alet şırıngalarının, camın ve metal mutfak eşyaları kauçuk tüpler vb. Basınç altında buhar sterilizasyonu bir otoklavda gerçekleştirilir. Bu sterilizasyon yöntemi, sterilize edilen malzemelerin atmosferik basıncın üzerindeki doymuş su buharına maruz bırakılmasına dayanmaktadır. Bu tür bir sterilizasyon sonucunda mikroorganizmaların hem vejetatif hem de spor formları tek bir işlemle ölür. Otoklav (Şekil 12), dışarıdan metal bir mahfaza ile kaplanmış, bir kapakla hava geçirmez şekilde kapatılmış ve kazana menteşeli cıvatalarla sıkıca vidalanmış devasa bir kazandır.

Besleyici ortamın otoklavlanmasının sıcaklığı ve süresi, besin ortamını hazırlama tarifinde belirtilen bileşimlerine göre belirlenir. Örneğin, basit ortamlar (et-pepton agar, et-pepton suyu) 120 ° C'de (1 atm) 20 dakika sterilize edilir. Ancak bu sıcaklıkta, doğal proteinler, karbonhidratlar ve ısıtmayla kolaylıkla değiştirilebilen diğer maddeleri içeren ortamın sterilize edilmesi mümkün değildir. Karbonhidrat içeren ortamlar 100°C'de fraksiyonel olarak veya 112°C'de (0,5 atm) bir otoklavda 10-15 dakika süreyle sterilize edilir. Çeşitli sıvılar, kauçuk hortumlu, tapalı, bakteri mumlu ve filtreli cihazlar 120°C'de (1 atm) 20 dakika süreyle sterilize edilir.

Akan buharla sterilizasyon bir Koch aparatında gerçekleştirilir. Bu yöntem, sterilize edilen nesnenin 100° C'nin üzerindeki sıcaklıkta değiştiği durumlarda kullanılır. Üre, karbonhidrat, süt, patates, jelatin vb. içeren besin ortamları, akan buharla sterilize edilir.

Koch aparatı (kazan), dış tarafı keçe veya asbestle (ısı transferini azaltmak için) kaplanmış metal bir silindirdir. Silindir, buharın çıkması için bir delik bulunan konik bir kapakla kapatılır. Silindirin içinde suyun döküldüğü seviyeye kadar bir stand bulunmaktadır. Sterilize edilecek malzemenin yerleştirildiği standın üzerine delikli bir kova yerleştirilir. Koch aparatı gaz veya elektrik kullanılarak ısıtılır. Sterilizasyon süresi, kapağın kenarlarından ve buhar çıkışından kuvvetli buhar çıktığı andan itibaren sayılır. 30-60 dakika sterilize edin. Sterilizasyon sonunda ısıtma durdurulur. Malzeme kovasını aparattan çıkarın ve oda sıcaklığı ertesi güne kadar. Isıtma, 30-60 dakika boyunca 100° C sıcaklıkta arka arkaya 3 gün gerçekleştirilir. Bu yönteme fraksiyonel sterilizasyon denir. İlk ısıtma sırasında mikropların bitkisel formları ölür, spor formları ise korunur. Sporlar bir gün içinde çimlenmeyi ve bitkisel formlara dönüşmeyi başarır ve bunlar sterilizasyonun ikinci gününde ölür. Sporlardan bazılarının çimlenmeye vakti olmaması mümkün olduğundan malzeme 24 saat daha bekletilir ve ardından üçüncü bir sterilizasyon gerçekleştirilir. Koch aparatında akan buharla sterilizasyon gerektirmez özel kontrolÇünkü hazırlanan besin ortamının sterilliği cihazın doğru çalıştığının bir göstergesidir. Ayrıca kapak vidasız ve çıkış valfi açıkken otoklavda akan buharla da sterilize edebilirsiniz.

Ultraviyole ışınlamayla sterilizasyon

UV ışınlarıyla sterilizasyon kullanılarak gerçekleştirilir. özel kurulumlar- bakteri yok edici lambalar. UV ışınları yüksek antimikrobiyal aktiviteye sahiptir ve sadece bitkisel hücrelerin değil sporların da ölümüne neden olabilir. UV ışınlaması hastanelerde, ameliyathanelerde, çocuk kurumlarında vb. yerlerde havayı sterilize etmek için kullanılır. Mikrobiyoloji laboratuvarında, çalışmadan önce bir kutu UV ışınlarıyla işlenir.

Kimyasal yöntemler

Bu tip sterilizasyon sınırlı bir ölçüde kullanılır ve esas olarak kültür ortamının ve immünobiyolojik preparatların (aşılar ve serumlar) bakteriyel kontaminasyonunu önlemeye yarar.

Kloroform, toluen ve eter gibi maddeler çoğunlukla besin ortamına eklenir. Ortamın bu koruyucu maddelerden arındırılması gerekiyorsa, 56 ° C'lik bir su banyosunda ısıtılır (koruyucular buharlaşır).

Aşıları ve serumları korumak için mertiolat, borik asit, formaldehit vb.

Biyolojik sterilizasyon

Biyolojik sterilizasyon antibiyotik kullanımına dayanmaktadır. Bu yöntem virüs yetiştirmek için kullanılır.

B. Lyon mezbahalarında sığır peynir altı suyu üretimi için ayrıntılı teknoloji

Halihazırda 1.000 hayvandan kan alındı, serum şişelenerek 20.000'e yakın çocuğa ücretsiz olarak dağıtıldı.

Böylece gösterilmiştir ki endüstriyel üretim Peynir altı suyunun mezbahada aseptik kurallara ve sıhhi düzenlemelere uygun olarak alınması mümkündür.

Seroterapi işletmesi ek garanti sağlamaz - donör hayvanına otopsi yapma hakkı yoktur.

Üretimimizde kullanılan teknoloji, olduğundan daha az aseptik görünebilir. klasik yöntem. Ancak serumun tamamı kanın alındığı gün üretildiği için hız açısından büyük bir avantajı vardır.

Eğer mevcut koşullar bizi serumu mezbahada üretmeye yöneltmişse, bunun geçici bir önlem olduğu açıktır, çünkü hematojen ve tıbbi serumlar ancak uzmanlaşmış bir enstitüde üretilebilir.

Hayvan seçimi. Lyon'da mezbahanın baş veterineri Dr. Guier ve veteriner müfettişi Dr. Fontenay, şehrimize et sağlamak amacıyla bağışçıları hayvanlar arasından kendileri seçiyor. Seçilen hayvan daha fazla kontrolü kolaylaştırmak için sağ omzuna markalanır.

Kesimden sonra hayvanların organları titizlikle kontrol edilir. Tüberkülozun tespitinde en güvenilir yöntemin otopsi olduğu bilinmektedir.

Daha sonraki operasyonlarda hastalıklı hayvanın serumunun hiç tüketilmediği görülecektir.

Hayvanlardan kan alınması. Kan alma odasında donör boğa otomatik bir boyunduruk tarafından güvenli bir şekilde tutulur.

Veteriner hekim, hayvanın boynu seviyesinde cildi iyotla dezenfekte eder ve şah damarı bölgesinde neşterle bir kesi yapar. Venöz ponksiyon, uzun süre kaynatılarak sterilize edilmiş bir trokar ile gerçekleştirilir. Kan göründüğünde, trokarın doğrudan ve aseptik olarak defibrinatöre bağlanması için otoklavlanmış bir lastik hortum trokara bağlanır.

Defibrinatörün sterilizasyonuna yönelik defibrinasyon teknolojisi ve yöntemi aşağıda açıklanmaktadır.

Her hayvandan 8-10 litre kan alınır ve bu kan aparatın altında bulunan terazilerde tartılır.

Sterilizasyon yöntemleri

Sıhhi kontrol işlemini kolaylaştırmak için her defibrinatörde donör hayvanın verilerinin yer aldığı bir etiket bulunur.

Tüm cihazların kapalı devresi nedeniyle kan örneklemesinin aseptik olarak yapıldığına dikkat edilmelidir. bileşenler: önceden sterilize edilmiş trokar, lastik hortum ve defibrinatör.

Toplanan kan, venöz ponksiyon anından seruma dönüştürülüp buzdolaplarında saklanıncaya kadar kan alma tarihini gösteren bir etiketle birlikte bulunur.

Kan defibrilasyonu. Çoğu seroterapi kuruluşunda cam kaplara dökülen kan, yükün basıncı altında serumu ayırır. Bu koşullar altında ilk olarak sığırlardan elde edilen kan çok az miktarda (yaklaşık %10) serum içerir.

Bu nedenle Lyon'daki seroterapi merkezi kullanıyor özel teknoloji hem peynir altı suyunun %50'sini hem de daha kısa sürede verir.

Dr. Merrier, bu yöntemi kısmen Rotterdam'daki Kraliyet Enstitüsünde ve Milano'daki Seroterapötik Enstitüsünde elde ettiği bulgulardan sonra geliştirmeyi başardı.

Bu enstitülerden kan alındıktan sonra yayık görünümündeki steril makinelerde defibrinasyonu yapılıyor.

5 dakika içerisinde kan havadan korunan bir kapta toplanır. Defibrasyon süresine kesinlikle uymak gerekir: yetersizse pıhtılaşma meydana gelebilir ve çok fazla ise hemoliz meydana gelebilir (kırmızı kan hücrelerinin yırtılması nedeniyle). Defibrinasyonun tam olarak 15 dakikasını işaretlemenize olanak tanıyan bir laboratuvar saati kullanmak gerekir.

Şek. 4, Merkezin ambleminde kayıtlı olan kan alım sayısının 1000'e ulaştığını gösteriyor.

Santrifüjleme.

Defibrasyondan hemen sonra cihazlar kan alma odasından birkaç metre uzakta bulunan laboratuvara nakledilir. Hasta olduğu ortaya çıkan hayvanın serumunun çıkarılabilmesi için her bir defibrinatörün içeriği ayrı ayrı işlenir.

Defibrinasyon sonrası pıhtılaşmayan kan, Alfa Laval separatöründen (peynir altı suyu üretimi için uyarladığımız bir süt separatörü) geçirilir.

Santrifüj kuvvetinin etkisi altında kan eşit parçalara bölünür: kırmızı kısım kırmızı toplar içerir ve şeffaf kısım serumu oluşturur (fibrin, defibrinatör bıçaklarında kalır).

Bir hayvandan 8-10 litre kan veya yaklaşık 4-5 litre serum elde edilir ve 180°C'de sterilize edilmiş Pyrex şişeye dökülür.

Şişenin üzerine defibrinatör etiketi yapıştırılır ve hijyen kontrolünün sağlanması için aynı numara altında kart doldurulur.

Serumun şeffaflığını ve tadını bozmadan yeterince aktif olacak şekilde tasarlanmış özel bir antiseptik seruma eklenir. 1 litre serum için ayrıca 1:1000 formaldehit ve 1:5000 syunuxol içeren 100 ml solüsyon ekleyin.

(Hazırlıkların arasında santrifüj bir antiseptik ile iyice dezenfekte edilir.)

Prensip olarak, kanın kırmızı kısmı, kan sosisi yapmak için kasaplara iade edilmelidir, ancak çoğu zaman kullanılmadan kalır, bu nedenle aşağıda açıklanan teknoloji kullanılarak şurup hazırlanabilir.

Kan şurubu hazırlamanın özel durumları. Şurubun iki avantajı var: Serumu aldıktan sonra kalan kanın kırmızı kısmının kullanılmasını sağlıyor ve çocukların hoşuna giden hoş bir tada sahip.

Gliserin eksikliği nedeniyle uzun süreli depolama için şurup hazırlamak zordur ancak su kullanarak oldukça aktif bir ürün yapabilir ve bunu çocuklara günde 2-3 yemek kaşığı verebilirsiniz. Kanın kırmızı kısmına %20 ekleyin içme suyu ve sıhhi kontrol yapılırken şurubu buzullarda saklayın.

Sonra Ekle eşit bir kısım%100 şeker şurubu (şurup yapılacak grupların kartlarından şeker elde edilebilir).

Şuruba kanın tadını nötralize etmek için limon veya portakal özütü eklenir ve 250 ml'lik şişelere dökülür.

Peynir altı suyunun Tyndallizasyonu.

Santrifüjlemenin hemen ardından, yani kanın alınmasından bir saatten az bir süre sonra serum, bir saat süreyle 56°C'de parçalanır.

Bunu yapmak için sıcaklığı otomatik olarak muhafaza edilen bir su banyosuna indirilir. Bu sıcaklıkta Tyndalizasyon (peynir altı suyunun daha yüksek bir sıcaklıkta pıhtılaşması) peynir altı suyunun kısmi sterilizasyonu için gereklidir, ancak hazırlanma hızı başlı başına bir asepsi garantisidir.

Her beş litrelik şişenin orijinal defibrinatör etiketiyle donatıldığına, dolayısıyla serum numaralandırmasının donör hayvanların numaralandırmasına karşılık geldiğine dikkat edilmelidir.

Kontrol kartı dosyası. Kart, istediğiniz zaman donör hayvanın kökenini, peynir altı suyu hazırlama aşamalarını, şişeleme tarihini ve peynir altı suyunun dağıtımını kontrol etmenize olanak tanır.

Sıhhi kontrol. Gemiler depolanırken soğutma odası Veteriner müfettişleri donör hayvanların sıhhi kontrolüyle ilgilenmektedir. Kesimlerinin ardından tüberkülozun en ufak belirtilerini ortaya çıkarmak için kapsamlı bir otopsi yapılır.

Eğer bir hastalık tespit edilirse ilgili serum kolaylıkla geri çekilebilir. Her hayvanın kanının ayrı ayrı işlendiği ve serumun ayrı, numaralı şişelerde muhafaza edildiği bilinmektedir.

Seroterapi merkezi Kamu Komitesi Lyon mezbahalarında çocukluk hijyeni

Kontrol numarası …

Litre cinsinden sığır peynir altı suyu

Kart ve etiket

Yukarıdaki kart ve etiket herhangi bir karışıklığı önler.

Lyon'da, hayvanların seçimi, kan alınması ve etin kontrol edilmesinin aynı veteriner hekimler tarafından yapılması nedeniyle hijyen tedbirleri özellikle katıdır.

Ekipmanın sterilizasyonu. Hayvan serumu mikroplar için mükemmel bir üreme alanıdır ve yalnızca kısmen sterilize edilebilir. 56°'nin üzerindeki sıcaklıklarda güçlü bir antiseptik eklenirse pıhtılaşır ve bulanıklaşır. Bu nedenle tüm serum üretim işlemleri sırasında maksimum sterilite gereklidir; ekipman kullanımdan önce dekontamine edilmelidir.

Bireysel defibrinatörler şu şekilde sterilize edilir: Kan alınmadan önceki gece antiseptik solüsyonla doldurulur ve kan alınmadan birkaç saat önce cihazın alt kısmında bulunan bir musluk kullanılarak antiseptik boşaltılır. Serum üretmek için kullanılan santrifüjler, her defibrinatörün içeriğinin işlenmesi arasında da bir antiseptik ile muamele edilir.

Peynir altı suyunu depolamak için kullanılan beş litrelik kaplar da dahil olmak üzere tüm cam eşyalar, 180°C sıcaklıkta elektrikli bir fırında sterilize edilir.

250 ml'lik serum şişeleri de 180°C'de sterilize edilir. İşlemi kolaylaştırmak için tabaklar, şişeleme ve halka dağıtım sırasında kullanılan kutulara yerleştiriliyor.

Voskresensk'e çiçek teslimatı

Sterilizasyon fiziksel, kimyasal, mekanik ve biyolojik yöntemlerle ve çeşitli yöntemlerle temsil edilir.

Belirli bir sterilizasyon yönteminin ve yöntemlerinin kullanılmasının uygulanabilirliği, sterilize edilecek malzemenin özelliklerine, fiziksel ve fiziksel özelliklerine bağlıdır. kimyasal özellikler.

Sterilizasyonun süresi, sterilize edilen nesneye, sterilizasyon maddesine ve dozuna, ortamın sıcaklığına ve nemine bağlıdır.

Fiziksel sterilizasyon yöntemi

Yollara fiziksel yöntem Sterilizasyon, kurutmayı, yakmayı ve kalsinasyonu, kaynatmayı, pastörizasyonu ve renklendirmeyi içerir, sıcak hava(kuru ısı), ultrason, ultraviyole ve radyoaktif radyasyon, yüksek frekanslı akım, güneş ışığı.

Yüksek sıcaklıklara maruz kalabilecek eşyaların sterilize edilmesinde en yaygın yöntem ateş, sıcak hava ve basınç altında doymuş buharla sterilizasyondur.

Ateş, hiçbir değeri temsil etmeyen enfekte nesneleri (gereksiz kağıtlar, eski duvar kağıtları, paçavralar, çöpler) yakmak, tüberküloz hastalarının balgamını, özellikle hastalıktan ölen insan ve hayvanların cesetlerini dezenfekte etmek için kullanılır. tehlikeli enfeksiyonlar yanı sıra çeşitli nesneleri yakmak ve kalsine etmek için.

Yakma ve kalsinasyon, mikrobiyolojik uygulamalarda aletlerin, laboratuvar ve farmasötik cam eşyaların dezenfeksiyonunda yaygın olarak kullanılmaktadır.

Brülör alevinde veya alevde kalsinasyon, bitkisel hücreler, kistler ve mikroorganizma sporları öldükçe nesnenin tamamen sterilize edildiği bir sterilizasyon yöntemidir.

Tipik olarak özeler, spatulalar, pipetler, lamlar ve lameller, küçük aletler ve diğer kontamine öğeler, eğer kaynatılamazlarsa, kalsinasyonla sterilize edilir. Ateşe maruz kaldığında kesme yüzeyi matlaşacağından makas ve neşterlerin ısıtılarak sterilize edilmesi önerilmez.

Tıbbi uygulamada kullanılan en basit ve en yaygın fiziksel sterilizasyon yöntemlerinden biri sıcak hava sterilizasyonudur (kuru ısı). Kuru ısı sterilizasyonu kurutma fırınlarında (Pastör fırınları) gerçekleştirilir. Kuru sıcak havanın bakteri yok edici, virüs yok edici, spor öldürücü etkisi vardır ve esas olarak cam ürünlerin (laboratuar) sterilizasyonu için kullanılır. tabaklar - bardaklar Petri şişeleri, pipetler, test tüpleri vb.) yanı sıra basınç altında buharla sterilize edilebilen metal ürünler.

Ek olarak, kuru ısı, porselen ve ısıya dayanıklı maddelerden (talk, beyaz kil) ve minerallerden yapılmış eşyaları sterilize etmek için kullanılır. sebze yağları, yağlar, vazelin, lanolin, balmumu. Bitkisel formların ve sporların ölümünü sağlayan bu sterilizasyon yöntemi için en etkili mod, 160 - 180 derece sıcaklıkta 15 dakika süreyle uygulanan sıcaklıktır.

Sıvılar kaynayıp döküldüğü ve kauçuk ve sentetik malzemeler eridiği için gıda maddelerini, izotonik solüsyonu veya kauçuk ve sentetik malzemelerden yapılmış eşyaları kuru ısıyla sterilize edemezsiniz.

Sterilizasyon doymuş buhar basınç altında - bu, pansumanları, suyu ve bazılarını sterilize etmenin en güvenilir ve en sık denenen yöntemidir. ilaçlar, besin ortamı, yumuşak ekipman, aletlerin yanı sıra atıkla kirlenmiş malzemenin dezenfeksiyonu için.

Cerrahi pratikte pansuman ameliyat olan kişinin önlükleri ve iç çamaşırları otoklavlarda buhar kullanılarak dezenfekte edilmektedir. Basınç altında buhar sterilizasyonu gerçekleştirilir özel cihazlar– otoklavlar.

Otoklavlama tüm mikroorganizmaları ve sporları tamamen yok eder. Buhar basınçlı sterilizasyon yöntemi, malzemenin atmosferik basıncın üzerindeki basınç altında doymuş su buharı ile ısıtılmasına dayanmaktadır. Yüksek sıcaklık ve buharın birleşik etkisi bu yöntemi özellikle etkili kılar. Bu durumda hem bitkisel hücreler hem de mikrobiyal sporlar ölür.

Mikrobiyal sporlar doymuş su buharının etkisi altında 10 dakika içinde ölür ve bitkisel formlar 1 ila 4 dakika içinde ölür.

Doymuş buharın yüksek bakteri öldürücü gücü, basınç altındaki su buharının etkisi altında mikrobiyal hücre proteinlerinin şişmesi ve pıhtılaşması ve bunun sonucunda mikrobiyal hücrelerin ölmesidir.

Doymuş su buharının bakteri yok edici etkisi aşırı basınçla artar.

Otoklavda sterilizasyon farklı modlarda gerçekleştirilir.

Böylece basit besin ortamları (et - pepton agar ve et - pepton suyu) 120 derecede (1 atm.) 20 dakika sterilize edilir. Ancak bu modda proteinler, karbonhidratlar ve ısıtılarak kolayca değiştirilebilen diğer maddeleri içeren ortamları sterilize etmek mümkün değildir.

Karbonhidrat içeren ortamlar otoklavda 0,5 atm'de sterilize edilir. 10 – 15 dakika veya kademeli olarak akan buhar.

Yüksek sıcaklık kullanarak, yalnızca dezenfekte edilen nesnelerin yüzeyinde değil, aynı zamanda derinliklerinde de patojenik mikroorganizmaların en kalıcı formlarını (spor oluşturanlar dahil) yok edebilirsiniz.

Bu, güvenilir bir sterilizasyon aracı olarak yüksek sıcaklığın büyük avantajıdır. Ancak bazı eşyalar yüksek sıcaklığın etkisi altında bozulur ve bu durumlarda başka dezenfeksiyon yöntem ve yöntemlerine başvurmak gerekir.

Sterilize edilemeyen malzeme ve eşyaların tamamen sterilizasyonu Yüksek sıcaklık 100 dereceyi aşmayan bir sıcaklıkta bir Koch aparatında su buharı ile tekrarlanan sterilizasyon ile elde edilir. Bu yönteme fraksiyonel sterilizasyon denir. Geriye kalan öldürülmemiş spor mikrop formlarının, 37 derecelik bir termostatta bir gün sonra, sonraki sterilizasyon sırasında ölümü meydana gelen bitkisel hücrelere filizlendiği gerçeğine iniyor. bu nesnenin akan buhar.

Sıvı buharla muamele 30-40 dakika boyunca üç kez gerçekleştirilir. Malzemenin 100 derecenin altındaki sıcaklıkta bir kez ısıtılmasına pastörizasyon denir. Pastörizasyon Pasteur tarafından önerilmiştir ve esas olarak spor olmayan mikroorganizmaların yok edilmesi amaçlanmaktadır. Pastörizasyon 60 - 70 derecede 15 - 30 dakika, 80 derecede 10 - 15 dakika gerçekleştirilir.

Mikrobiyolojik uygulamalarda pastörizasyon tohum malzemesi sıklıkla spor oluşturan mikroorganizmaların saf kültürlerini izole etmek ve mikroorganizmaların spor oluşturma yeteneklerini belirlemek için kullanılır.

Yüksek sıcaklıklara maruz kaldığında tadı ve diğer değerli niteliklerini kaybeden sıvılar için (süt, meyve ve meyve suları, bira, karbonhidrat veya üre içeren besin ortamları vb.), akan buharla sterilizasyon 15 - 50 - 60 derecede gerçekleştirilir. 33333330 dakika veya 70 - 80 derecede 5 - 10 dakika. Bu durumda ortalama dirençli mikroplar ölür, daha dirençli mikroplar ve sporlar korunur.

60 derecede 1 saat süreyle fraksiyonel 5-6 kat sterilizasyona tyndalizasyon denir.

Pek çok tıbbi ürün polimer malzemeler, sterilizasyona dayanmaz buhar yöntemi genel kabul görmüş modlara göre. Pek çok ürünün, içerdikleri sıvıların (koruyucular, ilaçlar ve diğer ürünler) özelliklerinden dolayı, genel kabul görmüş yöntem ve yöntemler kullanılarak sterilize edilmesi mümkün değildir. Bu tür ürünler için, nesnelerin güvenilir bir şekilde sterilizasyonunu sağlamak amacıyla bireysel sterilizasyon rejimleri geliştirilmiştir.

Böylece kanı fraksiyonlara ayırmak için rotorun sterilizasyonu 120 derece sıcaklıkta 45 dakika su buharı ile gerçekleştirilir.

Koruyucu kapların sterilitesi 110 derecede 60 dakika süreyle sağlanır.

Kaynatma, yeniden kullanılabilen şırıngaların, cerrahi aletlerin, kauçuk tüplerin, cam ve metal mutfak eşyalarının sterilizasyonu için kullanılan bir sterilizasyon yöntemidir.

Sterilizatörlerde kaynatılarak sterilizasyon yapılır. Kaynayan suda oluşan sporlar 20-30 dakika sonra ölür. 45 dakika kaynatma, salgıları ve diğer bulaşıcı malzemeleri, çamaşırları, tabakları, oyuncakları ve hasta bakım malzemelerini dezenfekte etmek için yaygın olarak kullanılır.

Sıcak su (60 - 100 derece) ile deterjanlar yıkamak ve temizlemek için kullanılır mekanik kaldırma kirleticiler ve mikroorganizmalar.

Bitkisel hücrelerin çoğu 70 derecede 30 dakika sonra ölür.

Filtrasyon sterilizasyonu, substratların ısınmaya dayanamadığı durumlarda, özellikle proteinler, serumlar, bazı antibiyotikler, vitaminler ve uçucu maddeler içeren ortamlar için kullanılır. Bu teknik, bir kültür sıvısının mikrobiyal hücrelerden arındırılması ancak içerdiği tüm metabolik ürünlerin değişmeden korunması gerektiğinde sterilize edilmesi için oldukça yaygın olarak kullanılır.

Yöntem, sıvıların ince gözenekli bölmelere sahip olan ve dolayısıyla mikrobiyal hücreleri tutan özel filtrelerden filtrelenmesini içerir.

En yaygın kullanılan iki filtre türü membran filtreler ve Seitz filtreleridir.

Membran filtreler kolodyum, asetat, selüloz ve diğer malzemelerden hazırlanır.

Seitz filtreleri asbest ve selüloz karışımından yapılır.

Ayrıca sterilizasyon için kaolinden katkılı filtreler kullanılmaktadır. kuvars kumu, demlik toprağından ve diğer malzemelerden (Chamberlan, Berkfeld'in “mumları”).

Membran ve asbest filtreleri tek kullanımlık olarak tasarlanmıştır.

Ultraviyole ışınlama ile bakteri yok edici etki, kaynağı bakteri yok edici lambalar olan 200 - 450 nm uzunluğunda ışınlar tarafından sağlanır.

Sterilizasyon bakteri yok edici lambalar kullanılarak gerçekleştirilir. ultraviyole ışınlarşifalı hava önleyici kurumlar, mikrobiyoloji laboratuvarlarının kutuları, işletmelerde Gıda endüstrisi aşı ve serum üretimine yönelik kutularda, ameliyathanelerde, manipülasyon odalarında, çocuk kurumlarında vb.

Ultraviyole ışınları yüksek antimikrobiyal aktiviteye sahiptir ve sadece bitkisel hücrelerin değil, aynı zamanda sporlarının da ölümüne neden olabilir.

Güneş ışığının etkisi sonucu mikroorganizmaların ölümüne neden olur ultraviyole ışınlama ve kurutma.

Güneş ışığı ile kurutmanın birçok mikroorganizma türü üzerinde zararlı etkisi vardır ancak etkisi yüzeyseldir ve bu nedenle güneş ışığı sterilizasyon uygulamasında destekleyici rol oynar.

İÇİNDE Son zamanlarda yara ve yanıkların tedavisinde sentetik ve doğal polimerlerden jel formunda yapılan kaplamalar kullanılmaktadır.

Polimer antiseptik filmler yara ve yanıkların lokal tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Katapol, dioksidin, mavi iyot gibi geniş spektrumlu antimikrobiyal ajanların yanı sıra glutaraldehit içeren sorbitol içerirler. Bu filmleri sterilize etmek için kullanılır iyonlaştırıcı radyasyon 20.0 kGy dozunda. Polimer antiseptik filmlerin ve sorbentlerin endüstriyel üretimi sırasında, bu sterilizasyon rejimi altında sterillikleri tamamen sağlanır.

Radyoaktif radyasyon hem bitkisel hem de spor formdaki her türlü mikroorganizmayı öldürür. Steril ürünler ve steril tek kullanımlık tıbbi cihazlar üreten işletmelerde sterilizasyon, dezenfeksiyon amacıyla yaygın olarak kullanılmaktadır. Atıksu ve hayvansal kökenli hammaddeler.

Mekanik yöntem sterilizasyon

Mekanik sterilizasyon yöntemleri mikropları nesnelerin yüzeyinden uzaklaştırır. Bunlar; yıkama, silkeleme, süpürme, ıslak silme, havalandırma, havalandırma, elektrik süpürgesiyle süpürme, yıkamadır.

Kimyasal sterilizasyon yöntemi

Plastikler artık tıbbi uygulamalarda giderek daha fazla kullanılıyor.

Diş hekimliğinde, çene-yüz cerrahisinde, travmatolojide, ortopedide ve cerrahide kullanılırlar. Çoğu plastik, basınç altında buhar ve kuru ısı (kuru ısıtılmış hava) ile yapılan ısı sterilizasyon yöntemlerine dayanamaz. Bu tür nesneleri sterilize etmek için kullanılan alkol, dioksit ve üçlü çözeltiden oluşan çözeltiler, işlenen ürünlerin sterilliğini garanti etmez.

Bu nedenle plastik ürünleri sterilize etmek için gaz ve radyasyon yöntemlerinin yanı sıra kimyasal çözeltiler kullanılmaktadır.

Tıbbi kurumların uygulamalarına giriş çok sayıda Termolabil malzemelerden yapılan ürünler radyasyonun girişine katkıda bulunur, gaz yöntemleri dezenfektan solüsyonları ile dezenfeksiyon ve sterilizasyon.

Şu tarihte: kimyasal sterilizasyonçeşitli kimyasal gruplardan (peroksit, fenolik, halojen içeren, aldehitler, alkaliler ve asitler, yüzey aktif maddeler vb.) gazlar ve ajanlar kullanır. Günlük kullanım için, çeşitli maddelerin eklenmesi nedeniyle antimikrobiyal etkiye sahip deterjanlar, temizlik, ağartma ve diğer müstahzarlar üretilmektedir. kimyasal maddeler.

Bu preparatlar sıhhi tesisatların temizlenmesi ve dezenfeksiyonu için kullanılır. teknik ekipman, tabaklar, çarşaflar vb.

Formaldehit buharı (buhar formu) kullanılabilir tıbbi kurumlar sterilizasyon için metal ürünleri tıbbi amaçlar için (neşter, iğneler, cımbız, sondalar, kelepçeler, kancalar, tel kesiciler vb.).

Formaldehit buharı ile sterilizasyondan önce ürünler, ön sterilizasyon temizliğine tabi tutulmalı ve iyice kurutulmalıdır.

Herhangi bir şekilde sterilize edildiğinde kimyasal olarak Belirli bir nesnenin işlenmesine ilişkin düzenlemeler, dezenfekte edilen nesnenin özelliklerine, mikropların direncine ve özelliklerinin özelliklerine bağlıdır. kimyasal hazırlık, ortam sıcaklığı, nem ve diğer faktörler.

Böylece metal aletlerin sterilliği, kapalı bir odada buharla birlikte en az 20 derece sıcaklıkta beş saat bekletilerek sağlanır ve bağıl nem 15 derecelik bir sıcaklıkta% 95 - 98, bu nesnelerin tam sterilitesi ancak 16 saat sonra elde edilir.

Glutaraldehitin sporisidal aktivitesi sıcaklığa bağlıdır. Optimum etkisi 15 - 25 derecelik bir sıcaklıkta gerçekleşir. Sıcaklık arttıkça bu ilacın sporisidal aktivitesi azalır.

Sterilizasyon kimyasal yöntem Kullanımı biraz sınırlıdır. Çoğu zaman bu yöntem, kültür ortamının ve immünobiyolojik preparatların (aşılar ve serumlar) bakteriyel kontaminasyonunu önlemek için kullanılır. Kloroform, toluen ve eter gibi maddeler çoğunlukla besin ortamına eklenir. Ortamın bu koruyucu maddelerden arındırılması gerekiyorsa 56 derecelik su banyosunda ısıtılır ve koruyucu maddeler buharlaştırılır.

Aşıların veya serumların korunması için mertiolat kullanılır, borik asit, formalin.

Biyolojik yöntem sterilizasyon

Biyolojik sterilizasyon antibiyotik kullanımına dayanmaktadır.

Bu yöntem virüslerin yetiştirilmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır.

Sterilizasyon (Latince sterilis'ten - steril), işlenen nesneler üzerindeki mikropların tamamen etkisiz hale getirilmesini içerir.

Pasteur fırını - kuru ısı sterilizasyonu.

Üç ana sterilizasyon yöntemi vardır: ısı, radyasyon, kimyasal.

İyot.

Isı sterilizasyonu mikropların yüksek sıcaklığa duyarlılığına dayanır.

60 °C'de ve suyun varlığında, enzimler de dahil olmak üzere proteinlerin denatürasyonu meydana gelir ve bunun sonucunda mikropların bitkisel formları ölür. Çok az miktarda bağlı su içeren ve yoğun kabuklu sporlar 160-170 °C'de inaktive edilir. Isı sterilizasyonu için esas olarak kuru ısı ve basınç altında buhar kullanılır.
Kuru ısıyla sterilizasyon, kuru ısı fırınlarında veya Pasteur fırınlarında gerçekleştirilir. Pasteur fırını, elektrikle ısıtılan ve bir termometre ile donatılmış, sıkıca kapatılmış metal bir dolaptır.

İçerisindeki malzemenin dezenfeksiyonu 160-170 °C'de 60-120 dakika süreyle gerçekleşir. Bu yöntemin dezavantajı, yalnızca laboratuvar camı gibi bazı sterilize edilebilir nesnelerin bu kadar yüksek sıcaklıklara dayanabilmesidir.
Sterilizasyonun en evrensel yöntemi, pansumanların, çamaşırların, birçok aletin, kültür ortamının, solüsyonların, bulaşıcı materyalin vb. sterilize edildiği otoklavlarda basınç altında buhar tedavisidir.

Otoklav, su buharı ve sterilizasyon odasından oluşan, hava geçirmez şekilde kapatılmış, güçlü duvarlara sahip metal bir silindirdir. Cihaz bir manometre, termometre ve diğer izleme cihazlarıyla donatılmıştır. Otoklavda artan basınç yaratılır ve bu da suyun kaynama noktasının artmasına neden olur. Yani 0,5 atm'de kaynama noktası 80 °C, 1 atm'de - 100 °C, 2 atm'de - 121 °C ve 3 atm'de - 136 °C'dir.

Yüksek sıcaklığa ek olarak buharın mikroorganizmalara etki etmesi nedeniyle sporlar zaten 120 ° C'de ölür. En yaygın otoklav çalışma modu 2 atm, 121 °C, 15-20 dakikadır. Sterilizasyon süresi arttıkça azalır atmosferik basınç ve dolayısıyla kaynama noktası. Mikroorganizmalar birkaç saniye içinde ölür, ancak malzeme daha uzun süre işlenir, çünkü ilk olarak sterilize edilen malzemenin içindeki sıcaklığın yüksek olması gerekir ve ikinci olarak, sıcaklıktan olası sapma için tasarlanmış sözde bir güvenlik alanı vardır. Otoklav işlemi sırasında belirtilen parametreler.

Etiketler: vücut, büyüme, sterilizasyon, enzim

Termostat– Mikroorganizma kültürlerinin yetiştirilmesinde kullanılan, sabit bir sıcaklığı koruyan bir cihaz. Uzun süre bakımının yapıldığı bir dolaptır (Şekil 1). belirli sıcaklık. Optimum sıcaklık birçok mikroorganizmanın üremesi için 37 ºС. Termostatların kuru hava ve su tipleri mevcuttur.

Kurutma kabini (Pastör fırını) tabakların, ekipmanların ve nişasta, tebeşir gibi kuru malzemelerin kuru ısıyla sterilizasyonu için kullanılır (Şekil 2). Sterilize edilecek malzeme önceden kağıda sarılarak duvarlara temas etmeyecek şekilde bir dolaba yerleştirilir. Sterilizasyon iki saat boyunca 160 ºС sıcaklıkta gerçekleştirilir. Sıcaklığın 180 ºС'nin üzerine çıkarılması önerilmez: pamuk tıkaçlar ve kağıtlar bozulmaya başlar (kahverengiye döner, kırılgan hale gelir). Sterilize edilmiş malzeme, kabin kapatılıp soğutulduktan sonra, tercihen kabin içindeki sıcaklık oda sıcaklığına eşit olduğunda çıkarılır.

Koloni sayma aparatı(Şekil 3) - elektrikli kalemle donatılmış yarı otomatik bir sayaç yay cihazı Petri kaplarındaki bakteri kolonilerini saymak için tasarlanmıştır. Bardak
Bakteri kolonileri içeren bir petri, bir tarama camının üzerine baş aşağı yerleştirilir. Petri kabının alt kısmında koloninin konumuna karşılık gelen alana elektrikli kalemin hafif basıncı cam üzerinde bir iz bırakır. Bu durumda tutucu yükselir, devre kapanır ve sayaç okumaları birer birer artar. Bakteri kolonilerinin sayısı, sayımın başlamasından önce ve bitiminden sonra nabız sayacının okumaları arasındaki fark hesaplanarak sayılır.

Otoklav(Şekil 4), bulaşıkları ve kültür ortamlarını basınç altında buharla sterilize etmek için tasarlanmış kalın duvarlı bir aparattır. Bu, çift metal duvarlı ve kapaklı, kapalı bir kazandır. Duvarlar arasındaki boşluk (su buharı odası) su ile doldurulur. İç mekan(sterilizasyon odası) bir basınç göstergesi, emniyet valfleri ve su ve buharın boşaltılması için bir musluk ile donatılmıştır. Sıkı bir sızdırmazlık sağlamak için otoklav, lastik contalı bir kapakla sıkıca kapatılır. Kültür ortamını 0,5 ila 1,0 MPa basınç altında 20...30 dakika süreyle sterilize etmek için kullanılır.

1 – gövde; 2 – termometre; 1 – kapak; 2 – gövde;

3 – kapı; 4 – potansiyometre; 3 – vites kutusu; 4 – kontrol ünitesi;

5 – geçiş anahtarı; 6 – lamba; 5 – işaretleme; 6 – termometre

7 – havalandırma delikleri

Şekil 1 - Termostat Şekil 2 - Kurutma kabini

1 – Petri kabı için masa; 2 – yay aparatlı kalem;

3 – sayaç göstergesi; 4 – nabız sayacını açmak için geçiş anahtarı; 5 – sayaç aydınlatma lambasını açmak için geçiş anahtarı

Şekil 3 - Mikroorganizma kolonilerini saymak için cihaz

Kuru ısı veya sıcak hava ile sterilizasyon Pasteur fırınlarında (kurutma fırınları) gerçekleştirilir. Pasteur fırını, ısıya dayanıklı malzemelerden (metal ve asbest) yapılmış çift duvarlı bir dolaptır. Kabini gaz brülörleri veya elektrikli ısıtma cihazları kullanarak ısıtın. Elektrikle ısıtılan dolaplar gerekli sıcaklığı sağlamak için regülatörlerle donatılmıştır. Sıcaklığı kontrol etmek için dolabın üst duvarındaki deliğe yerleştirilmiş bir termometre bulunmaktadır.

Laboratuvar cam malzemelerini sterilize etmek için kuru ısı kullanılır. Sterilizasyon için hazırlanan kaplar, sterilize edilen malzemenin eşit ve güvenilir bir şekilde ısıtılmasını sağlamak için fırına gevşek bir şekilde yüklenir. Dolap kapağını sıkıca kapatın, ısıtma cihazını açın, sıcaklığı 160-165 °C'ye getirin ve bu sıcaklıkta 1 saat sterilize edin.Sterilizasyon sonunda ısıtmayı kapatın ancak soğuyana kadar dolap kapısını açmayın. fırın soğudu; Aksi halde kabin içine giren soğuk hava, sıcak tencerede çatlaklara neden olabilir.

Pasteur fırınında sterilizasyon farklı sıcaklıklarda yapılabilir. sıcaklık koşulları ve maruz kalma (sterilizasyon süresi) (Tablo 1).

Tablo 1. Sterilizasyon modu

Pasteur fırınında sterilizasyonu kontrol etmek için ipek iplikler spor oluşturan bakteri kültüründe nemlendirilir, kurutulur, steril bir Petri kabına yerleştirilir ve bir Pasteur fırınına yerleştirilir. Sterilizasyon 165°C sıcaklıkta 1 saat süreyle gerçekleştirilir (kontrol için ipliklerin bir kısmı oda sıcaklığında bırakılır). Daha sonra sterilize edilen ve kontrol iplikleri bir Petri kabındaki agarın yüzeyine yerleştirilir veya et suyuyla birlikte test tüplerine yerleştirilir ve 2 gün boyunca 37°C'de bir termostatta inkübe edilir. Pasteur fırınının düzgün çalışmasıyla, bakteri sporları öleceğinden, sterilize edilmemiş (kontrol) iplikler üzerindeki bakteri sporları besin maddesi üzerinde filizleneceğinden, içine sterilize edilmiş ipliklerin yerleştirildiği besin ortamına sahip test tüpleri veya tabaklarda büyüme olmayacaktır. Medyada büyüme kaydedilecek.

Pasteur fırınının içindeki sıcaklığı belirlemek için 165-170 ° C sıcaklıkta karamelize olan sakaroz veya toz şeker kullanabilirsiniz.

Pasteur fırınında sterilizasyon için laboratuvar cam malzemelerinin hazırlanması. Laboratuar kapkacakları(Petri kapları, dereceli ve Pasteur pipetleri, şişeler, şişeler, test tüpleri) sterilizasyondan önce iyice yıkanmalı, kurutulmalı ve kağıda sarılmalıdır, aksi takdirde sterilizasyondan sonra tekrar hava bakterileri ile kontamine olabilir.

Petri kapları tek seferde bir veya daha fazla parça halinde kağıda sarılır veya özel metal kutulara yerleştirilir.

Test materyalinin ağza girmesini önlemek için pipetlerin üst uçlarına pamuklu çubuklar yerleştirilir. Dereceli pipetler 4-5 cm genişliğinde uzun kağıt şeritlerine sarılır, sarılmış pipetin hacmi kağıt üzerinde işaretlenir. Kalem kutularında dereceli pipetler, kağıda ilave ambalajlama yapılmadan sterilize edilir.

Not. Pipetlerdeki mezuniyet yeterince görülemiyorsa, sterilizasyondan önce eski haline getirilir. Bir pipete uygulayın yağlı boya ve boyanın kurumasına izin verilmeden baryum sülfat tozu bir bezle üzerine sürülür. Bundan sonra, yalnızca mezuniyet çentiklerinde kalan fazla boyayı bir bezle çıkarın. Bu şekilde işlenen pipetler durulanmalıdır.

Pasteur pipetlerinin keskin uçları bek alevinde kapatılır ve bir seferde 3-5 parça olacak şekilde kağıda sarılır. Pasteur pipetleri, kılcal damarların kapalı uçlarını kırmayacak şekilde dikkatlice sarılmalıdır.

Şişeler, şişeler, test tüpleri pamuklu gazlı bez tıpalarla kapatılır. Mantar, kabın boynuna uzunluğunun 2 / 3'ü kadar sığmalı, çok sıkı olmamalı, ancak gevşek de olmamalıdır. Her kaptaki (test tüpleri hariç) tıpaların üzerine bir kağıt kapak yerleştirilir. Test tüpleri 5-50'li gruplar halinde birbirine bağlanır ve kağıtla sarılır.

Not. Yüksek sıcaklıklarda, kapların ve pipetlerin sarıldığı kağıtlar ve pamuk yünü sararır ve hatta kömürleşebilir. yeni çeşit Laboratuvara ulaşan kağıtlar kabul edilen sıcaklık koşullarında test edilmelidir.

Kontrol soruları

1. Sterilizasyon terimi ile ne kastedilmektedir?

2. Sterilizasyon nasıl yapılır?

3. Ateşte kalsinasyonla sterilize edilen nedir?

4. Pasteur fırınının yapısını ve çalışma şeklini anlatınız.

5. Pasteur fırınında ne sterilize edilir?

6. Cam eşyalar sterilizasyona nasıl hazırlanır?

7. Besleyici ortamlar ve kauçuk nesneler neden bir Pasteur fırınında sterilize edilemiyor?

Egzersiz yapmak

Sterilizasyon için Petri kaplarını, dereceli pipetleri, Pasteur pipetlerini, test tüplerini, şişeleri ve şişeleri hazırlayın.

Sterilizasyon fiziksel, kimyasal, mekanik ve biyolojik yöntemlerle ve çeşitli yöntemlerle temsil edilir. Belirli bir sterilizasyon yönteminin ve yöntemlerinin kullanılmasının uygulanabilirliği, sterilize edilecek malzemenin özelliklerine, fiziksel ve kimyasal özelliklerine bağlıdır. Sterilizasyonun süresi, sterilize edilen nesneye, sterilizasyon maddesine ve dozuna, ortamın sıcaklığına ve nemine bağlıdır.

Fiziksel sterilizasyon yöntemi Fiziksel sterilizasyon yönteminin yöntemleri arasında kurutma, yakma ve kalsinasyon, kaynatma, pastörizasyon ve tindalizasyon, sıcak hava (kuru ısı), ultrason, ultraviyole ve radyoaktif radyasyon, yüksek frekanslı akım, güneş ışığı bulunur. Yüksek sıcaklıklara maruz kalabilecek eşyaların sterilize edilmesinde en yaygın yöntem ateş, sıcak hava ve basınç altında doymuş buharla sterilizasyondur. Ateş, herhangi bir değeri temsil etmeyen enfekte nesneleri (gereksiz kağıtlar, eski duvar kağıtları, paçavralar, çöp) yakmak, tüberküloz hastalarının balgamını, özellikle tehlikeli enfeksiyonlardan ölen insan ve hayvanların cesetlerini dezenfekte etmek için kullanılır. çeşitli nesneleri yakar ve kalsine eder. Yakma ve kalsinasyon, mikrobiyolojik uygulamalarda aletlerin, laboratuvar ve farmasötik cam eşyaların dezenfeksiyonunda yaygın olarak kullanılmaktadır. Brülör alevinde veya alevde kalsinasyon, bitkisel hücreler, kistler ve mikroorganizma sporları öldükçe nesnenin tamamen sterilize edildiği bir sterilizasyon yöntemidir. Tipik olarak özeler, spatulalar, pipetler, lamlar ve lameller, küçük aletler ve diğer kontamine öğeler, eğer kaynatılamazlarsa, kalsinasyonla sterilize edilir. Ateşe maruz kaldığında kesme yüzeyi matlaşacağından makas ve neşterlerin ısıtılarak sterilize edilmesi önerilmez. Tıbbi uygulamada kullanılan en basit ve en yaygın fiziksel sterilizasyon yöntemlerinden biri sıcak hava sterilizasyonudur (kuru ısı). Kuru ısı sterilizasyonu kurutma fırınlarında (Pastör fırınları) gerçekleştirilir. Kuru sıcak havanın bakteri, virüs ve spor öldürücü etkisi vardır ve esas olarak cam ürünlerin (laboratuvar cam eşyaları - Petri kapları, şişeler, pipetler, test tüpleri vb.) ve ayrıca buharla sterilize edilebilen metal ürünlerin sterilizasyonu için kullanılır. baskı altında. Ayrıca kuru ısı, porselen ve ısıya dayanıklı maddelerden (talk, beyaz kil), mineral ve bitkisel yağlar, katı yağlar, vazelin, lanolin ve balmumundan yapılmış eşyaları sterilize etmek için kullanılır. Bitkisel formların ve sporların ölümünü sağlayan bu sterilizasyon yöntemi için en etkili mod, 160 - 180 derece sıcaklıkta 15 dakika süreyle uygulanan sıcaklıktır. Sıvılar kaynayıp döküldüğü ve kauçuk ve sentetik malzemeler eridiği için gıda maddelerini, izotonik solüsyonu veya kauçuk ve sentetik malzemelerden yapılmış eşyaları kuru ısıyla sterilize edemezsiniz. Basınç altında doymuş buharla sterilizasyon, pansumanların, suyun, bazı ilaçların, kültür ortamlarının, yumuşak ekipmanların, aletlerin sterilize edilmesinin yanı sıra atıkla kirlenmiş malzemenin dezenfekte edilmesi için en güvenilir ve en sık kullanılan yöntemdir. Cerrahi uygulamada ameliyat edilen hastanın pansumanları, cerrah önlükleri ve iç çamaşırları otoklavlarda buhar kullanılarak dezenfekte edilmektedir. Basınç altında buhar sterilizasyonu özel cihazlarda - otoklavlarda gerçekleştirilir. Otoklavlama tüm mikroorganizmaları ve sporları tamamen yok eder. Buhar basınçlı sterilizasyon yöntemi, malzemenin atmosferik basıncın üzerindeki basınç altında doymuş su buharı ile ısıtılmasına dayanmaktadır. Yüksek sıcaklık ve buharın birleşik etkisi bu yöntemi özellikle etkili kılar. Bu durumda hem bitkisel hücreler hem de mikrobiyal sporlar ölür. Mikrobiyal sporlar doymuş su buharının etkisi altında 10 dakika içinde ölür ve bitkisel formlar 1 ila 4 dakika içinde ölür. Doymuş buharın yüksek bakteri öldürücü gücü, basınç altındaki su buharının etkisi altında mikrobiyal hücre proteinlerinin şişmesi ve pıhtılaşması ve bunun sonucunda mikrobiyal hücrelerin ölmesidir. Doymuş su buharının bakteri yok edici etkisi aşırı basınçla artar. Otoklavda sterilizasyon farklı modlarda gerçekleştirilir. Böylece basit besin ortamları (et - pepton agar ve et - pepton suyu) 120 derecede (1 atm.) 20 dakika sterilize edilir. Ancak bu modda proteinler, karbonhidratlar ve ısıtılarak kolayca değiştirilebilen diğer maddeleri içeren ortamları sterilize etmek mümkün değildir. Karbonhidrat içeren ortamlar otoklavda 0,5 atm'de sterilize edilir. 10 – 15 dakika veya kademeli olarak akan buhar. Yüksek sıcaklık kullanarak, yalnızca dezenfekte edilen nesnelerin yüzeyinde değil, aynı zamanda derinliklerinde de patojenik mikroorganizmaların en kalıcı formlarını (spor oluşturanlar dahil) yok edebilirsiniz. Bu, güvenilir bir sterilizasyon aracı olarak yüksek sıcaklığın büyük avantajıdır. Ancak bazı eşyalar yüksek sıcaklığın etkisi altında bozulur ve bu durumlarda başka dezenfeksiyon yöntem ve yöntemlerine başvurmak gerekir. Yüksek sıcaklıkta sterilizasyon kullanımına izin vermeyen malzeme ve nesnelerin tam sterilizasyonu, Koch aparatında 100 dereceyi aşmayan bir sıcaklıkta su buharı ile tekrarlanan sterilizasyonla sağlanır. Bu yönteme fraksiyonel sterilizasyon denir. Geriye kalan öldürülmemiş mikrop spor formlarının, 37 derecelik bir termostatta bir gün sonra, bitkisel hücrelere filizlendiği ve bunların ölümü, bu nesnenin akan buharla daha sonra sterilizasyonu sırasında meydana geldiği gerçeğine indirgeniyor. Sıvı buharla muamele 30-40 dakika boyunca üç kez gerçekleştirilir. Malzemenin 100 derecenin altındaki sıcaklıkta bir kez ısıtılmasına pastörizasyon denir. Pastörizasyon Pasteur tarafından önerilmiştir ve esas olarak spor olmayan mikroorganizmaların yok edilmesi amaçlanmaktadır. Pastörizasyon 60 - 70 derecede 15 - 30 dakika, 80 derecede 10 - 15 dakika gerçekleştirilir. Mikrobiyolojik uygulamada, spor oluşturan mikroorganizmaların saf kültürlerini izole etmek ve mikroorganizmaların spor oluşturma yeteneklerini belirlemek için tohum materyalinin pastörizasyonu sıklıkla kullanılır. Yüksek sıcaklıklara maruz kaldığında tadı ve diğer değerli niteliklerini kaybeden sıvılar için (süt, meyve ve meyve suları, bira, karbonhidrat veya üre içeren besin ortamları vb.), akan buharla sterilizasyon 15 - 50 - 60 derecede gerçekleştirilir. 33333330 dakika veya 70 - 80 derecede 5 - 10 dakika. Bu durumda ortalama dirençli mikroplar ölür, daha dirençli mikroplar ve sporlar korunur. 60 derecede 1 saat süreyle fraksiyonel 5-6 kat sterilizasyona tyndalizasyon denir. Polimer malzemelerden yapılmış birçok tıbbi ürün, genel kabul görmüş rejimlere göre buhar sterilizasyonuna dayanamaz. Pek çok ürünün, içerdikleri sıvıların (koruyucular, ilaçlar ve diğer ürünler) özelliklerinden dolayı, genel kabul görmüş yöntem ve yöntemler kullanılarak sterilize edilmesi mümkün değildir. Bu tür ürünler için, nesnelerin güvenilir bir şekilde sterilizasyonunu sağlamak amacıyla bireysel sterilizasyon rejimleri geliştirilmiştir. Böylece kanı fraksiyonlara ayırmak için rotorun sterilizasyonu 120 derece sıcaklıkta 45 dakika su buharı ile gerçekleştirilir. Koruyucu kapların sterilitesi 110 derecede 60 dakika süreyle sağlanır. Kaynatma, yeniden kullanılabilen şırıngaların, cerrahi aletlerin, kauçuk tüplerin, cam ve metal mutfak eşyalarının sterilizasyonu için kullanılan bir sterilizasyon yöntemidir. Sterilizatörlerde kaynatılarak sterilizasyon yapılır. Kaynayan suda oluşan sporlar 20-30 dakika sonra ölür. 45 dakika kaynatma, salgıları ve diğer bulaşıcı malzemeleri, çamaşırları, tabakları, oyuncakları ve hasta bakım malzemelerini dezenfekte etmek için yaygın olarak kullanılır. Yıkama ve temizlik sırasında kir ve mikroorganizmaların mekanik olarak uzaklaştırılması için deterjanlı sıcak su (60 - 100 derece) kullanılır. Bitkisel hücrelerin çoğu 70 derecede 30 dakika sonra ölür. Filtrasyon sterilizasyonu, substratların ısınmaya dayanamadığı durumlarda, özellikle proteinler, serumlar, bazı antibiyotikler, vitaminler ve uçucu maddeler içeren ortamlar için kullanılır. Bu teknik, bir kültür sıvısının mikrobiyal hücrelerden arındırılması ancak içerdiği tüm metabolik ürünlerin değişmeden korunması gerektiğinde sterilize edilmesi için oldukça yaygın olarak kullanılır. Yöntem, sıvıların ince gözenekli bölmelere sahip olan ve dolayısıyla mikrobiyal hücreleri tutan özel filtrelerden filtrelenmesini içerir. En yaygın kullanılan iki filtre türü membran filtreler ve Seitz filtreleridir. Membran filtreler kolodyum, asetat, selüloz ve diğer malzemelerden hazırlanır. Seitz filtreleri asbest ve selüloz karışımından yapılır. Ek olarak, sterilizasyon için kuvars kumu, infüzör toprağı ve diğer malzemelerin (Chamberlan, Berkfeld'in "mumları") karışımıyla kaolinden yapılmış filtreler kullanılır. Membran ve asbest filtreleri tek kullanımlık olarak tasarlanmıştır. Ultraviyole ışınlama ile bakteri yok edici etki, kaynağı bakteri yok edici lambalar olan 200 - 450 nm uzunluğunda ışınlar tarafından sağlanır. Bakterisidal lambaların yardımıyla tıbbi ve önleyici kurumlarda, mikrobiyoloji laboratuvarlarının kutularında, gıda endüstrisi işletmelerinde, aşı ve serum üretimine yönelik kutularda, ameliyathanelerde, manipülasyon odalarında, çocuk kurumlarında vb. hava ultraviyole ışınlarla sterilize edilir. Ultraviyole ışınları yüksek antimikrobiyal aktiviteye sahiptir ve sadece bitkisel hücrelerin değil, aynı zamanda sporlarının da ölümüne neden olabilir. Güneş ışığı, ultraviyole ışınımı ve kuruması sonucu mikroorganizmaların ölümüne neden olur. Güneş ışığı ile kurutmanın birçok mikroorganizma türü üzerinde zararlı etkisi vardır ancak etkisi yüzeyseldir ve bu nedenle güneş ışığı sterilizasyon uygulamasında destekleyici rol oynar. Son zamanlarda yara ve yanıkların tedavisinde sentetik ve doğal polimerlerden yapılmış jel formundaki kaplamalar kullanılmaya başlanmıştır. Polimer antiseptik filmler yara ve yanıkların lokal tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Katapol, dioksidin, mavi iyot gibi geniş spektrumlu antimikrobiyal ajanların yanı sıra glutaraldehit içeren sorbitol içerirler. Bu filmleri sterilize etmek için 20,0 kGy dozunda iyonlaştırıcı radyasyon kullanılır. Polimer antiseptik filmlerin ve sorbentlerin endüstriyel üretimi sırasında, bu sterilizasyon rejimi altında sterillikleri tamamen sağlanır. Radyoaktif radyasyon hem bitkisel hem de spor formdaki her türlü mikroorganizmayı öldürür. Steril ürünler ve steril tek kullanımlık tıbbi cihazlar üreten işletmelerde sterilizasyon, atık suların ve hayvansal kökenli hammaddelerin dezenfeksiyonunda yaygın olarak kullanılmaktadır.

Mekanik sterilizasyon yöntemi Mekanik sterilizasyon yöntemleri mikropları nesnelerin yüzeyinden uzaklaştırır. Bunlar; yıkama, silkeleme, süpürme, ıslak silme, havalandırma, havalandırma, elektrik süpürgesiyle süpürme, yıkamadır.

Kimyasal sterilizasyon yöntemi Plastikler artık tıbbi uygulamalarda giderek daha fazla kullanılıyor. Diş hekimliğinde, çene-yüz cerrahisinde, travmatolojide, ortopedide ve cerrahide kullanılırlar. Çoğu plastik, basınç altında buhar ve kuru ısı (kuru ısıtılmış hava) ile yapılan ısı sterilizasyon yöntemlerine dayanamaz. Bu tür nesneleri sterilize etmek için kullanılan alkol, dioksit ve üçlü çözeltiden oluşan çözeltiler, işlenen ürünlerin sterilliğini garanti etmez. Bu nedenle plastik ürünleri sterilize etmek için gaz ve radyasyon yöntemlerinin yanı sıra kimyasal çözeltiler kullanılmaktadır. Termolabil malzemelerden yapılmış çok sayıda ürünün tıbbi kurumların pratiğine dahil edilmesi, dezenfektan solüsyonlarla radyasyon ve gaz dezenfeksiyon ve sterilizasyon yöntemlerinin uygulanmasına katkıda bulunur. Kimyasal sterilizasyon sırasında çeşitli kimyasal gruplardan gazlar ve ajanlar kullanılır (peroksit, fenolik, halojen içeren, aldehitler, alkaliler ve asitler, yüzey aktif maddeler vb.). Günlük kullanım için, bileşimlerine çeşitli kimyasalların eklenmesi nedeniyle antimikrobiyal etkiye sahip deterjanlar, temizlik, ağartma ve diğer müstahzarlar üretilmektedir. Bu preparatlar sıhhi ekipmanların, tabakların, çamaşırların vb. temizlenmesi ve dezenfekte edilmesi için kullanılır. Formaldehit buharı (buhar formu), tıbbi kurumlarda metal tıbbi ürünleri (neşter, iğneler, cımbız, sondalar, kelepçeler, kancalar, tel kesiciler, vb.). Formaldehit buharı ile sterilizasyondan önce ürünler, ön sterilizasyon temizliğine tabi tutulmalı ve iyice kurutulmalıdır. Herhangi bir kimyasal yöntemle sterilize ederken, belirli bir nesneyi işleme prosedürü, dezenfekte edilen nesnenin özelliklerine, mikropların direncine, kimyasalın özelliklerinin özelliklerine, ortam sıcaklığına, neme ve diğer faktörlere bağlıdır. Böylece, metal aletlerin sterilitesi, en az 20 derecelik bir sıcaklıkta ve% 95-98 bağıl nemde buharla kapalı bir odada beş saatlik depolamadan sonra elde edilir; 15 derecelik bir sıcaklıkta, bu nesnelerin tamamen sterilliği ancak 16 saat sonra elde edilir. Glutaraldehitin sporisidal aktivitesi sıcaklığa bağlıdır. Optimum etkisi 15 - 25 derecelik bir sıcaklıkta gerçekleşir. Sıcaklık arttıkça bu ilacın sporisidal aktivitesi azalır. Kimyasal sterilizasyon biraz sınırlı bir ölçüde kullanılır. Çoğu zaman bu yöntem, kültür ortamının ve immünobiyolojik preparatların (aşılar ve serumlar) bakteriyel kontaminasyonunu önlemek için kullanılır. Kloroform, toluen ve eter gibi maddeler çoğunlukla besin ortamına eklenir. Ortamın bu koruyucu maddelerden arındırılması gerekiyorsa 56 derecelik su banyosunda ısıtılır ve koruyucu maddeler buharlaştırılır. Aşıları veya serumları korumak için mertiolat, borik asit ve formalin kullanılır.

Biyolojik sterilizasyon yöntemi Biyolojik sterilizasyon antibiyotik kullanımına dayanmaktadır. Bu yöntem virüslerin yetiştirilmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır.

1. Alevli(lat. flamma'dan - alev ve fr. flamb'dan) é - yanık) - küçük metal veya cam nesnelerin alevde kalsine edilmesiyle sterilizasyon. Bu sayede bakteriyolojik özeler, metal cımbız, cam spatula ve tüpler, cam slaytlar vb. sterilize edilir.Alev sıcaklığı yaklaşık 1000°C'dir. Kalsine edildiğinde tüm mikroorganizmalar (bitkisel ve spor formları) yanar. Bu hızlı ve güvenilir bir sterilizasyon yöntemidir.

2. Kaynamak. En çok biri basit yollar sterilizasyon. Sterilizatörde gerçekleştirilir - metal dikdörtgen kutu Sterilize edilmiş eşyaların yerleştirilmesi için altta bir kapak ve bir ağ bulunur. İçine su dökün ve kaynatın (elektrikli ısıtma veya aşırı ateşte). Kaynama yaklaşık 100 ºС sıcaklıkta 15-30 dakikadan 2 saate kadar sürebilir. Küçük metal veya cam nesneleri (şırıngalar, iğneler, cam tüpler vb.) Sterilize edin. Bu durumda, mikroorganizmaların bitkisel formları ve bazı sporlar ölür. Sterilize edilen malzemenin kaynar su ile haşlanması da uygulanmaktadır.

3. Kuru ısı sterilizasyonu. Pasteur fırınında sıcak hava ile üretilir veya kurutma kabini. Pasteur fırını, ısı yalıtımı için dış kısmı asbestle kaplı çift duvarlı bir dolaptır. Dolabın içinde şunlar var metal raflar Sterilize edilecek malzemenin yerleştirileceği deliklere sahip. Elektrikli ısıtma. Sterilizasyon, bu sıcaklıklara ulaşıldığı andan itibaren 1-2 saat boyunca 160-180 ºС sıcaklıkta gerçekleştirilir (bir termometre ile kontrol edilir). Kuru ısı esas olarak cam eşyaları - Petri kapları, pipetler, spatulalar (kağıda sarılı) ve ayrıca test tüpleri ve şişeleri - sterilize etmek için kullanılır. Bu teknik güvenilirdir - mikroorganizmaların spor olmayan ve spor formları ölür. Kağıda sarılmış ve sterilize edilmiş malzeme saklanabilir.

4. Akan buhar sterilizasyonu. Sıcak yürütülen nemli hava Koch aparatında. Koch aparatı (kazan), ayaklar üzerinde bulunabilen ve muşamba ile kaplanabilen metal bir silindirdir. Aparatın içine, üzerine delikli metal bir dairenin yerleştirildiği ve üzerine sterilize edilecek malzemenin yerleştirildiği çıkıntıya ulaşmayacak kadar çok su dökülür. Cihaz, buharın çıkması ve ateşte ısıtılması için ortasında delik bulunan konik bir kapakla sıkıca kapatılır. Su kaynadığında, yaklaşık 100 ºС sıcaklığa sahip sıcak su buharı, kapaktaki delikten güçlü bir akışla "akacaktır". Bu andan itibaren sterilizasyonun başlangıç zamanı not edilir. Akan buharla sterilizasyon, sterilize edilecek malzemenin hacmine bağlı olarak 45 dakikadan 1,5 saate kadar sürer. 100 ºС'nin üzerinde ısıtılamayan besin ortamlarını, örneğin MPG'yi sterilize edin (100 ºС'nin üzerindeki sıcaklıklarda sıvılaşır ve katılaşmaz). Bu sterilizasyon yöntemi tamamen güvenilir değildir - mikroorganizmaların yalnızca bitkisel formları tamamen öldürülür, ancak sporlar korunur. Koch aparatında ortamın tam sterilizasyonunu sağlamak için fraksiyonel sterilizasyon kullanılır.

5. Basınç altında buhar sterilizasyonu (otoklavlama). Otoklavda doymuş su buharı ile gerçekleştirilir. Otoklav var farklı tasarımlar. Dikey otoklav, kazana sıkıca cıvatalanmış, ağır menteşeli bir kapağa sahip, dışarıdan metal bir mahfaza ile çevrelenmiş, devasa çift duvarlı bir kazandır. Kazanın alt kısmında bir huni ve içinden suyun döküldüğü bir musluk bulunmaktadır. boş alan iç kazan ile kasa arasında. Sterilize edilecek malzeme kazanın alt kısmına yerleştirilir, kapak sıkıca vidalanır ve elektrikli ısıtma çalıştırılır. Su kaynayınca buhar iç kazana geçer. Otoklavdaki basınç yükselir ve aynı zamanda sıcaklık da artar. Manometre kazandaki basıncın belirlenen değere ulaştığını gösterdiğinde sterilizasyonun başlama zamanını işaretleyin. Basınç, emniyet valfi kullanılarak belirli bir seviyede tutulur.

Tipik olarak laboratuvar uygulamasında, basınçlı sterilizasyon 1,5-2 atm'de ve yaklaşık 115-120 ºС sıcaklıkta gerçekleştirilir.

20-30 dk. Sterilizasyon süresi dolduktan sonra ısıtma durdurulur, buhar vanası açılır ve buhar dışarı verilir. Basınçlı besin ortamı MPB, MPA, su ile cam eşyalar, pansuman malzemesi, buharla sterilize edin. cerrahi Aletler Otoklavlama, en dirençli sporlar dahil her türlü mikroorganizmayı öldüren hızlı ve güvenilir bir sterilizasyon yöntemidir.

6. Pastörizasyon. Bu kısmi sterilizasyon yöntemi, adını bunu öneren Fransız bilim adamı L. Pasteur'den almıştır. Yöntem, steril bir kaba dökülen sıvının bir su banyosunda 60-90 ºС sıcaklıkta ısıtılmasıdır.

10-30 dk. Özelliklerini değiştiren sıvı ortamlar için uygundur fizikokimyasal özellikler yüksek sıcaklıklarda. Süt, krema, şarap, bira, meyve suları vb. pastörize edilir.Aynı zamanda vitaminler ve tat nitelikleriürünler. Pastörize ürünler Uzun süreli depolama tabi değildir, çünkü bu sterilizasyon yöntemiyle mikroorganizmaların yalnızca bitkisel formları ölür ve sporlar kalır. Laboratuvar uygulamalarında bu yöntem esas olarak spor oluşturan türleri spor oluşturmayan türlerden ayırmak için kullanılır.

7. Fraksiyonel sterilizasyon. Sterilize edilecek malzemenin birkaç aşamada işlenmesi esasına dayanır. Kesirli bir Koch aparatında akan buharla kaynatma veya sterilizasyon olabilir. Tipik olarak sterilizasyon, belirtilen yöntemlerden biri kullanılarak günde 30 dakika, 3 gün boyunca gerçekleştirilir ve aralar sırasında ortam oda sıcaklığında bırakılır. Bu, sporların bitkisel formlara dönüşmesini ve sonraki tedaviler sırasında bunların yok edilmesini teşvik etmek için yapılır, bu da bu tekniklerin güvenilirliğini arttırır.

8. Tyndalizasyon. Bu bir tür fraksiyonel sterilizasyondur (fraksiyonel pastörizasyon). Tekniğe, onu öneren İngiliz bilim adamı D. Tyndall'ın adı verilmiştir. 56-58 ºС sıcaklıkta su banyosunda 1 saat süreyle yapılır, 24 saat sonra 5-7 kez tekrarlanır, ısıtma arasındaki aralıklarla malzeme oda sıcaklığında tutulur. Tyndallizasyon, mikroorganizmalar açısından fakir olan ve aynı zamanda 60 °C'nin üzerindeki sıcaklıklarda kolayca yok edilen ve denatüre olan maddeleri (proteinler, vitaminler) içeren besin ortamlarında gerçekleştirilir. Bunlar kan serumu, yumurta vb. Tyndalizasyon sonucunda mikroorganizmaların tamamen yok edilmesi sağlanır.